專利名稱：顯微鏡、區(qū)域判定方法和程序的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本公開涉及顯微鏡、區(qū)域判定方法和程序，其能夠?qū)τ谒臄z的樣本圖像執(zhí)行區(qū)域判定處理。
背景技術(shù)：
最近已經(jīng)知道了如下的系統(tǒng)，其將由光學(xué)顯微鏡獲得的生物有機體的細(xì)胞、組織等的放大圖數(shù)字化，并且醫(yī)生、病理學(xué)者等基于數(shù)字圖像檢查組織等并治療病人。例如，通過虛擬載片(slide)設(shè)備，對被其中封入生物有機體的組織等的標(biāo)本進(jìn)行掃描并且產(chǎn)生組織等的數(shù)字圖像。例如，日本專利公報No. 2010-197425包括關(guān)于如下所述的標(biāo)本的描述，該標(biāo)本用于通過顯微鏡觀察諸如病理細(xì)胞的樣本。如該專利文獻(xiàn)的段落
和圖5所述，樣本被布置在載玻片(3)上并且在封入劑(5)位于中間的狀態(tài)下疊置蓋玻片(I)。由此，制造了標(biāo)本(6)。

發(fā)明內(nèi)容
當(dāng)如上所述地產(chǎn)生生物有機體的組織等的數(shù)字圖像時，將顯微鏡聚焦在封入在標(biāo)本中的樣本上是很重要的。然而，在制造標(biāo)本時，經(jīng)常在蓋玻片和載玻片之間產(chǎn)生氣泡。在這種情況下，在對標(biāo)本進(jìn)行掃描時，難以將顯微鏡聚焦在樣本上。此外，例如在由通過成像獲得的數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)執(zhí)行自動診斷時，也存在氣泡部分被錯誤地包括在診斷目標(biāo)區(qū)域并且妨礙正確診斷的可能性?？紤]到上述內(nèi)容，期望提供一種顯微鏡、區(qū)域判定方法和程序，即使在空氣被包括在標(biāo)本中的情況下，它們也能夠?qū)⒊丝諝鈪^(qū)域之外的區(qū)域判定為聚焦處理等的對象區(qū)域。根據(jù)本發(fā)明的實施例，提供了一種包括暗視野照明系統(tǒng)、成像單元和區(qū)域判定器的顯微鏡。暗視野照明系統(tǒng)將暗視野照明光照射到標(biāo)本，在標(biāo)本中，通過使用封入劑將樣本封入在載玻片與蓋玻片之間。成像單元拍攝利用暗視野照明光照射的標(biāo)本的暗視野圖像。區(qū)域判定器基于所拍攝的暗視野圖像來檢測封入劑與被包括在載玻片和蓋玻片之間的空氣之間的邊界，并且將除了空氣的區(qū)域之外的區(qū)域判定為對于樣本的關(guān)心區(qū)域。在該顯微鏡中，暗視野照明光被照射到其中封入了樣本的標(biāo)本并且拍攝該標(biāo)本的暗視野圖像。暗視野圖像是由暗視野照明光等產(chǎn)生的散射光的圖像，并且基于暗視野圖像檢測在標(biāo)本中的空氣與封入劑之間的邊界。因此,除了標(biāo)本中的空氣區(qū)域之外的區(qū)域可以被判定為作為聚焦處理的對象等的關(guān)心區(qū)域。區(qū)域判定器可以將在暗視野圖像中形成閉區(qū)域的區(qū)域線檢測為所述邊界。在該顯微鏡中，形成閉區(qū)域的區(qū)域線被檢測為邊界。其允許容易檢測空氣與封入劑之間的邊界。區(qū)域判定器可以將閉區(qū)域的內(nèi)部區(qū)域與外部區(qū)域相比較，并將兩者之一判定為關(guān)心區(qū)域。在該顯微鏡中，將閉區(qū)域的內(nèi)部區(qū)域和外部區(qū)域進(jìn)行比較，并且基于比較結(jié)果來判定關(guān)心區(qū)域。因此，可以可靠地判定關(guān)心區(qū)域。該顯微鏡還可以包括聚焦處理單元，其計算內(nèi)部區(qū)域中的聚焦位置和外部區(qū)域中的聚焦位置。在這種情況下，區(qū)域判定器可以將計算得到的內(nèi)部區(qū)域和外部區(qū)域的聚焦位置進(jìn)行比較并判定關(guān)心區(qū)域。如上所述，內(nèi)部區(qū)域中的聚焦位置和外部區(qū)域中的聚焦位置可以被比較，并且可以基于比較結(jié)果判定關(guān)心區(qū)域。該顯微鏡還可以包括照射器和反射光檢測器。照射器將檢測光照射到內(nèi)部區(qū)域和外部區(qū)域的每一者。反射光檢測器檢測照射到內(nèi)部區(qū)域和外部區(qū)域的檢測光的反射光，在這種情況下，區(qū)域判定器可以判定在由反射光檢測器檢測到的、內(nèi)部區(qū)域和外部區(qū)域的每一者的反射光中是否包括由空氣的區(qū)域反射的反射光，并且基于判定結(jié)果來判定關(guān)心區(qū)域。如上所述，檢測光可以被照射到內(nèi)部區(qū)域和外部區(qū)域中的每一者，并且可以基于檢測光的反射光來判定關(guān)心區(qū)域。根據(jù)本公開的一個實施例，提供了一種區(qū)域判定方法，包括將暗視野照明光照射到標(biāo)本，在標(biāo)本中，通過使用封入劑將樣本封入在載玻片與蓋玻片之間。拍攝利用暗視野照明光照射的標(biāo)本的暗視野圖像?；谒臄z的暗視野圖像來檢測封入劑與被包括在載玻片和蓋玻片之間的空氣之間的邊界，并且將除了空氣的區(qū)域之外的區(qū)域判定為對于樣本的關(guān)心區(qū)域。根據(jù)本公開的一個實施例，提供了一種用于使安裝有計算機的顯微鏡執(zhí)行包括照明、拍攝和檢測的處理的程序。照明處理將暗視野照明光照射到標(biāo)本，在標(biāo)本中，通過使用封入劑將樣本封入在載玻片與蓋玻片之間。拍攝處理拍攝利用暗視野照明光照射的標(biāo)本的暗視野圖像。檢測處理基于所拍攝的暗視野圖像來檢測封入劑與被包括在載玻片和蓋玻片之間的空氣之間的邊界，并且將除了空氣的區(qū)域之外的區(qū)域判定為對于樣本的關(guān)心區(qū)域。該程序可以被記錄在記錄介質(zhì)中。如上所述，根據(jù)本公開的實施例，即使在空氣被包含在標(biāo)本中時，仍然可以將除了空氣區(qū)域之外的區(qū)域判定為聚焦處理等的對象區(qū)域。


圖I是示出了根據(jù)本公開的第一實施例的顯微鏡的構(gòu)造示例的示意圖；圖2A和圖2B是示出了圖I中示出的標(biāo)本的構(gòu)造示例的示意圖；圖3是示意性地示出圖I中示出的標(biāo)本臺的平面圖；圖4是示出了標(biāo)本被放置在圖3中示出的標(biāo)本臺上的狀態(tài)的圖；圖5是示出了邊界檢測用照明系統(tǒng)的示意性立體圖，其作為根據(jù)第一實施例的暗視野照明系統(tǒng)；圖6是示出了處于空氣進(jìn)入載玻片與蓋玻片之間的狀態(tài)的樣本的平面圖；圖7是通過利用由亮視野照明的透射光對圖6中示出的標(biāo)本進(jìn)行照明而拍攝的縮略圖的圖像；圖8是通過利用由染色用暗視野照明的透射光對圖6中示出的標(biāo)本進(jìn)行照明而拍攝的縮略圖的圖像；圖9是通過根據(jù)實施例的邊界檢測用照明系統(tǒng)，利用由暗視野照明的透射光對圖 6中示出的標(biāo)本進(jìn)行照明而拍攝的縮略圖的圖像；圖10是示意性地示出了圖I中示出的整體控制器的構(gòu)造示例的框圖；圖11是示出了圖I中示出的顯微鏡的操作示例的流程圖；圖12是包括氣泡的標(biāo)本的示意截面圖；圖13A和13B是示出了包括氣泡的標(biāo)本的放大圖的局部的圖；圖14是示出了根據(jù)實施例的設(shè)置關(guān)心區(qū)域的處理以及拍攝關(guān)心區(qū)域的放大圖的處理的流程圖；圖15A和圖15B是示出了標(biāo)本的暗視野圖像的其它示例的平面圖；圖16是示意性地示出了具有圖I中示出的整體控制器的功能的計算機的構(gòu)造示例的框圖；圖17是示出了根據(jù)本公開的第二實施例的、設(shè)定關(guān)心區(qū)域的處理以及拍攝關(guān)心區(qū)域的放大圖的處理的流程圖；圖18是用于解釋如圖17所示的設(shè)定關(guān)心區(qū)域的處理的圖；圖19是示出了圖14中示出的顯微鏡的處理的修改示例的流程圖；圖20是示出了根據(jù)圖17中示出的第二實施例的顯微鏡的處理的修改示例的流程圖；并且圖21是示出了用于圖5中示出的邊界檢測用照明系統(tǒng)的修改示例的示意性立體圖。
具體實施例方式現(xiàn)在將會參照附圖描述本公開的實施例?！吹谝粚嵤├礫顯微鏡]圖I是示出了根據(jù)本公開的第一實施例的顯微鏡100的構(gòu)造示例的示意圖。顯微鏡100具有縮略圖拍攝單元110，其拍攝其中封入了作為樣本的生物樣品的標(biāo)本180的整體的縮略圖。此外，顯微鏡100具有以預(yù)定放大率拍攝生物樣品的放大圖的放大圖拍攝單元 120。在本實施例中，縮略圖拍攝單元110具有成像單元的功能。圖2A和圖2B是示出了標(biāo)本180的構(gòu)造示例的示意圖。圖2A是標(biāo)本180的平面圖。圖2B是在沿著標(biāo)本180的短邊方向延伸的線處的界面(沿著線A-A的截面圖)。根據(jù)預(yù)定的固定技術(shù)，通過將生物樣品190固定到載玻片160上制造標(biāo)本180。在本實施例中，通過使用封入劑165將生物樣品190封入載玻片160與蓋玻片161之間。生物樣品190例如由諸如血液之類的結(jié)締組織、上皮組織或這兩種組織二者的組織部分或者涂片細(xì)胞構(gòu)成。這些組織部分和涂片細(xì)胞根據(jù)需要受到各種染色。染色的示例不僅包括普通染色(代表為蘇木精曙紅(HE)染色、姬姆薩染色(Giemsa staining)、巴氏染色(Papanicolaou staining)),還包括突光染色(諸如突光原位雜交(FISH)染色和酶抗體技術(shù))。作為封入劑165，例如，使用通過將高分子聚合物溶解在芳香族有機物中而制備的藥劑。然而，封入劑165的種類沒有具體的限制。可以使用含有染色劑的封入劑。如圖2A所示，描述了用于識別相應(yīng)生物樣品190的附屬信息(例如，采集樣品的人員的姓名，采集的日期和時間、以及染色劑的種類)的標(biāo)簽162被貼到標(biāo)本180上。如圖I所示,顯微鏡100具有其上放置標(biāo)本180的標(biāo)本臺130。圖3是示意性地示出了標(biāo)本臺130的平面圖。圖4是示出了標(biāo)本180被放置在標(biāo)本臺130上的狀態(tài)的圖。如圖3所示，在標(biāo)本臺130中形成了具有略小于標(biāo)本180的面積的孔131。在標(biāo)本臺130的孔131周圍，設(shè)置了固定標(biāo)本180的外周181的突起132a到132c。突起132a在與孔131相對應(yīng)的位置處支撐被放置在標(biāo)本臺130上的標(biāo)本180的短邊181a。突起132b和132c支撐標(biāo)本180的長邊181b。此外，在標(biāo)本臺130上，提供保持部133，其支撐作為短邊側(cè)181a與長邊側(cè)181b之間的角部182的對角角部的角部183。 如圖3和圖4所示，保持部133可繞樞轉(zhuǎn)點133a樞轉(zhuǎn)并且受到朝向孔131的偏向力。用于識別標(biāo)本臺130的位置的標(biāo)記134a到134d被設(shè)置在標(biāo)本臺130的放置面138 上，在該放置面138上放置標(biāo)本180。例如，標(biāo)本臺130的圖像由縮略圖拍攝單元等拍攝。 基于在該成像中標(biāo)記134a到134d的成像位置，調(diào)整標(biāo)本臺130的位置。作為標(biāo)記134a到 134d，例如使用以彼此不同的位置關(guān)系布置的白色圓圈和白色三角的一對標(biāo)記。如圖I所示,顯微鏡100具有沿著預(yù)定方向移動標(biāo)本臺130的標(biāo)本臺驅(qū)動機構(gòu) 135。通過標(biāo)本臺驅(qū)動機構(gòu)135，標(biāo)本臺130可以沿著與標(biāo)本臺表面平行的任意方向(X軸Y 軸方向)以及垂直于標(biāo)本臺表面的方向(Z軸方向)自由地移動。放大圖拍攝單元120具有光源121、會聚透鏡122、物鏡123和成像元件124。此外，放大圖拍攝單元120具有視野止擋件(未示出)等。根據(jù)本實施例的光源121設(shè)置在標(biāo)本臺130的與放置面138相反一側(cè)的表面139 那側(cè)。通過光源121來照射對受到一般染色的生物樣品190進(jìn)行照明的光(下文中，稱作為亮視野照明光或者簡稱為照明光)。或者，可以通過光源121照射對受到特殊染色的生物樣品190進(jìn)行照明的光(下文中，稱作為暗視野照明光)?；蛘?，能夠以交替的方式照射亮視野照明光和染色用暗視野照明光的單元可以被用作光源121。在這種情況下，兩種類型的光源，S卩，照射亮視野照明光的光源以及照射染色用暗視野照明光的光源被設(shè)置為光源121。光源121也可以被設(shè)置在標(biāo)本臺130的放置面 138那側(cè)。會聚透鏡122將來自光源121的亮視野照明光和從染色用暗視野照明光的光源照射的暗視野照明光會聚到標(biāo)本臺130上的標(biāo)本180上。以其光軸ERA作為放置在標(biāo)本臺 130的放置面138上的放大圖拍攝單元120的基準(zhǔn)位置的法線的方式，將該會聚透鏡122布置在光源121與標(biāo)本臺130之間。以其光軸ERA作為放置在標(biāo)本臺130的放置面138上的放大圖拍攝單元120的基準(zhǔn)位置的法線的方式，將預(yù)定放大率的物鏡123布置在標(biāo)本臺130的放置面138那側(cè)。穿過放置在標(biāo)本臺130上的標(biāo)本180的透射光由物鏡123會聚并且在設(shè)置于物鏡123的后側(cè) (即，照明光的行進(jìn)目標(biāo)側(cè))上的成像元件124上形成圖像。在放大圖拍攝單元120中，通過相應(yīng)地改變物鏡123，可以為各種放大率進(jìn)行放大的方式對生物樣品190進(jìn)行成像。在成像元件124上，形成在標(biāo)本臺130的放置面138上具有預(yù)定橫向?qū)挾群涂v向?qū)挾鹊某上穹秶鷥?nèi)的圖像。即，生物樣品190的一部分被成像為使其由物鏡123放大。成像范圍的尺寸根據(jù)成像元件124的像素尺寸、物鏡123的放大率等決定。成像范圍的尺寸充分地小于由縮略圖拍攝單元110成像的成像范圍?？s略圖拍攝單元110具有光源111、物鏡112和成像元件113。此外，縮略圖拍攝單元110具有邊界檢測用照明系統(tǒng)(在圖I中未示出)，來作為根據(jù)本實施例的暗視野照明系統(tǒng)。將會之后描述邊界檢測用照明系統(tǒng)的細(xì)節(jié)。光源111設(shè)置在標(biāo)本臺130的與放置面138相反側(cè)的表面139那側(cè)。作為光源 111，可以使用照射亮視野照明光的光源或者照射染色用暗視野照明光的光源?；蛘撸梢允褂靡郧袚Q的方式照射這兩種照明光的光源。光源111也可以被設(shè)置在標(biāo)本臺130的放置面138那側(cè)上。以其光軸SRA為放置面138 (其上放置標(biāo)本180)上的縮略圖拍攝單元110的基準(zhǔn)位置的法線的方式，預(yù)定放大率的物鏡112被設(shè)置在標(biāo)本臺130的放置面138那側(cè)上。穿過放置在標(biāo)本臺130上的標(biāo)本180的透射光由該物鏡112會聚并且在設(shè)置于物鏡112的后方(即，成像光的行進(jìn)目標(biāo)那側(cè))的成像元件113上形成圖像。在成像元件113上，形成在包括放置在放置臺138上的標(biāo)本180的整體的成像范圍中的圖像光(基本穿過標(biāo)本180的整體的透射光)。形成在成像元件113上的該圖像被獲得為縮略圖，該縮略圖是通過對標(biāo)本180的整體進(jìn)行成像而獲得的顯微鏡圖像。此外，通過成像元件113，拍攝由邊界檢測用照明系統(tǒng)(之后對其進(jìn)行描述)的暗視野照明光照射的標(biāo)本180的縮略圖。如圖I所示，放大圖拍攝單元120和縮略圖成像單元110也被布置為使得光軸SRA 和光軸ERA (它們都是各個單元的基準(zhǔn)位置的法線)沿著Y軸方向彼此分離距離D。該距離D被設(shè)計為使得保持放大圖拍攝單元120的物鏡123的鏡筒(未示出)不落入成像元件 113的成像范圍內(nèi)。另一方面，距離D被設(shè)置為盡可能短以減小顯微鏡100的尺寸。上述成像元件124和113可以是一維成像元件或二維成像元件。圖5是示出了作為根據(jù)本實施例的暗視野照明系統(tǒng)的邊界檢測用照明系統(tǒng)的示意立體圖。邊界檢測用照明系統(tǒng)500具有發(fā)光二極管LED)環(huán)狀照明器114，其利用暗視野照明光對標(biāo)本180進(jìn)行照射。LED環(huán)狀照明器114被布置在放置于標(biāo)本臺130上的標(biāo)本180 與成像元件113之間。即，其設(shè)置在與光源111相反的一側(cè)。LED環(huán)狀照明器114的位置和形狀也被設(shè)計為使得暗視野照明光可以從標(biāo)本180的邊緣部分184那一側(cè)傾斜地照明。暗視野照明光的照射角度可以被任意地設(shè)置。例如，可以以標(biāo)本180被包括在環(huán)中的方式，將LED環(huán)狀照明器114布置在與標(biāo)本180基本相同的高度。此外，暗視野照明光可以從標(biāo)本180的旁邊照射。下文中將會描述由根據(jù)本實施例的邊界檢測用照明系統(tǒng)500的暗視野照明光照射的標(biāo)本180的縮略圖。圖6到圖9是用于該描述的圖。如圖6所示，當(dāng)生物樣品190被封入標(biāo)本180中時，空氣進(jìn)入載玻片160與蓋玻片CN 102540445 A
161之間并且在這種情況下產(chǎn)生氣泡50。圖7是通過利用亮視野照明的透射光照射該標(biāo)本180而拍攝的縮略圖210的圖像。如圖7所示，在封入劑165與氣泡50之間的邊界55處的對比度較低。因此，難以檢測該邊界55。圖8是通過利用染色用暗視野照明的透射光照射該標(biāo)本180而拍攝的縮略圖220 的圖像。如圖8所示，也在縮略圖220中，在封入劑165與氣泡50之間的邊界55處的對比度較低，并且難以檢測邊界55。圖9是通過根據(jù)本實施例的邊界檢測用照明系統(tǒng)500的暗視野照明光照射而拍攝的縮略圖200的圖像。該縮略圖200被拍攝為暗視野圖像。如圖9所示，在縮略圖200中， 在封入劑165與氣泡50之間的邊界55處的對比度被強調(diào)。這是因為暗視野照明光在封入劑165與氣泡50之間的邊界55處被散射，并且被散射的光的圖像等形成在成像元件113上。作為一般光的特性，具有短波長的光容易被散射(即，散射率較高)并且具有長波長的光難以被散射(即，散射率較低)。散射率根據(jù)波長而變化的散射被稱為瑞利散射 (Rayleigh Scattering)。瑞利散射的散射率與波長的四次冪成反比。當(dāng)光被散射到更大程度時，散射率的變化的差異可以被成像為更高程度的光的對比度差異，并且因此可以更清楚地檢測邊界55。因此，具有高散射率的短波長光(例如，藍(lán)色、紫色或白色光)可以被用作為暗視野照明光。然而，暗視野照明光的波長可以被任意地設(shè)置。在本實施例中，LED照明器被用作為邊界檢測用照明系統(tǒng)。然而，照明系統(tǒng)不局限于此。例如，激光可以被用作為暗視野照明系統(tǒng)。如圖I所示，顯微鏡100連接有用于控制顯微鏡100的各個模塊的控制器。例如， 顯微鏡100連接有用于控制由顯微鏡100擁有的各種類型的光源(包括光源111、光源121 和LED環(huán)狀照明器114)進(jìn)行控制的照明控制器141。標(biāo)本臺驅(qū)動機構(gòu)135連接到標(biāo)本臺驅(qū)動控制器142。縮略圖拍攝控制器143連接到用于拍攝縮略圖的成像元件113，并且放大圖拍攝控制器144連接到用于拍攝生物樣品190的放大圖的成像元件124。這些控制器經(jīng)由各種類型的數(shù)據(jù)通信路徑連接到顯微鏡100的各個模塊。如圖I所示，控制顯微鏡100整體的總控制器150被分立地設(shè)置在顯微鏡100中。 上述各種控制器經(jīng)由各種數(shù)據(jù)通信路徑連接到總控制器150?？偪刂破?50具有區(qū)域判定器等的功能。各個控制器和總控制器150由中央處理單元(CPU)、只讀存儲器(ROM)、隨機存取存儲器(RAM)、諸如硬盤驅(qū)動器(HDD)之類的存儲裝置、通信裝置和算法電路等實現(xiàn)。當(dāng)表明用于照明生物樣品190的方法的信息從總控制器150輸出到照明控制器 141時，照明控制器141基于該信息執(zhí)行相應(yīng)光源的照射控制。例如，如果照明光要由縮略圖拍攝單元110的光源111照射，那么照明控制器141參照照明方法的信息并且判定成像模式。具體地，照明控制器141判定要執(zhí)行以下模式中的哪種模式應(yīng)當(dāng)獲取亮視野圖像的模式(下文中，稱作為亮視野模式)和應(yīng)當(dāng)獲取暗視野圖像的模式(下文中，稱作為暗視野模式)。照明控制器141設(shè)置與用于光源111的模式相關(guān)的參數(shù)，并且使得光源111照射適合于該模式的照明光。由此，從光源111發(fā)射的照明光經(jīng)由標(biāo)本臺130的孔131照射到生物樣品190。由照明控制器141設(shè)置的參數(shù)的示例包括照明光的強度以及光源的種類的選擇。如果要由放大圖拍攝單元120的光源121照射的照明光，那么照明控制器141參照照明方法的信息并且判定執(zhí)行亮視野模式還是暗視野模式。照明控制器141設(shè)置與用于光源121的模式相關(guān)的參數(shù)，并且使得從光源121照射適合于該模式的照明光。由此，從光源121發(fā)射的照明光經(jīng)由標(biāo)本臺130的孔131照射到生物樣品190。亮視野模式中的照射光通常是可見光。暗視野模式中的照射光通常是包括諸如能夠激發(fā)用于特殊染色的熒光標(biāo)記的波長的光。在暗視野模式中，熒光標(biāo)記的背景部分被去掉。當(dāng)表示用于對生物樣品190進(jìn)行成像的方法的信息從總控制器150輸出到標(biāo)本臺驅(qū)動控制器142時，標(biāo)本臺驅(qū)動控制器142基于該信息控制標(biāo)本臺驅(qū)動機構(gòu)135。例如，表示被拍攝的生物樣品190的縮略圖的信息從總控制器150輸出到標(biāo)本臺驅(qū)動控制器142。 響應(yīng)于該信息，標(biāo)本臺驅(qū)動控制器142控制標(biāo)本臺驅(qū)動機構(gòu)135的驅(qū)動，并且沿著標(biāo)本臺表面方向(XY軸方向)移動標(biāo)本臺130。標(biāo)本臺130被移動為使得整個標(biāo)本180落入成像元件113的成像范圍內(nèi)。此外,標(biāo)本臺驅(qū)動控制器142沿著與標(biāo)本臺表面垂直的方向移動標(biāo)本臺130 (Z軸方向，生物樣品190的深度方向)，以進(jìn)行物鏡112的聚焦處理。當(dāng)表示被拍攝的生物樣品190的放大圖的信息從總控制器150輸出時，標(biāo)本臺驅(qū)動控制器142將標(biāo)本臺130從縮略圖拍攝單元110移動到放大圖拍攝單元120。以使得生物樣品190被布置在會聚透鏡122和物鏡123之間的位置處的方式，使標(biāo)本臺130沿著標(biāo)本臺表面方向移動。此外，標(biāo)本臺130被移動為使得生物樣品190的預(yù)定部分被布置在由成像元件124成像的成像范圍內(nèi)。此外,標(biāo)本臺驅(qū)動控制器142沿著Z軸方向移動標(biāo)本臺 130，以進(jìn)行物鏡123的聚焦處理。縮略圖拍攝控制器143在成像元件113中設(shè)置與亮視野模式或暗視野模式相關(guān)的參數(shù)。此外，基于與形成在成像元件113的圖像形成平面上的圖像相關(guān)的輸出信號，縮略圖拍攝控制器143輸出關(guān)于縮略圖的成像數(shù)據(jù)。由縮略圖拍攝控制器143設(shè)置的參數(shù)的示例包括曝光的開始時間和結(jié)束時間。放大圖拍攝控制器144在成像元件124中設(shè)置與亮視野模式或暗視野模式相關(guān)的參數(shù)。此外，基于與形成在成像元件124的圖像形成平面上的圖像相關(guān)的輸出信號，放大圖拍攝控制器144輸出關(guān)于放大圖的成像數(shù)據(jù)。該圖像數(shù)據(jù)被輸出到總控制器150。圖10是示意性地示出了總控制器150的構(gòu)造示例的框圖?？偪刂破?50包括位置控制器151、圖像處理器152、縮略圖獲取器153和放大圖獲取器154。位置控制器151執(zhí)行位置控制處理，以將標(biāo)本臺130移動到目標(biāo)位置。位置控制器151具有目標(biāo)位置決定器151a、標(biāo)本臺圖像獲取器151b和標(biāo)本臺位置檢測器151c。如果獲取了縮略圖，則由目標(biāo)位置決定器151a決定標(biāo)本臺130的目標(biāo)位置。標(biāo)本臺130的目標(biāo)位置被設(shè)置為使得整個標(biāo)本180落入成像元件113的成像范圍內(nèi)的位置。目標(biāo)圖像獲取器151b經(jīng)由照明控制器141驅(qū)動光源111 (該光源照射記號134a 到134d)等。隨后，標(biāo)本臺圖像獲取器151b以預(yù)定時間間隔經(jīng)由縮略圖拍攝控制器143獲取由成像元件113成像的整個成像范圍的標(biāo)本臺圖像。
標(biāo)本臺位置檢測器151c計算所獲取的標(biāo)本臺圖像的各個像素與預(yù)先存儲在 HDD(存儲裝置)中的標(biāo)記134a到134d的形狀數(shù)據(jù)之間的相關(guān)值。之后，標(biāo)本臺位置檢測器151c計算在標(biāo)本臺圖像中的標(biāo)記134a到134d的位置?；谶@些標(biāo)本臺圖像中的各個標(biāo)記的位置，通過采用例如存儲在HDD中的對應(yīng)表格來檢測標(biāo)本臺130的實際位置。位置控制器151計算由目標(biāo)位置決定器151a所決定的目標(biāo)位置與由標(biāo)本臺位置檢測器151c所檢測的標(biāo)本臺130的位置之間的差異。之后，位置控制器151將該差異輸出到標(biāo)本臺驅(qū)動控制器142。標(biāo)本臺驅(qū)動控制器142根據(jù)從位置控制器151提供的差異來控制標(biāo)本臺驅(qū)動機構(gòu) 135，并且將標(biāo)本臺130移動到目標(biāo)位置。每次獲取由成像元件113拍攝的標(biāo)本臺圖像時， 位置控制器151能夠?qū)⒃摬町惖男畔⑤敵龅綐?biāo)本臺驅(qū)動控制器142。根據(jù)本實施例的圖像處理器152基于從縮略圖拍攝控制器143輸出的縮略圖執(zhí)行各種類型的處理。例如，基于通過邊界檢測用照明系統(tǒng)500進(jìn)行照明而獲得的縮略圖200， 圖像處理器152檢測氣泡50與封入劑165之間的邊界55，類似圖9所示。此外，圖像處理器152將除了空氣層區(qū)域51 (該區(qū)域是氣泡50的區(qū)域)之外的區(qū)域判定為用于生物樣品 190的關(guān)心區(qū)域195 (見圖6)。之后將會描述這種處理的細(xì)節(jié)。通過成像處理器152，可以設(shè)置對象區(qū)域，從該對象區(qū)域拍攝多個放大圖。此外， 通過圖像處理器152，可以獲得貼到標(biāo)本180上的標(biāo)簽162的圖像，并且可以去除由于標(biāo)本 180中的異物等而產(chǎn)生的噪音。由圖像處理器152產(chǎn)生的數(shù)據(jù)、參數(shù)等被輸出到縮略圖獲取器153和放大圖獲取器154?？s略圖獲取器153要求縮略圖拍攝控制器143基于例如用戶對于顯微鏡100的操作在各種設(shè)置條件下拍攝縮略圖。當(dāng)標(biāo)本180被放置在標(biāo)本臺130上時，用于自動地作出拍攝縮略圖的請求?？s略圖獲取器153可以將從圖像處理器152輸出的縮略圖的數(shù)據(jù)存儲在預(yù)定存儲部分中?；蛘?，縮略圖數(shù)據(jù)可以被縮略圖獲取器153經(jīng)由通信部分(未示出)輸出到設(shè)置在外部的圖像數(shù)據(jù)存儲服務(wù)器等。放大圖獲取器154要求放大圖拍攝控制器144基于例如用戶對于顯微鏡100的操作在各種設(shè)定條件下拍攝放大圖?？梢栽谂臄z標(biāo)本180的縮略圖之后自動地作出拍攝放大圖的請求。放大圖獲取器154可以將從放大圖拍攝控制器144輸出的放大圖的數(shù)據(jù)存儲在預(yù)定存儲部分中?；蛘撸糯髨D數(shù)據(jù)可以被放大圖獲取器154經(jīng)由通信部分(未示出)輸出到設(shè)置在外部的圖像數(shù)據(jù)存儲服務(wù)器等。〈顯微鏡的操作〉圖11是示出了根據(jù)本實施例的顯微鏡100的操作示例的流程圖。標(biāo)本臺130被移動到縮略圖拍攝單元110的光源111與物鏡112之間的位置(步驟101)。標(biāo)本180由邊界檢測用照明系統(tǒng)500的LED環(huán)狀照明器114照射的暗視野照明光照射(步驟102)。拍攝標(biāo)本180的暗視野圖像(步驟103)。由此，產(chǎn)生如圖9所示的縮略圖200等。可以在拍攝縮略圖200之后關(guān)閉暗視野照明光的照射。在所拍攝的縮略圖200中檢測對比度被強調(diào)的強調(diào)部分56 (步驟104)。該強調(diào)部分56被檢測為標(biāo)本180中的封入劑165與氣泡50之間的邊界55。
基于例如縮略圖200的各個像素的亮度值來檢測強調(diào)部分56。例如，亮度值大于預(yù)先設(shè)置的閾值的部分可以被檢測為強調(diào)部分56?；蛘?，可以通過使用頻率成分或標(biāo)準(zhǔn)偏差值，檢測強調(diào)部分56。此外，用于檢測對比度的強調(diào)部分56的方法可以被任意地設(shè)置?；谒鶛z測到的封入劑165與氣泡50之間的邊界55的信息，將除了空氣層區(qū)域 51 (其為氣泡50的區(qū)域)之外的區(qū)域判定為對于生物樣品190的關(guān)心區(qū)域195。之后，對于關(guān)心區(qū)域195相應(yīng)地執(zhí)行聚焦處理等，并且掃描標(biāo)本180 (步驟105)。圖12以及圖13A和圖13B是用于解釋對于標(biāo)本180的聚焦處理的圖。圖12是包括氣泡50的標(biāo)本180的示意性截面圖。圖13A和圖13B是示出了包括氣泡50的標(biāo)本180 的放大圖的一部分的圖像。在本實施例中，縮略圖拍攝單元110和放大圖拍攝單元120具有作為聚焦處理單元的自動聚焦機構(gòu)。由自動聚焦機構(gòu)計算聚焦位置，并且基于該聚焦位置設(shè)置焦點。如圖12所示，通過封入劑165將生物樣品190封入載玻片160與蓋玻片161之間。 在載玻片160與蓋玻片161之間產(chǎn)生氣泡。這里，標(biāo)本180的外部(空氣)以及氣泡50的內(nèi)部的折射率N4的值被定義為I。假設(shè)載玻片160的折射率N1、封入劑165的折射率N2以及蓋玻片161的折射率N3幾乎彼此相等。此外，假設(shè)這些折射率的值大于空氣的折射率的值，例如，I. 5。如圖12所不,在對于不存在氣泡50的關(guān)心區(qū)域195執(zhí)行聚焦處理時,基于聚焦位置匕來設(shè)置焦點。圖13A示出了在對于關(guān)心區(qū)域195的區(qū)域執(zhí)行聚焦處理時獲得的圖片。另一方面，在對于氣泡50中的空氣層區(qū)域51執(zhí)行聚焦處理時，基于聚焦位置F2來設(shè)置焦點。由于空氣層區(qū)域51的折射率N4的值與蓋玻片等的折射率N1到N3的值之間的差異，聚焦位置F2與聚焦位置F1不同。如圖12所示，聚焦位置F2是比聚焦位置F1更深的位置，即，沿著Z軸方向離開物鏡112的位置。圖13B示出了在對于氣泡50中的空氣層區(qū)域51執(zhí)行聚焦處理時，獲得的圖像。如剛剛所述的，如果氣泡50進(jìn)入標(biāo)本180，那么在掃描標(biāo)本180時難以將顯微鏡聚焦在作為診斷對象等的關(guān)心區(qū)域195上。此外，例如在基于所拍攝的放大圖執(zhí)行自動診斷時，由于在診斷對象的區(qū)域中包括了氣泡50的一部分所以降低了正確診斷的可能性。此外，由于拍攝了氣泡50中的無意義的部分，也將會存在所產(chǎn)生的放大圖等的數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)的尺寸變得不必要地過大的不利效果。在根據(jù)本實施例的顯微鏡100中，其中封入了生物樣品190的標(biāo)本180被邊界檢測用照明系統(tǒng)500的暗視野照明光照射。那么，將標(biāo)本180的縮略圖200拍攝為暗視野圖像。在暗視野圖像中，拍攝了由于在標(biāo)本180中氣泡50與封入劑165之間的邊界55處的散射光而被強調(diào)的強調(diào)部分56。因此，強調(diào)部分56可以被檢測為邊界55。因此，標(biāo)本180 中除了氣泡50中的空氣層區(qū)域51之外的區(qū)域可以被判定為關(guān)心區(qū)域195，使其受到聚焦處理等。此外，通過從自動診斷的診斷對象排除空氣層區(qū)域51并且將關(guān)心區(qū)域195用作診斷對象而實現(xiàn)了正確診斷。此外，因為可以省略空氣層區(qū)域51的成像，所以所產(chǎn)生的數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)的尺寸可以被減小并且可以減輕處理資源的負(fù)擔(dān)。下文中將會針對用于基于由邊界檢測用照明系統(tǒng)500用暗視野照明光照射的標(biāo)本180的縮略圖200(下文中稱作為暗視野圖像200)來設(shè)定關(guān)心區(qū)域195的方法給出說明。 圖14是示出了設(shè)定關(guān)心區(qū)域195的處理以及拍攝關(guān)心區(qū)域195的放大圖的處理的流程圖。
從標(biāo)本180的暗視野圖像200檢測閉區(qū)域和開區(qū)域(步驟201)。如圖9所示，強調(diào)部分56作為形成閉區(qū)域57的區(qū)域線來發(fā)揮作用。即，在本實施例中，形成暗視野圖像 200中的閉區(qū)域57的強調(diào)部分56被檢測為氣泡50與封入劑165之間的邊界55。不是閉區(qū)域57的區(qū)域被檢測為開區(qū)域58。例如，如果灰塵等附著到標(biāo)本180上，可能在這些粘附部分處產(chǎn)生散射光。在這種情況下，可能將不是氣泡50與封入劑165之間的邊界55的部分拍攝為暗視野圖像200中的強調(diào)部分56。然而，在本實施例中，形成閉區(qū)域57的強調(diào)部分56被檢測為邊界55。這允許容易地檢測氣泡50與封入劑165之間的邊界55。圖15A和圖15B是示出了標(biāo)本180的暗視野圖像200的另一個示例的平面圖。在圖15A中，封入劑165被設(shè)置為遍布基本整個蓋玻片161并且產(chǎn)生了多個氣泡50。S卩，由強調(diào)部分56形成的閉區(qū)域57是氣泡50，并且開區(qū)域58是關(guān)心區(qū)域195。在圖15B中，封入劑165被滴落到與蓋玻片161的一部分相對應(yīng)的區(qū)域中。即，在圖15B中，由強調(diào)部分56形成的閉區(qū)域57是關(guān)心區(qū)域195。開區(qū)域58是空氣層區(qū)域51。如圖15A和圖15B所示，這里提到的閉區(qū)域57還包括由強調(diào)部分56以及載玻片 160或蓋玻片161的邊緣部分159形成的區(qū)域。在這種情況下，可以計算邊緣部分159與形成閉區(qū)域57的強調(diào)部分56的比例。例如，如果邊緣部分159的比率高于預(yù)定值，可以判定為該區(qū)域不是閉區(qū)域57。此外，閉區(qū)域57可以基于強調(diào)部分56的形狀、強調(diào)部分56的長度等決定。以此方式，閉區(qū)域57或開區(qū)域58是否對應(yīng)于關(guān)心區(qū)域195根據(jù)設(shè)置封入劑165 的方式而不同。因此，在本實施例中，測量所設(shè)置的閉區(qū)域57和開區(qū)域58中每一者的聚焦位置(步驟202)。聚焦位置(圖12中示出的聚焦位置F1)更接近物鏡112的那個區(qū)域被設(shè)定為關(guān)心區(qū)域195 (步驟203)。聚焦位置(圖12中示出的聚焦位置F2)更遠(yuǎn)離物鏡112的區(qū)域被設(shè)定為空氣層區(qū)域51 (步驟204)。以此方式，在本實施例中，將閉區(qū)域57和開區(qū)域58 (換言之，閉區(qū)域57的內(nèi)部區(qū)域和外部區(qū)域)彼此比較。之后，基于比較結(jié)果將兩個區(qū)域之一設(shè)定為關(guān)心區(qū)域195。這允許可靠地判定關(guān)心區(qū)域195。按照放大圖的視野的尺寸對標(biāo)本180的整體進(jìn)行劃分。具體地，以用于拍攝放大圖的成像范圍的尺寸將標(biāo)本180以網(wǎng)格方式劃分(步驟205)。由此，限定了由放大圖拍攝單元120成像的多個拍攝區(qū)域。關(guān)于每個拍攝區(qū)域(每個網(wǎng)格)，判定關(guān)心區(qū)域195和空氣層區(qū)域51是否以混合的方式存在于拍攝區(qū)域中(步驟206)。如果判定為區(qū)域195和51都以混合方式存在(步驟206中為“是”)，那么從作為聚焦處理的對象的聚焦檢測區(qū)域排除空氣層區(qū)域51 (步驟 207)。即，關(guān)心區(qū)域195被設(shè)定為聚焦檢測區(qū)域。基于被設(shè)定為聚焦檢測區(qū)域的關(guān)心區(qū)域195來執(zhí)行自動聚焦處理(步驟208)?；谒嬎愕木劢刮恢脕慝@得拍攝區(qū)域的放大圖(步驟209)。如果在步驟206判定為關(guān)心區(qū)域195和空氣層區(qū)域51沒有以混合的方式存在于拍攝區(qū)域中，那么在步驟210中判定是否僅有關(guān)心區(qū)域195存在于拍攝區(qū)域中。如果判定為關(guān)心區(qū)域195不存在于拍攝區(qū)域中(步驟210中為“否”)，那么不獲得該拍攝區(qū)域的放大圖(步驟211)。如果在步驟210中判定為僅有關(guān)心區(qū)域195存在于拍攝區(qū)域中，那么基于該關(guān)心區(qū)域195執(zhí)行自動聚焦處理(步驟212)?；谒嬎愕木劢刮恢脕慝@得該拍攝區(qū)域的放大圖(步驟213)。在關(guān)于全部拍攝區(qū)域執(zhí)行圖14中示出的處理時，結(jié)束獲得其中封入了生物樣品 190的標(biāo)本180的放大圖的處理。圖16的框圖示意性地示出了具有根據(jù)本實施例的總控制器150的功能的計算機的構(gòu)造示例。由總控制器150執(zhí)行的處理可以由硬件執(zhí)行或由軟件執(zhí)行。總控制器150包括CPU 10UR0M 102、RAM 103和主機總線104a。此外，總控制器150包括橋接器104、外部總線104b、接口 105、輸入裝置106、輸出裝置107、存儲裝置 (HDD) 108、驅(qū)動器109、連接端口 115和通信裝置116。CPU 101具有算法處理裝置和控制裝置的功能，并且根據(jù)各種類型的程序來控制總控制器150中的一般操作。CPU 101可以是微處理器。ROM 102存儲由CPU 101使用的程序、算法參數(shù)等。RAM 103臨時地存儲用于由 CPU 101執(zhí)行的程序，在執(zhí)行過程中相應(yīng)地改變的參數(shù)等。這些單元通過由CPU總線等構(gòu)成的主機總線104a彼此連接。主機總線104a經(jīng)由橋接器104連接到外部總線104b (諸如外圍組件互連/接口 (PCI)總線)。主機總線104a、橋接器104和外部總線104b不一定被分離地構(gòu)造，并且這些功能可以被實施在一個總線中。輸入裝置106由用于用戶的信息輸入的輸入單元(諸如鼠標(biāo)、鍵盤、觸摸板和按鈕)和控制電路等組成，控制電路基于用戶的輸入產(chǎn)生輸入信號并且將輸入信號輸出到 CPU 101。輸出裝置107例如包括顯示裝置和諸如揚聲器的音頻輸出裝置，顯示裝置例如液晶顯示器(LCD)裝置或有機發(fā)光二極管(OLED)裝置。存儲裝置108是總控制器150的存儲部分的一個示例并且是用于數(shù)據(jù)存儲的裝置。存儲裝置108例如包括存儲介質(zhì)、在存儲介質(zhì)中記錄數(shù)據(jù)的記錄裝置、從存儲介質(zhì)讀出數(shù)據(jù)的讀取裝置以及刪除記錄在存儲介質(zhì)中的數(shù)據(jù)的刪除裝置。存儲裝置108驅(qū)動硬盤并且存儲由CPU 101執(zhí)行的程序以及各種數(shù)據(jù)。驅(qū)動器109是用于存儲介質(zhì)的讀取器/寫入器，并且被設(shè)置為總控制器150的內(nèi)置驅(qū)動器或外部驅(qū)動器。驅(qū)動器109讀出記錄于所裝載的可移動記錄介質(zhì)(諸如磁盤、光盤、磁光盤或半導(dǎo)體存儲器)中的信息并且將信息輸出到RAM 103。連接端口 115是連接到外部設(shè)備的接口并且是能夠與外部設(shè)備通過例如通用串行總線(USB)傳輸數(shù)據(jù)的連接端口。通信裝置116是例如由用于連接到通信網(wǎng)絡(luò)10的通信裝置構(gòu)成的通信接口。通信裝置116可以是用于無線局域網(wǎng)(LAN)的通信裝置、用于無線USB的通信裝置或者執(zhí)行有線通信的有線通信裝置?！吹诙嵤├迪挛闹袑枋龈鶕?jù)本公開的第二實施例的顯微鏡。在下文中，省略與第一實施例的顯微鏡100中的那些部分相似的構(gòu)造和操作的描述。
圖17是示出了根據(jù)本實施例的、設(shè)定關(guān)心區(qū)域的處理的流程圖以及拍攝關(guān)心區(qū)域的放大圖的處理的流程圖。圖18是用于解釋如圖17所示的設(shè)定關(guān)心區(qū)域的處理的圖。在根據(jù)本實施例的顯微鏡中，在圖17中示出的步驟302到304中執(zhí)行的設(shè)定關(guān)心區(qū)域的處理與由根據(jù)第一實施例的顯微鏡100進(jìn)行的處理不同。圖17中示出的步驟301 和步驟305到313與圖14中示出的步驟201和步驟205到213相同。如圖18所示，根據(jù)本實施例的顯微鏡具有高度檢測器290，其基于標(biāo)本臺的放置面來檢測標(biāo)本180的高度(沿著Z軸方向的尺寸)，即，標(biāo)本180的厚度。高度檢測器290 具有照射器291和反射光檢測傳感器292，該照射器291利用激光對標(biāo)本180的蓋玻片進(jìn)行照射，該反射光檢測傳感器292檢測由蓋玻片161反射的反射光Lp基于直到檢測到來自于蓋玻片161的反射光L1為止的時間、照射角等來檢測標(biāo)本180的高度。利用高度檢測用激光照射在步驟301中檢測到的閉區(qū)域57和開區(qū)域58中的每一者(步驟302)。如圖18所示，如果空氣層區(qū)域51存在于載玻片160與蓋玻片161之間，那么來自于空氣層區(qū)域51的反射光L2被高度檢測器290的反射光檢測傳感器292檢測到。 檢測到從其而來的反射光L2的閉區(qū)域57或開區(qū)域58被設(shè)定為空氣層區(qū)域51 (步驟303)。 沒有檢測到從其而來的反射光的閉區(qū)域57或開區(qū)域58被設(shè)定為關(guān)心區(qū)域195 (步驟304)。以此方式，在本實施例中，基于來自空氣層區(qū)域51的反射光L2是否存在來設(shè)定關(guān)心區(qū)域195。激光照射器等可以被獨立地設(shè)置為用于設(shè)定關(guān)心區(qū)域195的機構(gòu)。在本實施例中，空氣層區(qū)域51的反射光L2由用于檢測標(biāo)本180的高度的高度檢測器290檢測。這可以降低成本，而不需要提供額外的機構(gòu)。此外，這有利于顯微鏡的尺寸減小?！葱薷氖纠当竟_的實施例不局限于上述實施例并且可以被不同地修改。圖19是示出了圖14中示出的顯微鏡100的處理的修改示例的流程圖。在本修改示例中，圖19中示出的步驟405和406的處理與圖14中示出的處理不同。其他步驟與圖 14中示出的那些相同。在步驟405中，執(zhí)行自動區(qū)域檢測處理。因此，決定用作由放大圖拍攝單元120成像的拍攝區(qū)域的候選者。例如，基于利用亮視野照明光照射的標(biāo)本180的縮略圖，來自動地檢測存在生物樣品的區(qū)域。存在生物樣品的區(qū)域被劃分為多個拍攝區(qū)域，并且由此決定拍攝候選區(qū)域。此外，用于計算生物樣品的位置信息的方法、用于決定拍攝候選區(qū)域的方法等可以被任意地設(shè)置。對于在步驟405中決定的拍攝候選區(qū)域中的每一者判定是否以混合方式存在關(guān)心區(qū)域和空氣層區(qū)域(步驟406)。隨后，執(zhí)行上述步驟207到213。圖20是示出了根據(jù)圖17中示出的第二實施例的顯微鏡的處理的修改示例的流程圖。在該修改示例中，同樣在步驟505中執(zhí)行自動區(qū)域檢測處理，從而決定拍攝候選區(qū)域。 隨后，在步驟506中，判定在每個拍攝候選區(qū)域中是否以混合方式存在關(guān)心區(qū)域和空氣層區(qū)域。其他步驟的處理與圖17中示出的那些相同。通過圖19和圖20中示出的自動區(qū)域檢測處理和拍攝候選區(qū)域決定處理，可以省略獲得不存在生物樣品的部分的放大圖的操作。因此，獲取放大圖的處理的負(fù)擔(dān)被減輕了并且獲取放大圖的效率可以被加強。圖21是示出了用于圖5中示出的邊界檢測用照明系統(tǒng)500的修改示例的是以立體圖。此邊界檢測用照明系統(tǒng)600具有四個LED條狀照明器614，而不是圖5中示出的LED 環(huán)狀照明器114。由這些LED條狀照明器614用暗視野照明光照射標(biāo)本180。以此方式，可以使用一個或多個LED條狀照明器614。其他構(gòu)造可以被用作邊界檢測用照明系統(tǒng)。在第一實施例中，基于閉區(qū)域57和開區(qū)域58中的聚焦位置F1和F2來設(shè)定關(guān)心區(qū)域195。在第二實施例中，基于照射到閉區(qū)域57和開區(qū)域58的每一者上的檢測光的反射狀態(tài)來判定空氣層區(qū)域51是否存在，并且判定關(guān)心區(qū)域195。然而，用于判定關(guān)心區(qū)域195 的方法不局限于這些方法，并且可以任意地設(shè)置。例如，可以獲得每個區(qū)域57或58的亮視野圖像，并且基于各個圖像的亮度值的平均值、標(biāo)準(zhǔn)差等判定關(guān)心區(qū)域195?；蛘?，可以基于區(qū)域57或58中每一者的亮視野圖像的頻率成分來判定關(guān)心區(qū)域195。在以上描述中，基于所判定的關(guān)心區(qū)域195來執(zhí)行聚焦處理，并且由此獲得合適的放大圖。然而，利用所判定的關(guān)心區(qū)域195的處理不局限于聚焦處理。例如，關(guān)心區(qū)域195 可以被用作診斷對象區(qū)域?；蛘?，關(guān)心區(qū)域195可以被用作用于檢測標(biāo)本180的厚度的檢測光照射區(qū)域。此外，利用關(guān)心區(qū)域195的處理由根據(jù)本實施例的顯微鏡相應(yīng)地執(zhí)行。標(biāo)本180中的空氣層區(qū)域51與封入劑165之間的邊界55的信息可以被相應(yīng)地用于各種類型的處理。本技術(shù)包含的主題與2010年12月6日遞交于日本專利局的日本在先專利申請JP 2010-271355中公開的主題相關(guān)，該專利申請的全部內(nèi)容通過引用結(jié)合于此。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)注意，只要在權(quán)利要求及其等同物的實旨和范圍內(nèi)，就可以根據(jù)設(shè)計需要和其他因素進(jìn)行各種修改、結(jié)合、子結(jié)合和替換。
1權(quán)利要求
1.一種顯微鏡，包括暗視野照明系統(tǒng)，其構(gòu)造為將暗視野照明光照射到標(biāo)本，在所述標(biāo)本中，通過使用封入劑將樣本封入在載玻片與蓋玻片之間；成像單元，其構(gòu)造為拍攝利用所述暗視野照明光照射的所述標(biāo)本的暗視野圖像；以及區(qū)域判定器，其構(gòu)造為基于所拍攝的暗視野圖像來檢測所述封入劑與被包括在所述載玻片和所述蓋玻片之間的空氣之間的邊界，并且將除了所述空氣的區(qū)域之外的區(qū)域判定為對于所述樣本的關(guān)心區(qū)域。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的顯微鏡，其中所述區(qū)域判定器將在所述暗視野圖像中形成閉區(qū)域的區(qū)域線檢測為所述邊界。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的顯微鏡，其中所述區(qū)域判定器將所述閉區(qū)域的內(nèi)部區(qū)域與外部區(qū)域相比較，并將兩者之一判定為所述關(guān)心區(qū)域。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的顯微鏡，還包括聚焦處理單元，其構(gòu)造為計算所述內(nèi)部區(qū)域中的聚焦位置和所述外部區(qū)域中的聚焦位置，其中所述區(qū)域判定器將計算得到的所述內(nèi)部區(qū)域和所述外部區(qū)域的聚焦位置進(jìn)行比較并判定所述關(guān)心區(qū)域。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的顯微鏡，還包括照射器，其構(gòu)造為將檢測光照射到所述內(nèi)部區(qū)域和所述外部區(qū)域的每一者；以及反射光檢測器，其構(gòu)造為檢測照射到所述內(nèi)部區(qū)域和所述外部區(qū)域的所述檢測光的反射光，其中所述區(qū)域判定器判定在由所述反射光檢測器檢測的、所述內(nèi)部區(qū)域和所述外部區(qū)域的每一者的反射光中是否包括由所述空氣的區(qū)域反射的反射光，并且基于該判定結(jié)果來判定所述關(guān)心區(qū)域。
6.一種區(qū)域判定方法，包括以下步驟將暗視野照明光照射到標(biāo)本，在所述標(biāo)本中，通過使用封入劑將樣本封入在載玻片與蓋玻片之間；拍攝利用所述暗視野照明光照射的所述標(biāo)本的暗視野圖像；以及基于所拍攝的暗視野圖像來檢測所述封入劑與被包括在所述載玻片和所述蓋玻片之間的空氣之間的邊界，并且將除了所述空氣的區(qū)域之外的區(qū)域判定為對于所述樣本的關(guān)心區(qū)域。
7.一種用于使安裝有計算機的顯微鏡執(zhí)行處理的程序，所述處理包括以下步驟 將暗視野照明光照射到標(biāo)本，在所述標(biāo)本中，通過使用封入劑將樣本封入在載玻片與蓋玻片之間；拍攝利用所述暗視野照明光照射的所述標(biāo)本的暗視野圖像；以及基于所拍攝的暗視野圖像來檢測所述封入劑與被包括在所述載玻片和所述蓋玻片之間的空氣之間的邊界，并且將除了所述空氣的區(qū)域之外的區(qū)域判定為對于所述樣本的關(guān)心區(qū)域
全文摘要
本發(fā)明提供了顯微鏡、區(qū)域判定方法和程序。顯微鏡包括暗視野照明系統(tǒng)，其構(gòu)造為將暗視野照明光照射到標(biāo)本，在標(biāo)本中，通過使用封入劑將樣本封入在載玻片與蓋玻片之間；以及成像單元，其構(gòu)造為拍攝利用暗視野照明光照射的標(biāo)本的暗視野圖像。顯微鏡還包括區(qū)域判定器，其構(gòu)造為基于所拍攝的暗視野圖像來檢測封入劑與被包括在載玻片和蓋玻片之間的空氣之間的邊界，并且將除了空氣的區(qū)域之外的區(qū)域判定為對于樣本的關(guān)心區(qū)域。
文檔編號G02B21/32GK102540445SQ201110394178
公開日2012年7月4日 申請日期2011年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月6日
發(fā)明者成澤龍, 松延剛 申請人:索尼公司