專利名稱：：在線細(xì)胞顯微觀察儀的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本實(shí)用新型涉及一種在線細(xì)胞顯微觀察儀，特別是一種應(yīng)用于生化反應(yīng)罐的在線細(xì)胞顯微形態(tài)觀察儀。技術(shù)背景生物反應(yīng)過(guò)程中以活細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行產(chǎn)品生產(chǎn)時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)與形態(tài)變化是極重要的監(jiān)測(cè)參數(shù)，長(zhǎng)期來(lái)以從罐中取樣的方法，通過(guò)離線顯微鏡觀察獲得。近年來(lái)隨著電子技術(shù)的進(jìn)步，可以把圖象轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號(hào)，進(jìn)行計(jì)算機(jī)處理，由此得到量化的生長(zhǎng)與形態(tài)變化信息。但是，以上方法只是離線間隔采樣，缺乏動(dòng)態(tài)觀察，特別如動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)過(guò)程，抗雜菌污染是過(guò)程操作的首要問(wèn)題，因此不可能頻繁取樣，由此帶來(lái)觀察動(dòng)態(tài)性差，過(guò)程分析困難的問(wèn)題。根據(jù)以上使用情況，插入到發(fā)酵罐的在線細(xì)胞顯微觀察儀必須符合以下基本要求1)顯微觀察儀的分辨率和視野能清晰區(qū)分細(xì)菌、真菌和動(dòng)物細(xì)胞，死細(xì)胞與活細(xì)胞，并作相應(yīng)的形態(tài)分析；2)由于培養(yǎng)過(guò)程細(xì)胞濃度變化，顯微觀察儀必須有相應(yīng)的最大濃度界限；3)必須克服顯微探頭長(zhǎng)期插入發(fā)酵罐后形成的鏡頭表面菌體生長(zhǎng)或吸附；4)顯微觀察儀結(jié)構(gòu)有利于生物反應(yīng)器的滅菌和無(wú)菌操作；5)顯微觀察儀必須具有符合反應(yīng)器要求的實(shí)時(shí)數(shù)字圖象信號(hào)轉(zhuǎn)化與處理能力。德國(guó)DrChristophBittner于1994年在博士學(xué)位論文中描述了一種熒光激發(fā)法的在線顯微裝置(原位顯微鏡培養(yǎng)過(guò)程中生物量在線測(cè)定的新過(guò)程，DrChristophBittner,Hannover，1994)。其主要工作原理如圖1所示，激光發(fā)出的單色紫外光經(jīng)透鏡Ll、小孔空間濾波后再經(jīng)透鏡組L2、L3由雙色鏡片反射至物鏡，然后由物鏡投射至反應(yīng)罐腔內(nèi)的細(xì)胞表面，由于熒光效應(yīng)，細(xì)胞產(chǎn)生的熒光經(jīng)物鏡匯聚，雙色鏡片以及反射鏡，再經(jīng)濾波片后成像于同步攝像機(jī)上。由于反應(yīng)罐內(nèi)的細(xì)胞高速旋轉(zhuǎn)，因此要求同步攝像機(jī)的曝光時(shí)間很短，--般不超過(guò)2ms(根據(jù)放大倍數(shù)的不同可能需要調(diào)整)。此方法的優(yōu)點(diǎn)為不需要復(fù)雜的機(jī)械取樣裝置。但該方案采用亮視場(chǎng)照明方式，對(duì)于透明細(xì)胞所成圖像的對(duì)比度以及分辨率不好；又由于采用高速攝影，單波長(zhǎng)熒光激發(fā)的方式，在使用中更換激發(fā)光波長(zhǎng)成本較高。在2004年美國(guó)有專利介紹了一種基于在線采樣的顯微觀察儀(US6,809,862)。如圖2所示，采樣窗口4來(lái)回移動(dòng)，當(dāng)采樣窗口4移動(dòng)到顯微鏡16以及照明燈源所在位置時(shí)，反應(yīng)罐10內(nèi)的細(xì)胞溶液就流入觀察腔12;當(dāng)采樣窗口4移動(dòng)至其他位置時(shí)，觀察腔12內(nèi)的細(xì)胞溶寫(xiě)相對(duì)穩(wěn)定，以便于顯微觀察。為了更換顯微鏡頭方便，如圖3所示專門(mén)設(shè)計(jì)了一個(gè)清洗腔。拉動(dòng)拉桿2，使得顯微鏡頭以及采樣窗口4到達(dá)清洗腔位置，清洗腔腔壁有孔8，可用于引入蒸汽或消毒液進(jìn)行消毒或清洗。同時(shí)在此位置，可以方便地更換顯微鏡鏡頭。但該方案采用亮視場(chǎng)照明方式，對(duì)于透明細(xì)胞所成圖像的對(duì)比度以及分辨率不好；又由于照明系統(tǒng)在反應(yīng)罐內(nèi)工作，不便于更換光源、切換光源激發(fā)波長(zhǎng)，無(wú)法區(qū)分不同種類的細(xì)胞，如死細(xì)胞與活細(xì)胞；且頻繁的取樣與消毒會(huì)給在線的生物培養(yǎng)造成染菌的隱患。2004年德國(guó)專利DE10350243介紹了一種利用SLD(SuperLightDiode)照明，MultimodeFiber(多模光纖)傳輸、同步高速攝像的在線細(xì)胞顯微觀察儀。激光或發(fā)光二極管發(fā)出的光線經(jīng)多模光纖傳輸?shù)椒磻?yīng)罐內(nèi)，照射反應(yīng)罐(反應(yīng)器)內(nèi)的細(xì)胞，細(xì)胞反射的光線經(jīng)物鏡匯聚后成像在CCD攝像機(jī)上。由于細(xì)胞在反應(yīng)罐內(nèi)不斷地運(yùn)動(dòng)，因此要求攝像機(jī)的曝光時(shí)間比較小，才能在瞬間抓住細(xì)胞影像。攝像機(jī)拍攝的圖片送入計(jì)算機(jī)處理。該方案采用亮視場(chǎng)照明方式，對(duì)于透明細(xì)胞所成圖像的對(duì)比度以及分辨率不好；又由于在反應(yīng)罐攪拌速度較快的情況下必然采用高速攝像機(jī)，由于沒(méi)有取樣裝置限制景深，因此與圖1所示方案一樣對(duì)景深影響無(wú)法消除；同時(shí)由于其光源采用復(fù)雜的SLD(SuperLightDiode超亮發(fā)光二極管)，光源驅(qū)動(dòng)控制器比較復(fù)雜，因此更換光源、切換激發(fā)波長(zhǎng)成本高且比較困難。
發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問(wèn)題是采用暗視場(chǎng)照明以提高在線細(xì)胞顯微觀察儀對(duì)于細(xì)胞所成圖像的對(duì)比度以及分辨率；提供一種可更換波長(zhǎng)的外部光源系統(tǒng)；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的機(jī)械取樣裝置，操作簡(jiǎn)便和制造成本低的用于生化反應(yīng)器的在線細(xì)胞顯微觀察儀。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本實(shí)用新型采用的技術(shù)方案如下一種在線細(xì)胞顯微觀察儀，包括觀察儀主體，物鏡，觀察入射窗，取樣裝置，外部光源系統(tǒng)；觀察儀主體前端設(shè)置觀察入射窗，觀察入射窗前部設(shè)置取樣裝置，觀察儀主體內(nèi)，觀察入射窗后面放置物鏡和外部光源系統(tǒng)，其特點(diǎn)是外部光源系統(tǒng)與物鏡之間設(shè)置反射棱鏡，物鏡后面，觀察入射窗前設(shè)有反射鏡，反射棱鏡前面放置環(huán)形光闌片，反射棱鏡側(cè)面上部置有CCD或面陣圖像傳感器；取樣裝置由取樣塊，彈性元件，移動(dòng)裝置構(gòu)成，其中，取樣塊與移動(dòng)裝置的驅(qū)動(dòng)軸之間連接彈性元件，取樣塊前端面與觀察入射窗之間的間隙構(gòu)成采樣池。外部光源系統(tǒng)由光源，聚光鏡，可換濾色片7組成；光源為鹵素?zé)艋騆ED燈，其發(fā)射的光線經(jīng)過(guò)聚光鏡聚焦后形成平行光束后透過(guò)可換濾色片產(chǎn)生所需的波段光線。觀察儀主體通過(guò)鎖緊螺母與反應(yīng)罐相連接；觀察儀主體與反應(yīng)罐之間采用密封圈密封。移動(dòng)裝置之一由驅(qū)動(dòng)軸，連接桿，取樣拉桿，彈性元件組成，其中裝有驅(qū)動(dòng)軸的連接桿通過(guò)螺絲與取樣拉桿相連接，取樣拉桿與彈性元件在連接處通過(guò)焊接進(jìn)行密封和連接，同時(shí)彈性元件的另外一端面也在連接處通過(guò)焊接與觀察儀主體相連接。移動(dòng)裝置之二由驅(qū)動(dòng)軸，電機(jī)，取樣筒組成，其中取樣筒連接在觀察儀主體的前端，取樣筒后端置有電機(jī)，電機(jī)輸出軸連接驅(qū)動(dòng)軸。取樣塊由三個(gè)不同直徑圓柱體構(gòu)成，且由不銹鋼或藍(lán)寶石材料制成。CCD或面陣圖像傳感器經(jīng)光電轉(zhuǎn)換將數(shù)字信號(hào)傳輸給圖像采集處理單元，集處理單元將處理結(jié)果送入計(jì)算機(jī)分析，顯示或存儲(chǔ)。本實(shí)用新型的有益效果是(1)光源發(fā)出平行光束透過(guò)可替換的不同濾色片產(chǎn)生特定波段的光線后，通過(guò)環(huán)形光闌片處理將所入射的光線轉(zhuǎn)換為環(huán)形的平行光束，并且經(jīng)過(guò)反射鏡形成一個(gè)具有大環(huán)形孔徑角的照明光線照射取樣塊與觀察儀觀察窗之間所形成的取樣池內(nèi)部的細(xì)胞溶液。由于照明光線是環(huán)繞細(xì)胞溶液進(jìn)行入射照明的，其光線不返回進(jìn)入物鏡。因此視場(chǎng)是暗視場(chǎng)。只有被照射的溶液中細(xì)胞或顆粒的反射光線進(jìn)入物鏡后經(jīng)鍍有反射膜的45度反射棱鏡反射后投射到CCD或面陣圖像傳感器上。因此，本實(shí)用新型的外部光源系統(tǒng)通過(guò)替換不同濾色片、能很方便地更換波長(zhǎng)；同時(shí)暗視場(chǎng)照明能提高觀察儀對(duì)于透明細(xì)胞所成圖像的對(duì)比度以及分辨率；(2)取樣裝置由取樣塊，彈性元件，移動(dòng)裝置構(gòu)成，取樣塊的端面與觀察儀觀察窗之間的間隙空間形成了一個(gè)與反應(yīng)罐隔離的取樣池，此時(shí)取樣池內(nèi)的溶液細(xì)胞與反應(yīng)罐內(nèi)的溶液細(xì)胞相對(duì)隔離，不隨反應(yīng)罐的攪拌器運(yùn)動(dòng)，便于觀察。而且移動(dòng)裝置結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，使用方便，制造成本低。圖1是熒光激發(fā)法的在線顯微裝置的結(jié)構(gòu)原理圖；圖2是美國(guó)專利US6，809，862的顯微觀察儀的光學(xué)原理示意圖；圖3是美國(guó)專利US6,809，862的顯微觀察儀的采樣腔、清洗腔結(jié)構(gòu)示意圖；圖4是本實(shí)用新型的光學(xué)照明以及成像光路示意圖；圖5是本實(shí)用新型的取樣裝置實(shí)施例之一結(jié)構(gòu)示意圖6是本實(shí)用新型的取樣裝置實(shí)施例之二結(jié)構(gòu)示意圖；圖7，8是采樣池的工作示意圖。具體實(shí)施方式以下結(jié)合附圖與實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一的說(shuō)明。如圖4所示，本實(shí)用新型的用于生化反應(yīng)器的在線細(xì)胞顯微觀察儀，包括觀察儀主體43，反射鏡23，物鏡24，觀察入射窗22，取樣裝置40，外部光源系統(tǒng)60，反射棱鏡25，環(huán)形光闌片26，CCD或面陣圖像傳感器30。觀察儀主體前端設(shè)置觀察入射窗22，觀察入射窗22前部設(shè)置取樣裝置40，觀察儀主體43內(nèi)，觀察入射窗22后面放置物鏡24和外部光源系統(tǒng)60。外部光源系統(tǒng)60與物鏡24之間設(shè)置反射棱鏡25，物鏡24后面，觀察入射窗22前設(shè)有反射鏡23，反射棱鏡25前面放置環(huán)形光闌片26，反射棱鏡25側(cè)面上部置有CCD或面陣圖像傳感器30。外部光源系統(tǒng)60由光源28，聚光鏡29，可換濾色片27組成；燈源28可以采用鹵素?zé)?、LED燈，其發(fā)射的光線經(jīng)過(guò)聚光鏡29聚焦后形成平行光束出射。平行光束透過(guò)可替換濾色片27產(chǎn)生特定波段的光線后，通過(guò)環(huán)形光闌片26處理將所入射的光線轉(zhuǎn)換為環(huán)形的平行光束。環(huán)形平行光束經(jīng)過(guò)反射鏡23形成一個(gè)具有大環(huán)形孔徑角的照明光線照射取樣塊21與觀察儀觀察窗22之間所形成的取樣池內(nèi)部的細(xì)胞溶液。由于照明光線是環(huán)繞細(xì)胞溶液進(jìn)行入射照明的，其光線不返回進(jìn)入物鏡24。因此視場(chǎng)是暗視場(chǎng)。只有被照射的溶液中細(xì)胞或顆粒的反射光線進(jìn)入物鏡24后經(jīng)鍍有反射膜的45度反射棱鏡25反射后投射到CCD或面陣圖像傳感器30上。經(jīng)30光電轉(zhuǎn)換后成為數(shù)字信號(hào)傳輸給圖像采集處理單元31。圖像采集處理單元31將處理結(jié)果送計(jì)算機(jī)32進(jìn)行分析，顯示或存儲(chǔ)。如圖5，6所示，取樣裝置40由取樣塊21，彈性元件38，移動(dòng)裝置構(gòu)成，其中，取樣塊21與移動(dòng)裝置的驅(qū)動(dòng)軸51之間連接彈性元件38，取樣塊21前端面與觀察入射窗22之間的間隙構(gòu)成采樣池50。如圖5所示，移動(dòng)裝置之一由驅(qū)動(dòng)軸51，連接桿46，取樣拉桿44，彈性元件39組成，其中裝有驅(qū)動(dòng)軸51的連接桿46通過(guò)螺絲47與取樣拉桿44相連接，取樣拉桿44與彈性元件39通過(guò)在9a處焊接進(jìn)行密封和連接，同時(shí)彈性元件39的另外一端面也通過(guò)在9b處焊接與觀察儀主體43相連接。觀察儀主體43通過(guò)鎖緊螺母42與反應(yīng)罐41相連接。觀察儀主體43與反應(yīng)罐41之間采用密封圈45密封。觀察儀觀察入射窗22浸入反應(yīng)罐41內(nèi)部，其材料為石英玻璃或藍(lán)寶石。取樣塊21為三個(gè)不同直徑圓柱體形狀，采用不銹鋼或藍(lán)寶石材料制成。其一端面與彈性元件38焊接，另外一端面可以沿觀察儀觀察窗中心軸線方向左右移動(dòng)，與觀察儀觀察窗22組成了一個(gè)采樣池50。向外拉動(dòng)取樣拉桿44，取樣拉桿44通過(guò)連接桿46、彈性元件38推動(dòng)取樣塊21向靠近觀察窗22方向移動(dòng)，同時(shí)彈性元件39處于壓縮狀態(tài)；向內(nèi)推動(dòng)取樣拉桿44，取樣拉桿44通過(guò)連接桿46、彈性元件38推動(dòng)取樣塊21向遠(yuǎn)離觀察窗22方向移動(dòng)，同時(shí)彈性元件39處于松弛狀態(tài)。彈性元件38、39均采用不銹鋼材料制成，同時(shí)連接桿46、拉桿44也是由不銹鋼材料制成。如圖7，8所示，當(dāng)連接桿46沿箭頭方向移動(dòng)時(shí)，連接桿46通過(guò)彈性元件38帶動(dòng)取樣塊21朝著遠(yuǎn)離觀察儀觀察窗22的方向移動(dòng)，取樣塊21與觀察儀觀察窗22之間的距離變大，這時(shí)取樣塊21與觀察儀觀察窗22之間的組成的取樣池50與反應(yīng)罐41連通，取樣池細(xì)胞溶液與反應(yīng)罐內(nèi)的細(xì)胞溶液連通。當(dāng)連接桿46通過(guò)彈性元件38帶動(dòng)取樣塊21朝著靠近觀察儀觀察窗22的方向移動(dòng)時(shí)，取樣塊21與觀察儀觀察窗22之間的距離變小，到達(dá)極限位置時(shí)，取樣塊21的端面與觀察儀觀察窗22之間的間隙空間形成了一個(gè)與反應(yīng)罐41隔離的取樣池50，此時(shí)取樣池50內(nèi)的溶液細(xì)胞與反應(yīng)罐內(nèi)的溶液細(xì)胞相對(duì)隔離，不隨反應(yīng)罐的攪拌器運(yùn)動(dòng)，便于觀察。成形后的取樣池的深度大小可以通過(guò)控制取樣塊21端面與觀察儀觀察窗22之間的距離來(lái)獲得。如圖6所示，移動(dòng)裝置之二由驅(qū)動(dòng)軸51，電機(jī)48，取樣筒49組成，其中取樣筒49連接在觀察儀主體43的前端，取樣筒49后端置有電機(jī)48，電機(jī)48輸出軸連接驅(qū)動(dòng)軸51。觀察儀主體43與反應(yīng)罐41通過(guò)鎖緊螺母42相連接。采樣池50是由取樣塊21的一個(gè)端面與觀察儀觀察窗22之間的間隙組成。電機(jī)48為耐高溫電機(jī)，密封在觀察儀主體43中的浸入反應(yīng)罐溶液部分中。當(dāng)電機(jī)48通過(guò)彈性元件38帶動(dòng)取樣塊21沿著使采樣池50體積變小的方向移動(dòng)至一個(gè)極限位置，采樣池50內(nèi)的細(xì)胞溶液與反應(yīng)罐內(nèi)的溶液隔離，因此釆樣池內(nèi)的細(xì)胞溶液相對(duì)靜止，便于觀察。相反，當(dāng)電機(jī)48帶動(dòng)取樣塊21向另一方向移動(dòng)時(shí)，取樣池50內(nèi)的溶液與反應(yīng)罐41內(nèi)的細(xì)胞溶液混合。本實(shí)用新型的實(shí)施例一為驗(yàn)證本實(shí)用新型，使用本實(shí)用新型的一種用于生化反應(yīng)器的在線細(xì)胞顯微觀察儀在微生物反應(yīng)器中對(duì)重組酵母發(fā)酵過(guò)程觀察應(yīng)用在培養(yǎng)過(guò)程中每2h取樣一次進(jìn)行細(xì)胞光密度(0D600)測(cè)定、細(xì)胞干重、離線顯微鏡血球計(jì)數(shù)，同時(shí)在線細(xì)胞顯微觀察儀進(jìn)行自動(dòng)觀察和計(jì)數(shù)，結(jié)果如表l。由表1可知在線細(xì)胞顯微觀察儀的細(xì)胞在線計(jì)數(shù)結(jié)果與細(xì)胞光密度(0D600)、細(xì)胞血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)結(jié)果基本一致，而在培養(yǎng)后期時(shí)稍微偏大。各細(xì)胞濃度與發(fā)酵時(shí)間進(jìn)行指數(shù)方程擬合，線性相關(guān)系數(shù)以在線細(xì)胞顯微觀察儀最高，與血球計(jì)數(shù)板離線計(jì)數(shù)基本一致，而明顯高于細(xì)胞光密度和細(xì)胞干重計(jì)數(shù)法的結(jié)果，這是由于光密度法和干重法均無(wú)法區(qū)分死、活細(xì)胞、以及發(fā)酵液中的固形物顆粒，因而誤差較大。表l離線、在線細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞光密度、細(xì)胞干重結(jié)果比較離線血球計(jì)數(shù)在線細(xì)胞顯微細(xì)胞光密度細(xì)胞干重<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>本實(shí)用新型的實(shí)例二-為驗(yàn)證本實(shí)用新型，使用本實(shí)用新型的用于生化反應(yīng)器的在線細(xì)胞顯微觀察儀在哺乳動(dòng)物細(xì)胞反應(yīng)器中對(duì)重組動(dòng)物細(xì)胞(HEK293)培養(yǎng)過(guò)程觀察應(yīng)用發(fā)酵過(guò)程每24h取樣一次進(jìn)行離線細(xì)胞血球計(jì)數(shù)。二者細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果如表2。由表2可知，離線的血球計(jì)數(shù)和在線細(xì)胞顯微觀察儀的細(xì)胞數(shù)量計(jì)數(shù)結(jié)果基本一致。表5L機(jī)械攪拌式反應(yīng)器培養(yǎng)HEK293細(xì)胞密度比較<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>權(quán)利要求1.一種在線細(xì)胞顯微觀察儀，包括觀察儀主體(43)，物鏡(24)，觀察入射窗(22)，取樣裝置(40)，外部光源系統(tǒng)(60)，觀察儀主體(43)前端設(shè)置觀察入射窗(22)，觀察入射窗(22)前部設(shè)置取樣裝置(40)，觀察儀主體(41)內(nèi)，觀察入射窗(22)后面放置物鏡(24)和外部光源系統(tǒng)(60)，其特征在于，所述外部光源系統(tǒng)(60)與物鏡(24)之間設(shè)置反射棱鏡(25)，物鏡(24)后面，觀察入射窗(22)前設(shè)有反射鏡(23)，反射棱鏡(25)前面放置環(huán)形光闌片(26)，反射棱鏡(25)側(cè)面上部置有CCD或面陣圖像傳感器(30)；所述取樣裝置(40)由取樣塊(21)，彈性元件(38)，移動(dòng)裝置構(gòu)成，其中，取樣塊(21)與移動(dòng)裝置的驅(qū)動(dòng)軸(51)之間連接彈性元件(38)，取樣塊(21)前端面與觀察入射窗(22)之間的間隙構(gòu)成采樣池(50)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的在線細(xì)胞顯微觀察儀，其特征在于，所述外部光源系統(tǒng)(60)由光源(28)，聚光鏡(29)，可換濾色片(27)組成；所述光源(28)為鹵素?zé)艋騆ED燈，其發(fā)射的光線經(jīng)過(guò)聚光鏡(29)聚焦后形成平行光束后透過(guò)可換濾色片(27)產(chǎn)生所需的波段光線。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的在線細(xì)胞顯微觀察儀，其特征在于，所述觀察儀主體(43)通過(guò)鎖緊螺母(42)與反應(yīng)罐(41)相連接；觀察儀主體(43)與反應(yīng)罐(41)之間采用密封圈(45)密封。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的在線細(xì)胞顯微觀察儀，其特征在于，所述移動(dòng)裝置由驅(qū)動(dòng)軸(51)，連接桿(46)，取樣拉桿(44)，彈性元件(39)組成，其中裝有驅(qū)動(dòng)軸(51)的連接桿(46)通過(guò)螺絲(47)與取樣拉桿(44)相連接，取樣拉桿(44)與彈性元件(39)在連接處(9a)通過(guò)焊接進(jìn)行密封和連接，同時(shí)彈性元件(39)的另外一端面也在連接處(9b)通過(guò)焊接與觀察儀主體(43)相連接。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的在線細(xì)胞顯微觀察儀，其特征在于，所述移動(dòng)裝置由驅(qū)動(dòng)軸(51)，電機(jī)(48)，取樣筒(49)組成，其中取樣筒(49)連接在觀察儀主體(43)的前端，取樣筒(49)后端置有電機(jī)(48)，電機(jī)(48)輸出軸連接驅(qū)動(dòng)軸(51)。6..根據(jù)權(quán)利要求1所述的在線細(xì)胞顯微觀察儀，其特征在于，所述取樣塊(21)由三個(gè)不同直徑圓柱體構(gòu)成，且由不銹鋼或藍(lán)寶石材料制成。7..根據(jù)權(quán)利要求1所述的在線細(xì)胞顯微觀察儀，其特征在于，所述CCD或面陣圖像傳感器(30)經(jīng)光電轉(zhuǎn)換將數(shù)字信號(hào)傳輸給圖像采集處理單元(31)，集處理單元(31)將處理結(jié)果送入計(jì)算機(jī)(32)分析，顯示或存儲(chǔ)。專利摘要本實(shí)用新型涉及一種用于生化反應(yīng)器的在線細(xì)胞顯微觀察儀，包括觀察儀主體，物鏡，觀察入射窗，取樣裝置，外部光源系統(tǒng)；其特點(diǎn)是外部光源系統(tǒng)與物鏡之間設(shè)置反射棱鏡，物鏡后面，觀察入射窗前設(shè)有反射鏡，反射棱鏡前面放置環(huán)形光闌片，反射棱鏡側(cè)面上部置有CCD或面陣圖像傳感器；取樣裝置由取樣塊，彈性元件，移動(dòng)裝置構(gòu)成，其中，取樣塊與移動(dòng)裝置的驅(qū)動(dòng)軸之間連接彈性元件，取樣塊前端面與觀察入射窗之間的間隙構(gòu)成采樣池。本實(shí)用新型的外部光源系統(tǒng)通過(guò)替換不同濾色片、能很方便地更換波長(zhǎng)；同時(shí)暗視場(chǎng)照明能提高觀察儀對(duì)于細(xì)胞所成圖像的對(duì)比度以及分辨率；并且具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，使用方便，制造成本低等特點(diǎn)。文檔編號(hào)G02B21/36GK201047885SQ20072007120公開(kāi)日2008年4月16日申請(qǐng)日期2007年6月18日優(yōu)先權(quán)日2007年6月18日發(fā)明者健劉,恂張,明張,張嗣良,張?jiān)婪?王紹娟,袁旭軍,賀莉清,郭美錦,馬文峰申請(qǐng)人:上海國(guó)強(qiáng)生化工程裝備有限公司;上海科源電子科技有限公司