專利名稱：：苦瓜葉提取物及其在化妝品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及化妝品工業(yè)，特別涉及的是一種苦瓜葉提取物的制備及其在化妝品中的應(yīng)用，具體地說是苦瓜葉經(jīng)提取、純化后得到苦瓜葉提取物并作為防腐抑菌劑應(yīng)用于化妝品中，亦可作為祛痘或美白祛斑劑應(yīng)用到化妝品中。
背景技術(shù)：
：化妝品是一種日用消費(fèi)品，它包括護(hù)膚膏霜、護(hù)膚乳液、潔膚膏霜、潔膚乳液、化妝水、濕巾、面膜及洗發(fā)水等。這些化妝品的原料大同小異，原料大多數(shù)為石油加工的副產(chǎn)品，安全性和功效性有限。目前，人們?yōu)榱吮Ｗo(hù)和改善自己的皮膚和頭發(fā)，提高產(chǎn)品的安全性，紛紛把具有保健作用的植物性原料添加到化妝品中，希望通過加入這些有效成分，挺高化妝品的安全性，并且在用化妝品清潔和護(hù)理的同時(shí)，起到更好的消炎抑菌、美白祛斑的功效。
發(fā)明內(nèi)容苦瓜(Mo"/orafcac/2"ra"&a丄.)為葫戸科苦瓜屬一年生蔓性草本植物，又名涼瓜、癩瓜、癩葡萄和錦蒸枝等，是一種藥食同源植物，其葉大，腎狀圓形，長寬各約5-12cm，通常5-7深裂，裂片卵狀橢圓形，基部收縮，邊緣具波狀齒，兩面近于光滑或有毛；葉柄長3-6cm。苦瓜葉可入藥，《本草綱目》記載"葉曬干為末，治一切丹火毒氣，金瘡結(jié)毒、脂麻疔、大疔，痛不可忍、胃氣疼、滾湯、目疼，燈草湯下子苦寒無毒，可益氣壯陽"。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)提取、純化的苦瓜葉提取物具有防腐抑菌、祛痘和抑制黑色素生成的功效。因此，本發(fā)明提供了一種苦瓜葉提取物，先將苦瓜葉洗凈去雜、干燥后進(jìn)行機(jī)械研磨粉碎，制成苦瓜葉粉；再將苦瓜葉粉放入以水和乙醇制得的混合溶劑中加熱萃取；溶劑萃取出的組分經(jīng)色譜法或分餾法進(jìn)一歩純化、分離得到產(chǎn)品。所述苦瓜葉的粉碎粒度為1(Him—500^im;溶劑的配置比例為水乙醇1:l一l:19;苦瓜葉與溶劑的比例為1:5—1:40;萃取的溫度保持在攝氏35i:—10(rC之間；時(shí)間掌握在8—24小時(shí)之間；純化分離具體措施為噴霧干燥、冷凍干燥等。上述所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應(yīng)用，將苦瓜葉提取物作為植物活性添加劑應(yīng)用到化妝品中，苦瓜葉提取物的添加量為化妝品的0.1—30%。上述的苦瓜葉提取物是作為防腐抑菌劑應(yīng)用到化妝品中的。上述的苦瓜葉提取物是作為祛痘物質(zhì)應(yīng)用到化妝品中的。上述的苦瓜葉提取物是作為美白祛斑劑應(yīng)用到化妝品中的。上述所述的化妝品為護(hù)膚膏霜、護(hù)膚乳液、潔膚膏霜、潔膚乳液、化妝水、濕巾、面膜或洗發(fā)水其中之一。本發(fā)明通過將具有防腐抗菌、祛痘、美白祛斑功效的苦瓜葉中的有效物質(zhì)提取出來，經(jīng)分離純化后添加到各種化妝品中。進(jìn)一步提高化妝品的效果，并充分利用了苦瓜葉中的生物活性物質(zhì)。具體實(shí)施例方式苦瓜葉有效物質(zhì)的提取-將苦瓜葉5公斤清洗并晾干，5(TC烘干后粉碎，過40目篩，然后加入10公斤60%的乙醇，6(TC水浴回流提取三次，每次4小時(shí)，合并濾液，低于5(TC濃縮后，得苦瓜葉提取液1.0-1.5公斤，提取液可進(jìn)行進(jìn)一步純化。本發(fā)明所述苦瓜葉提取物具有下述的功效試驗(yàn)一抑菌功效采用金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和粉刺丙酸桿菌作為代表菌，檢測(cè)本藥物組合物的抑菌作用。將濾紙制成(^5mm的紙片，高壓滅菌后備用，用鑷子將滅菌后的濾紙片放入含苦瓜葉提取物的溶液中，浸泡30分鐘后取出晾干，用吸管吸取各種菌懸液0.1mL于無菌平皿中，然后倒入已冷卻的滅菌培養(yǎng)基15mL，充分混勻后水平放置，因供試菌株的不同，所用培養(yǎng)基種類也不同，待培養(yǎng)基冷凝后，將含苦瓜葉提取物的紙片貼于平板上，以無菌水作為對(duì)照，放入培養(yǎng)箱中37'C下細(xì)菌培養(yǎng)24h、真菌培養(yǎng)48h。按時(shí)取出，用卡尺測(cè)定抑菌圈直徑，以上操作均在超凈工作臺(tái)上完成，結(jié)果見表l?？喙先~提取液稀釋度菌種-原液1:21:41:8金黃色葡萄球菌21181512大腸桿菌25242113粉刺丙酸桿菌29262320實(shí)驗(yàn)證明，苦瓜葉提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和粉刺丙酸桿菌均有很好的抑制作用，說明苦瓜葉提取物是一種抑菌效果明顯的天然植物防腐劑。試驗(yàn)二祛痘功效1.治療方案將面部出現(xiàn)痘點(diǎn)，并反復(fù)出現(xiàn)，長期不愈者作為治療對(duì)象，將苦瓜葉提取物與護(hù)膚霜基質(zhì)混合，按照護(hù)膚霜的生產(chǎn)方法制成護(hù)膚霜，治療對(duì)象每天涂抹加入苦瓜葉提取物1.010.0%的護(hù)膚霜早晚各一次。2.治療評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)(1)治愈痘點(diǎn)消失，痘點(diǎn)不再出現(xiàn)；(2)顯效痘點(diǎn)基本消失；(3)有效痘點(diǎn)有不同程度的減少、減輕或減弱；(4)無效癥狀無任何改善，甚至有加重趨勢(shì)。3.本發(fā)明治療痘癥106人，其中男56人，女50人，年齡為15—30歲，按上述方案敷用添加苦瓜葉提取物的護(hù)膚霜，每天早晚各一次，7天后統(tǒng)計(jì)療效，如下<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>上表表明，本發(fā)明用于治療青少年痘癥療效極佳，療效高達(dá)98.11%，而且治療時(shí)間短，使用方便。同時(shí)，在臨床測(cè)試中，均未發(fā)現(xiàn)任何反應(yīng)，使用用非常安全，性能穩(wěn)定可靠。試驗(yàn)三抑制B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性實(shí)驗(yàn)方法:將培養(yǎng)的B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞活化配制成單個(gè)細(xì)胞懸液后，以lxl()S個(gè)/ml細(xì)胞密度接種于6孔板，將6孔板放入C02培養(yǎng)箱，在37"C、5%C02及飽和濕度條件下，培養(yǎng)24小時(shí)后添加含苦瓜提取物的培養(yǎng)液2ml，72小時(shí)后收集細(xì)胞。用離心機(jī)以1000r/min轉(zhuǎn)速離心5min，用磷酸緩沖液(pH6.8)洗2次，加入磷酸緩沖液(pH6.8)制成細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)細(xì)胞密度后，調(diào)整細(xì)胞密度為lxl(^個(gè)/ml，取lml細(xì)胞懸液離心后去上清液，加入l%TritonX-100(用pH7.4的磷酸緩沖液配制)lml，迅速放入-80。C冰箱冷凍，30min后取出在37。C溶解，加入5mM的L-3，4-二羥基苯丙氨酸(L-DOPA)2ml。調(diào)節(jié)紫外分光光度計(jì)的波長為A475，測(cè)定即時(shí)反應(yīng)的吸光度值，再置于37-C條件下30min后測(cè)定吸光度值，用L-3，4-二羥基苯丙氨酸(L-DOPA)的自身氧化作參比，用曲酸作為陽性對(duì)照，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。根據(jù)以下公式計(jì)算酶抑制率=[(A—B)_(C—D)]+(A—B)其中A:陰性對(duì)照組30min后475nm處吸光度值；B:陰性對(duì)照組即時(shí)475nm處吸光度值；C:受試物組30min后475nm處吸光度值；D:受試物組即時(shí)475nm處吸光度值。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)后顯示31.25250pg/ml的苦瓜提取物對(duì)活體B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞酪氨酸酶活性和細(xì)胞內(nèi)黑色素含量具有抑制作用，酪氨酸酶抑制率為9.85~83.74%，且對(duì)酪氨酸酶活性的抑制作用隨濃度增加而增加，并呈劑量依賴性(P<0.05)。見表2。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>人的膚色是由皮膚內(nèi)的黑色素密度和分布來決定的，現(xiàn)在化妝品中主要使用的美白機(jī)理為抑制酪氨酸酶活性機(jī)理，如熊果苷、曲酸就是這類美白劑。在黑素細(xì)胞內(nèi)，酪氨酸在酪氨酸酶的作用下轉(zhuǎn)化為多巴、多巴醌和多巴色素等，并最終轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏?，再從黑素?xì)胞分泌到鄰近的角質(zhì)形成細(xì)胞中，從而使膚色改變或形成色斑，而酪氨酸酶是黑色素形成的關(guān)鍵酶，通過抑制酪氨酸酶活性，阻斷黑色素的合成反應(yīng)鏈，降低黑色素的形成從而達(dá)到美白祛斑的效果，本發(fā)明所述的苦瓜葉提取物具有抑制酪氨酸酶活性和黑素生成的作用，因此苦瓜葉提取物可作為美白祛斑劑應(yīng)用于化妝品中。試驗(yàn)四大鼠急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)采用最大限量法。設(shè)5000mg/kg—個(gè)劑量組，20只SD大鼠，雌雄各半。備皮減去大鼠脊柱兩側(cè)的被毛，去毛面積4X4cm2。24小時(shí)后確認(rèn)無皮膚損傷，以lml/100gbw將該劑量組苦瓜液提取物溶液滴于6層紗布上，貼敷于已去毛的皮膚上，覆蓋稱量紙，膠布固定。4h后取下紗布，洗去殘留物，觀察其中毒癥狀、體征，連續(xù)觀察兩周，判定其毒性分類。苦瓜葉提取物5g/kg*bw劑量經(jīng)皮染毒后，兩周內(nèi)未見動(dòng)物死亡，亦無明顯的中毒癥狀和不良反應(yīng)，結(jié)果見表3。兩周實(shí)驗(yàn)結(jié)束后剖殺全部動(dòng)物，內(nèi)臟器官未見明顯異常改變，即苦瓜葉提取物對(duì)雌、雄SD大鼠的急性經(jīng)皮MTD大于5g/kgbw，屬實(shí)際無毒類。表3苦瓜葉提取物對(duì)SD大鼠的急性經(jīng)皮毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果可以得出如下結(jié)論，苦瓜葉提取物作為防腐抗菌劑使用時(shí)添加比例掌握在0.15.0%范圍內(nèi)；作為祛痘劑使用時(shí)添加比例掌握在1.0~10.0%范圍內(nèi)；作為祛斑美白劑使用時(shí)添加比例掌握在1.0~30.0%范圍內(nèi)。下面舉例對(duì)本發(fā)明產(chǎn)品做更詳細(xì)的描述實(shí)施例1-按1.0%的添加量，將苦瓜葉提取物與洗滌用品基質(zhì)混合，按照洗滌用品的生產(chǎn)方法制成洗滌用品，即得具有祛痘、美白祛斑功效的洗滌用品，這些洗滌用品可以是潔面乳液、潔面膏霜。實(shí)施例2:按5.0%的添加量，將苦瓜葉提取物與化妝水基質(zhì)混合，按照化妝水的生產(chǎn)方法制成化妝水，即得具有祛痘、美白祛斑功效的化妝水。實(shí)施例3:按10.0。/。的添加量，將苦瓜提取液加入濕巾中，即得具有祛痘、美白祛斑功效的濕巾。實(shí)施例4:按20.0%的添加量，將苦瓜葉提取物與面膜基質(zhì)混合，按照面膜的生產(chǎn)方法制成面膜，即得具有祛痘、美白祛斑功效的面膜。實(shí)施例5:按30.0%的添加量，將苦瓜葉提取物與護(hù)膚品基質(zhì)混合，按照護(hù)膚品的生產(chǎn)方法制成護(hù)膚品，即得具有祛痘、美白祛斑功效的護(hù)膚品，這些護(hù)膚品包括護(hù)膚膏霜、護(hù)膚乳液。實(shí)施例6:按0.3%的添加量，將苦瓜葉提取物與洗滌用品基質(zhì)混合，按照洗滌用品的生產(chǎn)方法制成洗滌用品，即得具有一定保質(zhì)期的洗滌用品，這些洗滌用品可以是洗手液、沐浴液、潔面乳液、潔面膏霜。實(shí)施例7:按0.4%的添加量，將苦瓜葉提取物與化妝水基質(zhì)混合，按照化妝水的生產(chǎn)方法制成化妝水，即得具有一定保質(zhì)期的化妝水。實(shí)施例8:按0.6%的添加量，將苦瓜提取液加入濕巾中，即得具有一定保質(zhì)期的濕巾。實(shí)施例9:按0.8%的添加量，將苦瓜葉提取物與面膜基質(zhì)混合，按照面膜的生產(chǎn)方法制成面膜，即得具有一定保質(zhì)期的面膜。實(shí)施例10:按1.0%的添加量，將苦瓜葉提取物與護(hù)膚品基質(zhì)混合，按照護(hù)膚品的生產(chǎn)方法制成護(hù)膚品，即得具有一定保質(zhì)期的護(hù)膚品，這些護(hù)膚品包括護(hù)膚膏霜、護(hù)膚乳液。權(quán)利要求1.一種苦瓜葉提取物，其特征在于先將苦瓜葉洗凈去雜、干燥后進(jìn)行機(jī)械研磨粉碎，制成苦瓜葉粉；再將苦瓜葉粉放入以水和乙醇制得的混合溶劑中加熱萃取；溶劑萃取出的組分經(jīng)色譜法或分餾法進(jìn)一步純化、分離得到產(chǎn)品。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜葉提取物，其特征在于所述苦瓜葉的粉碎粒度為10nm—500^im;溶劑的配置比例為水乙醇1:19;苦瓜葉與溶劑的比例為l:5—1:40;萃取的溫度保持在攝氏35t:—10(TC之間；時(shí)間掌握在8—24小時(shí)之間；純化分離具體措施為噴霧干燥或冷凍干燥。3.—種如權(quán)利要求1或2所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應(yīng)用，其特征在于所述的苦瓜葉提取物作為植物活性添加劑應(yīng)用到化妝品中，苦瓜葉提取物的添加量為化妝品的0.1—30%。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應(yīng)用，其特征在于苦瓜葉提取物作為防腐抑菌劑應(yīng)用到化妝品中。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應(yīng)用，其特征在于苦瓜葉提取物作為祛痘物質(zhì)應(yīng)用到化妝品中。6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應(yīng)用，其特征在于苦瓜葉提取物作為美白祛斑劑應(yīng)用到化妝品中。7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應(yīng)用，其特征在于所述化妝品為護(hù)膚膏霜、護(hù)膚乳液、潔膚膏霜、潔膚乳液、化妝水、濕巾、面膜或洗發(fā)水其中之一。全文摘要本發(fā)明公開了一種苦瓜葉提取物，先將苦瓜葉洗凈去雜、干燥后進(jìn)行機(jī)械研磨粉碎，制成苦瓜葉粉；再將苦瓜葉粉放入以水和乙醇制得的混合溶劑中加熱萃取；溶劑萃取出的組分經(jīng)色譜法或分餾法進(jìn)一步純化、分離得到產(chǎn)品。所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應(yīng)用是將所述的苦瓜葉提取物作為植物活性添加劑應(yīng)用到化妝品中，苦瓜葉提取物的添加量為化妝品的0.1-30％，可以作為防腐抑菌劑、祛痘物質(zhì)或美白祛斑劑應(yīng)用到化妝品中。文檔編號(hào)A61Q19/06GK101336880SQ20081014731公開日2009年1月7日申請(qǐng)日期2008年8月7日優(yōu)先權(quán)日2008年8月7日發(fā)明者竹溫,征閆,黃正梅申請(qǐng)人:北京昂立達(dá)技術(shù)有限責(zé)任公司