一種海藻油的提取方法
【專利摘要】一種海藻油的提取方法屬海洋生物提取【技術(shù)領(lǐng)域】。按照以下步驟進(jìn)行：（1）藻體凍融破碎處理：球等鞭金藻冷凍干燥成海藻粉,-20℃下冷凍,45℃溫水浴中融化5min,反復(fù)2次制成海藻漿,鏡檢無完整藻體細(xì)胞；（2）海藻油提?。悍Q取海藻漿,按1:(4~12)的料液比加入體積比為1:(1~3)的乙醚/石油醚浸提劑,充氮?dú)饷芊夂笥?0~45℃，以150r/min)振搖，浸提2~7h;浸提物取上層液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀60℃,吹氮?dú)鈿夥罩姓羧ト軇?離心干燥得海藻油。（3）海藻油中加入羥甲基纖維素鈉，加入的質(zhì)量為海藻油的1-2%，攪拌均勻后紫外滅菌。本發(fā)明設(shè)備簡(jiǎn)單,能源消耗低,適合對(duì)光和熱較敏感的活性物質(zhì)的提取和較大規(guī)模的生產(chǎn)，海藻油得率搞到40.8%。
【專利說明】一種海藻油的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬海洋生物提取【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種海藻油的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]微藻蘊(yùn)量豐富種類繁多，地球上大約存在3萬多種不同門類的微藻。近年來的研究表明，微藻中存在著豐富的結(jié)構(gòu)獨(dú)特的有機(jī)化合物，如多不飽和脂肪酸、多糖、抗生素、毒素等，這些代謝產(chǎn)物具有多種多樣的生物活性。這些生物活性物質(zhì)是人類及動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育所必需的物質(zhì)，具有抗血栓、降血脂、防止血
小板聚結(jié)、舒張血管等功能，對(duì)心腦血管疾病、關(guān)節(jié)炎、腎炎等疾病有良好的防治作用。此外，這些生物活性物質(zhì)還能促進(jìn)腦細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育，改善大腦機(jī)能。作為食物鏈基礎(chǔ)的海洋微藻是EPA和DHA的最初生產(chǎn)者，動(dòng)物體內(nèi)的這些物質(zhì)也是從微藻中轉(zhuǎn)化而來。隨著海洋漁業(yè)資源的日益衰減，海洋微藻將成為人類獲得這些物質(zhì)的主要資源。
[0003]球等鞭金藻是一種分布廣泛的海洋浮游單細(xì)胞藻類，屬于金藻門，金藻綱，等鞭金藻目，等鞭金藻科，等鞭金藻屬。由于其個(gè)體小，繁殖快，營(yíng)養(yǎng)豐富，運(yùn)動(dòng)速度適中，又無含纖維素的細(xì)胞壁，易被貝類幼蟲捕捉、吞食和消化吸收，因而是海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)雙殼動(dòng)物幼蟲良好的基礎(chǔ)餌料。近來又有相關(guān)報(bào)道表明，球等鞭金藻富含η - 3多不飽和脂肪酸，尤其富含DHA和EPA，是一種具有DHA和EPA生產(chǎn)潛力的藻種。
[0004]目前，常采用的藻類油脂提取方法有:酸熱法、索氏提取法、超臨界C02萃取法(SCF- C02 )、有機(jī)溶劑法等。有機(jī)溶劑法中常見的溶劑主要有乙醚、異丙醚、氯仿、乙醚/乙醇、石油醚、氯仿/甲醇等。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供一種新的海藻油的提取方法，本發(fā)明一種海藻油的提取方法按照以下步驟進(jìn)行:
(1)藻體凍融破碎處理:球等鞭金藻冷凍干燥成海藻粉，-20°c下冷凍，45°C溫水浴中融化5m in,反復(fù)2次制成海藻漿，鏡檢無完整藻體細(xì)胞；
(2)海藻油提取:稱取海藻漿，按1:0-12)的料液比加入體積比為1:(廣3)的乙醚/石油醚浸提劑，充氮?dú)饷芊夂笥?(T45°C，以150 r /m in)振搖，浸提7h;浸提物取上層液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀60°C，吹氮?dú)鈿夥罩姓羧ト軇x心干燥得海藻油。
[0006](3)海藻油中加入羥甲基纖維素鈉，加入的質(zhì)量為海藻油的1_2%，攪拌均勻后紫外滅菌。
[0007]微藻中的活性物質(zhì)大多數(shù)存在于細(xì)胞內(nèi)，如何有效地破碎海藻細(xì)胞以充分釋放這些活性物質(zhì)是亟需解決的一個(gè)關(guān)鍵性問題。目前，主要破碎方法有研磨法、酸煮法、菌體自溶法(菌體在50°C下保溫3 d)、酶解法、反復(fù)凍融法、超聲波法等。本實(shí)驗(yàn)采用反復(fù)凍融破碎藻體，具有操作簡(jiǎn)便，不受外源性雜質(zhì)污染的特點(diǎn)，并且設(shè)備簡(jiǎn)單，能源消耗低，適合對(duì)光和熱較敏感的活性物質(zhì)的提取和較大規(guī)模的生產(chǎn)。經(jīng)過2次反復(fù)凍融處理，球等鞭金藻細(xì)胞的破碎率達(dá)99%以上。
[0008]在料液比、乙醚/石油醚體積比、提取溫度、提取時(shí)間4個(gè)因素中，乙醚/石油醚體積比對(duì)海藻油得率的影響最大，其次是提取溫度、料液比、提取時(shí)間。
[0009]本發(fā)明設(shè)備簡(jiǎn)單，能源消耗低，適合對(duì)光和熱較敏感的活性物質(zhì)的提取和較大規(guī)模的生產(chǎn),海藻油得率搞到40.8 %。
【具體實(shí)施方式】
[0010]球等鞭金藻原種購于中國(guó)海洋大學(xué)藻種庫，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室活化后用于實(shí)驗(yàn)藻種。石油醚、乙醚、乙醇、丙酮、尿素、氫氧化鉀、鹽酸均為市購。
[0011]實(shí)施例1
一種海藻油的提取方法按照以下步驟進(jìn)行:
(1)藻體凍融破碎處理:球等鞭金藻冷凍干燥成海藻粉，-20°c下冷凍，45°C溫水浴中融化5m in,反復(fù)2次制成海藻漿，鏡檢無完整藻體細(xì)胞；
(2)海藻油提取:稱取海藻漿，按1:12的料液比加入體積比為1:2的乙醚/石油醚浸提劑，充氮?dú)饷芊夂笥谝欢囟认掠?0°C,以150 r /m in速度振搖，于浸提5h;浸提物取上層液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀60°C，吹氮?dú)鈿夥罩姓羧ト軇?，離心干燥得海藻油。
[0012](3)海藻油中加入羥甲基纖維素鈉，加入的質(zhì)量為海藻油的1_2%，攪拌均勻后紫外滅菌。
[0013]經(jīng)檢測(cè)所得海藻油得率為40.8%。
[0014]實(shí)施例2
一種海藻油的提取方法按照以下步驟進(jìn)行:
(1)藻體凍融破碎處理:球等鞭金藻冷凍干燥成海藻粉，-20°C下冷凍，45°C溫水浴中融化5m in,反復(fù)2次制成海藻漿，鏡檢無完整藻體細(xì)胞；
(2)海藻油提取:稱取海藻漿，按1:4的料液比加入體積比為1:1的乙醚/石油醚浸提劑，充氮?dú)饷芊夂笥?(T45°C，以150 r /m in)振搖，浸提7h;浸提物取上層液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀60°C，吹氮?dú)鈿夥罩姓羧ト軇?，離心干燥得海藻油。
[0015](3)海藻油中加入羥甲基纖維素鈉，加入的質(zhì)量為海藻油的1_2%，攪拌均勻后紫外滅菌。
[0016]實(shí)施例3
一種海藻油的提取方法按照以下步驟進(jìn)行:
(1)藻體凍融破碎處理:球等鞭金藻冷凍干燥成海藻粉，-20°C下冷凍，45°C溫水浴中融化5m in,反復(fù)2次制成海藻漿，鏡檢無完整藻體細(xì)胞；
(2)海藻油提取:稱取海藻漿，按1:12的料液比加入體積比為1:2的乙醚/石油醚浸提劑，充氮?dú)饷芊夂笥?0°C,以150 r /m in)振搖,浸提2h;浸提物取上層液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀60°C，吹氮?dú)鈿夥罩姓羧ト軇?，離心干燥得海藻油。
[0017](3)海藻油中加入羥甲基纖維素鈉，加入的質(zhì)量為海藻油的1_2%，攪拌均勻后紫外滅菌。
【權(quán)利要求】
1.一種海藻油的提取方法，其特征在于按照以下步驟進(jìn)行: (1)藻體凍融破碎處理:球等鞭金藻冷凍干燥成海藻粉，-20°c下冷凍，45°C溫水浴中融化5m in,反復(fù)2次制成海藻漿，鏡檢無完整藻體細(xì)胞； (2)海藻油提取:稱取海藻漿，按1:0-12)的料液比加入體積比為1:(廣3)的乙醚/石油醚浸提劑，充氮?dú)饷芊夂笥?(T45°C，以150 r /m in)振搖，浸提7h;浸提物取上層液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀60°C，吹氮?dú)鈿夥罩姓羧ト軇x心干燥得海藻油； (3)海藻油中加 入羥甲基纖維素鈉，加入的質(zhì)量為海藻油的1_2%，攪拌均勻后紫外滅菌。
【文檔編號(hào)】C11B1/10GK103725406SQ201310621832
【公開日】2014年4月16日 申請(qǐng)日期:2013年11月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月30日
【發(fā)明者】陳宏 , 崔冰, 時(shí)慧, 劉晶營(yíng) 申請(qǐng)人:青島海之林生物科技開發(fā)有限公司