專利名稱：一種降解偏二甲肼的微桿菌m18及其降解偏二甲肼的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及生物技術領域，尤其涉及一種降解偏二甲胼的微桿菌M18及其降解偏二甲胼的方法。
背景技術：
偏二甲胼，英文名為Unsymmetrical Dimethylhydrazine，簡稱 UDMH，分子式為 (CH3)2NNH2，偏二甲胼分子量為60. 11，沸點為63°C，凝固點為-57. 2°C，密度為0. 791g/cm3, 具有良好的親水性，可與水混溶，能和汽油、酒精以及其它有機溶劑混合使用。偏二甲胼是一種易燃、易揮發(fā)、具有強烈刺激性魚腥臭味的無色或微黃色透明液體。它熱值高、燃燒性能好，是一種性能優(yōu)異的火箭推進劑。我國長征系列火箭就是以偏二甲胼為主體燃料的。偏二甲胼在我國導彈、衛(wèi)星和神州系列飛船和嫦娥計劃等航天器的發(fā)射實驗中，發(fā)揮著重要的作用。偏二甲胼屬于高毒物質，易通過吸入、接觸和誤食等引起中毒。同時，它是一種致癌物質，能夠誘導機體產生腫瘤。長期接觸低濃度偏二甲胼，尤其是直接進行生產、貯運、轉注等相關工作的人員，隨工作年限增長，會出現(xiàn)不同程度的注意力不集中、記憶力減退、食欲不振、肝功能異常等癥狀。在火箭發(fā)射過程中，產生大量偏二甲胼廢水。偏二甲胼廢水的來源主要有以下兩種途徑，一是偏二甲胼貯罐、運輸車輛、管道的沖洗和管道的跑、冒、滴、漏；二是在發(fā)射火箭或導彈后，對四氧化二氮和偏二甲胼的燃燒產物進行消防冷卻后的廢水，以及試車過程中未燃燒的偏二甲胼隨消防水進入導流槽而產生的偏二甲胼廢水；三是突發(fā)事故中偏二甲胼發(fā)生泄漏時的洗消廢水等。廢水中的偏二甲胼本身存在一定的降解，但是降解速度緩慢。隨著我國軍事和民用航天事業(yè)的快速發(fā)展，大量的偏二甲胼投入使用，由此產生的廢水廢氣治理及其他環(huán)境問題引起了人們的極大關注。目前對偏二甲胼廢水的處理方法包括物理方法、化學方法、生物方法和一些新型的處理技術。這些偏二甲胼的處理方法存在能耗高、運行成本高、安全系數(shù)低、技術不成熟等問題。近年來的研究表明微生物降解偏二甲胼是可行的，關鍵是篩選和培養(yǎng)具有高效降解性能的微生物。

發(fā)明內容
為解決上述中存在的問題與缺陷，本發(fā)明提供了一種降解偏二甲胼的微桿菌M18 ； 并提供一種利用微桿菌M18降解偏二甲胼的方法?！N降解偏二甲胼的微桿菌M18，該微桿菌M18作為降解偏二甲胼的菌種，所述微桿菌M18的保藏編號為CGMCC No. 5187。上述微桿菌(MicrcAacterium)M18，已于2011年8月30日保藏于中國微生物菌種保藏管委理員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，保藏單位地址為中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No. 5187。采用微桿菌M18降解偏二甲胼的方法包括
將微桿菌M18的菌種接種于由胰蛋白胨、麥芽浸出膏、細菌蛋白胨、瓊脂構成的斜面培養(yǎng)基，得到斜面培養(yǎng)物；將所述斜面培養(yǎng)物接種于裝置有由胰蛋白胨、麥芽浸出膏、細菌蛋白胨構成的種子培養(yǎng)基的容器中，得到種子液；將所述種子液接種至裝置有由蔗糖、NaCl, K2HPO4, KH2PO4, MgSO4, CaCl2, FeSO4, H3B03、ZnSO4及偏二甲胼構成的底物溶液的容器中培養(yǎng)，并在轉速為100 200r/min，降解溫度為28 37°C下降解72小時。本發(fā)明提供的技術方案的有益效果是對偏二甲胼的降解率高達88. 06%。
具體實施例方式為使本發(fā)明的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚，下面對本發(fā)明實施方式作進一步地詳細描述實施例1本實施例提供了一種利用微桿菌M18降解偏二甲胼的方法，包括種子培養(yǎng)將所述微桿菌M18的菌種接種于斜面培養(yǎng)基，在M 37°C下培養(yǎng)12 30小時，得到斜面培養(yǎng)物。上述斜面培養(yǎng)基組成胰蛋白胨1 15g/L、麥芽浸出膏1 15g/ L、細菌蛋白胨1 15g/L和瓊脂15g/L。取生長良好的斜面培養(yǎng)物接種至裝有50 IOOmL種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中。 在搖瓶轉速為150 200r/min、培養(yǎng)溫度28 37°C的條件下，培養(yǎng)12 30小時，得到種子培養(yǎng)液。上述種子培養(yǎng)基組成胰蛋白胨1 15g/L、麥芽浸出膏1 15g/L和細菌蛋白胨 1 15g/L。降解偏二甲胼將15. 78mL種子液接種至裝有300mL底物溶液的IOOOmL三角瓶中，并攪拌轉速為140r/min，降解溫度為觀 37°C下降解72小時。上述底物溶液組成 蔗糖 0. 1 10g/L、NaCl 0. 5 10g/L、K2HPO4 0. 1 10g/L、KH2PO4 0. 1 10g/L、MgSO4 0. 1 5g/L、CaCl2 0. 001 0. lg/L,FeSO4 0. 001 0. 01g/L,H3BO3 0. 01 0. lmg/L,ZnSO4 0. 02 2mg/L 和偏二甲胼 10 300mg/L。上述斜面培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基及底物溶液的pH值為6 8。實施例2種子培養(yǎng)將所述微桿菌M18的菌種接種于由胰蛋白胨，麥芽浸出膏，細菌蛋白胨，瓊脂構成的斜面培養(yǎng)基，在27°C下培養(yǎng)M小時，得到斜面培養(yǎng)物；上述斜面培養(yǎng)基組成胰蛋白胨3g/L、麥芽浸出膏3g/L、細菌蛋白胨5g/L和瓊脂15g/L。取生長良好的斜面培養(yǎng)物接種至裝有IlOmL種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，在搖瓶轉速為200r/min、培養(yǎng)溫度30°C的條件下，培養(yǎng)18小時；上述種子培養(yǎng)基的組成胰蛋白胨3g/L、麥芽浸出膏3g/L和細菌蛋白胨5g/L。降解偏二甲胼將15. 78mL種子液接種至裝有300mL底物溶液的IOOOmL三角瓶中，并攪拌轉速為140r/min，降解溫度為36°C下降解72小時；上述底物溶液的組成蔗糖 lg/L、NaCl 5g/L、K2HPO4 lg/L、KH2PO4 lg/L、MgSO4 0. 2g/L、CaCl2 0. 01g/L、FeSO4 0. 005g/ L、H3BO3 0. lmg/L、ZnSO4 0. 2mg/L及偏二甲胼50mg/L。該實施例在底物降解完成后，利用
4GB/T14376對偏二甲胼的濃度進行檢測，檢測結果如表1所示表 1

權利要求
1.一種降解偏二甲胼的微桿菌M18，其特征在于，該微桿菌M18作為降解偏二甲胼的菌種，所述微桿菌M18的保藏編號為CGMCC No. 5187。
2.一種利用權利要求1降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述方法包括將微桿菌M18的菌種接種于由胰蛋白胨、麥芽浸出膏、細菌蛋白胨、瓊脂構成的斜面培養(yǎng)基，經培養(yǎng)得到斜面培養(yǎng)物；將所述斜面培養(yǎng)物接種于裝置有由胰蛋白胨、麥芽浸出膏、細菌蛋白胨構成的種子培養(yǎng)基的容器中，經培養(yǎng)得到種子液；將所述種子液接種至裝置有由蔗糖、NaCl、K2HPO4, KH2PO4, MgSO4, CaCl2, FeSO4, Η3Β03、 ZnSO4及偏二甲胼構成的底物溶液的容器中培養(yǎng)，并在轉速為100 200r/min，降解溫度為 28 37°C下降解72小時。
3.根據(jù)權利要求2所述的降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述接種于斜面培養(yǎng)基的微桿菌M18在溫度為M 37°C下培養(yǎng)12 30小時。
4.根據(jù)權利要求2所述的降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述斜面培養(yǎng)物接種至裝有50 IOOmL種子培養(yǎng)基的容器中，并在轉速為150 200r/min、培養(yǎng)溫度為28 37°C 的條件下培養(yǎng)12 30小時。
5.根據(jù)權利要求2所述的降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述種子培養(yǎng)液接種至裝有50 500mL底物溶液的容器中培養(yǎng)，且接種的種子液體積為加入種子培養(yǎng)液和底物溶液混合后總體積的3% 10%。
6.根據(jù)權利要求2所述的降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述斜面培養(yǎng)基中組分含量為胰蛋白胨1 15g/L、麥芽浸出膏1 15g/L、細菌蛋白胨1 15g/L及瓊脂15g/L ；所述種子培養(yǎng)基中組分含量為胰蛋白胨1 15g/L、麥芽浸出膏1 15g/L及細菌蛋白胨1 15g/L ；所述底物溶液中組分含量為蔗糖0. 1 10g/L、NaCl 0. 5 10g/L、K2HP04 0. 1 IOg/ L、KH2P04 0. 1 10g/L,MgSO4 0. 1 5g/L、CaCl2 0. 001 0. lg/L,FeSO4 0. 001 0. Olg/ L、H3BO3 0. 01 0. lmg/L、ZnSO4 0. 02 2mg/L 及偏二甲胼 10 300mg/L。
7.根據(jù)權利要求2或6所述的降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述斜面培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基及底物溶液的PH值為6 8。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種降解偏二甲肼的微桿菌M18，并提供了一種利用微桿菌M18降解偏二甲肼的方法。所述方法包括將微桿菌M18的菌種接種于由胰蛋白胨、麥芽浸出膏、細菌蛋白胨、瓊脂構成的斜面培養(yǎng)基，經培養(yǎng)得到斜面培養(yǎng)物；將所述斜面培養(yǎng)物接種于裝置有由胰蛋白胨、麥芽浸出膏、細菌蛋白胨構成的種子培養(yǎng)基的容器中，經培養(yǎng)得到種子液；將所述種子液接種至裝置有由蔗糖、NaCl、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4、CaCl2、FeSO4、H3BO3、ZnSO4及偏二甲肼構成的底物溶液的容器中培養(yǎng)，并在轉速為100～200r/min，降解溫度為28～37℃下降解72小時。本發(fā)明對偏二甲肼的降解率高達88.06％。
文檔編號A62D101/26GK102367426SQ201110322108
公開日2012年3月7日 申請日期2011年10月21日 優(yōu)先權日2011年10月21日
發(fā)明者叢繼信, 夏本立, 彭清濤, 曹巧玲, 曹曄, 王力, 范春華 申請人:中國人民解放軍總裝備部后勤部防疫大隊