專利名稱：包含含酶聚合物粒子的酶組合物的制作方法
包含含酶聚合物粒子的酶組合物本發(fā)明涉及一種包含含酶聚合物粒子的酶組合物，其可用于清凈劑組合物，特別 是液體清凈劑組合物。已知酶的穩(wěn)定性受儲存時的周圍環(huán)境影響，如化學或物理因素可降低酶的穩(wěn)定 性。特別是，在包含蛋白質(zhì)敵對化合物的液體配制劑如液體清凈劑中酶的穩(wěn)定性是有問題 的，難以保持酶在這種液體配制劑中穩(wěn)定。與液體清凈劑相關(guān)的特別問題是它們通常含有 消化蛋白質(zhì)的蛋白水解酶，因此存在于液體清凈劑中的其它酶可被存在的蛋白酶減活化， 其中可發(fā)生蛋白水解和自體蛋白水解。在液體配制劑中使用包含聚合物與酶的混合物的粒子代替通常的液體酶產(chǎn)品可 具有幾個優(yōu)點；它可保持酶敵對化合物遠離酶直至酶活性為所需的，且它可避免酶與液體 中活化酶的化合物直接接觸。然而，由于較大粒子的光散射，在加入含酶的聚合物粒子以 后，液體配制劑可變得混濁。在加入以后粒子不會或僅輕微改變液體配制劑的外觀以及它 們具有降低的沉降傾向也是重要的。此外，重要的是酶在合適的時間釋放，例如對于液體清 凈劑，酶一與洗滌水接觸就釋放。已存在若干嘗試制備適于液體配制劑如液體清凈劑的酶組合物。EP 356239 A2和EP 356240公開了含酶聚合物珠，其可通過從水溶性聚合物如聚 丙烯酸和酶在水不溶性液體中的水溶液的油包水(w/o)乳液中除去水或通過甲醛和脲凝 聚而制備。制備聚合物粒子的方法為單調(diào)的且不能制備小型酶聚合物粒子。除此之外，酶 的穩(wěn)定性不令人滿意。WO 93/22417 Al描述了包含(a)清凈劑敏感成分如清凈劑酶和(b)聚合物復合物 的聚合物膠囊，其中聚合物復合物包含(i)通過烯屬不飽和單體乳液聚合形成的疏水性聚 合物芯，和(ii)親水性聚合物，其選自合成非離子聚合物、多糖、改性多糖、蛋白質(zhì)、改性蛋 白質(zhì)、帶有羥基的蛋白質(zhì)和帶有羧基的聚合物。然而，聚合物復合物難以制備。US 5，198，353描述了一種制備穩(wěn)定酶分散體的方法，其包括在酶的存在下從水溶 液中沉淀水溶性聚合物如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纖維素、瓜爾膠或聚羧酸。分 散體適于酶催液體清凈劑。然而，實現(xiàn)的穩(wěn)定不完全令人滿意。WO 02/81616 Al描述了適于清凈劑組合物的含水溶性或水分散性酶的粒子，其中 將酶分散在包含聚乙烯醇的基質(zhì)中。粒子相當大，因此難以摻入液體清凈劑組合物中。WO 02/96551 Al描述了包含膠態(tài)模板和圍繞模板的聚合物的可溶性納米-或微 膠囊。聚合物為聚兩性電解質(zhì)，例如等電點優(yōu)選為PH4-9的蛋白質(zhì)。它建議使用這些膠囊 包封洗衣用清凈劑。制備納米-或微膠囊的方法為單調(diào)的，且聚兩性電解質(zhì)為昂貴的。因此，本發(fā)明的目的是提供用于在包含蛋白質(zhì)敵對化合物的液體配制劑如液體清 凈劑中有效穩(wěn)定酶的組合物。理想的是組合物可容易地摻入液體配制劑，特別是液體清凈 劑組合物中。當摻入液體配制劑中時，組合物應(yīng)不影響配制劑的外觀。此外，組合物應(yīng)容易 地制備。已令人驚訝地發(fā)現(xiàn)這些和其它目的通過呈含酶粒子形式的組合物實現(xiàn)，其中所述 粒子包含
i)至少一種酶，和ii)至少一種聚合物P，其選自具有C-C骨架的均聚物和共聚物，其中C-C骨架帶 有可以酸形式或以中和形式存在的羧基，且其中C-C骨架基于聚合物P的總重量(即基于 聚合物P中重復單元的總重量)包含至少20重量％，例如20-98重量％衍生自單體B的疏 水性重復單元，所述單體B在25°C下的水溶性為至多30g/l，其中含酶粒子的體積平均粒徑為50nm_100 μ m。因此，本發(fā)明涉及呈含酶粒子形式的酶組合物，其中所述粒子包含i)至少一種酶，和ii)至少一種如本文所定義的聚合物P，且其中含酶粒子的體積平均粒徑為50nm_100 μ m。本發(fā)明酶組合物具有幾個優(yōu)點。包含聚合物P與酶的混合物的粒子改進了液體配 制劑如清凈劑中酶的儲存穩(wěn)定性。含酶聚合物粒子可容易地由液體酶制劑制備，此外，聚合 物P為市售的或可容易地制備。由于粒子具有小尺寸，它們在配制劑中特別不可見，且不沉 降。由于酶存在于粒子中，酶不與環(huán)境直接接觸，且周圍環(huán)境中的酶敏感性化合物如液體清 凈劑中的組分不與酶直接接觸。酶敏感性化合物可為對于脂肪酶的類脂或?qū)τ诘鞍酌傅牡?白質(zhì)。除此之外，酶快速釋放至它要起作用的介質(zhì)中。關(guān)于清凈劑，重要的是當清凈劑在洗 滌過程期間被水稀釋時釋放酶。這通過充當釋放體系的聚合物P的性能確保。因此，酶組 合物適于摻入清凈劑組合物，特別是液體清凈劑組合物中。因此，本發(fā)明還涉及清凈劑組合 物，特別是液體清凈劑組合物。本發(fā)明酶組合物含至少一種酶或酶混合物。在本發(fā)明上下文中，酶可為任何酶或不同酶的組合。因此，當提到“酶”時，這通常 應(yīng)當理解包括一種酶或酶的組合。酶可為任何市售酶，特別是選自蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶、裂合酶、氧化 還原酶及其混合物的酶。還包括來自同一類酶(例如蛋白酶)的混合物?？蓛?yōu)選摻入本發(fā)明組合物中的酶的類型包括氧化還原酶(EC 1.-.-._)、轉(zhuǎn)移酶 (EC 2.-.-.-)、水解酶(EC 3.-.-.-)、裂合酶(EC 4.-.-.-)、異構(gòu)酶(EC 5.-.-.-)和連接 酶(EC 6.-.-.-)及其混合物。應(yīng)當理解酶變體(例如通過重組技術(shù)制備)包括在術(shù)語“酶”的含義內(nèi)。這 種酶變體的實例例如公開于 EP 251，446 (Genencor)、WO 91/00345 (Novo Nordisk)、EP 525, 610 (Solvay)和 WO 94/02618 (Gist-Brocades NV)中。酶可基于手冊酶命名法NC-IUBMB，1992分類，還見互聯(lián)網(wǎng)的ENZYME網(wǎng)址 http://www. expasy. ch/enzyme/0 ENZYME為關(guān)于酶命名的信息庫。它主要基于 Nomenclature Committee of the International Union of Biochemistry and Molecular Biology(IUB-MB)，Academic Press, Inc.，1992 的推薦，它描述了 提供有 EC (Enzyme Commission)號的表征酶的各個類型(Bairoch A. The ENZYME database, 2000, Nucleic Acids Res28 :304-305)。該IUB-MB酶命名法基于它們的基質(zhì)特異性，有時基于它們的分子 機理；這種分類不反映這些酶的結(jié)構(gòu)特征。多年前已推薦了基于氨基酸順序相似性的種類中的某些糖苷水解酶的另一分類， 例如內(nèi)切葡聚糖酶、木聚糖酶、半乳聚糖酶、甘露聚糖酶、葡聚糖酶和α-半乳糖苷酶。目前它們分為90個不同的種類見CAZy(ModO)互聯(lián)網(wǎng)址(Coutinho, P. M. & Henrissat, B. (1999)碳水化合物-活性酶服務(wù)器連接(URL) :http //afmb. cnrs-mrs. fr/ cazy/ CAZY/index. html (對應(yīng)文件:Coutinho，P. Μ. & Henrissat，B. (1999)碳水化合物-活性酶 綜合數(shù)據(jù)庫° 在"Recent Advances in Carbohydrate Bioengineering", H. J. Gilbert, G.Davies, B. Henrissat 禾口 B. Svensson 編 輯，The Royal Society of Chemistry, Cambridge,第 3-12 頁；Coutinho, P. Μ. & Henrissat, B. (1999)。纖維素酶和其它碳水 化合物活性酶的模塊結(jié)構(gòu)綜合數(shù)據(jù)庫。在“Genetics，Biochemistry and Ecology of Cellulose Degradation，，，K. Ohmiya, K. Hayashi, K. Sakka, Y. Kobayashi, S. Karita 禾口 Τ. Kimura 編輯，Uni Publishers Co.，iTokyo,第 15-23 頁中)。氧化還原酶在這里可使用適用于液體組合物中的氧化還原酶，例如過氧化物酶 或氧化物酶如漆酶。這里合適的過氧化物酶包括植物、細菌或真菌來源的那些。包括化學 或基因改性的突變體。合適的過氧化物酶的實例為衍生自鬼傘屬(Coprinus)菌株，例如灰 蓋鬼傘(C. cinereus)或長根鬼傘(C. macrorhizus)，或桿菌屬(Bacillus)菌株，如短小芽 胞桿菌(B.pumilus)的那些，特別是根據(jù)WO 91/05858的過氧化物酶。這里合適的漆酶包 括細菌或真菌來源的那些。包括化學或基因改性的突變體。合適的漆酶的實例為可由栓菌 屬(Trametes)菌株，例如長絨毛栓菌(T. villosa)或變色栓菌(T. versicolor)，或鬼傘屬 (Coprinus)菌株，例如灰蓋鬼傘(C. cinereus)，或毀絲霉屬(Myceliophthora)菌株，例如 嗜熱毀絲霉(M. thermophila)得到的那些。在本發(fā)明上下文中優(yōu)選的氧化還原酶為過氧化物酶(EC 1. 11. 1)、漆酶(EC 1. 10. 3. 2)和葡糖氧化酶(EC 1.1.3.4)。市售的氧化還原酶(EC 1._._._)的實例為
Gluzyme (可由Novozymes A/S得到的酶)。其它氧化還原酶可由其它供應(yīng)商得到。優(yōu)選的轉(zhuǎn)移酶為以下子類中任一種中的轉(zhuǎn)移酶a轉(zhuǎn)移單碳基團的轉(zhuǎn)移酶(EC 2. 1)；b轉(zhuǎn)移醛或酮殘基的轉(zhuǎn)移酶(EC 2. 2)；?；D(zhuǎn)移酶(EC 2. 3)；c羰基轉(zhuǎn)移酶(EC 2. 4)；d轉(zhuǎn)移不同于甲基的烷基或芳基的轉(zhuǎn)移酶(EC 2. 5)；和e轉(zhuǎn)移含氮基團的轉(zhuǎn)移酶(EC 2. 6)。在本發(fā)明上下文中，一類最優(yōu)選的轉(zhuǎn)移酶為谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶(蛋白質(zhì)-谷氨酰胺 Y -谷?；D(zhuǎn)移酶；EC 2. 3. 2. 13)。合適的谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶的其它實例描述于WO 96/06931 (Novo Nordisk A/S)中。在本發(fā)明上下文中優(yōu)選的水解酶為酯酶(EC 3. 1)，特別是羧酸酯水解酶(EC 3. 1. 1.-)，例如三酰甘油脂肪酶(EC 3. 1. 1. 3)；植酸酶(EC 3. 1. 3.-)，例如3-植酸酶(EC 3. 1. 3. 8)和6-植酸酶(EC 3. 1. 3. 26)；糖苷酶(EC 3. 2，其屬于這里表述為“糖酶”的一 組)，例如α -淀粉酶(EC 3. 2. 1. 1)、β -淀粉酶(EC3. 2. 1. 2)；肽酶(EC 3. 4.-.-，也稱作 蛋白酶)，和其它羰基水解酶。蛋白酶合適的蛋白酶包括動物、植物或微生物來源的那些。優(yōu)選微生物來源。 包括化學或基因改性的突變體。蛋白酶可為絲氨酸蛋白酶，優(yōu)選堿性微生物蛋白酶或胰 蛋白酶狀蛋白酶。堿性蛋白酶的實例為枯草溶菌素，尤其是衍生自桿菌屬的那些，例如枯 草溶菌素Novo、枯草溶菌素Carlsberg、枯草溶菌素309、枯草溶菌素147和枯草溶菌素168(W089/06279所述)。胰蛋白酶狀蛋白酶的實例為胰蛋白酶(例如豬或牛來源的)和WO 89/06270中所述鐮孢霉(Fusarium)蛋白酶。在本發(fā)明具體實施方案中，蛋白酶為絲氨酸蛋 白酶。絲氨酸蛋白酶或絲氨酸肽鏈內(nèi)切酶(新命名)為一類肽酶，其通過絲氨酸殘基在酶 的活性中心存在表征。絲氨酸蛋白酶絲氨酸蛋白酶為催化肽鍵水解，且其中在活性部位上存在主要是 絲氨酸殘基的酶(White，Handler 和 Smith，1973"Principles of Biochemistry”，第 5 版， McGraw-Hill Book Company, NY,第 271-272 頁)。細菌絲氨酸蛋白酶的分子量為20，000-45，000道爾頓。它們受二異丙基氟磷酸酯 抑制。它們水解簡單的末端酯且在活性方面類似于真核胰凝乳蛋白酶，也為一種絲氨酸蛋 白酶。更狹義地講，涵蓋子類的堿性蛋白酶反映出一些絲氨酸蛋白酶的高PH最佳值，例如 ρΗ9· 0-11. 0(為檢驗，見 Priest (1977) Bacteriological Rev. 41711-753)?？莶輻U菌酶(Subtilases):Siezen 等人，(1991)，Protein Eng.，4719-737 已推薦 了暫稱為枯草桿菌酶的絲氨酸蛋白酶的一個子類。它們通過同源性分析先前稱作枯草溶菌 素狀蛋白酶的絲氨酸蛋白酶多于40個氨基酸順序定義?？莶萑芫叵惹岸x為通過革蘭 氏陽性細菌或真菌制備的絲氨酸蛋白酶，根據(jù)Siezen等人，現(xiàn)在為枯草桿菌酶的一個子類。 已識別了多種枯草溶菌素，并已確定大量枯草溶菌素的氨基酸順序。這些包括大于6種來 自桿菌菌株的枯草溶菌素，即枯草溶菌素168、枯草溶菌素BPN'、枯草溶菌素Carlsberg、 枯草溶菌素 Y、枯草溶菌素 amyIosacchariticus 禾口 mesentericopeptidase (Kurihara 等人 (1972) J. Biol. Chem. 2475629-5631 ；Wells 等人(1983)Nucleic Acids Res. 117911-7925 ； Stahl 和 Ferrari(1984)J. Bacteriol.159811-819, Jacobs 等人(1985)Nucl. Acids Res. 138913-8926 ；Nedkov 等人(1985) Biol. Chem. Hoppe-Seyler 366421-430，Svendsen 等 人(1986)FEBS Lett. 1962沘_232)，來自放線菌目(actinomycetales)的一種枯草溶菌素， 來自普通高溫放線菌(Thermoactinomyces vulgaris)的嗜熱蛋白酶(Meloun等人(1985) FEBS Lett. 198195-200)，和一種真菌枯草溶菌素，來自白色念珠菌(Tritirachium album) 的蛋白酶 K(Jany 和 Mayer (1985)Biol. Chem. Hoppe-Seyler 366584-492)。為進一步參考， 以下轉(zhuǎn)載了 Siezen等的表I?？莶萑芫乇缓芎玫匚锢砗突瘜W地表征。除這些酶的主要結(jié)構(gòu)(氨基酸順序)的 知識外，已確定了枯草溶菌素的超過50高分辨率X射線結(jié)構(gòu)，其描繪了基質(zhì)的鍵合、過渡 態(tài)、產(chǎn)物、至少三種不同的蛋白酶抑制劑，并定義了天然變異的結(jié)構(gòu)結(jié)果(Kraut (1977) Arm. Rev. Biochem. 46331—358)?？莶輻U菌酶的一個子類，I-Sl包括“傳統(tǒng)的”枯草溶菌素，例如枯草溶菌素168、枯 草溶菌素BPN'、枯草溶菌素Carlsberg(ALCALASE ，Novozymes A/幻和枯草溶菌素 DY。Siezen等人(supra)識別了枯草桿菌酶的另一子類，I-S2。子類I-S2蛋 白酶被描述為高堿性枯草溶菌素，且包括酶如枯草溶菌素pb92(maxaCAL , Gist-Brocades NV)，枯草溶菌素 309 ( SAVINASE , Novozymes A/S)，枯草溶菌素 147 ( ESPERASE , Novozymes A/S)，和堿性彈性蛋白酶 YaB。由酶物理和化學性能的知識和關(guān)于枯草桿菌酶催化活性、基質(zhì)特異性、三級結(jié)構(gòu)等的相關(guān)信息(Wells 等人(1987)Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. Α. 84 ； 1219-1223 ； Wells 等人(1986)Phil. Trans. R. Soc. Lond. Α. 317415-423 ；Hwang 和 Warshel (1987) Biochem. 262669-2673 ；Rao 等人，(1987)Nature328551_554 來看，已出現(xiàn)枯草桿菌酶基因 的無規(guī)則和定點突變，覆蓋該領(lǐng)域的更近期出版物為Carter等人(1989)ftx)teinS 6M0-M8，其涉及 分解基質(zhì)中特異性目標順序的變體的設(shè)計(位置M和64) ；Graycar等人(199 Armals of the New York Academy of Sciences 67271-79，其討論了大量先前出版的結(jié)果；和 Takagi (1993) Int. J. Biochem. 25307-312，其也評論了先前的結(jié)果。市售蛋白酶(肽酶)的實例包括Kannase 、Everlase , Esperase ,
Alcalase 、Neutrase 、Durazym 、Savinase 、Ovozyme 、Pyrase 、
Pancreatic Trypsin NOVO (PTN)、Bio-Feed Pro 和 Clear-LeilS Pro (所有都可由 Novozymes A/S, Bagsvaerd，Denmark 得到)。其它優(yōu)選的蛋白酶包括 WO 01/58275 和 WO 01/58276所述的那些。其它市售的蛋白酶包括Ronozyme Pro, Maxatase , Maxacal 、 Maxapem 、Opticlean 、Propease 、Purafect ,和 Purrfect 0x (可由
Genencor International Inc., Gist-Brocades, BASF 或DSM Nutritional Products得 到)。市售蛋白酶的實例包括Lipex Lipoprime 、Lipopan Lipolase 、 Lipolase 、Ultra、Lipozyme 、Palatase 、Resinase , Novozym 435 禾口 Lecitase (所有可由 Novozymes A/s 得到)。脂肪酶合適的脂肪酶包括細菌或真菌來源的那些。包括化學或基因改性的突變 體。有用的脂肪酶的實例包括柔毛腐質(zhì)霉(Humicola lanugi-nosa)脂肪酶，例如 如EP 258 068和EP 305 216所述，米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)脂肪酶，例如如EP 238 023所述，假絲酵母菌屬(Candida)脂肪酶，例如南極假絲酵母(C. antarctica)脂肪 酶，例如EP 214 761所述的南極假絲酵母脂肪酶A或B，假單胞菌屬(I^eudomonas)脂肪 酶，例如類產(chǎn)堿假單胞菌(P.pseudoalcaligenes)和產(chǎn)堿假單胞菌(P. alcali-genes)脂 肪酶，例如如EP 218272所述，洋蔥假單胞菌(P. c印acia)脂肪酶，例如如EP 331 376所 述，斯氏假單胞菌(P. stutzeri)脂肪酶，例如如BP 1，372，034所公開的，熒光假單胞菌 (P. fluorescens)脂肪酶，桿菌屬(Bacillus)脂肪酶，例如枯草桿菌(B. subtilis)脂肪酶 (Dar-tois 等人，(1993) ,Biochemica et Biophysica acta 1131，253-260)，嗜熱脂肪芽孢 桿菌(B. stearothermophiIus)脂肪酶(JP 64/744992)和短小芽孢桿菌(B. pumilus)脂肪 酶(W0 91/16422)。此外，可使用大量克隆脂肪酶，包括私-maguchi等人，(1991)，Genel03，61-67)所 述卡門培爾干酪青霉(Penicillium camenbertii)脂肪酶，Gchimada，Y.等人，(1989)， J. Biochem. 106,383-388)所述白地霉(Geotricum can-didum)脂肪酶，和各種根霉屬 (Rhizopus)脂肪酶，例如戴爾根霉(R. delemar)脂肪酶(Hass, M. J 等人，(1991)，Gene109，117-113)，紅泡刺藤(R. niveus)脂肪酶(Kugimiya 等人，(1992)，Biosci. Biotech. Bio-chem. 56，716-719)和米根霉(R. oryzae)脂肪酶。也可使用其它類型的脂肪分解酶如角質(zhì)酶，例如如WO 88/09367所述衍生自門 多薩假單胞菌(Pseudomonas mendocina)的角質(zhì)酶，或衍生自豌豆根腐病菌(Fusarium solani pisi)的角質(zhì)酶(例如如WO 90/09446所述)。其它市售的脂肪酶包括Lumafast (來自Genencor International Inc.的門 多薩假單胞菌(Pseudomonas mendocina)脂肪酶)；Lipomax (來自 Gist-Brocades/ Genencor Int. Inc.的類產(chǎn)堿假單胞菌(P. pseudoalcaligenes)脂肪酶；和來自 Solvay 酶的桿菌屬脂肪酶。其它脂肪酶可由其它供應(yīng)商得到，例如Lipase P “Amano“ (Amano Pharmaceutical Co. Ltd.)0淀粉酶合適的淀粉酶(α和/或β)包括細菌或真菌來源的那些。包括化學 或基因改性的突變體。淀粉酶例如包括由地衣芽孢桿菌(B. Iicheniformis)的特殊菌株 得到的α-淀粉酶，其更詳細地描述于英國專利說明書號1，296，839中。市售的淀粉酶為 Duramyl , Termamy 1 ,Fungamy 1 和 BAN (可由 Novozymes A/S 得到)以及 Rapidase 和 Maxamyl P (可由 Gist-Brocades 得到)。纖維素酶合適的纖維素酶包括細菌或真菌來源的那些。包括化學或基因改性 的突變體。合適的纖維素酶公開于US 4，435，307中，其公開了由特異腐質(zhì)霉(Humicola insolens)產(chǎn)生的真菌纖維素酶。尤其合適的纖維素酶為具有顏色護理優(yōu)點的纖維素酶。 這種纖維素酶的實例為歐洲專利申請?zhí)朞 495 257中描述的纖維素酶。市售的植酸酶的實例包括Bio-Feed Phytase (Novozymes)、Ronozyme P(DSM Nutritional Products)、Natuphos (BASF)、Finase (AB Enzymes)，和 Phyzyme 產(chǎn)品系列 (Danisco)。其它優(yōu)選的植酸酶包括WO 98/28408、WO 00/43503和WO 03/066847所述那 些。在本發(fā)明上下文中，術(shù)語“糖酶”不僅用于表示能分解尤其是5和6元環(huán)結(jié)構(gòu)的碳 水化合物鏈(例如淀粉或纖維素)的酶(即糖苷酶，EC 3. 2)，而且表示能使碳水化合物，例 如6元環(huán)結(jié)構(gòu)如D-葡萄糖異構(gòu)成5元環(huán)結(jié)構(gòu)如D-果糖的酶。相關(guān)糖酶包括如下(括號中為EC號)α-淀粉酶(EC 3. 2. 1. 1)、β-淀粉酶(EC 3. 2. 1. 2)、葡聚糖 1，4_ α -葡糖苷酶 (EC3. 2. 1. 3)、內(nèi)切-1，4-β-葡聚糖酶(纖維素酶，EC 3.2. 1. 4)、內(nèi)切-1，3 (4) - β -葡聚 糖酶(EC 3. 2. 1.6)、內(nèi)切-1，4-β-木聚糖酶(EC 3. 2. 1. 8)、葡聚糖酶(EC3. 2. 1. 11)、幾 丁質(zhì)酶(EC 3. 2. 1. 14)、聚半乳糖醛酸酶(EC 3. 2. 1. 15)、溶菌酶(EC 3. 2. 1. 17), β -葡 糖苷酶(EC 3. 2. 1. 21)、α-半乳糖苷酶(EC 3. 2. 1. 22)、β -半乳糖苷酶(EC 3. 2. 1. 23)、 淀粉-1，6-葡糖苷酶(EC 3.2. 1.33)、木聚糖1，4-β-木糖苷酶(EC 3. 2. 1. 37)、葡聚糖內(nèi) 切-1，3-β-D-葡糖苷酶(EC 3.2. 1. 39)、α-糊精內(nèi)切-1，6-α-葡糖苷酶(EC3. 2. 1.41)、 蔗糖α-葡糖苷酶(EC 3.2. 1.48)、葡聚糖內(nèi)切-1，3-α-葡糖苷酶(EC 3.2. 1.59)、葡聚 糖1，4- β -葡糖苷酶(EC3. 2. 1. 74)、葡聚糖內(nèi)切-1，6- β -葡糖苷酶(EC 3.2.1. 75)、半乳 聚糖酶(EC3.2. 1.89)、聚阿拉伯糖內(nèi)切-1，5-0-1^-阿拉伯糖酶(EC 3.2. 1.99)、乳糖酶 (EC3. 2. 1. 108)、殼聚糖酶(EC 3. 2. 1. 132)和木糖異構(gòu)酶(EC 5. 3. 1. 5)。
市售的糖酶的實例包括 Alpha-Gal 、Bio-Feed Alpha、Bio-Feed Beta、Bio-Feed plus、Bio-Feed wheat、Bio-Feed z、Novozyme 188、 Carezyme 、Celluclast 、Cellusoft 、Celluzyme 、Ceremyl 、 Citrozym 、Denimax 、Dezyme 、Dextrozyme 、Duramyl 、 Energex 、 Finizym 、 Fungamyl 、 Gamanase 、 Glucanex 、 Lactozym 、Liquezyme 、Maltogenase 、Natalase 、Pentopan 、 Pectinex 、Promozyme 、Pulpzyme 、Novamyl 、Termamyl 、 AMG (Amyloglucosidase Novo)、Maltogenase 、 Sweetzyme 和Aquazym (都可由Novozymes A/s得到)。其它糖酶可由其它供應(yīng)商得 到，例如 Roxazyme 禾日 Ronozyme 產(chǎn)品系(DSM Nutritional Products)、 Avizyme 、Porzyme 禾口 Grindazyme 產(chǎn)品系列(Danisco、Finnfeeds),禾口 Natugrain (BASF)、pUrastar 禾口Purastar OxAm (Genencor)。其它市售的酶包括Maimaway 、Pectaway 、Stainzyme 和 Renozyme 本發(fā)明組合物優(yōu)選包含蛋白酶(EC 3. 4. -. _)，特別是絲氨酸蛋白酶。在具體實施 方案中，組合物包含兩種或更多種酶，其中第一種酶為蛋白酶，第二種酶選自葡糖苷酶(EC 3. 2.-.-)，特別是淀粉酶(EC 3. 2. 1. 1和3. 2. 1. 2)和纖維素酶(3. 2. 1. 4)，羧酸酯水解酶 (E. C. 3. 1.-.-)如脂肪酶(EC 3. 1. 1.-)，特別是三酰甘油脂肪酶(EC 3. 1. 1. 3)，裂合酶和 氧化還原酶。在更具體的實施方案中，第二種酶為脂肪酶，特別是三酰甘油脂肪酶。含酶粒子包含至少一種如本文所定義的聚合物P。聚合物P具有帶有羧基(C00H) 且包含衍生自單體B的疏水性重復單元的C-C骨架，其中單體B在25°C下的水溶性為至多 30g/l，優(yōu)選至多10g/l，特別是至多5g/l，尤其是至多l(xiāng)g/Ι。優(yōu)選，聚合物P為存在于組合 物中或含酶粒子中的唯一合成聚合物，或占存在于組合物和因此的含酶粒子中的合成聚合 物總重量的至少90重量％。聚合物P中的羧基可直接，即借助單鍵，或借助二價基團如C1-C4亞烷基結(jié)構(gòu)部分 (例如CH2或CH2-CH2)或式-C (0) O-Alk-的結(jié)構(gòu)部分連接在聚合物骨架上，其中Alk為線性 或支化C2-C4亞烷基如1，2-亞乙基、1，3-亞丙基、1，4-亞丁基、2-甲基丙烷-1，2- 二基，且 其中羰基連接在聚合物骨架上。優(yōu)選，羧基直接連接在C-C骨架上。羧基可以以酸性形式(C00H)或以中和形式，即以陰離子形式存在。聚合物P則包 含用于聚合物電中和的抗衡離子。合適的抗衡離子包括堿金屬離子，例如鈉或鉀離子，NH4+ 和有機銨離子如單_、二 _、三-和四烷基銨，其中各個烷基結(jié)構(gòu)部分可具有1-40個碳原子， 優(yōu)選總計1-40個碳原子，且其中烷基結(jié)構(gòu)部分可為未被取代或由羥基或NRR'基團取代 的，其中R和R'各自獨立地選自氫或C1-C4烷基，且其中具有1-40個碳原子的烷基結(jié)構(gòu)部 分可間隔有1個或多個，即1、2、3、4、5或6個不相鄰的氧原子。羧基量的選擇通常使得酸值，即可中和羧基的總數(shù)為10-700mgK0H/g聚合物P，特別是 30-600mg KOH/g 聚合物 P 或 50_500mg KOH/g 聚合物 P。技術(shù)人員清楚聚合物P的C-C骨架通常由C-C重復形成，其對應(yīng)于具有可聚合C = C雙鍵的聚合單體。形成聚合物P的單體一聚合，單體的可聚合C = C雙鍵就形成聚合物P 的C-C骨架。因此，聚合物P中的重復單元通常對應(yīng)于制備聚合物P時聚合的單體。因此， 本發(fā)明中所用術(shù)語“重復單元”、“聚合單體的單元”、“衍生自單體的單元”和“衍生自(聚 合)單體的重復單元”為同義詞。羧基通常為形成聚合物P ( 一部分)C-C骨架的聚合單體A的一部分，即羧基為聚 合物P的C-C骨架那些重復單元的一部分，其衍生自單體A。這些單體A通常為單烯屬不飽 和的且?guī)в兄辽僖粋€羧基。合適的單體A包括具有3-8個碳原子的單烯屬不飽和單羧酸， 例如丙烯酸、甲基丙烯酸、巴豆酸、2-乙烯基乙酸、丙烯酸或甲基丙烯酸與羥基乙酸的酯。合 適的單體A還包括具有4-8個碳原子的單烯屬不飽和二羧酸，例如富馬酸、馬來酸、衣康酸 和檸康酸。單體A還可包括上述單體的混合物。技術(shù)人員容易地理解在聚合物P的制備中，代替上述羧酸單體A或與其組合，可使 用相應(yīng)的酐，例如丙烯酸酐、甲基丙烯酸酐、馬來酸酐或衣康酸酐。在這種情況下，使主要得 到的聚合物經(jīng)受水解，以將酐基團轉(zhuǎn)化成羧基。聚合物P中單體A的量通常為2-80重量％，優(yōu)選3-70重量％，特別是5_60重 量％，其基于聚合物P中重復單元的總重量，這對應(yīng)于聚合物P的總重量。聚合物P的C-C骨架還包含衍生自單體B的疏水性重復單元，即聚合單體B形成 聚合物P的C-C骨架重復單元的另一部分。與羧基組合，衍生自單體B的重復單元賦予聚 合物P兩親性。疏水性重復單元可為通常具有2-200個，特別是2-100個，更優(yōu)選2_50個碳原子， 包括形成C-C骨架的兩個碳原子的烴重復單元。疏水性重復單元也可為包含至少一個優(yōu)選選自0和N的雜原子(例如1、2、3或4 個雜原子)和至少一個具有至少一個，特別是至少兩個碳原子，例如1-200個，特別是2-100 個，更優(yōu)選2-50個碳原子的不可聚合烴基的重復單元。在這種情況下，烴結(jié)構(gòu)部分借助雜 原子結(jié)構(gòu)部分如0、N、C (0) 0 (=羧基)、C (0) N(羧酰胺)或C (0) NC (0)(環(huán)狀或無環(huán)羧酰胺) 結(jié)合在聚合物的C-C骨架上。不可聚合烴基可為具有1-200個碳原子，優(yōu)選2-100個碳原 子，特別是2-50個碳的線性或支化烷基，具有5-10個碳原子且任選由1、2、3個具有1_20 個碳原子的烷基取代的環(huán)烷基，和任選由1、2、3個具有1-20個碳原子的烷基取代的芳基如 苯基或萘基。如本發(fā)明所用術(shù)語Cn-Cm表示相應(yīng)基團中的碳原子數(shù)。如本發(fā)明所用，術(shù)語“烷基”指線性或支化烷基，包括C1-C2tl烷基，例如甲基、乙 基、丙基、異丙基、正丁基、2-丁基、叔丁基、正己基、正庚基、正辛基、1，1，3，3-四甲基丁基、 2-乙基己基、壬基、正癸基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、 十八烷基、二十烷基、二十二烷基、二十四烷基、三十烷基等。聚合物P中疏水性重復單元的量基于聚合物P中重復單元的總重量(對應(yīng)于聚合 物P的總重量)為至少20重量％，優(yōu)選至少30重量％，特別是至少40重量％。聚合物P 中疏水性重復單元的量通常為聚合物P總重量的20-98重量％，優(yōu)選30-97重量％，特別是 40-95 重量 ％。
疏水性重復單元衍生自聚合疏水性單體B。疏水性單體B具有降低的水溶性，在 25°C下的水溶性通常不超過30g/l。特別是，疏水性單體B在25°C下的水溶性不超過IOg/ 1，特別是5g/l，尤其是lg/Ι。疏水性單體B可實際上不溶于水(即溶解度在檢測極限以 下)或在25°C下水溶性為至少10_5g/l。這些疏水性單體B通常選自具有至少兩個碳原子的單烯屬不飽和烴單體和單烯 屬不飽和非離子單體，其中所述單烯屬不飽和非離子單體具有可聚合C = C雙鍵、至少一個 優(yōu)選選自0和N的雜原子(例如1、2、3或4個雜原子)和至少一個如上定義具有至少一個， 特別是至少兩個碳原子，例如1-200個碳原子，特別是2-100個碳原子或3-100個碳原子， 更優(yōu)選2-50個碳原子或3-50個碳原子的不可聚合烴基。疏水性單體還可選自具有羧基和 至少一個如上定義具有至少兩個，特別是至少4個碳原子，例如2-100個，特別是4-100個， 更優(yōu)選4-50個碳原子的不可聚合烴基的單烯屬不飽和單體。當然，單體B還可選自至少一 種烴單體與至少一種其它單體的混合物，其中所述其它單體選自上述具有至少一個雜原子 的單烯屬不飽和非離子單體和上述具有羧基和至少一個不可聚合烴基的單烯屬不飽和單 體。合適的烴單體包含一個形成C-C骨架一部分的可聚合C-C雙鍵，和任選一個或多 個，例如一個或兩個其它烴基如優(yōu)選具有1-98個碳原子，特別是1-48個碳原子的線性或支
化烷基。合適的烴單體包括烯烴，特別是具有優(yōu)選2-100個碳原子，特別是2-50個碳原子 的α-烯烴，實例包括乙烯、丙烯、1-丁烯、2-丁烯、異丁烯、1-戊烯、1-己烯、1-庚烯、1-辛 烯、二異丁烯O-甲基-4，4-二甲基-1-戊烯)、1_壬烯、1-癸烯、1-十一碳烯、1-十二碳 烯、1-十四碳烯、1-十六碳烯、1-十八碳烯、1-二十碳烯、1-二十二碳烯、1-二十四碳烯、 1- 二十六碳烯、1- 二十八碳烯及其混合物，特別是C12 α -烯烴、C16 α -烯烴、C18 α -烯烴、 C2ch24 α -烯烴和C18_24 α -烯烴的工業(yè)混合物以及具有可聚合雙鍵，特別是乙烯基或亞乙烯 基雙鍵WC4-Cltl烯烴的低聚物，低聚物的實例包括分子量(數(shù)均)為140-2000道爾頓，特 別是的低聚丁烯和低聚異丁烯。合適的烴單體包括乙烯基芳族單體如苯乙烯、α-甲基苯 乙烯，和取代的苯乙烯如2-甲基苯乙烯、4-甲基苯乙烯、2_(正丁基)苯乙烯、4_(正丁基) 苯乙烯、2-(叔丁基)苯乙烯、4-(叔丁基)苯乙烯、2-(正癸基)苯乙烯和2-(正癸基)苯 乙火布ο合適的具有至少一個優(yōu)選選自0和N的雜原子，和至少一個具有至少兩個，特別是 至少兩個碳原子的不可聚合烴基的非離子單烯屬不飽和單體包括-C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯，特別是丙烯酸或甲基丙烯酸的酯，例如(甲基)丙烯 酸乙酯、(甲基)丙烯酸正丙酯、(甲基)丙烯酸異丙酯、(甲基)丙烯酸正丁酯、(甲基)丙 烯酸仲丁酯、(甲基)丙烯酸叔丁酯、(甲基)丙烯酸正己酯、(甲基)丙烯酸正庚酯、(甲 基)丙烯酸正辛酯、(甲基)丙烯酸1，1，3，3-四甲基丁酯、(甲基)丙烯酸2-乙基己酯、 (甲基)丙烯酸正壬酯、(甲基)丙烯酸正癸酯、(甲基)丙烯酸正十一烷酯、(甲基)丙烯 酸十三烷酯、(甲基)丙烯酸肉豆蔻酯、(甲基)丙烯酸十五烷酯、(甲基)丙烯酸棕櫚酯、 (甲基)丙烯酸十七烷酯、(甲基)丙烯酸十九烷酯、(甲基)丙烯酸二十烷酯、(甲基)丙 烯酸山崳酯、(甲基)丙烯酸二十四烷酯、(甲基)丙烯酸二十六烷酯、(甲基)丙烯酸三十 烷酯、(甲基)丙烯酸硬脂酯、(甲基)丙烯酸月桂酯；
-C4-C8 二羧酸雙-C1-C5tl烷基酯，特別是富馬酸、馬來酸或衣康酸的酯，例如馬來酸 二甲酯、富馬酸二甲酯、馬來酸二丁酯、富馬酸二丁酯、馬來酸二己酯、富馬酸二己酯、馬來 酸二辛酯和富馬酸二辛酯，-C3-C8單羧酸的N-C2-C5tl烷基酰胺，特別是丙烯酸或甲基丙烯酸的N-烷基酰胺，例 如N-乙基(甲基)丙烯酰胺、N-正丙基(甲基)丙烯酰胺、N-異丙基(甲基)丙烯酰胺、 N-正丁基(甲基)丙烯酰胺、N-仲丁基(甲基)丙烯酰胺、N-叔丁基(甲基)丙烯酰胺、 N-正己基(甲基)丙烯酰胺、N-正庚基(甲基)丙烯酰胺、N-正辛基(甲基)丙烯酰胺、 N-l，l，3，3-四甲基丁基(甲基)丙烯酰胺、N-2-乙基己基(甲基)丙烯酰胺、N-正壬基 (甲基)丙烯酰胺、N-正癸基(甲基)丙烯酰胺、N-正十一烷基(甲基)丙烯酰胺、N-十三 烷基(甲基)丙烯酰胺、N-肉豆蔻基(甲基)丙烯酰胺、N-十五烷基(甲基)丙烯酰胺、 N-棕櫚基(甲基)丙烯酰胺、N-十七烷基(甲基)丙烯酰胺、N-十九烷基(甲基)丙烯酰 胺、N-二十烷基(甲基)丙烯酰胺、N-山?；?甲基)丙烯酰胺、N-二十四烷基(甲基)丙 烯酰胺、N-二十六烷基(甲基)丙烯酰胺、N-三十烷基(甲基)丙烯酰胺、N-硬脂基(甲 基)丙烯酰胺、N-月桂基(甲基)丙烯酰胺；-C3-C8單羧酸的N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺，特別是丙烯酸或甲基丙烯酸的 N-烷基-N-烷基酰胺，例如N-甲基-N-乙基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正丙基(甲 基)丙烯酰胺、N-甲基-N-異丙基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正丁基(甲基)丙烯 酰胺、N-甲基-N-仲丁基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-叔丁基(甲基)丙烯酰胺、N-甲 基-N-正己基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正庚基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正辛 基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-1，1，3，3-四甲基丁基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-2-乙 基己基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正壬基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正癸基(甲 基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正十一烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-十三烷基(甲基) 丙烯酰胺、N-甲基-N-肉豆蔻基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-十五烷基(甲基)丙烯酰 胺、N-甲基-N-棕櫚基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-十七烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲 基-N-十九烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N- 二十烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-山 ?；?甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-二十四烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-二十六烷 基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-三十烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-硬脂基(甲基) 丙烯酰胺、N-甲基-N-月桂基(甲基)丙烯酰胺；-C2-C5tl鏈烷酸乙烯基酯，例如乙酸乙烯酯、丙酸乙烯酯、丁酸乙烯酯、新戊酸乙烯 酯、月桂酸乙烯酯、肉豆蔻酸乙烯酯、硬脂酸乙烯酯和叔碳酸乙烯酯；-乙烯基-C1-C4tl烷基醚，例如甲基乙烯基醚、乙基乙烯基醚、丙基乙烯基醚、異丙 基乙烯基醚、正丁基乙烯基醚、2-丁基乙烯基醚、叔丁基乙烯基醚、正己基乙烯基醚、正庚 基乙烯基醚、正辛基乙烯基醚、1，1，3，3-四甲基丁基乙烯基醚、2-乙基己基乙烯基醚、壬基 乙烯基醚、正癸基十二烷基乙烯基醚、十三烷基乙烯基醚、十四烷基乙烯基醚、十五烷基乙 烯基醚、十六烷基乙烯基醚、十七烷基乙烯基醚、十八烷基乙烯基醚、二十烷基乙烯基醚、 二十二烷基乙烯基醚、二十四烷基乙烯基醚、三十烷基乙烯基醚；-馬來酸N-C1-C4tl烷基酰亞胺，例如N-甲基馬來酰亞胺、N-乙基馬來酰亞胺、N-丙 基馬來酰亞胺、N-異丙基馬來酰亞胺、N-正丁基馬來酰亞胺、N-2- 丁基馬來酰亞胺、N-叔 丁基馬來酰亞胺、N-正己基馬來酰亞胺、N-正庚基馬來酰亞胺、N-正辛基馬來酰亞胺、N-1，1，3，3_四甲基丁基馬來酰亞胺、N-2-乙基己基馬來酰亞胺、N-壬基馬來酰亞胺、N-正癸基 馬來酰亞胺、N-十二烷基馬來酰亞胺、N-十三烷基馬來酰亞胺、N-十四烷基馬來酰亞胺、 N-十五烷基馬來酰亞胺、N-十六烷基馬來酰亞胺、N-十七烷基馬來酰亞胺、N-十八烷基馬 來酰亞胺、N- 二十烷基馬來酰亞胺、N- 二十二烷基馬來酰亞胺、N- 二十四烷基馬來酰亞胺、 N-三十烷基馬來酰亞胺；及其混合物。合適的具有羧基和至少一個具有至少兩個，特別是至少4個碳原子，例如2-200 個，特別是4-100個，更優(yōu)選4-50個碳原子的不可聚合烴基的單烯屬不飽和單體例如包括 單烯屬不飽和C4-C8 二羧酸的單酯，例如馬來酸或富馬酸與鏈烷醇的單酯，和單烯屬不飽和 C4-C8 二羧酸單羧酰胺，例如馬來酸或富馬酸與烷基胺或二烷基胺的單羧酰胺。實例特別包 括馬來酸或富馬酸與C2-C4tl鏈烷醇的單酯，例如馬來酸單-正丁酯、馬來酸單-2- 丁酯、馬 來酸單-正己酯、馬來酸單-正庚酯、馬來酸單-正辛酯、馬來酸單-1，1，3，3-四甲基丁酯、 馬來酸單-2-乙基己酯、馬來酸單-壬酯、馬來酸單-正癸酯、馬來酸單-十二烷酯、馬來酸 單-十三烷酯、馬來酸單-十四烷酯、馬來酸單-十五烷酯、馬來酸單-十六烷酯、馬來酸 單-十七烷酯、馬來酸單-十八烷酯、馬來酸單-二十烷酯、馬來酸單-二十二烷酯、富馬酸 單-正丁酯、富馬酸單-2-丁酯、富馬酸單-正己酯、富馬酸單-正庚酯、富馬酸單-正辛酯、 富馬酸單-1，1,3,3-四甲基丁酯、富馬酸單-2-乙基己酯、富馬酸單-壬酯、富馬酸單-正 癸酯、富馬酸單-十二烷酯、富馬酸單-十三烷酯、富馬酸單-十四烷酯、富馬酸單-十五烷 酯、富馬酸單-十六烷酯、富馬酸單-十七烷酯、富馬酸單-十八烷酯、富馬酸單-二十烷酯 和富馬酸單-二十二烷酯，以及馬來酸或富馬酸與C2-C40烷基胺或二 -C1-C4tl烷基胺的單羧 酰胺。聚合物P還可含其它不同于上述單體A和B的單體C的聚合單元。合適的其它單 體C包括優(yōu)選為中性且優(yōu)選在25°C下水溶性通常大于50g/l的單烯屬不飽和單體。合適的 單體C包括-丙烯腈、甲基丙烯腈、甲基丙烯酸酯，-單烯屬不飽和單-和二-C3-C8羧酸羥基-C2-C4烷基酯，特別是丙烯酸和甲基丙烯 酸羥基-C2-C4烷基酯，例如丙烯酸2-羥基乙酯、丙烯酸3-羥基丙酯、丙烯酸2-羥基丙酯、 丙烯酸4-羥基丁酯、甲基丙烯酸2-羥基乙酯、甲基丙烯酸3-羥基丙酯、甲基丙烯酸2-羥 基丙酯和甲基丙烯酸4-羥基丁酯；-N-乙烯基內(nèi)酰胺，特別是具有5-8個環(huán)原子的那些，例如N-乙烯基吡咯烷酮、 N-乙烯基哌啶酮、N-乙烯基嗎啉酮和N-乙烯基己內(nèi)酰胺，-具有1-6個，特別是1-4個碳原子的脂族羧酸的N-乙烯基酰胺，例如N-乙烯基 甲酰胺、N-乙烯基乙酰胺和N-乙烯基丙酰胺；-單烯屬不飽和C3-C8單羧酸的酰胺、羥基-C1-C4烷基酰胺和C1-C4烷氧基-C1-C4 烷基酰胺，例如丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺、N-(甲氧基甲基)(甲基)丙烯酰胺、N-(乙氧基甲 基)(甲基)丙烯酰胺、N-甲氧基乙基)(甲基)丙烯酰胺、N-乙氧基乙基)(甲基) 丙烯酰胺等；-具有聚醚基團，特別是具有聚-C2-C4氧化烯基團，尤其是具有聚氧乙烯基團的單 烯屬不飽和單體，其中聚醚基團優(yōu)選分子量(數(shù)均)為100-5000。這些特別包括聚-C2-C4 亞烷基二醇的乙烯基和烯丙基醚，和單烯屬不飽和C3-C8單-和C4-C8 二羧酸與聚-C2-C4亞烷基二醇的單酯和二酯，特別是這種聚-C2-C4亞烷基二醇的丙烯酸和甲基丙烯酸單酯。單體C的聚合單元的量基于聚合物P的重量通常不超過20重量％，特別是不超過
10重量％。在本發(fā)明的優(yōu)選實施方案中，聚合物P為包含至少一種如上定義具有一個或多個 羧基的單烯屬不飽和單體A的聚合單元(即重復單元)A和至少一種如上定義疏水性單體B 的聚合單元(即重復單元)B的共聚物。在優(yōu)選的聚合物P中，聚合單元A與聚合單元B的摩 爾比，和因此聚合單體A與聚合單體B的摩爾比通常為1 20-10 1，優(yōu)選1 20-5 1， 特別是1 15-5 1，尤其是1 10-2 1。在優(yōu)選的聚合物P中，聚合單元A與聚合單 元B的重量比，和因此聚合單體A與聚合單體B的重量比通常為2 98-80 20，特別是 3 97-70 30，更優(yōu)選5 95-60 40。優(yōu)選聚合單元A和聚合單元B的總量，和因此聚 合單體A和聚合單體B的總量構(gòu)成聚合物P的至少80重量％，特別是至少90重量％，更優(yōu) 選至少95重量％。特別優(yōu)選聚合單體A和聚合單體B —起構(gòu)成聚合物P的至少99重量％ 或它們?yōu)樾纬删酆衔颬的唯一單體。尤其優(yōu)選聚合物P基本上由重復單元A和B組成。聚合單元A通常選自衍生自單烯屬不飽和C3-C8單羧酸如丙烯酸、甲基丙烯酸、巴 豆酸、2-乙烯基乙酸、丙烯酸或甲基丙烯酸與羥基乙酸的酯和單烯屬不飽和C3-C8 二羧酸如 富馬酸、馬來酸、衣康酸和檸康酸的重復單元。優(yōu)選的單體A選自丙烯酸、甲基丙烯酸、馬來 酸、衣康酸和巴豆酸，特別選自丙烯酸、甲基丙烯酸和馬來酸。技術(shù)人員容易地理解在聚合 物P的制備中，代替上述羧酸單體A或與其組合，可使用相應(yīng)的酐如丙烯酸酐、甲基丙烯酸 酐、馬來酸酐或衣康酸酐。在這種情況下，使主要得到的聚合物經(jīng)受水解，以將酐基團轉(zhuǎn)化 成羧基。單體B如上定義。優(yōu)選的單體B選自C2-C5tl烯烴、乙烯基芳族化合物、C3-C8單羧 酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸雙-C1-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、C3-C8單羧 酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl鏈烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基醚、馬來 酸N-C1-C4tl烷基酰亞胺及其混合物。特別是，單體B選自C2-C5tl烯烴、乙烯基芳族化合物、 C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl鏈烷酸乙烯基酯。優(yōu)選單體B包含至少一種C2-C5tl烯烴，任選與至少一種選自乙烯基芳族化合物、 C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸雙-C1-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、 C3-C8單羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C1-C50鏈烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基 醚、馬來酸N-C1-C4tl烷基酰亞胺及其混合物的其它單體B組合，特別是至少一種C2-C5tl烯烴， 任選與至少一種選自乙烯基芳族化合物和C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯的其它單體B組合。 在其中單體B包含至少一種C2-C5tl烯烴的聚合物P中，C2-C50烯烴的量優(yōu)選為聚合單元(或 單體)B總量的至少50摩爾％，特別是至少70摩爾％或至少80摩爾％。如果存在其它單 體B，則它們通常不超過聚合單元(或單體)B總量的50摩爾％，特別是30摩爾％或20摩 爾％。在混合物中，不同于C2-C5tl烯烴的烯屬不飽和單體B的量例如為聚合單元(或單體) B總量的0. 5-50摩爾％，特別是1-30摩爾％，尤其是2-20摩爾％。優(yōu)選一種或多種C2-C5tl 烯烴為唯一的單體B或總計為聚合單元(或單體)B總量的至少99摩爾％。在本發(fā)明第一個特別優(yōu)選的實施方案中，聚合單元A(和因此單體A)包含聚合馬 來酸的單元。在該特別優(yōu)選的實施方案中，馬來酸的聚合單元的摩爾量總計為單元(或單 體)A總量的至少50摩爾％，特別是至少70摩爾％，尤其是至少80摩爾％。單元(或單體)A的其余部分如果存在的話，通常衍生自上述烯屬不飽和單羧酸如丙烯酸或甲基丙烯酸。特 別是，聚合單元A為聚合馬來酸或馬來酸與至少一種優(yōu)選選自丙烯酸和甲基丙烯酸及其混 合物的烯屬不飽和單羧酸的混合物的單元，其中馬來酸的量為聚合單元(或單體)A總量的 至少50摩爾％，特別是至少70摩爾％或至少80摩爾％。在混合物中，烯屬不飽和單羧酸的 量例如為聚合單元(或單體)A總量的0. 5-50摩爾％，特別是1-30摩爾％，尤其是2-20摩 爾％。優(yōu)選馬來酸為唯一的單體A或總計為聚合單元(或單體)A總量的至少99摩爾％。在該特別優(yōu)選的第一實施方案中，單體B優(yōu)選選自C2-C5tl烯烴、乙烯基芳族化合 物、C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸雙-C1-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰 胺、C3-C8單羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl鏈烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl 烷基醚、馬來酸N-C1-C4tl烷基酰亞胺及其混合物。特別是，單體B選自C2-C5tl烯烴、乙烯基芳 族化合物、C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl鏈烷酸乙烯 基酯。在第一特別優(yōu)選實施方案的聚合物P中，優(yōu)選下述那些聚合物P，其作為單體B包 含至少一種C5-C5tl烯烴，任選與至少一種選自C2-C4烯烴、乙烯基芳族化合物、C3-C8單羧酸 C2-C50烷基酯、C4-C8 二羧酸雙-C1-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、C3-C8單羧 酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C5tl鏈烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基醚、馬來酸 N-C1-C40烷基酰亞胺及其混合物的其它單體B組合，更優(yōu)選至少一種C5-C5tl烯烴，任選與至 少一種選自C2-C4烯烴、乙烯基芳族化合物和C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯的其它單體B組合。 在該特別優(yōu)選的第一實施方案的聚合物P中，其中單體B包含至少一種C2-C5tl烯烴，C2-C50 烯烴的量優(yōu)選為聚合單元(或單體)B總量的至少50摩爾％，特別是至少70摩爾％或至 少80摩爾％。如果存在其它單體B，則它們通常不超過聚合單元(或單體)B總量的50摩 爾％，特別是30摩爾％或20摩爾％。在混合物中，不同于C2-C5tl烯烴的烯屬不飽和單體B 的量例如為聚合單元(或單體)B總量的0. 5-50摩爾％，特別是1-30摩爾％，尤其是2-20 摩爾％。優(yōu)選一種或多種C2-C5tl烯烴為唯一的單體B或總計為聚合單元(或單體)B總量 的至少99摩爾％。在第一特別優(yōu)選實施方案的聚合物P中，聚合單體A(即馬來酸或其與一種或多種 上述烯屬不飽和單羧酸的混合物)與聚合單體B的摩爾比優(yōu)選為1 10-10 1，特別是 1:5-5: 1。在該實施方案的優(yōu)選聚合物P中，聚合單元A與聚合單元B的重量比，和因 此聚合單體A與聚合單體B的重量比通常為10 90-80 20，特別是15 85-70 30， 更優(yōu)選20 80-60 40。優(yōu)選聚合單元A和聚合單元B的總量，和因此聚合單體A和聚合 單體B的總量構(gòu)成該第一特別優(yōu)選實施方案的聚合物P的至少80重量％，特別是至少90 重量％，更優(yōu)選至少95重量％。在本發(fā)明第二特別優(yōu)選的實施方案中，聚合單元A(和因此單體A)包含聚合單烯 屬不飽和C3-C8單羧酸的單元，特別是丙烯酸或甲基丙烯酸的單元，任選與微量聚合單烯屬 不飽和C4-C8 二羧酸的單元組合。在該特別優(yōu)選的實施方案中，單烯屬不飽和C3-C8單羧酸 的聚合單元的摩爾量總計為聚合單元(或單體)A總量的至少70摩爾％，特別是至少90摩 爾％，尤其是至少99摩爾％。因此，聚合單烯屬不飽和C4-C8 二羧酸的單元的量不超過聚合 單元(或單體)A的30摩爾％，特別是10摩爾％，尤其是1摩爾％。在該第二特別優(yōu)選的實施方案中，單體B優(yōu)選選自C2-C5tl烯烴、乙烯基芳族化合物、C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸雙-C1-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰 胺、C3-C8單羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C5tl鏈烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷 基醚、馬來酸N-C1-C4tl烷基酰亞胺及其混合物。特別地，單體B選自C2-C5tl烯烴、乙烯基芳族 化合物、C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl鏈烷酸乙烯基在第二特別優(yōu)選實施方案的聚合物P中，優(yōu)選下述那些聚合物P，其作為單體B包 含至少一種C3-C8單羧酸的C2-C5tl烷基酯，特別是至少一種丙烯酸或甲基丙烯酸的C2-C5tl 烷基酯，任選與至少一種選自C2-C4烯烴、乙烯基芳族化合物、C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯、 C4-C8 二羧酸雙-C1-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、C3-C8單羧酸N-C1-C5tl烷 基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C5tl鏈烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基醚、馬來酸N-C1-C4tl烷基 酰亞胺及其混合物的其它單體B組合，更優(yōu)選至少一種C3-C8單羧酸C2-C2tl烷基酯，特別是 至少一種丙烯酸或甲基丙烯酸C2-C2tl烷基酯，任選與至少一種選自C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷 基酰胺、C3-C8單羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl鏈烷酸乙烯基酯的其它單 體B組合。在該特別優(yōu)選第二實施方案的聚合物P中，其中單體B包含至少一種C3-C8單羧 酸C2-C5tl烷基酯，C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯的量優(yōu)選為聚合單元(或單體)B總量的至少 50摩爾％，特別是至少70摩爾％或至少80摩爾％。如果存在其它單體B，則它們通常不超 過聚合單元(或單體)B總量的50摩爾％，特別是30摩爾％或20摩爾％。在混合物中，不 同于C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯的烯屬不飽和單體B的量例如為聚合單元(或單體)B總量 的0. 5-50摩爾％，特別是1-30摩爾％，尤其是2-20摩爾％。優(yōu)選一種或多種C3-C8單羧酸 C2-C50烷基酯為唯一的單體B或總計為聚合單元(或單體)B總量的至少99摩爾％。在第二特別優(yōu)選實施方案的聚合物P中，同樣優(yōu)選下述那些聚合物P，其作為單體 B包含至少一種C2-C4烯烴，任選與至少一種選自C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸 雙-C1-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、C3-C8單羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基 酰胺、C1-C50鏈烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基醚、馬來酸N-C1-C4tl烷基酰亞胺及其混合 物的其它單體B組合；更優(yōu)選至少一種C2-C4烯烴，任選與至少一種選自C3-C8單羧酸C2-C5tl 烷基酯的其它單體B組合。在該特別優(yōu)選第二實施方案的聚合物P中，其中單體B包含至 少一種C2-C4烯烴，C2-C4烯烴的量優(yōu)選為聚合單元(或單體)B總量的至少50摩爾％，特別 是至少70摩爾％或至少80摩爾％。如果存在其它單體B，則它們通常不超過聚合單元(或 單體)B總量的50摩爾％，特別是30摩爾％或20摩爾％。在混合物中，不同于C2-C4烯烴 的烯屬不飽和單體B的量例如為聚合單元(或單體)B總量的0. 5-50摩爾％，特別是1-30 摩爾％，尤其是2-20摩爾％。優(yōu)選一種或多種C2-C4烯烴為唯一的單體B或總計為聚合單 元(或單體)B總量的至少99摩爾％。在第二特別優(yōu)選實施方案的聚合物P中，同樣優(yōu)選下述那些聚合物P，其作為單體 B包含至少一種乙烯基芳族化合物如苯乙烯和/或α-甲基苯乙烯，任選與至少一種選自 C2-C50烯烴、乙烯基芳族化合物、C3-C8單羧酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸雙-C1-C5tl烷基酯、 C3-C8單羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、C3-C8單羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C50鏈烷 酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基醚、馬來酸N-C1-C4tl烷基酰亞胺及其混合物的其它單體B組 合。在該特別優(yōu)選的第一實施方案的聚合物P中，其中單體B包含至少一種乙烯基芳族化 合物，乙烯基芳族化合物的量優(yōu)選為聚合單元(或單體)B總量的至少50摩爾％，特別是至少70摩爾％或至少80摩爾％。如果存在其它單體B，則它們通常不超過聚合單元(或單 體)B總量的50摩爾％，特別是30摩爾％或20摩爾％。在混合物中，不同于乙烯基芳族化 合物的烯屬不飽和單體B的量例如為聚合單元(或單體)B總量的0. 5-50摩爾％，特別是 1-30摩爾％，尤其是2-20摩爾％。優(yōu)選一種或多種乙烯基芳族化合物為唯一的單體B或總 計為聚合單元(或單體)B總量的至少99摩爾％。在第二特別優(yōu)選實施方案的聚合物P中，聚合單體A與聚合單體B的摩爾比優(yōu)選 為1 20-5 1，特別是1 10-3 1。在該實施方案的優(yōu)選聚合物P中，聚合單元A與 聚合單元B的重量比，和因此聚合單體A與聚合單體B的重量比通常為2 98-50 50，特 別是3 97-50 50，更優(yōu)選5 95-50 50。優(yōu)選聚合單元A和聚合單元B的總量，和 因此聚合單體A和聚合單體B的總量構(gòu)成該第二特別優(yōu)選實施方案的聚合物P的至少90 重量％，特別是至少95重量％，更優(yōu)選至少99重量％。除羧基和疏水性重復單元外，本發(fā)明聚合物P可含有聚-C2-C4氧化烯基團，尤其是 聚氧化乙烯基團，其中聚-C2-C4氧化烯基團的分子量(數(shù)均)優(yōu)選為100-5000。聚-C2-C4 氧化烯基團的量通常不超過聚合物P的30重量％，特別是小于10重量％。在本發(fā)明特別 優(yōu)選的實施方案中，聚合物P不含聚-C2-C4氧化烯基團。聚合物P的數(shù)均分子量Mn可為300-500000，特別是500-100000，特別 是700-50000，尤其是1000-30000。數(shù)均分子量Mn優(yōu)選約500-1000000，更優(yōu)選 1000-200000,特別是1500-100000，尤其是2000-50000。聚合物P的K值(根據(jù) Fikentscher-Cellulosechemie 1932，第 13 卷，第 58-64 頁和第 71-74 頁)通常為 5-120， 特別是10-100，尤其是15-80(在20°C下作為在水或四氫呋喃中取決于K值濃度為0. 1-5 重量％的溶液測定)。聚合物可通過使合適的單烯屬單體均聚或共聚而制備，所述單體經(jīng)聚合形成聚合 物P。在聚合中，烯屬雙鍵聚合以形成C-C骨架。例如，聚合物P可通過使烯屬不飽和單體A與同樣為烯屬不飽和單體的疏水性單 體B共聚而制備。如果單體B帶有羧基，則也可通過使這些帶有羧基的單體B均聚或通過 使所述單體B與其它單體A和/或B共聚而制備聚合物P。如果聚合物P含馬來酸的單元， 則可在聚合反應(yīng)中使用馬來酸酐代替馬來酸，然后使由聚合反應(yīng)得到的聚合物水解。如果 聚合物P含馬來酰亞胺的單元，則可在聚合反應(yīng)中使用馬來酸酐代替相應(yīng)的馬來酰亞胺， 然后使由聚合反應(yīng)得到的聚合物與合適的胺反應(yīng)，由此形成馬來酰亞胺結(jié)構(gòu)部分。同樣，如 果聚合物P含二羧酸的單酰胺或單酯如馬來酸的單酰胺或單酯的單元，則可在聚合反應(yīng)中 使用相應(yīng)的酐如馬來酸酐代替相應(yīng)的單酰胺，然后使由聚合反應(yīng)得到的聚合物與合適的胺 或醇反應(yīng)，由此形成單酰胺或單酯結(jié)構(gòu)部分。單體A可以以其酸形式或以其鹽，特別是其堿 金屬鹽的形式聚合。優(yōu)選單體A以酸形式，或在馬來酸的情況下以酐形式使用。適于制備聚合物P的方法包括單體A和B本體聚合、溶液聚合、懸浮聚合和乳液聚 合，優(yōu)選溶液聚合和本體聚合。形成聚合物P的單體的聚合通常在引發(fā)劑的存在下引發(fā)，所述引發(fā)劑通過形成基 團而衰解。聚合引發(fā)劑通?；谛纬删酆衔颬的單體以0. 05-10重量％，特別是0. 1-5重 量％的量使用。合適的引發(fā)劑例如為有機過氧化物和氫過氧化物，還有過二硫酸鹽、過碳酸 鹽、過氧化物酯、過氧化氫和偶氮化合物。引發(fā)劑的實例為過氧化氫、過二碳酸二環(huán)己基酯、過氧化二乙酰、過氧化二丁基、過氧化二戊基、過氧化二辛酰、過氧化二癸酰、過化二月桂 酰、過氧化二苯甲酰、過氧化雙(鄰甲苯基)、過氧化琥珀酰、過氧化甲基乙基酮、氫過氧化 二叔丁基、過氧化乙酰丙酮、過乙酸叔丁基酯、過馬來酸叔丁基酯、過異丁酸叔丁基酯、過新 戊酸叔丁基酯、過辛酸叔丁基酯、過新癸酸叔丁基酯、過苯甲酸叔丁基酯、氫過氧化叔丁基、 氫過氧化異丙基苯、過新癸酸叔丁基酯、過新戊酸叔戊基酯、過新戊酸叔丁基酯、過苯甲酸 叔丁基酯、過氧-2-乙基己酸叔丁基酯和過氧二氨基甲酸二異丙基酯；還有鋰、鈉、鉀和銨 過二硫酸鹽、2，2'-偶氮雙異丁腈、2，2'-偶氮雙O-甲基丁腈)、2，2'-偶氮雙[2-甲 基-N-(2-羥乙基)]丙酰胺、1，1'-偶氮雙(1-環(huán)己烷甲腈)、2，2'-偶氮雙(2，4_ 二甲 基戊腈)、2，2'-偶氮雙(N，N' -二亞甲基異丁脒)二鹽酸鹽和2，2'-偶氮雙(2-脒 基丙烷)二鹽酸鹽，和以下所述氧化還原引發(fā)劑體系。氧化還原氧化劑體系包含至少一種 氧化化合物，通常為過氧化物化合物，和至少一種還原化合物，例如還原硫化合物，例如堿 金屬的亞硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽、連二亞硫酸鹽、連四硫酸鹽或其銨鹽，或有機還 原劑，例如苯偶姻、二甲基苯胺、抗壞血酸、羥基甲烷亞磺酸鹽，和亞硫酸氫鹽在酮上的加合 物，例如丙酮-亞硫酸氫鹽加合物。與引發(fā)劑或氧化還原引發(fā)劑組合，還可使用過渡金屬催 化齊U，例如鐵、鈷、鎳、銅、釩和錳的鹽。合適的鹽例如為硫酸鐵(II)、氯化鈷(II)、硫酸鎳 (II)或氯化銅(I)。基于單體，還原過渡金屬鹽以0. I-IOOOppm的濃度使用。因此可使用 過氧化氫與鐵(II)鹽，如0. 5-30%過氧化氫與0. l-500ppm莫爾鹽的組合。如果合適的話，可需要控制要制備的聚合物的分子量。為此，單體M的聚合通常在 調(diào)節(jié)劑的存在下進行。調(diào)節(jié)劑例如包括含SH基團的有機化合物，優(yōu)選具有6-20個碳原子 的烷基硫醇如己基硫醇、辛基硫醇、2-乙基己基硫醇、正癸基硫醇、異癸基硫醇、正十二烷基 硫醇、叔十二烷基硫醇，極性硫醇如2-巰基乙醇、2-巰基丙醇、巰基丁醇、巰基乙酸(2-巰基 乙酸)、3_巰基丙酸、半胱氨酸和N-乙酰半胱氨酸，以及甲酸、異丙醇、烯丙醇、醛如丁醛、鹵 化烴如三氯甲烷、三溴甲烷和四氯甲烷等。如果需要的話，聚合調(diào)節(jié)劑通?；谛纬删酆衔?P的單體以0. 05-2重量％，特別是0. 1-1重量％的量使用。所需反應(yīng)溫度和反應(yīng)壓力取決于聚合物的類型和要以已知方式聚合的單體的類 型。通常，聚合溫度為10-250°C，特別是30-180°C。反應(yīng)壓力通常為0. 1-2500巴，特別是 0. 9-2000 巴。 如果聚合物P含聚-C2-C4氧化烯基團，尤其是聚氧化乙烯基團，則可如下引入這些 基團通過選擇合適的具有聚-C2-C4氧化烯基團的單體C，或通過將具有聚-C2-C4氧化烯單 元的化合物接枝在預形成的聚合物P上，例如通過酯化或酰胺化反應(yīng)，或通過使形成C-C骨 架的烯屬不飽和單體在具有聚-C2-C4氧化烯基團的不可聚合化合物的存在下聚合。用于本發(fā)明中的聚合物P和適于制備它們的方法為本領(lǐng)域中已知的，例如由EP 412389、DE 3730885、DE 10251141、DE 19810404、EP 498634、DE 3926168、DE 3931039、DE 4402029,WO 93/17130、PCT/EP2007/062189、US 4, 414, 370,US 4, 529, 787,US 4,546，160、 US 6，858，678、US 6，355，727禾口Ullmann' s Encyclopedia of Industrial Chemistry,第 5 版，Waxes，第 A 28 卷，第 146 及隨后各頁，Verlag Chemie ffeinheim, Basel, Cambridge, New York, Tokio，1986已知。一些聚合物可市購，例如作為BASF SE的Sokalail 類型和 Joncryl 類型市購。本發(fā)明組合物呈粒子形式，其優(yōu)選包含酶與聚合物P重量比為1 50-10 1，特別是1 40-5 1，更優(yōu)選1 30-2 1，尤其是1 20-1 2或1 20-1 5的至少 一種酶和至少一種聚合物P。通常所述至少一種酶和所述至少一種聚合物P的總量基于含 酶粒子的重量為至少30重量％，優(yōu)選至少40重量％，特別是至少50重量％，更優(yōu)選至少70 重量％，尤其是至少80重量％或至少90重量％。本發(fā)明組合物可額外含有通常用于顆粒酶組合物中的其它組分。這些其它組分在 本發(fā)明中也稱作配制添加劑。這些其它組分的量通常不超過70重量％，優(yōu)選不超過60重 量％，特別是不超過50重量％，更優(yōu)選不超過30重量％，尤其是不超過20重量％或10重量％?？蓳饺肓Ｗ又械钠渌M分例如包括多糖、蠟、酶活化劑或增強劑、填料、酶穩(wěn)定劑、 增溶劑、交聯(lián)劑、懸浮劑、粘度調(diào)節(jié)劑、輕質(zhì)球、氯清除劑、增塑劑、顏料、鹽、防腐劑和芳香 劑。合適的多糖可為未改性的天然存在的多糖或改性的天然存在的多糖。合適的多糖 包括纖維素、果膠、糊精和淀粉。淀粉可為可溶或不溶于水的。在本發(fā)明特別實施方案中，多 糖為淀粉。在本發(fā)明特別實施方案中，多糖為不可溶淀粉。來自廣泛植物來源的天然存在 的淀粉為可溶的(或作為淀粉本身，或作為改性淀粉的起點)，相關(guān)淀粉包括例如來自以下 的淀粉稻、玉米、小麥、土豆、燕麥、木薯、西谷椰子、樹薯、大麥、甘薯、高粱、山藥、黑麥、粟、 蕎麥、竹芋、芋頭、芋類，且可例如為粉的形式。在本發(fā)明上下文中，木薯淀粉為其中優(yōu)選的 淀粉；就這點而言，可提到木薯且木薯淀粉為各個同義詞下已知的，包括木薯粉、樹薯粉、樹 薯和木薯。如本發(fā)明上下文中所用，術(shù)語“改性淀粉”表示天然存在的淀粉，其已經(jīng)受至少 部分化學改性、酶催改性和/或物理或物理化學改性中一些種類，且通常相對于“母體”淀 粉具有改變的性能。本發(fā)明上下文中的“蠟”應(yīng)當理解為熔點為25-150°C，特別是30-100°C，更特別地 35-85°C，最特別地40-75°C的聚合材料。蠟優(yōu)選在室溫，25°C下為固態(tài)的。下限優(yōu)選在蠟開 始熔融的溫度與粒子或包含粒子的組合物通常儲存的溫度之間設(shè)定合理的距離，20-30°C。 對于一些粒子，例如用于清凈劑工業(yè)中的粒子，蠟的優(yōu)選特征為蠟應(yīng)為水溶性或水分散性 的，特別是在中性和堿性溶液中，使得當將本發(fā)明涂覆粒子引入水溶液中，即將它用水稀釋 時，蠟應(yīng)分解和/或溶解，提供摻入粒子中的活性物質(zhì)快速釋放和溶解在水溶液中。水溶性 蠟的實例為聚乙二醇(PEG)。其中可分散在水溶液中的水不溶性蠟為甘油三酯和油。對于 一些粒子，優(yōu)選涂層含一些不可溶的蠟，例如進料粒子。蠟可為任何蠟，且可為化學合成的或由天然來源分離的蠟或其衍生物。因此，合適 的蠟選自下列非限定性蠟-聚乙二醇，PEG。具有不同分子大小的不同PEG蠟為市售的，其中具有低分子大 小的PEG也具有低熔點。合適的PEG的實例為例如來自BASF(Pluriol E系列)或來自 Clariant 或來自 heos 的 PEG 1500、PEG2000、PEG 3000、PEG 4000、PEG 6000、PEG 8000、 PEG 9000等。也可使用聚乙二醇的衍生物。-聚丙二醇(例如來自BASF的聚丙二醇PluriolP系列)和聚乙二醇-聚丙二醇 嵌段共聚物。也可使用聚丙二醇和聚乙二醇-聚丙二醇嵌段共聚物的衍生物。-在室溫下為固體的非離子表面活性劑，例如具有高乙氧基水平的乙氧基化脂肪 醇，例如來自BASF的Lutensol AT系列，每分子具有不同量氧化乙烯的C16-C18脂肪醇，例如Lutensol AT11、AT13、AT25、AT50、AT80，其中數(shù)字表示氧化乙烯基團的平均數(shù)。作為 選擇，可使用氧化乙烯、氧化丙烯的聚合物或其共聚物，例如嵌段聚合物，例如來自BASF的 Pluronic PE 6800。優(yōu)選乙氧基化脂肪醇的衍生物。-由天然來源分離的蠟，例如巴西棕櫚蠟(熔點80-880C )、小燭樹蠟(熔點 68-70°C)和蜂蠟。其它天然蠟或其衍生物為衍生自動物或植物來源，例如海洋來源的蠟。 氫化植物油或動物脂同樣適合。這種蠟的實例為氫化公牛脂、氫化棕櫚油、氫化棉籽油和 /或氫化大豆油，其中如本發(fā)明所用術(shù)語“氫化”應(yīng)理解為不飽和碳水化合物鏈的飽和，例 如在甘油三酯中，其中C = C雙鍵轉(zhuǎn)化成C-C單鍵。氫化棕櫚油為例如由Hobum Oele und Fette GmbH-德國或 Deutsche Cargill GmbH-德國市購的。-脂肪醇，例如來自CondeaChemie GMBH-德國且熔點為55_60°C的線性長鏈脂肪 醇NAFOL 1822(C18，20，22)。脂肪醇的衍生物同樣有用。-甘油一酯和/或甘油二酯，例如硬脂酸甘油酯為有用的蠟，其中硬脂酸酯為硬脂 酸和棕櫚酸的混合物。其實例為來自Danisco hgredients，丹麥的Dimodan PM。-脂肪酸，例如氫化線性長鏈脂肪酸和脂肪酸的衍生物。-石蠟，即固體烴。-微晶蠟。其它合適的賭可在C. M. McTaggart 等人，Int. J. Pharm. 19,139(1984)或 Flanders 等人，Drug Dev. Ind. Pharm. 13，1001 (1987)中找到，在此將二者均引入作為參考。在本發(fā)明特別實施方案中，本發(fā)明蠟為兩種或更多種不同蠟的混合物。在本發(fā)明 特別實施方案中，蠟選自PEG、乙氧基化脂肪醇、脂肪酸、脂肪酸醇和甘油酯。在本發(fā)明另一 特別實施方案中，蠟選自合成蠟。在更特別的實施方案中，本發(fā)明蠟為PEG或非離子表面活 性劑。在本發(fā)明最特別的實施方案中，蠟為PEG。合適的填料為水溶性和/或不溶性無機鹽如細碎堿性硫酸鹽、堿性碳酸鹽和/或 堿性氯化物，粘土如高嶺土(例如SPESWHITE ，English China Clay)、膨潤土、滑石、 沸石、白堊、碳酸鈣和/或硅酸鈣。通常的填料為硫酸二鈉和木素磺酸鈣。其它填料為硅石、 石膏、高嶺土、滑石、硅酸鋁鎂和纖維素纖維。合適的酶穩(wěn)定或保護劑可分為幾類，包括例如堿性或中性材料、還原劑、抗氧化劑 和/或第一過渡族金屬離子的鹽。這些各自可與其它相同或不同類的保護劑聯(lián)合使用。堿 性保護劑的實例為堿金屬硅酸鹽、碳酸鹽或碳酸氫鹽，其通過活性中和例如氧化劑提供化 學清除效果。還原保護劑的實例為亞硫酸鹽、硫代亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽，而抗氧化劑的實 例為蛋氨酸、丁基化羥基甲苯(BHT)或丁基化羥基苯甲醚(BHA)。最優(yōu)選的試劑為硫代硫酸 鹽，例如硫代硫酸鈉。酶穩(wěn)定劑還可為硼酸鹽、硼砂、甲酸鹽、二羧酸和三羧酸，和所謂的可 逆性酶抑制劑如具有巰基的有機化合物或烷基化或芳基化硼酸。合適的交聯(lián)劑包括例如酶相容性表面活性劑，例如乙氧基化醇，尤其是具有10-80 個乙氧基的那些。在涂覆粒子為清凈劑配制劑的組分的情況下，粒子的溶解度是關(guān)鍵的。如本領(lǐng)域 技術(shù)人員已知，通過多種方法，許多試劑用于提高配制劑的溶解度，本領(lǐng)域通常已知的試劑 可在 National Pharmacopeia，s 中找至丨J。輕質(zhì)球為具有低真密度的小粒子。通常，它們?yōu)閮?nèi)部具有空氣或氣體的空心球粒子。這種材料通常通過使固體材料膨脹而制備。這些輕質(zhì)球可為無機性質(zhì)或有機性質(zhì)，例 如可由The PQ Corporation得到的PM系列(塑料空心球)。輕質(zhì)球也可由多糖如淀粉或 其衍生物制備。Biodae 為由纖維素(造紙廢品)制備的非空心輕質(zhì)材料的實例，其可由 GranTek Inc得到。這些材料可單獨或作為不同輕質(zhì)材料的混合物包含在本發(fā)明粒子中?？蓪腋?、調(diào)節(jié)劑(例如在洗滌應(yīng)用中促進粒子溶解時的漂白作用)和/或溶 劑摻入粒子中。在本發(fā)明上下文中用于粒子中的增塑劑包括例如多元醇，例如糖、糖醇、甘油、甘 油三羥甲基丙烷、新戊二醇、三乙醇胺、單-、二 -和三甘醇或分子量小于1000的聚乙二醇 (PEG)；脲、鄰苯二甲酸酯如鄰苯二甲酸二丁酯或二甲酯；硫氰酸酯、非離子表面活性劑如 乙氧基化醇和乙氧基化磷酸酯和水。合適的顏料包括但不限于細碎增白劑，例如二氧化鈦或高嶺土，有色顏料，水溶性 著色劑，以及一種或多種顏料與水溶性著色劑的組合?？蓳饺肓Ｗ又械暮线m鹽可為任何無機鹽，例如硫酸鹽、亞硫酸鹽、磷酸鹽、膦酸鹽、 硝酸鹽、氯化物或碳酸鹽，或簡單有機酸，特別是優(yōu)選具有小于10個碳原子，例如6個或 更少碳原子的單_、二-或三羧酸的鹽，例如檸檬酸鹽、丙二酸鹽、葡糖酸鹽、乳酸鹽、蘋果 酸鹽、馬來酸鹽、琥珀酸鹽、甲酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽或乙酸鹽。這些鹽中的陽離子的實例 為堿金屬或堿土金屬離子，以及銨離子或第一過渡族的金屬離子，例如鈉、鉀、鎂、鈣、鋅或 鋁。陰離子的實例包括氯離子、溴離子、碘離子、硫酸根、亞硫酸根、硫酸氫根、硫代硫酸根、 磷酸根、磷酸一氫根、磷酸二氫根、次磷酸根、焦磷酸二氫根、四硼酸根、硼酸根、碳酸根、碳 酸氫根、偏硅酸根、檸檬酸根、蘋果酸根、馬來酸根、丙二酸根、琥珀酸根、乳酸根、甲酸根、 乙酸根、丁酸根、丙酸根、苯甲酸根、酒石酸根、抗壞血酸根或葡糖酸根。特別地，可使用硫 酸鹽、亞硫酸鹽、磷酸鹽、膦酸鹽、硝酸鹽、氯化物或碳酸鹽的堿金屬或堿土金屬鹽，或簡單 有機酸的鹽，例如檸檬酸鹽、丙二酸鹽或乙酸鹽。具體實例包括NaH2PCV Na2HPO4, Na3PO4, (NH4) H2PO4, K2HPO4, KH2PO4, Na2SO4, K2SO4, KHSO4, ZnSO4, MgSO4, CuSO4, Mg (NO3) 2、(NH4) 2S04、硼 酸鈉、乙酸鎂、甲酸鎂、丙酸鎂、乳酸鎂、葡糖酸鎂、檸檬酸鎂、乙酸鈣、甲酸鈣、丙酸鈣、乳酸 鈣、葡糖酸鈣、檸檬酸鈣、乙酸鋅、甲酸鋅、丙酸鋅、乳酸鋅、葡糖酸鋅、檸檬酸鋅和檸檬酸鈉。 鹽可為水合鹽，即具有結(jié)晶結(jié)合水的結(jié)晶鹽水合物，例如如WO 99/32595所述。水合鹽的 實例包括硫酸鎂七水合物(MgS04(7H20))、硫酸鋅七水合物(ZnS04(7H20))、硫酸銅五水合物 (CuSO4 (5H20))、磷酸氫二鈉七水合物(Na2HPO4 (7H20))、硝酸鎂六水合物(Mg (NO3) 2 (6H20))、 硼酸鈉十水合物、檸檬酸鈉二水合物和乙酸鎂四水合物。在本發(fā)明的優(yōu)選實施方案中，含酶粒子包含至少一種選自ai2+、Mg2+、Ca2+及其混合 物的至少一種二價金屬陽離子的鹽。合適的鹽包括上述陰離子的鹽，特別是硫酸的鹽(硫 酸鹽)、磷酸的鹽(磷酸鹽、磷酸單-和二氫鹽和磷酸氫銨)，優(yōu)選具有小于10個碳原子，例 如6個或更少碳原子的簡單有機酸，特別是單_、二-或三羧酸的氯化物或鹽，例如檸檬酸 鹽、丙二酸鹽、葡糖酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、琥珀酸鹽、甲酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽或 乙酸鹽，優(yōu)選簡單有機酸的鹽。特別優(yōu)選鈣鹽，尤其是簡單有機酸的那些。這些鹽的量的選 擇通常使得含酶粒子基于酶的總重量含有0. 1-10重量％，特別是0. 5-8重量％，尤其是1-5 重量％至少一種二價離子。在本發(fā)明粒子中，聚合物和酶和任選其它組分通常作為均質(zhì)混合物存在，即粒子中的成分分布為均勻或基本均勻的。然而，粒子也可具有芯殼結(jié)構(gòu)。術(shù)語“芯殼結(jié)構(gòu)”意指 粒子內(nèi)的組分分布為不均勻的。而是，至少一種粒子組分主要位于粒子的內(nèi)部區(qū)域，而至少 一種其它組分主要位于粒子的外部區(qū)域。在這些芯殼粒子中，酶優(yōu)選位于粒子的內(nèi)部區(qū)域。 在本發(fā)明特別優(yōu)選實施方案中，粒子內(nèi)的組分分布為均勻或基本均勻的。本發(fā)明組合物中粒子的粒度可變化。優(yōu)選含酶粒子的體積平均粒徑為 50nm-90 μ m,特別是100nm-80 μ m,更優(yōu)選200nm-50 μ m,尤其是1-20 μ m,特別優(yōu)選 0. 5-20 μ m。然而，體積平均粒徑可小達50-500nm。通常，至少90重量％粒子的粒徑為至 多150 μ m,優(yōu)選至多100 μ m,更優(yōu)選至多70 μ m,特別是至多50 μ m,尤其是至多30 μ m。粒 度可通過常規(guī)技術(shù)如光散射測定，例如如D. Dist 1 er，Wassrige Po 1 ymerdispersionen [Aqueos Polymer Dispersions], Wiley-VCH 1999，第 4· 2· 1 章，第 40 及隨后各頁， H. Auweter, D. Horn, J. Colloid Interf. Sci. 105 (1985) 399, D. Lilge, D. Horn, Colloid Polym. Sci. 269(1991)704 或 H. Wiese，D.Horn，J. Chem. Phys. 94(1991)6429 或 W.Brown， Dynamic Light Scattering Oxford University Press, 1992 所述。本發(fā)明粒子可包含1、2或更多個其它涂層。在本發(fā)明特別實施方案中，粒子包含 至少兩個涂層。可將其它涂層施涂在粒子上以提供其它特征或性能。因此，例如其它涂層可實現(xiàn) 一種或多種如下效果(i)進一步保護粒子中的活性化合物以防環(huán)境中的敵對化合物。(ii)當將粒子引入液體介質(zhì)(如酸介質(zhì))中時以理想速率溶解。(iii)提供粒子更好的物理強度。在本發(fā)明特別實施方案中，可根據(jù)已知以微囊包封技術(shù)例如借助作為界面聚合的 縮聚和就地聚合、凝聚、膠凝和螯合、溶劑萃取、蒸發(fā)和懸浮交聯(lián)施涂外層。不同的涂覆技術(shù) 描述于“Microspheres,Microcapsules and Liposomes，，,編者Reza Arshady,Citus Books Ltd.和TO 97/24179中，在此將其引入作為參考。通常，酶粒子可為粉末形式或在液體介質(zhì)中的分散體形式。通常在第一個步驟中 制備粉末，在第二個步驟中將其摻入液體介質(zhì)，例如極性液體介質(zhì)如含水液體或液體乳化 劑、乳化劑的液體混合物或其混合物，或非極性液體介質(zhì)如液體烴或液體植物油或其混合 物中。在特別優(yōu)選的實施方案中，液體介質(zhì)為液體表面活性劑或表面活性劑的液體混合物 (液體乳化劑)或基于液體介質(zhì)的重量含有至少80重量％至少一種液體表面活性劑或表面 活性劑混合物。特別地，液體表面活性劑的實例為非離子表面活性劑如醇烷氧基化物。這 種分散體還可含有各種添加劑，例如穩(wěn)定以防沉降。液體介質(zhì)的類型為次要的，主要取決于 酶粒子的意欲目的。然而，也可使用其中得到作為液體分散體的含酶粒子的方法。本發(fā)明組合物的制備可通過制備其粒子包含多種組分的顆粒物質(zhì)的常用方法實 現(xiàn)。通常，將含活性物質(zhì)的粒子的組分相互混合，然后通過常規(guī)方法加工以得到酶粒子。這 種方法也是本申請的主題。根據(jù)本發(fā)明合適的方法的實例為干燥方法，例如噴霧干燥、冷凍干燥、流化床干 燥、流化床涂布、隨后噴霧干燥地制備皮克林分散體，和包括大粒子粉碎的步驟的方法，例 如微粉化、干磨或濕磨。優(yōu)選，酶粒子的制備方法為噴霧干燥或乳液干燥，其中更優(yōu)選噴霧干燥。噴霧干燥方法通常包括如下步驟制備酶和聚合物P的溶液，將該溶液在氣體或液體中霧化以制備 小液滴(在氣體中霧化相當于噴霧干燥方法，在水不溶混液體中霧化得到乳液)，并干燥這 些液滴以形成固體粒子。合適的干燥方法包括噴霧干燥和乳液方法。a)噴霧干燥方法，其中將液體含酶和含聚合物溶液在噴霧干燥塔中霧化以形成小 液滴，在其下降期間，將干燥塔干燥易形成含酶+聚合物的顆粒材料。這樣可制備非常小的 粒子(Michael S. Showell (編者)；Powdered detergents ；Surfactant Science Series ； 1998 ；第 71 卷；第 140-142 頁；Marcel Dekker)b)乳液方法，其中將含水液體含酶和含聚合物溶液在水不混溶性液體如石蠟油中 乳化。為使液滴的形成容易并穩(wěn)定乳液，使用各種乳化劑和表面活性劑?？呻S后將來自液 滴的水通過蒸餾如共沸蒸餾，或如果水不混溶性液體為揮發(fā)性的，則優(yōu)選通過將乳液噴霧 干燥而除去。對于乳液，干燥方法可為例如如EP 0356239所述的共沸蒸餾。同樣優(yōu)選將液體含酶和聚合物的溶液冷凍干燥的方法。本發(fā)明粒子還可通過粉碎方法制備，其中借助研磨較大粒子降低預形成的較大粒 子/團塊等的粒度。這可在干粒子上(干磨)或使用粒子在液體中的分散體，所謂漿料(濕 磨)進行。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，本發(fā)明組合物的制備通過噴霧干燥方法，即通過將 含至少一種酶和至少一種聚合物P的液體組合物噴霧干燥而實現(xiàn)。根據(jù)本發(fā)明特別優(yōu)選的 實施方案中，本發(fā)明組合物的制備通過將含至少一種酶和至少一種聚合物P的含水組合物 噴霧干燥而實現(xiàn)。為此，在第一個步驟中，將含酶粒子的組分相互混合或溶于合適的溶劑或稀釋劑 中。隨后使所得懸浮液或溶液經(jīng)受噴霧干燥方法。這里，將溶劑或稀釋劑借助熱氣流除去， 其中存在于溶液或懸浮液中的活性物質(zhì)粒子的組分形成細碎粉末，這可以以本身已知的方 式得到。作為選擇，可將粒子的組分分別溶解或分散，并可使所得溶液或分散體經(jīng)受伴隨噴
霧干燥。在通過噴霧干燥方法制備本發(fā)明組合物中，粒子的組分將在第一個步驟中溶于或 懸浮在合適的溶劑或稀釋劑中。優(yōu)選的溶劑為含活性物質(zhì)粒子的所有組分溶解且不破壞所 用酶的那些。合適溶劑的實例為-水，-C1-C4鏈烷醇如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、正丁醇、2-丁醇、異丁醇；-C1-C4脂族酸與C1-C4鏈烷醇的酯，例如乙酸乙酯、乙酸丁酯、丁酸甲酯；-優(yōu)選具有4-10個C原子的脂族和脂環(huán)族醚，例如四氫呋喃、二烷、二乙醚、二 異丙醚、甲基叔丁基醚；-鹵代烴如二氯甲烷、三氯甲烷、二氯乙烷；-環(huán)狀或開鏈碳酸酯，例如碳酸亞乙酯、碳酸亞丙酯、碳酸二乙酯；-上述溶劑的混合物和上述溶劑與水的混合物。優(yōu)選使含至少一種酶和至少一種聚合物P的含水組合物經(jīng)受噴霧干燥。因此，溶 劑優(yōu)選選自水或水和與水混合的有機溶劑的混合物。優(yōu)選溶劑中水的量為至少50體積％。 更優(yōu)選水為唯一的溶劑或稀釋劑。優(yōu)選水或水與有機溶劑的混合物的PH為pH6-9。
在第二個步驟中，隨后在合適的噴霧設(shè)備中借助熱氣流將溶劑除去。為此，在合適 的設(shè)備中，將溶液或分散體噴入熱氣流中。噴入溶液或分散體可與熱氣流并流或逆流，優(yōu)選 并流，即以與熱氣流相同的方向進行。適于噴入的設(shè)備為單材質(zhì)或多材質(zhì)噴嘴和圓盤霧化器。熱氣流，下文也稱作干燥氣體進入干燥設(shè)備中時的溫度通常為50-200°C，特別是 70-180°C，尤其是100-160°C。當干燥氣體離開干燥設(shè)備時，它的溫度通常為40_120°C，特 別是60-10(TC。合適的干燥氣體除空氣外，特別為惰性氣體，例如氮氣、氬氣或氦氣，優(yōu)選氮 氣。在易揮發(fā)的溶劑的情況下，還可使用降低的溫度，例如室溫。通常，噴霧干燥在適于此目的的噴霧干燥塔中進行。這里，通常將待干燥的溶液 或分散體和干燥氣體在頂部引入塔中。在塔的底部，將干活性物質(zhì)粒子與氣流一起排出 并在置于下游的設(shè)備如旋風器中與氣流分離。除常規(guī)噴霧外，還可使用內(nèi)部或外部流化床 (例如來自Mro稱作FSD技術(shù))進行附聚噴霧干燥操作，其中粒子形成聚集體以得到較大 塊體。然而，形成的粒子的初級粒度優(yōu)選在上述范圍內(nèi)，特別是不超過100 μ m,具體而言 50 μ m0如果合適的話，特別當它們具有特定粘性時，粒子具有傳統(tǒng)噴霧干燥輔助劑。這 些為細碎固體，將其與溶液或分散體一起引入噴霧干燥設(shè)備中，并確保不發(fā)生凝集或結(jié)塊。 合適的細碎固體特別為硅石，包括疏水性硅石、堿金屬和堿土金屬硅酸鹽、堿土金屬硅鋁酸 鹽、高度交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、淀粉、高度交聯(lián)的羧甲基淀粉鈉或交聯(lián)的羧甲基 纖維素鈉。這些物質(zhì)的粒度通常為100ym(D9CI值)以下。本發(fā)明組合物可用于任何需要酶的應(yīng)用中。本發(fā)明組合物特別適于摻入含蛋白質(zhì) 敵對物質(zhì)的組合物，例如清凈劑組合物，特別是含蛋白質(zhì)敵對物質(zhì)的液體組合物，例如液體 清凈劑組合物中。因此，本發(fā)明涉及含至少一種如本發(fā)明所述酶組合物的清凈劑組合物。本發(fā)明還涉及含至少一種如本發(fā)明所述酶組合物的液體組合物，特別是液體清凈 劑組合物。在本發(fā)明清凈劑組合物中，聚合物P保護酶直至將清凈劑引入洗滌液中，將其充 分稀釋以使粒子溶解并釋放酶，使得可在污漬上起作用。本發(fā)明液體組合物可為適于包含本發(fā)明粒子的任何液體組合物。液體組合物可 為任何組合物，但特別合適的組合物為個人護理組合物、清潔組合物、織物加工組合物如漂 白、藥物組合物、皮革加工組合物、燃料、紙漿或紙加工組合物、食品和飲料組合物和動物飼 料組合物。在本發(fā)明另一特別實施方案中，液體組合物為液體清凈劑組合物。在本發(fā)明更特 別的實施方案中，液體組合物為洗衣用或洗碗用清凈劑組合物。在本發(fā)明的特別實施方案中，液體組合物包含小于50%水。在本發(fā)明更特別的實 施方案中，液體組合物包含小于30%水。在本發(fā)明又一實施方案中，液體組合物包含小于 20% 水。如果液體組合物為液體清凈劑組合物，則液體組合物可包含表面活性劑退增溶 (desolubilising)電解質(zhì)，所述電解質(zhì)以所述表面活性劑形成能穩(wěn)定懸浮酶/聚合物粒子 的結(jié)構(gòu)的濃度存在。
在特別實施方案中，液體清凈劑組合物基于液體清凈劑包含30-70重量％水。在 更特別的實施方案中，液體清凈劑基于液體清凈劑包含40-60重量％水。在最特別的實施 方案中，液體清凈劑基于液體清凈劑包含80-90重量％水。在本發(fā)明的特別實施方案中，液體清凈劑組合物包含大于30 %但小于90 %水。包 含在液體清凈劑組合物中的水的量特別為小于85重量％，更特別地小于75重量％，例如小 于60重量％液體清凈劑。本發(fā)明液體清凈劑組合物為通常用于洗衣或洗碗應(yīng)用中的常規(guī)組合物。在特別實施方案中，組合物包含有效量的清凈劑助洗劑。合適的助洗劑縮聚磷酸 鹽，尤其是三聚磷酸鈉，或較少優(yōu)選焦磷酸鈉或四磷酸鈉、偏磷酸鈉、碳酸鈉、硅酸鈉、正磷 酸鈉、檸檬酸鈉、次氮基三乙酸鈉、膦酸鹽如乙二胺四(亞甲基膦酸)鈉、二亞乙基三胺五 (亞甲基膦酸)鈉、乙酰二膦酸鈉或氨基三(亞甲基膦酸)鈉、乙二胺四乙酸鈉或沸石。其 它較少優(yōu)選的助洗劑包括以上鈉鹽的鉀或鋰類似物。助洗劑的比例通常為液體清凈劑組合 物的約5重量％至約40重量％，通常10-35重量％，優(yōu)選15-30重量％，更優(yōu)選18- 重 量％，最優(yōu)選20-27重量％。通常使用兩種或更多種助洗劑的混合物，例如三聚磷酸鈉與硅 酸鈉和/或碳酸鈉和/或與沸石；或次氮基三乙酸鈉與檸檬酸鈉。優(yōu)選助洗劑至少部分作 為懸浮在組合物中的固體粒子存在。本發(fā)明還適用于制備未復配清凈劑組合物或其中所有助洗劑以溶液存在的組合物。在特別實施方案中，本發(fā)明清凈劑組合物包含一種或多種表面活性劑，所述表面 活性劑可為非離子，包括半極性和/或陰離子和/或陽離子和/或兩性離子的。通常，表面 活性劑基于組合物以約0. 1-90重量％的量存在于液體組合物中。在特別實施方案中，表面 活性劑基于組合物以約10-60重量％的量存在于液體組合物中。在另一特別實施方案中， 表面活性劑基于組合物以約2-35重量％的量存在于液體組合物中。當清凈劑包含表面活性劑時，清凈劑通常含約至約40%陰離子表面活性劑， 例如線性烷基苯磺酸鹽如甲苯磺酸鹽、辛基苯磺酸鹽或十二烷基苯磺酸鹽、α -烯烴磺酸 鹽、烷基硫酸鹽(脂肪醇硫酸鹽)、醇乙氧基硫酸鹽、仲烷烴磺酸鹽、α-磺基脂肪酸甲酯、 烷基-或烯基-琥珀酸、二烷基-或二烯基-磺基琥珀酸或皂。高度優(yōu)選的陰離子表面活 性劑為線性烷基苯磺酸鹽(LAS)材料。這種表面活性劑及其制備方法例如描述于美國專利 2，220，099和2，477，383中，在此將其引入作為參考。尤其優(yōu)選線性直鏈烷基苯磺酸鈉和 鉀，其中烷基中平均碳原子數(shù)為約11-14。尤其優(yōu)選鈉C11-C14(如C12)LAS。其它有用的陰離 子表面活性劑描述于WO 99/00478，第11_13頁中，在此將其引入作為參考。當清凈劑包含表面活性劑時，清凈劑通常含約0. 2%至約40%非離子表面活性 劑。合適的非離子表面活性劑包括氧化乙烯和/或氧化丙烯與具有至少一個NH-或OH基團 的疏水性化合物的反應(yīng)產(chǎn)物。非離子表面活性劑的平均親水親脂平衡(HLB)通常為8-17， 優(yōu)選9. 5-14，更優(yōu)選12-14。疏水(親脂)結(jié)構(gòu)部分可為脂族或芳族性質(zhì)且可容易地調(diào)整 與任何具體疏水性基團縮合的聚氧乙烯基團的長度以得到具有親水與疏水元素之間的理 想平衡度的水溶性化合物。合適的非離子表面活性劑包括醇乙氧基化物，特別是鏈烷醇乙氧基化物、烷基苯 酚乙氧基化物如壬基酚乙氧基化物、烷基多糖苷、烷基二甲基胺氧化物、乙氧基化脂肪酸單 乙醇酰胺、脂肪酸單乙醇酰胺、聚羥基烷基脂肪酸酰胺或葡糖胺的N-?；鵑-烷基衍生物(“葡糖酰胺”)。這種有用的非離子表面活性劑另外描述于WO 99/0478，第13-14頁中，在 此將其引入作為參考。清凈劑還可含兩性和/或兩性離子表面活性劑。一列典型的陰離子、非離子、兩性 和兩性離子表面活性劑在1972年5月23日Norris發(fā)布的US3, 664，961中給出。這類尤其優(yōu)選的非離子表面活性劑為含2-12摩爾氧化乙烯/摩爾醇的C9-C15伯 醇乙氧基化物，特別是含3-8摩爾氧化乙烯/摩爾醇的C12-C15伯醇乙氧基化物。另一類優(yōu)選的非離子表面活性劑包括通式RO(CnH2nO)tZx的烷基多糖苷化合物，其 中Z為衍生自葡萄糖的結(jié)構(gòu)部分；R為含12-18個碳原子的飽和疏水性烷基；t為0-10，且η 為2或3 ;Χ為1. 3-4，該化合物包含小于10%未反應(yīng)的脂肪醇和小于50%短鏈烷基多糖苷。 這類化合物和它們在清凈劑中的用途公開于EP-BO 070 077, EP 75996和EP 94118中。通?？墒褂肎B 1，123，846 或 khwartz，Perry 和 Berch 的 “Surface Active Agents and Detergents”中提到的任何表面活性劑。優(yōu)選液體清凈劑組合物的pH為堿性的，例如7. 5以上，尤其是7. 5-12,通常為 8-11，例如 9-10. 5。在特別實施方案中，液體清凈劑組合物包含溶解的表面活性劑退增溶電解質(zhì)。實 例包括氯化鈉、硝酸鈉、溴化鈉、碘化鈉、氟化鈉、硼酸鈉、甲酸鈉或乙酸鈉或相應(yīng)的鉀鹽。然 而，特別地，電解質(zhì)為需要在洗滌液中進行有用作用的鹽。在特別實施方案中，溶液中電解質(zhì)的濃度為大于3重量％，例如大于5重量％。在 另一實施方案中，溶液中電解質(zhì)的濃度基于組合物的重量為6-20重量％，尤其是7-19重 量％，例如8-18重量％、9-17重量％、10-16重量％，例如11-15重量％溶液中的電解質(zhì)。優(yōu) 選調(diào)整電解質(zhì)含量以提供在室溫，0°C和40°C下至少3個月儲存穩(wěn)定性。清凈劑組合物可含任何通常的次要成分，例如污垢懸浮劑(例如羧甲基纖維 素)、防腐劑如甲醛或四(羥甲基)樓鹽、膨潤土，或任何根據(jù)本發(fā)明保護的本發(fā)明所述 酶。如果使用漂白劑，則可便利地將漂白劑例如用親水性密封劑，或在疏水性介質(zhì)，例如如 EP-A-0238216或GB-A-2200377所述聚硅氧烷或烴中包封。本發(fā)明液體清凈劑組合物還可含0-65 % w/w螯合劑。這種螯合劑可選自氨基羧酸 鹽、氨基膦酸鹽、多官能取代的芳族螯合劑、二磷酸鹽、三磷酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽、次氮基 三乙酸、乙二胺三乙酸、二亞乙基三胺五乙酸、烷基-或烯基琥珀酸、可溶性硅酸鹽或?qū)訝?硅酸鹽(例如來自Hoechst的SKS-6)及其混合物。其它螯合劑描述于WO 99/00478中。也可使用穩(wěn)定劑將液體清凈劑中的酶穩(wěn)定在液相中，例如多元醇如丙二醇或甘 油、糖或糖醇、乳酸、短鏈羧酸如甲酸鹽或乙酸鹽、肽醛、硼酸，或硼酸衍生物，例如芳族硼酸 酯，或苯基硼酸衍生物如4-甲?；交鹚?，組合物可如例如WO 92/19709和WO 92/19708 所述配制。特別優(yōu)選的液體清凈劑為含以下組分的那些量為5-12%的長鏈(例如Cich14)線 性烷基苯磺酸鹽，量為0-3%的例如具有0-5個氧化乙烯單元的長鏈烷基或烷基醚硫酸鹽； 量為1-5%的HLB為小于12的脂肪酸鏈烷醇酰胺和/或醇乙氧基化物；量為0-3%，例如 0. 1-1%的單-和二長鏈烷基磷酸鹽的混合物；量為14-30%，例如14-18%或20-30%的三 聚磷酸鈉(優(yōu)選預水合有0.5-5重量％水)；任選量為至多10%，例如5-10%的碳酸鈉，其 中三聚磷酸鈉和碳酸鈉的總量優(yōu)選為20-30% ；量為0. 05-0. 5%的防再沉積劑如羧甲基纖維素鈉；量為0. 5-0. 5%的熒光增白劑；任選以0. 1-15%的量存在的螯合劑，例如氨基膦酸 鹽，例如二-和多胺的亞甲基膦酸鹽，尤其是乙二胺四[亞甲基膦酸]鈉或二亞乙基三胺六 [亞甲基膦酸]鈉；以及常規(guī)次要添加劑如芳香劑、著色劑、防腐劑，其余為水，其中百分數(shù) 以整個液體清凈劑的重量計。在稀釋至以后液體清凈劑的PH為6-13，優(yōu)選7-12，更通 常為8-11，例如9-10. 5。本發(fā)明通過以下實施例進一步描述，所述實施例應(yīng)理解為不限制本發(fā)明范圍。I.原料:聚合物Pl 馬來酸與C2ci-Cm單烯烴(摩爾比1 1)的共聚物，水解的，鈉鹽，根據(jù)EP 412389制備(見表1)，K值洸· 8 (在H2O中1 % )。P2 馬來酸、C12烯烴和C2q-Cm烯烴(摩爾比1 0. 6 0. 4)的三聚物，水解的，鈉 鹽，根據(jù)EP 412389制備(見表1)，K值50. 1 (在H2O中1 % )。P3 馬來酸、C12烯烴和苯乙烯(摩爾比1 0. 1 0.9)的三聚物，水解的，鈉鹽， 根據(jù)EP 412389制備(見表1)，K值52. 6 (在H2O中1 % )。P4 馬來酸、C12烯烴、聚異丁烯(Mn 550)和苯乙烯(摩爾比1 0. 6 0. 2 0. 2) 的四聚物，水解的，鈉鹽，根據(jù)EP 412389制備(見表1)，K值觀· 1 (在H2O中1 % )。P5 馬來酸、C2ci-Cm烯烴和苯乙烯(摩爾比1 0. 7 0. 3)的三聚物，水解的，鈉 鹽，根據(jù)EP 412389制備(見表1)，K值65. 2 (在H2O中1 % )。P6 馬來酸、C2ci-Cm烯烴和丙烯酸(摩爾比1 1 0. 5)的三聚物，水解的，鈉鹽， 根據(jù)EP 412389制備(見表1)，K值38. 9 (在H2O中1 % )。P7 馬來酸、C12烯烴、C2q-Cm烯烴和丙烯酸(摩爾比1 0. 5 0. 5 0. 5)的四 聚物，水解的，鈉鹽，根據(jù)EP 412389制備(見表1)，K值57. 1 (在H2O中1 % )。P8 馬來酸與C16烯烴(摩爾比1. 15 1)的共聚物，水解的，鈉鹽，根據(jù)EP412389， 但在聚合期間使用有機溶劑而制備(見表1)，K值10.8(在H2O中)。P9 馬來酸、C12烯烴和聚異丁烯(Mn 550)(摩爾比1 0.8 0.2)的三聚物，水 解的，鈉鹽，根據(jù)EP 412389制備(見表1)，K值42. 4 (在H2O中1 % )。PlO 丙烯酸2-乙基己酯、甲基丙烯酸叔丁酯和丙烯酸(摩爾比 0.46 0. 15 0. 39)的三聚物，根據(jù) EP 07115644. 2 制備。Pll 巴豆酸與乙酸乙烯酯(摩爾比10 90)的共聚物，K值37 (在四氫呋喃中)。P12 馬來酸、(^單烯烴和異丁烯(摩爾比1 0.05 0.7)的三聚物，水解的，鈉 鹽，根據(jù)EP 412389制備。P13:乙烯與甲基丙烯酸(摩爾比92 8)的共聚物，鉀鹽，水乳液，根據(jù)PCT/ EP2007/062189 制備。P14:馬來酸與Q6烯烴(摩爾比1 1)的共聚物，水解的，鈉鹽，根據(jù)EP 412389 制備(見表1)，K值60.4(在H2O中)。P15 馬來酸與烯烴的共聚物，水解的，鈉鹽，Sokalan CP9(K值40，Mwl2000)。P16 苯乙烯、α -甲基苯乙烯和丙烯酸的共聚物(酸值，220mg K0H/g，Mw6000)，銨
鹽水溶液。
P17 苯乙烯與丙烯酸的共聚物，鉀鹽水溶液，具有KOH的Joncryl HPD296。P18 苯乙烯與丙烯酸的共聚物(酸值，IlOmg KOH/g, Mw 4500)，用二甲基乙醇胺 中和的水溶液。P19 丙烯酸乙酯與丙烯酸(重量比0. 9 0. 10)的共聚物。P20:乙烯與甲基丙烯酸(重量比73 27)的共聚物，用二甲基乙醇胺中和的，水 溶液，根據(jù) PCT/EP 2007/062189 制備。P21 馬來酸和Cw烯烴和苯乙烯(摩爾比1 0.5 1)的三聚物，水解的，鈉鹽， 根據(jù)EP 412389制備(見表1)，K值33. 5 (在H2O中1 % )。P22 馬來酸、C20-C24烯烴和丙烯酸2_乙基己酯(摩爾比1 0. 75 0. 75)的三 聚物，水解的，鈉鹽，根據(jù)EP 412389制備(見表1)，K值19. 7 (在H2O中1 % )。P23 叔丁基丙烯酰胺、丙烯酸乙酯和丙烯酸的三聚物，K值40(在乙醇中)，酸 值 77mg KOH/g。P24 馬來酸與苯乙烯(摩爾比1 1)的改性共聚物的鈉鹽，用Mn為500的聚氧 化乙烯改性，根據(jù)WO 93/17310所述方法制備。馬來酸與疏水性共聚單體的共聚物(聚合物P1_P9、P12、P14、P21和P2》通過類 似于EP 412389關(guān)于分散體I所述方法制備。表1
權(quán)利要求
1.包含含酶粒子的酶組合物，其中所述粒子包含i)至少一種酶，和ii)至少一種聚合物P，其中聚合物P選自具有C-C骨架的均聚物和共聚物，其中C-C骨架帶有可以酸形式或 以中和形式存在的羧基，且其中C-C骨架基于聚合物P的總重量包含至少20重量％衍生自 單體B的疏水性重復單元，其中單體B在25°C下的水溶性為至多30g/l，且其中含酶粒子的體積平均粒徑為50nm-100 μ m。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中聚合物P選自具有包含如下單元的C-C骨架的共聚物a)至少一種單烯屬不飽和C3-C8單羧酸或二羧酸(單體A)的聚合單元A，和b)至少一種疏水性單烯屬不飽和單體B的聚合單元B，其中聚合單元A與聚合單元B的相對摩爾量為1 20-10 1。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中聚合單元A為選自丙烯酸、甲基丙烯酸、馬來酸、衣康 酸和巴豆酸及其混合物的聚合單烯屬不飽和C3-C8單羧酸或二羧酸的單元。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其中聚合單元A包含聚合馬來酸的單元。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中聚合單元B為在25°C下水溶性為至多 10g/l的聚合單體B的單元。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中單體B選自C2-C5tl烯烴、乙烯基芳族化合 物、C3-C8單羧酸的C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸的雙-C1-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸的N-C2-C5tl 烷基酰胺、C3-C8單羧酸的N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C5tl鏈烷酸的乙烯基酯、乙烯 基-C1-C4tl烷基醚、馬來酸的N-C1-C4tl烷基酰亞胺及其混合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的組合物，其中單體B包含至少一種C2-C5tl烯烴或至少一種(2-(5(|烯 烴與至少一種其它單體B的組合，所述至少一種其它單體B選自乙烯基芳族化合物、(3-(8單 羧酸的C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸的雙-C1-C5tl烷基酯、C3-C8單羧酸的N-C2-C5tl烷基酰胺、 C3-C8單羧酸的N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C50鏈烷酸的乙烯基酯、乙烯基-C1-C40 烷基醚、馬來酸的N-C1-C4tl烷基酰亞胺及其混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的組合物，其中聚合單元A為聚合馬來酸或馬來酸與至少一種單羧 酸的混合物的單元，其中馬來酸的量為聚合單元A的至少50摩爾％。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中聚合物P中疏水性重復單元的量為聚合 物P的40-95重量％。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中聚合物P的酸值為10-700mgKOH/g聚 合物P。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中酶與聚合物P的重量比為 1 50-10 1。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中含酶粒子的體積平均粒徑為 50nm-90 μ m。
13.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述至少一種酶與所述至少一種聚合 物P構(gòu)成含酶粒子的至少50%。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述酶為蛋白水解酶。
15.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其包含至少一種選自ai2+、Mg2+、Ca2+及其混 合物的二價金屬陽離子，所述陽離子呈所述陽離子的一種或多種鹽的形式。
16.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其可通過將含所述至少一種酶和所述至少 一種聚合物P的液體組合物噴霧干燥而得到。
17.一種制備根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的組合物的方法，所述方法包括將含所述至 少一種酶和所述至少一種聚合物P的液體組合物干燥。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其包括將含所述至少一種酶和所述至少一種聚合物P的 液體組合物噴霧干燥。
19.根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項的酶組合物在清凈劑組合物中的用途。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的用途，其為液體清凈劑組合物。
21.一種包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項的酶組合物的清凈劑組合物。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的清凈劑組合物，其為液體清凈劑組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種包含含酶聚合物粒子的酶組合物，其可用于清凈劑組合物，特別是液體清凈劑組合物。在這些含酶粒子中，所述粒子包含i)至少一種酶，和ii)至少一種聚合物P，所述聚合物P選自具有C-C骨架的均聚物和共聚物，其中C-C骨架帶有可以酸形式或以中和形式存在的羧基，且其中C-C骨架包含疏水性重復單元。
文檔編號C11D3/386GK102144024SQ200980134456
公開日2011年8月3日 申請日期2009年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月7日
發(fā)明者D·伯克, H·普費斯特奈爾, 塔博阿達 L·赫瑞拉, O·西蒙森, S·馬斯, V·施文德曼 申請人:巴斯夫歐洲公司, 諾和酶股份有限公司