專利名稱：人源干細(xì)胞分泌生物活性因子與裂解液的制備與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從健康人的臍帶組織或胎盤組織中提取干細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)、擴(kuò)增，然后提取干細(xì)胞培養(yǎng)、擴(kuò)增過程中分泌的生物活性因子和干細(xì)胞內(nèi)的生物活性物質(zhì)并應(yīng)用。
背景技術(shù)：
干細(xì)胞(stem cell)是一類具有自我更新、高度增殖和多向分化潛能的細(xì)胞群體， 是形成人體各種組織、器官的“祖宗細(xì)胞”、“萬能細(xì)胞”。根據(jù)其發(fā)育階段可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞，根據(jù)分化潛能大小又可以分為全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞和單能干細(xì)胞。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是一類具有多向分化潛能的組織干細(xì)胞，可以從骨髓、外周血、脂肪及皮膚等多種組織中獲得，作為一類多能干細(xì)胞，它可以向成骨、軟骨、肌肉、神經(jīng)及胰島樣細(xì)胞等方向增殖分化。目前MSCs主要來源于成人骨髓， 但成人骨髓MSCs細(xì)胞數(shù)量及增殖分化潛能隨供體年齡的增加而下降，病毒感染率較高，且采集具有創(chuàng)傷，使其來源受限。最近，已開發(fā)出從臍帶或胎盤組織提取MSCs，它也是一類具有多向分化潛能的干細(xì)胞，越來越多的研究表明其極具開發(fā)潛質(zhì)，與骨髓MSCs相比具有明顯的優(yōu)勢(1)來源充足，取材方便，成本低廉；( 間充質(zhì)干細(xì)胞含量豐富，較為原始，分化能力強(qiáng)，可在體外進(jìn)行分離、培養(yǎng)，擴(kuò)增迅速，且生物學(xué)性狀穩(wěn)定，多次傳代擴(kuò)增仍能保持旺盛功能，可以提供充足的細(xì)胞來源；C3)免疫原性極低，免疫排斥的概率極低，且還具有一定的免疫抑制功能；(4)可以支持造血和促進(jìn)移植功能；( 旁分泌能力強(qiáng)，在增殖生長過程中會(huì)產(chǎn)生大量生物活性因子。干細(xì)胞不但可以產(chǎn)生或分泌大量的生物活性因子，而且干細(xì)胞內(nèi)也含有豐富的生物活性物質(zhì)，這些干細(xì)胞生物活性因子或物質(zhì)可有效調(diào)控機(jī)體細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、活化人體干細(xì)胞，進(jìn)而生理性修復(fù)或替代機(jī)體損傷、病變及衰老的細(xì)胞等。例如干細(xì)胞可以產(chǎn)生干細(xì)胞生長因子(SCF)、神經(jīng)生長因子(NGF)、基質(zhì)細(xì)胞源性生長因子(SDF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、胰島素樣生長因子(IGF)、表皮生長因子 (EGF)、白介素-6與白介素-7 (IL-6與IL-7)、巨核細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)、腫瘤壞死因子(TNF)、干擾素(IFN)等因子，這些細(xì)胞因子具有促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化、抗凋亡等功能；干細(xì)胞還可以產(chǎn)生天然免疫蛋白，例如IgG、IgA、IgM、IgD、IgE等，可以抵御或修復(fù)自身和外界因素對機(jī)體細(xì)胞造成的損傷。研究表明人體骨髓、血管、脂肪組織、骨骼肌、心臟和大腦，也包括在肺、肝、胰腺、 消化道、皮膚、視網(wǎng)膜、乳房、卵巢、前列腺和睪丸的上皮內(nèi)均可分離到相應(yīng)的干細(xì)胞。理論上，干細(xì)胞可以修復(fù)身體任何部位的組織缺損，可以利用干細(xì)胞去治療遺傳疾病、惡性疾病和退變性疾病等。2007年10月10日，國際干細(xì)胞權(quán)威雜志《Cell》系列刊物《Cell-Mem Cell》的一篇研究論文揭示干細(xì)胞功能下降可導(dǎo)致人類衰老，并證明干細(xì)胞衰老過程是受到外在和內(nèi)在因素共同調(diào)控的。因此，利用干細(xì)胞分泌產(chǎn)生的生物活性因子或干細(xì)胞內(nèi)的生物活性物質(zhì)激活機(jī)體干細(xì)胞，進(jìn)而通過自身干細(xì)胞生理性修復(fù)或替代機(jī)體損傷、病變及衰老的細(xì)胞，在疾病防治與保健美容領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。目前實(shí)際中利用的干細(xì)胞生物活性因子或物質(zhì)大多存在以下不足(1)直接利用胎盤等組織提取，致得到的干細(xì)胞生物活性因子或干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)純度低；( 利用含有動(dòng)物源成分的培養(yǎng)液進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)增(例如，使用胎牛血清)，提取的分泌物質(zhì)中不可避免的含有動(dòng)物來源的成分甚至含有存在于動(dòng)物體內(nèi)的特定病毒等，若應(yīng)用于臨床或保健美容則存在較大的安全隱患；C3)胚胎干細(xì)胞等在增殖分化過程不易控制，致瘤性大，提取此類干細(xì)胞的分泌物質(zhì)中可能含有使正常干細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的因子，而骨髓等組織的干細(xì)胞分化程度較高，開始表達(dá)相關(guān)人白細(xì)胞抗原，直接應(yīng)用可能會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)；(4)干細(xì)胞內(nèi)含有豐富的生物活性物質(zhì)，對干細(xì)胞的增殖分化等有重要作用，但在增殖分化過程這類物質(zhì)并不分泌到細(xì)胞外，實(shí)際中尚未出現(xiàn)提取間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)的專利技術(shù)。鑒于上，我們研究開發(fā)從人臍帶或胎盤組織中提取干細(xì)胞，利用無血清間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基(不含動(dòng)物源成分)進(jìn)行體外培養(yǎng)、擴(kuò)增，然后提取干細(xì)胞培養(yǎng)、擴(kuò)增過程中分泌的生物活性因子和干細(xì)胞內(nèi)的生物活性物質(zhì)，利用這類生物活性因子或生物活性物質(zhì)激活人體自身干細(xì)胞來生理性修復(fù)或替代機(jī)體損傷、病變和衰老的組織細(xì)胞。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是1、提供可以活化機(jī)體干細(xì)胞的生物活性因子群和干細(xì)胞的裂解液(其主要成分為干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)群)；2、提供干細(xì)胞分泌的生物活性因子和干細(xì)胞裂解液的制備方法；3、提供干細(xì)胞分泌的生物活性因子和干細(xì)胞裂解液的用途。本發(fā)明的技術(shù)方案如下從健康人的臍帶或胎盤組織中提取干細(xì)胞，利用無血清間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基(不含動(dòng)物源成分)進(jìn)行體外培養(yǎng)、擴(kuò)增，并維持干細(xì)胞的高增殖能力和穩(wěn)定性狀。收集臍帶或胎盤干細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)增過程中更換的廢液，并置于-80°C冰箱中保存；臍帶或胎盤干細(xì)胞體外最多傳代至第5代，此時(shí)收集的干細(xì)胞不但產(chǎn)量高、活性強(qiáng)，而且生物學(xué)性狀穩(wěn)定。將收集的廢液經(jīng)融化、低溫分離、超濾和濃縮即可得到含豐富生物活性因子的組合物；將收集的干細(xì)胞調(diào)整至合適濃度密封于凍存管中，經(jīng)超低溫液氮反復(fù)凍融至細(xì)胞破碎，再通過低溫分離、純化等現(xiàn)代生物技術(shù)手段，即可獲得高純度的干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)群或組合物即為高純度的干細(xì)胞裂解液。整個(gè)過程要求無細(xì)菌、真菌、病毒、衣原體和支原體等污染。本發(fā)明獲得的干細(xì)胞為間充質(zhì)干細(xì)胞，制備的生物活性因子或物質(zhì)富含干細(xì)胞因子群、多肽、天然免疫蛋白和核酸等，該生物活性因子或物質(zhì)群可促進(jìn)機(jī)體干細(xì)胞增殖、分化，活化機(jī)體干細(xì)胞，提高身體免疫力和抗衰老作用。該干細(xì)胞生物活性因子或物質(zhì)群組合物可制成針劑、涂劑、膏劑、霜?jiǎng)┗蚍蹌┑龋卺t(yī)學(xué)、保健和美容領(lǐng)域有極佳的應(yīng)用前景。本發(fā)明與現(xiàn)有產(chǎn)品或技術(shù)相比具有明顯優(yōu)勢第一，克服了現(xiàn)有技術(shù)直接從臍帶或胎盤等組織中提取的有效生物活性物質(zhì)純度、產(chǎn)量和活性不高的缺點(diǎn)，本發(fā)明從臍帶或胎盤組織提取的干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)、擴(kuò)增，收集高產(chǎn)量、高純度的干細(xì)胞，利用超低溫等現(xiàn)代技術(shù)進(jìn)行提取、分離、純化等，從而獲得高純度、高產(chǎn)量和高活性的干細(xì)胞生物活性因子或物質(zhì)；第二，克服了現(xiàn)有技術(shù)中利用含動(dòng)物源成分培養(yǎng)基的不足，因?yàn)槔煤袆?dòng)物源成分的培養(yǎng)基進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng)、擴(kuò)增(例如，使用胎牛血清)，提取的分泌物質(zhì)中不可避免的含有動(dòng)物來源的成分甚至含有存在于動(dòng)物體內(nèi)的特定病毒等，若應(yīng)用于臨床或保健美容則存在較大的安全隱患；第三，本發(fā)明干細(xì)胞來源為臍帶或胎盤組織間充質(zhì)干細(xì)胞，增殖分化能力強(qiáng)，易于控制，生物學(xué)性狀穩(wěn)定，且本發(fā)明所利用的干細(xì)胞嚴(yán)格控制在5代以內(nèi)(包括第5代)，將細(xì)胞非正常分化控制在最低范圍內(nèi)，從而保證了產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定；第四，本發(fā)明通過對干細(xì)胞的物理性裂解破碎，提取了干細(xì)胞內(nèi)的生物活性物質(zhì)，因?yàn)楦杉?xì)胞在增殖分化過程很多生物活性物質(zhì)并不分泌到細(xì)胞外，而這些物質(zhì)對干細(xì)胞的增殖分化等有著重要作用。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1、臍帶組織干細(xì)胞制備從健康人的臍帶組織提取干細(xì)胞，此干細(xì)胞主要為間充質(zhì)干細(xì)胞，獲得的干細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)、擴(kuò)增。原代細(xì)胞收集后按1 2比率進(jìn)行傳代培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞約80%匯合時(shí)，利用胰酶進(jìn)行消化、收集，按相同的比率進(jìn)行傳代，最多傳代培養(yǎng)至第5代，收集5代以內(nèi)(包括第5代)的細(xì)胞，此時(shí)收集的干細(xì)胞生物學(xué)性狀穩(wěn)定，增值能力強(qiáng)，同時(shí)收集培養(yǎng)、擴(kuò)增過程中更換的廢培養(yǎng)液于-80°C冰箱中保存。具體過程如下①采集健康人的臍帶；②去掉臍帶內(nèi)血管和外層薄膜；③將臍帶組織剪切成1 2mm3大小的小塊；④將剪切后小塊種植于加有無血清間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿(直徑為100mm)中，置于37°C、飽和濕度、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；⑤每3 4天半量換液，培養(yǎng)14 16天細(xì)胞生長約80%匯合，并收集更換的廢培養(yǎng)液于-80°C冰箱中保存；⑥當(dāng)細(xì)胞約80%匯合時(shí)，利用0. 25%胰酶對細(xì)胞進(jìn)行消化，以1 3X IO5ceIls/ml接種于培養(yǎng)皿中傳代培養(yǎng)，并收集更換的廢培養(yǎng)液于_80°C冰箱中保存；⑦當(dāng)細(xì)胞約80%匯合時(shí)，利用0. 25%胰酶對細(xì)胞進(jìn)行消化，收集第1代細(xì)胞，按1 2比率進(jìn)行傳代，置于37°C、飽和濕度、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，并收集更換的廢培養(yǎng)液于-80°C冰箱中保存；⑧若需多次傳代，重復(fù)步驟⑦即可；⑨分離、純化獲得高純度間充質(zhì)干細(xì)胞，利用FACS Calibur流式細(xì)胞儀分析其間充質(zhì)干細(xì)胞純度。實(shí)施例2、胎盤組織干細(xì)胞制備從健康人的胎盤組織提取干細(xì)胞，此干細(xì)胞主要為間充質(zhì)干細(xì)胞，獲得的干細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)、擴(kuò)增。原代細(xì)胞收集后按1 2比率進(jìn)行傳代培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞約80%匯合時(shí)，利用胰酶進(jìn)行消化、收集，按相同的比率進(jìn)行傳代，最多傳代培養(yǎng)至第5代，收集5代以內(nèi)(包括第5代)的細(xì)胞，此時(shí)收集的干細(xì)胞生物學(xué)性狀穩(wěn)定，增值能力強(qiáng)，同時(shí)收集培養(yǎng)、擴(kuò)增過程中更換的廢培養(yǎng)液于-80°C冰箱中保存。具體過程如下①采集健康人的胎盤羊膜下組織或絨毛膜組織；②PBS反復(fù)沖洗除去血跡；
③將胎盤羊膜下組織或絨毛膜組織剪切成1 2mm3大小的小塊；④將剪切后小塊種植于加有無血清間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿(直徑為100mm)中，置于37°C、飽和濕度、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； ⑤每3 4天半量換液，培養(yǎng)14 16天細(xì)胞生長約80 %匯合，并收集更換的廢培養(yǎng)液于-80°C冰箱中保存；⑥當(dāng)細(xì)胞約80%匯合時(shí)，利用0. 25%胰酶對細(xì)胞進(jìn)行消化，以1 3X IO5ceIls/ml接種于培養(yǎng)皿中傳代培養(yǎng)，并收集更換的廢培養(yǎng)液于_80°C冰箱中保存；⑦當(dāng)細(xì)胞約80%匯合時(shí)，利用0. 25%胰酶對細(xì)胞進(jìn)行消化，收集第1代細(xì)胞，按1 2比率進(jìn)行傳代，置于37°C、飽和濕度、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，并收集更換的廢培養(yǎng)液于-80°C冰箱中保存；⑧若需多次傳代，重復(fù)步驟⑦即可；⑨分離、純化獲得高純度間充質(zhì)干細(xì)胞，利用FACS Calibur流式細(xì)胞儀分析其間充質(zhì)干細(xì)胞純度。實(shí)施例3、臍帶或胎盤組織干細(xì)胞分泌的生物活性因子的制備將干細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)增過程中收集的廢液融化，混合，經(jīng)0. 25微米濾器過濾，再經(jīng)截留分子量為50KD中空纖維超濾柱超濾，將超濾后的液體進(jìn)行濃縮，即可得到含有豐富干細(xì)胞生物活性因子的組合物。實(shí)施例4、臍帶或胎盤組織干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)的制備將體外培養(yǎng)獲得的臍帶或胎盤組織干細(xì)胞濃度調(diào)整為5 X IO6 1 X IO7個(gè)/毫升密封于凍存管中，經(jīng)超低溫液氮反復(fù)凍融4 5次至細(xì)胞破碎，再通過低溫分離、純化等現(xiàn)代生物技術(shù)手段，便可獲得高純度的干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)群或組合物即為高純度的干細(xì)胞裂解液。該生物活性物質(zhì)群主要來自間充質(zhì)干細(xì)胞，包含但不限于干細(xì)胞生長因子(SCF)、神經(jīng)生長因子(NGF)、基質(zhì)細(xì)胞源性生長因子(SDF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、胰島素樣生長因子(IGF)、表皮生長因子(EGF)、白介素-6與白介素-7(IL-6與IL-7)、巨核細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)、腫瘤壞死因子(TNF)、干擾素(IFN)等因子、脫氧核糖核酸(DNA)及核糖核酸(RNA)、活性多肽、以及免疫蛋白IgG、IgA、IgM、IgD、IgE等等，這些物質(zhì)可以促進(jìn)機(jī)體干細(xì)胞生長、增殖，起到活化干細(xì)胞作用，從根本上調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能。實(shí)施例5、臍帶或胎盤組織干細(xì)胞分泌生物活性因子和干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)的活性驗(yàn)證將干細(xì)胞生物活性因子或干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)按15微克/毫升濃度加入到培養(yǎng)基中，并以此種濃度的培養(yǎng)基培養(yǎng)正常傳代至第8代的臍帶或胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞(此代細(xì)胞的增殖能力減弱，活性降低)，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)，并于第3天收集細(xì)胞，與對照組相比，添加干細(xì)胞生物活性因子或干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)的組別，間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力顯著增強(qiáng)。實(shí)施例6、臍帶或胎盤組織干細(xì)胞分泌生物活性因子和干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用將干細(xì)胞生物活性因子或干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)按10 50微克/毫升濃度加入到培養(yǎng)液中，因富含干細(xì)胞因子群，可以促進(jìn)體外培養(yǎng)干細(xì)胞的增殖分化，起到活化干細(xì)胞功能的效果。實(shí)施例7、臍帶或胎盤組織干細(xì)胞分泌生物活性因子和干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)在保健和美容領(lǐng)域中的應(yīng)用將干細(xì)胞生物活性因子或干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)按1 1000 1 10000比例加入特定食品中制成保健品，進(jìn)入于機(jī)體后可活化機(jī)體干細(xì)胞，修復(fù)或替代受損與衰老的細(xì)胞，改善新陳代謝，提高機(jī)體抵抗力，延緩衰老。將干細(xì)胞生物活性因子或干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)以10 20微克/毫升加入到化妝品中，外用于皮膚，可活化皮膚干細(xì)胞，促進(jìn)皮膚干細(xì)胞增殖、分化，修復(fù)或替代衰老的皮膚細(xì)胞，從根本上改變皮膚的生理機(jī)能。
權(quán)利要求
1.人源干細(xì)胞分泌生物活性因子與裂解液的制備與應(yīng)用，其特征是干細(xì)胞分泌生物活性因子與裂解液來源于臍帶組織或胎盤組織的干細(xì)胞，其內(nèi)富含干細(xì)胞因子群、活性多肽、 免疫蛋白和核酸等物質(zhì)，其制備方法為①提取人源干細(xì)胞一體外培養(yǎng)、擴(kuò)增一收集培養(yǎng)、擴(kuò)增過程中更換的廢培養(yǎng)液，并保存于-80°c冰箱一融化廢培養(yǎng)液并混合一低溫分離、超濾和濃縮一得到高純度干細(xì)胞分泌的生物活性因子群或組合物；②提取人源干細(xì)胞一體外培養(yǎng)、擴(kuò)增一收集干細(xì)胞經(jīng)超低溫液氮反復(fù)凍融至細(xì)胞破碎一低溫分離、純化一得到干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)群或組合物即為高純度干細(xì)胞裂解液，其兩者用途為醫(yī)學(xué)、保健和美容領(lǐng)域的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞，其特征是來源于健康人的臍帶組織或胎盤組織，經(jīng)體外培養(yǎng)、擴(kuò)增獲得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的干細(xì)胞，其特征是干細(xì)胞為間充質(zhì)干細(xì)胞。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的干細(xì)胞，其特征是臍帶或胎盤組織來源干細(xì)胞按1 2比率進(jìn)行傳代，最多培養(yǎng)至第5代，即收集5代以內(nèi)(包括第5代)的細(xì)胞，其細(xì)胞活性高且性狀穩(wěn)定。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的干細(xì)胞，其特征是培養(yǎng)、擴(kuò)增所用的特定培養(yǎng)基為無血清間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基(不含動(dòng)物源成分)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞分泌生物活性因子，其特征是臍帶或胎盤組織來源干細(xì)胞培養(yǎng)、擴(kuò)增過程中分泌的生物活性因子。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞裂解液，其特征是臍帶或胎盤組織來源干細(xì)胞經(jīng)內(nèi)的生物活性物質(zhì)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞分泌生物活性因子的制備方法，其特征是廢培養(yǎng)液經(jīng)低溫分離、50KD中空纖維超濾柱超濾和濃縮得到。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞裂解液的制備方法，其特征是干細(xì)胞經(jīng)超低溫液氮反復(fù)凍融4 5次至細(xì)胞破碎，再通過低溫分離、純化等現(xiàn)代生物技術(shù)手段得到。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞分泌生物活性因子和干細(xì)胞裂解液的醫(yī)學(xué)用途，其特征是干細(xì)胞分泌生物活性因子和干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)可以促進(jìn)干細(xì)胞增殖分化，通過活化機(jī)體干細(xì)胞，修復(fù)或替代受損、病變和衰老的細(xì)胞。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞分泌生物活性因子和干細(xì)胞裂解液的保健領(lǐng)域的用途，其特征是干細(xì)胞分泌生物活性因子和干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)以1 1000 1 10000 比例制成保健品，進(jìn)入人體后可以提高機(jī)體抵抗力，延緩衰老。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞分泌生物活性因子和干細(xì)胞裂解液的美容領(lǐng)域的用途，其特征是細(xì)胞分泌生物活性因子和干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)以10 20微克/毫升濃度加入到化妝品中，活化皮膚干細(xì)胞，從根本上改變皮膚的生理機(jī)能。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種人源干細(xì)胞分泌生物活性因子和裂解液的制備與應(yīng)用。其過程為提取健康人臍帶或胎盤組織的干細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)、擴(kuò)增，并利用低溫分離、純化等現(xiàn)代生物技術(shù)手段制備得到高純度、高活性的干細(xì)胞分泌生物活性因子和干細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)(即高純度干細(xì)胞裂解液)。本發(fā)明的生物活性因子或物質(zhì)中不含任何動(dòng)物源成分，利用此生物活性因子或物質(zhì)可開發(fā)成具有細(xì)胞生物學(xué)活性功能的產(chǎn)品，作用于人體后可活化機(jī)體干細(xì)胞，修復(fù)或替代受損、病變和衰老的細(xì)胞，具有調(diào)節(jié)機(jī)體細(xì)胞代謝功能，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，延緩衰老等功效。該人源生物活性因子或物質(zhì)在醫(yī)學(xué)、保健和美容領(lǐng)域極具應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A61Q19/00GK102586182SQ201010592660
公開日2012年7月18日 申請日期2010年12月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月17日
發(fā)明者張正前 申請人:張正前