一種egcg納米脂質(zhì)體可食用膜及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜及其制備方法，該可食用膜由以下原料制備而成：大豆分離蛋白、甘油、去離子水、EGCG納米脂質(zhì)體。本發(fā)明的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜，抗氧化、抑菌和防腐保鮮效果好，是一種創(chuàng)新的食品包裝技術(shù)。
【專利說明】一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品保鮮領(lǐng)域，具體是一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜及其制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002]我國是茶葉種植的大國，也是茶葉的發(fā)源地，自古以來茶葉除了用作飲品外，也與養(yǎng)生息息相關(guān)，具有豐富的藥用價值。各類茶葉有著不同的功效，例如，烏龍茶具有減肥美容，降低膽固醇的功效，紅茶具有消脂的功效，綠茶具有美白皮膚，改善貧血，防癌的功效。21世紀，健康產(chǎn)業(yè)蓬勃發(fā)展，隨著科學技術(shù)的不斷發(fā)展以及大眾養(yǎng)生意識的不斷提高，我們得以借助先進的技術(shù)方法和設備，對茶葉的結(jié)構(gòu)，功效進行深入的微觀研究，茶葉的保健價值將不斷開發(fā)。
[0003]兒茶素是從茶葉中提取的多羥基酚物質(zhì)茶多酚的主要成分，是典型的黃烷醇類化合物，有時它也指的是表兒茶素(EC)、表沒食子兒茶素(EGC)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)和兒茶素沒食子酸酯(ECG)等物質(zhì)的總稱，它具有抗氧化、抗癌、抗動脈粥樣硬化等多種功能，同時具有抗病毒作用、抑制厭氧菌增殖作用、改善高膽固醇作用、改善肝功能等多種生物活性。EGCG作為兒茶素中最主要的一種成分，具有較高的抗氧化性能和許多的功效，在食品保健、醫(yī)療美容領(lǐng)域都有著廣泛的應用。開發(fā)不同功效的產(chǎn)品，滿足不同層次消費群體的需求，不僅可以充分利用我國茶葉大國的資源優(yōu)勢，提升產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，創(chuàng)造良好的經(jīng)濟價值，也能滿足大眾的健康需求。
[0004]然而，EGCG的化學性質(zhì)不穩(wěn)定，容易被氧化，難以維持其長期的效用，其在溫度過高，濕度過大的環(huán)境條件下易變質(zhì)氧化，脂溶性差，生物利用度低。純的EGCG粉末需要在低溫冷藏，而由其制成的口服藥品或食品的穩(wěn)定性又由于人體腸道的復雜環(huán)境而大大降低，這極大地限制了它在食藥行業(yè)領(lǐng)域中的應用。目前，對EGCG的研究主要是集中在提高其穩(wěn)定性，而最常用的辦法是制備納米顆粒來包裹EGCG，使其在較小的空間里與外界隔離，經(jīng)脂質(zhì)體包埋后，延緩了它的氧化作用，同時脂質(zhì)體具有與皮質(zhì)相似的結(jié)構(gòu)，利用其高度的生物相容性，提高了」L茶素的生物利用度。
[0005]納米技術(shù)是研究結(jié)構(gòu)尺寸在Inm — 10nm范圍內(nèi)材料的性質(zhì)和應用的一種技術(shù)，它內(nèi)容涉及廣泛。納米材料具有獨特的性質(zhì)，它的很多效應如:光電效應、尺寸效應、表面與界面效應等在很多領(lǐng)域有著應用前景，是近年來備受關(guān)注的新材料。隨著科技的進步，納米技術(shù)在食品領(lǐng)域中應用也有了長足的發(fā)展，應用的領(lǐng)域主要集中在納米食品加工、包裝食品的納米材料、食品機械應用、食品微生物檢測等方面。
[0006]脂質(zhì)體是由磷脂、膽固醇等物質(zhì)制成的人工膜，它具有磷脂的雙分子層結(jié)構(gòu)。磷脂一般選用大豆卵磷脂，其含有豐富的不飽和脂肪酸，對于增加磷脂的不飽和度，改善膜的性狀具有重要作用。納米脂質(zhì)體是用到納米技術(shù)制備得到的一種新型微膠囊，它可以包裹生物活性的物質(zhì)，使其與外界隔離，從而保護了物質(zhì)的活性，提高了物質(zhì)的穩(wěn)定性。納米材料的表面界面效應和尺寸效應極大地增強了活性物質(zhì)在體內(nèi)與細胞接觸，更好地發(fā)揮了藥物效應。由于其阻隔效應，胃腸道內(nèi)的復雜環(huán)境對EGCG的影響也大大減小。納米脂質(zhì)體在食品中應用主要集中在維生素、抗氧化劑等方面，阿霉素脂質(zhì)體是目前上市脂質(zhì)體中效益最好，療效最佳的產(chǎn)品。
[0007]脂質(zhì)體的制備方法多樣，逆相蒸發(fā)較常應用，大致步驟為:將類脂溶于有機溶劑中，在加入溶有藥物的水溶液，磁力攪拌和超聲后，形成水包油的乳液，最后再低壓下蒸發(fā)溶劑得到脂質(zhì)體。薛紅安等人用該法制備得到黃芩苷脂質(zhì)體，胥傳來等人通過該方法制備PST脂質(zhì)體，都取得了較優(yōu)的結(jié)果。
[0008]脂質(zhì)體的評價指標主要是藥物的包封率，脂質(zhì)體粒徑以及穩(wěn)定性。測定包封率的方法多樣，主要有紫外分光光度法，氣相色譜法，超濾法，凝膠過濾法等。紫外分光光度法操作簡單，但制膜材料存在干擾，且只能對有紫外吸收的物質(zhì)進行檢測；氣相色譜法，可以對無紫外吸收且具有揮發(fā)性的物質(zhì)進行測定；超濾法，樣品用量少，分離時間短，通過超濾對脂質(zhì)體與游離藥物進行分離；凝膠過濾法，利用了分子篩的原理，此方法誤差小，脂質(zhì)體不會被破壞，但是分離時間長。脂質(zhì)體粒徑的測定，主要采用電鏡掃描法，激光散射法和激光掃描法。脂質(zhì)體的穩(wěn)定性包括化學穩(wěn)定性和物理穩(wěn)定性，化學穩(wěn)定性主要通過磷脂氧化指數(shù)和磷脂量的測定，物理穩(wěn)定性則可通過包封率隨放置時間的變化情況來測定。
[0009]可食性膜是以可食性大分子為原料，通過一定的加工工藝使各成膜劑分子之間相互作用而成的具有特定功能的可食用薄膜。它的優(yōu)勢主要有:(1)容易被生物降解，無任何環(huán)境污染，有的可食性成膜材料本身具有營養(yǎng)價值。(2)具有選擇性的透氣性和抗?jié)B透能力，延長貯存期。(3)可提高食品包裝的機械強度，使食品容易分發(fā)運輸。(4)可賦予食品表面光澤，增強食品的感觀效應。(5)能作為食品添加劑的載體，控制它們在食品中的擴散速率。(6)可食性膜和不可食用薄膜構(gòu)成的多界面、多層次的復合包裝可以提高整體阻隔性能。隨著人們對食品品質(zhì)要求的提高，以及環(huán)保意識的增強，可食膜在人們的日常生活中將得到越來越廣泛的應用。
[0010]大豆分離蛋白是一種質(zhì)優(yōu)價廉的植物蛋白，具有優(yōu)良的成膜性能、阻氧和阻油特性和較高的營養(yǎng)價值，非常適宜應用在可食膜上。周紅鋒等采用大豆分離蛋白為主要原料制備了可食性復合膜，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過微波處理后，大豆分離蛋白膜的機械強度、阻濕能力得到了提高。姜燕等得出增塑劑的種類(甘油、山梨醇或甘油山梨醇的等)對大豆分離蛋白膜的性能有明顯影響。包惠燕等以大豆分離蛋白、甘油為組成成分的成膜溶液，調(diào)PH為中性，熱處理后鋪板干燥，揭膜，得到性能較好的可食用膜。馬丹等研究了熱處理對大豆分離蛋白膜性能和結(jié)構(gòu)的影響，結(jié)果得出90°C熱處理后制得的大豆分離蛋白膜呈現(xiàn)出最佳機械性能和阻隔性能。
[0011]可食膜是國際上果蔬保鮮的新方法，它通過改變果蔬表面形態(tài)、減少表皮水分散失、降低表皮氧氣透過率延長果蔬貯藏期?？墒衬ぶ饕糜谑称穬?nèi)包裝和新鮮食品的表面包裝，以阻止食品吸水或失水，防止食品氧化等化學反應，調(diào)節(jié)生鮮食品呼吸強度，提高食品表面機械強度，改善食品表現(xiàn)，減少油炸食品吸油量等；也常作為食品特殊成分如:防腐劑色素風味物質(zhì)等的載體，使這些成分在食品表面或界面上發(fā)揮作用。
將EGCG與脂質(zhì)體的制備工藝與可食用膜的制備工藝結(jié)合，研究優(yōu)化實驗條件和配方，對于延長EGCG的抗氧化效果，創(chuàng)新食品包裝技術(shù)具有重要意義。
[0012]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]本發(fā)明提供了一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜及其制備方法。
[0014]一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜，其特征在于其由以下重量份數(shù)的原料制備而成:大豆分離蛋白I一5份，甘油1.5— 2份，去離子水40— 60份，EGCG納米脂質(zhì)體0.05—0.15份。
[0015]所述的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜，其特征在于其由以下重量份數(shù)的原料制備而成:大丑分尚蛋白2—4份，甘油1.7— 1.9份,去尚子水45—55份，EGCG納米脂質(zhì)體0.1—0.15 份。
[0016]所述的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜，其特征在于其由以下重量份數(shù)的原料制備而成:大豆分離蛋白3份，甘油1.8份，去離子水50份，EGCG納米脂質(zhì)體0.15份。
[0017]所述的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜，其特征在于所述EGCG納米脂質(zhì)體是濃度為5 — 15mg/ml的EGCG納米脂質(zhì)體溶液。
[0018]所述的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜的制備方法，其特征在于包括如下步驟:將大豆分離蛋白、甘油、去離子水攪拌均勻后進行超聲，待充分混勻后于恒溫水浴鍋進行加熱，冷卻至室溫，加入EGCG納米脂質(zhì)體溶液，混合均勻后，置于恒溫干燥箱干燥成膜。
[0019]所述的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜的制備方法，其特征在于包括如下步驟:將大豆分離蛋白、甘油、去離子水攪拌均勻后進行超聲20min，待充分混勻后于90°C恒溫水浴鍋進行加熱30min，冷卻至室溫，加入EGCG納米脂質(zhì)體溶液，混合均勻后，置于56°C恒溫干燥箱干燥成膜。
[0020]本發(fā)明的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜，抗氧化、抑菌和防腐保鮮效果好，是一種創(chuàng)新的食品包裝技術(shù)。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0021]圖1是本發(fā)明的測定3個濃度梯度的實驗組和空白組的鱈魚肉糜的pH值結(jié)果圖； 圖2是對3個濃度梯度的實驗組和空白組的鱈魚樣品先進行去蛋白然后再用比色法確定TBA的值的實驗結(jié)果圖；
圖3是對適宜范圍內(nèi)的菌落數(shù)進行計數(shù)的實驗結(jié)果圖；
圖4是揮發(fā)性鹽基總氮(TVB-N)測定結(jié)果圖。

【具體實施方式】
[0022]實驗材料: 膽固醇(北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠)，大豆卵磷脂(國藥集團化學試劑有限公司)，乙醚(杭州大方化學試劑廠)，氯仿(浙江三鷹化學試劑有限公司)，磷酸二氫鈉(天津市科密歐化學試劑有限公司)，磷酸氫二鈉(天津市科密歐化學試劑有限公司)，吐溫一80 (天津市東和盛泰化工商貿(mào)有限公司)，無水乙醇(南京化學試劑有限公司)，EGCG99% (Aladdinindustrial Corporat1n),食用大豆分離蛋白粉(谷神生物科技集團有限公司),甘油(杭州米克化工儀器有限公司)，新鮮凍鱈魚(購于物美超市)，平板計數(shù)瓊脂(杭州百思生物技術(shù)有限公司)，三氯乙酸(如皋市化學試劑股份有限公司)，營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(杭州微生物試劑有限公司)，2-硫代巴比妥酸(Aladdin industrial Corporat1n)試劑均為分析純,金黃色葡萄球菌菌種，熒光假單胞菌菌種，去離子水。
[0023]實施例1
配方:3g大豆分離蛋白，1.8g甘油，50mL去離子水，5mg/mL的EGCG納米脂質(zhì)體10mL。工藝為:將大豆分離蛋白、甘油、去離子水攪拌均勻后超聲20min，待充分混勻后于90°C恒溫水浴鍋加熱30 min,冷卻至室溫，傾倒在培養(yǎng)皿，并加入EGCG納米脂質(zhì)體溶液，混合均勻后，置于56°C恒溫干燥箱干燥成膜。
[0024]實施例2
配方:3g大豆分離蛋白，1.8g甘油，50mL去離子水，10mg/mL的EGCG納米脂質(zhì)體10mL。工藝為:將大豆分離蛋白、甘油、去離子水攪拌均勻后超聲20min，待充分混勻后于90°C恒溫水浴鍋加熱30 min,冷卻至室溫，傾倒在培養(yǎng)皿，并加入EGCG納米脂質(zhì)體溶液，混合均勻后，置于56°C恒溫干燥箱干燥成膜。
[0025]實施例3
配方:3g大豆分離蛋白，1.8g甘油，50mL去離子水，15mg/mL的EGCG納米脂質(zhì)體10mL。工藝為:將大豆分離蛋白、甘油、去離子水攪拌均勻后超聲20min，待充分混勻后于90°C恒溫水浴鍋加熱30 min,冷卻至室溫，傾倒在培養(yǎng)皿，并加入EGCG納米脂質(zhì)體溶液，混合均勻后，置于56°C恒溫干燥箱干燥成膜。
[0026]EGCG可食用膜保鮮抗氧化作用評價
將新鮮凍鱈魚均質(zhì)后 ，制成鱈魚樣品，用可食用膜包裹后裝入離心管中密封，實驗組為本發(fā)明實施例1一3中含有EGCG納米脂質(zhì)體的可食膜，空白組為不含EGCG納米脂質(zhì)體的可食膜。將實驗組與空白組在冰箱中4°C下保存。通過實驗組與空白組的對比，評價可食用膜的抗氧化效果。實驗組分別是含有添加5mg/mL的EGCG的納米脂質(zhì)體，10mg/mL的EGCG的納米脂質(zhì)體，15mg/mL的EGCG的納米脂質(zhì)體。對EGCG可食用膜抗氧化作用評價都分為以上這三個濃度梯度。
[0027]鱈魚樣品pH值的測定
用PH計測定實驗組和空白組鱈魚肉糜的pH值，首先稱取各組樣品5.0Og,加入50mL蒸懼水，用研缽研磨均勻，超聲1min,用濾紙過濾,取濾液,用pH計測定,直接讀取pH值。鱈魚肉糜于冰箱中4°C下保存，連續(xù)測定一周。
[0028]TBA值的測定
采用硫代巴比妥酸法，測定鱈魚的TBA值。分別稱取5g實驗組和空白組的鱈魚樣品，加入25mL5%三氯乙酸(TCA)，超聲均質(zhì)后過濾。取5mL濾液，加入0.02 mo I/L的TBA溶液5mL。將混合液在(80±1) °C恒溫水浴加熱40min顯色,冷卻至室溫Ih后,測定532nm和600nm處吸光度，以去離子水調(diào)零。TBA值為每千克樣品中的丙二醛(mg/kg)，用鱈魚脂肪氧化程度來評價EGCG可食品膜的抗氧化效果。鱈魚肉糜樣品于冰箱中4°C下保存，連續(xù)測定一周。
[0029]菌落總數(shù)的測定
按照GB4789.1—2010食品微生物學檢驗總則和GB4789.2—2010菌落總數(shù)測定的國家標準，對實驗組和空白組的鱈魚樣品分別進行菌落總數(shù)的測定，連續(xù)測定一周，用兩者菌落總數(shù)的差別來評價EGCG可食品膜的抗氧化效果。
[0030]EGCG可食用膜對腐敗菌和致病菌的抑菌效果金黃色葡萄球菌一種重要致病菌，可引起許多嚴重感染，熒光假單胞菌是一種腐敗菌，參考濾紙片法，研究EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜對腐敗菌和致病菌的抑菌效果，首先，將不同濃度的EGCG納米脂質(zhì)體可食膜和空白可食膜用打孔器制成直徑為6_的小圓片，放在分別接種熒光假單胞菌和金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)皿上，實驗組分別是含有添加5mg/mL的EGCG的納米脂質(zhì)體、10mg/mL的EGCG的納米脂質(zhì)體、15mg/mL的EGCG的納米脂質(zhì)體的可食用膜，對照組為未添加EGCG的納米脂質(zhì)體的可食用膜。做三個平行對照，通過觀測抑菌環(huán)的大小來判定EGCG可食膜對腐敗菌和致病菌的抑菌效果。
[0031]揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N值)的測定
揮發(fā)性鹽基氮是水產(chǎn)品在腐敗過程中由于酶和細菌的作用，使蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氨以及胺類等堿性含氮物質(zhì)，由于此類物質(zhì)具有揮發(fā)性，故可采用凱氏定氮法測定氮量。可以根據(jù)水產(chǎn)行業(yè)標準SC/T 3032-2007水產(chǎn)品中揮發(fā)性鹽基氮的測定方法，對實驗組和空白組的揮發(fā)性鹽基氮進行測定。測量原理:在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉(zhuǎn)變成無機銨鹽，然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨，隨水蒸氣餾出并為過量的酸液吸收，再以標準酸滴定。
[0032]稱取去骨去皮的均質(zhì)鱈魚糜樣品1g樣品到750mL的蒸餾管。加入50mL去離子水到蒸餾管中，用手搖晃混勻，然后加入IgMgO作為消泡劑，并將其連接到蒸餾器上。在接收燒瓶中加入25-30mL2%的硼酸接收液，然后選擇0.1mol的鹽酸標準滴定液滴定。

【權(quán)利要求】
1.一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜，其特征在于其由以下重量份數(shù)的原料制備而成?大豆分離蛋白I一5份，甘油1.5— 2份，去離子水40— 60份，EGCG納米脂質(zhì)體0.05—0.15份。
2.如權(quán)利要求1所述的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜，其特征在于其由以下重量份數(shù)的原料制備而成:大丑分尚蛋白2—4份，甘油1.7一1.9份，去尚子水45—55份，EGCG納米脂質(zhì)體0.1—0.15份。
3.如權(quán)利要求1所述的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜，其特征在于其由以下重量份數(shù)的原料制備而成:大豆分離蛋白3份，甘油1.8份，去離子水50份，EGCG納米脂質(zhì)體0.15份。
4.如權(quán)利要求1所述的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜，其特征在于所述EGCG納米脂質(zhì)體是濃度為5 — 15mg/ml的EGCG納米脂質(zhì)體溶液。
5.如權(quán)利要求1至4中任意一項所述的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜的制備方法，其特征在于包括如下步驟:將大豆分離蛋白、甘油、去離子水攪拌均勻后進行超聲，待充分混勻后于恒溫水浴鍋進行加熱，冷卻至室溫，加入EGCG納米脂質(zhì)體溶液，混合均勻后，置于恒溫干燥箱干燥成膜。
6.如權(quán)利要求5所述的一種EGCG納米脂質(zhì)體可食用膜的制備方法，其特征在于包括如下步驟:將大豆分離蛋白、甘油、去離子水攪拌均勻后進行超聲20min，待充分混勻后于90°C恒溫水浴鍋進行加熱30min，冷卻至室溫，加入EGCG納米脂質(zhì)體溶液，混合均勻后，置于56 °C恒溫干燥箱干燥成膜。
【文檔編號】C08K5/053GK104164090SQ201410236952
【公開日】2014年11月26日 申請日期:2014年5月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月30日
【發(fā)明者】關(guān)榮發(fā), 駱曉波, 王彥波, 羅自生, 呂飛, 張進杰, 胡穎 申請人:中國計量學院