專利名稱：：改良聚合物的方法及化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及改善聚合物物理性質(zhì)的方法及化合物。特別地，本發(fā)明涉及改善聚合物物理性質(zhì)的方法及化合物，其中把聚合物與一種賦予聚合物改善的流體、電學(xué)或強(qiáng)度性質(zhì)的，以下稱為“效應(yīng)物片段”的化合物結(jié)合。2.發(fā)明背景在日常生活中聚合物和包含聚合物的材料是很普遍的。天然聚合物包括如蛋白質(zhì)(包括角蛋白，它是毛發(fā)中的主要成分)、淀粉、果膠、瓜爾膠、殼多糖、木質(zhì)素、瓊脂、藻酸鹽、以及多糖如纖維素和半纖維素(包括木聚糖、甘露糖和阿拉伯糖)。常見(jiàn)的纖維素形式有，如以木材纖維或一年生作物纖維(如大麻、麥稈、水稻、亞麻、黃麻)為基礎(chǔ)的產(chǎn)品，如紙，和可為纖維、紗線、絲線或多種紡織和無(wú)紡織織物或紡織產(chǎn)品形式的棉制品。木糖是木聚糖的主成分，木聚糖為在草、谷類植物、麥稈、谷殼和木材中存在的也稱為半纖維素的物質(zhì)。淀粉存在于種子、果實(shí)、葉子、球莖等中?？捎枚喾N化學(xué)和物理處理方法改善聚合物和包含聚合物的材料的物理性質(zhì)。這些化學(xué)和物理處理方法可用于聚合物結(jié)構(gòu)本身的改善或包含聚合物的材料的整體性質(zhì)的改善。例如，通過(guò)向材料中混入處理劑如濕強(qiáng)度增強(qiáng)劑、干強(qiáng)度增強(qiáng)劑或其它改善材料物理性質(zhì)的化合物，可改善包含聚合物的材料的整體性質(zhì)。典型地，這些化合物和材料的混合并不能使化合物與聚合物緊密結(jié)合，因此會(huì)遇到化合物的浪費(fèi)和化合物從材料中滲出的問(wèn)題，從而導(dǎo)致材料性質(zhì)的不穩(wěn)定。通過(guò)一種其中使化合物的離子電荷與包含聚合物的材料的離子電荷相等并相反的電荷平衡規(guī)程可以減小化合物的滲出。然而在實(shí)際的體系中，兩種組分的電荷變化很大，需要仔細(xì)并且經(jīng)常地進(jìn)行控制?；衔锏母牧夹Ч惨蕾囉谂c聚合物的共價(jià)結(jié)合，以便獲得恰當(dāng)?shù)母牧夹ЧＡ硗猓瑸橐谆承┗瘜W(xué)物質(zhì)和材料的結(jié)合還需要促進(jìn)劑。此外，如可通過(guò)浸漬或印刷法把化合物涂于材料的表面。同樣典型地，化合物也不與材料的表面結(jié)合，并且也會(huì)遇到化合物從設(shè)計(jì)應(yīng)用位置擴(kuò)散的問(wèn)題。已知有多種非共價(jià)結(jié)合相互作用，例如抗體和抗原間的相互結(jié)合作用和生物素和抗生素蛋白或抗生蛋白鏈菌素間的相互結(jié)合作用。典型地，可改變酶底物的酶也依賴于與酶底物間的非共價(jià)相互結(jié)合作用以起作用。這類酶包括降解聚合物的酶，如蛋白酶、角蛋白酶、殼多糖酶、木質(zhì)素酶、瓊脂酶、藻朊酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、淀粉酶、纖維素酶和半纖維素酶。例如，纖維素酶和半纖維素酶可分別從纖維素和半纖維素上裂解下糖或多糖分子，淀粉酶可從淀粉上裂解下葡萄糖。纖維素與纖維素酶蛋白，特別是按具有催化活性的方式鍵合于纖維素纖維上的纖維素酶蛋白之間的相互作用已被描述和綜述(纖維素酶Beguin，Annu.Rev.Microbiol.，44，219-248，1990；纖維素酶和木聚糖酶Gilbert和Hazelwood，JournalofGeneralMicrobiology，139，187-194，1993)。這類酶包括其中包含功能獨(dú)特的蛋白質(zhì)域的纖維素酶和半纖維素酶。具體而言，有催化活性的域與纖維素鍵合域在結(jié)構(gòu)上是不同的。這些域具有進(jìn)化保守的序列，對(duì)所有該類蛋白質(zhì)均十分相似(Gilkes等人，MicrobiologicalReviews，303-315，June1991)。通過(guò)蛋白水解可把該類蛋白質(zhì)上的鍵合域和活性位域分離。已發(fā)現(xiàn)孤立的鍵合域仍保持鍵合能力(VanTilbeurgh等人，F(xiàn)EBSLetters，204(2)，223-227，August1986)。已有建議利用纖維素酶的纖維素鍵合域作為纖維素載體表面紋路的粗糙化處理手段，并建議利用纖維素酶活性位域作為這些表面紋路的拋光處理(國(guó)際專利申請(qǐng)WO93/05226)。很多鍵合域已從基因水平上進(jìn)行了指征(Ohmiya等人，MicrobialUtilisationofRenewalResource，8，162-181，1993)，并且已被亞克隆產(chǎn)生新型的融合蛋白(Kilburn等人，已公開(kāi)的國(guó)際專利申請(qǐng)WO90/00609；Ong等人，EnzymeMicrob.Technol，13，59-65，January1991；Shoseyov等人，已公開(kāi)的國(guó)際專利申請(qǐng)WO94/24158)。某些該類融合蛋白已在一些特殊應(yīng)用中用作錨定蛋白。通過(guò)融合蛋白與用于蛋白純化法中的纖維素載體材料的結(jié)合，這些蛋白被用作蛋白純化的助劑(Kilburn等人，美國(guó)專利5,137,819；Greenwood等人，BiotechnologyandBioengineering，44，1295-1305，1994)。融合蛋白固定在纖維素載體上的能力已被建議作為一種酶生物反應(yīng)器的固定方法(Ong等人，Bio/Technology，7，604-607，June1989；Le等人，EnzymeMicrob.Technol.，16，496-500，June1994)，和作為在纖維素載體上連接化學(xué)“標(biāo)簽”的方法(國(guó)際專利申請(qǐng)WO93/21331)。3.發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明提供一種處理聚合物的方法，使得選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其中包括通過(guò)用于獲得所述改善的蛋白聯(lián)接將效應(yīng)物片段結(jié)合在所述聚合物上，所述效應(yīng)物片段不同于所述蛋白聯(lián)接，而且所述蛋白聯(lián)接不同于所述聚合物，所述效應(yīng)物片段和所述蛋白聯(lián)接按獲得所述改善的有效量存在。應(yīng)認(rèn)識(shí)到聚合物可包括聚合分子或一種包含聚合分子的聚合材料。此外效應(yīng)物片段和蛋白聯(lián)接分別指至少一種效應(yīng)物片段和至少一種蛋白聯(lián)接。因此本發(fā)明包括一種處理聚合物的方法，使得選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其中包括通過(guò)用于獲得所述改善的至少一種蛋白聯(lián)接將至少一種效應(yīng)物片段結(jié)合在至少一種所述聚合物上，所述至少一種效應(yīng)物片段不同于所述至少一種蛋白聯(lián)接，所述至少一種蛋白聯(lián)接不同于所述至少一種聚合物，所述至少一種效應(yīng)物片段和所述至少一種蛋白聯(lián)接按獲得所述改善的有效量存在。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提供一種處理聚合物的方法，使得選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其中包括使效應(yīng)物片段和用于獲得所述改善的蛋白質(zhì)與所述聚合物接觸，所述效應(yīng)物片段不同于所述蛋白質(zhì)，所述蛋白質(zhì)不同于所述聚合物，所述效應(yīng)物片段和所述蛋白質(zhì)按獲得所述改善的有效量存在。本發(fā)明包括一種處理聚合物的方法，使得選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其中包括使至少一種效應(yīng)物片段和用于獲得所述改善的至少一種蛋白質(zhì)與至少一種所述聚合物接觸，所述至少一種效應(yīng)物片段不同于所述至少一種蛋白質(zhì)，所述至少一種蛋白質(zhì)不同于所述至少一種聚合物，所述至少一種效應(yīng)物片段和所述至少一種蛋白質(zhì)按獲得所述改善的有效量存在。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提供一種化學(xué)物質(zhì)組合物，包含a)一種效應(yīng)物片段；和b)一種可把所述效應(yīng)物片段結(jié)合到聚合物上的蛋白質(zhì)；其中所述效應(yīng)物片段不同于所述蛋白質(zhì)，所述組合物可使所述聚合物的選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善。本發(fā)明也提供包含一種聚合物的材料的組合物，而效應(yīng)物片段通過(guò)蛋白聯(lián)接結(jié)合在該聚合物上，所述效應(yīng)物片段不同于所述蛋白聯(lián)接，其中所述效應(yīng)物片段和所述蛋白聯(lián)接按有效量存在，使所述聚合物的選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提供一種處理紙或紙的組成纖維的方法，使選自流體，電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其中包括通過(guò)用于獲得所述改善的至少一種蛋白聯(lián)接將至少一種效應(yīng)物片段結(jié)合在所述紙或紙的組成纖維上，所述至少一種效應(yīng)物片段不同于所述至少一種蛋白聯(lián)接，所述至少一種蛋白聯(lián)接不同于所述紙或紙的組成纖維，所述至少一種效應(yīng)物片段和所述至少一種蛋白聯(lián)接按獲得所述改善的有效量存在。4.發(fā)明詳述本發(fā)明提供通過(guò)將可賦予所需性質(zhì)的效應(yīng)物片段結(jié)合在聚合物上以改善聚合物或包含聚合物的材料的流體、電學(xué)和/或強(qiáng)度性質(zhì)的方法和化合物。術(shù)語(yǔ)聚合物包括含聚合物的材料。含聚合物的材料可完全由聚合物組成或可包含聚合物并復(fù)合有其它成分。聚合物可包括具有任意單體單元數(shù)的任意聚合物。優(yōu)選地，聚合物包括天然聚合物或其化學(xué)修飾衍生物。例如，天然聚合物可包括蛋白質(zhì)如角蛋白，或多糖如淀粉、果膠、瓜爾膠、殼多糖、木質(zhì)素、瓊脂、藻酸鹽。優(yōu)選地，聚合物包含多糖。多糖可包括任意多糖，如甘露糖、木糖、纖維素或半纖維素，優(yōu)選為纖維素。包含纖維素的材料包括如木材纖維或一年生作物纖維(如大麻、麥稈、水稻、亞麻、黃麻)基材料，如紙。另外該材料也可包括纖維、絲線或紡織和無(wú)紡織織物、布或棉紙形式的棉制品。優(yōu)選地，所述材料包含紙?？刹捎帽景l(fā)明改善聚合物任意的流體、電學(xué)或強(qiáng)度性質(zhì)。被改善的聚合物性質(zhì)包括濕強(qiáng)度和干強(qiáng)度、施膠性能、疏水性、拒染性和防污性、流體滲透性、疏油和疏水性、電導(dǎo)和電阻、電容、pH和生物金屬性。本發(fā)明所采用的蛋白質(zhì)可包括任何可與聚合物結(jié)合的蛋白質(zhì)。優(yōu)選地，蛋白質(zhì)為可與聚合物結(jié)合的、離解常數(shù)(Kd)小于1×10-3M的。此處術(shù)語(yǔ)“蛋白質(zhì)”包括肽、低聚肽和多肽，以及蛋白質(zhì)殘基、含蛋白質(zhì)物質(zhì)、氨基酸鏈和含肽鍵分子。有時(shí)按上下文要求(如，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)鍵合于別的分子上時(shí))，蛋白質(zhì)指蛋白質(zhì)殘基。術(shù)語(yǔ)“蛋白聯(lián)接”指蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)殘基，效應(yīng)物片段通過(guò)它與聚合物聯(lián)接。蛋白質(zhì)可包括天然蛋白質(zhì)，或其片斷或用化學(xué)修飾或合成法制得的或通過(guò)編碼表達(dá)蛋白質(zhì)之遺傳改性的基因制得的改性蛋白質(zhì)。此處術(shù)語(yǔ)“改性蛋白質(zhì)”包括可與聚合物結(jié)合的蛋白質(zhì)的化學(xué)類似物。可與聚合物結(jié)合的蛋白質(zhì)的例子已為人所熟知，包括選自纖維素酶、半纖維素酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、蛋白酶、角蛋白酶、殼多糖酶、木質(zhì)素酶、瓊脂酶、藻朊酶和淀粉酶的酶。例如已知有多種結(jié)合于纖維素起作用的纖維酶。這些纖維素酶的例子為那些可從細(xì)菌如Cellulomonasfimi和霉菌如綠色木霉(Trichodermaviride)、黑色曲霉(Aspergillusniger)、繩狀青霉(Penicilliumfuniculosum)、Trichodermareesei和Humicolainsolens中分離的酶，它們可從SigmaChemicalSigma-AldrichCompanyLtd.、NovoNordiskA/S、BDHLtd.或ICNBiomedicalsLtd.購(gòu)得。另外，也可用如國(guó)際專利申請(qǐng)WO94/24158中公開(kāi)的重組DNA技術(shù)制備的蛋白質(zhì)。通常纖維素酶包含纖維素酶結(jié)合域和纖維素酶活性域。本發(fā)明可采用整個(gè)纖維素酶或其可與纖維素結(jié)合的片斷。利用蛋白酶如木瓜酶處理整個(gè)纖維素酶獲得纖維素酶結(jié)合域。本發(fā)明可采用外纖維酶和內(nèi)纖維素酶。優(yōu)選地，蛋白質(zhì)包括可與聚合物結(jié)合的天然酶。更優(yōu)選地，對(duì)于紙來(lái)說(shuō)其催化活性被失活。酶的催化活性可通過(guò)如聯(lián)接效應(yīng)物片段或酶交聯(lián)來(lái)失活。可采用適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)交聯(lián)劑如二醛例如戊二醛進(jìn)行酶交聯(lián)。優(yōu)選地，蛋白質(zhì)包括失活的天然纖維素酶。效應(yīng)物片段可以任何便利的方式結(jié)合于可與聚合物結(jié)合的蛋白質(zhì)上。例如，效應(yīng)物片段可通過(guò)效應(yīng)物片段和蛋白質(zhì)上的適當(dāng)反應(yīng)性官能團(tuán)直接共價(jià)鍵聯(lián)于蛋白質(zhì)。適當(dāng)反應(yīng)性官能團(tuán)的識(shí)別和，如果需要的話，為易化共價(jià)鍵聯(lián)對(duì)它們所做的化學(xué)修飾處于本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)人員的能力水平范圍內(nèi)。共價(jià)鍵構(gòu)成的例子包括通過(guò)羧基的碳化二亞胺或二甲基甲酰胺活化使羧基和胺基構(gòu)成酰胺鍵。效應(yīng)物片段可結(jié)合于聚合物結(jié)合蛋白質(zhì)的任意適當(dāng)部分。效應(yīng)物片段可結(jié)合于聚合物結(jié)合蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)N-端，例如通過(guò)N-端氨基。另外，它也可結(jié)合于蛋白質(zhì)的C-端，例如通過(guò)C-端羧基。此外，通過(guò)任選存在的官能團(tuán)，例如在蛋白質(zhì)氨基酸鏈中或其側(cè)鏈中或者為與效應(yīng)物片段結(jié)合而引入蛋白質(zhì)的官能團(tuán)，使效應(yīng)物片段結(jié)合于蛋白質(zhì)。例如，效應(yīng)物片段可通過(guò)胱氨酸中的巰基、絲氨酸或蘇氨酸中的羥基、賴氨酸或精氨酸中的氨基、天門(mén)冬酰胺或谷氨酰胺中的酰胺基、天門(mén)冬氨酸或谷氨酸中的羧基或苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸或組氨酸、或其衍生物中的芳基或雜芳基進(jìn)行聯(lián)接。效應(yīng)物片段可通過(guò)一種聯(lián)接劑聯(lián)接于蛋白質(zhì)。聯(lián)接劑可包括如可與蛋白質(zhì)反應(yīng)性位點(diǎn)和效應(yīng)物片段的反應(yīng)性位點(diǎn)反應(yīng)的雙官能團(tuán)分子，以使蛋白質(zhì)和效應(yīng)物片段聯(lián)接。在蛋白質(zhì)和效應(yīng)物片段間引入該聯(lián)接劑作為一種間隔基可能是有利的，這使得兩個(gè)物質(zhì)空間上足夠分離從而不立體影響各自的活性。在提供適當(dāng)?shù)穆?lián)接效應(yīng)物片段和蛋白質(zhì)的官能團(tuán)方面，聯(lián)接劑也是有利的。此外，或者也作為聯(lián)接劑的部分，可通過(guò)分子的非共價(jià)結(jié)合對(duì)把效應(yīng)物片段聯(lián)接于蛋白質(zhì)上。這樣的分子非共價(jià)結(jié)合對(duì)的例子包括生物素和抗生素蛋白、抗生蛋白鏈菌素或neutralite。因此，有一種可能性是效應(yīng)物片段共價(jià)聯(lián)接于抗生蛋白鏈菌素，而聚合物結(jié)合蛋白共價(jià)聯(lián)接于生物素。這些成分的結(jié)合易化了各組分的抗生蛋白鏈菌素和生物素部分的結(jié)合，因而使效應(yīng)物片段與聚合物結(jié)合蛋白質(zhì)聯(lián)接。應(yīng)認(rèn)識(shí)到效應(yīng)物片段-抗生蛋白鏈菌素組分可在蛋白組分結(jié)合于聚合物之前或之后與蛋白-生物素組分混合。還應(yīng)認(rèn)識(shí)到效應(yīng)物片段可共價(jià)聯(lián)接生物素，而蛋白質(zhì)共價(jià)聯(lián)接抗生素蛋白、抗生蛋白鏈菌素或neutralite應(yīng)認(rèn)識(shí)到可有一種以上類型的效應(yīng)物片段聯(lián)接于聚合物?？刹捎脙煞N或更多種類型的效應(yīng)物片段以強(qiáng)化各自的效果或者同時(shí)提供兩種或多種效果。應(yīng)認(rèn)識(shí)到通常效應(yīng)物片段可在聚合物結(jié)合蛋白結(jié)合于聚合物之前或之后與聚合物結(jié)合蛋白聯(lián)接。本發(fā)明的方法可包括把效應(yīng)物片段和蛋白質(zhì)的綴合物與聚合物接觸，或可包括把效應(yīng)物片段與蛋白質(zhì)和聚合物的綴合物相接觸。此外，可在一步法中原位完成效應(yīng)物片段和蛋白質(zhì)的聯(lián)接和蛋白質(zhì)與聚合物的聯(lián)接。本發(fā)明不對(duì)效應(yīng)物片段結(jié)合于蛋白聯(lián)接和蛋白聯(lián)接結(jié)合于聚合物的方式的精確性質(zhì)作界定。可通過(guò)化學(xué)鍵如共價(jià)鍵或通過(guò)非共價(jià)物理相互關(guān)系、聯(lián)接、聯(lián)系、吸引或親合進(jìn)行聯(lián)接。效應(yīng)物片段可包含任意能賦予所需物理性質(zhì)的片段。效應(yīng)物片段可包括能賦予所需物理性質(zhì)的一個(gè)原子、分子或化合物或其殘基。在一個(gè)實(shí)施方案中效應(yīng)物片段可包括能賦予所需物理性質(zhì)的化合物。例如，處理劑可包括濕強(qiáng)度增強(qiáng)劑如醛例如戊二醛或二醛淀粉、或其陽(yáng)離子衍生物、聚酰胺樹(shù)脂、聚丙烯酰胺共聚乙二醛、乙醛酰聚丙烯酰胺、聚乙烯亞胺、聚胺環(huán)氧氯丙烷聚合物、聚酰胺基胺環(huán)氧氯丙烷聚合物、脲甲醛和蜜胺甲醛的聚合物、合成膠乳、甲醛修飾的蛋白或其它用于增強(qiáng)紙濕強(qiáng)度的聚合物；干強(qiáng)度增強(qiáng)劑如淀粉、陰離子或陽(yáng)離子淀粉、聚丙烯酰胺、兩性、陰離子或陽(yáng)離子聚丙烯酰胺共聚物、陰離子或陽(yáng)離子瓜爾膠、刺槐豆膠、或其陽(yáng)離子或陰離子修飾物、聚乙烯醇、羧甲基纖維素；施膠劑如松香酸包括松香酸，加合松香酸包括皂化的富馬酸膠松香加合物，松香酸衍生物包括妥爾油，脂肪酸包括肉豆蔻酸、棕櫚酸或硬脂酸；其它疏水劑包括烯基琥珀酸酐(ASA)或2-氧雜環(huán)丁烷酮(2-oxetanone)化合物如烷基或炔基烯酮二聚物或多聚物(AKD)或ASA或AKD的衍生物、樹(shù)膠、加合樹(shù)膠、木材或妥爾油松香、鏈長(zhǎng)為約4至30個(gè)碳原子的直鏈或分枝飽和或不飽和羧酸、由羧酸制得的烷基乙烯酮二聚物、鏈長(zhǎng)為約4至30個(gè)碳原子的烷基琥珀酸酐、全氟代或部分氟代羧酸或其衍生的烷基乙烯酮二聚物、全氟代或部分氟代烷基琥珀酸酐；拒染或防污劑；疏油或疏水劑如氟代化合物包括氟代脂肪酸或ASA或AKD的氟代衍生物；柔軟劑如可破壞纖維氫鍵的處理劑包括表面活性劑、清潔劑、脂肪酰胺或酶制劑例如expansin(McQueen-Mason等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91，6574-6578(July1995))；提供導(dǎo)電性的試劑如金屬；可提供剛性的試劑；可提供吸收性能的試劑；可提供親水性的試劑；可改善密度的試劑；金屬化劑；可改善pH的制劑，如緩沖劑(例如用于增強(qiáng)抗酸降解的能力)。在另一實(shí)施方案中，效應(yīng)物片段可包括交聯(lián)劑或骨架形成劑或其殘基，它本身可用于改善聚合物的物理性質(zhì)，或可用于改善蛋白質(zhì)的性質(zhì)從而改善聚合物的性質(zhì)，或可用于引入其它改善聚合物物理性質(zhì)的制劑。優(yōu)選的交聯(lián)骨架形成劑的例子包括二醛，如戊二醛。例如二醛如戊二醛可使纖維素酶衍生蛋白形成骨架。纖維素酶/戊二醛骨架使紙有改善的濕強(qiáng)度和干強(qiáng)度，對(duì)紙施膠和/或可引入其它試劑如TiO2或CaCO3。用于造紙的化合物的詳細(xì)綜述由Robert等人作出(PaperChemistry，ChapmanHallNewYork，1991)，其整個(gè)內(nèi)容在此用作參考。該參考文獻(xiàn)特別綜述了助留劑、濕強(qiáng)度添加劑、干強(qiáng)度添加劑、施膠劑和填料。此處述語(yǔ)“紙”是指任何結(jié)合的片狀或網(wǎng)狀材料，包含纖維素交織成的網(wǎng)絡(luò)，其中包含源于植物的纖維并任選地混入多種配比的來(lái)源于植物、礦物、動(dòng)物或合成的纖維，以及任選地混入多種配比的無(wú)機(jī)材料細(xì)粒，如金屬元素的氧化物、碳酸鹽和硫酸鹽。術(shù)語(yǔ)“紙”包括紙片或網(wǎng)重量大于200g/m2的紙板。纖維素的植物來(lái)源包括木材、麥稈、甘蔗渣、針茅、竹、卡納夫纖維、草、黃麻、苧麻、大麻、棉、亞麻。粗的植物源纖維素被加工制成紙漿，然后利用機(jī)械方法、或化學(xué)方法或兩者兼施地由該紙漿造紙。根據(jù)紙漿的制備和純化方法分類，含纖維素的紙漿可被分為機(jī)械紙漿、化學(xué)機(jī)械和預(yù)熱法木片化學(xué)磨木漿、半化學(xué)紙漿、高得率化學(xué)紙漿、全化學(xué)紙漿(參見(jiàn)“紙漿和紙，化學(xué)和化學(xué)技術(shù)(Pulpandpaper，ChemistryandChemicalTechnology)”，第三版，第1卷，第164、165頁(yè)，由JamesP.Cassay編輯，ISBN0-471-03175-5(V.1))。效應(yīng)物片段可在任何適當(dāng)?shù)木酆衔锘蚝酆衔锏牟牧现圃旌图庸るA段中加到聚合物中。如果效應(yīng)物片段應(yīng)用于紙，效應(yīng)物片段可在紙漿階段中添加或在形成濕紙漿骨架過(guò)程或在擠壓并卷骨架構(gòu)成紙的過(guò)程中的任何階段添加。另外，也可把效應(yīng)物片段加到已制成的紙產(chǎn)品上，例如，把紙浸到含有用以連接效應(yīng)物片段之試劑的浴中或利用適當(dāng)?shù)膰娡俊⑼磕?、刷涂、涂布或印刷法把效?yīng)物片段聯(lián)接于已成形的紙上。如果效應(yīng)物片段應(yīng)用于棉制品，效應(yīng)物片段可在任何棉織品加工階段添加。它可聯(lián)接于棉織品、絲線、紗線或紡織或無(wú)紡織布或織物上。例如，把材料浸到含有用以連接效應(yīng)物片段之試劑的浴中或利用適當(dāng)?shù)膰娡?、涂抹、刷涂、涂布或印刷法?lián)接效應(yīng)物片段。在制造聚合物或含聚合物的材料時(shí)，通過(guò)選擇聯(lián)接效應(yīng)物片段的時(shí)機(jī)，可控制效應(yīng)物片段分布于聚合物材料中或基本上局限于材料的表面上。對(duì)于效應(yīng)物片段用于改善材料整體性質(zhì)的情況，保證效應(yīng)物片段在材料中均勻分布是有利的。因此，效應(yīng)物片段應(yīng)在早期制造階段聯(lián)接。例如當(dāng)效應(yīng)物片段用于改善紙的整體性質(zhì)時(shí)，在造紙過(guò)程中，效應(yīng)物片段應(yīng)在紙漿階段中加入。對(duì)于效應(yīng)物片段用于改善材料表面性質(zhì)的情況，可把效應(yīng)物片段充分限制于材料表面水平上，其伴隨的好處是減小了所需效應(yīng)物片段的用量。因此，優(yōu)選地，效應(yīng)物片段應(yīng)在制造的晚期階段加入。例如當(dāng)效應(yīng)物片段用于改善紙的表面性質(zhì)時(shí)，在造紙過(guò)程中，效應(yīng)物片段應(yīng)涂于紙的表面。依賴于用途需要，對(duì)紙的一個(gè)或二個(gè)平表面涂效應(yīng)物片段。例如用包含濕強(qiáng)度劑的效應(yīng)物片段處理紙的兩個(gè)表面，而余下其一個(gè)或多個(gè)邊緣不處理，這易化了夾層結(jié)構(gòu)的制備，在該結(jié)構(gòu)中具有差的濕強(qiáng)度性質(zhì)以及好的液體吸收性能的紙層被夾在二層具有好的濕強(qiáng)度性能的紙層中。這樣的結(jié)構(gòu)可通過(guò)其中間層的毛細(xì)作用傳遞液體，在浸入型診斷試紙條的制造中特別有用。本發(fā)明的一個(gè)特別的方面是以可逆轉(zhuǎn)方式改善聚合物或含聚合物材料的物理性質(zhì)的能力。常規(guī)處理聚合物賦予特殊的物理性質(zhì)的方法常常是不可逆轉(zhuǎn)的。而且常規(guī)處理方法常常使聚合物不適于再生。對(duì)于紙的再生如果用常規(guī)濕強(qiáng)度增強(qiáng)劑處理，把紙重新制漿是更困難的或者是不可能的。本發(fā)明提供使效應(yīng)物片段釋放、材料再生的方法。例如通過(guò)可裂解在聚合物上聯(lián)有效應(yīng)物片段的蛋白質(zhì)的蛋白酶處理，可把效應(yīng)物片段從含聚合物的材料上釋放出來(lái)；另外，通過(guò)選擇性可裂解聯(lián)接劑可把效應(yīng)物片段聯(lián)于蛋白質(zhì)；可用淀粉酶裂解交聯(lián)劑如醛取代的淀粉。本發(fā)明的另一好處是所需物理性質(zhì)基本上被立即賦予到材料上。在常規(guī)的賦予紙濕強(qiáng)度的處理法中，需要幾周的熱處理和老化。以下將用圖和實(shí)施例作參考描述本發(fā)明。在圖中圖1顯示纖維素酶濃度對(duì)戊二醛交聯(lián)的纖維素酶賦予的濕強(qiáng)度的影響；圖2顯示戊二醛濃度對(duì)戊二醛交聯(lián)的纖維素酶賦予的濕強(qiáng)度的影響；圖3顯示pH對(duì)戊二醛交聯(lián)的纖維素酶賦予的濕強(qiáng)度的影響；圖4顯示溫度對(duì)戊二醛交聯(lián)的纖維素酶賦予的濕強(qiáng)度的影響；圖5顯示溫育時(shí)間對(duì)戊二醛交聯(lián)的纖維素酶賦予的濕強(qiáng)度的影響；圖6顯示預(yù)溫育時(shí)間對(duì)戊二醛交聯(lián)的纖維素酶賦予的濕強(qiáng)度的影響；圖7顯示戊二醛交聯(lián)的纖維素酶對(duì)由不同木紙漿制成的紙的濕強(qiáng)度的影響。應(yīng)認(rèn)識(shí)到以下僅為實(shí)施例，并且在本發(fā)明范圍可對(duì)細(xì)節(jié)作修正。實(shí)驗(yàn)效應(yīng)物片段聯(lián)接的原理和操作下列定義的規(guī)程代表特征化使用纖維素酶作為生物橋連劑把效應(yīng)物片段連于纖維素的技術(shù)。初始材料的制備使用1/3濃度的磷酸鹽緩沖鹽水(1/3PBS)。以下為1/3PBS的配方200升去離子水或脫礦質(zhì)水(DEMI水)197g無(wú)水磷酸二氫鈉(NaH2PO4)767g無(wú)水磷酸氫二鈉(Na2HPO4)389g氯化鈉(NaCl)無(wú)水材料不是必須的，但對(duì)于含水鹽應(yīng)扣除“結(jié)晶水”重新計(jì)算所述重量。所采用的纖維素酶來(lái)源于霉菌，可以水溶液或凍干粉末形式得到。繩狀青霉源于繩狀青霉的纖維素酶(SigmaAldrichCo.Ltd.，Poole，Dorset，U.K.)可以褐色粉末得到，應(yīng)在0℃以下貯藏。當(dāng)用作手抄紙的添加劑時(shí)，首先在1/3PBS中把該纖維素酶制成20％總固形物溶液。在一個(gè)大的淺底燒杯中放入200g干的酶制劑。接著向其中緩慢加入800g1/3PBS。用玻棒慢慢攪拌混合物。由于會(huì)使酶變性，不要?jiǎng)×覕嚢枞芤阂苑稚⒎勰?。任何酶制劑塊均可用玻棒輕輕打破。如果在使用前一天制備酶溶液，需把它在4℃下貯藏。Trichodermareesei源于Trichodermareesei的纖維素酶可從SigmaAldrichCo.Ltd.，Poole，Dorset，U.K.按粉末形式或可從NovoNordiskA/S，Bagsvaerd，Denmark按水溶液形式獲得。當(dāng)使用粉末時(shí)，也采用此處制備Penicilliumfuniculosum水溶液的方法和操作。以酶溶液中總蛋白含量為計(jì)(如每100份干纖維加10份干蛋白)把纖維素酶溶液加到原料中。用CoomassieBrilliantBlueG250染料(Sedmak和Grassberg(AnalyticalBiochemistry，79，544-552(1997))使蛋白染色，用UV吸收(＝620nm)測(cè)量制成的纖維素酶溶液的總蛋白含量。1、纖維素酶結(jié)合纖維的試驗(yàn)把纖維素樣品(典型地在25-500mg之間，常為100mg)，例如微晶纖維素(Avicel，SigmaCell)或未施膠紙漿稱入到一系列試管/燒瓶中。把纖維素酶溶液(典型地，在3ml緩沖液中，每ml含200-600mg蛋白)加到各個(gè)試管中。在結(jié)合試驗(yàn)的開(kāi)始首先用Sedmak和Grassberg發(fā)展的測(cè)試法測(cè)量所加蛋白的精確濃度(AnalyticalBiochemistry，79，544-552(1977))。在所需溫度下振搖試管(典型地在4℃-30℃之間，通常為室溫)一段時(shí)間(典型地為1-90min，通常在5-15min之間)。接著取樣(0.5-1ml)進(jìn)行試驗(yàn)。使用臺(tái)式微型離心機(jī)在1mlEppendorf管中把樣品離心5分鐘，保留上清液用于測(cè)定上清液中殘留蛋白的濃度(未結(jié)合的纖維素酶)。用初始蛋白濃度減去上清液蛋白濃度表示結(jié)合于纖維素團(tuán)的纖維素蛋白酶量。在試驗(yàn)中采用牛血清白蛋白(BSA)作為對(duì)照。結(jié)果用結(jié)合纖維素蛋白的量占所加蛋白的百分比或結(jié)合纖維素蛋白的量占蛋白/纖維素的百分比(％w/w)表示。2、使用化學(xué)發(fā)光法顯現(xiàn)效應(yīng)物片段的聯(lián)接用于ECL檢測(cè)體系的纖維素蛋白酶的制備1.纖維素酶的生物素化制備生物素酰胺基N-羥基琥珀酰亞胺酯(BcapNHS)的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液(1mg/ml)。在蒸餾水中制備纖維素酶的溶液(77mg/ml)。把1ml纖維素酶溶液加到1mlBcapNHS溶液中，振搖下把混合物室溫溫育2.5小時(shí)。接著把反應(yīng)液用500ml1/3PBS緩沖液(PBS，pH7.5Na2HPO4，11.5g；NaH2PO4，2.96g；NaCl，5.84g用蒸餾水稀釋至1L)充分滲析1小時(shí)。2.生物素化的纖維素酶與紙片的結(jié)合[把纖維素酶應(yīng)用于紙片的表面]振搖下于4℃在一淺底培養(yǎng)皿中把一個(gè)未施膠紙片，通常為2cm2，和在1/3PBS中的蛋白濃度范圍為0.05至100μg蛋白ml-1的生物素化的纖維酶(10ml)一起溫育45分鐘至2小時(shí)。也進(jìn)行使用含吐溫20(0.1％vv-1)的PBS的實(shí)驗(yàn)。3.生物素化的纖維素酶與紙漿的結(jié)合和隨后的紙片制備[把纖維素酶應(yīng)用于紙基體中]紙漿和在含吐溫20(0.1％vv-1)的1/3PBS中的生物素化纖維素酶于振搖下室溫一起溫育45分鐘。使用造紙濾網(wǎng)由紙漿-生物素化纖維素酶制紙片。把紙片從濾網(wǎng)上取下，卷起并干燥過(guò)夜。4.HRP標(biāo)記的抗生蛋白鏈菌素與生物素化纖維素酶的結(jié)合按制造商的推薦(AmershamLed.，Amersham，U.K.；Whitehaead，T.P.等人，Clin.Chem.26，1531-1546，1997)進(jìn)行HRP標(biāo)記的抗生蛋白鏈菌素的結(jié)合以及生物素化纖維素酶的ECL檢測(cè)。振搖下于4℃或室溫把紙與在PBS中的奶粉(4％wv-1)一起溫育45分鐘以掩蔽HRP抗生蛋白鏈菌素綴合物的非特征結(jié)合。接著用在含吐溫20(0.1％vv-1)的1/3PBS中的0.5％(wv-1)奶粉清洗紙片3×3分鐘。在每次清洗后棄去溶液并換入新溶液。使用在含吐溫20(0.1％vv-1)的1/3PBS中的0.5％(wv-1)奶粉制成1∶1000的辣根過(guò)氧化酶(HRP)-抗生蛋白鏈菌素綴合物溶液。加入適量體積(2至10ml)溶液覆蓋紙片，接著在振搖下于4℃溫育45分鐘。用在含吐溫20(0.1％vv-1)的1/3PBS中的0.5％(wv-1)奶粉清洗紙片3×5分鐘。在每次清洗后棄去溶液并換入新溶液。接著用1/3PBS清洗紙片3×5分鐘。在每次清洗后棄去溶液并換入新溶液。接著結(jié)合有纖維素酶-生物素-HRP-抗生蛋白鏈菌素綴合物的纖維素可用ECL法顯影，或用OPD法定量。3、增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光(ECL)法該方法需在照相暗室中進(jìn)行。AmershamECL檢測(cè)試劑1+2等體積混合(用量約為0.13ml/cm2紙)。接著把過(guò)量的緩沖液從紙上除去并加入檢測(cè)試劑完全覆蓋紙表面。不攪拌把紙?jiān)谑覝叵虑『脺赜?分鐘。接著把檢測(cè)試劑除去并把紙夾在兩片衛(wèi)生紙中吸干多余試劑。接著把吸干的紙轉(zhuǎn)移至一片粘貼性膜上并纏繞確保除去任何的氣包。把紙放入一個(gè)膜盒中，使溫育紙和將紙曝光到上膜上之間的延遲最小化。該膜被仔細(xì)地置于紙的頂部，確保曝光中膜不被移動(dòng)把該膜曝光15秒。接著除去第一層膜并立即換上隨后要曝光1分鐘的紙的第二層膜。接著立即把膜顯影以顯示結(jié)果。如果需要可用1至60分鐘曝光其它膜片。4、定量檢測(cè)結(jié)合纖維素的效應(yīng)物片段的(OPD)法把1片OPD片(60mg；鄰苯二胺二鹽酸鹽，SigmaChemicals，UK)溶于150ml0.06M磷酸鹽-檸檬酸鹽緩沖液(0.2MNa2HPO4，121.5ml；0.1M檸檬酸121.5ml用蒸餾水稀釋至500ml，并把pH調(diào)至5.0)制備底物緩沖液，所得最終OPD濃度為0.4mgml-1。注意該試劑是光敏性的。恰好在使用前每25ml底物緩沖鹽中加入10μl新鮮30％H2O2。把含生物素化纖維素酶的紙樣置于50mlFalcon管中。把25ml配好的底物緩沖液加到試管中，并在室溫下振搖30秒至20分鐘，通常為5至15分鐘，接著加入1ml3MH2SO4終止反應(yīng)。接著在492nm處測(cè)量吸光度，為計(jì)算處于紙上或紙中的生物素化纖維素酶的濃度，參考OD491對(duì)生物素化纖維素酶濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。5、使用碳化二亞胺把紙效應(yīng)物片段與酶肽鏈聯(lián)接碳化二亞胺與羧基反應(yīng)形成活化羧基。接著氨基進(jìn)攻活化羧基構(gòu)成肽鍵。該化學(xué)反應(yīng)用于把含游離羧基的紙效應(yīng)物片段與肽上的氨基相連。用于將紙的效應(yīng)物片段與纖維素酶連接的碳化二亞胺的化學(xué)基于常規(guī)方法(Hoare等人J.Biol.Chem，242(10)，2447-2453，1967)。在下述方法中，用松香酸偶聯(lián)纖維素酶。把纖維素酶(21mgml-1)溶于蒸餾水中，把松香酸(100mg)溶于25ml10％(vv-1)甲醇中。在1.0ml松香酸溶液中加入0.5ml1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳化二亞胺-HCl(WS-CDI；63mgml-1)，并用HCl(0.1N)把pH調(diào)至4.5±0.5。接著在室溫下攪拌混合物(5min)。加入2ml纖維素酶溶液，并把混合物在室溫下攪拌(16hr)。加入乙酸鈉和多余松香酸(0.1M；pH5.0)終止反應(yīng)，通過(guò)在磷酸鹽緩沖液中完全滲析除去WS-CDI。接著按所述方法用已偶聯(lián)的纖維素酶將松香酸橋聯(lián)在纖維素上。6、用戊二醛交聯(lián)之纖維素酶證明濕抗拉強(qiáng)度性質(zhì)已進(jìn)行把戊二醛交聯(lián)的纖維素酶應(yīng)用于未施膠紙漿中的實(shí)驗(yàn)，并證明了其可賦予紙片濕強(qiáng)度性質(zhì)。按以下方法制備未施膠紙漿把10g未施膠紙切成1cm2的方塊并在家用草藥磨(CH100，KenwoodLtd.UK)中用100ml蒸餾水將其浸軟3分鐘。取出2.15g未施膠紙漿(10％wv-1)，其中含0.2g纖維素，并進(jìn)行下列添加1、10ml1/3濃度磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)，pH7.0作為參考。2、10ml含T.reesei纖維素酶(2mgml-1)的1/3PBS3、10ml含戊二醛(25μlml-1)的1/3PBS4a、10ml含T.reesei纖維素酶(2mgml-1)和戊二醛(25μlml-1)的1/3PBS，其中在加入紙漿前于室溫下共同溫育1小時(shí)。4b、10ml含T.reesei纖維素酶(2mgml-1)和戊二醛(25μlml-1)的1/3PBS，直接加至紙漿中。在制成紙片前所有樣品均在水平搖床中室溫溫育1小時(shí)。為制備測(cè)試紙片，用蒸餾水使容積增至100ml，按下列方式利用實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的造紙儀器制備紙片(6cm2)將紙漿懸浮液(0.2％WV-1)倒進(jìn)裝有細(xì)尼龍過(guò)濾篩網(wǎng)的塑料過(guò)濾箱中。加真空幾秒鐘使紙漿構(gòu)成由篩網(wǎng)支撐的紙片。把過(guò)濾篩網(wǎng)從儀器中取出，紙片被夾在第二片尼龍篩網(wǎng)中并用吸水紙吸水。把紙片仔細(xì)地從成紙篩網(wǎng)上取下，用輥壓展平接著干燥。按下列方法測(cè)定濕強(qiáng)度；A、紙?jiān)谒械姆€(wěn)定性把各測(cè)量紙片的樣品(1.5cm2)置于Universal瓶中并分別加入25ml蒸餾水。振搖試管并周期性檢查紙樣完整性喪失的跡象。結(jié)果列于表1中。表1紙樣在水中穩(wěn)定性的檢測(cè)</tables>在表1中，“-”指不適用實(shí)驗(yàn)的B、紙強(qiáng)度取各測(cè)試紙片樣品(4cm×1cm)并把25μl蒸餾水滴到紙的中部以確保均勻分布。把紙懸掛在兩個(gè)帶套管的夾子中，并在底部夾子上安裝一容器。向容器中加水并稱量使紙撕裂所需水的重量。結(jié)果列于表2中，證明用戊二醛交聯(lián)纖維素酶制備的紙樣具有最大濕抗拉強(qiáng)度。表2紙強(qiáng)度的測(cè)定</tables>用BSA作對(duì)照重新測(cè)試紙樣的濕強(qiáng)度，以評(píng)價(jià)橋聯(lián)蛋白質(zhì)作用的特異性。按下述制備紙樣1、10ml1/3濃度磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)，pH7.02、10ml含T.reesei纖維素酶(2mgml-1)的1/3PBS3、10ml含戊二醛(25μlml-1)的1/3PBS4、10ml含BSA(2mgml-1的1/3PBS)5、10ml含T.reesei纖維素酶(2mgml-1)和戊二醛(25μlml-1)的1/3PBS，在紙片制備前加到紙漿中并在水平搖床上室溫溫育1小時(shí)。6、10ml含BSA(2mgml-1)和戊二醛(25μlml-1)的1/3PBS，在紙片制備前加到紙漿中并在水平搖床上室溫溫育1小時(shí)。把紙樣和25ml水加到50mlUniversal瓶中，并用實(shí)驗(yàn)室用混合器渦旋直至紙樣完全解體。結(jié)果列于表3中。表3在水中渦旋混合時(shí)紙穩(wěn)定性的證明</tables>與對(duì)照相比，雖然使用交聯(lián)BSA(樣品6)制備的紙樣顯示濕抗拉強(qiáng)度增加，但它要比戊二醛交聯(lián)纖維素酶小100倍。為確定改善濕強(qiáng)度的戊二醛/纖維素酶處理法的最佳條件，依次變動(dòng)下列參數(shù)。對(duì)于本工作對(duì)照參數(shù)定為纖維素酶(2mgml-1)、戊二醛(0.6％vv-1)分別加到紙漿中；在25℃下把紙漿懸浮于緩沖液(pH7.0)中。在紙片制備前將混合物溫育60分鐘。下面依次變動(dòng)各參數(shù)纖維素酶(0.5至8mgml-1)；戊二醛(0.1至2.5vv-1)；pH(5.0至10.0)；溫度25℃、37℃和45℃；溫育時(shí)間(5至120分鐘)；纖維素酶和戊二醛的預(yù)溫育時(shí)間(15至60分鐘)。在濕抗拉強(qiáng)度測(cè)定前所有紙片在室溫下干燥過(guò)夜。結(jié)果列于圖1至6中。7、用不同類型紙漿證明戊二醛交聯(lián)纖維素酶(GCC)-濕抗拉強(qiáng)度性能把GCC-濕強(qiáng)度組合物應(yīng)用于用不同類型紙漿制備的紙上磨木漿(GWP)、預(yù)熱法木片化學(xué)磨木漿(CTMP)、闊葉木漿(HWP)、針葉木漿(SWP)和未施膠紙漿(W-LP；70％HW30％SW)。紙漿按常規(guī)方法制備，當(dāng)然，在混合以促進(jìn)纖維分散前應(yīng)將GWP和CTMP紙漿浸入水中過(guò)夜。紙漿用PBS緩沖液(10ml)；或PBS緩沖液(10ml)+纖維素酶(20ml)+戊二醛(0.6％vv-1)處理。接著在濕抗拉強(qiáng)度測(cè)試前按所述方法把紙漿樣品制成測(cè)試紙片(6cm2)。結(jié)果列于表4中并在圖7中用圖形表示。結(jié)果表明所有被測(cè)試紙漿的濕抗拉強(qiáng)度均得以改善。使用GWP或CTMP制備的紙片的最終強(qiáng)度要比用HWP、SWP和W-LP制備的大。但GCC組合物在HWP和SWP樣品中產(chǎn)生出的濕抗拉強(qiáng)度有更大百分比的增加。表4不同紙漿制成的紙片的濕抗拉強(qiáng)度</tables>完全破壞所需的時(shí)間8、戊二醛交聯(lián)纖維素酶賦予濕抗拉強(qiáng)度可逆性的證明為證明由戊二醛交聯(lián)纖維素酶賦予的濕抗拉強(qiáng)度的可逆性，用下列SigmaChemical-AldrichCompanyLtd.，F(xiàn)ancyRoad，Poole，Dorset，BH177NH供應(yīng)的酶制劑制備下列蛋白酶溶液無(wú)花果蛋白酶(在pH6.5PBS緩沖液中的4μlml-1溶液)；木瓜酶(在pH6.5PBS緩沖液中的5μlml-1溶液)；蛋白酶K(在pH8.0PBS緩沖液中的2.8mgml-1溶液)；α-胰凝乳蛋白酶(在pH8.0PBS緩沖液中的1.0mgml-1溶液)。取用戊二醛交聯(lián)纖維素酶增強(qiáng)的未施膠紙漿制成的紙片(1.5×1.5cm)并按表5所列處理方法溫育。表5濕強(qiáng)度可逆性處理方法</tables>樣品在水平搖床中于70rpm、30℃下溫育。在4小時(shí)和20小時(shí)時(shí)檢測(cè)樣品，在20小時(shí)后渦旋混合10秒觀察紙是否保持完整。重復(fù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果列于表6中。表6不同處理方法中紙破壞的測(cè)定定性觀測(cè)結(jié)果用任意標(biāo)度0至XXXX表示，其中0代表紙沒(méi)有可見(jiàn)破損，XXXX代表紙完全破壞；----代表測(cè)試前紙完整性即喪失。9、確定蛋白酶處理對(duì)由戊二醛交聯(lián)纖維素酶濕強(qiáng)度增強(qiáng)紙之可再生性的影響采用戊二醛交聯(lián)纖維素酶濕強(qiáng)度增強(qiáng)未施膠紙漿(0.2g)或未用任何濕強(qiáng)度增強(qiáng)劑處理的紙漿(0.2g)制成的紙進(jìn)行一系列處理。處理1把用戊二醛交聯(lián)纖維素酶濕強(qiáng)度增強(qiáng)的紙漿制成的紙片(0.2g)切成1cm×1cm的方塊，并與含蛋白酶K(14mg)的20ml0.2m磷酸鹽緩沖液(pH8.0)置于一培養(yǎng)皿中。振搖(60rpm)下于37℃把樣品溫育2小時(shí)。接著把紙片取出并浸到磷酸鹽緩沖液(pH8.0)中，接著放入到含20ml新鮮磷酸鹽緩沖液(pH8.0)的Universal瓶中。把樣品渦旋混合以浸軟紙。任何在最初溫育時(shí)殘留于培養(yǎng)皿中的纖維均在6,000rpm下離心收集，用磷酸鹽緩沖液(pH8.0)洗滌并加到Universal瓶中的浸軟的樣品中。加入2mlT.reesei纖維素酶(10mgml-1)和0.5ml戊二醛溶液(25％)，把樣品在25℃下溫育60分鐘。接著用該樣品制備新的紙片。處理2把由不加任何濕強(qiáng)度增強(qiáng)劑僅用PBS制成的紙漿制備的未施膠紙片(0.2g)和10ml1/3濃度PBS置于一Universal瓶中。把樣品渦旋混合以浸軟紙，所得紙漿用以制備新的紙片。處理3由戊二醛交聯(lián)纖維素酶濕強(qiáng)度增強(qiáng)的紙漿制成的紙片(0.4g)和30ml1/3濃度PBS置于一混合器中浸軟。取出所得紙漿并制成新的紙片。處理4把用戊二醛交聯(lián)纖維素酶濕強(qiáng)度增強(qiáng)的紙漿制成的紙片(0.2g)切成1cm2的片然后與30ml1/3濃度PBS置于一混合器中浸軟。加入2mgT.reesei纖維素酶(10mgml-1)和0.5ml戊二醛溶液(25％)，把樣品在25℃下溫育60分鐘。接著用該樣品制備新的紙片。在使用渦流混合器把1cm2的樣品在水中破壞以測(cè)試其完整性之前，各紙片在室溫下干燥過(guò)夜。紙的測(cè)試結(jié)果列于表7中。表7再生紙的完整性</tables>結(jié)果顯示當(dāng)制成新紙片時(shí)，含GCC的紙漿保持一些濕抗拉強(qiáng)度性質(zhì)；用蛋白酶處理制成的紙漿與物理破壞相反，當(dāng)再生時(shí)生成強(qiáng)度更好的紙，而繼續(xù)添加GCC可使再生紙片達(dá)最佳的濕抗拉強(qiáng)度性質(zhì)。10、戊二醛和纖維素酶處理后紙的濕強(qiáng)度、干強(qiáng)度和施膠性能改善的證明做實(shí)驗(yàn)以確定纖維素酶(蛋白質(zhì)配基)和戊二醛(效應(yīng)物片段)對(duì)紙的濕強(qiáng)度、干強(qiáng)度和施膠性能的影響。在實(shí)驗(yàn)中采用下列材料和通用規(guī)程纖維素酶采用水基Trichodermareesei纖維素酶制劑(“Cellulast1.5L”，由NovoNordiskBioindustryS.A.92017NanterreCedex，F(xiàn)rance提供)。戊二醛在下列實(shí)施例中采用戊二醛25％水溶液，可從MerckLtd(Poole，Dorset，U.K.)購(gòu)得。原料制備除非特別指明，采用的配料為ECF漂白的闊葉木和針葉木漿的混合物(比例為70∶30HW/SW)。用1/3PBS并且不加填料制備原料。過(guò)程如下把280g漂白的闊葉木漿和120g漂白的針葉木漿加到18升1/3PBS中。劇烈攪拌使纖維分散。接著把原料轉(zhuǎn)移至打漿機(jī)中，并打漿至均漿度值為25oSR為止(通常需30至35分鐘)。接著再加1/3PBS把原料最終濃度調(diào)至2％。添加劑的加入/溫育把纖維素酶溶液和戊二醛溶液加到該粘稠的(濃度2％)原料中。把兩升原料(含40g纖維)置于一金屬罐中，并用盡可能低的速度攪拌使原料緩慢運(yùn)動(dòng)。應(yīng)避免劇烈攪拌否則在溫育期會(huì)導(dǎo)致酶變性。原料處于室溫(20至25℃)。首先向原料中加入纖維素酶溶液(避免任何的溶液飛濺或?yàn)R潑)，加入酶一分鐘后，再加入戊二醛水溶液。添加劑的溫育時(shí)間為15分鐘，從酶添加完起算。在溫育過(guò)程中原料的運(yùn)動(dòng)速度可能會(huì)變?nèi)菀?更快。如果變化較明顯則需盡可能地降低攪拌器轉(zhuǎn)速。當(dāng)15分鐘溫育期完成后，把粘稠的原料加到配料器中。配料器僅用DEMI水把配料器中粘稠的原料稀至濃度為0.25％。采用配料器中常用攪拌速度混合原料。手抄紙的形成在白水箱中充入供手抄紙形成的DEMI水。把手抄紙形成導(dǎo)線裝入模具中，將一升從配料器中的原料加到板框盒中，同時(shí)加入從白水箱中的水。板框盒中的內(nèi)容物用多孔攪拌器攪拌(上下提拉五次)。當(dāng)?shù)谖宕翁崂瓿珊螅褦嚢杵髦糜谒砻嬉詭椭o止在板框盒中水的運(yùn)動(dòng)。接著把水泵回到白水盒中使得形成初濕坯。依賴于攪拌的劇烈程度在板框盒中會(huì)出現(xiàn)一些泡沫。當(dāng)初濕坯形成后泡沫可繼續(xù)存在，并且也可能非常多。如果在水除去后繼續(xù)用泵抽幾秒鐘以除去坯中的空氣，則可使一部分泡沫消失。手抄紙的壓制和干燥把濕坯和手抄紙導(dǎo)線從模中脫除并進(jìn)行壓制。壓制成的紙片含水量應(yīng)為70％。接著在電加熱圓筒烘干機(jī)中把壓制成的紙片干燥。干烘機(jī)的表面溫度在60℃至105℃之間，干燥機(jī)的轉(zhuǎn)速要使壓制成的紙片與其熱表面接觸時(shí)間達(dá)35至180秒。紙片的最終含水量應(yīng)在4至7％之間(典型地為5％)。如果壓制后紙片的含水量小于70％，接下來(lái)當(dāng)采用所述條件時(shí)紙片可能會(huì)粘在圓筒烘干機(jī)表面。這可能是由于紙片幅度上不均勻施壓造成的。操作中應(yīng)避免發(fā)生這種情況。當(dāng)圓筒烘干機(jī)的表面溫度小于105℃但為70℃或更高時(shí)，則需要更長(zhǎng)的接觸時(shí)間以使手抄紙的最終水含量為5％。如果圓筒烘干機(jī)的表面溫度低于70℃，則需進(jìn)一步增加接觸時(shí)間或增加壓在濕坯上的初始?jí)毫σ猿ジ嗟乃蛘邇烧呔捎?。有可能把壓制成的紙片的含水量降至小?0％。測(cè)試根據(jù)“TappiTestMethods”TAPPI出版，TechnologyParkAtlanta，POBOX105113，AtlantaGA30348，USA，ISBN0-89852-200-5(第1和2卷)中所列的方法進(jìn)行紙的老化和測(cè)試。方法T456om-87定義了紙和紙板的濕抗拉破裂強(qiáng)度；T4940m-81定義了紙和紙板的抗拉破裂強(qiáng)度；用抗墨性T530pm-83把HST(Hercules施膠試驗(yàn))定義為紙的施膠實(shí)驗(yàn)；用T441om-84定義Cobb試驗(yàn)。進(jìn)行一系列纖維素濃度、戊二醛濃度、干燥時(shí)間和溫度、老化時(shí)間和溫度各自作改變的實(shí)驗(yàn)。結(jié)果列于下列表中，其中“自然老化”指T402om-83中定義的在23℃±1℃、相對(duì)濕度50.0±2％下貯藏特定時(shí)間；“爐內(nèi)老化”指在80℃下處理30分鐘；“標(biāo)準(zhǔn)干燥條件”指在105℃下干燥35秒。用方法T456om-87和T4940m-81分別測(cè)試濕和干抗拉強(qiáng)度，濕抗拉強(qiáng)度與干抗拉強(qiáng)度的比用百分比表示。這些數(shù)據(jù)列于表中，其中該值越高濕強(qiáng)度越好。用HST(Hercules施膠試驗(yàn))(TAPPI方法T530om-83)測(cè)定施膠效果，數(shù)據(jù)以秒為單位記錄。該數(shù)值越大施膠效果越好。所得的HST值優(yōu)選為大于20秒，更優(yōu)選為大于120秒，進(jìn)一步優(yōu)選為大于200秒。也可用Cobb試驗(yàn)(TAPPI方法T441om-90)。數(shù)據(jù)以單位grams/m2記錄。“完全飽和”指紙根本沒(méi)有施膠。Cobb值越低，施膠效果越好。所得的Cobb值優(yōu)選為小于30g/m2，更優(yōu)選為小于21g/m2。標(biāo)準(zhǔn)條件下干燥的手抄紙中的纖維素酶/戊二醛體系的濕強(qiáng)度和施膠性能“24小時(shí)自然老化后的％濕強(qiáng)度”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX＝4.57％“2周自然老化后的％濕強(qiáng)度”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX＝9.01％“24小時(shí)自然老化后的HST(秒)”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX＝1s“2周自然老化后的HST(秒)”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX＝1s“爐內(nèi)老化后的HST(秒)”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX＝1s“24小時(shí)自然老化后的Cobb(gsm)”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX＝完全飽和“2周自然老化后的Cobb(gsm)”對(duì)照-0.25％KymeneSLX＝完全飽和“爐內(nèi)老化后的Cobb(gsm)”對(duì)照-0.25％KymeneSLX＝完全飽和可變條件下干燥的手抄紙中的纖維素酶/戊二醛體系的濕強(qiáng)度和施膠性能“24小時(shí)自然老化后的％濕強(qiáng)度”對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝6.03％“爐內(nèi)老化后的％濕強(qiáng)度”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝11.38％“24小時(shí)自然老化后的HST(秒)”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝1s“2周自然老化后的HST(秒)”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝1s“爐內(nèi)老化后的HST(秒)”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝1s“24小時(shí)自然老化后的Cobb(gsm)”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝完全飽和“2周自然老化后的Cobb(gsm)”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝完全飽和“爐內(nèi)老化后的Cobb(gsm)”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝完全飽和在兩階段老化條件下干燥的手抄紙中的纖維素酶/戊二醛體系的濕/干強(qiáng)度和施膠性能“48小時(shí)自然老化后的％濕強(qiáng)度”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝8.48％“爐內(nèi)老化后的％濕強(qiáng)度”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝12.53％“48小時(shí)自然老化后的干強(qiáng)度”</tables>對(duì)照-空白(105℃/35s)＝4.28kNm-1；0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝4.41kNm-1“爐內(nèi)老化后的干強(qiáng)度對(duì)照-空白(105℃/35s)＝3.93kNm-1；0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝4.64kNm-1“48小時(shí)自然老化后的HST”對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝1s“2周自然老化后的HST”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝1s“爐內(nèi)老化后的HST”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝1s“48小時(shí)自然老化后的Cobb”對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝完全飽和“2周自然老化后的Cobb”對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝完全飽和“爐內(nèi)老化后的Cobb”</tables>對(duì)照-0.25％KymeneSLX(105℃/35s)＝完全飽和不同干燥規(guī)程對(duì)纖維素酶/戊二醛體系的濕強(qiáng)度和施膠性能的影響的對(duì)比“不同干燥規(guī)程對(duì)濕強(qiáng)度的影響(爐內(nèi)老化數(shù)據(jù))”</tables>“不同干燥規(guī)程對(duì)HST的影響(爐內(nèi)老化數(shù)據(jù))”</tables>“不同干燥規(guī)程對(duì)Cobb的影響(爐內(nèi)老化數(shù)據(jù))”</tables>總之，所述數(shù)據(jù)證明紙的纖維素酶/戊二醛處理使得紙的濕強(qiáng)度、干強(qiáng)度和施膠性能得以改善。11、紙的生物金屬化的證明紙的生物金屬化被證明。該技術(shù)基于抗生蛋白鏈菌素對(duì)生物素的親合力。生物素標(biāo)記連于纖維素酶，接著纖維素酶再與金顆粒標(biāo)記的抗生蛋白鏈菌素相連。振搖下于溫室把在含吐溫20(0.1％vv-1)的1/3PBS緩沖液(pH7.4)中的紙漿溫育45分鐘。制成紙片(6cm2)，卷起并在室溫下干燥過(guò)夜。把含生物素化纖維素酶的紙樣(1.5cm2)和沒(méi)有生物素化纖維素酶的對(duì)照樣在振搖、室溫下與在10mMPBSpH7.4中的5％(wv-1)BSA一起溫育30分鐘。按制造商的建議使用AuroprobeBLplus標(biāo)記的抗生蛋白鏈菌素綴合物和促進(jìn)劑(AmershamLtd.，Amersham，U.K.)用于聯(lián)接和顯影金顆粒(Fostel等人，Chromosoma，90，254，(1984)；Hutchinson等人，J.CellBiol.，95，609，(1982))。促進(jìn)劑溶液用銀包被金顆粒產(chǎn)生橙/褐色，證明金屬的存在。不含生物素化纖維素酶的對(duì)照紙片不顯橙/褐色，因而沒(méi)有被金屬包被。12、生物金屬化紙的電容測(cè)量把生物金屬化紙的電容與對(duì)照紙片比較以確定是否金標(biāo)記的纖維素酶改變了紙的電容特性。用含纖維素酶、金標(biāo)記的纖維素酶，增強(qiáng)金標(biāo)記的纖維素酶和沒(méi)有纖維素酶的對(duì)照紙漿制備紙片。將紙片夾在連于電容測(cè)量?jī)x的兩個(gè)金屬板間。把金屬板放在一個(gè)架子中確保金屬板間保持恒定和可重現(xiàn)的距離。利用下式計(jì)算電容(C)C=&epsiv;o&epsiv;rAd]]>其中d＝兩板間的距離A＝面積εo＝常數(shù)εr＝相對(duì)介電常數(shù)所得測(cè)量結(jié)果顯示金標(biāo)記的纖維素酶的存在增加了紙片的電容。測(cè)量結(jié)果列于表7中。表7電容測(cè)量</tables>13、淀粉酶結(jié)合淀粉的證明用HPLC指征兩種淀粉酶來(lái)源于米曲霉(Aspergillusoryzae)的α-淀粉酶(X-A型粗制劑)和來(lái)源于黑色曲霉的淀粉葡糖苷糖(從SigmaAldrichCo.Ltd.，Poole，Dorset，UnitedKingdom獲得)。用淀粉葡糖釋放試驗(yàn)確定每一制劑的催化性主峰。在評(píng)價(jià)中對(duì)多種淀粉用BSA作對(duì)照測(cè)定每種蛋白的結(jié)合效率。把32mgml-1(干重)的α-淀粉酶溶液配入到0.1MPBS(pH7.0)中。進(jìn)樣100μl至HPLC中，采用Bio-SilSEL凝膠滲透柱，淋洗液為0.1M磷酸鹽緩沖液，流速為1mlmin-1。收集洗脫液(1ml)并用標(biāo)準(zhǔn)微量滴定試驗(yàn)(葡萄糖)檢測(cè)從淀粉懸浮液中釋放出的還原糖。用下列定量試驗(yàn)檢測(cè)試樣中的葡萄糖和纖維二糖。試驗(yàn)在室溫下微量滴定板上進(jìn)行。試劑成分10μl苯酚試劑(0.128M苯酚的0.1M磷酸鹽緩沖液pH7.0)10μl氨基pyrine試劑(19.7mM4-氨基非那宗的0.1M磷酸鹽緩沖液pH7.0)10μl過(guò)氧化酶的0.1M磷酸鹽緩沖液pH7.0(800Eu/ml)10μl葡糖氧化酶的0.1M磷酸鹽緩沖液pH7.0(250Eu/ml)60μl0.1M磷酸鹽緩沖液pH7.0把這些試劑成分混合并加到微量滴定板的坑中。加入100μl試樣接著再加入過(guò)量的底物(淀粉)。出現(xiàn)紅色表明有淀粉酶存在。也可用相同的辦法作出淀粉葡糖苷酶的HPLC曲線。用Coomassie藍(lán)技術(shù)測(cè)定淀粉葡糖苷酶為含約262mgml-1蛋白的液體制劑。用0.1MPBS(pH7.0)稀釋成原濃度0.007的稀釋液，取100μlHPLC進(jìn)樣并在230nm0.1AUS下監(jiān)測(cè)。收集1ml洗脫液并按所述方法檢測(cè)從淀粉懸浮液中釋放出的還原糖。評(píng)價(jià)α-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶在懸浮液中結(jié)合常規(guī)淀粉的能力。淀粉(0.2g；Roquette)加到9ml0.1MPBS(pH7.0)中并加入1mlα-淀粉酶溶液(Coomassie藍(lán)測(cè)定為9.5mgml-1)。在搖床上溫育20分鐘。樣品在轉(zhuǎn)速13000rpm下離心5分鐘，取100μl樣品進(jìn)樣至HPLC柱中。20分鐘結(jié)合α-淀粉酶的峰高與T＝0樣品作對(duì)比。從而計(jì)算出酶的結(jié)合百分率。也用陽(yáng)離子淀粉測(cè)定淀粉葡糖苷酶的結(jié)合率。BSA被作為對(duì)照用于相同的方法中。所使用的BSA的最終濃度為0.2％(WV-1)于0.1MPBS中。結(jié)合實(shí)驗(yàn)的結(jié)果列于下表中。淀粉結(jié)合曲線</tables>結(jié)果顯示α-淀粉酶和淀粉葡糖苷糖均特異性結(jié)合于淀粉和陽(yáng)離子淀粉上，因此適用作效應(yīng)物片段結(jié)合淀粉的蛋白質(zhì)聯(lián)接。權(quán)利要求1.一種處理聚合物的方法，使得選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其包括通過(guò)用于獲得所述改善的蛋白聯(lián)接將效應(yīng)物片段結(jié)合在所述聚合物上，所述效應(yīng)物片段不同于所述蛋白聯(lián)接，所述蛋白聯(lián)接不同于所述聚合物，所述效應(yīng)物片段和所述蛋白聯(lián)接按獲得所述改善的有效量存在。2.如權(quán)利要求1的處理聚合物的方法可使所述聚合物的流體浸入性能得以改善。3.如權(quán)利要求1的處理聚合物的方法可使所述聚合物的施膠性能得以改善。4.如權(quán)利要求1的處理聚合物的方法可使所述聚合物的導(dǎo)電性能得以改善。5.如權(quán)利要求1的處理聚合物的方法可使所述聚合物的金屬性能得以改善。6.如權(quán)利要求1的處理聚合物的方法可使所述聚合物的濕強(qiáng)度性能得以改善。7.如權(quán)利要求1的處理聚合物的方法可使所述聚合物的干強(qiáng)度性能得以改善。8.如前述任意權(quán)利要求的方法，其中所述聚合物為多糖。9.如權(quán)利要求8的方法，其中所述聚合物為纖維素。10.如前述任意權(quán)利要求的方法，其中所述聚合物為紙或紙的組成纖維。11.如前述任意權(quán)利要求的方法，其中所述蛋白聯(lián)接包括天然酶或其片段。12.如權(quán)利要求1的方法，其中所述蛋白聯(lián)接包括選自纖維素酶、半纖維素酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、蛋白酶、角蛋白酶、殼多糖酶、木質(zhì)素酶、瓊脂酶、藻朊酶和淀粉酶的酶或其片段。13.如前述任意權(quán)利要求的方法，其中所述蛋白聯(lián)接包括多糖酶及其片段。14.如權(quán)利要求13的方法，其中所述蛋白聯(lián)接包括纖維素酶及其片段。15.如權(quán)利要求14的方法，其中所述蛋白聯(lián)接包括纖維素酶的纖維素結(jié)合域。16.如前述任意權(quán)利要求的方法，其中所述效應(yīng)物片段通過(guò)聯(lián)接劑聯(lián)接于所述蛋白。17.如權(quán)利要求16的方法，其中所述聯(lián)接劑包括非共鍵結(jié)合對(duì)。18.如權(quán)利要求1至16之一的方法，其中所述效應(yīng)物片段共價(jià)結(jié)合于所述蛋白聯(lián)接。19.如前述任意權(quán)利要求的方法，其中所述效應(yīng)物片段可從所述聚合物上選擇性地裂解下來(lái)。20.一種化學(xué)物質(zhì)組合物，包含a)效應(yīng)物片段；和b)可把所述效應(yīng)物片段結(jié)合到聚合物上的蛋白質(zhì)；其中所述效應(yīng)物片段不同于所述蛋白質(zhì)，所述組合物可使所述聚合物的選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善。21.一種材料組合物，其包括通過(guò)蛋白聯(lián)接結(jié)合于其上的效應(yīng)物片段的聚合物，所述效應(yīng)物片段不同于所述蛋白聯(lián)接，其中所述效應(yīng)物片段和所述蛋白聯(lián)接按有效量存在，使所述聚合物的選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善。22.一種處理聚合物的方法，使得選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其中包括使聚合物與效應(yīng)物片段和用于獲得所述改善的蛋白相接觸，所述效應(yīng)物片段不同于所述蛋白聯(lián)接，而且不同于所述聚合物，所述蛋白不同于所述聚合物，所述效應(yīng)物片段和所述蛋白按獲得所述改善的有效量存在。23.如權(quán)利要求22的方法，包括把所述效應(yīng)物片段和所述蛋白質(zhì)的綴合物與所述聚合物接觸的步驟。24.如權(quán)利要求22的方法，包括把所述效應(yīng)物片段與所述蛋白質(zhì)和所述聚合物的綴合物接觸的步驟。25.一種處理聚合物的方法，使得選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其中包括通過(guò)用于獲得所述改善的至少一種蛋白聯(lián)接將至少一種效應(yīng)物片段結(jié)合在至少一種所述聚合物上，所述至少一種效應(yīng)物片段不同于所述至少一種蛋白聯(lián)接，所述至少一種蛋白聯(lián)接不同于所述至少一種聚合物，所述至少一種效應(yīng)物片段和所述至少一種蛋白聯(lián)接按獲得所述改善的有效量存在。26.一種處理聚合物的方法，使得選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其中包括使至少一種效應(yīng)物片段和用于獲得所述改善的至少一種蛋白質(zhì)與至少一種所述聚合物接觸，所述至少一種效應(yīng)物片段不同于所述至少一種蛋白質(zhì)，而且不同于所述至少一種聚合物，所述至少一種蛋白質(zhì)不同于所述至少一種聚合物，所述至少一種效應(yīng)物片段和所述至少一種蛋白質(zhì)按獲得所述改善的有效量存在。27.一種處理紙或紙的組成纖維的方法，使選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其中包括通過(guò)用于獲得所述改善的至少一種蛋白聯(lián)接將至少一種效應(yīng)物片段結(jié)合在所述紙或紙的組成纖維上，所述至少一種效應(yīng)物片段不同于所述至少一種蛋白聯(lián)接，所述至少一種蛋白聯(lián)接不同于所述紙或紙的組成纖維，所述至少一種效應(yīng)物片段和所述至少一種蛋白聯(lián)接按獲得所述改善的有效量存在。28.一種處理紙或紙的組成纖維的方法，使選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善，其中包括通過(guò)用于獲得所述改善的蛋白聯(lián)接將效應(yīng)物片段結(jié)合在所述紙或紙的組成纖維上，所述效應(yīng)物片段不同于所述蛋白聯(lián)接，所述蛋白聯(lián)接不同于所述紙或紙的組成纖維，所述效應(yīng)物片段和所述蛋白聯(lián)接按獲得所述改善的有效量存在。29.如權(quán)利要求28的方法，其中所述效應(yīng)物片段可賦予所述紙改善的濕強(qiáng)度。30.如權(quán)利要求28的方法，其中所述效應(yīng)物片段可賦予所述紙改善的干強(qiáng)度。31.如權(quán)利要求28的方法，其中所述效應(yīng)物片段可賦予所述紙改善的施膠性能。32.如權(quán)利要求28的方法，其中所述效應(yīng)物片段為交聯(lián)劑。33.如權(quán)利要求32的方法，其中所述效應(yīng)物片段為二醛交聯(lián)劑。34.如權(quán)利要求33的方法，其中所述效應(yīng)物片段為戊二醛。35.如權(quán)利要求28至34之一的方法，其中所述蛋白聯(lián)接為纖維素酶。36.效應(yīng)物片段和蛋白酶在一種處理聚合物使所述聚合物之選自流體、電學(xué)和強(qiáng)度性質(zhì)的至少一種性質(zhì)得以改善的方法中的用途。全文摘要本發(fā)明涉及通過(guò)蛋白質(zhì)在聚合物上結(jié)合效應(yīng)物片段來(lái)改善聚合物之流體、電學(xué)或強(qiáng)度性質(zhì)的方法及化合物。具體而言,本發(fā)明涉及通過(guò)如能夠結(jié)合在紙的纖維素上之纖維素酶的蛋白質(zhì)以將能夠賦予如改善的濕強(qiáng)度、干強(qiáng)度或施膠性能的效應(yīng)物片段結(jié)合在紙上。文檔編號(hào)D21H17/00GK1199421SQ9619公開(kāi)日1998年11月18日申請(qǐng)日期1996年8月16日優(yōu)先權(quán)日1995年8月16日發(fā)明者羅伯特·貝茨,斯蒂芬·戴維·格里納韋,戴維·約翰·哈德曼,馬格麗特·赫胥黎,詹姆斯·哈沃德·斯萊特申請(qǐng)人:赫爾克里士公司