專利名稱：：使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶精煉食用油的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及使用脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶精煉食用油(優(yōu)選植物油)的方法。本發(fā)明還涉及使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶處理食用油(優(yōu)選未加工食用油(crudeedibleoil)，例如植物油)和/或食用油(優(yōu)選植物油)膠相的方法。
背景技術(shù)：
：已知脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶在食品應(yīng)用中具有優(yōu)點。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶在食物中具有顯著的酰基轉(zhuǎn)移酶活性。這種活性在食物的制備方法中有令人驚奇的有益應(yīng)用。例如，WO2004/064537公開了通過使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶來原位制備乳化劑的方法和與其相關(guān)的優(yōu)點。國際專利申請No.PCT/IB2001/000558教導(dǎo)了脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶在(異源)宿主細(xì)胞中的表達，并且該申請通過引用并入本文。精煉食用油的目的是為了除去影響品質(zhì)(例如，口感、氣味和外觀)和貯存能力的不良雜質(zhì)。由于各種不同雜質(zhì)，如游離脂肪酸、金屬離子、有色化合物、氣味、膠等的存在，通常采用一系列的化學(xué)和物理性方法進行精煉(參見，例如Bailey的IndustrialOilandFatProducts-2006JohnWiley&Sons-第六版)。通常用于油脫膠的兩種方法為物理脫膠法和化學(xué)脫膠法。在所謂化學(xué)精煉中，通過使用大量過量NaOH的初步處理除去幾乎所有的游離脂肪酸成分。還將磷脂含量降低至通常低于IOppm的磷水平。隨后，將油脫色并除臭。所謂物理精煉通常由水脫膠步驟，以及其后的酸脫膠、中和、脫色、氣提以除去游離脂肪酸和除臭步驟組成。在物理精煉期間，開發(fā)了用于代替使用酸脫膠的酶促脫膠。酶促脫膠法的開發(fā)以胰腺磷脂酶的應(yīng)用為基礎(chǔ)。由于這種酶并不適合，最終由微生物磷脂酶Al(LecitaseUltra-Novozymes,Denmark)取代了磷脂酶(OilMillGazetteer,Vol111July2005pp2_4)。酶促法具有優(yōu)于化學(xué)或物理脫膠法的多個優(yōu)點，包括節(jié)約成本、產(chǎn)量高并且是更為環(huán)保的方法。酶促油脫膠法的基礎(chǔ)是向已經(jīng)水脫膠的油中添加磷脂酶。W02006/008508中教導(dǎo)了將脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶用于食用油酶促脫膠。W02006/008508教導(dǎo)了向經(jīng)水脫膠的油中添加脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，或向未加工油(crudeoil)中添加脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶而無需對油進行水脫膠過程。通?？赏ㄟ^常規(guī)“水脫膠法”獲得“經(jīng)水脫膠的油”，其中所述“水脫膠法”包括將1-2%w/w的熱軟水與溫(70-90°C)的未加工油混合(AOCSIntroductiontotheProcessingofFatsandOils-Table8-DegummingProcesses~http://www,aocs.ors/meetings/education/mod3sample.pdf)。根據(jù)經(jīng)驗法則，向未加工油中添加的水量通常約等于未加工油中的磷脂量。通常的處理時間為30-60分鐘。水脫膠步驟除去在水合時在油中變?yōu)椴蝗艿牧字驼衬z?？赏ㄟ^沉降、過濾或離心從油分離水合磷脂和膠，其中離心的應(yīng)用較為普遍。上述水脫膠法的主要目的是為了從油中分離水合磷脂。如上所述，在本文中應(yīng)當(dāng)將熱水與油的混合廣義地理解為按照本領(lǐng)域中的標(biāo)準(zhǔn)水脫膠程序?qū)⑺芤号c油混合。在傳統(tǒng)的水脫膠法中，大部分磷脂轉(zhuǎn)移到重膠相中。在水脫膠法結(jié)束時，將膠相與油相分離。盡管可將膠相進一步加工成商品，但通常將膠相視為油精煉的副產(chǎn)品。具有商業(yè)重要性的是油相。然而，因為磷脂能夠成為良好的乳化劑，所以一些油在水脫膠期間不可避免地?fù)p失到膠相中。這導(dǎo)致水脫膠后油相中的油產(chǎn)量下降。隨著油價的上漲，以及對作為生物柴油的植物油需求增加，優(yōu)化食用油的加工以獲得高油產(chǎn)量具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的各個方面體現(xiàn)于權(quán)利要求書和以下說明中?，F(xiàn)已驚奇地發(fā)現(xiàn)，通過在進行水脫膠方法期間或之前向未加工食用油中添加一種或多種脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，可以顯著提高油相中的油產(chǎn)量。也就是說，可以顯著減少油損失在膠相中。此外，還令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，通過在進行水脫膠方法期間或之前向未加工食用油中添加一種或多種脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶，所得膠相的粘度降低很多。這可允許使用更有利的離心參數(shù)。還令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，通過在進行水脫膠方法期間或之前向未加工食用油中添加一種或多種脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，將由此方法獲得的膠相溫育或貯存，(由于殘留的活性脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶)可觀察到膠相中磷脂的進一步水解。隨后，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)可以分離膠相中含有游離脂肪酸(酸性油)和剩余甘油三酯的油相。此酸性油可以以高于添加到膳食(meal)中的通常膠相的價格銷售。此外，還令人驚奇地發(fā)現(xiàn)(分離酸性油后)剩余的固相具有高于通常膠的磷水平，由此可以用作有機磷源。還令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，一種或多種脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶和一種或多種磷脂酶C(PLC)的組合當(dāng)用于食用油(例如植物油)脫膠時產(chǎn)生了協(xié)同作用。發(fā)明詳述根據(jù)本發(fā)明的第一方面，本文提供了食用油(優(yōu)選未加工食用油)的水脫膠方法，所述方法包括以下步驟a)將約0.1-5%w/w水與食用油(優(yōu)選未加工食用油)和脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶混合，b)將混合物在約45°C至約90°C下攪動(agitate)約10分鐘至180分鐘，和c)分離油相和膠相。根據(jù)本發(fā)明的第二方面，本文提供了脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶在食用油的水脫膠期間(優(yōu)選在未加工食用油的水脫膠期間)用于提高在水脫膠過程完成后油相中的油產(chǎn)量的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的第三方面，本文提供了脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶在食用油的水脫膠期間(優(yōu)選在未加工食用油的水脫膠期間)用于降低在水脫膠過程完成后膠相的粘度的應(yīng)用。所述產(chǎn)量提高和/或粘度下降是與(用水脫膠和酶促水脫膠)而沒有使用脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶脫膠的相當(dāng)?shù)挠?comparableoil)的油相和/或膠相進行比較。根據(jù)本發(fā)明的第四方面，本文提供了食用油(優(yōu)選未加工食用油)的水脫膠方法，所述方法包括以下步驟a)將約0.1-5%w/w水與食用油(優(yōu)選未加工食用油)和脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶混合，b)將混合物在約45°C至約90°C下攪動約10分鐘至180分鐘，c)分離油相和膠相，d)溫育包含活性脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的膠相最少約2小時至最長7天的時間(適合地長達約1-2天)，和e)(例如通過離心)從膠相分離油。本發(fā)明還提供了用于處理膠相(優(yōu)選可通過食用油的脫膠獲得或通過食用油的脫膠獲得，所述脫膠例如水脫膠或酶促脫膠或其組合)的方法，其中將膠相與一種或多種(活性)脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(單獨的，或與一種或多種磷脂酶C組合的)一起溫育最少約2小時至最長7天的時間(適合地長達約1-2天)，和(例如通過離心)從膠相分離油。本發(fā)明還進一步提供了脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(單獨，或與磷脂酶C組合)在膠相(可通過食用油脫膠獲得或通過食用油脫膠獲得，所述脫膠例如水脫膠或酶促脫膠或其組合)溫育中用于提高油產(chǎn)量和/或(在分離酸性油后)產(chǎn)生磷水平比通常膠改進的固相的應(yīng)用。因為酸性油可以用于生產(chǎn)脂肪酸，所以酶的應(yīng)用提高了酸性油與膠相比的價值。與添加到膳食中的膠相比，脂肪酸具有更高的價值。所述改進和/或提高是與未經(jīng)脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(單獨，或與磷脂酶C組合)處理的膠相進行比較。適合地，膠相中的一種或多種脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可具有殘余的活性酶，其可在食用油的酶促脫膠后被轉(zhuǎn)移到膠相。或者，膠相中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以是添加的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，該酶可以在膠相的溫育開始時或進行期間添加。值得注意地，在第四方面中所述方法(以及膠相的其他處理)結(jié)束時的油是“酸性油”。此酸性油的銷售價高于添加到膳食中的通常膠相。剩余的膠相(在分離酸性油后)有時也被稱作固相。還令人驚奇地發(fā)現(xiàn)剩余的固相(分離酸性油后)具有高于通常膠的磷水平，由此可以用作有機磷源。適合地，可將膠相與脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶(單獨，或與一種或多種磷脂酶C組合)一起在約30°C至約70°C溫育，優(yōu)選約40°C至約60°C溫育，優(yōu)選約40°C至約50°C溫育，優(yōu)選約40°C至約45°C溫育。優(yōu)選地，可將由脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶對未加工油進行酶促水脫膠而獲得的膠相在約30V至約70V溫育，優(yōu)選約40V至約60V溫育，優(yōu)選約40V至約50V溫育，優(yōu)選約40V至約45°C溫育。適合地，所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是按照酶命名法分類而歸類的酶(E.C.2.3.1.43)。在一個實施方式中，優(yōu)選將脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶與磷脂酶C(E.C.3.1.4.3)組合使用。在一個優(yōu)選的實施方式中，將脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(E.C.2.3.1.43)與磷脂酶C(E.C.3.1.4.3)組合使用。因此，根據(jù)本發(fā)明的一個方面，本文提供了食用油(優(yōu)選未加工食用油)的水脫膠方法，所述方法包括以下步驟a)將約0.1-5%w/w水與食用油(優(yōu)選未加工食用油)和脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶和磷脂酶C的組合混合，b)將混合物在約45°C至約90°C下攪動約10分鐘至180分鐘，和c)分離油相和膠相。盡管不希望受到理論束縛，但已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶能夠使用(通過磷脂酶C的反應(yīng)產(chǎn)生的)甘油二酯作為受體分子以產(chǎn)生甘油三酯。因此，將脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C組合使用時，這些酶之間的相互作用導(dǎo)致與包含任意單獨一種酶的相當(dāng)?shù)挠突虿缓傅南喈?dāng)?shù)挠拖啾?，包含這兩種酶的油中的甘油三酯的量協(xié)同的增加(synergisticincrease)。有利地，將脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C組合使用時，這些酶之間的相互作用導(dǎo)致與包含任意單獨一種酶的相當(dāng)?shù)挠突虿缓傅南喈?dāng)?shù)挠拖啾?，包含這兩種酶的油中的甘油二酯的量協(xié)同的降低。將脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C組合使用時，這些酶之間的相互作用導(dǎo)致與包含其中任意單獨一種的相當(dāng)?shù)挠突虿缓傅南喈?dāng)?shù)挠拖啾?，包含這兩種酶的油中的油產(chǎn)量協(xié)同的增加。因為甘油二酯對油的“發(fā)煙點”具有不利影響和/或會對較多飽和脂肪源的結(jié)晶性質(zhì)產(chǎn)生不利影響，因此甘油二酯在油中的累積(其可在單獨使用磷脂酶C時發(fā)生)會對油有害，所以使用這些酶的組合具有優(yōu)于單獨使用磷脂酶C的顯著優(yōu)點。因此，在本發(fā)明中使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(特別是在與磷脂酶C組合時)的另一個優(yōu)點是能夠使油中甘油二酯的量比不含脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的相當(dāng)?shù)挠秃?或特別是單獨使用磷脂酶C處理的相當(dāng)?shù)挠蜏p少。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本文提供了脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C的組合在食用油的水脫膠期間(優(yōu)選在未加工食用油的水脫膠期間)用于提高油產(chǎn)量和/或提高水脫膠過程完成后油相中的甘油三酯水平和/或降低在水脫膠過程完成后油相中的甘油二酯水平的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本文提供了脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C的組合在食用油的水脫膠期間(優(yōu)選在未加工食用油的水脫膠期間)用于降低在水脫膠過程完成后膠相的粘度的應(yīng)用。這些提高和/或降低是與未經(jīng)脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C的組合處理的相當(dāng)?shù)拿撃z食用油進行比較。通常，本文討論的所述提高和/或降低是與未經(jīng)脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(單獨，或與磷脂酶C組合)處理的相當(dāng)?shù)姆椒ɑ蛳喈?dāng)?shù)挠瓦M行比較。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本文提供了食用油(優(yōu)選未加工食用油)的水脫膠方法，所述方法包括以下步驟a)將約0.1-5%w/w水與食用油(優(yōu)選未加工食用油)和脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶和磷脂酶C的組合混合，b)將混合物在約45°C至約90°C下攪動約10分鐘至180分鐘，c)分離油相和膠相，d)溫育包含活性脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的膠相最少約2小時至最長7天的時間(適合地長達約1-2天)，和e)(例如通過離心)從膠相分離油。將磷脂分解酶(優(yōu)選脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶)與磷脂酶C組合使用時，可在添加脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶之前、同時或之后添加磷脂酶C。在一個實施方式中，優(yōu)選在脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶之前添加磷脂酶C。已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C的組合顯著提高了水脫膠過程完成后油相中的油產(chǎn)量。盡管不希望被理論束縛，但設(shè)想磷脂酶C將磷脂(例如磷脂酰膽堿)水解成甘油二酯(例如1，2-甘油二酯)和磷酸部分(例如磷酸膽堿)，隨后脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶將脂肪酸轉(zhuǎn)移到由磷脂酶C產(chǎn)生的甘油二酯，從而形成更多的甘油三酯并提高油產(chǎn)量。這種作用導(dǎo)致油產(chǎn)量的協(xié)同的(即優(yōu)選多于加和的)增加。在一個實施方式中，適合地，本發(fā)明的食用油脫膠方法和/或應(yīng)用可在約45-90°C之間進行，優(yōu)選在約45至約70°C之間。在另一個實施方式中，合適地，本發(fā)明的食用油脫膠方法和/或應(yīng)用可在約44°C以上進行，更優(yōu)選在約45°C以上進行，更優(yōu)選約50°C以上進行。在另一個實施方式中，合適地，本發(fā)明的方法和/或應(yīng)用可在低于約60°C進行，優(yōu)選在低于約65°C進行，優(yōu)選低于約70°C進行。在另一個實施方式中，合適地，本發(fā)明的方法和/或應(yīng)用可在約45-70°C之間進行，優(yōu)選在約45-68°C之間進行，更優(yōu)選低于約50-65°C之間進行。適合地，在與酶混合時，油和/或水的溫度可在期望的反應(yīng)溫度?？稍谔砑用钢昂?或期間，將油和/或水加熱和/或冷卻到期望的溫度。因此，在一個實施方式中，設(shè)想本發(fā)明的另一個步驟可以是將油和/或水冷卻和/或加熱。優(yōu)選用于本發(fā)明方法的水含量可以在約0.之間，更優(yōu)選在約0.1-3%w/w之間，更優(yōu)選約0.5-3%w/w之間。在一個實施方式中，用于本發(fā)明方法的水含量可在約1-3%w/w之間。在一個實施方式中，用于本發(fā)明方法的水含量可以小于約3%w/w，適合地小于約2%ο在一個實施方式中，用于本方法的水含量可以小于1%。將水量減少至小于約能夠?qū)е滤撃z方法中的顯著成本優(yōu)勢。因此，如果能夠?qū)⑺繙p少至約1%，就能夠產(chǎn)生顯著的成本下降。適合地，反應(yīng)時間(即攪動混合物的時間)可以在約10分鐘至約180分鐘之間，優(yōu)選約15分鐘至約180分鐘之間，更優(yōu)選約15分鐘至60分鐘之間，更優(yōu)選約15分鐘至約35分鐘之間。在一個實施方式中，適合的反應(yīng)時間可在約30分鐘至約180分鐘之間，優(yōu)選在約30分鐘至約60分鐘之間。在一個實施方式中，所述方法優(yōu)選在約pH4.5以上，約pH5以上或約pH6以上進行。所述方法優(yōu)選在約pH4.6至約pH10.0之間進行，更優(yōu)選約pH5.0至約pH10.0之間，更優(yōu)選約PH6.0至約pH10.0之間，更優(yōu)選約pH5.0至約pH7.0之間，更優(yōu)選約pH5.0至約pH6.5之間，甚至更優(yōu)選約pH5.5和pH6.0之間。在一個實施方式中，所述方法可在約pH5.3-8.3之間的pH下進行。在一個實施方式中，所述方法可在約pH6-6.5之間的pH下進行，優(yōu)選約6.3。適合地，在本發(fā)明的方法和/或應(yīng)用中的PH可以是中性(約pH5.0-約pH7.0)。優(yōu)選在脫膠過程期間進行酶處理，而不對油和/或水進行pH調(diào)節(jié)。因此，pH通常為約5.5-7.5。這樣獲得了優(yōu)于使用磷脂酶A的現(xiàn)有技術(shù)方法的顯著優(yōu)點，其中磷脂酶A通常僅在酸性PH條件，SPpH4-5具有高度活性。因此，在現(xiàn)有技術(shù)方法(例如使用磷脂酶A)中，必須將油的PH調(diào)整到更為酸性的條件。此外，與使用所述磷脂酶A和磷脂酶C相比，使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C具有顯著的優(yōu)勢，這是因為脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的最適PH通常與磷脂酶C的最適pH更好地符合。因此，在將脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C組合使用時，通常沒有“pH沖突”。這與將磷脂酶A與磷脂酶C組合使用的情況截然相反。因此，由于脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C能夠在其最佳PH范圍內(nèi)同時發(fā)揮作用，這兩種酶的組合應(yīng)用提供了顯著的改進?？赏ㄟ^任意常規(guī)分離方法進行油相和膠相的分離。優(yōu)選通過離心進行分離。使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(單獨的，或優(yōu)選與磷脂酶C組合)的一個顯著的優(yōu)點在于，酶處理使其能夠調(diào)整離心過程以控制最終油中的磷含量。盡管不希望被理論束縛，其實現(xiàn)的原因在于，與未經(jīng)脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(單獨的，或優(yōu)選與磷脂酶C組合)處理的油相比，油的粘度顯著下降。這是優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)方法的顯著進步。在常規(guī)脫膠方法中，離心通常使油中的磷水平為約50ppm。實際上，根據(jù)食用油中磷水平的規(guī)格指導(dǎo)說明，食用油中磷水平應(yīng)低于200ppm。實際上，最好使油的磷水平盡可能地接近200ppm的水平。使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(單獨的，或優(yōu)選與磷脂酶C組合)可以獲得經(jīng)離心后約100-200ppm磷水平的油品，優(yōu)選約170-190ppm，更優(yōu)選約180ppm。在本發(fā)明之前，這樣的磷水平很難通過調(diào)整離心而實現(xiàn)，因此這也構(gòu)成了本發(fā)明顯著改進方面。適合地，可在與酶混合之前或同時，將水與食用油混合?；蛘呖稍谂c水混合之前，將食用油與酶混合。在一個實施方式中，可將油、水和酶流同時或基本同時通過混合器泵入并進入存儲罐中。適合地，可在所述方法期間和/或結(jié)束時將酶滅活。可在油相與膠相分離之前或之后將酶滅活。適合地，可通過在75_85°C之間或在92°C以上加熱10分鐘，將酶熱滅活。在一個實施方式中，適合地，膠相中的酶可以不進行滅活。因此，在收集并溫育膠相時，酶可進一步分解膠相中的磷脂。在將膠相延期溫育后，可進行進一步的分離(例如，通過離心)以從膠相回收更多的油。這可進一步提高油的產(chǎn)量。盡管不希望被理論束縛，但認(rèn)為酶將膠相中的磷脂降解成游離脂肪酸，由此釋放此前被磷脂乳化的三酰甘油。這降低了膠相的粘度，并且允許例如通過離心分離三酰甘油和游離脂肪酸。在一個實施方式中，適合地，可實施本發(fā)明方法而不添加堿，例如NaOH。在另一個實施方式中，適合地，在存在堿，例如NaOH的情況下實施本發(fā)明的方法。在添加NaOH時，優(yōu)選其添加量不超過每IOOg油中約0.2ml(4%溶液)NaOH。適合用于本發(fā)明方法和/或應(yīng)用的酶可具有使用以下“轉(zhuǎn)移酶試驗(膽固醇磷脂)(TrU)”測定的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶活性。10轉(zhuǎn)移酶活性的測定轉(zhuǎn)移酶試驗(膽固醇磷脂)(TrU)底物將50mg膽固醇(SigmaC8503)和450mg大豆卵磷脂(PC)，Avanti#441601溶于氯仿，并在40°C真空蒸發(fā)氯仿。在40°C，將300mgPC膽固醇(91)分散在IOml50mMHEPES緩沖液(pH7)中。酶解在40°C，將250μ1底物添加到帶蓋玻璃器中。添加25μ1酶溶液，并在攪動下于40°C溫育10分鐘。在試驗中，所添加的酶應(yīng)當(dāng)將2-5%的膽固醇酯化。此外，同樣分析使用25μ1水代替酶溶液的空白對照。10分鐘后，添加5ml己烷異丙醇(3:2)。使用膽甾醇硬脂酸酯(SigmaC3549)作為校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品，通過HPTLC分析膽固醇酯的量。計算在試驗條件下每分鐘形成的膽固醇酯量，作為轉(zhuǎn)移酶活性。一個轉(zhuǎn)移酶單位(TrU)被定義為根據(jù)上文所述的轉(zhuǎn)移酶試驗，在40°C，pH7的條件下，酶分鐘產(chǎn)生膽固醇酯的μπιο數(shù)。優(yōu)選在本發(fā)明方法和應(yīng)用中使用的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶具有至少25TrU/mg酶蛋白的每mg酶比轉(zhuǎn)移酶單位(TrU)。適合地，用于本發(fā)明的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的加入量為每g油中0.0550TrU，適合地為每g油中0.55TrU。更優(yōu)選地，適合用于本發(fā)明方法和/或應(yīng)用的酶可具有通過以下方案限定的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶活性用于測定?；D(zhuǎn)移酶活性％的方案在酶反應(yīng)后，可使用CHCl3CH3OH(21)提取添加了本發(fā)明脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的食用油，分離包含脂質(zhì)材料的有機相，并按照下文詳述的方法通過GLC和HPLC分析所述有機相。根據(jù)GLC和HPLC分析測定游離脂肪酸以及一種或多種留醇酯/留烷醇酯的量。以相同的方式分析沒有添加本發(fā)明酶的對照食用油。計算根據(jù)GLC和HPLC分析的結(jié)果，可按照下式計算游離脂肪酸和留醇/留烷醇酯的增加脂肪酸脂肪酸(酶脂肪酸(對照)；Mv脂肪酸=脂肪酸的平均分子量；A=Δ%甾醇酯/Mv甾醇酯(其中Δ%甾醇酯甾醇酯/甾烷醇酯(酶甾醇酯/甾烷醇酯(對照)，且Mv甾醇酯=甾醇酯/甾烷醇酯的平均分子量)；計算作為總酶活性的百分比的轉(zhuǎn)移酶活性Ax100%轉(zhuǎn)移酶活性=-Α+Δ%脂肪酸/(Mv脂肪酸)如果食用油中的游離脂肪酸增加，優(yōu)選其沒有明顯增加，即沒有增加到顯著的程度。也就是說，游離脂肪酸的增加沒有對食用油的品質(zhì)產(chǎn)生不良影響。用于?；D(zhuǎn)移酶試驗的食用油優(yōu)選是補充了植物留醇(1%)和磷脂酰膽堿(2%)的大豆油，并使用以下方法進行通過在攪動下加熱至95°C，將植物留醇和磷脂酰膽堿溶解在大豆油中。隨后，將油冷卻至40°C，并添加酶。添加水到油相5%的總濃度。在磁力攪拌下，將樣品保持在40°C，并在4和20小時后取出樣品，并通過TLC分析。對于本試驗，所使用的酶劑量優(yōu)選為0.2TIPU-K/g油，更優(yōu)選0.08TIPU-K/g油，優(yōu)選0.01TIPU-K/g油。優(yōu)選在0.5、1、2、4和20小時后，更優(yōu)選在20小時后測定油中存在的磷脂水平和/或留醇轉(zhuǎn)化％。當(dāng)所使用的酶是脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶時，優(yōu)選溫育時間能夠確保至少5%的轉(zhuǎn)移酶活性，優(yōu)選至少10%的轉(zhuǎn)移酶活性，優(yōu)選至少15%,20%,25%,26%,28%,30%,40%,50%,60%或75%轉(zhuǎn)移酶活性。可通過上述教導(dǎo)的方案測定轉(zhuǎn)移酶活性％(即，作為總酶活性百分?jǐn)?shù)的轉(zhuǎn)移酶活性)。在本發(fā)明的某些方面，本文使用的術(shù)語“基本沒有增加游離脂肪酸”表示用本發(fā)明的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶處理的食用油中游離脂肪酸的量小于用不是本發(fā)明的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的酶處理的食用油中產(chǎn)生的游離脂肪酸的量，例如小于用常規(guī)磷脂酶，例如，LecitaseUltra(NovozymesA/S,Denmark)時產(chǎn)生的游離脂肪酸的量。此外，或作為替代，也可采用下文標(biāo)題為“鑒定用于本發(fā)明的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的方法”評估(上述)油中的轉(zhuǎn)移酶活性％，以鑒定最優(yōu)選用于本發(fā)明方法的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。鑒定脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的方法本發(fā)明的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是產(chǎn)生以下結(jié)果的酶i)去除在補充了植物甾醇(1%)和磷脂酰膽堿(2%)的大豆油中存在的磷脂(使用以下方法進行通過在攪動下加熱至95°C，將植物留醇和卵磷脂溶解在大豆油中。隨后，將油冷卻至40°C，并添加酶。在磁力攪拌下，將樣品保持在40°C，并在0.5、1、2、4和20小時后取出樣品，并通過TLC分析)；禾口/或ii)所添加甾醇到甾醇酯的轉(zhuǎn)化(轉(zhuǎn)化％)(使用上述i)中教導(dǎo)的方法)。可使用如實施例2中教導(dǎo)的用于測定甾醇和甾醇酯的GLC方法。對于本試驗，所使用的酶劑量可以是0.2TIPU-K/g油，優(yōu)選0.08TIPU-K/g油，優(yōu)選0.01TIPU-K/g油。優(yōu)選在0.5、1、2、4和20小時后，更優(yōu)選在20小時后測定油中存在的磷脂水平和/或留醇的轉(zhuǎn)化(轉(zhuǎn)化％)。在用于鑒定脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的方法中，在酶處理后，優(yōu)選添加5%的水，并與油徹底混合。隨后，使用離心將油分離成油相和水相(參見，“Enzyme-catalyzeddegummingofvegetableoils"byBuchold,H.andLaurgiA.-G.,FettWissenschaftTechnologie(1993)，95(8)，300-4，ISSN=0931-5985)，然后使用以下方法(“磷含量試驗”)分析油相的磷含量磷含量試驗水脫膠后油中存在的磷脂水平的測定如下首先根據(jù)AOACOfficialMethod12999.10(>Lead,Cadmium,Zinc,Copper,andIroninFoodsAtomicAbsorptionSpectrophotometryafterMicrowaveDigestion,FirstAction1999NMKL-AOACMethod)制備油樣品。隨后，根據(jù)AOACOfficialMethodCa20-99AnalysisofPhosphorusinoilbyinductivelyCoupledPlasmaOpticalEmissionSpectroscopy通過分析油樣品中的磷含量測定油中的磷脂量。使用本發(fā)明后油相中存在的磷量通常與常規(guī)水脫膠(即沒有酶)后油相中的磷含量沒有顯著區(qū)別。與使用常規(guī)水脫膠法(即沒有酶)后的油相相比，使用本發(fā)明的油相中本發(fā)明的油產(chǎn)量通常明顯增加。適合地，與進行沒有添加酶的相同水脫膠法處理的相同油相比，本發(fā)明的方法和/或應(yīng)用使產(chǎn)量提高約0.25%7%，例如約0.25%3%，或約0.52%，或約12%。令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，與使用沒有添加酶的相當(dāng)?shù)乃撃z方法獲得的相當(dāng)?shù)挠拖嘞啾?，在本發(fā)明方法中添加的酶使油相中的油產(chǎn)量顯著提高，但并不一定顯著減少油相的磷含量。適合地，根據(jù)本發(fā)明的方法或應(yīng)用處理油時，油相中的磷含量可以比使用沒有添加酶的相當(dāng)?shù)乃撃z法獲得的油相的磷含量少0-80%，適合地少0-50%，適合地少0-10%，適合地少0-1%ο值得注意地，可將本發(fā)明方法獲得的油相進一步脫膠以除去磷脂(phospholipid)和/或磷脂質(zhì)(phosphatide)。例如，可對油相進行酶促脫膠和/或酸脫膠。油中存在的甾醇的轉(zhuǎn)化％為至少1%，優(yōu)選至少5%，優(yōu)選至少10%，優(yōu)選至少20%，優(yōu)選至少30%，優(yōu)選至少40%，優(yōu)選至少50%，優(yōu)選至少60%，優(yōu)選至少70%，優(yōu)選至少80%，優(yōu)選至少90%，優(yōu)選至少95%。在一個實施方式中，油中存在的甾醇的轉(zhuǎn)化％為至少5%，優(yōu)選至少20%。在某些方面，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以包含GDSx基序和/或GANDY基序。優(yōu)選地，將所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶表征為具有?；D(zhuǎn)移酶活性并包含氨基酸序列基序GDSX的酶，其中X是以下氨基酸殘基中的一種或多種:L、A、V、I、F、Y、H、Q、T、N、M或S。適合地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用的編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列或脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以獲自于，優(yōu)選獲自于以下一個或多個屬的生物氣單孢菌屬(Aeromonas)、鏈霉菌屬(Streptomyces)、酵母菌屬(Saccharomyces)、乳球菌屬(Lactococcus)、分支桿菌屬(Mycobacterium)、鏈球菌屬(Streptococcus)、乳桿菌屬(Lactobacillus)、脫亞硫酸菌屬(Desulfitobacterium)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、彎曲胃M(Campylobacter)>^M(Vibrionaceae)>ff^M(Xylella)>ψι^Pf^M(Sulfolobus)、曲霉屬(Aspergillus)、裂殖酵母屬(Schizosaccharomyces)、李斯特菌屬(Listeria)、奈瑟菌屬(Neisseria)、中慢生根瘤菌屬(Mesorhizobium)、雷爾氏菌屬(Ralstonia)、黃單胞菌屬(Xanthomonas)和念珠菌屬(Candida)。優(yōu)選地，所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以獲自于，優(yōu)選獲自于氣單孢菌屬的生物。在本發(fā)明的一些方面，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列所編碼的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶在對應(yīng)于SEQIDNo.35所示的嗜水氣單胞菌13(Aeromonashydrophila)脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的氨基酸序列中的N-80位置上包含天冬氨酸殘基。在本發(fā)明的一些方面，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是在對應(yīng)于SEQIDNo.35所示的嗜水氣單胞菌脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的氨基酸序列中的N-80位置上包含天冬氨酸殘基的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶。此外或可選地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的編碼脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的核苷酸序列編碼的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以包含SEQIDNo.16所示的氨基酸序列，或與其具有75%或更高同一性的氨基酸序列。適合地，編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列所編碼的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以包含SEQIDNo.16所示的氨基酸序列。此外或可選地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列編碼的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以包含SEQIDNo.68所示的氨基酸序列，或與其具有75%或更高同一性的氨基酸序列。適合地，編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列所編碼的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以包含SEQIDNo.68所示的氨基酸序列。在一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶具有SEQIDNo.16或SEQIDNo.68所示的氨基酸序列，或者具有與其具有至少75%的同一性，優(yōu)選與其具有至少80%，優(yōu)選至少85%，優(yōu)選至少95%，優(yōu)選至少98%的同一性的氨基酸序列。在一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶由SEQIDNo.49所示的核苷酸序列編碼，或者由與SEQIDNo.49具有至少75%的同一性，優(yōu)選與其具有至少80%，優(yōu)選至少85%，優(yōu)選至少95%，優(yōu)選至少98%的同一性的核苷酸序列編碼。在一個實施方式中，優(yōu)選用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是通過使用SEQIDNo.1所示核苷酸序列或與其具有至少75%同一性(更優(yōu)選至少80%，更優(yōu)選至少85%，更優(yōu)選至少95%，更優(yōu)選至少98%同一性)的核苷酸序列轉(zhuǎn)化的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)，培養(yǎng)所述地衣芽孢桿菌，并分離其中產(chǎn)生的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶，從而由地衣芽孢桿菌表達的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。本文所用的術(shù)語“食用油”可包括植物油。優(yōu)選在本發(fā)明處理前的食用油是未加工食用油，其包含約50-3000ppm的非水合磷含量，更優(yōu)選在約50-1400ppm的范圍，更優(yōu)選在約200-1400ppm的范圍，更優(yōu)選在約400-1200ppm的范圍。一方面，在實施本發(fā)明方法之前，所述未加工食用油具有350ppm以上的磷含量，更優(yōu)選400ppm以上，更優(yōu)選500ppm以上，最優(yōu)選600ppm以上。優(yōu)選地，所述食用油是植物油。本發(fā)明方法所涵蓋的油可包括，但不限于大豆油、菜籽油(canolaoil)、玉米油、棉籽油、棕櫚油、椰子油、米糠油、花生油、橄欖油、紅花油、棕櫚仁油、油菜籽油(rapeseedoil)和葵花油中的一種或多種。優(yōu)選所述油是大豆油、玉米油、葵花油和油菜籽油(有時也稱作菜籽油)中的一種或多種。更優(yōu)選所述油是大豆油、葵花油或油菜籽油中的一種或多種。更優(yōu)選所述油是大豆油。本文所用的“未加工油”(本文中也稱作未脫膠油)可以是壓榨油或提取油或其混合物。未加工油中的磷脂含量可在0.5-3%w/w之間變化，對應(yīng)的磷含量在200-1200ppm的范圍，更優(yōu)選在250-1200ppm的范圍。除磷脂外，未加工油還可包含低濃度的碳水化合物、糖化合物以及Ca、Mg和Fe的金屬/磷脂酸復(fù)合物。有利的是，本發(fā)明的方法和應(yīng)用能夠在低水(<5%，優(yōu)選小于2%，更優(yōu)選小于1%)環(huán)境中進行食用油的脫膠。因此，可在加水量少于使用常規(guī)水脫膠方法的情況下進行水脫膠。本發(fā)明的另一個優(yōu)點是在油相中產(chǎn)生甾醇酯。適合地，酶的劑量可以在約0.01-10TIPU-K/g油的范圍，適合地，酶的劑量可以在約0.05-1.5TIPU-K/g油的范圍，更優(yōu)選0.2-lTIPU-K/g油。當(dāng)所述酶是脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶時，合適地，其劑量可以在約0.OlTIPU-K單位/g油至5TIPU-K單位/g油的范圍。在一個實施方式中，脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的劑量可在約0.1至約ITIPU-K單位/g油的范圍，更優(yōu)選脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的劑量在約0.1至約0.5TIPU-K單位/g油的范圍，更優(yōu)選脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的劑量在約0.1至約0.3TIPU-K單位/g油的范圍。當(dāng)所述酶是磷脂酶時，合適地，其適合的劑量在約0.5-10TIPU-K單位/g油的范圍。在一個實施方式中，磷脂酶的劑量可在約0.5-5TIPU-K單位/g油的范圍，優(yōu)選磷脂酶的劑量在約0.5-1.5TIPU-K單位/g油的范圍。適合地，磷脂酶的劑量在約1.0-3TIPU-K單位/g油的范圍。磷脂酶活性，TIPU-K底物1.75%L-植物磷脂酰膽堿95%(441601，AvantiPolarLipids),6.3%TritonX-100(#T9284,Sigma)和溶于50mmHepes(pH7.0)的5mMCaCl20試驗方法將樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和對照稀釋到IOmMHEPES(pH7.0),0.1%TritonX-100(#T9284,Sigma)中。使用KonelabAutoanalyzer(Thermo,Finland)進行分析。試驗在30°C進行。在添加4μL樣品前，將34μL底物熱穩(wěn)定180秒。酶解持續(xù)600秒。在酶解期間使用NEFACkit(999-75406,WAK0,Germany)測量釋放的游離脂肪酸量。添加56μLNEFAΑ，并將混合物溫育300秒。然后，添加113μLNEFAB，并將混合物溫育300秒。隨后測量OD520nm。基于標(biāo)準(zhǔn)酶制劑計算酶活性(ymolFFA/minmL)。計算在試驗條件下每分鐘產(chǎn)生的游離脂肪酸(FFA)微摩爾數(shù)，作為酶活性TIPU-Ko在本發(fā)明中，優(yōu)選此方法不是堿中和方法(即，不是酸-水脫膠法和/或不是酸-堿脫膠法)。也就是說，此方法優(yōu)選不包括添加酸(例如磷酸、檸檬酸、抗壞血酸、硫酸、富馬酸、馬來酸、鹽酸和/或乙酸)或堿(例如，KOH和NaOH)，或不包括添加大量的酸或堿。也就是說，如果在本發(fā)明的方法中添加酸和/或堿，其添加量小于0.004%。為了便于參考，在適合的部分標(biāo)題下討論本發(fā)明的這些和其他方面。然而，在每個部分中的教導(dǎo)并不一定局限于每個具體的部分。磷脂酶C如上所述，磷脂分解酶(優(yōu)選脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶)可以與磷脂酶C(E.C.3.1.4.3)組合使用。磷脂酶C可以是任何可獲得的磷脂酶C，并且可選自以下磷脂酶C中的一種或多種Purifine(可得自于Verenium，US)；來自產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridiumperfringens)的磷脂酶C(例如，可得自于Sigma，RefP7633的磷脂酶C)；來自蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)的磷脂酶C(例如，可得自于Sigma，RefP6621的磷脂酶C)；W02008/036863(并入本文作為參考)中教導(dǎo)的磷脂酶C。優(yōu)點本發(fā)明的一個優(yōu)點是在水脫膠過程結(jié)束時獲得的油產(chǎn)量提高。所述油產(chǎn)量的增加是與未添加本發(fā)明酶的相當(dāng)?shù)乃撃z方法進行比較的。盡管不希望被理論束縛，所述產(chǎn)量增加可能是由于磷脂向膠相的轉(zhuǎn)移而導(dǎo)致乳化作用降低造成的。磷脂是良好的乳化劑，并可與三酰甘油一起乳化，因此，當(dāng)磷脂被轉(zhuǎn)移到膠相時，三酰甘油(油)形式的一些油也被轉(zhuǎn)移。由磷脂的降解導(dǎo)致的膠相粘度的降低有助于防止油損失到膠相中(由于分離的是膠相，而油更容易)。此外或可選地(不希望被理論束縛)，按照本發(fā)明使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶時，通過將脂肪酸部分從磷脂轉(zhuǎn)移到留醇而形成留醇酯。在油相中發(fā)現(xiàn)了通過脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶反應(yīng)而與甾醇酯化的脂肪酸部分，但在膠相中沒有發(fā)現(xiàn)。在常規(guī)的水脫膠方法(沒有添加脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶)中，這些脂肪酸部分損失到膠相中。本發(fā)明的另一個優(yōu)點是，在使用脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶時，無需調(diào)節(jié)水脫膠過程中的pH(約pH5.0或5.5，或約pH6.5或7)。此pH導(dǎo)致脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的高反應(yīng)性。本發(fā)明的另一個優(yōu)點是，當(dāng)使用脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶時，來自磷脂的脂肪酸被轉(zhuǎn)移到甾醇上，形成留醇酯。這可以獨立地在油相中產(chǎn)生0.1-0.15%的產(chǎn)量增加。本發(fā)明(特別是使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶時)的另一個優(yōu)點是與沒有添加本發(fā)明酶的相當(dāng)?shù)乃撃z方法相比，膠相的粘度更低。膠相粘度較低導(dǎo)致更易于其與油相分離，即通過離心分離。此外，膠相可具有較少的含水量，因此，更易于干燥。本發(fā)明的另一個優(yōu)點是膠相中甘油三酯的濃度降低。本發(fā)明的方法可在加工廠中產(chǎn)生較少的污垢。這意味著工廠的清洗更加容易。盡管不希望受到理論束縛，但已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶能夠使用(通過磷脂酶C的反應(yīng)產(chǎn)生的)甘油二酯作為受體分子以產(chǎn)生甘油三酯。因此，將脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶與磷脂酶C組合使用時，這些酶之間的相互作用導(dǎo)致與包含其中任意單獨一種的相當(dāng)?shù)挠突虿缓傅南喈?dāng)?shù)挠拖啾龋@兩種酶的油中的甘油三酯的量協(xié)同的增加。將脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶與磷脂酶C組合使用時，這些酶之間的相互作用導(dǎo)致與包含其中任意單獨一種的相當(dāng)?shù)挠突虿缓傅南喈?dāng)?shù)挠拖啾龋@兩種酶的油中的油產(chǎn)量協(xié)同的增加。因為甘油二酯對油的“發(fā)煙點”具有不利影響和/或會對較多飽和脂肪源的結(jié)晶性質(zhì)產(chǎn)生不利影響，甘油二酯在油中的累積(其可在單獨使用磷脂酶C時發(fā)生)會對油有害，所以使用這些酶的組合具有優(yōu)于單獨使用磷脂酶C的顯著優(yōu)點。因此，在本發(fā)明中使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(特別是在與磷脂酶C組合時)的另一個優(yōu)點是能夠使油中甘油二酯的量比不含脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的相當(dāng)?shù)挠秃?或特別是單獨使用磷脂酶C處理的相當(dāng)?shù)挠蜏p少。使用本發(fā)明的酶能夠?qū)⒎椒ㄖ兴璧乃繙p少到小于約1%。這能夠在水脫膠過程中產(chǎn)生顯著的經(jīng)濟優(yōu)勢。因此，如果能夠?qū)⑺繙p少至約1%，就能夠產(chǎn)生顯著的成本下降。優(yōu)選在脫膠過程期間進行酶處理，而不對油和/或水進行pH調(diào)節(jié)。這產(chǎn)生了由于使用磷脂酶A的現(xiàn)有技術(shù)方法的顯著優(yōu)勢，其中所述磷脂酶A通常僅在酸性pH條件下具有高度活性。在現(xiàn)有技術(shù)方法(例如使用磷脂酶A)中，必須在脫膠過程之前和/或期間調(diào)整油的pH。這對于本發(fā)明不是必須的。此外，與使用所述磷脂酶A和磷脂酶C相比，使用脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶與磷脂酶C的組合具有顯著的優(yōu)勢，這是因為脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的最適PH通常與磷脂酶C的最適pH更好的符合。因此，在將脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C組合使用時，通常沒有“pH沖突”。這與將磷脂酶A與磷脂酶C組合使用的情況截然相反。因此，由于脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C能夠在其最佳PH范圍內(nèi)同時發(fā)揮作用，因此，這兩種酶的組合應(yīng)用提供了顯著的改進。值得注意地，在包括使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(單獨的，或與磷脂酶C組合)處理膠相的方法中，在此方法結(jié)束時產(chǎn)生的“酸性油”可以以高于添加到膳食中的通常膠相的價格銷售。此外，還令人驚奇地發(fā)現(xiàn)剩余的固相(分離酸性油后)具有高于通常膠的磷水平，由此可以用作有機磷源。宿主細(xì)胞所述宿主生物可以是原核或真核生物。在本發(fā)明的一個實施方式中，本發(fā)明的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶在宿主細(xì)胞中表達，例如在細(xì)菌細(xì)胞中，例如在芽孢桿菌，例如在地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)宿主細(xì)胞中表達?？蛇x擇的宿主細(xì)胞有，例如真菌、酵母或植物。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)與其它生物如枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)相比，使用地衣芽孢桿菌宿主細(xì)胞可使脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的表達增加。已經(jīng)將來自于殺鮭氣單胞菌(Aeromonassalmonicida)的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶插入到多個常規(guī)表達載體中，所述表達載體經(jīng)設(shè)計分別最適宜在枯草芽孢桿菌、多型漢遜酵母(Hansenulapolymorpha)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomycespombe)禾口塔賓曲霉(Aspergillustubigensis)中表達。然而，在多型漢遜酵母、粟酒裂殖酵母和塔賓曲霉中僅檢測到極低的水平。這些表達水平低于1μg/ml,因此不可能選擇出產(chǎn)生足量蛋白以起始商業(yè)生產(chǎn)的細(xì)胞(結(jié)果未顯示)。相反，地衣芽孢桿菌能夠產(chǎn)生對商業(yè)可行的生產(chǎn)具有吸引力的蛋白水平。具體而言，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)地衣芽孢桿菌中的表達比在aprE啟動子控制下的枯草芽孢桿菌表達高約100倍，或比在A4啟動子控制下并與纖維素融合時變鉛青鏈霉菌(S.Iividans)中的表達高約100倍(結(jié)果未顯示在本文中)。除枯草芽孢桿菌外，所述宿主細(xì)胞還可以為任何芽孢桿菌細(xì)胞。優(yōu)選地，所述芽孢桿菌宿主細(xì)胞可以是以下物種中的一種地衣芽孢桿菌、嗜堿芽孢桿菌(B.alkalophilus)、解淀粉芽孢桿菌(B.amyloliquefaciens)、環(huán)狀芽孢桿菌(B.circulans)、克勞氏芽孢桿菌(B.clausii)、凝結(jié)芽孢桿菌(B.coagulans)、堅強芽孢桿菌(B.firmus)、燦爛芽孢桿菌(B.Iautus)、緩慢芽孢桿菌(B.Ientus)、巨大芽孢桿菌(B.megaterium)、短小芽孢桿菌(B.pumilus)或嗜熱月旨肪芽孢桿菌(B.stearothermophiIus)。本發(fā)明涉及的術(shù)語“宿主細(xì)胞”包括具有以下特征的任何細(xì)胞包含本文所定義的編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列或本文所定義的表達載體，且用于重組制備具有如本文所定義的特異性質(zhì)的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。適合地，所述宿主細(xì)胞可以是蛋白酶缺陷或蛋白酶陰性細(xì)胞株(proteaseminusstrain)和/或α-淀粉酶缺陷或α-淀粉酶陰性細(xì)胞株(α-amylaseminusstrain)。本文所用的術(shù)語“異源”是指源自分離的遺傳資源或物種的序列。異源序列是非宿主序列、修飾的序列、來自不同宿主細(xì)胞株的序列、或來自宿主細(xì)胞的不同染色體位置的同源序列?！巴础毙蛄惺侵冈谙嗤z傳資源或物種中發(fā)現(xiàn)的序列，即其天然存在于宿主細(xì)胞的相關(guān)物種中。本文所用的術(shù)語“重組脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶”是指已經(jīng)通過遺傳重組的方式制備的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶。例如，將編碼脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的核苷酸序列插入克隆載體，得到以存在異源脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶為特征的地衣芽孢桿菌細(xì)胞。調(diào)控序列在一些應(yīng)用中，可通過如下獲得用于本發(fā)明方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶序列將其編碼序列可操作地連接到能夠通過例如所選宿主細(xì)胞(如地衣芽孢桿菌細(xì)胞)提供核苷酸序列表達的調(diào)控序列。例如，可以使用包含可操作地連接到此調(diào)控序列的本發(fā)明核苷酸序列的載體，即所述載體是表達載體。術(shù)語“可操作地連接”是指并列放置(juxtaposition)，其中所述組件的關(guān)系允許它們能以其希望的方式發(fā)揮功能。“可操作地連接”到編碼序列的調(diào)控序列的連接方式使其能在與控制序列相容的條件下實現(xiàn)編碼序列的表達。術(shù)語“調(diào)控序列”包括啟動子和增強子以及其它表達調(diào)控信號。所用的術(shù)語“啟動子”為本領(lǐng)域的一般含義，如RNA聚合酶結(jié)合位點。也可以通過選擇調(diào)控區(qū)(如啟動子、分泌引導(dǎo)子和終止子區(qū))來實現(xiàn)編碼具有如本文所定義的特定性質(zhì)的酶的核苷酸序列的增強表達，其中所述終止子區(qū)本質(zhì)上不是編碼所述酶的核苷酸序列的調(diào)控區(qū)。適合地，可以將本發(fā)明的核苷酸序列至少可操作地連接到啟動子。適合地，編碼脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的核苷酸序列可以可操作地連接編碼終止子序列的核苷酸序列。用于本發(fā)明載體、宿主細(xì)胞、方法和/或應(yīng)用中任一項的適合的終止子序列的實例包括α-淀粉酶終止子序列(例如，CGGGACTTACCGAAAGAAACCATCAATGATGGTTTCTTTTTTGTTCATAAA-SEQIDNo.64)、堿性蛋白酶終止子序列(例如，CAAGACTAAAGACCGTTCGCCCGTTTTTGCAATAAGCGGGCGAATCTTACATAAAAATA-SEQIDNo.65)、谷氨酸特異性終止子序列(例如，ACGGCCGTTAGATGTGACAGCCCGTTCCAAAAGGAAGCGGGCTGTCTTCGTGTATTATTGT-SEQIDNo.66)、果聚糖酶終止子序列(例如，TCTTTTAAAGGAAAGGCTGGAATGCCCGGCATTCCAGCCACATGATCATCGTTT-SEQIDNo.67)和枯草桿菌蛋白酶E終止子序列(如，GCTGACAAATAAAAAGAAGCAGGTATGGAGGAACCTGCTTCTTTTTACTATTATTG)。適合地，可以將編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列可操作地連接到α-淀粉酶終止子，如地衣芽孢桿菌α-淀粉酶終止子。啟動子根據(jù)本發(fā)明所用的啟動子序列可以與編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的序列異源或同源。所述啟動子序列可以是能夠指導(dǎo)脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶在所選宿主細(xì)胞中表達的任何啟動子序列。適合地，所述啟動子序列可以與芽孢桿菌(如地衣芽孢桿菌)同源。優(yōu)選地，所述啟動子序列與所選宿主細(xì)胞同源。適合地，所述啟動子序列可以與宿主細(xì)胞同源?！芭c宿主細(xì)胞同源”是指來源于宿主生物內(nèi)；即，在宿主生物中自然發(fā)現(xiàn)的啟動子序列。適合地，所述啟動子序列可以選自由編碼以下啟動子的核苷酸序列組成的組α-淀粉酶啟動子、蛋白酶啟動子、枯草桿菌蛋白酶啟動子、谷氨酸特異性蛋白酶啟動子和果聚糖蔗糖酶啟動子。適合地，所述啟動子序列可以是編碼以下啟動子的核苷酸序列LAT(如，來自地衣芽孢桿菌的α"淀粉酶啟動子，也稱作AmyL)、AprL(如，枯草桿菌蛋白酶Carlsberg啟動子),EndoGluC(如，來自地衣芽孢桿菌的谷氨酸特異性啟動子)、AmyQ(如，來自解淀粉芽孢桿菌α"淀粉酶啟動子的α"淀粉酶啟動子)和SacB(如，枯草芽孢桿菌的果聚糖蔗糖酶啟動子)。適合在本發(fā)明方法中指導(dǎo)核酸序列轉(zhuǎn)錄的啟動子的其它實例包括緩慢芽孢桿菌堿性蛋白酶基因(aprH)的啟動子、枯草芽孢桿菌α-淀粉酶基因(amyE)的啟動子、嗜熱脂肪芽孢桿菌麥芽糖淀粉酶基因(amyM)的啟動子、地衣芽孢桿菌青霉素酶基因(penP)的啟動子、枯草芽孢桿菌xylA和xylB基因的啟動子、和/或蘇云金芽胞桿菌擬步行甲亞種(Bacillusthuringiensissubsp·tenebrionis)CryIIIA基因的啟動子。在優(yōu)選的實施方式中，所述啟動子序列為α-淀粉酶啟動子(如地衣芽孢桿菌α-淀粉酶啟動子)。優(yōu)選地，所述啟動子序列包含地衣芽孢桿菌α-淀粉酶啟動子的-35至"10序列(參見圖53和圖55)。所述“_35至-10序列”描述的是相對于轉(zhuǎn)錄起始位點的位置?！?35”和“-10”均為框，即多個核苷酸，各包含6個核苷酸，且這些框被17個核苷酸分開。這17個核苷酸通常被稱為“間隔子”。圖55對此進行了說明，其中-35框和-10框被加下劃線。為了避免混淆，本文所用的“_35至-10序列”是指從-35框的起點至-10框的終點的序列，即包括-35框、長度為17個核苷酸的間隔子和-10框。信號肽根據(jù)所用的序列和/或載體，通過由宿主細(xì)胞表達編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列所產(chǎn)生的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以被分泌出或包含在細(xì)胞內(nèi)。信號序列可以用于指導(dǎo)編碼序列分泌通過特定的細(xì)胞膜。所述信號序列對脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶編碼序列來說可以是天然的或外源的。例如，所述信號肽編碼序列可以是從芽孢桿菌，優(yōu)選從地衣芽孢桿菌獲得的淀粉酶或蛋白酶基因。可以由一種或多種以下基因獲得適合的信號肽編碼序列麥芽糖α-淀粉酶基因、枯草桿菌蛋白酶基因、內(nèi)酰胺酶基因、中性蛋白酶基因、PrsA基因和/或酰基轉(zhuǎn)移酶基因。19優(yōu)選地，所述信號肽為地衣芽孢桿菌α-淀粉酶的信號肽、氣單孢菌?；D(zhuǎn)移酶的信號肽(如，mkkwfvcllglialtvqa-SEQIDNo.21)、枯草芽孢桿菌枯草桿菌蛋白酶的信號肽(如，mrskklwisiIfaltliftmafsnmsaqa-SEQIDNo.22)或地衣芽孢桿菌枯草桿菌蛋白酶的信號肽(如，mmrkksfwfgmltafmlvftmefsdsasa-SEQIDNo.23)。適合地，所述信號肽可以為地衣芽孢桿菌α-淀粉酶的信號肽。然而，可以使用能夠指導(dǎo)所表達的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶進入所選芽孢桿菌宿主細(xì)胞(優(yōu)選為地衣芽孢桿菌宿主細(xì)胞)分泌途徑的任何信號肽編碼序列。在本發(fā)明的一些實施方式中，可以將編碼信號肽的核苷酸序列可操作地連接到編碼所選脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列。所選脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以在本文所定義的宿主細(xì)胞中作為融合蛋白表達。表達載體術(shù)語“表達載體”是指能夠在體內(nèi)或體外表達的構(gòu)建體。優(yōu)選地，所述表達載體被引入到生物(如地衣芽孢桿菌宿主)的基因組中。術(shù)語“引入”優(yōu)選涵蓋穩(wěn)定的引入到基因組中。如本文所定義的編碼脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的核苷酸序列可以存在于載體中，在該載體中所述核苷酸序列可操作地連接到調(diào)控序列，使得所述調(diào)控序列能夠通過適合的宿主生物(如地衣芽孢桿菌)表達所述核苷酸序列，即所述載體是表達載體。本發(fā)明的載體可以被轉(zhuǎn)化到上述的適合宿主細(xì)胞中，以表達具有如本文所定義的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶活性的多肽。通常根據(jù)其將被引入的宿主細(xì)胞來選擇載體(如質(zhì)粒、粘粒、病毒或噬菌體載體、基因組插入物)。本發(fā)明可以涵蓋發(fā)揮等同功能且本領(lǐng)域已知或可知的其它形式的表達載體。一旦轉(zhuǎn)化到所選擇的宿主細(xì)胞中，載體可以不依賴宿主細(xì)胞的基因組而復(fù)制并發(fā)揮功能，或可以自行整合進入基因組。所述載體可以包含一個或多個選擇性標(biāo)記基因，如提供抗生素抗性的基因，如提供氨芐青霉素抗性、卡那霉素抗性、氯霉素抗性或四環(huán)素抗性的基因。或者，也可以通過共轉(zhuǎn)化完成選擇(如W091/17243中所述)。載體可以在體外使用，例如，用于制備RNA或用于轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞。所述載體可以進一步包含能使該載體在所述宿主細(xì)胞中復(fù)制的核苷酸序列。所述序列的實例為質(zhì)粒pUC19、pACYC177、pUB110、pE194、pAMBl和pIJ702的復(fù)制起點。脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用的編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列可編碼天然脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶或脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶變體。用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是天然脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶或脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶變體。例如，用于本發(fā)明的編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列可以是W02004/064537、W02004/064987、W02005/066347或W02006/008508中所述的一種。這些文獻通過引用并入本文。本文所用的術(shù)語“脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶”優(yōu)選地是指具有酰基轉(zhuǎn)移酶活性的酶(通常被歸類為E.C.2.3.1.X，如2.3.1.43)，其中所述酶能夠?qū)Ⅴ；鶊F從脂質(zhì)轉(zhuǎn)移到一個或多個受體底物，例如以下的一種或多種留醇；留烷醇(stanol)；碳水化合物；蛋白；蛋白亞基；糖醇，如抗壞血酸和/或甘油，優(yōu)選甘油和/或留醇，如膽固醇。優(yōu)選地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶是能夠?qū)Ⅴ；鶊F從磷脂(如本文所定義)轉(zhuǎn)移到糖醇(如抗壞血酸和/或甘油和/或留醇，優(yōu)選甘油或甾醇，最優(yōu)選留醇(例如膽固醇))的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶。在一些方面，本發(fā)明的“?；荏w”可以是包含羥基基團(-0H)的任何化合物，例如多元醇，包括甘油；留醇；留烷醇；碳水化合物；羥酸，包括果酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸和抗壞血酸；蛋白或其亞基，如氨基酸、蛋白水解產(chǎn)物和肽(部分水解的蛋白)；和其混合物和衍生物。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的“?；荏w”不是水。優(yōu)選地，所述?；荏w不為甘油單酯。在一個實施方式中，所述?；荏w可以是甘油二酯。一方面，優(yōu)選用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶能夠?qū)Ⅴ；鶊F從脂質(zhì)轉(zhuǎn)移到留醇和/或留烷醇。另一方面，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶能夠?qū)Ⅴ；鶊F從脂質(zhì)轉(zhuǎn)移到留醇和/或留烷醇，此外還能夠?qū)Ⅴ；鶊F從脂質(zhì)轉(zhuǎn)移到以下的一種或多種物質(zhì)碳水化合物、蛋白、蛋白亞基、甘油、脂肪醇。適合地，所述酰基受體可以天然存在于油中?；蛘?，可向油中添加所述酰基受體(例如，所述?；荏w對于油而言是外源的)。例如，在一些實施方式中，在脫膠過程之前或期間向油中添加留醇和/或留烷醇。如果?；荏w的量限制酰基轉(zhuǎn)移酶反應(yīng)的速率，這一點特別重要。與沒有添加額外?；荏w的油相比，添加?；荏w可導(dǎo)致游離脂肪酸減少和/或形成更多的?；荏w酯。優(yōu)選地，脂質(zhì)?；饔玫闹|(zhì)底物是以下脂質(zhì)中的一種或多種磷脂，如卵磷脂，如磷脂酰膽堿和/或磷脂酰乙醇胺。所述脂底物在本文中可以被稱為“脂質(zhì)?；w”。本文所用的術(shù)語卵磷脂涵蓋磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸和磷脂酰甘油。用于本發(fā)明的優(yōu)選脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是鑒定為具有高活性，例如在油環(huán)境中對磷脂具有高磷脂水解活性或高磷脂轉(zhuǎn)移酶活性的那些，用于本發(fā)明的最優(yōu)選的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶具有磷脂到留醇的高轉(zhuǎn)移酶活性。如上所述，可通過與pFam00657共有序列(SEQIDNo.1)比對，和/或與⑶Sx?；D(zhuǎn)移酶例如SEQIDNo.28比對，鑒定⑶Sx、GANDY和HPT區(qū)的存在，從而鑒定適合用于本發(fā)明方法的其他酰基轉(zhuǎn)移酶。為了評估其用于脫膠的適宜性，即鑒定這些酶是否具有占總酶活性至少5%的轉(zhuǎn)移酶活性，更優(yōu)選至少10%，更優(yōu)選至少20%，更優(yōu)選至少30%，更優(yōu)選至少40%，更優(yōu)選至少50%，更優(yōu)選至少60%，更優(yōu)選至少70%，更優(yōu)選至少80%，更優(yōu)選至少90%，更優(yōu)選至少98%的轉(zhuǎn)移酶活性，使用上文詳述的“用于測定?；D(zhuǎn)移酶活性％的方法”試驗測試此類?；D(zhuǎn)移酶。在一些方面，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶優(yōu)選為不能或基本不能作用于甘油三酯和/或1-甘油單酯和/或2-甘油單酯的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。在一些方面，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶優(yōu)選為不表現(xiàn)出三酰甘油(triacylglycerol)脂肪酶活性(E.C.3.1.1.3)或不表現(xiàn)出顯著的三酰甘油脂肪酶活性(E.C.3.1.1.3)的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。水解甘油三酯的能力(E.C.3.1.1.3活性)可以根據(jù)FoodChemicalCodex(3rdEd.，1981，pp492-493)(其中修改為以葵花油，pH5.5替代橄欖油，pH6.5)測定的脂肪酶活性來測定。脂肪酶活性以LUS(葵花油的脂肪酶單位)來計量，其中將ILUS定義為在以上試驗條件下每分鐘可以從葵花油中釋放Iymol脂肪酸的酶量?；蛘?，也可以使用如W09845453中定義的LUT試驗。此文獻通過引用并入本文。用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以為基本上不能作用于甘油三酯的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的LUS/mg可以小于1000，如小于500、如小于300，優(yōu)選為小于200、更優(yōu)選為小于100、更優(yōu)選為小于50、更優(yōu)選為小于20、更優(yōu)選為小于10，如小于5、小于2、更優(yōu)選為小于1LUS/mgο或者，LUT/mg活性小于500，如小于300，優(yōu)選為小于200、更優(yōu)選為小于100、更優(yōu)選為小于50、更優(yōu)選為小于20、更優(yōu)選為小于10，如小于5、小于2、更優(yōu)選為小于lLUT/mg。用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是基本上不能作用于甘油單酯的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以在LUS試驗中使用單油酸酯(M77651-油酰-rac-甘油99%)以替代葵花油來測定。將IMGHU定義為在所述試驗條件下每分鐘可以從甘油單酯中釋放1μmol脂肪酸的酶量。用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是優(yōu)選基本上不能作用于甘油三酯的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶具有的MGHU/mg可以小于5000，如小于1000、如小于500、如小于300，優(yōu)選為小于200、更優(yōu)選為小于100、更優(yōu)選為小于50、更優(yōu)選為小于20、更優(yōu)選為小于10，如小于5、小于2，更優(yōu)選為小于lMGHU/mg。適合地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是可以表現(xiàn)出一種或多種以下磷脂酶活性的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶磷脂酶A2活性(E.C.3.1.1.4)和/或磷脂酶Al活性(E.C.3.1.1.32)。所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶也可以具有磷脂酶B活性(E.C.3.1.1.5)。適合地，在一些方面，所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以能夠?qū)Ⅴ；鶊F從磷脂轉(zhuǎn)移到甾醇和/或留烷醇，優(yōu)選為膽固醇。在一些方面，優(yōu)選用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶編碼能夠?qū)Ⅴ；鶊F從磷脂轉(zhuǎn)移到留醇和/或留烷醇以至少形成留醇酯和/或留烷醇酯的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶。因此，在一個實施方式中，本發(fā)明的“?；荏w”可以為植物留醇和/或留烷醇。優(yōu)選地，所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以使用以下標(biāo)準(zhǔn)進行表征所述酶具有可以被定義為酯轉(zhuǎn)移活性的?；D(zhuǎn)移酶活性，由此將脂質(zhì)酰基供體的原始酯鍵的?；糠洲D(zhuǎn)移到?；荏w以形成新的酯；和所述酶包含氨基酸序列基序GDSX，其中X是以下氨基酸殘基中的一種或多種L、A、V、I、F、Y、H、Q、Τ、N、M或S。優(yōu)選地，⑶SX基序的X為L或Y。更優(yōu)選地，⑶SX基序的X為L。因此，優(yōu)選本發(fā)明的酶包含氨基酸序列基序GDSL。GDSX基序由四個保守的氨基酸構(gòu)成。優(yōu)選地，該基序中的絲氨酸為所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的催化絲氨酸。適合地，⑶SX基序的絲氨酸的位置對應(yīng)于Brumlik和Buckley(JournalofBacteriologyApr.1996，Vol.178，No.7，p2060_2064)中教導(dǎo)的嗜水氣單胞菌脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的Ser-16。為了測定蛋白是否具有本發(fā)明的⑶SX基序，優(yōu)選使用W02004/064537或W02004/064987(均通過引用并入本文)中公開的方法，將序列與pfam數(shù)據(jù)庫的隱馬爾可夫模型譜(hiddenmarkovmodelprofile)(HMM譜)進行比較。優(yōu)選地，所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以使用Pfam00657共有序列進行比對(有關(guān)完整的解釋可參見W02004/064537或W02004/064987)。優(yōu)選地，與pfam00657結(jié)構(gòu)域家族的隱馬爾可夫模型譜(HMM譜)的陽性匹配表示存在本發(fā)明的⑶SL或⑶SX結(jié)構(gòu)域。優(yōu)選地，當(dāng)與Pfam00657共有序列進行比對時，用于本發(fā)明方法和/或應(yīng)用的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以具有至少一個，優(yōu)選為多于一個、更優(yōu)選為多于兩個的下述區(qū)(block)⑶Sx區(qū)、GANDY區(qū)、HPT區(qū)。適合地，所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以具有⑶Sx區(qū)和GANDY區(qū)?；蛘?，所述酶可以具有GDSx區(qū)和HPT區(qū)。優(yōu)選地，所述酶至少包含GDSx區(qū)。更多細(xì)節(jié)請參見W02004/064537或W02004/064987。優(yōu)選地，GANDY基序的殘基選自GANDY、GGNDA,GGNDL,最優(yōu)選為GANDY。優(yōu)選地，當(dāng)與Pfam00657共有序列進行比對時，與嗜水氣單胞菌多肽參考序列即SEQIDNo.1相比，用于本發(fā)明方法和/或應(yīng)用的酶具有以下氨基酸殘基中的至少一個，優(yōu)選多于兩個，優(yōu)選多于三個，優(yōu)選多于四個，優(yōu)選多于五個，優(yōu)選多于六個，優(yōu)選多于七個，優(yōu)選多于八個，優(yōu)選多于九個，優(yōu)選多于十個，優(yōu)選多于十一個，優(yōu)選多于十二個，優(yōu)選多于十三個，優(yōu)選多于十四個28hid、29hid、30hid、31hid、32gly、33Asp、34Ser、35hid、130hid、131Gly、132Hid、133Asn、134Asp、135hid、309His。pfam00657⑶SX結(jié)構(gòu)域是區(qū)分有此結(jié)構(gòu)域的蛋白和其它酶的獨特標(biāo)志。圖3中顯示了pfam00657共有序列(SEQIDNo.2)。其源自于對第6版數(shù)據(jù)庫pfam家族00657(在本文中也可以稱為pfam00657.6)的鑒定。所述共有序列可以通過使用較新版pfam數(shù)據(jù)庫來升級(如參見W02004/064537或W02004/064987)。在一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是可以使用以下標(biāo)準(zhǔn)進行表征的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶(i)所述酶具有可以被定義為酯轉(zhuǎn)移活性的?；D(zhuǎn)移酶活性，由此將脂質(zhì)?；w的原始酯鍵的?；糠洲D(zhuǎn)移到酰基受體以形成新的酯；(ii)所述酶包含氨基酸序列基序GDSX，其中X是以下氨基酸殘基中的一種或多種丄、八、￥、1、卩、丫、!1、0、1\1]\1或3;(iii)所述酶包含His-309或在對應(yīng)于圖2和4(SEQIDNo.1或SEQIDNo.3)中所示的嗜水氣單胞菌脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶中His-309的位置上包含組氨酸殘基。優(yōu)選地，所述⑶SX基序的氨基酸殘基為L。在SEQIDNo.3或SEQIDNo.1中，起始的18個氨基酸殘基形成信號序列。全長序列(即包含信號序列的蛋白)中的His-309等同于蛋白的成熟部分(即不含信號序列的序列)中的His-291。在一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶為包含以下催化三聯(lián)體的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶Ser-34、Asp-306和His_309，或在分別對應(yīng)于圖4(SEQIDNo.3)或圖2(SEQIDNo.1)中所示嗜水氣單胞菌脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶中Ser_34、Asp-306和His-309的位置上包含絲氨酸殘基、天冬氨酸殘基和組氨酸殘基。如上所述，在SEQIDNo.3或SEQIDNo.1所示的序列中，起始的18個氨基酸殘基形成信號序列。長序列(即包含信號序列的蛋白)中的Ser-34、Asp-306和His-309等同于蛋白的成熟部分(即不含信號序列的序列)中的Ser-16、Asp-288和His-291。在圖3(SEQIDNo.2)所示的pfam00657共有序列中，活性位點殘基相應(yīng)于Ser-7、Asp-345和His_348。在一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是可以使用以下標(biāo)準(zhǔn)進行表征的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶所述酶具有可以被定義為酯轉(zhuǎn)移活性的?；D(zhuǎn)移酶活性，由此將第一脂質(zhì)?；w的原始酯鍵的酰基部分轉(zhuǎn)移到?；荏w以形成新的酯；和所述酶至少包含Gly-32、Asp-33、Ser-34、Asp-134和His-309，或在分別對應(yīng)于SEQIDNo.3或SEQIDNo.1所示的嗜水氣單胞菌脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶中Gly-32、Asp-33、Ser-34、Asp-306和His-309的位置上包含甘氨酸殘基、天冬氨酸殘基、絲氨酸殘基、天冬氨酸殘基和組氨酸殘基。適合地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以由以下核苷酸序列中之一編碼(a)SEQIDNo.36所示的核苷酉堯序列參見圖29)(b)SEQIDNo.38所示的核苷酉堯序列參見圖31)(c)SEQIDNo.39所示的核苷酉堯序列參見圖32)(d)SEQIDNo.42所示的核苷酉堯序列參見圖35)(e)SEQIDNo.44所示的核苷酉堯序列參見圖37)(f)sEQIDNo.46所示的核苷酉堯序列參見圖39)(g)SEQIDNo.48所示的核苷酉堯序列參見圖41)(h)SEQIDNo.49所示的核苷酉堯序列參見圖57)(i)SEQIDNo.50所示的核苷酉堯序列參見圖58)(j)SEQIDNo.51所示的核苷酉堯序列參見圖59)(k)SEQIDNo.52所示的核苷酉堯序列參見圖60)(I)SEQIDNo.53所示的核苷酉堯序列參見圖61)(m)SEQIDNo.54所示的核苷酉堯序列參見圖62)(η)SEQIDNo.55所示的核苷酉堯序列參見圖63)(ο)SEQIDNo.56所示的核苷酉堯序列參見圖64)(P)SEQIDNO.57所示的核苷酉堯序列參見圖65)(q)SEQIDNo.58所示的核苷酉堯序列參見圖66)(r)SEQIDNo.59所示的核苷酉堯序列參見圖67)(s)SEQIDNo.60所示的核苷酉堯序列參見圖68)(t)SEQIDNo.61所示的核苷酉堯序列參見圖69)(u)SEQIDNo.62所示的核苷酉堯序列參見圖70)(ν)SEQIDNo.63所示的核苷酉堯序列參見圖71)(w)與SEQIDNo.36、SEQIDNo.38、SEQIDNo.39、SEQIDNo.42,SEQIDNo.44、SEQIDNo.46,SEQIDNo.48,SEQIDNo.49,SEQIDNo.50、SEQIDNo.5USEQIDNo.52、SEQIDNo.53,SEQIDNo.54、SEQIDNo.55、SEQIDNo.56、SEQIDNo.57、SEQIDNo.58、SEQIDNo.59、SEQIDNo.60、SEQIDNo.61、SEQIDNo.62或sEQIDNo.63中所示的任一序列具有70%或更高，優(yōu)選為75%或更高同一性的核苷酸序列。適合地，所述核苷酸序列可以與SEQIDNo.36、SEQIDNo.38、SEOIDNo.39、SEQIDNo.42,SEQIDNo.44,SEQIDNo.46,SEQIDNo.48,SEQIDNo.49,SEQIDNo.50,SEQIDNo.5USEQIDNo.52,SEQIDNo.53,SEQIDNo.54,SEQIDNo.55,SEQIDNo.56,SEQIDNo.57,SEQIDNo.58,SEQIDNo.59,SEQIDNo.60,SEQIDNo.6USEQIDNo.62或SEQIDNo.63中所示的任一序列具有80%或更高，優(yōu)選為85%或更高，更優(yōu)選為90%或更高，更優(yōu)選為95%或更高同一性。在一個實施方式中，編碼用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列為與SEQIDNo.49、SEQIDNo.50、SEQIDNo.51、SEQIDNo.62和SEQIDNo.63中所示的任一序列具有70%或更高，優(yōu)選為75%或更高同一性的核苷酸序列。適合地，所述核苷酸序列可以與SEQIDNo.49,SEQIDNo.50,SEQIDNo.51,SEQIDNo.62和SEQIDNo.63中所示的任一序列具有80%或更高，優(yōu)選為85%或更高，更優(yōu)選為90%或更高，更優(yōu)選為95%或更高同一性。在一個實施方式中，編碼用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列為與SEQIDNo.49中所示的序列具有70%或更高，75%或更高，80%或更高，優(yōu)選為85%或更高，更優(yōu)選為90%或更高，更優(yōu)選為95%或更高同一性的核苷酸序列。適合地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以為包含一個或多個以下氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶(i)SEQIDNo.68所示的氨基酸序列(ii)SEQIDNo.3所示的氨基酸序列(iii)SEQIDNo.4所示的氨基酸序列(iv)SEQIDNo.5所示的氨基酸序列(v)SEQIDNo.6所示的氨基酸序列(vi)SEQIDNo.7所示的氨基酸序列(vii)SEQIDNo.8所示的氨基酸序列(viii)SEQIDNo.9所示的氨基酸序列(ix)SEQIDNo.10所示的氨基酸序列(X)SEQIDNo.11所示的氨基酸序列(xi)SEQIDNo.12所示的氨基酸序列(xii)SEQIDNo.13所示的氨基酸序列(xiii)SEQIDNo.14所示的氨基酸序列(xiv)SEQIDNo.1所示的氨基酸序列(XV)SEQIDNo.15所示的氨基酸序列(xvi)SEQIDNo.16所示的氨基酸序列(xvii)SEQIDNo.17所示的氨基酸序列(xix)SEQIDNo.18所示的氨基酸序列(x)SEQIDNo.34所示的氨基酸序列(XX)SEQIDNo.35所示的氨基酸序列，或與SEQIDNo.68、SEQIDNo.1、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5、SEQIDNo.6、SEQIDNo.7、SEQIDNo.8、SEQIDNo.9、SEQIDNo.10、SEQIDNo.IUSEQIDNo.12、SEQIDNo.13、SEQIDNo.14或SEQIDNo.15、SEQIDNo.16、SEQIDNo.17、SEQIDNo.18、SEQIDNo.34或SEQIDNo.35中所示的任一序列具有75%、80%、85%、90%、95%、98%或更高同一性的氨基酸序列。適合地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是包含SEQIDNo.68或SEQIDNo.3或SEQIDNo.4或SEQIDNo.1或SEQIDNo.15或SEQIDNo.16或SEQIDNo.34或SEQIDNo.35所示的氨基酸序列，或包含與SEQIDNo.68所示的氨基酸序列，或與SEQIDNo.3所示的氨基酸序列，或與SEQIDNo.4所示的氨基酸序列，或與SEQIDNo.1所示的氨基酸序列，或與SEQIDNo.15所示的氨基酸序列，或與SEQIDNo.16所示的氨基酸序列，或與SEQIDNo.34所示的氨基酸序列，或與SEQIDNo.35所示的氨基酸序列具有75%或更高，優(yōu)選為80%或更高，優(yōu)選為85%或更高，優(yōu)選為90%或更高，優(yōu)選為95%或更高同一性的氨基酸序列的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶。適合地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以是包含與SEQIDNo.68、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5、SEQIDNo.6、SEQIDNo.7、SEQIDNo.8、SEQIDNo.9、SFQIDNo.10、SEQIDNo.11、SEQIDNo.12、SEQIDNo.13、SEQIDNo.14、SEQIDNo.USEQIDNo.15、SEQIDNo.16、SEQIDNo.17、SEQIDNo.18、SEQIDNo.34或SEQIDNo.35中所示的任一序列具有80%或更高，優(yōu)選為85%或更高，更優(yōu)選為90%或更高，更優(yōu)選為95%或更高的同一性的氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。適合地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以是包含一個或多個以下氨基酸序列的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(a)SEQIDNo.3或SEQIDNo.1的氨基酸殘基1-100所示的氨基酸序列；(b)SEQIDNo.3或SEQIDNo.1的氨基酸殘基101-200所示的氨基酸序列；(c)SEQIDNo.3或SEQIDNo.1的氨基酸殘基201-300所示的氨基酸序列；或(d)與以上(a)至(C)中所定義的氨基酸序列中任一序列具有75%或更高，優(yōu)選為85%或更高，更優(yōu)選為90%或更高，更優(yōu)選為95%或更高的同一性的氨基酸序列。適合地，用于本發(fā)明方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以包含一個或多個以下氨基酸序列(a)SEQIDNo.3或SEQIDNo.1的氨基酸殘基28_39所示的氨基酸序列；(b)SEQIDNo.3或SEQIDNo.1的氨基酸殘基77_88所示的氨基酸序列；(c)SEQIDNo.3或SEQIDNo.1的氨基酸殘基126-136所示的氨基酸序列；(d)SEQIDNo.3或SEQIDNo.1的氨基酸殘基163-175所示的氨基酸序列；(e)SEQIDNo.3或SEQIDNo.1的氨基酸殘基304-311所示的氨基酸序列；或(f)與以上(a)至(e)中所定義的氨基酸序列中任一序列具有75%或更高，優(yōu)選為85%或更高，更優(yōu)選為90%或更高，更優(yōu)選為95%或更高的同一性的氨基酸序列。一方面，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以是如EP127526711中教導(dǎo)的來自于近平滑假絲酵母(Candidaparapsilosis)的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。因此，一方面，用于本發(fā)明方法和應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以為包含SEQIDNo.17或SEQIDNo.18所教導(dǎo)的氨基酸序列之一的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。優(yōu)選地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是可以為包含SEQIDNo.16所示的氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶，或者包含與SEQIDNo.16具有75%或更高，優(yōu)選為85%或更高，更優(yōu)選為90%或更高，更優(yōu)選為95%或更高，更優(yōu)選為98%或更高、或更優(yōu)選為99%或更高的同一性的氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶。該酶可以認(rèn)為是酶變體。一方面，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是可以為卵磷脂膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶(LCAT)或其變體(如由分子進化產(chǎn)生的變體)的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶。適合的LCAT為本領(lǐng)域已知的，且可以獲自于一種或多種如下的生物，如哺乳動物、大鼠、小鼠、雞、黑腹果蠅(Drosophilamelanogaster)、植物(包括擬南芥(Arabidopsis)和水稻(Oryzasativa))、線蟲、真菌和酵母。在一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是這樣的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，其可以是可獲自于，優(yōu)選獲自于含有pPetUaAhydro和pPetUaASalmo的大腸桿菌株TOP10的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，其中所述大腸桿菌株TOP10由丹麥哥本哈根K，DK-1001，Langebrogade1的丹尼斯科公司(DaniscoA/SofLangebrogade1，DK-1001CopenhagenK，Denmark)根據(jù)國際承認(rèn)用于專利程序的微生物保藏布達佩斯條約保藏在英國蘇格蘭阿伯丁圣馬恰爾街23號英國食品工業(yè)與海洋細(xì)菌菌種保藏中心(NationalCollectionofIndustrial,MarineandFoodBacteria(NCIMB)23St.MacharStreet,AberdeenScotland，GB)，保藏日為2003年12月22日，保藏號分別為NCIMB41204和NCIMB41205。用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是磷脂甘油?；D(zhuǎn)移酶。磷脂甘油?；D(zhuǎn)移酶包括分離自氣單孢菌，優(yōu)選為嗜水氣單胞菌或殺鮭氣單胞菌，最優(yōu)選為殺鮭氣單胞菌或其變體的磷脂甘油酰基轉(zhuǎn)移酶。用于本發(fā)明的最優(yōu)選脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶由SEQIDNo.1、3、4、15、16、34和35編碼。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，優(yōu)選?；D(zhuǎn)移酶的信號肽在轉(zhuǎn)移酶的表達過程中已被切割掉。SEQIDNo.1、3、4、15和16的信號肽為氨基酸1-18。因此，最優(yōu)選的區(qū)域為SEQIDNo.1和SEQIDNo.3(嗜水氣單胞菌)中的氨基酸19-335，和SEQIDNo.4、SEQIDNo.15和SEQIDNo.16(殺鮭氣單胞菌)中的氨基酸19-336。當(dāng)用于測定氨基酸序列同一性的同源性時，優(yōu)選使用成熟序列進行本文所述的比對。在一個實施方式中，適合用于本發(fā)明的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶包含SEQIDNo.16所示的氨基酸序列(或由SEQIDNo.16所示的氨基酸序列組成)，或包含與SEQIDNo.16具有至少70%、至少75%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%同一性的氨基酸序列(或由與SEQIDNo.16具有至少70%、至少75%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%同一性的氨基酸序列組成)。在一個實施方式中，適合用于本發(fā)明的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶由編碼SEQIDNo.68所示氨基酸序列(或由SEQIDNo.68所示氨基酸序列組成)的氨基酸序列的核苷酸序列編碼，或包含與SEQIDNo.68具有至少70%、至少75%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%同一性的氨基酸序列或由與SEQIDNo.68具有至少70%、至少75%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%同一性的氨基酸序列組成。因此，確定同源性(同一性)的最優(yōu)選區(qū)域為SEQIDNo.1和3(嗜水氣單胞菌)中的氨基酸19-335，和SEQIDNo.4、15和16(殺鮭氣單胞菌)中的氨基酸19-336。SEQIDNo.34和35是來分別來自嗜水氣單胞菌和殺鮭氣單胞菌的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的成熟蛋白序列，其可以經(jīng)歷或可以未經(jīng)歷翻譯后修飾。用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以是還可分離自喜熱裂孢菌(Thermobifida)，優(yōu)選為褐色喜熱裂孢菌(T.fusca)，最優(yōu)選由SEQIDNo.28編碼的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶。適合本發(fā)明應(yīng)用和/或本發(fā)明方法的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以包含以下任一氨基酸序列和/或由以下核苷酸序列編碼a)核酸，其編碼表現(xiàn)出脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶活性和與SEQIDNo.16所示的多肽序列或與SEQIDNo.68所示的多肽序列具有至少70%同一性(優(yōu)選至少80%同一性，更優(yōu)選至少90%同一性)的多肽；b)(分離的)多肽，其包含SEQIDNo.16或SEQIDNo.68所示的氨基酸序列(或由SEQIDNo.16或SEQIDNo.68所示的氨基酸序列組成)，或包含與SEQIDNo.16或SEQIDNo.68具有至少70%同一性(優(yōu)選至少80%同一性，更優(yōu)選至少90%同一性)的氨基酸序列(或由與SEQIDNo.16或SEQIDNo.68具有至少70%同一性(優(yōu)選至少80%同一性，更優(yōu)選至少90%同一性)的氨基酸序列組成)；c)編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核酸，所述核酸包含SEQIDNo.49所示的核苷酸序列(或由SEQIDNo.49所示的核苷酸序列組成)，或包含與SEQIDNo.49所示的核苷酸序列具有至少70%同一性(優(yōu)選至少80%同一性，更優(yōu)選至少90%同一性)的核苷酸序列(或由與SEQIDNo.49所示的核苷酸序列具有至少70%同一性(優(yōu)選至少80%同一性，更優(yōu)選至少90%同一性)的核苷酸序列組成)；d)核酸，所示核酸在中等或高嚴(yán)謹(jǐn)條件下與包含SEQIDNo.49所示核苷酸序列的核酸探針雜交，且編碼表現(xiàn)出脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶活性的多肽；e)核酸，其是a)、C)或d)所指核酸序列的片段；或f)多肽，其是b)所指多肽的片段。用于本發(fā)明任一方法和應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是還可分離自鏈霉菌屬，優(yōu)選為阿維鏈霉菌(S.avermitis)，最優(yōu)選由SEQIDNo.32編碼的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。用于本發(fā)明的來自鏈霉菌的其它可能的酶包括由SEQIDNo.5、6、9、10、11、12、13、14、31和33編碼的那些酶。用于本發(fā)明的酶也可以分離自棒狀桿菌屬(Corynebacterium)，優(yōu)選為C.efficiens，最優(yōu)選由SEQIDNo.29編碼。適合地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是包含SEQIDNo.37、38、40、41、43、45或47所示的任一氨基酸序列，或與其具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%或98%同一性的氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶，或可以由SEQIDNo.36、39、42、44、46或48所示的任一核苷酸序列所編碼，或由與其具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%或98%同一性的核苷酸序列所編碼。28在一個實施方式中，編碼用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的核苷酸序列選自由以下組成的組a)包含SEQIDNo.36所示的核苷酸序列的核酸；b)由于遺傳密碼簡并性而與SEQIDNo.36的核苷酸序列相關(guān)的核酸；和c)包含與SEQIDNo.36所示的核苷酸序列具有至少70%同一性的核苷酸序列的核酸。在一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是包含SEQIDNo.37所示的氨基酸序列或與其具有至少60%同一性的氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。在另一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以是包含SEQIDNo.37、38、40、41、43、45或47所示的任一氨基酸序列，或與其具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%或98%同一性的氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶，或由SEQIDNo.39、42、44、46或48所示的任一核苷酸序列所編碼，或由與其具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%或98%同一性的核苷酸序列所編碼。在另一實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是包含SEQIDNo.38、40、41、45或47所示的任一氨基酸序列，或與其具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%或98%同一性的氨基酸序列的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，以用于本發(fā)明所述的應(yīng)用。在另一實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是包含SEQIDNo.38、40或47所示的任一氨基酸序列，或與其具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%或98%同一性的氨基酸序列脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，以用于本發(fā)明所述的應(yīng)用。更優(yōu)選地，在一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是包含SEQID似.47所示的氨基酸序列，或與其具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%或98%同一性的氨基酸序列的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶。在另一實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是包含SEQIDNo.43或44所示的氨基酸序列，或與其具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%或98%同一性的氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。在另一實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是包含SEQIDNo.41所示的氨基酸序列，或與其具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%或98%同一性的氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶。在一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以由選自以下組成的組的核酸編碼a)包含SEQIDNo.36所示核苷酸序列的核酸；b)由于遺傳密碼簡并性而與SEQIDNo.36的核苷酸序列相關(guān)的核酸；和c)包含與SEQIDNo.36所示的核苷酸序列具有至少70%同一性的核苷酸序列的核酸。在一個實施方式中，根據(jù)本發(fā)明的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是可獲自于，優(yōu)選獲自于鏈霉菌株L130或L131的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶，所述鏈霉菌株L130或L131由丹麥哥本哈根K，DK-1001，Langebrogade1的丹尼斯科公司(DaniscoA/SofLangebrogade1，DK-1001CopenhagenK，Denmark)根據(jù)國際承認(rèn)用于專利程序的微生物保藏布達佩斯條約保藏在英國蘇格蘭阿伯丁圣馬恰爾街23號英國食品工業(yè)與海洋細(xì)菌菌種保藏中心(NationalCollectionofIndustrial,MarineandFoodBacteria(NCIMB)23St.MacharStreet,AberdeenScotland，GB)，保藏日為2004年6月25日，保藏號分別為NCIMB41226和NCIMB41227。適合地，編碼用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列可以是編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(SEQIDNo.16或SEQIDNo.68)的多核苷酸；或可以編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶(SEQIDNo.16或SEQIDNo.68)的氨基酸序列。適合地，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是可使用AlignX(使用默認(rèn)設(shè)置的VectorNTI的ClustalW成對比對算法)通過與L131(SEQIDNo.37)序列的比對而鑒定的氨基酸序列。L131與來自灰色鏈霉菌(S.avermitilis)和褐色喜熱裂孢菌的同源物的比對說明了GDSx基序(L131以及灰色鏈霉菌和褐色喜熱裂孢菌中為GDSY),GANDY框(其為GGNDA或GGNDL)和HPT區(qū)(被認(rèn)為是保守的催化組氨酸)的保守性。這三個保守區(qū)突出標(biāo)記在圖42中。與pfamPfam00657共有序列(如W004/064987中所述)和/或本文公開的L131序列(SEQIDNo.37)比對時，可以鑒定出三個保守區(qū)，GDSx區(qū)、GANDY區(qū)和HTP區(qū)(更多細(xì)節(jié)請參見W004/064987)。與pfamPfam00657共有序列(如W004/064987中所述)和/或本文公開的L131序列(SEQIDNo.37)比對時，i)用于本發(fā)明任一方法和應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是具有GDSx基序，更優(yōu)選為選自GDSL或GDSY基序的GDSx基序的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶；和/或ii)用于本發(fā)明任一方法和應(yīng)用中的編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是具有GANDY區(qū)，更優(yōu)選包含氨基GGNDx(更優(yōu)選為GGNDA或GGNDL)的GANDY區(qū)的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶；和/或iii)用于本發(fā)明任一方法和應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是優(yōu)選具有HTP區(qū)的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶；和優(yōu)選地，iv)用于本發(fā)明任一方法和應(yīng)用中的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以是優(yōu)選具有GDSx或⑶SY基序，和包含氨基GGNDx(優(yōu)選為GGNDA或GGNDL)的GANDY區(qū)，和HTP區(qū)(保守的組氨酸)的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶。在一個實施方式中，本發(fā)明的酶優(yōu)選不是磷脂酶，如被歸類為E.C.3.1.1.32的磷脂酶Al或被歸類為E.C.3.1.1.4的磷脂酶A2。脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶變體在優(yōu)選的實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的編碼脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的核苷酸序列所編碼的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶變體?？梢允褂脤α字幕钚栽黾拥淖凅w，如對磷脂的水解活性增加和/或轉(zhuǎn)移酶活性增加的變體，優(yōu)選為對磷脂的轉(zhuǎn)移酶活性增加的變體。優(yōu)選地，通過如上定義的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的一個或多個氨基酸修飾來制備所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶變體。適合地，當(dāng)用于本發(fā)明任一方法和應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以為脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶變體的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶，在此情況中，所述酶的特征為所述酶包含氨基酸序列基序GDSX，其中X是下列氨基酸殘基L、A、V、I、F、Y、H、Q、T、N、M或S中的一種或多種，且其中所述酶變體相對于親本序列在第2組、第4組、第6組或第7組(如W02005/066347和下文所定義)限定的一個或多個氨基酸殘基處包含任意一個或多個氨基酸修飾。例如，脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶變體可以被表征為所述酶包含氨基酸序列基序GDSX，其中X是下列氨基酸殘基中的一種或多種L、A、V、I、F、Y、H、Q、Τ、N、M或S，且其中酶變體相對于親本序列在第2組、第4組、第6組或第7組(如W02005/066347和下文所定義)限定的一個或多個氨基酸殘基處包含任意一個或多個氨基酸修飾，其中所述組是通過所述親本序列與本文定義的Ρ10480結(jié)構(gòu)模型的結(jié)構(gòu)比對而鑒定出來的，其優(yōu)選是通過Ρ10480晶體結(jié)構(gòu)等同物(crystalstructurecoordinates)與如W02005/066347和下文所定義的1IVN.PDB和/或1DE0.PDB的結(jié)構(gòu)比對而獲得的。在另一個實施方式中，用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶變體，其可以被表征為所述酶包含氨基酸序列基序GDSX，其中X是下列氨基酸殘基中的一種或多種L、A、V、I、F、Y、H、Q、Τ、N、M或S，且其中酶變體相對于親本序列在第2組所教導(dǎo)的一個或多個氨基酸殘基處包含一個或多個氨基酸修飾，所述第2組是在將所述親本序列與Pfam共有序列(SEQIDNo.2-圖3)比對時被鑒定出來的，并根據(jù)Ρ10480的結(jié)構(gòu)模型進行修飾以確保如W02005/066347和下文所定義的最佳匹配重疊(bestfitoverlap)。適合地，用于本發(fā)明任一方法和應(yīng)用中的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是包含以下氨基酸序列的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶變體，其中所述氨基酸序列如SEQIDNo.68,SEQIDNo.16,SEQIDNo.34,SEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5、SEQIDNo.6、SEQIDNo.7、SEQIDNo.8、SEQIDNo.9,SEQIDNo.10,SEQIDNo.IUSEQIDNo.12,SEQIDNo.13,SEQIDNo.14、SEQIDNo.USEQIDNo.15,SEQIDNo.25,SEQIDNo.26,SEQIDNo.27,SEQIDNo.28、SEQIDNo.29、SEQIDNo.30、SEQIDNo.32、SEQIDNo.33或SEQIDNo.35所示，但在如TO2005/066347和下文所定義的第2組、第4組、第6組或第7組限定的一個或多個氨基酸殘基處有一個或多個氨基酸修飾，所述組是通過與SEQIDNo.34的序列比對而鑒定出來的?；蛘?，所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是包含以下氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶變體，其中所述氨基酸序列如SEQIDNo.34、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5、SEQIDNo.6、SEQIDNo.7、SEQIDNo.8、SEQIDNo.9、SEQIDNo.10、SEQIDNo.11、SEQIDNo.12、SEQIDNo.13、SEQIDNo.14、SEQIDNo.USEQIDNo.15、SEQIDNo.25、SEQIDNo.26、SEQIDNo.27、SEQIDNo.28、SEQIDNo.29、SEQIDNo.30、SEQIDNo.16、SEQIDNo.68,SEQIDNo.32、SEQIDNo.33或SEQIDNo.35所示，但在如W02005/066347和下文所定義的第2組、第4組、第6組或第7組限定的一個或多個氨基酸殘基處有一個或多個氨基酸修飾，所述組是通過所述親本序列與本文定義的P10480的結(jié)構(gòu)模型的結(jié)構(gòu)比對而鑒定出來的，其優(yōu)選是通過P10480晶體結(jié)構(gòu)等同物與如W02005/066347和下文所教導(dǎo)的1IVN.PDB和/或1DE0.PDB的結(jié)構(gòu)比對而獲得的?；蛘?，所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可以是包含以下氨基酸序列的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶變體，其中所述氨基酸序列如SEQIDNo.34、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5、SEQIDNo.6、SEQIDNo.7、SEQIDNo.8、SEQIDNo.9、SEQIDNo.10、SEQIDNo.11、SEQIDNo.12、SEQIDNo.13、SEQIDNo.14、SEQIDNo.USEQIDNo.15、SEQIDNo.25、SEQIDNo.26、SEQIDNo.27、SEQIDNo.28、SEQIDNo.29、SEQIDNo.30、SEQIDNo.32、SEQIDNo.33、SEQIDNo.16、SEQIDNo.68或SEQIDNo.35所示，但在第2組所教導(dǎo)的一個或多個氨基酸殘基處有一個或多個氨基酸修飾，所述第2組是在將所述親本序列與pfam共有序列(SEQIDNo.2)比對時被鑒定出來的，并根據(jù)P10480的結(jié)構(gòu)模型進行修飾以確保如W02005/066347和下文所教導(dǎo)的最佳匹配重疊。優(yōu)選地，所述親本酶是包含SEQIDNo.34和/或SEQIDNo.15和/或SEQIDNo.35所示氨基酸序列或與它們同源的酶。優(yōu)選地，所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可以是包含以下氨基酸序列的脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶變體，其中所述氨基酸序列如SEQIDNo.34或SEQIDNo.35所示，但在如W02005/066347和下文所定義的第2組、第4組、第6組或第7組限定的任意一個或多個氨基酸殘基處有一個或多個氨基酸修飾。組的定義第1組氨基酸第1組氨基酸(注意這些是圖53和圖54的IIVN中的氨基酸)Gly8.Asp9.SerlO.LeulUSerl2、Tyrl5、Gly44、Asp45、Thr46、Glu69、Leu70、Gly71、Gly72、Asn73、Asd74、Gly75、Leu76、Glnl06、Ilel07、Argl08、Leul09、ProllO、Tyrll3、Phel21、Phel39、Phel40、Metl41、Tyrl45、Metl51、Aspl54、Hisl57、Glyl55、Ilel56、Pro158高度保守的基序，如GDSx和催化殘基從第1組中取消選定(標(biāo)有下劃線的殘基)。為了避免爭議，第1組定義了在IIVN模型活性位點中的甘油中心碳原子IOA以內(nèi)的氨基酸殘基。第2組氨基酸第2組氨基酸(注意氨基酸的編號是指P10480成熟序列中的氨基酸)Leul7、Lys22、Met23、Gly40、Asn80、Pro81、Lys82、Asn87、Asn88、Trplll、Valll2、Alall4、Tyrll7、Leull8、Prol56、Glyl59、Glnl60、Asnl61、Prol62、Serl63、Alal64、Argl65、Serl66、Glnl67、Lysl68、Vall69、Vall70、Glul71、Alal72、Tyrl79、Hisl80、Asnl81、Met209、Leu210、Arg211、Asn215、Lys284、Met285、Gln289和Val290。第1組中所選殘基與第2組的比較表3權(quán)利要求食用油(優(yōu)選未加工食用油)的水脫膠方法，所述方法包括以下步驟a)將約0.15％w/w水與食用油(優(yōu)選未加工食用油)和脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶混合，b)將混合物在約45℃至約90℃下攪動約10分鐘至180分鐘，和c)分離油相和膠相。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法進一步包括d)溫育包含活性脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的膠相最少約2小時至最長7天的時間，和e)從所述膠相分離油。3.用于處理膠相(優(yōu)選可通過食用油脫膠獲得或通過食用油脫膠獲得，所述脫膠例如為水脫膠或酶促脫膠或其組合)的方法，其中將膠相與單獨的一種或多種脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶一起溫育或者與一種或多種脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶和一種或多種磷脂酶C的組合一起溫育最少約2小時至最長7天的時間，并從所述膠相分離油。4.如權(quán)利要求1-3中任一項所述的方法，其中所述方法的pH在約pH5.0至約pH10.0之間。5.如權(quán)利要求1-4中任一項所述的方法，其中所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶包含GDSx基序和/或GANDY基序。6.如前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶的特征在于其為具有?；D(zhuǎn)移酶活性并包含氨基酸序列基序GDSX的酶，在GDSX中X是以下氨基酸殘基L、A、V、I、F、Y、H、Q、T、N、M或S中的一個或多個。7.如前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中用于本發(fā)明任一方法和/或應(yīng)用的脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可獲自于，優(yōu)選獲自于一種或多種以下屬的生物氣單胞菌屬(Aeromonas)、鏈霉菌屬(Streptomyces)、酵母菌屬(Saccharomyces)、乳球菌屬(Lactococcus)、分枝桿菌屬(Mycobacterium)>IjIit^M(Streptococcus)>ILff^M(Lactobacillus)^Ι^Μρτβ'屬(Desulfitobacterium)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、彎曲桿菌屬(Campylobacter)、弧菌屬(Vibrionaceae)、木桿菌屬(Xylella)、硫葉菌屬(Sulfolobus)、曲霉屬(Aspergillus)、裂殖酵母屬(Schizosaccharomyces)、李斯特菌屬(Listeria)、奈瑟氏菌屬(Neisseria)、中慢生根瘤菌屬(Mesorhizobium)、雷爾氏菌屬(Ralstonia)、黃單胞菌屬(Xanthomonas)禾口假絲酵母屬(Candida)。8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可獲自于，優(yōu)選獲自于氣單胞菌屬的生物。9.如前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是具有脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶活性的多肽，所述多肽是通過表達以下所示的任一核苷酸序列或與其具有75%或更高同一性的核苷酸序列獲得的SEQIDNo.49,SEQIDNo.36,SEQIDNo.38,SEQIDNo.39、SEQIDNo.42,SEQIDNo.44,SEQIDNo.46、SEQIDNo.48、SEQIDNo.50、SEQIDNo.51、SEQIDNo.52,SEQIDNo.53、SEQIDNo.54、SEQIDNo.55、SEQIDNo.56、SEQIDNo.57、SEQIDNo.58,SEQIDNo.59、SEQIDNo.60,SEQIDNo.6USEQIDNo.62或SEQIDNo.63。10.如前述任一項權(quán)利要求所述的方法，其中所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶是具有脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶活性的多肽，所述多肽是通過表達以下序列獲得的a)SEQIDNo.49所示的核苷酸序列，或與其具有75%或更高同一性的核苷酸序列；b)編碼所述多肽的核酸，其中所述多肽與SEQIDNo.16所示的多肽序列或SEQIDNo.68所示的多肽序列具有至少70%同一性；或c)在中度嚴(yán)謹(jǐn)條件下與包含SEQIDNo.49所示核苷酸序列的核酸探針雜交的核酸。11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是通過在地衣芽孢桿菌中表達所述核酸序列而獲得的。12.如前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶是具有脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶活性的多肽，所述多肽包含以下所示的任一氨基酸序列或與其具有75%或更高同一性的氨基酸序列SEQIDNo.68,SEQIDNo.16,SEQIDNo.USEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5,SEQIDNo.6,SEQIDNo.7,SEQIDNo.8,SEQIDNo.9,SEQIDNo.10,SEQIDNo.11、SEQIDNo.12、SEQIDNo.13、SEQIDNo.14、SEQIDNo.15、SEQIDNo.17、SEQIDNo.17、SEQIDNo.18、SEQIDNo.34、SEQIDNo.35。13.如前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是具有脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶活性的多肽，所述多肽包含SEQIDNo.68所示的氨基酸序列或與其具有75%或更高同一性的氨基酸序列。14.如前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中另外將磷脂酶C與油和/或水和/或脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶混合。15.脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶在食用油水脫膠中用于提高在水脫膠過程完成后油相中的油產(chǎn)量的應(yīng)用。16.脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶在食用油水脫膠中用于降低在水脫膠過程完成后膠相的粘度的應(yīng)用。17.脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C的組合在食用油水脫膠中用于提高油產(chǎn)量和/或用于提高在水脫膠過程完成后油相中的甘油三酯水平和/或用于降低在水脫膠過程完成后油相中的甘油二酯水平的應(yīng)用。18.脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶(或脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C的組合)在膠相(可通過食用油脫膠獲得或通過食用油脫膠獲得，所述脫膠例如為水脫膠、酶促脫膠或其組合)溫育中用于提高油產(chǎn)量和/或與未處理膠相比產(chǎn)生具有改進的磷水平的固相(分離酸性油之后)的應(yīng)用。19.如權(quán)利要求15-18中任一項所述的應(yīng)用，其中將0.1-4%w/w的水與食用油混合。20.如權(quán)利要求15-19中任一項所述的應(yīng)用，其中在約45°C至約90°C范圍的溫度下將所述酶添加到食用油中。21.如權(quán)利要求15-20中任一項所述的應(yīng)用，其中所述脫膠過程的pH在約pH5.0至約pH10.0之間。22.如權(quán)利要求15-21中任一項所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶與所述食用油反應(yīng)約10分鐘至180分鐘之間。23.如權(quán)利要求15-22中任一項所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶包含GDSx基序和/或GANDY基序。24.如權(quán)利要求15-23中任一項所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶的特征在于其為具有?；D(zhuǎn)移酶活性并包含氨基酸序列基序GDSX的酶，在GDSX中X是以下氨基酸殘基L、A、V、I、F、Y、H、Q、Τ、N、M或S中的一個或多個。25.如權(quán)利要求15-24中任一項所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶可獲自于，優(yōu)選獲自于一種或多種以下屬的生物氣單胞菌屬、鏈霉菌屬、酵母菌屬、乳球菌屬、分枝桿菌屬、鏈球菌屬、乳桿菌屬、脫亞硫酸菌屬、芽孢桿菌屬、彎曲桿菌屬、弧菌屬、木桿菌屬、硫葉菌屬、曲霉屬、裂殖酵母屬、李斯特菌屬、奈瑟氏菌屬、中慢生根瘤菌屬、雷爾氏菌屬、黃單胞菌屬和假絲酵母屬。26.如權(quán)利要求25所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶可獲自于，優(yōu)選獲自于氣單胞菌屬的生物。27.如權(quán)利要求15-26中任一項所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶是通過表達以下所示的任一核苷酸序列或與其具有75%或更高同一性的核苷酸序列獲得的SEQIDNo.49,SEQIDNo.36,SEQIDNo.38,SEQIDNo.39,SEQIDNo.42,SEQIDNo.44,SEQIDNo.46,SEQIDNo.48,SEQIDNo.50,SEQIDNo.51,SEQIDNo.52,SEQIDNo.53,SEQIDNo.54、SEQIDNo.55、SEQIDNo.56、SEQIDNo.57、SEQIDNo.58、SEQIDNo.59、SEQIDNo.60、SEQIDNo.61、SEQIDNo.62或SEQIDNo.63。28.如權(quán)利要求15-27中任一項所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是通過表達以下序列獲得的多肽a)SEQIDNo.49所示的核苷酸序列，或與其具有75%或更高同一性的核苷酸序列；b)編碼所述多肽的核酸，其中所述多肽與SEQIDNo.16所示的多肽序列或SEQIDNo.68所示的多肽序列具有至少70%同一性；或c)在中度嚴(yán)謹(jǐn)條件下與包含SEQIDNo.49所示核苷酸序列的核酸探針雜交的核酸。29.如權(quán)利要求28所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶是通過在地衣芽孢桿菌中表達所述核酸序列而獲得的。30.如權(quán)利要求15-29中任一項所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是包含以下所示的任一氨基酸序列或與其具有75%或更高同一性的氨基酸序列SEQIDNo.68、SEQIDNo.16,SEQIDNo.1、SEQIDNo.3,SEQIDNo.4,SEQIDNo.5,SEQIDNo.6,SEQIDNo.7、SEQIDNo.8、SEQIDNo.9、SEQIDNo.10、SEQIDNo.11、SEQIDNo.12、SEQIDNo.13、SEQIDNo.14、SEQIDNo.15、SEQIDNo.17、SEQIDNo.18、SEQIDNo.34、SEQIDNo.35。31.如權(quán)利要求15-30中任一項所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是包含SEQIDNo.68所示的氨基酸序列或與其具有75%或更高同一性的氨基酸序列的多肽。32.如權(quán)利要求15-31中任一項所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)酰基轉(zhuǎn)移酶與磷脂酶C組合使用。33.參照本文實施例和附圖，基本如本文定義的方法。34.參照本文實施例和附圖，基本如本文定義的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及食用油(優(yōu)選未加工食用油)的水脫膠方法，所述方法包括以下步驟a)將約0.1-5％w/w水與食用油(優(yōu)選未加工食用油)和脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶混合，b)將混合物在約45℃至約90℃下攪動約10分鐘至180分鐘，和c)分離油相和膠相。優(yōu)選所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶是具有脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶活性的多肽，所述多肽是通過表達SEQIDNo.49所示的核苷酸序列或與其具有70％或更高同一性的核苷酸序列獲得的；和/或通過表達在中度嚴(yán)謹(jǐn)條件下與包含SEQIDNo.49所示核苷酸序列的核酸探針雜交的核酸獲得的；和/或是具有脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶活性的多肽，所述多肽包含SEQIDNo.68所示的氨基酸序列或與其具有70％或更高同一性的氨基酸序列。在一個實施方式中，優(yōu)選將所述脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶與磷脂酶C組合使用。本發(fā)明還教導(dǎo)了使用脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶改進脫膠油的膠相的方法。文檔編號C11B3/00GK101978037SQ200880126854公開日2011年2月16日申請日期2008年12月11日優(yōu)先權(quán)日2007年12月21日發(fā)明者安妮·維多利亞·布朗,約恩·博爾奇·瑟申請人:丹尼斯科公司