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      一種提取小球藻中油脂的方法

      文檔序號(hào):1456616閱讀:513來(lái)源:國(guó)知局
      一種提取小球藻中油脂的方法
      【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種提取小球藻中油脂的方法,屬于微藻生化工程【技術(shù)領(lǐng)域】,包括細(xì)胞破碎、萃取、制備藻油和回收小球藻細(xì)胞三個(gè)步驟。該方法不需要加入絮凝劑、不需要進(jìn)行濃縮、不需要進(jìn)行離心或者干燥制藻粉,具有提藻油工藝流程短、操作過(guò)程簡(jiǎn)單、提取時(shí)間短、能耗低、成本低、藻油收率高、適于直接從發(fā)酵液中提油的優(yōu)點(diǎn)。
      【專(zhuān)利說(shuō)明】一種提取小球藻中油脂的方法

      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001]本發(fā)明屬于微藻生化工程【技術(shù)領(lǐng)域】,具體涉及一種提取小球藻中油脂的方法。

      【背景技術(shù)】
      [0002]全球變暖和石油危機(jī)催生著低碳經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,替代能源的研究變得刻不容緩。微藻生物柴油作為一種新型綠色能源,由于能夠減少CO2的排放、脂質(zhì)含量高、產(chǎn)量高、土地占用面積小等優(yōu)點(diǎn),成為目前世界各國(guó)研究的熱點(diǎn)。
      [0003]利用小球藻進(jìn)行油脂生產(chǎn)是一個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)工程,涵蓋多個(gè)技術(shù)環(huán)節(jié),包括小球藻的篩選和培育、小球藻的規(guī)模培養(yǎng)、油脂的收集和加工等幾個(gè)方面。每個(gè)環(huán)節(jié)都對(duì)設(shè)備和生產(chǎn)水平有較高的要求。微藻胞壁堅(jiān)韌,細(xì)胞胞體較油料作物小,所以傳統(tǒng)的壓榨法、有機(jī)溶劑提取法往往很難實(shí)現(xiàn)微藻油脂的高效提取。因此探索適合微藻脂質(zhì)提取工藝方法是必要的。目前利用藻類(lèi)制備油脂整體成本都比較高,因此尋找工藝簡(jiǎn)單、能耗少、效率高的提取途徑關(guān)系到藻類(lèi)制備油脂前景。
      [0004]中國(guó)專(zhuān)利200810138499.7公開(kāi)了一種微生物油脂分離提取方法,但是該方法需要先在攪拌的狀態(tài)下使用分子篩對(duì)藻液進(jìn)行濃縮。這個(gè)過(guò)程需要消耗大量的時(shí)間、能量。另外回收分子篩的過(guò)程中,分子篩和藻細(xì)胞混在一起,會(huì)造成藻細(xì)胞的損失或分子篩的堵塞。在分子篩再生的過(guò)程中,還需要進(jìn)行加熱或減壓才能恢復(fù)分子篩的脫水性能,這個(gè)過(guò)程同樣需要消耗大量的能源,總體成本高,不利于推廣和工廠化生產(chǎn)。
      [0005]中國(guó)專(zhuān)利CN102559376B公開(kāi)了一種提取異養(yǎng)小球藻中性油脂的方法,但該方法需要先離心收集藻細(xì)胞,在整個(gè)離心的過(guò)程中需要消耗較多的能源。在異養(yǎng)小球藻的發(fā)酵過(guò)程中,會(huì)有部分藻細(xì)胞因溶氧、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏而死亡或自溶,生物量(干重)越高這種現(xiàn)象越明顯,當(dāng)生物量(干重)超過(guò)100g/L時(shí),其死亡或自溶量約占總量的20?35%。在離心時(shí)候,會(huì)發(fā)生分層:細(xì)胞碎片會(huì)集聚在最上方,中間是水,最下層是正常細(xì)胞。采用離心會(huì)導(dǎo)致死亡或自溶部分所產(chǎn)生的油脂損失。
      [0006]中國(guó)專(zhuān)利201210431210.7公開(kāi)了一種藻類(lèi)細(xì)胞中的生物油脂及其制備方法和應(yīng)用,該方法使用了臭氧與高壓共同處理藻細(xì)胞,不斷打壓、泄壓反復(fù)處理40?80次來(lái)達(dá)到細(xì)胞破碎的效果,這個(gè)過(guò)程操作麻煩能耗高,而且快速泄壓有較大的噪音。
      [0007]中國(guó)專(zhuān)利CN103725413A公開(kāi)了一種從小球藻中提取海藻油的方法,該方法通過(guò)反復(fù)凍融技術(shù)對(duì)小球藻進(jìn)行破壁處理,用乙醇做溶劑提取海藻油,操作簡(jiǎn)單、能耗小,但是破壁效果差,油脂提取率低。
      [0008]綜上所述,現(xiàn)有公開(kāi)的的藻油提取技術(shù),均存在工藝復(fù)雜、能耗較高、提取率低、提取速率慢的缺點(diǎn)。


      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0009]為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問(wèn)題,本發(fā)明提供了一種提取小球藻中油脂的方法,該方法不需要加入絮凝劑、不需要進(jìn)行濃縮、不需要進(jìn)行離心或者干燥制藻粉,具有提藻油工藝流程短、操作過(guò)程簡(jiǎn)單、提取時(shí)間短、能耗低、成本低、藻油收率高、適于直接從發(fā)酵液中提油的優(yōu)點(diǎn)。
      [0010]為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明提供的具體技術(shù)方案如下:
      [0011]一種提取小球藻中油脂的方法,包括以下步驟:
      [0012]I)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液,再加入纖維素酶,然后將超聲破碎儀的超聲探頭插入小球藻溶液中進(jìn)行細(xì)胞破碎;
      [0013]2)萃取:向上述步驟I)破碎后的小球藻溶液中加入疏水性有機(jī)溶劑對(duì)油脂成分進(jìn)行萃取,萃取過(guò)程繼續(xù)使用超聲破碎儀;
      [0014]3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂。
      [0015]所述步驟I)細(xì)胞破碎中,小球藻溶液濃度是I X 101°個(gè)藻細(xì)胞/mL。
      [0016]所述步驟I)細(xì)胞破碎中,纖維素酶加入量為I?5mg/lmL小球藻溶液,活性單位為20萬(wàn)。
      [0017]所述步驟I)細(xì)胞破碎中,超聲破碎儀功率為250W,探頭距離溶液底部I厘米。
      [0018]所述步驟I)細(xì)胞破碎中,反應(yīng)所需環(huán)境條件是25?35°C,pH 6.0。
      [0019]所述步驟I)細(xì)胞破碎中,細(xì)胞破碎時(shí)間是I小時(shí)。
      [0020]所述步驟2)萃取中,疏水性有機(jī)溶劑采用石油醚2 (沸程60?90°C ),添加量為小球藻溶液體積的1/2。
      [0021]所述步驟2)萃取中,萃取時(shí)間為I小時(shí),萃取溫度30?40°C,萃取過(guò)程中需要進(jìn)行振蕩。
      [0022]所述步驟2)萃取中,超聲破碎儀用法同步驟I)。
      [0023]本發(fā)明的有益之處是:
      [0024](I)不需要反復(fù)調(diào)節(jié)壓力和溫度、不需要加入絮凝劑、不需要進(jìn)行離心或者干燥制藻粉,而是直接進(jìn)行細(xì)胞破碎,破碎液在利用疏水性有機(jī)溶劑萃取時(shí)可以直接將里面的油脂萃取出來(lái),提藻油的工藝流程極短,只有三步就可以獲得藻油,藻油的提取率高,減少了工藝流程、減少了物料損失、減少了能源消耗。
      [0025](2)25?35°C,PH 6.0能夠保證油品的質(zhì)量和色澤,同時(shí)結(jié)合纖維素酶和超聲破碎儀,極大提高小球藻細(xì)胞破壁率和油脂提取率。
      [0026](3)回收的小球藻經(jīng)過(guò)破壁,其中所富含的各種營(yíng)養(yǎng)成分能夠完全釋放出來(lái)被人體吸收,用于小球藻產(chǎn)品制造,不會(huì)造成浪費(fèi),而且營(yíng)養(yǎng)價(jià)值更高。

      【具體實(shí)施方式】
      [0027]實(shí)施例1
      [0028]I)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液10mL,濃度是I X 101°個(gè)藻細(xì)胞/mL,再加入10mg活性單位為20萬(wàn)的纖維素酶,然后將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入小球藻溶液距離底部I厘米處,在25?35°C,pH 6.0環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)胞破碎I小時(shí),細(xì)胞破碎率為96.3% ;
      [0029]2)萃取:向上述步驟I)破碎后的小球藻溶液中加入疏水性有機(jī)溶劑石油醚2 (沸程60?90°C ) 50mL, 30?40°C溫度條件下對(duì)油脂成分萃取I小時(shí),萃取過(guò)程進(jìn)行間歇性振蕩;
      [0030]3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂,油脂提取率為 78.7%。
      [0031]實(shí)施例2
      [0032]I)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液10mL,濃度是I X 101°個(gè)藻細(xì)胞/mL,再加入300mg活性單位為20萬(wàn)的纖維素酶,然后將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入小球藻溶液距離底部I厘米處,在25?35°C,pH 6.0環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)胞破碎I小時(shí),測(cè)得細(xì)胞破碎率為99.2% ;
      [0033]2)萃取:向上述步驟I)破碎后的小球藻溶液中加入疏水性有機(jī)溶劑石油醚2 (沸程60?90°C ) 50mL, 30?40°C溫度條件下對(duì)油脂成分萃取I小時(shí),萃取過(guò)程進(jìn)行間歇性振蕩;
      [0034]3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂,油脂提取率為 86.4%o
      [0035]實(shí)施例3
      [0036]I)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液10mL,濃度是I X 101°個(gè)藻細(xì)胞/mL,再加入500mg活性單位為20萬(wàn)的纖維素酶,然后將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入小球藻溶液距離底部I厘米處,在25?35°C,pH 6.0環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)胞破碎I小時(shí),測(cè)得細(xì)胞破碎率為99.5% ;
      [0037]2)萃取:向上述步驟I)破碎后的小球藻溶液中加入疏水性有機(jī)溶劑石油醚2 (沸程60?90°C ) 50mL, 30?40°C溫度條件下對(duì)油脂成分萃取I小時(shí),萃取過(guò)程進(jìn)行間歇性振蕩;
      [0038]3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂,油脂提取率為 89.7%。
      [0039]實(shí)施例4
      [0040]I)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液10mL,濃度是I X 101°個(gè)藻細(xì)胞/mL,再加入10mg活性單位為20萬(wàn)的纖維素酶,在25?35°C,pH6.0環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)胞破碎I小時(shí),測(cè)得細(xì)胞破碎率為62.9% ;
      [0041]2)萃取:向上述步驟I)將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入破碎后的小球藻溶液距離底部I厘米處,然后加入疏水性有機(jī)溶劑石油醚2 (沸程60?90°C )50mL,30?40°C溫度條件下對(duì)油脂成分萃取I小時(shí),萃取過(guò)程進(jìn)行間歇性振蕩;
      [0042]3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂,油脂提取率為 81.6%。
      [0043]實(shí)施例5
      [0044]I)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液10mL,濃度是I X 101°個(gè)藻細(xì)胞/mL,再加入300mg活性單位為20萬(wàn)的纖維素酶,在25?35°C,pH6.0環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)胞破碎I小時(shí),測(cè)得細(xì)胞破碎率為68.1% ;
      [0045]2)萃取:向上述步驟I)將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入破碎后的小球藻溶液距離底部I厘米處,然后加入疏水性有機(jī)溶劑石油醚2 (沸程60?90°C )50mL,30?40°C溫度條件下對(duì)油脂成分萃取I小時(shí),萃取過(guò)程進(jìn)行間歇性振蕩;
      [0046]3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂,油脂提取率為 84.8%0
      [0047]實(shí)施例6
      [0048]I)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液10mL,濃度是I X 101°個(gè)藻細(xì)胞/mL,再加入300mg活性單位為20萬(wàn)的纖維素酶,在25?35°C,pH6.0環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)胞破碎I小時(shí),測(cè)得細(xì)胞破碎率為69.5% ;
      [0049]2)萃取:向上述步驟I)將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入破碎后的小球藻溶液距離底部I厘米處,然后加入疏水性有機(jī)溶劑石油醚2 (沸程60?90°C )50mL,30?40°C溫度條件下對(duì)油脂成分萃取I小時(shí),萃取過(guò)程進(jìn)行間歇性振蕩;
      [0050]3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂,油脂提取率為 88.7%。
      [0051]實(shí)施例7
      [0052]I)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液10mL,濃度是I X 101°個(gè)藻細(xì)胞/mL,再加入10mg活性單位為20萬(wàn)的纖維素酶,然后將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入小球藻溶液距離底部I厘米處,在25?35°C,pH 6.0環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)胞破碎I小時(shí),測(cè)得細(xì)胞破碎率為96.3% ;
      [0053]2)萃取:向上述步驟I)將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入破碎后的小球藻溶液距離底部I厘米處,然后加入疏水性有機(jī)溶劑石油醚2 (沸程60?90°C )50mL,30?40°C溫度條件下對(duì)油脂成分萃取I小時(shí),萃取過(guò)程進(jìn)行間歇性振蕩;
      [0054]3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂,油脂提取率為 87.2%。
      [0055]實(shí)施例8
      [0056]I)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液10mL,濃度是I X 101°個(gè)藻細(xì)胞/mL,再加入300mg活性單位為20萬(wàn)的纖維素酶,然后將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入小球藻溶液距離底部I厘米處,在25?35°C,pH 6.0環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)胞破碎I小時(shí),測(cè)得細(xì)胞破碎率為99.2% ;
      [0057]2)萃取:向上述步驟I)將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入破碎后的小球藻溶液距離底部I厘米處,然后加入疏水性有機(jī)溶劑石油醚2 (沸程60?90°C )50mL,30?40°C溫度條件下對(duì)油脂成分萃取I小時(shí),萃取過(guò)程進(jìn)行間歇性振蕩;
      [0058]3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂,油脂提取率為 95.6%。
      [0059]實(shí)施例9
      [0060]I)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液10mL,濃度是I X 101°個(gè)藻細(xì)胞/mL,再加入300mg活性單位為20萬(wàn)的纖維素酶,然后將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入小球藻溶液距離底部I厘米處,在25?35°C,pH 6.0環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)胞破碎I小時(shí),測(cè)得細(xì)胞破碎率為99.5% ;
      [0061]2)萃取:向上述步驟I)將功率為250W的超聲破碎儀的超聲探頭插入破碎后的小球藻溶液距離底部I厘米處,然后加入疏水性有機(jī)溶劑石油醚2 (沸程60?90°C )50mL,30?40°C溫度條件下對(duì)油脂成分萃取I小時(shí),萃取過(guò)程進(jìn)行間歇性振蕩;
      [0062]3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂,油脂提取率為 96.1%。
      [0063]上述實(shí)施例1、2、3是僅在細(xì)胞破碎過(guò)程中使用超聲破碎儀,纖維素酶的用量對(duì)小球藻細(xì)胞破碎率和油脂提取率的影響,可以看出,在其他因素相同的條件下,小球藻細(xì)胞破碎率和油脂提取率隨著纖維素酶用量的增加而增大,而纖維素酶用量在300mg和500mg時(shí),細(xì)胞破碎率和油脂提取率差異不明顯,因此纖維素酶的最佳用量為3mg/lmL小球藻溶液。
      [0064]實(shí)施例4、5、6是僅在萃取過(guò)程中使用超聲破碎儀,纖維素酶的用量對(duì)小球藻細(xì)胞破碎率和油脂提取率的影響,結(jié)果同上。
      [0065]實(shí)施例7、8、9是在細(xì)胞破碎和萃取兩個(gè)步驟中均使用超聲破碎儀,纖維素酶的用量對(duì)小球藻細(xì)胞破碎率和油脂提取率的影響,結(jié)果同上,但僅在細(xì)胞破碎過(guò)程中使用超聲破碎儀,油脂提取率較低,僅在萃取過(guò)程中使用超聲破碎儀,細(xì)胞破碎率和油脂提取率都較低,而在細(xì)胞破碎和萃取兩個(gè)步驟中均使用超聲破碎儀,細(xì)胞破碎率和油脂提取率都達(dá)到很聞水平,操細(xì)胞破壁率最聞可達(dá)到99.5%,油脂提取率最聞可達(dá)到96.1 %。
      [0066]綜上所述,本發(fā)明最佳的實(shí)施方案是實(shí)施例9所述方案。本發(fā)明不需要反復(fù)調(diào)節(jié)壓力和溫度、不需要加入絮凝劑、不需要進(jìn)行離心或者干燥制藻粉,而是直接進(jìn)行細(xì)胞破碎,破碎液在利用疏水性有機(jī)溶劑萃取時(shí)可以直接將里面的油脂萃取出來(lái),提藻油的工藝流程極短,只有三步就可以獲得藻油,藻油的提取率高,減少了工藝流程、減少了物料損失、減少了能源消耗,在25?35°C,PH 6.0條件下能夠保證油品的質(zhì)量和色澤,同時(shí)結(jié)合纖維素酶和超聲破碎儀,極大提高小球藻細(xì)胞破壁率和油脂提取率,回收的小球藻經(jīng)過(guò)破壁,其中所富含的各種營(yíng)養(yǎng)成分能夠完全釋放出來(lái)被人體吸收,用于小球藻產(chǎn)品制造,不會(huì)造成浪費(fèi),而且營(yíng)養(yǎng)價(jià)值更高。
      【權(quán)利要求】
      1.一種提取小球藻中油脂的方法,其特征在于,包括以下步驟: 1)細(xì)胞破碎:將新鮮小球藻與磷酸鹽緩沖溶液混合,配制成小球藻溶液,再加入纖維素酶,然后將超聲破碎儀的超聲探頭插入小球藻溶液中進(jìn)行細(xì)胞破碎; 2)萃取:向上述步驟I)破碎后的小球藻溶液中加入疏水性有機(jī)溶劑對(duì)油脂成分進(jìn)行萃取,萃取過(guò)程繼續(xù)使用超聲破碎儀; 3)制備藻油和回收小球藻細(xì)胞:萃取結(jié)束后,加入10%氫氧化鉀溶液沉淀小球藻細(xì)胞進(jìn)行回收,搖勻靜止10分鐘后收集上層有機(jī)相,然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得油脂。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取小球藻中油脂的方法,其特征在于,所述步驟I)中,小球藻溶液濃度是I X 1010個(gè)藻細(xì)胞/mL。
      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取小球藻中油脂的方法,其特征在于,所述步驟I)中,纖維素酶加入量為I?5mg/lmL小球藻溶液,活性單位為20萬(wàn)。
      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取小球藻中油脂的方法,其特征在于,所述步驟I)中,超聲破碎儀功率為250W,探頭距離溶液底部I厘米。
      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取小球藻中油脂的方法,其特征在于,所述步驟I)中,反應(yīng)所需環(huán)境條件是25?35°C,pH 6.0。
      6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取小球藻中油脂的方法,其特征在于,所述步驟I)中,細(xì)胞破碎時(shí)間是I小時(shí)。
      7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取小球藻中油脂的方法,其特征在于,所述步驟2)中,疏水性有機(jī)溶劑采用石油醚2 (沸程60?90°C ),添加量為小球藻溶液體積的1/2。
      8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取小球藻中油脂的方法,其特征在于,所述步驟2)中,萃取時(shí)間為I小時(shí),萃取溫度30?40°C,萃取過(guò)程中需要進(jìn)行振蕩。
      9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取小球藻中油脂的方法,其特征在于,所述步驟2)中,超聲破碎儀用法同步驟I)。
      【文檔編號(hào)】C11B1/04GK104312720SQ201410632017
      【公開(kāi)日】2015年1月28日 申請(qǐng)日期:2014年11月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月11日
      【發(fā)明者】白玉龍, 張國(guó)威 申請(qǐng)人:甘肅德福生物科技有限公司
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