專利名稱：穩(wěn)定接觸透鏡用處理劑的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及穩(wěn)定含蛋白酶的接觸透鏡用處理劑的方法，它包括將表面活性劑加至所述處理劑中。本發(fā)明還涉及含蛋白酶的接觸透鏡用的凍干的處理劑的生產(chǎn)方法，而且，本發(fā)明涉及含蛋白酶的凍干的接觸透鏡用處理劑。
接觸透鏡可分為硬接觸透鏡和軟接觸透鏡兩類。盡管硬接觸透鏡是非親水性的且透氧性較差，但近年來已開發(fā)出透氧性得到改善的硬接觸透鏡。這些透鏡同軟接觸透鏡一樣，易被蛋白質(zhì)等弄臟，需每天進(jìn)行清洗、滅菌和保存處理以增加維持透氧性的效應(yīng)。
附著在接觸透鏡表面的蛋白質(zhì)污垢可以通過已被推薦并實際使用的蛋白酶和各種清潔劑的作用分解和去除。然而蛋白酶在水中不穩(wěn)定，已采取多種措施來克服這個缺陷。例如已有含蛋白酶為主要成分的固體形式的藥劑，如片劑、顆粒劑、粉劑等，用戶在每次實際使用前將其溶于凈化水等中。這種每次使用時將固體清潔劑溶解的方法花費大，而且使用戶不得不進(jìn)行麻煩的操作。此外，所述的固態(tài)制劑往往具有較差的溶解性。已提出若干種穩(wěn)定處于溶液狀態(tài)的蛋白酶的方法以提供用于接觸透鏡的處理液。例如，日本專利公開第167726/1989號公開了含具有季銨基團(tuán)和羥基的水溶性聚合物和酶的保存液。該保存液清潔效果差，不足以用作清潔液。日本專利公開第159822/1988和180515/1989號還建議采用通過將蛋白酶加至含可與水混溶的有機(jī)液體的溶液中來穩(wěn)定該酶的方法。但該溶液的酶活性極低，以致無清潔作用。一些這類接觸透鏡用常規(guī)的酶穩(wěn)定的溶液需稀釋使用以達(dá)到高酶活性。該方法的缺點在于當(dāng)有機(jī)液體的濃度高時，蛋白酶缺乏活性;盡管當(dāng)用水稀釋時可以增強所述活性，但穩(wěn)定性卻降低了。
鑒于上述情況，作出了本發(fā)明，目的在于穩(wěn)定溶液(尤其是水溶液)中的蛋白酶，最終提供用一單一溶液就能同時對接觸透鏡進(jìn)行清潔、滅菌及保存的接觸透鏡用處理劑。
本發(fā)明的另一目的是在生產(chǎn)含蛋白酶的接觸透鏡用凍干的處理劑時，在將該處理劑凍干過程中穩(wěn)定所述蛋白酶。
本發(fā)明的再一個目的是提供含蛋白酶的接觸透鏡用處理劑，它可使所述蛋白酶保持穩(wěn)定。
本發(fā)明人觀察了穩(wěn)定能除去蛋白質(zhì)污垢的蛋白酶的方法并進(jìn)行了深入細(xì)致的研究，發(fā)現(xiàn)少量的表面活性劑能夠起到穩(wěn)定溶液中、尤其是在水溶液中的蛋白酶的作用。
如上所述，人們知道蛋白酶在水存在下失活。許多表面活性劑含水，為此，按照本領(lǐng)域的技術(shù)水平，當(dāng)這兩者共存時，推測蛋白酶會因含在表面活性劑中的水分而失活。由此看來，上述發(fā)現(xiàn)完全是意想不到的。
此外，本發(fā)明者發(fā)現(xiàn)將含蛋白酶的接觸透鏡用處理劑凍干足以去除水分，這也能獲得確保穩(wěn)定的蛋白酶;而且所述的凍干產(chǎn)物在使用時溶解性較佳。
然而，在制備凍干制劑時，甚至在制備含欲實施凍干處理的蛋白酶的液體組合物時，蛋白酶就可能失活，這樣就使得凍干處理劑的生產(chǎn)非常困難。具體來講，將通常裝在小瓶等中的含蛋白酶的水性溶液進(jìn)行凍干處理以獲得凍干制劑。在所述的操作過程中，將含蛋白酶的水性溶液裝入小瓶等中并將其冷凍則花費相當(dāng)長的時間，這使所述蛋白酶失活。
意想不到的是，本發(fā)明人現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)在生產(chǎn)凍干制劑過程中蛋白酶的失活可因表面活性劑的存在而顯著得到抑制。
也就是說，本發(fā)明涉及穩(wěn)定含蛋白酶的接觸透鏡用處理劑的方法，它包括將表面活性劑加至含有效量蛋白酶的溶液中，這樣便可以用單一溶液來清潔、滅菌和保存接觸透鏡。所述表面活性劑尤其是指至少一種選自陰離子表面活性劑、兩性表面活性劑和非離子表面活性劑的表面活性。
本發(fā)明還涉及生產(chǎn)含蛋白酶的接觸透鏡用凍干處理劑的方法，它包括對含蛋白酶的水性組合物在表面活性劑存在下進(jìn)行凍干處理。
此外，本發(fā)明涉及含蛋白酶和表面活性劑的接觸透鏡用的凍干處理劑。
用于本發(fā)明的表面活性劑的例子有非離子表面活性劑、陰離子表面活性劑和兩性表面活性劑?？蓪⑦@些表面活性劑以適當(dāng)合用的方式有效地使用。已知這些表面活性劑通常顯示抗菌作用，并具有清潔作用。
陰離子表面活性劑的例子有月桂酰肌氨酸鈉、月桂酰基-L-谷氨酸三乙醇胺和肉豆蔻基肌氨酸鈉;兩性表面活性劑的例子有月桂基二甲氨基乙酸甜菜堿、2-烷基-N-羧甲基-N-羥乙基咪唑啉鎓甜菜堿和鹽酸烷基二氨基甘氨酸;以及非離子表面活性劑的例子包括吐溫80、聚氧乙烯蓖麻油60、硬脂酸聚烴氧基酯40和聚氧乙烯月桂基醚。表面活性劑合用的例子有月桂?；?L-谷氨酸三乙醇胺(陰離子表面活性劑)和吐溫80(非離子表面活性劑);以及月桂?；?L-谷氨酸三乙醇胺(陰離子表面活性劑)和月桂基二甲氨基乙酸甜菜堿(兩性表面活性劑)。
所述表面活性劑的濃度為能使足夠的酶穩(wěn)定而對接觸透鏡無有害影響，優(yōu)選約0.01-10(W/V)%，更優(yōu)選約0.1-3(W/V)%。
用于本發(fā)明的蛋白酶的例子有得自植物的木瓜蛋白酶、得自動物的胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶以及得自芽胞桿菌屬的蛋白酶，根據(jù)需要來選擇。根據(jù)酶在液體中的穩(wěn)定性，最優(yōu)選的是得自屬于芽胞桿菌的微生物的蛋白酶，例如Bioprase(商標(biāo)，日本Nagase Seikagaku Kogyo K.K.制選)。在本發(fā)明中，蛋白酶的用量宜根據(jù)可獲得所需清潔效果的有效量來預(yù)測，優(yōu)選約10-5000單位/ml，更優(yōu)選約50-1000單位/ml;太小量則導(dǎo)致清潔作用不夠，太大量則在清潔透鏡時易引起皮膚疾病。
用本發(fā)明方法穩(wěn)定的接觸透鏡用處理劑的pH優(yōu)選4-8，以穩(wěn)定蛋白酶。
在本發(fā)明中，對接觸透鏡用處理劑的形式無特別限制，只要能將其在用時制成液體組合物就可以，例如液體制劑和可長時貯存并能在用時溶解的固體制劑。固體制劑的例子包括片劑、顆粒劑、粉劑和凍干產(chǎn)品。若從組合物的快速溶解性、穩(wěn)定性和均勻性方面來看，凍干產(chǎn)品是優(yōu)選的。注意上述表面活性劑和蛋白酶的量和pH是當(dāng)接觸透鏡用處理劑是固體制劑時，為將其制成接觸透鏡用液體處理劑時的量和pH;若為含蛋白酶的接觸透鏡用凍干處理劑，則為欲凍干的含蛋白酶的水性組合物中的量和pH。
就本發(fā)明而言，在接觸透鏡用處理劑的穩(wěn)定性不受損的情況下，所述處理劑可以含各種添加劑，例如常規(guī)用防腐劑(例如氯芐烷銨、Chlorohexyzine gluconate、對羥苯甲酸酯類、鹽酸烷基二氨乙基甘氨酸、氯丁醇、山梨酸)，pH調(diào)節(jié)劑(例如鹽酸、磷酸、硫酸、氫氧化鈉、氨)，緩沖劑(例如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽、三乙醇胺)，螯合劑，賦形劑如崩解劑和粘合劑，以及其它酶例如脂酶。
用本發(fā)明方法穩(wěn)定的接觸透鏡用處理劑的使用包括將從眼睛上取下的接觸鏡片放入液體處理劑(例如溶液狀態(tài)的本發(fā)明接觸透鏡用的處理劑)中，并浸泡1至12小時。通過所述浸泡，由于表面活性劑所具有的抗菌作用所獲得的滅菌作用的發(fā)揮，浸泡后，將所述接觸鏡片用自來水等沖洗，再戴上。已證實將所述溶液連續(xù)使用一周不會產(chǎn)生任何問題。
在本發(fā)明中，接觸透鏡有用的處理劑優(yōu)選是硬接觸透鏡用的處理劑。
順便提一句，甚至在制備欲進(jìn)行凍干處理的含蛋白酶的水性組合物時，蛋白酶就會失活。為避免所述失活問題，在本發(fā)明中，凍干制劑在表面活性劑存在下制備。凍干制劑例如按下述方法來制備。
將蛋白酶和表面活性劑溶于或分散于水中，優(yōu)選凈化水中。在進(jìn)行此項操作時，優(yōu)選低速攪拌溶解或分散，以抑制由表面活性劑所致發(fā)泡。
冷凍通常于-10至-40℃進(jìn)行。冷凍后干燥在不高于40℃的溫度下進(jìn)行。所述干燥優(yōu)選隨增溫來實施。
經(jīng)冷凍后于不高于40℃的溫度下進(jìn)行干燥，可以獲得使用時溶解性較佳的產(chǎn)品。
接觸透鏡用凍干處理劑使用前以凍干狀態(tài)貯存穩(wěn)定，使用時將其溶于水(優(yōu)選凈化水或注射用蒸餾水)中。蛋白酶和表面活性劑的濃度和液體組合物的pH優(yōu)選在上述范圍內(nèi)。因此，優(yōu)選的是應(yīng)將預(yù)定量的接觸透鏡用凍干處理劑和預(yù)定量溶解所述處理劑的水放在一個盒內(nèi)。不用說，溶于水中使用的處理劑的穩(wěn)定性由于表面活性劑的存在而得到改善。
下面用實施例詳述本發(fā)明，但它們對本發(fā)明并無限制。
實施例1將表1所示各成分溶于凈化水中，得到各樣品。將得到的各樣品在制備后立即測定酶含量，并在于30℃保存7天后測定酶含量。剩余活性(%)按下式計算。結(jié)果見表1。
剩余酶活性(%)＝ (于30℃保存7天的酶活性)/(制得樣品當(dāng)時的酶活性) ×100

如表1所示，將表面活性劑加到含蛋白酶的溶液中可顯著改善該蛋白酶的穩(wěn)定性。將硬接觸透鏡浸入各樣品(樣品1-12)中7天。結(jié)果未觀察到細(xì)菌顯著發(fā)育，而且使該硬接觸透鏡的濕潤度得以保持。
實施例2Bioprase1200單位月桂酰肌氨酸鈉0.03g月桂基二甲氨基乙酸甜菜堿(35%)0.05g月桂?；?L-谷氨酸三乙醇胺(30%)0.1g硼酸0.03g硼酸鈉0.018g乙二胺四乙酸鈉6mgChlorohexydine glaconate0.3mg硫代硫酸鈉0.015mg將凈化水(6ml)加至以上組成的凍干制劑中并將該混合物靜置5秒鐘。結(jié)果，該制劑被令人滿意地溶解了。得到無色、澄清的液體組合物。將得到的樣品于室溫靜置7天，并按實施例1測定剩余酶活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)剩余酶活性為93.9%，而且該液體組合物對類脂和蛋白質(zhì)污垢顯示出優(yōu)良的清潔作用。此外，未觀察到細(xì)菌顯著發(fā)育。
實施例3
Bioprase1200單位月桂酰肌氨酸鈉0.03g月桂基二甲氨基乙酸甜菜堿(35%)0.05g月桂酰基-L-谷氨酸三乙醇胺(30%)0.1g硼酸0.03g硼酸鈉0.018g乙二胺四乙酸鈉6mg對羥基苯甲酸甲酯6mg硫代硫酸鈉0.015mg按與實施例2相同的方法制備液體組合物，并對其進(jìn)行與實施例2相同的試驗。結(jié)果，剩余活性為95.1%，且該液體組合物顯示出對類脂和蛋白質(zhì)污垢具有優(yōu)良的清潔作用。此外，未觀察到細(xì)菌顯著發(fā)育。
實施例4Bioprase1200單位聚乙二醇40硬脂酸酯0.03g月桂酰基-L-谷氨酸三乙醇胺(30%)0.1g鹽酸烷基二氨乙基甘氨酸0.6mg硼酸0.03g硼酸鈉3mg乙二胺四乙酸鈉0.6mg將以上成分溶于6ml凈化水中，得到含蛋白酶的接觸透鏡用處理劑。對獲得的樣品進(jìn)行與實施例2相同的試驗，得到更佳的效果。
本發(fā)明的穩(wěn)定含蛋白酶的接觸透鏡用處理劑的方法使用于含蛋白酶的接觸透鏡用處理劑的蛋白酶在液體中得以穩(wěn)定保存。此外，用含蛋白酶的接觸透鏡用處理劑的單一溶液可同時進(jìn)行清潔、滅菌和保存。本發(fā)明處理劑僅通過將接觸透鏡浸入液體形式的處理劑中就能夠有效地去除污垢。因此，本發(fā)明處理劑通過簡單處理就能很容易地被有利使用，本發(fā)明的制備含蛋白酶的接觸透鏡用凍干處理劑的方法使蛋白酶在生產(chǎn)過程中能夠穩(wěn)定進(jìn)入凍干制劑中，因而提供在蛋白酶活性方面優(yōu)越的含蛋白酶的接觸透鏡用處理劑。此外，本發(fā)明的含蛋白酶的接觸透鏡用凍干處理劑能使所述蛋白酶保持穩(wěn)定，并在溶解性方面極佳。當(dāng)以水溶液形式保存時，該蛋白酶的穩(wěn)定性由于其中所所含的表面活性劑的作用可以被長時間保持。
權(quán)利要求
1.穩(wěn)定包含蛋白酶的接觸透鏡用處理劑的方法，它包括將表面活性劑加至該處理劑中。
2.權(quán)利要求1的方法，其中，表面活性劑是至少一種選自陰離子表面活性劑、兩性表面活性劑和非離子表面活性劑的表面活性劑。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其中表面活性劑以0.01-10(W/V)%的比例被包括。
4.權(quán)利要求1至3之任一方法，其中，蛋白酶以10-5000單位/ml的濃度被包括。
5.權(quán)利要求1至4之任一方法，其中，蛋白酶是來自屬于桿菌屬的微生物的Bioprase。
6.權(quán)利要求1至5之任一方法，它是用于硬接觸透鏡的。
7.制備包含蛋白酶的接觸透鏡用凍干處理劑的方法，它包括將含所述蛋白酶的水性組合物在表面活性劑存在下凍干。
8.權(quán)利要求7的方法，其中，冷凍在-40℃至-10℃的溫度下進(jìn)行。
9.權(quán)利要求7的方法，其中，冷凍后干燥在不高于40℃溫度進(jìn)行。
10.權(quán)利要求7的方法，其中，表面活性劑是至少一種選自陰離子表面活性劑、兩性表面活性劑和非離子表面活性劑的表面活性劑。
11.權(quán)利要求7的方法，其中表面活性劑以0.01-10(W/V)%的比例被包括。
12.包含蛋白酶和表面活性劑的接觸透鏡用凍干處理劑。
13.權(quán)利要求12的處理劑，其中，表面活性劑是至少一種選自陰離子表面活性劑、兩性表面活性劑和非離子表面活性劑的表面活性劑。
全文摘要
通過將表面活性劑加至含有效量蛋白酶的溶液中以穩(wěn)定含蛋白酶的接解透鏡用處理劑的方法和制備含蛋白酶的接觸透鏡用凍干處理劑的方法。本發(fā)明方法可使在液體中的蛋白酶得以穩(wěn)定保存。用單一溶液就能同時進(jìn)行清潔、滅菌和保存，而且僅通過將接觸透鏡浸入溶液狀態(tài)的所述處理劑中就能有效地去除污垢。制備本發(fā)明凍干處理劑的方法能使蛋白酶在制備過程中穩(wěn)定地進(jìn)入凍干制劑中。因此本發(fā)明凍干處理劑能使蛋白酶保持穩(wěn)定而且溶解性極佳。
文檔編號C11D1/94GK1105758SQ94107548
公開日1995年7月26日 申請日期1994年7月11日 優(yōu)先權(quán)日1993年7月14日
發(fā)明者中山久幸, 木元章博, 槌野訓(xùn)子 申請人:千壽制藥株式會社