專利名稱:作為β-促分泌酶抑制劑用于阿爾茨海默氏病的治療中的2,4,6-取代的吡啶衍生化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一類新的2,4,6-取代的吡啶衍生化合物,它們是有效的β-促分泌酶抑制劑并且適用于其中牽涉β-促分泌酶(secretase)的疾病如阿爾茨海默氏病的治療。
背景技術(shù):
阿爾茨海默氏病的特征在于淀粉樣蛋白在腦內(nèi)的異常沉積形成細(xì)胞外噬斑和細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)原纖維纏結(jié)。淀粉樣蛋白蓄積的速率是形成、聚集和從腦部外輸速率的函數(shù)。人們普遍接受的是淀粉樣蛋白噬斑的主要組成是4kD淀粉樣蛋白質(zhì)(βA4,也稱作Aβ;β-蛋白質(zhì)和βAP),它是一種前體蛋白的尺寸非常大的蛋白水解產(chǎn)物。淀粉樣蛋白前體蛋白(APP或Aβ;PP)具有受體樣結(jié)構(gòu)并且?guī)в写蟮陌饨Y(jié)構(gòu)域、跨膜區(qū)域和短胞質(zhì)尾區(qū)。Aβ結(jié)構(gòu)域包含APP的胞外和跨膜結(jié)構(gòu)域兩者的多個(gè)部分,因此其釋放意味著兩種不同蛋白水解事件的存在從而產(chǎn)生其NH2-和COOH-末端。至少存在兩種從膜釋放APP并且產(chǎn)生可溶性、COOH-截頭形式的APP(APPs)的分泌基質(zhì)。釋放APP的蛋白酶及其構(gòu)成膜的片段稱作″促分泌酶″。絕大多數(shù)APPs是由推定的α-促分泌酶釋放的,其在Aβ蛋白質(zhì)內(nèi)裂解釋放α-APPs并且阻止了完整Aβ的釋放。少部分的APPs是由β-促分泌酶(″β-促分泌酶″)釋放,其在APP的NH2-末端附近裂解并產(chǎn)生含有全部Aβ結(jié)構(gòu)域的COOH-末端片段(CTFs)。
因此,β-促分泌酶或β-位點(diǎn)淀粉樣蛋白前體蛋白-裂解酶(″BACE″)的活性造成APP的異常裂解,產(chǎn)生Aβ,和β-淀粉樣蛋白噬斑在腦內(nèi)的蓄積,其特征在于阿爾茨海默氏病(參見R.N.Rosenberg,Arch.Neurol.,vol.59,Sep 2002,pp.1367-1368;H.Fukumoto等,Arch.Neurol.,vol.59,Sep 2002,pp.1381-1389;J.T.Huse等,J.Biol.Chem.,vol 277,No.18,May 3,2002出版,pp.16278-16284;K.C.Chen and W.J.Howe,Biochem.Biophys.Res.Comm,vol.292,pp 702-708,2002)。所以,可以抑制β-促分泌酶或BACE的治療劑可以有效治療阿爾茨海默氏病。
本發(fā)明的化合物通過抑制β-促分泌酶或BACE的活性有效治療阿爾茨海默氏病,由此預(yù)防不溶性Aβ的形成;和阻止Aβ的產(chǎn)生。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及用作β-促分泌酶抑制劑的2,4,6-取代的吡啶基衍生化合物,并用于治療其中涉及β-促分泌酶的疾病,例如阿爾茨海默氏病。本發(fā)明還涉及含有這些化合物的藥物組合物,和這些化合物和組合物在治療涉及β-促分泌酶的疾病中的應(yīng)用。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及式(I)的化合物 其中X選自基團(tuán)
其中R11和R12獨(dú)立地選自(a)氫,(b)-C1-10烷基,(c)C2-10鏈烯基,(d)C2-10鏈炔基,(e)-C3-12環(huán)烷基,和(f)選自苯基和萘基的芳基;其中該烷基,環(huán)烷基,鏈烯基,鏈炔基或芳基未被取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-OH,(iii)-CN,(iv)-C1-10烷基,
(v)-C3-12環(huán)烷基,和(vi)-O-C1-10烷基,Y1是N,并且Y2和Y3分別是CH,或Y2是N,和Y1和Y3分別是CH,或Y3是N,和Y1和Y2分別是CH;A選自基團(tuán)(1)氫,(2)-C1-10烷基,和(3)-C2-10鏈烯基,其中該烷基或鏈烯基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素,(b)-C3-12環(huán)烷基,(c)-OH,(d)-CN,(e)-O-C1-10烷基,(f)苯基,或(g)雜芳基選自吡嗪基,吡唑基,噠嗪基,吡啶基,嘧啶基,吡咯基,四唑基,呋喃基,咪唑基,三嗪基,吡喃基,噻唑基,噻吩基,苯硫基,三唑基,唑基,異唑基,噻唑基,二唑基,吲哚基,喹啉基,異喹啉基,苯并咪唑基,苯并呋喃基,吲哚炔基(indynyl)和苯并唑基,和該苯基和雜芳基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-OH,(iii)-CN,(iv)-O-C1-10烷基,(v)-C1-10烷基,或(vi)-C3-12環(huán)烷基;Q是-C0-3烷基,其中該烷基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(1)鹵素,(2)-C3-12環(huán)烷基,(3)-OH,
(4)-CN,(5)-O-C1-10烷基,和(6)-C1-10烷基;R1是(1)選自苯基和萘基的芳基,(2)雜芳基選自吡嗪基,吡唑基,噠嗪基,吡啶基,嘧啶基,吡咯基,四唑基,呋喃基,咪唑基,三嗪基,吡喃基,噻唑基,噻吩基,苯硫基,三唑基,唑基,異唑基,噻唑基,二唑基,吲哚基,喹啉基,異喹啉基,苯并咪唑基,苯并呋喃基,吲哚炔基和苯并唑基,(3)-C1-10烷基,和(4)C3-8環(huán)烷基,該環(huán)烷基任選地與C6-10芳基稠合,其中該烷基,環(huán)烷基,芳基或雜芳基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素,(b)-C1-10烷基,其中該烷基是未取代或被鹵素取代,(c)-OH,(d)-CN,(e)-O-C1-10烷基,(f)-C3-12環(huán)烷基,和(g)-NR8R9;R2選自(1)-OH,和(2)-NR8R9,其中R8和R9選自(a)氫,(b)C1-10烷基,和(c)C0-6烷基-C6-10芳基,或當(dāng)R2是NR8R9,并且R8和A是氫時(shí),則Q,R1和R9可以連接在一起構(gòu)成-CH2CH2CH2-,當(dāng)R2是NR8R9時(shí),則Q、R1和A可以連接在一起構(gòu)成4或5碳烷基鏈,其中烷基鏈中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以用N、O或S原子,或SO2基團(tuán)替代;R4選自基團(tuán)(1)-C1-10烷基,或(2)-C3-12環(huán)烷基,其中該烷基和環(huán)烷基未被取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素,(b)-OH,(c)-CN,(d)-O-C1-10烷基,(e)-C1-10烷基,(f)-C3-12環(huán)烷基,(g)選自苯基和萘基的芳基,或(h)雜芳基選自吡嗪基,吡唑基,噠嗪基,吡啶基,嘧啶基,吡咯基,四唑基,呋喃基,咪唑基,三嗪基,吡喃基,噻唑基,噻吩基,苯硫基,三唑基,唑基,異唑基,噻唑基,二唑基,吲哚基,喹啉基,異喹啉基,苯并咪唑基,苯并呋喃基,吲哚炔基和苯并唑基,和該芳基和雜芳基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-OH,(iii)-CN,(iv)-O-C1-10烷基,(v)-C3-12環(huán)烷基,或(vi)-C1-10烷基;R7選自基團(tuán)(1)氫,(2)-C1-10烷基,和(3)選自苯基和萘基的芳基;其中該烷基和芳基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素,(b)-OH,(c)-CN,(d)-O-C1-10烷基,(e)-C3-12環(huán)烷基,(f)選自苯基和萘基的芳基,或(g)雜芳基選自吡嗪基,吡唑基,噠嗪基,吡啶基,嘧啶基,吡咯基,四唑基,呋喃基,咪唑基,三嗪基,吡喃基,噻唑基,噻吩基,苯硫基,三唑基,唑基,異唑基,噻唑基,二唑基,吲哚基,喹啉基,異喹啉基,苯并咪唑基,苯并呋喃基,吲哚炔基和苯并唑基;其中該環(huán)烷基,芳基或雜芳基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-OH,(iii)-CN,(iv)-O-C1-10烷基,(v)-C3-12環(huán)烷基,或(vi)選自苯基和萘基的芳基;或R4和R7可以相連構(gòu)成-CH2CH2CH2-;R5和R6獨(dú)立地選自(1)氫,(2)-C1-10烷基,(3)-C2-10鏈烯基,(4)-C2-10鏈炔基,和(5)-C1-10烷基-C3-12環(huán)烷基;其中該烷基,環(huán)烷基,鏈烯基或鏈炔基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素,(b)-OH,(c)-CN,(d)-C1-10烷基(e)-C3-12環(huán)烷基,(f)-O-C1-10烷基,(g)雜芳基選自吡嗪基,吡唑基,噠嗪基,吡啶基,嘧啶基,吡咯基,四唑基,呋喃基,咪唑基,三嗪基,吡喃基,噻唑基,噻吩基,苯硫基,三唑基,唑基,異唑基,噻唑基,二唑基,吲哚基,喹啉基,異喹啉基,苯并咪唑基,苯并呋喃基,吲哚炔基和苯并唑基,其中該雜芳基可以未取代或被鹵素取代;(h)苯基,或(i)-NR8R9;
或R5和R6與它們所連的氮原子一起相連構(gòu)成4-6員環(huán),其未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)-C1-10烷基,(b)-C3-12環(huán)烷基,(c)-(CH2)正苯基,(d)-C2-10鏈烯基,或(e)-C2-10鏈炔基,其中該烷基,鏈烯基和鏈炔基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-OH,(iii)-CN,(iv)-O-C1-10烷基,或(v)-C3-12環(huán)烷基;和該環(huán)烷基和苯基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-C1-10烷基,(iii)-OH,(iv)-CN,(v)-C3-12環(huán)烷基,或(vi)-O-C1-10烷基;n是0,1,2,3或4;和其藥學(xué)可接受鹽,以及其各個(gè)對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。
在一優(yōu)選實(shí)施方式中,Y1是N和Y2和Y3分別是CH。
在一實(shí)施方式中,本發(fā)明涉及式(I)的化合物其中R1是未取代或取代的苯基,和Q優(yōu)選是CH2。優(yōu)選地,R1是未取代的苯基。
在其他實(shí)施方式中,R1是雜芳基。優(yōu)選的R1雜芳基包括吡啶基(2-吡啶基,3-吡啶基或4-吡啶基),噻吩基(優(yōu)選2-噻吩基或3-噻吩基),噻唑和吲哚炔基。
在其他實(shí)施方式中,R1是C1-12烷基或C3-8環(huán)烷基。優(yōu)選的C1-12烷基R1基團(tuán)包括C1-6烷基(優(yōu)選未取代的C1-6烷基,包括甲基和異丙基)。優(yōu)選的C3-8環(huán)烷基包括環(huán)丙基,環(huán)戊基和環(huán)己基,優(yōu)選未取代的。兩個(gè)環(huán)烷基的環(huán)碳原子可以相連構(gòu)成C6-12芳基。此實(shí)施方式的異構(gòu)示例稠合基團(tuán)是 在另一實(shí)施方式中,本發(fā)明涉及式(I)的化合物其中R2是NR8R9,并且優(yōu)選R8和R9均為氫。
在式(I)化合物的另一實(shí)施方式中,當(dāng)R2是NR8R9和R8和A分別是氫時(shí),則Q,R1和R9可以連接在一起構(gòu)成-CH2CH2CH2-,由此構(gòu)成吡咯烷基吡咯烷基。
在式(I)化合物的另一實(shí)施方式中,當(dāng)R2是NR8R9,則Q,R1和A連接子啊一起構(gòu)成4或5碳烷基鏈,其中該烷基鏈中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被N,O或S原子,或被SO2基團(tuán)替代。
在式(I)化合物的另一實(shí)施方式中,R2是OH。
在式(I)化合物的另一實(shí)施方式中,A是未取代或取代(優(yōu)選未取代)的C1-10烷基,優(yōu)選未取代或取代的(優(yōu)選未取代)的C1-6烷基,和特別更優(yōu)選甲基。
在另一實(shí)施方式中,A可以是氫。
在式(I)化合物的另一實(shí)施方式中,R5和R6與其同時(shí)連接的氮原子一起相連構(gòu)成吡咯烷環(huán)。
在式(I)化合物的另一實(shí)施方式中,R4和R7是C1-10烷基,優(yōu)選C1-6烷基。更優(yōu)選,R4是甲基或異丙基和R7是甲基。
在式(I)化合物的一實(shí)施方式中,X是二唑選自 在式(I)化合物的另一實(shí)施方式中,X是唑選自
在式(I)化合物的另一實(shí)施方式中,X是噻唑選自 在式(I)化合物的另一實(shí)施方式,X是1,2,4-三嗪 呋喃 吡唑 嘧啶
在另一實(shí)施方式中,本發(fā)明涉及式(II)的化合物 其中A,X,Y1,Y2,Y3,Q,R1,R2,R4,R5和R7定義如上,和R10是氫或C1-6烷基,和其藥學(xué)可接受鹽,和其各個(gè)對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。
在式(II)的化合物的一優(yōu)選實(shí)施方式,Y1是N并且Y2和Y3分別是CH。在式(II)化合物的一實(shí)施方式中,R1是苯基和Q是CH2。優(yōu)選地,R1是未取代苯基。
在另一實(shí)施方式中,本發(fā)明涉及式(II)的化合物其中R2是NR8R9,和優(yōu)選R8和R9同時(shí)為氫。
在式(II)化合物的另一實(shí)施方式中,R2是OH。
在式(II)化合物的另一實(shí)施方式中,R10是氫。在另一實(shí)施方式中,R10是C1-6烷基,優(yōu)選甲基,乙基或異丙基。
在式(II)化合物的另一實(shí)施方式中,A是C1-10烷基,優(yōu)選C1-6烷基,更優(yōu)選甲基。
在式(II)化合物的另一實(shí)施方式中,R4和R7是C1-10烷基,優(yōu)選C1-6烷基。更優(yōu)選,R4是甲基或異丙基和R7是甲基。
在式(II)化合物的另一實(shí)施方式中,R5是氫或,C1-10烷基,其中C1-10烷基被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代或未取代(1)鹵素(優(yōu)選氟),(2)-OH,(3)-CN,(4)苯基,(5)-OC1-10烷基,或(6)-NR8R9(優(yōu)選R8和R9分別是C1-10烷基)。
在式(II)的化合物中,優(yōu)選的R5基團(tuán)包括氫,甲基,芐基和-C1-10烷基-NR8R9,其中R8和R9分別是C1-10烷基。
在式(II)化合物的一實(shí)施方式中,X是二唑選自 在式(II)化合物的另一實(shí)施方式中,X是唑選自 在式(II)化合物的另一實(shí)施方式中,X是噻唑選自 在式(II)化合物的另一實(shí)施方式中,X是1,2,4-三嗪 呋喃 吡唑
嘧啶 當(dāng)R10是氫時(shí),一優(yōu)選對(duì)映體構(gòu)型的式(II)化合物是在甲基-環(huán)丙基-甲基部分上具有反式-S,S構(gòu)型的化合物,如下式(IIA)所示 在另一實(shí)施方式中,本發(fā)明涉及式(III)的化合物 其中A,X,Q,R1,R2,R4,R5,R6和R7定義如上,和R10是氫或C1-6烷基,和其藥學(xué)可接受鹽,和其各對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。
本發(fā)明的另一實(shí)施方式包括選自下列實(shí)施例的標(biāo)題化合物和其藥學(xué)可接受鹽的化合物。
如此所用,術(shù)語″烷基″本身或作為另一取代基的組成部分,是指具有規(guī)定數(shù)目碳原子的飽和直鏈或支鏈烴基(例如,C1-10烷基是指具有1-10個(gè)碳原子的烷基)。本發(fā)明使用的優(yōu)選的烷基是C1-6烷基,具有1-6個(gè)碳原子。示例烷基包括甲基,乙基,正丙基,異丙基,正丁基,異丁基,叔丁基,戊基,己基等。
如此所用,術(shù)語″鏈烯基″本身或作為另一取代基的組成部分,是指具有一個(gè)碳-碳雙鍵和指定碳原子數(shù)的直鏈或支鏈烴基(例如,C2-10鏈烯基是指具有2-10個(gè)碳原子的鏈烯基)。本發(fā)明使用的優(yōu)選鏈烯基是C2-6鏈烯基具有2-6個(gè)碳原子。示例鏈烯基包括乙烯基和丙烯基。
如此所用,術(shù)語″環(huán)烷基″本身或作為另一取代基的組成部分,是指具有指定碳原子數(shù)的飽和單環(huán)、多環(huán)或橋環(huán)烴基(例如,C3-12環(huán)烷基是指具有3-12個(gè)碳原子的環(huán)烷基)。優(yōu)選的環(huán)烷基包括C3-8環(huán)烷基,尤其是C3-8單環(huán)環(huán)烷基。示例單環(huán)環(huán)烷基包括環(huán)丙基,環(huán)丁基,環(huán)戊基,環(huán)己基等。示例橋連環(huán)烷基包括金剛烷基和降冰片基。
如此所用,術(shù)語″芳基″本身或作為另一取代基的組成部分,是指具有指定碳原子數(shù)的芳族或環(huán)狀基團(tuán)(例如,C6-10芳基是指具有6-10個(gè)碳原子的芳基)。本發(fā)明使用的優(yōu)選芳基包括苯基和萘基。
術(shù)語″鹵代″或″鹵素″包括氟,氯,溴和碘。
如此所用,術(shù)語″雜芳基″本身或作為另一取代基的組成部分,是指具有至少一個(gè)環(huán)雜原子(O,N或S)的芳族環(huán)狀基團(tuán)。本發(fā)明使用的示例雜芳基包括呋喃基,吡喃基,苯并呋喃基,異苯并呋喃基,色烯基,噻吩基,苯并苯硫基,吡咯基,吡唑基,咪唑基,吡啶基,吡嗪基,嘧啶基,噠嗪基,吲哚基,吲唑基,苯并咪唑基,喹啉基和異喹啉基。
當(dāng)本文定義的雜芳基被取代時(shí),該取代基可以與雜芳基的環(huán)碳原子鍵合,或位于環(huán)雜原子(即,氮,氧或硫)上,它們具有允許取代的化合價(jià)。優(yōu)選地,該取代基鍵合環(huán)碳原子。同樣地,當(dāng)雜芳基在此定義為取代基時(shí),連接點(diǎn)可以在雜芳基的環(huán)碳原子上,或在環(huán)雜原子(即,氮,氧或硫)上,它們具有允許取代的化合價(jià)。優(yōu)選地,連接可以位于環(huán)碳原子。
本發(fā)明的一些化合物具有至少一個(gè)不對(duì)稱中心。根據(jù)分子上不同取代基的性質(zhì)可能存在附加不對(duì)稱中性。具有不對(duì)稱中心的化合物產(chǎn)生對(duì)映異構(gòu)體(光學(xué)異構(gòu)體);非對(duì)映異構(gòu)體(構(gòu)象異構(gòu)體)或兩者,和本發(fā)明的范圍包括所有混和物和純化和部分純化化合物的可能的對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。本發(fā)明包括這些化合物的所有此類異構(gòu)形式。
對(duì)映異構(gòu)或非對(duì)映異構(gòu)富集化合物的獨(dú)立合成,或其色譜分離,可以按照本領(lǐng)域已知的方法通過適當(dāng)改進(jìn)本文公開的方法來獲得。其絕對(duì)立體化學(xué)可以通過晶體產(chǎn)物和衍生的晶體中間體的X-射線結(jié)晶學(xué)測(cè)定,如果必要,采用含有已知絕對(duì)構(gòu)型的不對(duì)稱中心的試劑。
如果希望,所述化合物的外消旋混和物可以分離,從而分離出單個(gè)對(duì)映異構(gòu)體。該分離可以通過本領(lǐng)域熟知的方法進(jìn)行,例如所述化合物的外消旋混和物與對(duì)映體純的化合物的偶聯(lián)形成非對(duì)映異構(gòu)體混和物,隨后通過標(biāo)準(zhǔn)方法例如分級(jí)結(jié)晶和色譜分離單個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體。偶聯(lián)反應(yīng)通常利用對(duì)映體純的酸或堿形成鹽。非對(duì)映異構(gòu)體衍生物可以通過裂解附加的手性殘基轉(zhuǎn)化為純的對(duì)映異構(gòu)體。所述化合物的外消旋混和物還可以直接通過色譜方法利用手性固相分離,該方法是本領(lǐng)域熟知的。
另外,化合物的任何對(duì)映異構(gòu)體可以通過立體有擇合成利用已知構(gòu)型的光學(xué)純起始原料或試劑通過本領(lǐng)域熟知的方法來獲得。
在式(I)-(III)的化合物中,與R2、A和Q鍵合的碳原子脫除為手性碳。所以,式(I)-(III)的化合物可以存在外消旋體,或者以立體化學(xué)純的(R)或(S)形式。式(I)化合物的異構(gòu)體如下所示 優(yōu)選上述第一構(gòu)型(一般為(R)構(gòu)型,例如當(dāng)A是CH3,R2是NH2,Q是-CH2-和R1是苯基時(shí))。
本發(fā)明所述的化合物可以按照下列通用方法和具體實(shí)施例1-94制備(路線方案1-25)。
在路線方案1者,1類型的氨基酸衍生物經(jīng)過兩步程序轉(zhuǎn)化為相應(yīng)肼基酰胺3。為了獲得無法商購的氨基酸衍生物,可以采用甘氨酸席夫堿4的兩步烷基化反應(yīng)。席夫堿脫保護(hù),Boc保護(hù)和酯水解提供了獲得化合物2的另一途徑。用于合成5的將4的烷基化反應(yīng)可以以對(duì)映選擇性方式按照文獻(xiàn)所述的方法進(jìn)行(參見K.Maruoka等,J.Am.Chem.Soc.2000,122,5228-5229和M.North等,Tetrahedron Lett.2003,44,2045-2048)。
路線方案1 在路線方案2中,N-保護(hù)的氨基酸2轉(zhuǎn)化為羧酰胺6a(和硫代羧酰胺6b),隨后脫水得到腈7。7用NH2OH-HCl在弱堿性條件下處理得到羥基酰胺化物8。
路線方案2 在路線方案3中,氨基酸1用就地生成的BH3還原得到相應(yīng)的氨基醇,該化合物隨后可以被N-保護(hù)得到化合物9。9的氧化生成醛10,它隨后可以在溫和條件下轉(zhuǎn)化為亞胺11。
路線方案3 氨基醇12的醇如路線方案4所示。10的環(huán)氧化反應(yīng),隨后用氨打開得到氨基醇12。
路線方案4 路線方案5舉例說明區(qū)域異構(gòu)體氨基醇13的制備醛10的Ellman衍生物的合成,乙烯基的格氏加成,臭氧分解和還原處理,隨后脫除Ellman輔劑。
路線方案5 路線方案6描述了溴酮14經(jīng)過衍生自酸2的二偶氮酮的制備。
路線方案6 路線方案7描述了中間體15-18的制備,用于修飾不同的雜環(huán)。另外,當(dāng)雜環(huán)X已經(jīng)形成后(中間體15′-18′),可以留下一個(gè)完整的氯基團(tuán)以便后面引入R5R6N。注意,如果需要,也可以殘留下完整的第二氯基團(tuán)在雜環(huán)X已經(jīng)形成后被-(R7)N-SO2R4替代。
路線方案7 路線方案8-21描述了不同雜環(huán)的X的制備。19類型的1,3,4-二唑的合成可以通過將酸15與肼基酰胺3偶聯(lián),隨后用Burgess試劑環(huán)脫水,并且Boc脫保護(hù)來完成(路線方案8)。
路線方案8 另外,酰基-酰肼可以直接衍生自15類型的酸以便能夠不同氨基酸衍生物隨后引入到二唑環(huán)內(nèi)。最后R1基團(tuán)的隨后引入可以由45類型的席夫堿來進(jìn)行(路線方案8A)。
路線方案8A 兩種可能的1,2,4-二唑中的一種的合成如路線方案9所示。酸15與羥基酰胺化物11偶聯(lián),隨后在堿性條件下環(huán)脫水并且Boc脫保護(hù)得到二唑20。
路線方案9 其他可能的1,2,4二唑的合成可以由腈17獲得。反應(yīng)順序類似于上述方法得到二唑21(路線方案10)。
路線方案10 1,2,4三唑22在路線方案11中描述。腈17在堿性條件下向相應(yīng)亞胺鹽轉(zhuǎn)化,隨后與肼基酰胺3回流并且Boc脫保護(hù)得到所需雜環(huán)。
路線方案11 咪唑24按照路線方案12所述制備。12與甲酸偶聯(lián)并氧化,隨后閉環(huán)得到咪唑23。溴化物16經(jīng)過鋰鹵素交換轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的硼酸,鈀介導(dǎo)的與咪唑23的偶聯(lián)和Boc脫保護(hù)完成了該反應(yīng)流程,得到化合物24。
路線方案12 1,2,3-三唑26的合成如路線方案13所述。經(jīng)由苯胺8獲得的二偶氮中間體形成芳基疊氮化物,隨后與適當(dāng)缺電炔烴環(huán)加成得到25。Ellman亞磺酰基亞胺的形成,親核性加成,隨后通過手性輔劑裂解實(shí)現(xiàn)26的合成。
路線方案13 唑類27、噻唑類28和咪唑29的合成如路線方案14所示。酸15的還原,氧化為醛,環(huán)氧化反應(yīng),環(huán)氧化物用氨打開,隨后將所得的氨基醇與酸2偶聯(lián)并且氧化得到通用中間體酮基酰胺。在所述條件下環(huán)脫水生成27、28或29。
路線方案14 第二系列的區(qū)域異構(gòu)唑和噻唑類可以由芳基溴化物16按照路線方案15所述的方法合成。交聯(lián),Sharpless不對(duì)稱胺化并且與酸2偶聯(lián)得到通用中間體酰胺-醛。采用上述條件得到唑30,噻唑31,以及另一獲得咪唑29的途徑。
路線方案15 路線方案16表示制備雜環(huán)29-31的另一方式。酸15經(jīng)中間體二偶氮酮轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的溴酮。用羧酰胺6a替代并且環(huán)化,隨后脫除Boc得到唑30。用硫代羧酰胺6b替代和環(huán)化,隨后脫除Boc得到噻唑31。用酸2替代并在氨源的存在下環(huán)化,隨后脫除Boc得到咪唑29。
路線方案16 下面路線方案17描述第三個(gè)系列的區(qū)域異構(gòu)唑類32、噻唑類33和咪唑34的合成。酸15與氨基醇12偶聯(lián),在適當(dāng)條件下環(huán)脫水,隨后Boc脫保護(hù)得到所需化合物。
路線方案17
第三可能西林的唑類35、噻唑類36的合成如路線方案18所示。氨基醇13與酸15的EDC偶聯(lián)得到通用中間體醛-酰胺。在適當(dāng)條件下環(huán)脫水得到所需五員雜環(huán)。
路線方案18 路線方案19表示另一種制備雜環(huán)34-36的方式。溴酮14用酸15替代,在氨源的存在下環(huán)化,隨后除去Boc得到咪唑34。用羧酰胺37替代并環(huán)化,隨后除去Boc得到唑35。用硫代羧酰胺38替代并環(huán)化,隨后脫除Boc得到噻唑36。
路線方案19 40類型的異唑類可以按照路線方案20所述的方法制備。芳基溴化物16與TMS乙炔的交叉偶聯(lián)和脫保護(hù)得到39。與就地氧化11制成的氧化腈衍生物的環(huán)加成,隨后Boc脫保護(hù)得到40。
路線方案20
第二異唑區(qū)域異構(gòu)體的合成可以利用類似于路線方案20所述的流程完成。醛10可以利用Corey-Fuchs法加工為炔烴41。酸還原,氧化和羥基亞胺鹽的形成得到42。由41就地生成氧化腈并且環(huán)加成,隨后脫除Boc得到異唑43。
路線方案21 路線方案22描述了中間體49的制備,用于制備50類型的二唑類化合物。羧酸48也可以用于制備上述路線方案中的多種雜環(huán)類化合物。
路線方案22 路線方案23表示具有吡唑或嘧啶X基團(tuán)的本發(fā)明化合物的制備方法。
路線方案23
路線方案24描述了中間體54的制備,用于制備55類型的二唑類化合物。羧酸54也可以用于修飾上述多種路線方案中所述的多種雜環(huán)類化合物。
路線方案24 路線方案25描述了58類型的化合物的合成。商購2-氯-4-氨基-6-氯吡啶的重氮化和碘化,隨后通過Suzuki交叉偶聯(lián)得到呋喃醛56。格氏加成,隨后氧化并且隨后有機(jī)金屬加成得到中間體醇57。上述R4和R7的引入,隨后Ritte反應(yīng),R5和R6裝配和疊氮化物還原得到最終結(jié)構(gòu)的58類化合物。
路線方案25 術(shù)語″基本純″是指通過本領(lǐng)域已知的分析技術(shù)測(cè)定,純度至少為90%,和優(yōu)選純度95%,和特別更優(yōu)選純度99%的分離物質(zhì)。
術(shù)語″藥學(xué)可接受鹽″是指由藥學(xué)可接受無毒堿或酸制備的鹽,包括無機(jī)或有機(jī)堿和無機(jī)或有機(jī)酸。本發(fā)明的化合物可以氏一、二或三鹽,取決于該化合物游離堿中存在的酸官能度的數(shù)目。游離堿和由無機(jī)堿衍生的鹽包括鋁,銨,鈣,銅,鐵,亞鐵,鋰,鎂,錳鹽,亞錳,鉀,鈉,鋅等。特別優(yōu)選銨,鈣,鎂,鉀和鈉鹽。固體形式的鹽可能存在不止一種晶體結(jié)構(gòu),和還可以是水合物的形式。衍生自藥學(xué)可接受有機(jī)無毒堿的鹽包括伯、仲和叔胺的鹽,包括天然取代胺類、環(huán)狀胺和堿性離子交換樹脂,例如精氨酸,甜菜堿,咖啡因,膽堿,N,N′-二芐基亞乙基-二胺,二乙胺,2-二乙基氨基乙醇,2-二甲基氨基乙醇,乙醇胺,亞乙基二胺,N-乙基-嗎啉,N-乙基哌啶,葡糖胺,氨基葡萄糖,組氨酸,hydrab胺,異丙胺,賴氨酸,甲基葡糖胺,嗎啉,哌嗪,哌啶,聚胺樹脂,普魯卡因,嘌呤類,可可堿,三乙胺,三甲胺,三丙胺,氨丁三醇等。當(dāng)本發(fā)明的化合物為堿性時(shí),鹽可以由藥學(xué)可接受無毒酸制備,包括無機(jī)和有機(jī)酸。此類酸包括乙酸,三氟乙酸,苯磺酸,苯甲酸,樟腦磺酸,檸檬酸,乙磺酸,富馬酸,葡糖酸,谷氨酸,氫溴酸,鹽酸,羥乙磺酸,乳酸,馬來酸,蘋果酸,扁桃酸,甲磺酸,粘酸,硝酸,撲酸,泛酸,磷酸,琥珀酸,硫酸,酒石酸,對(duì)甲苯磺酸等。特別優(yōu)選檸檬酸,氫溴酸,鹽酸,三氟乙酸,馬來酸,磷酸,硫酸,富馬酸和酒石酸。
本發(fā)明涉及本文公開的化合物作為β-促分泌酶活性或β-位點(diǎn)淀粉樣蛋白前體蛋白-裂解酶(″BACE″)活性的抑制劑在需要這種抑制作用的患者或?qū)ο罄绮溉閯?dòng)物中的應(yīng)用,包括施用有效量的所述化合物。術(shù)語″β-促分泌酶″、″β-位點(diǎn)淀粉樣蛋白前體蛋白-裂解酶″和″BACE″在本說明書中可以互換使用。除了人類以外,許多其他哺乳動(dòng)物可以按照本發(fā)明的方法處理。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及制備用于抑制人體和動(dòng)物中β-促分泌酶活性的含有本發(fā)明化合物和藥學(xué)載體或稀釋劑的藥物或組合物的方法。
本發(fā)明的化合物在治療、改善、控制或降低阿爾茨海默氏病的危險(xiǎn)性中具有可利用性。例如,所述的化合物可以用于預(yù)防阿爾茨海默型的癡呆,并用于阿爾茨海默型的早期、中期或晚期癡呆。所述的化合物還可以用于治療、改善、控制或降低淀粉樣蛋白前體蛋白的異常裂解所介導(dǎo)的疾病(也稱作APP)的危險(xiǎn)性,和其他可以通過抑制β-促分泌酶治療或分的病癥。此類病癥包括輕度認(rèn)知損傷,Trisomy 21(唐氏綜合征),腦淀粉樣蛋白血管病,變性癡呆,遺傳性腦出血伴隨Dutch型淀粉樣變性(HCHWA-D),Creutzfeld-Jakob氏病,朊病毒疾病,肌萎縮性側(cè)索硬化,進(jìn)行性核上麻痹,頭部創(chuàng)傷,中風(fēng),唐氏綜合征,胰腺炎,包埋性體肌炎,其他外周淀粉樣蛋白,糖尿病和動(dòng)脈粥樣硬化。
本發(fā)明化合物所施用的對(duì)象或患者一般是其中希望抑制β-促分泌酶活性的人類,男性或女性,但也可以包括其他哺乳動(dòng)物,例如狗,貓,小鼠,大鼠,牛,馬,綿羊,兔,猴,黑猩猩或其他無尾猿或靈長類,其中需要抑制β-促分泌酶活性或治療上述疾病。
本發(fā)明的化合物可以與一種或多種其他藥物聯(lián)合用于本發(fā)明化合物所適用的疾病或病癥的治療中,其中藥物的聯(lián)用避其單獨(dú)使用安全或更加有效。另外,本發(fā)明的化合物可以與一種或多種其他治療、預(yù)防、控制、改善或降低本發(fā)明化合物的副作用或毒性的藥物聯(lián)合使用。此類其他藥物可以通過一定途徑并且以其常用量與本發(fā)明化合物同時(shí)或順序給藥。所以,本發(fā)明的藥物組合物包括除本發(fā)明化合物以外含有一種或多種其他活性成分的那些。鈣聯(lián)合形式可以作為一單位劑型聯(lián)合產(chǎn)品的組成部分給藥,或者作為套盒或治療方案給藥,其中一種或多種附加藥物以分開劑型作為治療方案的一部分給藥。
本發(fā)明化合物與其他藥物的單位劑型或套盒形式的聯(lián)合形式實(shí)例包括含有抗阿爾茨海默氏病藥物的聯(lián)合形式,例如其他β-促分泌酶抑制劑或γ-促分泌酶抑制劑;tau磷酸化抑制劑;Aβ低聚物形成的阻滯劑;p25/CDK5抑制劑;HMG-CoA還原酶抑制劑;NK1/NK3受體拮抗劑;NSAID類藥物包括布洛芬;維生素E;抗淀粉樣蛋白抗體;抗炎化合物,例如(R)-氟比洛芬;CB-1受體拮抗劑或CB-1受體反向激動(dòng)劑;抗體例如脫氧土霉素和利福平;N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑,例如美金剛胺;膽堿酯酶抑制劑例如加蘭他敏,雷司替明,獨(dú)尼匹次和他克林;生長激素促分泌劑例如ibutamoren,甲磺酸ibutamoren,和capromorelin;組胺H3拮抗劑;AMPA激動(dòng)劑;PDE IV抑制劑;GABAA反向激動(dòng)劑;神經(jīng)元煙堿樣激動(dòng)劑;P-450抑制劑,例如利托那韋;或其他影響受體或酶的提高本發(fā)明化合物效價(jià)、安全性、方便性或降低不良副作用或毒性的藥物。聯(lián)合形式的上述目錄僅僅是舉例說明而不以任何方式限定。
本發(fā)明所用的術(shù)語″組合物″包括含有預(yù)定量或比例的特定組分的產(chǎn)品,以及任何直接或間接由特定量的特定組分的聯(lián)合形式得到的產(chǎn)品。與藥物組合物有關(guān)的該術(shù)語包括了含有一種或多種活性成分和任選的載體的產(chǎn)品,所述載體包括惰性成分,以及任何直接或間接由任意兩種或多種組分的聯(lián)合、復(fù)合或聚集得到的產(chǎn)品,或者由一種或多種組分的其他反應(yīng)或相互反應(yīng)得到的產(chǎn)品。通常,藥物組合物通過均勻和緊密地使活性成分與液體載體或吸附固體財(cái)團(tuán)或兩種結(jié)合在一起來制備,并且隨后,如果必要,將該產(chǎn)品成形為所需制劑。在藥物組合物中活性目標(biāo)化合物以足夠?qū)膊〉倪^程或狀況產(chǎn)生預(yù)期作用的量存在。所以,本發(fā)明的藥物組合物包括任何通過將本發(fā)明化合物與藥學(xué)可接受載體環(huán)化制成的組合物。
口服使用的藥物組合物可以按照本領(lǐng)域已知的制備藥物組合物的方法制備并且此類組合物可以含有一種或多種選自甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑的試劑來提供藥學(xué)上美觀和可口的制劑。片劑含有與適合制備片劑的藥學(xué)可接受賦形劑相互混和的活性成分。這些賦形劑可以例如,惰性稀釋劑,例如碳酸鈣,碳酸鈉,乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉;造粒劑和崩解劑,例如玉米淀粉或藻酸;粘合劑,例如淀粉,明膠,聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯膠,和潤滑劑,例如,硬脂酸鎂,硬脂酸或滑石粉。片劑可以未包衣,或者它們可以通過已知技術(shù)將其包衣以延遲在胃腸道內(nèi)的崩解和吸收并由此獲得更長時(shí)間的緩釋作用。
口服使用的制劑也可以作為硬明膠膠囊存在,其中活性成分與惰性固體稀釋劑混和,該惰性固體稀釋劑例如是碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土;或作為軟明膠膠囊存在,其中該活性成分與水或油性介質(zhì)如花生油、液體石蠟或橄欖油混和。
其他藥物組合物包括水混懸液,它含有與適合制備水混懸液的賦形劑混和的活性物質(zhì)。此外,油性混懸液可以通過將活性成分懸浮在植物油如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油或懸浮在礦物油例如液體石蠟中來配制。油性混懸液可以含有不同的賦形劑。本發(fā)明的藥物組合物還可以是水包油乳液,它也可以含有賦形劑例如甜味劑和矯味劑。
該藥物組合物可以是滅菌可注射水或油性混懸液的形式,其可以按照本領(lǐng)域已知的方法配制,或者可以以直腸給藥栓劑的形式施用。
本發(fā)明的化合物也可以通過吸入、利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的吸入裝置給藥,或者通過透皮貼劑給藥。
所謂“藥學(xué)可接受”是指載體、稀釋劑或賦形劑必須與制劑的其他組分相容并且對(duì)接受者無害。
術(shù)語″施用″和″給藥″應(yīng)當(dāng)理解為是指將本發(fā)明的化合物以可以以治療有用形式和治療有效量引入到個(gè)體機(jī)體內(nèi)的形式提供給需要治療的個(gè)體內(nèi),包括,但不限于口服劑型,例如片劑,膠囊,糖漿劑,混懸劑等;可注射劑型,例如IV,IM,或IP等;透皮劑型,包括霜?jiǎng)?,凍膠,散劑或貼劑;經(jīng)頰劑型;吸入粉末,噴霧劑,混懸劑等;和直腸栓劑。
術(shù)語″有效量″或″治療有效量″是指所述化合物的由研究人員、獸醫(yī)、臨床醫(yī)生和其他臨床工作者尋找到的活性化合物或藥劑在組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人體中產(chǎn)生生物或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的量。如此所用,術(shù)語″治療″是指上述病癥的治療,特別是在被證實(shí)了疾病或病癥的癥狀的患者中。
如此所用,術(shù)語″治療″或″處理″是指施用本發(fā)明的化合物并且包括(1)在經(jīng)歷或表現(xiàn)除疾病的病理或癥狀的動(dòng)物中抑制該疾病(即,阻止病理和/或癥狀的進(jìn)一步發(fā)展),或(2)在經(jīng)歷或表現(xiàn)除疾病的病理或癥狀的動(dòng)物中改善疾病(即,逆轉(zhuǎn)該病理和/或癥狀)。
術(shù)語″控制″包括預(yù)防性處理、根除、改善或降低受控病癥的嚴(yán)重性。
含本發(fā)明化合物的組合物一般以單位劑型存在并且可以通過藥學(xué)領(lǐng)域熟知的方法制備。術(shù)語″單位劑型″是指其中所有活性和非活性成分結(jié)合為一個(gè)適當(dāng)體系的單一劑型,由此患者或?qū)⒃撍幬锸┯媒o患者的人可以打開一個(gè)容器或包裝而其中含有全部劑量,并且不需要將兩個(gè)或多個(gè)容器或包裝內(nèi)的任何組成混和。單位劑型的典型實(shí)例是口服給藥的片劑或膠囊,注射用的單一劑量小瓶,或直腸給藥的栓劑。單位劑型的上述目錄不以任何方式限定,而僅僅是單位劑型的現(xiàn)有典型實(shí)例。
含有本發(fā)明化合物的組合物通??梢宰鳛樘缀写嬖?,由此兩種或多種組分,其可以是活性或無活性組分、載體、稀釋劑等,與配制試劑劑型的說明書一起提供給患者或者給患者施用藥物的人。此類套盒可以含有并提供所有必要的物質(zhì)和組分,或它們可以包括使用或制備患者或給患者施用藥物的人需可獨(dú)立獲得的物質(zhì)或組成的說明書。
當(dāng)指出用本發(fā)明的化合物治療、改善、控制或降低阿爾茨海默氏病或其他疾病的危險(xiǎn)性時(shí),通常本發(fā)明化合物以約0.1mg-約100mg/kg單位體重的日劑量給藥時(shí)可以獲得令人滿意的結(jié)果,優(yōu)選作為單一日劑量給藥或以分開劑量每天給藥2-6次,或采取緩釋形式??偟娜談┝渴羌s1.0mg-約2000mg,優(yōu)選約0.1mg-約20mg/kg體重。在70kg成年人的情況中,總的日劑量一般是約7mg-約1,400mg。該劑量方案可以進(jìn)行調(diào)整以產(chǎn)生最近治療反應(yīng)。所述的化合物可以采用每天1-4次的方案給藥,優(yōu)選每天1或2次。
本發(fā)明化合物的或其藥學(xué)可接受鹽的具體給藥劑量包括1mg,5mg,10mg,30mg,80mg,100mg,150mg,300mg和500mg。本發(fā)明的藥物組合物可以以含有約0.5mg-1000mg活性成分的制劑提供;更優(yōu)選含有約0.5mg-500mg活性成分;或0.5mg-250mg活性成分;或1mg-100mg活性成分。用于治療的特定藥物組合物可以含有約1mg,5mg,10mg,30mg,80mg,100mg,150mg,300mg和500mg的活性成分。
然而,應(yīng)理解任何特定患者的具體劑量水平和給藥此時(shí)可以變化并且應(yīng)依賴于多種因素,包括所用特定化合物的活性,代謝穩(wěn)定性和化合物作用的時(shí)間長短,年齡,體重,全身健康,性別,飲食,情緒和給藥時(shí)間,排泄率,藥物聯(lián)合,特定病癥的嚴(yán)重性,和宿主進(jìn)行的療法。
本發(fā)明化合物作為β-促分泌酶活性抑制劑的實(shí)用性可以通過本領(lǐng)域已知的方法證實(shí)。酶抑制作用測(cè)定如下。
ECL分析法均勻終點(diǎn)電化學(xué)發(fā)光(ECL)分析采用生物素化BACE底物。底物的Km大于100μM并由于該單位溶解度的限制無法測(cè)定。典型反應(yīng)含有約0.1nM酶,0.25M的底物,和緩沖液(50mM NaOAc,pH4.5,0.1mg/ml BSA,0.2% CHAPS,15mM EDTA和1mM去鐵胺)并且總反應(yīng)體積為100μl。反應(yīng)過程為30分鐘,隨后加入25μL的1M Tris-HCL,pH8.0中止。所得酶產(chǎn)物通過加入釕化(ruthenylated)抗體來分析,該抗體特異性識(shí)別該產(chǎn)物的C-末端。將鏈霉抗生物素涂層的磁珠加入到該溶液內(nèi)并且樣本進(jìn)行M-384(Igen Inc.,Gaithersburg,MD)分析。在這些條件下,小于10%的底物用BACE 1處理。這些研究中所用的酶可溶于(不包括跨膜結(jié)構(gòu)域和胞質(zhì)伸展)桿狀病毒表達(dá)體系中的人蛋白質(zhì)內(nèi)。為了測(cè)定化合物的抑制效價(jià),反應(yīng)混和物(DMSO終濃度為10%)中含有抑制劑在DMSO內(nèi)的溶液(12種濃度的抑制劑是由100M開始制備并且進(jìn)行三倍連續(xù)稀釋)。所有試驗(yàn)在室溫下利用上述標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件進(jìn)行。為測(cè)定化合物的IC50,四參數(shù)公式用于曲線擬合。再現(xiàn)解離常數(shù)的誤差一般小于2倍。
HPLC試驗(yàn)均勻終點(diǎn)HPLC試驗(yàn)采用底物(香豆素-CO-REVNFEVEFR),它在BACE 1作用下裂解釋放出與香豆素連接的N-末端片段。該底物的Km大于100μM并且由于該單位溶解度的限制無法測(cè)定。典型反應(yīng)含有約2nM酶,1.0μM的底物和緩沖液(50mM NaOAc,pH4.5,0.1mg/ml BSA,0.2% CHAPS,15mM EDTA和1mM deferoxamine)且總體積為100μl。該反應(yīng)進(jìn)行30分鐘并且通過加入25μL的1M Tris-HCL,pH8.0中止。所得反應(yīng)混和物加載在HPLC上并且產(chǎn)物用5發(fā)展線性梯度與底物分離。在這些條件下,小于10%的底物進(jìn)行BACE 1。這些研究中所用的酶可溶于(不包括跨膜結(jié)構(gòu)域和胞質(zhì)伸展)桿狀病毒表達(dá)體系中的人蛋白質(zhì)內(nèi)。為了測(cè)定化合物的抑制效價(jià),反應(yīng)混和物(DMSO終濃度為10%)中含有抑制劑在DMSO內(nèi)的溶液(12種濃度的抑制劑是由100M開始制備并且進(jìn)行三倍連續(xù)稀釋)。所有試驗(yàn)在室溫下利用上述標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件進(jìn)行。為測(cè)定化合物的IC50,四參數(shù)公式用于曲線擬合。再現(xiàn)解離常數(shù)的誤差一般小于2倍。
特別是,下列實(shí)施例的化合物在一種或兩種上述試驗(yàn)中具有抑制β-促分泌酶的活性,一般具有的IC50為約1nM-100μM。此類結(jié)果是所用抑制劑作為β-促分泌酶活性抑制劑的內(nèi)在活性的指標(biāo)。
制備本發(fā)明化合物的若干方法在本文的路線方案和實(shí)施例中舉例說明。起始原料按照本領(lǐng)域已知的方法或者在此例舉的方法制備。提供下列實(shí)施例以更全面理解本發(fā)明。這些實(shí)施例僅僅是舉例而不應(yīng)以任何方式限定本發(fā)明。
中間體IR-N-(叔丁氧基羰基)-α-甲基苯基丙氨酸亞肼代酰胺(路線方案1) 步驟ABoc保護(hù)向D-α-甲基苯基丙氨酸(1.00g,5.58mmol)在20mL二烷中的漿液內(nèi)加入3N NaOH(7.4mL,22.32mmol)和Boc2O(1.28g,5.86mmol)。令該反應(yīng)進(jìn)行14小時(shí)。通過滴加1N HCl降低pH,用水稀釋,并且水相用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)物用Na2SO4干燥,過濾和濃縮得到預(yù)期產(chǎn)物,其為白色泡沫。此物質(zhì)無需進(jìn)一步純化就可使用。1H NMR(d4-MeOH)δ7.25-7.17(m,3H),7.12(d,J=6.6Hz,2H),3.27(d,J=13.4Hz,1H),3.15(d,J=13.4Hz,1H),1.45(s,9H),1.39(s,3H)。LCMS[(M-Boc)+H]+=180步驟B肼基酰胺的形成向步驟A的R-N-Boc-α-甲基苯基丙氨酸(1.50g,5.37mmol)在25mL CH3CN中的溶液內(nèi)加入EDC(1.75g,9.13mmol),隨后加入肼(0.421mL,13.43mmol)。立刻生成白色沉淀,該溶液在1小時(shí)內(nèi)逐漸變澄清。令該反應(yīng)在室溫下過夜,加入飽和NaHCO3水溶液將其中止,用EtOAc稀釋。分離各層,水層用新鮮EtOAc(3x)洗滌。合并的有機(jī)層用Na2SO4干燥,過濾和濃縮得到白色泡沫,其無需進(jìn)一步純化即可使用。1H NMR(d4-MeOH)δ7.27-7.20(m,3H),7.11(d,J=7.7Hz,2H),3.30(d,J=13.5Hz,1H),3.02(d,J=13.5Hz,1H),1.46(s,9H),1.31(s,3H)。LCMS[[(M-Boc)+H]+=194中間體IIR-N-(叔丁氧基羰基)-α-甲基苯基丙氨酸酰胺(路線方案2) 向N-Boc-D-α-甲基苯基丙氨酸(2.04g,7.30mmol)在26mL CH2Cl2中的溶液內(nèi)加入EDC(1.54g,8.03mmol),隨后加入HOAt(0.845g,6.21mmol)。室溫下30分鐘后,加入15mL DMF,該反應(yīng)冷卻至~10℃,向該反應(yīng)內(nèi)吹入氨氣50分鐘。該反應(yīng)通過加入飽和NaHCO3水溶液中止并且用EtOAc稀釋。分離各層,水層用新的EtOAc(2x)洗滌。合并的有機(jī)物用3M LiCl水溶液和鹽水洗滌,用Na2SO4干燥,過濾和濃縮。該殘余物通過正相色譜純化(0->6% MeOH/CH2Cl2)得到所需羧酰胺的白色固體。1H NMR(d4-MeOH)δ7.96(br s,1H),7.28-7.13(m,3H),7.12(d,J=7.4Hz,2H),6.39(br s,1H),5.81(br s,1H),3.32(d,J=13.7Hz,1H),3.10(d,J=13.7Hz,1H),1.44(s,9H),1.40(s,3H)。LCMS[(M-Boc)+H]+=179。
中間體III(3R-氨基-1-芐基-2RS-羥基-1-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯(路線方案3,4)
步驟A還原向D-α-甲基-苯基丙氨酸(1.74g,9.71mmol)在30mL THF中的溶液內(nèi)于室溫下一次性加入NaBH4(0.92g 24.27mmol)。將該溶液冷卻至0℃。30分鐘內(nèi)滴加存在于5mL THF中的碘(2.46g,9.71mmol)。加料完畢后,將該反應(yīng)加熱回流2天。該反應(yīng)隨后冷卻至0℃并且通過加入甲醇中止直至停止冒泡。該反應(yīng)混和物通過加入6N HCl酸化至pH1,在50℃下攪拌30分鐘并真空濃縮。利用離子交換色譜純化(SCX盒)得到2R-氨基-2-甲基-3-苯基丙-1-醇I的白色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.18(m,5H),3.36(AB的A,d,J=10.4Hz,1H),3.31(AB的B,d,J=10.4Hz,1H),2.70(s,2H),1.04(s,3H)。
步驟BBoc保護(hù)將2R-氨基-2-甲基-3-苯基丙-1-醇(4.14g,25mmol)和二碳酸二叔丁酯(7.1g,32.5mmol)的溶液在室溫下攪拌16小時(shí),濃縮得到(1-芐基-2R-羥基-1-甲基乙基)氨基甲酸叔丁酯),其為白色固體。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.15(m,5H),4.48(br s,1H),4.17(br s,1H),3.76-3.62(m,2H),3.19(AB的A,d,J=13.6Hz,1H),2.81(AB的B,d,J=13.6Hz,1H),1.47(s,9H),1.07(s,3H)。
步驟C氧化向(1-芐基-2R-羥基-1-甲基乙基)氨基甲酸叔丁酯(6.7g,25.2mmol)在DCM(100mL)和DMSO(25mL)中的溶液內(nèi)加入三乙胺(10.5mL,75.7mmol)和三氧化硫-吡啶(10g,63.1mmol)。該反應(yīng)混和物在室溫下攪拌3.5小時(shí),用EtOAc稀釋,用10% KHSO4、飽和NaHCO3、水、鹽水和LiCl水溶液洗滌,用硫酸鈉干燥,真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,0-20% EtOAc/己烷)得到(1-芐基-1-甲基-2R-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯的白色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.53(s,1H),7.35-7.22(m,3H),7.12-7.00(m,2H),4.84(br s,1H),3.17(AB的A,d,J=13.6Hz,1H),3.08(AB的B,d,J=13.6Hz,1H),1.51(s,9H),1.27(s,3H)。
步驟D環(huán)氧化反應(yīng)向N-((1-芐基-1-甲基-2R-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(1g,3.80mmol)在乙腈(15mL)中的溶液內(nèi)加入6滴水,三甲基碘化锍(775mg,3.80mmol)和氫氧化鉀(511mg,9.11mmol)。將該反應(yīng)在60℃下密封攪拌1.5小時(shí),加入附加三甲基碘化锍(775mg,3.80mmol)和氫氧化鉀(511mg,9.11mmol)并且將該反應(yīng)60℃下攪拌,密封達(dá)3小時(shí)。將反應(yīng)混和物用EtOAc稀釋,用飽和NaHCO3水溶液、鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥和真空濃縮得到(1-甲基-1-環(huán)氧乙烷-2R-基-2-苯基乙基)氨基甲酸叔丁酯的油。MS(ES,M+H)278。
步驟E環(huán)氧化物的開環(huán)將(1-甲基-1-環(huán)氧乙烷-2R-基-2-苯基乙基)氨基甲酸叔丁酯(986mg,3.56mmol)在EtOH(35mL)和NH4OH(35mL)中的溶液在60℃下密封攪拌16小時(shí),真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,0-30%(10%NH4OH/MeOH)/CH2Cl2)得到(3R-氨基-1-芐基-2RS-羥基-1-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯的稠油。1H NMR(400MHz,CD3OD,1∶1非對(duì)映異構(gòu)體混合物)δ7.30-7.14(m,5H),4.01(br d,J=9.2Hz,0.5H),3.54(dd,J=10.0,2Hz,0.5H),3.39(br s,0.5H),3.36(br s,0.5H),2.94-2.56(m,4H),1.47(s,9H),1.03(s,1.5H),0.99(s,1.5H)。
中間體IVN 2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸(路線方案1) 步驟A席夫堿的形成向丙氨酸甲酯鹽酸鹽(10.0g,71.6mmol)在100mL CH2Cl2中的溶液內(nèi)加入二苯酮亞胺(12.0mL,71.6mmol)。令該反應(yīng)在室溫下進(jìn)行15小時(shí),該溶液逐漸出現(xiàn)白色沉淀。該反應(yīng)用H2O和CH2Cl2稀釋,分離各層,該有機(jī)層用鹽水洗滌,用Na2SO4干燥,過濾和濃縮得到N-(二苯基亞甲基)丙氨酸甲酯的粘性油,其無需進(jìn)一步純化即可使用。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ7.62(m,2H),7.47-7.29(m,7.19-7.16(m,2H),4.16(q,J=6.8Hz,1H),3.7(s,3H,1.40(d,J=6.8Hz,3H)。
步驟B烷基化向步驟A的N-(二苯基亞甲基)丙氨酸甲酯(9.78g,36.6mmol)在60mL DMF中的溶液內(nèi)于0℃下和20分鐘內(nèi)加入二(三甲基甲硅烷基)氨化鈉在THF(45.72mL,45.72mmol)中的1M溶液。30分鐘內(nèi),在20分鐘內(nèi)向該反應(yīng)經(jīng)套管加入4-甲基吡啶氯鹽酸鹽(3.00g,18.29mmol)在40mL DMF中的溶液。使該反應(yīng)升至室溫并攪拌5小時(shí)。該反應(yīng)用飽和NH4Cl水溶液中止并且用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)層用3MLiCl(2x)和鹽水新的,用Na2SO4干燥,過濾,真空濃縮。通過硅膠色譜純化(0-40% EtOAc/己烷)得到2-[(二苯基亞甲基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯的白色固體(5.28g,81%)。LCMS[M+H]=359.2。1HNMR(d4-MeOH)δ8.51(dd,J=4.5,1.5Hz,2H),7.56(dd,J=8.4,1.4Hz,2H),7.40-7.37(m,4H),7.34-7.30(m,2H),7.26-7.23(m,2H),7.10-7.07(m,2H),3.33(AB的A,d,J=13.0Hz,1H),3.27(s,3H),3.18(AB的B,d,J=12.9Hz,1H),1.32(s,3H)。
步驟C席夫堿的脫除向步驟B的2-[(二苯基亞甲基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯(5.28g,14.73mmol)在75mL 1∶1MeOH/THF中的混懸液內(nèi)加入6NHCl(3.68mL,22.10mmol)。在室溫下攪拌1.5小時(shí)后將該反應(yīng)真空濃縮。利用離子交換色譜純化(SCX盒)得到2-氨基-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯,其為黃色油(2.76g,97%)。LCMS[M+H]=195.3。1H NMR(d4-MeOH)δ8.43(dd,J=4.6,1.6Hz,2H),7.24(dd,J=4.6,1.5Hz,2H),3.70(s,3H),3.09(AB的A,d,J=12.9Hz,1H),2.90(AB的B,d,J=13.0Hz,1H),1.39(s,3H)。
步驟DBoc保護(hù)向步驟C的2-氨基-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯(2.76g,14.21mmol)在70mL THF中的混懸液內(nèi)于0℃下加入二碳酸二叔丁酯(4.03g,18.47mmol)。30分鐘后,將該反應(yīng)升至室溫并且令其進(jìn)行過夜。該反應(yīng)用EtOAc稀釋并且用飽和NH4Cl水溶液、水和鹽水洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥,過濾和真空濃縮。在硅膠色譜(0-60%EtOAc/CH2Cl2)純化得到2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯的黃色固體(3.22g,77%)。LCMS[M+H]=295.2。1H NMR(400MHz,d4-MeOH)δ8.43(d,J=5.1Hz,2H),7.21(d,J=5.9Hz,2H),3.73(s,3H),3.44(AB的A,d,J=13.2Hz,1H),3.12(AB的B,d,J=13.2Hz,1H),1.46(s,9H),1.30(s,3H)。
步驟E皂化向步驟D的2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯(0.25g,0.85mmol)在4.25mL 1∶1MeOH/THF中的溶液內(nèi)加入3NNaOH(0.43mL,1.27mmol)。使該反應(yīng)在50℃下進(jìn)行1小時(shí),此時(shí)將其冷卻至室溫并且用6N HCl(0.21mL,1.27mmol)。將該反應(yīng)真空濃縮生成2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸NaCl的白色固體。LCMS[M+H]=281.3。1H NMR(400MHz,d4-MeOH)δ8.44(d,J=5.3Hz,2H),7.28(d,J=5.9Hz,2H),3.43(AB的A,d,J=12.6Hz,1H),3.33(AB的B,d,J=12.3Hz,1H),1.47(s,9H),1.41(s,3H)。
中間體VN-(叔丁氧基羰基)-2,5-二甲基去甲亮氨酸(路線方案1) N-(叔丁氧基羰基)-2,5-二甲基去甲亮氨酸是由碘化異丁烷和丙氨酸席夫堿按照制備中間體IV所述的方法制備。
中間體AN-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺
步驟A偶聯(lián)在2L燒瓶內(nèi)將反式-煙酸(15.0g,174mmol)、芐胺(20.5g,192mmol)和DIPEA(36.7g,192mmol)溶于700mL二氯甲烷中。室溫下向該溶液內(nèi)分次加入固體的EDC-HCl(36.7g,192mmol)并且攪拌過夜。將反應(yīng)混和物傾至10%KHSO4(250mL)水溶液。分離各層并且再次用10%KHSO4洗滌1此。有機(jī)層隨依次H2O(200mL)、鹽水(150mL)洗滌,用Na2SO4干燥和濃縮至干得到白色(2E)-N-芐基丁-2-烯酰胺的結(jié)晶1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.28(m,5H),6.85(sext,J=6.8Hz,1H),5.78(dd,J=15.2,1.6Hz,2H),4.47(d,J=5.6Hz,2H),1.82(dd,J=7.2,1.6Hz,3H)。
步驟B環(huán)化室溫下在含有Et2O(300mL)和40% KOH水溶液(111mL)的Erlenmeyer燒瓶內(nèi)在劇烈攪拌下在5分鐘內(nèi)滴加1-甲基-3-硝基-1-亞硝基胍(11.1g,67mmol)。加料完畢后停止攪拌并且將水層在-78℃浴下冷凍。將醚層傾析到含有KOH片的Erlenmeyer中。將內(nèi)容物放置5分鐘。,曲線到第三各含有KOH片的燒瓶內(nèi)并且隨后傾至含有(2E)-N-芐基丁-2-烯酰胺(3.0g,17.1mmol,得自步驟A)的Et2O/THF溶液(200mL/50mL)上。隨后加入Pd(OAc)2(180mg,0.9mmol)并且令該反應(yīng)升至室溫并且攪拌1小時(shí)。向該反應(yīng)吹入氮?dú)?0分鐘。該混和物用H2O(150mL)洗滌。分離有機(jī)層并且隨后用Na2SO4干燥。除去溶劑并且通過快速色譜在SiO2(EtOAc/己烷)純化得到N-芐基-反式-2-甲基環(huán)丙烷羧酰胺(83%)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.28(m,5H),5.81(br s,1H),4.43(dd,J=5.6,2.4Hz,2H),1.37(m,1H),1.17(m,1H),1.07(d,J=6.0Hz,3H),1.04(重疊m,1H),0.56(m,1H)。
任選地進(jìn)行制備手性HPLC得到優(yōu)選的對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S。在下列中間體和實(shí)施例中,無論是優(yōu)選的對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S或是反式-S,S和反式-R,R的外消旋混合物無需鑒定即可使用。為了簡(jiǎn)化,該甲基-環(huán)丙基-甲基部分繪制為反式-外消旋。
步驟C還原向500mL燒瓶內(nèi)加入含在THF(80mL)中的N-芐基-反式-2-甲基環(huán)丙烷羧酰胺(得自步驟B,3.9g,20.6mmol)。經(jīng)滴液漏斗滴加BH3-THF(1.0M,105mL,105mmol)。加料完畢后(10分鐘。),將該混和物回流5小時(shí)。令該混和物冷卻至室溫并且小心用MeOH(15mL)中止。該混和物濃縮至干,溶于二氯甲烷并且用3M KOH洗滌。分離有機(jī)層,用鹽水洗滌,隨后用Na2SO4干燥和濃縮至干。粗物質(zhì)用1N HCl在二烷中50℃下處理1小時(shí)。將該混和物濃縮得到鹽酸鹽的白色固體。將該固體溶于飽和NaHCO3水溶液(80mL)并用CHCl3(2×150mL)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌,用Na2SO4干燥和經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑,真空干燥后得到N-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺的米色半固體(quant.)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.28(m,5H),3.80(s,2H),2.50(d,J=6.8Hz,2H),2.4(br s,1H),1.02(d,J=6.0Hz,3H),0.69(m,1H),0.52(m,1H),0.23(m,2H)。
中間體BN-甲基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺 向N-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺(8g,45.6mmol,中間體A)在DCE(240mL)和MeOH(120mL)中的溶液內(nèi)加入甲醛(34mL,456mmol,37% aqueous)和NaBH(OAc)3(19.3g,91mmol)。將反應(yīng)混和物在室溫下攪拌1小時(shí),用飽和NaHCO3水溶液處理,濃縮近干,用水稀釋并用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥,用HCl(50mL,50mmol,1M Et2O)處理,并且真空濃縮得到N-芐基-甲基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺的鹽酸鹽,其在20%Pd(OH)2/C(616mg)的存在下在EtOH(400mL)中60℃和1atm H2下氫化2小時(shí)。過濾并且真空濃縮得到N-甲基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺的鹽酸鹽。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ2.88(d,J=7.3Hz,2H),2.69(s,3H),1.09(d,J=5.7Hz,3H),0.78-0.70(m,2H),0.52-0.50(m,1H),0.50-0.40(m,1H)。
中間體C2-{芐基[2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酸(路線方案7)
步驟A磺酰胺的引入將2,6-二氯異煙酸甲酯(5.0g,24.3mmol)、甲基(甲基磺酰基)胺(3.18g,29.12mmol)、磷酸鉀(7.22g,34.0mmol)、Xantphos(0.87g,1.50mmol)和三(二亞芐基酮)二鈀(0.68g,0.51mmol)加入到干燥、吹入氬氣的燒瓶內(nèi)。加入二烷(195mL),該溶液用氬氣脫氣并且該反應(yīng)在100℃下加熱16小時(shí)。將該反應(yīng)冷卻至室溫,經(jīng)硅藻土過濾并且真空蒸發(fā)。快速色譜(硅膠,0-50%EtOAc/CH2Cl2)得到2-氯-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]異煙酸甲酯,其為黃色油1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.88(s,1H),7.68(s,1H),3.96(s,3H),3.44(s,3H),3.11(s,3H)。
步驟B水解向2-氯-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]異煙酸甲酯(2g,7.18mmol)在1∶1THF∶MeOH(60mL)中的溶液內(nèi)加入NaOH(9.3mL,9.3mmol,1N)。將反應(yīng)混和物在室溫下攪拌0.5小時(shí),用1N HCl酸化至pH3-4,用二氯甲烷(x2)萃取,用硫酸鈉干燥和真空濃縮得到2-氯-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酸的白色固體。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.88(s,1H),7.63(s,1H),3.39(s,3H),3.13(s,3H)。
步驟C胺化將2-氯-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酸(1.2g,4.53mmol)、中間體A(1.85g,10.55mmol)、磷酸鉀(3.18g,15.1mmol)和二(三叔丁基膦)鈀(0.13g,0.25mmol)在脫氣DMA(10mL)中的混懸液密封在玻璃管內(nèi)并加熱至130℃達(dá)4小時(shí)。反應(yīng)混和物用水和鹽水稀釋,用1N HCl酸化至pH3-4,用二氯甲烷萃取并且真空濃縮。該殘余物溶于EtOAc,用LiCl(x3)水溶液洗滌,在Na2SO4上干燥,真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,2-7%(1% AcOH在MeOH中)/CH2Cl2)得到2-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酸的油。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.15(m,5H),7.06(s,1H),7.03(s,1H),4.59-4.28(m,2H),3.55(ABX的A,dd,J=14.8,5.6Hz,1H),3.29(ABX的B,dd,J=14.8,7.2Hz,1H),3.28(s,3H),2.87(s,3H),0.97(d,J=6.4Hz,3H),0.84-0.74(m,1H),0.66-0.56(m,1H),0.40-0.31(m,1H),0.29-0.21(m,1H)。
中間體D2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酸(路線方案7) 2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]異煙酸是由2-氯-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酸和N-甲基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺利用類似于中間體C制備的步驟C中所述的方法制備。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ7.02(s,1H),6.96(s,1H),3.55(ABX的A,dd,J=14.4,6.0Hz,1H),3.29(ABX的B,dd,J=14.4,7.2Hz,1H),3.35(s,3H),3.15(s,3H),3.12(s,3H),1.03(d,J=6.0Hz,3H),0.82-0.66(m,2H),0.48-0.41(m,1H),0.28-0.22(m,1H)。
中間體EN-(4-(溴乙?;?-6-{甲基(2-甲基環(huán)丙基)甲基}氨基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案16) 向中間體D(250mg,0.76mmol)在THF(3mL)中的冷卻至-78℃的溶液內(nèi)滴加N-甲基嗎啉(0.088mL,0.8mmol)和甲酸異丁酯(0.104mL,0.8mmol),將該反應(yīng)混合物-78℃下攪拌0.5小時(shí)。反應(yīng)混和物在硅藻土上過濾,用乙醚漂洗。將濾液和洗滌液冷卻至-20℃并且用二偶氮甲烷(3.5mL,Et2O溶液,由150mL Et2O、40mL 40% KOH水溶液和13.2g 1-甲基-3-硝基-1-亞硝基胍制成)處理。在-20℃下攪拌1.5小時(shí)后,該反應(yīng)混合物升至室溫,加入5mL二偶氮甲烷溶液并且將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌0.5小時(shí),真空濃縮(室溫浴且HOAc在捕集器內(nèi))。將該殘余物溶于Et2O和EtOAc,用水、鹽水新的,用硫酸鈉干燥和真空濃縮。將該殘余物溶于Et2O(5mL),冷卻至-20℃,用62% HBr(0.25mL)處理,在-20℃下攪拌0.3小時(shí),用Et2O稀釋,用水、飽和NaHCO3水溶液、鹽水新的,用硫酸鈉干燥和真空濃縮得到粗N-(4-(溴乙酰基)-6-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺,其為黃色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.96(s,1H),6.80(s,1H),4.40(s,2H),3.52(ABX的A,dd,J=14.8,6.4Hz,1H),3.36(ABX的B,dd,J=14.8,6.8Hz,1H),3.39(s,3H),3.12(s,3H),3.11(s,3H),1.03(d,J=6.0Hz,3H),0.78-0.62(m,2H),0.44-0.38(m,1H),0.31-0.26(m,1H)。
中間體FN-(4-(2-氨基-1-羥基乙基)-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案14) 步驟A還原向中間體D(815mg,2.49mmol)在THF(10mL)中的冷卻至0℃的溶液內(nèi)加入BH3-THF(7.5mL,7.5mmol,1M THF)并且將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2.5小時(shí),小心用MeOH中止,隨后用1N HCl中止,用EtOAc稀釋,用1N HCl、飽和NaHCO3水溶液、鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥,真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,25-70% EtOAc/己烷)得到N-(4-(羥基甲基)-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的稠油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.51(s,1H),6.38(s,1H),4.63(d,J=6.0Hz,2H),3.50(ABX的A,dd,J=14.4,6.4Hz,1H),3.33(s,3H),3.31(ABX的B,dd,J=14.4,6.8Hz,1H),3.10(s,3H),3.07(s,3H),1.84(t,J=6.0Hz,1H),1.02(d,J=5.6Hz,3H),0.77-0.60(m,2H),0.42-0.35(m,1H),0.27-0.21(m,1H)。
步驟B氧化向N-(4-(羥基甲基)-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(480mg,1.53mmol)在二氯甲烷(10mL)和DMSO(2.5mL)中的溶液內(nèi)加入三乙胺(1.07mL,7.66mmol)和SO3-吡啶(975mg,6.13mmol)。將該反應(yīng)混和物在室溫下攪拌0.5小時(shí),用EtOAc稀釋,用1N HCl、飽和NaHCO3水溶液、鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥,真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,25-50% EtOAc/己烷)得到N-(4-甲?;?6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.94(s,1H),6.92(s,1H),6.72(s,1H),3.53(ABX的A,dd,J=14.8,6.4Hz,1H),3.40(s,3H),3.36(ABX的B,dd,J=14.8,6.8Hz,1H),3.15(s,3H),3.13(s,3H),1.04(d,J=6.0Hz,3H),0.78-0.62(m,2H),0.45-0.37(m,1H),0.31-0.24(m,1H)。
步驟C環(huán)氧化反應(yīng)和環(huán)氧化物的開環(huán)向N-(4-甲?;?6-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(435mg,1.40mmol)在乙腈(5mL)中的溶液內(nèi)加入5滴水,三甲基碘化锍(342mg,1.68mmol)和氫氧化鉀(188mg,3.35mmol)。將該反應(yīng)在65℃下密封攪拌3小時(shí),用EtOAc稀釋,用飽和NaHCO3水溶液、鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥,和真空濃縮得到N-甲基-N-(6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-4-環(huán)氧乙烷-2-基吡啶-2-基)甲磺酰胺,用于下步。將N-甲基-N(6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-4-環(huán)氧乙烷-2-基吡啶-2-基)甲磺酰胺(440mg,1.35mmol)在EtOH(10mL)和NH4OH(15mL)中的溶液在60℃下密封攪拌16小時(shí),真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,5-15%(10%NH4OH/MeOH)/CH2Cl2)得到N-(4-(2-氨基-1-羥基乙基)-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的稠油。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.52(s,1H),6.47(s,1H),4.58(A′B′X′的X′,dd,J=7.6,4.0Hz,2H),3.54(ABX的A,dd,J=14.4,6.4Hz,1H),3.35(ABX的B,dd,J=14.4,6.8Hz,1H),3.30(s,3H),3.13(s,3H),3.08(s,3H),3.86(A′B′X′的A′,dd,J=13.2,4.0Hz,1H),2.76(A′B′X′的B′,dd,J=13.2,7.6Hz,1H),1.02(d,J=6.0Hz,3H),0.80-0.65(m,2H),0.46-0.39(m,1H),0.25-0.18(m,1H)。
中間體GN-(叔丁氧基羰基)-N-(2-氧代-2-{2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-{甲基(甲基磺酰基)氨基]吡啶-4-基}-α-D-甲基苯基丙氨酰胺(路線方案14) 步驟A偶聯(lián)將中間體F(330mg,096mmol)、N-Boc-D-α-甲基苯基丙氨酸(323mg,1.16mmol)、EDC(240mg,1.25mmol)、HOAt(157mg,1.16mmol)和二異丙基乙胺(0.34mL,1.93mmol)在DMF(9mL)中的溶液在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混和物用EtOAc稀釋,用水和鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥,真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,30-65% EtOAc/己烷)得到N-(叔丁氧基羰基)-N-(2-羥基-2-{2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基)乙基)-D-α-甲基苯基丙氨酰胺的淺黃色泡沫,其直接進(jìn)行氧化步驟。
步驟B氧化向N-(叔丁氧基羰基)-N-(2-羥基-2-{2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基乙基)-D-α-甲基苯基丙氨酰胺(458mg,0.76mmol)在DCM(6mL)和DMSO(1.5mL)中的溶液內(nèi)加入三乙胺(0.53mL,3.79mmol)和三氧化硫-吡啶(483mg,3.03mmol)。反應(yīng)混和物在室溫下攪拌1.5小時(shí),用EtOAc稀釋,用10% KHSO4、飽和NaHCO3和鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥,真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,0-50% EtOAc/己烷)得到N-(叔丁氧基羰基)-N-(2-氧代-2-{2-{甲基[(2-5甲基環(huán)丙基)甲基]氨基-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]吡啶-4-基}乙基)-D-α-甲基苯基丙氨酰胺的橙色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.10(m,5H),6.91(s,1H),6.75(s,1H),4.82(br s,1H),4.78-4.62(m,2H),3.53(ABX的A,dd,J=14.7,6.7Hz,1H),3.43(AB的A,d,J=14.4Hz,1H),3.38(s,3H),3.36(ABX的B,dd,J=14.7,6.6Hz,1H),3.16(s,3H),3.15(AB的B,d,J=14.4Hz,1H),3.13(s,3H),1.49(s,9H),1.46(s,3H),1.04(d,J=6.0Hz,3H),0.80-0.62(m,2H),0.46-0.38(m,1H),0.31-0.24(m,1H)。
中間體H[1R-芐基-1-甲基-3-({2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酰基氨基)-2-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(路線方案17) [1R-芐基-1-甲基-3-({2-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙?;鶀氨基)-2-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯通過中間體III與中間體D)的偶聯(lián)并隨后利用與制備N-叔丁氧基羰基)-N-(2-氧代-2-{2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基)乙基)-D-α-甲基苯基丙氨酰胺(中間體G)相同的羥基氧化方法。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.22(m,3H),7.13-7.08(m,2H),6.88(br s,1H),6.79(s,1H),6.72(s,1H),4.74(br s,1H),4.68-4.58(m,1H),4.44-4.34(m,1H),3.53(ABX的A,dd,J=14.0,6.0Hz,1H),3.38(s,3H),3.40-3.30(AB的A和ABX的B,m,2H),3.14(s,3H),3.11(s,3H),3.05(AB的B,d,J=13.6Hz,1H),1.49(s,9H),1.32(s,3H),1.04(d,J=6.0Hz,3H),0.78-0.62(m,2H),0.44-0.36(m,1H),0.29-0.22(m,1H)。
中間體J2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基l氨基]-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-羧亞胺酸乙酯(路線方案7,11) 步驟A腈的制備(路線方案7)將中間體D(250mg,0.76mmol)、氯化銨(204mg,3.82mmol)、EDC(176mg,0.92mmol)、HOAt(104mg,0.76mmol)和二異丙基乙胺(0.67mL,3.82mmol)在DMF(10mL)中的混懸液在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混和物用EtOAc稀釋,用水、10%KHSO4、飽和NaHCO3水溶液、LiCl水溶液洗滌,用硫酸鈉干燥和真空濃縮。該殘余物溶于THF(5mL),用Burgess試劑(219mg,0.92mmol)處理并且在80℃下微波(Smith合成器)照射5分鐘,真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,0-30% EtOAc/己烷)得到N-(4-氰基-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.73(s,1H),6.48(s,1H),3.47(ABX的A,dd,J=14.8,6.4Hz,1H),3.37(s,3H),3.33(ABX的B,dd,J=14.8,6.8Hz,1H),3.13(s,3H),3.09(s,3H),1.04(d,J=5.6Hz,3H),0.78-0.62(m,2H),0.45-0.37(m,1H),0.32-0.25(m,1H)。
步驟B亞胺鹽的制備向N-(4-氰基-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(180mg,0.58mmol)在EtOH(10mL)中的冷卻至0℃的溶液內(nèi)吹入HCL(g)達(dá)10分鐘。將反應(yīng)混和物密封,升至室溫和攪拌3小時(shí)。將氮?dú)獯等朐摲磻?yīng)混合物10分鐘并且將該反應(yīng)混合物真空濃縮。用乙醚研制得到2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-甲亞胺酸乙酯的鹽酸鹽和亮黃色固體。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.96(s,1H),6.88(s,1H),4.63(q,J=7.2Hz,2H),3.60(ABX的A,dd,J=14.8,6.4Hz,1H),3.44(ABX的B,dd,J=14.8,6.8Hz,1H),3.38(s,3H),3.18(s,3H),3.16(s,3H),1.61(t,J=7.2Hz,3H),1.03(d,J=6.0Hz,3H),0.84-0.68(m,2H),0.50-0.43(m,1H),0.29-0.23(m,1H)。
中間體K(2,2-二氟乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]胺 步驟A偶聯(lián)在500-mL燒瓶內(nèi)將二氟乙酸(0.78g,8.2mmol),N-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺(1.3g,7.42mmol)和DIPEA(4.2g,32.6mmol)溶于100mL的二氯甲烷。向該溶液內(nèi)在室溫下分次加入BOP(3.3g,7.42mmol)的固體并且攪拌1小時(shí)。將該反應(yīng)真空濃縮并且通過快速柱色譜純化(硅膠,0-10%乙酸乙酯/己烷)得到1.45g(77%)的酰胺,其為澄清油1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.31(m,5H),6.19(td,J=51,20Hz,1H),4.75(m,2H),3.24(m,2H),0.99(t,J=5.5Hz,3H),0.62(m,2H),0.31(m,2H);LCMS[M+H]+=254.1。
步驟B還原在圓底燒瓶中將N-芐基-2,2-二氟-N-{[-2-甲基環(huán)丙基甲基]-甲基}乙酰胺(1.45g,5.7mmol)溶于75mL無水THF。向該溶液內(nèi)加入BH3-THF(18.9mmol,18.9mL的1M THF溶液)。將該反應(yīng)按照回流冷凝器并加熱回流16小時(shí)。使該反應(yīng)冷卻至0℃并且通過加入甲醇、隨后加入濃HCl(5mL)中止。所得混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。將粗混合物隨后真空濃縮并且在10% NaOH/乙酸乙酯之間分配。有機(jī)物用硫酸鈉干燥,過濾和真空蒸發(fā)??焖僦V純化(硅膠,0-10%乙酸乙酯/己烷)得到1.25g(91%)的胺,其為澄清油1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.31(m,5H),5.75(tt,56.5,4.5Hz,1H),3.78(d,J=13.7Hz,1H),3.73(d,J=13.7Hz,1H),2.92(td,J=15,3.8Hz,2H),2.56(dd,J=13.2,6.0Hz,1H),2.37(dd,J=13.2Hz,7.0Hz,1H),1.03(d,J=6.0Hz,3H),0.54(m,2H),0.25(t,J=6.2Hz,2H);LCMS[M+H]+=240.2。
步驟C氫化將N-芐基-2,2-二氟-N-[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]乙胺(1.25g,5.2mmol)和鹽酸(5.7mmol,1.44mL的4M二烷溶液)在乙醇(50mL)中的溶液用氮?dú)饷摎獠⑶矣脷溲趸Z(125mg)處理。將該反應(yīng)置于氫氣氛下并劇烈攪拌1小時(shí)。該反應(yīng)經(jīng)硅藻土過濾,用甲醇洗滌和真空濃縮得到(2,2-二氟乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]胺的淺黃色油1H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.35(tt,48,3Hz,1H),3.56(td,J=15.6,3.1Hz,2H),3.03(m,2H),1.11(d,J=5.9Hz,3H),0.83(m,2H),0.60(m,1H),0.50(m,1H)。
中間體LN,N-二甲基-N-[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]丙-1,3-二胺 步驟A偶聯(lián)在100-mL燒瓶將丙烯酸(0.17g,2.4mmol)、N-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺(0.5g,2.4mmol)和DIPEA(0.64g,4.9mmol)溶于20mL二氯甲烷。向此溶液內(nèi)在室溫下滴加EDC(0.68g,3.5mmol)的固體并攪拌15小時(shí)。令該反應(yīng)在1M HCl和二氯甲烷之間分配。有機(jī)物用硫酸鈉干燥,過濾,真空濃縮和進(jìn)行下步反應(yīng)的粗品。
步驟BMichael加成在50-mL燒瓶中將丙烯酰胺(步驟A的粗品)在甲醇(10mL)用二甲基胺(4.5mmol,2.2mL的2M甲醇溶液)處理。將該反應(yīng)在室溫下攪拌1小時(shí),隨后真空濃縮。該殘余物通過快速柱色譜純化(2.5-15%MeOH/二氯甲烷)得到0.47g(75%兩步)的N1-芐基-N3,N3-二甲基-N1-[(2-甲基環(huán)丙基)-甲基]-β-丙氨酰胺的澄清油1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.24(m,5H),4.68(m,2H),3.21(m,2H),2.67(m,4H),2.34(s,3H),2.24(s,3H),0.97(m,3H),0.58(m,2H),0.29m,2H)。LCMS[M+H]+=275.4。
步驟C還原在圓底燒瓶將N1-芐基-N3,N3-二甲基-N1-[(2-甲基環(huán)丙基)-甲基]-β-丙氨酰胺(0.47mg,1.7mmol)溶于10mL無水THF中。向此溶液加入BH3-THF(5.1mmol,5.1mL的1M THF溶液)。將該反應(yīng)安裝回流冷凝器并加熱回流16小時(shí)。使該反應(yīng)冷卻至0℃和用甲醇、隨后用濃HCl(5mL)中止。將所得混合物加熱回流16小時(shí)。將粗混合物此后真空濃縮并在10% NaOH/乙酸乙酯之間分配。該有機(jī)物用硫酸鈉干燥,過濾和真空蒸發(fā)。通過反相色譜純化得到0.42g(49%)的N1-芐基-N3,N3-二甲基-N1-[(2-甲基環(huán)丙基)-甲基]丙-1,3-二銨二(三氟乙酸鹽)的澄清油LCMS[M+H]+=261.5。
步驟D氫化將N1-芐基-N3,N3-二甲基-N1-[(2-甲基環(huán)丙基)-甲基]丙-1,3-二銨二(三氟乙酸鹽)(0.42g,0.86mmol)在乙醇(50mL)中的溶液用氮?dú)饷摎夂陀脷溲趸Z(75mg)處理。將該反應(yīng)置于氫氣氛下并劇烈攪拌1小時(shí)。該反應(yīng)經(jīng)硅藻土過濾,用甲醇洗滌和真空濃縮得到N,N-二甲基-N-[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]丙-1,3-二銨二(三氟乙酸鹽)的淺黃色油。
中間體M(2-氟乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]胺 由氟乙酸、利用類似于中間體K所述的方法制備。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.79(bs,1H),4.98(bd,J=46.3,2H),3.42(m,2H),3.03(bs,2H),1.12(bs,3H),1.01(bs,1H),0.87(bs,1H),0.66(bs,1H),0.50(bs,1H)。
中間體N(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]胺
由甲氧基乙酸利用類似于中間體K所述的方法制備。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.98(bs,1H),3.64(bs,2H),3.38(bs,3H),3.27(bs,2H),3.00(bs,2H),1.06(d,J=5.3Hz,3H),0.79(bs,2H),0.51(m,2H)。
中間體ON,N-二甲基-N-[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]乙-1,2-二胺 由N,N-二甲基甘氨酸采用類似于中間體K所述的方法制備。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ3.49(m,4H),2.98(m,2H),2.96(s,6H),1.09(d,J=5.8Hz,3H),0.83(m,2H),0.61(m,1H),0.49(m,1H)。
中間體P{(1S)-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}胺 步驟A.(2E)-1,1-二乙氧基丁-2-烯將丁烯醛(23.64mL,285.35mmol)、原甲酸三乙酯(57.02mL,342.42mmol)和硝酸銨(2.28g,28.54mmol)在60mL EtOH中混合。室溫下22小時(shí)后,將該反應(yīng)用EtOAc稀釋(60mL)并用飽和碳酸氫鈉溶液(40mL)洗滌。水層再次用EtOAc(20mL)萃取。合并的有機(jī)物用鹽水洗滌(40mL),用Na2SO4干燥,過濾和真空濃縮得到36.5g(89%)的1,1-二乙氧基丁-2-烯。1H NMR(CDCl3,400MHz)5.84(m,1H);5.54(m,1H);4.82(d,J=5.7Hz,1H);3.64(m,2H);3.49(m,2H);1.73(m,3H);1.21(m,6H)。
步驟B.(4S,5S)-2-[(lE)-丙-1-烯基]-1,3-二氧雜環(huán)戊烷-4,5-二羧酸二異丙酯將(2E)-1,1-二乙氧基丁-2-烯(32.20g,223.27mmol)、D-酒石酸(-)-二異丙酯(64.64mL,245.60mmol)和甲苯磺酸吡啶(2.24g,8.93mmol)在100mL苯酯中的溶液加熱至95℃,蒸餾除去溶劑并生成EtOH。95℃下7小時(shí)后,將該反應(yīng)冷卻至室溫且真空濃縮。通過正相色譜純化(10->30% EtOAc/己烷)得到35.37g(55%)的(4S,5S)-2-[(1E)-丙-1-烯基]-1,3-二氧雜環(huán)戊烷-4,5-二羧酸二異丙酯的橙色油。1H NMR(CDCl3,400MHz)6.03(m,1H);5.86(m,2H);5.12(m,2H);4.71(d,J=3.84Hz,1H);4.63(d,J=3.84Hz,1H);1.78(m,3H);1.30(d,J=6.23Hz,12H);LC/MS[M+H]+=287。
步驟C.(4S,5S)-2-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]-1,3-二氧雜環(huán)戊烷-4,5-二羧酸二異丙酯向中間體(4S,5S)-2-[(1E)-丙-1-烯基]-1,3-二氧雜環(huán)戊烷-4,5-二異丙酯(4.10g,14.32mmol)在60mL己烷中的20℃溶液內(nèi)加入1M存在于己烷中的二乙基鋅(42.96mL,42.96mmol)。滴加二碘甲烷(6.92mL,85.92mmol)并劇烈攪拌。-20℃下1小時(shí)后,將該反應(yīng)在-5℃下冷凍。-5℃下17小時(shí)后,將該反應(yīng)在0℃下繼續(xù)攪拌5小時(shí)并且隨后用冷的飽和氯化銨溶液(100mL)中止并且用Et2O(100mL×3)萃取。合并的有機(jī)物用硫代硫酸鈉水溶液(100mL)和鹽水(100mL)洗滌,過濾,用Na2SO4干燥,再次過濾和真空濃縮。通過正相色譜純化(10->30%EtOAc/己烷)得到3.85g(89%)(4S,5S)-2-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]-1,3-二氧雜環(huán)戊烷-4,5-二羧酸二異丙酯,其為黃色油。1H NMR(CDCl3,400MHz)5.12(m,2H);4.78(d,J=6.41Hz,1H);4.66(d,J=4.21Hz,1H);4.57(d,J=4.22Hz,1H);1.30(m,12H);1.09(d,J=5.68Hz,3H);0.94(m,2H);0.67(m,1H);0.39(m,1H);LC/MS[M+H]+=301。
步驟D.2-甲基-N-{(1E)-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]亞甲基)丙-2-亞磺酰亞胺向(4S,5S)-2-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基l-1,3-二氧雜環(huán)戊烷-4,5-二羧酸二異丙酯(0.450g,1.50mmol)在5mL CH2Cl2/200μL H2O中的溶液內(nèi)加入對(duì)甲苯磺酸(0.071g,0.38mmol)。將該反應(yīng)在50℃下加熱回流。,50℃下16小時(shí)后,該反應(yīng)冷卻至室溫。除去在該反應(yīng)頂部生成的水滴。加入硫酸亞銅(II)(0.507g,2.85mmol)和R-(+)-叔丁基亞硫酰胺(0.173g,1.43mmol)。室溫下5.5小時(shí)后,該反應(yīng)經(jīng)硅藻土墊過濾。該硅藻土用CH2Cl2(200mL)洗滌并且該濾液真空濃縮。通過正相色譜純化(0->50%EtOAc/己烷)生成0.245g(92%)的2-甲基-N-{(1E)-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]亞甲基)丙-2-亞硫酰胺的澄清無色殘余物。1H NMR(CDCl3,400MHz)7.46(d,J=7.69Hz,1H);1.62(m,1H);1.25(m,2H);1.10(m,12H);0.82(m,1H);LC/MS[M+H]+=188。
步驟E.2-甲基-N-{(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}丙-2-亞硫酰胺向2-甲基-N-{(1E)-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]亞甲基}丙-2-亞硫酰胺(0.300g,1.60mmol)在5mL CH2Cl2中的-78℃溶液內(nèi)加入3M存在于Et2O中的甲基溴化鎂(1.07mL,3.20mmol)。-78℃ 2小時(shí)后,該反應(yīng)升至室溫。室溫下1小時(shí)后,該反應(yīng)用飽和氯化銨溶液(15mL)中止并且用EtOAc(30mL×2)萃取。合并的有機(jī)物用鹽水洗滌(15mL),用Na2SO4干燥,過濾和真空濃縮。通過正相色譜純化(0->80% EtOAc/己烷)生成0.224g(69%)的甲基-N-{(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}丙-2-亞硫酰胺的澄清無色殘余物。1H NMR(CDCl3,400MHz)2.77(m,1H);1.31(d,J=6.50Hz,3H);1.21(s,9H);1.03(d,J=5.77Hz,3H);0.54(m,3H);0.30(m,1H);LC/MS[M+H]+=204。
步驟F.(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙烷氯化銨向2-甲基-N-{(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}丙-2-亞硫酰胺(0.210g,1.03mmol)在4mL MeOH中的0℃溶液內(nèi)加入2M含在Et2O中的HCl(0.52mL,1.03mmol)。將該反應(yīng)在0℃下攪拌18小時(shí)并且隨后真空濃縮。所得材料溶于Et2O(4mL)和真空濃縮2次得到(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙烷氯化銨的白色固體。1H NMR(CDCl3,400MHz)2.60(m,1H);1.37(d,J=6.59Hz,3H);1.08(d,J=6.04Hz,3H);0.77(m,1H);0.64(m,2H);0.42(m,1H);LC/MS[M+H]+=100。
中間體Q{(1R)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}胺
采用中間體P所述的方法并且改進(jìn)步驟D中的S-(+)-叔丁烷亞硫酰亞胺來制備。LC/MS[M+H]+=100。
中間體R{(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]丙基}胺 采用中間體P所述的方案,并且改進(jìn)步驟E所用的乙基溴化鎂。LC/MS[M+H]+=114。
中間體S(1S)-2-甲基-1-((1S,25)-2-甲基環(huán)丙基)丙-1-胺 由中間體P所述的方案,并且改進(jìn)步驟E所用的異丙基溴化鎂來制備。LC/MS[M+H]+=128。
中間體T(2-叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧基}(2-甲基環(huán)丙基)-甲基]胺 由(叔丁基(二甲基)甲硅烷氧基)乙胺、利用類似于中間體B所述的方法制備。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ3.74(t,J=5.3Hz,2H),2.76(m,2H),2.52(m,2H),1.04(d,J=6.0Hz,3H),0.90(s,9H),0.68(m,1H),0.55(m,1H),0.29(m,1H),0.24(m,1H),0.07(s,6H)。
中間體a2-{(2,2-二氟乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基)-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酸
由中間體K利用類似于中間體C所述的方法制備。LCMS[M+H]+=378.3。
中間體b2-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酸 由中間體N利用類似于中間體C所述的方法制備。LCMS[M+H]+=372.3。
中間體c2-{(2,2-二氟乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(異丙基磺?;?(甲基)氨基]異煙酸 由中間體K和(異丙基磺?;?甲基胺利用類似于中間體C所述的方法制備。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.09(s,1H),7.01(s,1H),6.08(td,J=56.4,4.2Hz,1H),3.93(m,2H),3.46(m,1H),3.44(s,3H),3.32(dd,J=15.0,6.6Hz,1H),1.41(d,J=6.8Hz,6H),1.06(d,J=5.7Hz,3H),0.74(m,2H),0.45(m,1H),0.35(m,1H)。LCMS[M+H]+=406.5。
中間體d2-{(2-氟乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(異丙基磺酰基)(甲基)氨基]異煙酸 由中間體M和(異丙基磺?;?甲基胺利用類似于中間體C的方法制備。LCMS[M+H]+=388.0。
中間體2-[(異丙基磺?;?(甲基)氨基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基)異煙酸 由中間體N和(異丙基磺?;?甲基胺利用類似于中間體C所述的方法制備。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.01(s,1H),6.98(s,1H),3.99(m,1H),3.75(m,1H),3.59(m,1H),3.47(m,1H),3.44(s,3H),3.36(s,3H),3.34(m,1H),1.40(d,J=3.3Hz,6H),1.05(d,J=5.8Hz,3H),0.74(m,2H),0.43(m,1H),0.29(m,1H)。LCMS[M+H]+=400.5。
中間體f2-{[2-(二甲基氨基)乙基][(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(異丙基磺?;?(甲基)氨基]異煙酸 由中間體O和(異丙基磺酰基)甲基胺利用類似于中間體C所述的方式制備。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.95(s,1H),6.85(s,1H),4.00(m,2H),3.88(m,1H),3.44(m,2H),3.43(s,3H),3.34(d,J=5.9Hz,2H),2.95(bs,6H),1.38(d,J=7.0Hz,6H),1.03(d,J=5.7Hz,3H),0.70(m,2H),0.45(m,1H),0.31(m,1H)。LCMS[M+H]+=413.3。
中間體g2-{[3-(二甲基氨基)丙基][(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(異丙基磺?;?(甲基)氨基]異煙酸 由中間體L和(異丙基磺?;?甲基胺利用類似于制備中間體C所述的方法制備。LCMS[M+H]+=427.4。
中間體h[1-(5-{2-氯-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基}-1,3,4-二唑-2-基)-1R-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯(路線方案8)
步驟A.偶聯(lián)向2-氯-6-[甲基(甲基磺?;?氨基)異煙酸(0.200g,0.76mmol)在3mL DMF中的溶液內(nèi)加入三乙胺(0.13mL,0.91mmol),中間體I(0.222g,0.76mmol),HOAt(0.123g,0.91mmol)和EDC(0.174g,0.91mmol)。室溫下17小時(shí)后,該反應(yīng)用EtOAc稀釋(60mL),用飽和碳酸氫鈉溶液(30mL)和鹽水(30mL)洗滌,用Na2SO4干燥,過濾和真空濃縮。通過正相色譜純化(20->80% EtOAc/己烷)得到0.544g(99%)的酰基酰肼的澄清無色殘余物。NMR(CDCl3,400MHz)7.71(s,1H);7.53(s,1H);7.29(m,3H);7.15(d,J=6.59Hz,2H);3.50(d,J=13.55Hz,1H);3.42(s,3H);3.11(s,3H);3.05(d,J=13.73Hz,1H);1.47(s,9H);1.43(s,3H);LC/MS[M-C4H7]+=484。
步驟B.環(huán)化脫水向步驟A的?;k?0.550g,1.02mmol)在5mL DCE中的溶液內(nèi)加入Burgess試劑(0.971g,4.07mmol)。該反應(yīng)在120℃微波處理10分鐘并且直接通過正相色譜純化(0->50% EtOAc/己烷)得到(1R)-1-(5-{2-氯-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]吡啶-4-基}-1,3,4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯,其為白色泡沫。NMR(CDCl3,400MHz)7.89(s,1H);7.72(s,1H);7.29(m,3H);7.08(m,2H);3.60(d,J=13.55Hz,1H);3.46(s,3H);3.38(d,J=13.55Hz,1H);3.15(s,3H);3.15(s,3H);1.70(s,3H);1.42(s,9H);[M+H]+=522。
中間體i.{1-[5-(2-氯-6-{甲基(2-甲基環(huán)丙基)甲基}氨基吡啶-4-)基)-1,3,4-二唑-2-基]-1R-甲基-2-苯基乙基}氨基甲酸叔丁酯
步驟A親核性胺化將2,6-二氯異煙酸(0.25g,1.3mmol),甲基-[(甲基環(huán)丙基)甲基]鹽酸胺(0.53g,3.9mmol)和碳酸銫(1.25g,6.5mmol)在5mL DMF中的溶液內(nèi)在120℃下密封管中加熱72小時(shí)。該反應(yīng)在1M HCl和乙酸乙酯之間分配。該有機(jī)物用水(4x)、鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥,過濾和真空蒸發(fā)得到0.3g(90%)的粗2-氯-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙酸的核酸油LCMS(M+H)=255.0。
步驟B偶聯(lián)2-氯-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙酸(0.33g,1.3mmol)、N-(叔丁氧基羰基)-D-α-甲基苯基丙氨酸亞肼代酰胺(alaninhydrazamid)(0.38g,1.3mmol)和二異丙基乙胺(0.17g,1.3mmol)在10mL二氯甲烷中的溶液用BOP(0.57g,1.3mmol)處理。室溫下攪拌1小時(shí)后將該反應(yīng)用附加的亞肼代酰胺(0.19g,0.65mmol)和BOP(0.29g,0.65mmol)。1小時(shí)后,該反應(yīng)真空蒸發(fā)并且通過反相LC純化得到0.224g(33%)的{1-芐基-2-氧代-2-[2-(2-氯-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙?;?肼基]-1R-甲基乙基}氨基酸叔丁酯的橙色固體LCMS(M+H)=530.3。
步驟C環(huán)化脫水將1-芐基-2-氧代-2-[2-(2-氯-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基)異煙酰基)肼基]-1R-甲基乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.22g,0.42mmol)在2mLTHF中的溶液用Burgess試劑(0.22g,0.93mmol)處理。將該反應(yīng)密封并且在微波反應(yīng)器內(nèi)加熱至130℃達(dá)5分鐘。加入附加2當(dāng)量的Burgess試劑并且將該容器再次密封和重新加熱5分鐘。將該反應(yīng)真空蒸發(fā)和通過快速柱色譜純化(25-40%乙酸乙酯∶己烷)得到{1-[5-(2-氯-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-4-基)-1,3,4-二唑-2-基]-1R-甲基-2-苯基乙基}氨基丁酸叔丁酯,其為黃色油1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.28(m,3H),7.06(m,2H),7.00(s,2H),3.57(m,2H),3.39(m,2H),3.15(s,3H),1.73(s,3H),1.56(s,9H),1.05(d,J=5.7Hz,3H),0.72(m,2H),0.45(m,1H),0.29(m,1H)。LCMS(M+H)=512.2。
中間體k1-(2-{2-氯-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]吡啶-4-基}-1,3-唑-5-基)-1R-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯 步驟A.偶聯(lián)向2-氯-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酸(1.80g,6.79mmol)在10mL DMF中的溶液內(nèi)加入三乙胺(1.14mL,8.15mmol),中間體IV(2.00g,8,15mmol),HOAt(1.11g,8.15mmol)和EDC(1.56g,8.15mmol)。室溫下3.5小時(shí)后,該反應(yīng)用w/EtOAc(100mL)稀釋,用飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)和鹽水(50mL)洗滌,用Na2SO4干燥,過濾和真空濃縮。通過正相色譜純化(0->70% EtOAc/己烷和0-7%MeOH/CH2Cl2)生成3.18g(87%)的(1R)-1-芐基-3-({2-氯-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酰基}氨基)-2-羥基-1-甲基丙基氨基甲酸叔丁酯的白色固體。NMR(CDCl3,400MHz)7.66(d,J=2.58Hz,1H);7.50(d,J=4.58Hz,1H);7.31(m,3H);7.18(m,2H);4.05(m,1H);3.84(m,1H);3.59(m,1H);3.43(s,3H);3.23(d,J=13.92Hz,1H);3.09(s,3H);2.68(d,J=13.55Hz,1H);1.45(s,9H);1.21(s,3H);LC/MS[M+H]+=541。
步驟B.氧化向(1R)-1-芐基-3-({2-氯-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]異煙?;鶀氨基)-2-羥基-1-甲基丙基氨基甲酸叔丁酯(0.400g,0.74mmol)在8mLCH2Cl2/4mL DMSO中的-20℃溶液內(nèi)加入三乙胺(0.41mL,2.96mmol)。5分鐘后,將吡啶三氧化硫(0.471g,2.96mmol)在3mL DMSO中的溶液經(jīng)導(dǎo)管加入。室溫下16小時(shí)后,該反應(yīng)用鹽水(10mL)中止并用Et2O(15mL)萃取。水層再次用Et2O(10mL×2)萃取。合并的有機(jī)物用10%亞硫酸氫鈉(10mL)和鹽水(10mL)洗滌,用Na2SO4干燥,過濾和真空濃縮。通過正相色譜純化(20->70% EtOAc/己烷)得到0.335g(84%)的(1R)-1-芐基-3-({2-氯-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]異煙?;鶀氨基)-1-甲基-2-氧代丙基氨基甲酸叔丁酯的白色固體。NMR(CDCl3,400MHz)7.69(d,J=1.01Hz,1H);7.51(d,J=0.92Hz,1H);7.31(m,3H);7.12(m,2H);4.62(m,1H);4.41(m,1H);3.44(s,3H);3.11(s,3H);1.48(s,9H);1.31(s,3H);LC/MS[M-C4H7]+=483。
步驟C.環(huán)化脫水向(1R)-1-芐基-3-({2-氯-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酰基}氨基)-1-甲基-2-氧代丙基氨基甲酸叔丁酯(0.190g,0.35mmol)在2mL甲苯中的溶液內(nèi)加入Burgess試劑(0.504g,2.12mmol)。該反應(yīng)在130℃下微波處理30分鐘。將該反應(yīng)混合物的澄清黃色上層真空濃縮并通過正相色譜純化(0->50% EtOAc/己烷)得到(1R)-1-(2-{2-氯-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]吡啶-4-基}-1,3-唑-5-基)-1-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯。NMR(CDCl3,400MHz)7.86(s,1H);7.69(s,1H);7.28(m,3H);7.04(m,3H);3.45(s,3H);3.13(m,4H);1.60(s,3H);1.42(s,9H);LC/MS[M+H]+=521。
中間體lN-(4-(肼基羰基)-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基I氨基{吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
步驟A;偶聯(lián)向中間體D(1.95g,5.96mmol)和Boc-肼(0.866g,6.55mmol)在25mLDMF中的溶液內(nèi)加入EDC(1.37g,7.15mmol)和HOAt(0.080g,0.596mmol)。令該反應(yīng)進(jìn)行15小時(shí),隨后加入3M LiCl中止并且用EtOAc稀釋。分離各層,水層用EtOAc(2x)洗滌。合并的有機(jī)物用3MLiCI(2x)和鹽水洗滌,用Na2SO4干燥,過濾和濃縮。該殘余物通過正相色譜純化(15->65% EtOAc/己烷)得到所需偶聯(lián)加合物,其為白色泡沫。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.17(br s,1H),6.74(s,1H),6.70(s,1H),6.23(br s,1H),3.50(dd,J=14.5,6.4Hz,1H),3.33(s,3H),3.30(dd,J=14.5,8.3Hz,1H),3.08(s,3H),3.06(s,3H),1.48(s,9H),1.00(d,J=5.9Hz,3H),0.74-0.60(m,2H),0.37(m,1H),0.23(m,1H);LCMS[M+H]+=442。
步驟B;脫保護(hù)0℃下將HCl吹入步驟A的產(chǎn)物(2.50g,5.662mmol)在100mLCH2Cl2中的溶液內(nèi)達(dá)10分鐘。該溶液變化亮黃色。該反應(yīng)升至室溫達(dá)30分鐘,隨后濃縮得到黃色固體,其無需進(jìn)一步純化即可使用。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ7.55(s,1H),7.35(s,1H),3.44(m,2H),3.34(s,3H),3.22(s,3H),3.15(s,3H),0.92(d,J=5.8Hz,3H),0.72(m,1H),0.63(m,1H),0.40(m,1H),0.23(m,1H);LCMS[M+H]+=342。
中間體mN-{4-(5-{(1-((二苯基亞甲基)氨基)乙基)-1,3,4-二唑-2-基)-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺 向N-(4-[5-(1-氨基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-I甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.544g,1.26mmol,實(shí)施例22)在10mL CH2Cl2中的溶液內(nèi)加入二苯酮亞胺(0.25mL,1.51mmol)。在反應(yīng)過程中逐漸生成白色沉淀。當(dāng)加入另一等份的二苯酮亞胺(0.160mL,0.894mmol)時(shí),令該反應(yīng)進(jìn)行15小時(shí)。24小時(shí)后,該反應(yīng)用H2O和EtOAc稀釋,分離各層。水層用EtOAc(2x)洗滌,合并的有機(jī)物用鹽水洗滌,用Na2SO4干燥,過濾和濃縮。該殘余物通過正相色譜純化(2->35% EtOAc/己烷)得到N-(4-(5-{1-[(二苯基亞甲基)氨基]乙基}-1,3,4-二唑-2-基)-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的黃色泡沫。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.63(m,4H),7.54-7.50(m,4H),7.48(m,2H),7.05(s,1H),6.99(s,1H),4.95(q,J=6.5Hz,1H),3.52(dd,J=14.3,6.2Hz,1H),3.38(s,3H),3.34(dd,J=14.3,6.3Hz,1H),3.14(s,3H),3.12(s,3H),1.67(d,J=6.6Hz,3H),1.01(d,J=6.0Hz,3H),0.74(m,1H),0.65(m,1H),0.40(m,1H),0.25(m,1H);LCMS[M+H]+=559。
中間體n((2E)-1-芐基-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]吡啶-4-基}-1-甲基-4-氧代丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(路線方案24) 步驟AWeinreb酰胺的制備向中間體C(1.0g,2.23mmol)在10mL二氯甲烷中的溶液內(nèi)加入N,O二甲基羥胺鹽酸鹽(226mg,2.32mmol),二異丙基乙胺(574L,3.48mmol),EDC(577mg,3.01mmol),和HOAt(347mg,2.55mmol)。所得溶液在室溫下攪拌16小時(shí),隨后傾至0.3N HCl(20mL)和用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并的有機(jī)物用碳酸氫鈉水溶液(75mL)洗滌,隨后用鹽水(75mL)洗滌并用硫酸鈉干燥和濃縮。通過自動(dòng)快速色譜純化(硅膠盒,0-100%乙酸乙酯/己烷約20分鐘)得到2-{芐基[(2甲基環(huán)丙基)甲基]氨基-6-[(異丙基磺?;?(甲基)氨基]-N-甲氧基-N甲基異煙酰胺,其為黃色油。LCMS[M+H]=475.1。
步驟B甲基酮的制備向步驟A的2-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(異丙基磺?;?(甲基)氨基]-N-甲氧基-N-甲基異煙酰胺(860mg,1.81mmol)在6mL干燥THF中的-78℃溶液內(nèi)加入甲基溴化鎂(3.62mL,10.8mmol,3M溶液在二乙基醚中)。令反應(yīng)混和物在1小時(shí)內(nèi)緩慢升至0℃,此時(shí)將其傾至20mL的飽和氯化銨上并用乙酸乙酯萃取(3×30mL)。合并的有機(jī)物用鹽水洗滌(30mL),用硫酸鈉干燥,和濃縮。通過自動(dòng)快速色譜純化(硅膠盒,0-100%乙酸乙酯/己烷約35分鐘)得到N-(4-乙?;?6-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺的亮黃色固體。LCMS[M+H]=430.1。
步驟C羥醛縮回向步驟B的N-(4-乙?;?6-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺(100mg,0.23mmol)在1.5mL干燥THF中的-78℃溶液內(nèi)加入二(三甲基甲硅烷基)氨化鋰(244L,0.49mmol,2M的THF溶液),并且將所得混合物攪拌15分鐘。向此混合物加入(1R)-1-芐基-1-甲基-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(61mg,0.23mmol,按照制備中間體III至步驟C的方法制備)溶于1mL干燥THF。該溶液緩慢升至室溫并隨后繼續(xù)攪拌16小時(shí),此時(shí)用氯化銨的飽和溶液(15mL)中止并且用乙酸乙酯萃取(2×25mL)。合并的有機(jī)物用硫酸鈉干燥和濃縮。通過反相色譜純化得到(1R,2E)-1-芐基-4-{2-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(異丙基磺酰基)(甲基)氨基]吡啶-4-基)-1-甲基-4-氧代丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯,中間體n,其為橙色油。LCMS[M+H]=675.3。
實(shí)施例1N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-(芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案8)
步驟A偶聯(lián)向中間體C(100mg,0.25mmol)和中間體I(87mg,0.30mmol)在DMF(5mL)中的溶液內(nèi)加入HOAt(37mg,0.27mmol)和EDC(57mg,0.30mmol)。反應(yīng)混和物在室溫下攪拌2小時(shí),用N-(叔丁氧基羰基)-D-α-甲基苯基丙氨酸亞肼代酰胺(20mg,0.07mmol,中間體I)處理,室溫下攪拌1小時(shí),用EtOAc稀釋,用水、LiCl(x3)洗滌,用Na2SO4干燥,真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,10-50% EtOAc/己烷)得到[1R-芐基-2-氧代-1-甲基-2-(2-{2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]異煙?;鶀肼基)乙基]氨基甲酸叔丁酯的白色泡沫。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.35(br s,1H),8.64(br s,1H),7.38-7.14(m,10H),6.79(s,2H),4.88(AB的A,d,J=17.2Hz,1H),4.83(AB的B,d,J=17.2Hz,1H),4.66(s,1H),3.60-3.48(m,2H),3.36-3.24(m,1H),3.28(s,3H),3.07(AB的B,d,J=14.0Hz,1H),2.84(s,3H),1.50(s,9H),1.45(s,3H),0.98(d,J=6.0Hz,3H),0.86-0.76(m,1H),0.65-0.55(m,1H),0.39-0.31(m,1H),0.30-0.23(m,1H)。
步驟B環(huán)化脫氫和Boc脫除將[1R-芐基-2-氧代-1-甲基-2-(2-{2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙?;鶀肼基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(140mg,0.21mmol)和甲氧基羰基氨基磺?;?三乙基氫氧化銨(197mg,0.83mmol,Burgess試劑)在THF(5mL)中的溶液在微波(Smith合成器)和120℃下照射10分鐘,真空濃縮和通過快速色譜純化(硅膠,0-30%EtOAc/己烷)得到[1-(5-{2-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基}-1,3,4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯。用HCl(g)飽和的EtOAc溶液接觸0.5小時(shí)以脫除Boc,濃縮和由二烷/水冷凍干燥得到N-(4-[5-(1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的鹽酸鹽。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.33-7.18(m,8H),7.08-7.02(m,3H),6.94(d,J=2.8Hz,1H),4.98-4.82(m,2H),3.74-3.66(m,1H),3.48-3.36(m,1H),3.41(s,3H),3.34-3.26(m,2H),2.96(s,3H),1.82(s,3H),0.98(d,J=6.0Hz,3H),0.91-0.81(m,1H),0.73-0.62(m,1H),0.48-0.39(m,1H),0.29-0.19(m,1H)。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C30H36N6O3S561.2643,實(shí)測(cè)值561.2655。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例2N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-([(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺 將[1-(5-{2-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基}-1,3,4-二唑-2-基)-1R-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯(94mg,0.14mmol,得自實(shí)施例1)在EtOH(10mL)和TFA(0.011mL,0.14mmol)在中的溶液用20% Pd(OH)2/C(20mg)在40℃和1atm H2下氫化3小時(shí)。過濾和濃縮,隨后Boc脫除(HCl(g)飽和的EtOAc),濃縮和在Et2O中研制得到N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺鹽酸鹽的淺黃色固體。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.35-7.30(m,3H),7.11-7.05(m,2H),6.99(d,J=1.2Hz,1H),6.93(d,J=1.2Hz,1H),3.45(br s,2H),3.37(s,3H),3.28-3.20(m,2H),3.19(s,3H),1.82(s,3H),1.06(d,J=6.0Hz,3H),0.90-0.80(m,1H),0.73-0.65(m,1H),0.47-0.41(m,1H),0.31-0.24(m,1H)。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C23H30N6O3S471.2173,實(shí)測(cè)值471.2175。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例3N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺 由2-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]異煙酸和N-甲基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺采用類似于實(shí)施例1所述的方法制備。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C24H32N6O3S485.2330,實(shí)測(cè)值485.2355。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例4N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺 由2-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(異丙基磺?;?氨基]異煙酸(由甲基(異丙基磺?;?胺類似于制備中間體C的方法)和N-(叔丁氧基羰基)-D-α-甲基苯基丙氨酸亞肼代亞胺、采用類似于實(shí)施例1所述的方法制備。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C32H40N6O3S589.2955,實(shí)測(cè)值589.2920。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例5N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺 由實(shí)施例4采用類似于實(shí)施例2所述的方法制備。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C25H34N6O3S499.2486,實(shí)測(cè)值499.2499。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例6N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-((2,2-二氟乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案8)
由中間體P利用類似于實(shí)施例1所述的方法制備。HRMS[M+1]+計(jì)算值=535.2298,實(shí)測(cè)值=535.2288。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例7N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案8) 由中間體Q利用類似于實(shí)施例1所述方法制備。HRMS[M+1]+計(jì)算值=529.2592,實(shí)測(cè)值=529.2591。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例8N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{(2,2-二氟乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺(路線方案8)
由中間體R利用類似于實(shí)施例1所述方法制備。HRMS[M+1]+計(jì)算值=563.2611,實(shí)測(cè)值=562.2603。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例9N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{(2-氟乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺(路線方案8) 由中間體S利用類似于實(shí)施例1所述方法制備。HRMS[M+1]+計(jì)算值=545.2705,實(shí)測(cè)值=545.2727。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例10N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺(路線方案8)
由中間體T利用類似于實(shí)施例1的方式制備。HRMS[M+1]+計(jì)算值=557.2905,實(shí)測(cè)值=557.2900。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例11N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{[2-(二甲基氨基)乙基][(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺(路線方案8) 由中間體U利用類似于實(shí)施例1所述方法制備。LCMS[M+H]+=570.4。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例12N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-([3-(二甲基氨基)丙基][(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺(路線方案8)
由中間體V利用類似于實(shí)施例1所述方法制備。HRMS[M+1]+計(jì)算值=584.3378,實(shí)測(cè)值=584.3382。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例13N-[4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-({1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺(路線方案8,第2欄) 步驟A.Pd偶聯(lián)向(1S)-1-[(1S,25)-2-甲基環(huán)丙基]乙烷氯化銨(ethanaminiumchloride)(中間體P,0.045g,0.33mmol)和(1R)-1-(5-{2-氯-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基}-1,3,4-二唑-2-基)-1R-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯(中間體h,0.173g,0.33mmol)在1mL DMF中的溶液內(nèi)加入K3PO4(0.352g,1.66mmol)和Pd(PtBu3)2(0.025g,0.05mmol)。將密封的反應(yīng)在110℃下加熱12小時(shí)并且隨后用EtOAc稀釋(30mL)并經(jīng)硅藻土墊過濾。該硅藻土用EtOAc(100mL)洗滌。將濾液真空濃縮和通過正相色譜純化(0->50% EtOAc/己烷),隨后反相LC純化。所得材料用EtOAc稀釋(40mL)并用飽和碳酸氫鈉溶液(20mL)洗滌。水層再次用EtOAc(20mL)萃取。合并的有機(jī)物用鹽水洗滌(40mL),用Na2SO4干燥,過濾和真空濃縮得到0.030g(16%)的(1R)-1R-甲基-1-(5-{2-({(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}氨基)-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基}-1,3,4-二唑-2-基)-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯,其為黃色殘余物。NMR(CDCl3,400MHz)7.27(m,3H);7.03(m,3H);6.79(s,1H);3.55(d,J=13.46Hz,1H);3.43(m,2H);3.37(s,3H);3.15(s,3H);1.71(s,3H);1.42(s,9H);1.29(d,J=6.41Hz,3H);1.07(d,J=5.77Hz,3H);0.67(m,2H);0.50(m,1H);0.26(m,1H);LC/MS[M+H]+=585。
步驟B.Boc脫除將HCl(g)吹入(1R)-1-甲基-1-(5-{2-({(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}氨基)-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基}-1,3,4-二唑-2-基)-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯(0.030g,0.05mmol)在1mL CH2Cl2中的0℃溶液達(dá)5分鐘。0℃下10分鐘后,將該反應(yīng)真空濃縮并溶于DMF。通過反相LC純化,隨后冷凍干燥生成0.008g(27%)的(2R)-2-(5-{2-({(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}氨基)-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]吡啶-4-基-1,3,4-二唑-2-基)-1-苯基丙-2-三氟乙酸銨的白色固體。NMR(CDCl3,400MHz)7.31(m,3H);7.05(m,2H);6.91(d,J=1.1Hz,1H);6.84(d,J=1.1Hz,1H);3.55(m,1H);3.40(s,2H);3.16(s,3H);1.83(s,3H);1.28(d,J=6.4Hz,3H);1.06(d,J=5.7Hz,3H);0.67(m,2H);0.53(m,1H);0.21(m,1H);LC/MS[M+H]+=485。
其中X是二唑的另外化合物按照表1所述的制備。有關(guān)方法A和B分別參考路線方案8的方法A和路線方案8的方法B。
表I-二唑?qū)嵤├?
實(shí)施例39N-(4-[2-(1R-氨基-I-甲基-2-苯基乙基)-1,3-唑-5-基]-6-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案16) 將中間體E(100mg,0.25mmol)和中間體II(103mg,0.37mmol)在DMF(0.5mL)中的溶液在120℃下加熱1小時(shí)。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化(5->95%CH3CN/H2O,加入0.1% TFA,C18 PRO YMC 20×150mm)得到[1R-甲基-1-(4-{2-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基}-1,3-唑-2-基)-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯。Boc脫除(HCl(g)飽和的EtOAc),濃縮和通過制備HPLC純化(5->95% CH3CN/H2O,加入0.1% TFA,C18 PRO YMC 20×150mm)得到N-(4-[2-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3-唑-5-基]-6-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的TFA鹽。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ8.58(s,1H),7.32-7.26(m,3H),7.02-6.96(m,2H),6.92(d,J=0.8Hz,1H),6.84(d,J=0.8Hz,1H),3.62-3.53(m,1H),3.43-3.26(m,3H),3.33(s,3H),3.14(s,3H),3.11(s,3H),1.81(s,3H),1.03(d,J=6.0Hz,3H),0.81-0.66(m,2H),0.48-0.41(m,1H),0.27-0.21(m,1H)。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C25H33N5O3S484.2377,實(shí)測(cè)值484.2400。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例40N-(4-[2-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3-唑-5-基]-6-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案14) 將中間體G(25mg,0.04mmol)和Burgess試劑(40mg,0.17mmol)在THF(0.5mL)中的溶液在微波(Smith合成器)和80℃下照射25分鐘,在N2下濃縮并且通過快速色譜純化(硅膠,0-40% EtOAc/己烷)。用HCl脫除Boc(1mL,4mmol,4M在二烷中),隨后冷凍干燥得到N-(4-[2-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3-唑-5-基]-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的TFA鹽。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.84(s,1H),7.32-7.26(m,3H),7.04-6.97(m,2H),6.92(s,1H),6.81(s,1H),3.70-3.57(m,1H),3.50-3.36(m,1H),3.42(s,2H),3.38(s,3H),3.18(s,6H),1.84(s,3H),1.04(d,J=6.0Hz,3H),0.84-0.706(m,2H),0.54-0.44(m,1H),0.34-0.26(m,1H)。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C25H33N5O3S484.2377,實(shí)測(cè)值484.2390。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例41N-(4-[2-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3-噻唑-5-基]-6-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案14)
將中間體G(50mg,0.08mmol)和Lawson′s試劑(134mg,0.33mmol)在乙腈(0.8mL)中的溶液內(nèi)在微波(Smith合成器)85℃下照射15分鐘并在90℃下照射15分鐘(Boc也可以利用相同反應(yīng)脫除),在N2流下濃縮和通過制備HPLC純化(5->95% CH3CN/H2O,加入0.1% TFA,C18PRO YMC 20×150mm)得到N-(4-[2-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3-噻唑-5-基]-6-(甲基[(2甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的TFA鹽。MS(ES,M+H)500。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例42N-(4-[2-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3-咪唑-5-基]-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案14) 將中間體G(50mg,0.08mmol)和乙酸銨(64mg,0.83mmol)的混合物在150℃下熔化15分鐘(損失部分Boc)。令反應(yīng)混和物冷卻至室溫,用飽和NaHCO3稀釋,用EtOAc(x3)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌,用Na2SO4干燥和真空濃縮。用在DCM上的TFA(5mL,10% TFA在DCM中)脫除Boc,真空濃縮,通過制備HPLC純化(5->95% CH3CN/H2O,加入0.1%TFA,C18 PRO YMC 20×150mm)和冷凍干燥得到N-(4-[2-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3-咪唑-5-基]-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的TFA鹽。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.76(s,1H),7.29-7.21(m,3H),7.06(s,2H),6.92-6.86(m,2H),3.66-3.56(m,1H),3.48-3.35(m,1H),3.41(AB的A,d,J=13.6Hz,1H),3.34(s,3H),3.26(AB的B,d,J=13.6Hz,1H),3.18(s,3H),3.16(s,3H),1.74(s,3H),1.04(d,J=5.7Hz,3H),0.85-0.70(m,2H),0.51-0.45(m,1H),0.31-0.25(m,1H)。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C25H34N6O2S483.2537,實(shí)測(cè)值483.2548。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例43N-(4-[5-(1R-氨基-I-甲基-2-苯基乙基)-1,3-唑-2-基]-6-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)N-甲基甲磺酰胺(路線方案17) 實(shí)施例43是由中間體H采用類似于實(shí)施例7的制備所述的方法制成。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.32-7.26(m,3H),7.22(s,1H),7.14(s,1H),7.06-6.99(m,3H),3.62(ABX的A,dd,J=14.4,6.2Hz,1H),3.45(AB的A,d,J=13.7Hz,1H),3.43(ABX的B,dd,J=14.4,2.3Hz,1H),3.39(s,3H),3.26(AB的B,d,J=13.7Hz,1H),3.18(s,3H),3.16(s,3H),1.73(s,3H),1.04(d,J=6.2Hz,3H),0.86-0.70(m,2H),0.52-0.44(m,1H),0.30-0.24(m,1H)。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C25H33N5O3S484.2377,實(shí)測(cè)值484.2374。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例44N[4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3-唑-2-基]-6-({1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基)氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺 步驟A.Pd偶聯(lián)向(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙烷氯化銨(中間體P,0.039g,0.29mmol)和(1R)-1-(2-(2-氯-6-[甲基(甲基磺酰基)氨基]吡啶-4-基)-1,3-唑-5-基)-1-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯(中間體k,0.050g,0.10mmol)在1mL DMF中的溶液內(nèi)加入K3PO4(0.122g,0.58mmol)和Pd(PtBu3)2(0.007g,0.01mmol)。室溫下16小時(shí)后,將密封反應(yīng)在110℃下加熱8.5小時(shí)并且隨后經(jīng)硅藻土墊過濾。將該硅藻土用EtOAc(60mL)洗滌。將濾液真空濃縮并且將所得殘余物溶于DMF并且通過反相LC純化。所得物質(zhì)用EtOAc稀釋(40mL)并且用飽和碳酸氫鈉溶液(20mL)洗滌。水層再次用EtOAc(20mL)萃取。合并的有機(jī)物用鹽水洗滌(20mL),用Na2SO4干燥,過濾和真空濃縮得到0.028g(50%)的(1R)-1-甲基-1-(2-{2-({(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}氨基)-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基}-1,3-唑-5-基)-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯,其為黃色殘余物。(CDCl3,400MHz)7.28(m 3H);7.06(d,J=0.91Hz,1H);7.03(m,2H);6.93(s,1H);6.76(s,1H);3.50(m,1H);3.36(m,4H);14(m,4H);1.60(s,3H);1.42(s,9H);LC/MS[M+H]+=584。
步驟B.Boc脫除將HCl(g)吹入(1R)-1-甲基-1-(2-{2-({(1S)-1-[(1S,2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}氨基)-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基}-1,3-唑-5-基)-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯(0.028g,0.05mmol)在1mL CH2Cl2中的0℃溶液內(nèi)達(dá)5分鐘。0℃下10分鐘,將該反應(yīng)真空濃縮并且溶于DMF。通過反相LC純化,隨后冷凍干燥得到(2R)-2-(2-(2-(((1S)-1-[(1S,25)-2-甲基環(huán)丙基]乙基)氨基)-6-[甲基(甲基磺?;?氨基]吡啶-4-基}-1,3-唑-5-基)-1-苯基丙烷-2-銨的白色固體。(CDCl3,400MHz)7.27(m,3H);7.19(s,1H);7.01(m,3H);6.89(d,J=0.92Hz,1H);3.53(m,1H);3.45(d,J=13.37Hz,1H);3.33(s,3H);3.24d,J=13.55Hz,1H);3.14(s,3H);1.71(s,3H);1.27(d,J=6.41Hz,3H);1.94(d,J=5.67Hz,3H);0.66(m,2H);0.53(m,1H);0.20(m,1H);LC/MS[M+H]+=484。
其他唑衍生物按照下表3所述制備。
表3-唑衍生物 實(shí)施例49N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1,3-噻唑-2-基]-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案17)
實(shí)施例49是由中間體H,利用類似于實(shí)施例8的制備所述的方法制備。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.55(s,1H),7.26-7.20(m,3H),7.05-7.00(m,2H),6.99(d,J=1.2Hz,1H),6.90(d,J=1.2Hz,1H),3.59(ABX的A,dd,J=14.4,6.4Hz,1H),3.42(ABX的B,dd,J=14.4,6.8Hz,1H),3.37(s,3H),3.17(s,3H),3.15(s,3H),3.09(s,2H),1.60(s,3H),1.04(d,J=6.0Hz,3H),0.85-0.68(m,2H),0.50-0.42(m,1H),0.29-0.21(m,1H)。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C25H33N5O2S2500.2149,實(shí)測(cè)值500.2149。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例50N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-4H-1,2,4-三唑-3-基]-6-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案11) 將中間體I(17mg,0.06mmol)、中間體J(20mg,0.05mmol)和二異丙基乙胺(0.013mL,0.08mmol)在EtOH(1mL)中的溶液密封并在150℃下加熱2天。將反應(yīng)混和物真空濃縮并通過制備HPLC純化(5->95%CH3CN/H2O,加入的0.1%TFA,C18 PRO YMC 20×150mm)得到N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-4H-1,2,4-三唑-3-基]-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的TFA鹽。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ7.30-7.22(m,3H),7.13(s,1H),7.04(s,1H),7.02-6.96(m,2H),3.65-3.56(m,1H),3.48-3.42(m,1H),3.38(s,3H),3.36(s,2H),3.18(s,3H),3.17(s,3H),1.78(s,3H),1.04(d,J=6.0Hz,3H),0.86-0.70(m,2H),0.52-0.44(m,1H),0.30-0.23(m,1H)。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例51N-(4-[5-(1-氨基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(另一路線方案8) 步驟A偶聯(lián)向中間體1(0.610g,1.614mmol)和N-Boc-丙氨酸(0.336g,1.78mmol)在10mL DMF中的溶液內(nèi)加入Hunig氏堿(0.564mL,3.23mmol),EDC(0.371g,1.94mmol)和HOAt(0.025g,0.161mmol)。15小時(shí)后,該反應(yīng)用3M LiCl和EtOAc稀釋,分離各層。水層用EtOAc(2x)洗滌,合并的有機(jī)物用3M LiCl(2x)和鹽水洗滌,用Na2SO4干燥,過濾和濃縮。該殘余物通過正相色譜純化(35->90% EtOAc/己烷)得到所需偶聯(lián)加合物,其為黃色泡沫。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ9.11(br s,1H),8.97(br s,1H),8.00(s,1H),6.76(s,1H),6.69(s,1H),5.09(d,J=7.5Hz,1H),3.47(dd,J=14.5,6.2,1H),3.32(s,3H),3.29(dd,J=14.5,7.0Hz,1H),3.07(s,3H),2.93(s,3H),1.43(s,9H),1.41(d,J=7.5Hz,3H),1.00(d,J=5.7Hz,3H),0.68(m,1H),0.62(m,1H),0.36(m,1H),0.23(m,1H);LCMS[M+H]+=513。
步驟B脫水向步驟A的產(chǎn)物(0.763g,1.49mmol)在7mL 1,2-二氯乙烷中的溶液內(nèi)加入Burgess試劑(1.42g,5.95mmol)。該漿液在120℃下微波處理10分鐘,隨后直接傾至硅膠柱的頂部用于正相純化(10->55% EtOAc/己烷)。得到預(yù)期產(chǎn)物,其為黃色泡沫。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.01(s,1H),6.93(s,1H),5.12(m,1H),3.52(dd,J=14.5,6.3Hz,1H),3.38(s,3H),3.33(dd,J=14.5,7.0Hz,1H),3.15(s,3H),3.11(s,3H),1.63(d,J=6.8Hz,3H),1.44(s,9H),1.01(d,J=4.9Hz,3H),0.73(m,1H),0.67(m,1H),0.41(m,1H),0.26(m,1H);LCMS[M+H]+=495。
步驟C脫保護(hù)在0℃下將HCl吹入步驟B的產(chǎn)物(0.532g,1.08mmol)在15mLEtOAc中的溶液達(dá)5分鐘。將亮黃色溶液升至室溫1小時(shí),隨后濃縮得到N-(4-[5-(1-氨基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺,其為黃色泡沫,其無需進(jìn)一步純化即可使用。1H NMR(d4-MeOH,400MHz)87.15(s,1H),7.05(s,1H),4.95(q,J=7.0Hz,1H),3.61(dd,J=14.5,8.1Hz,1H),3.43(dd,J=14.5,6.9Hz,IH),3.38(s,3H),3.16(s,3H),3.15(s,3H),1.79(d,J=7.0Hz,3H),1.01(d,J=5.8Hz,3H),0.82-0.75(m,2H),0.47(m,1H),0.25(m,1H);LCMS[M+H]+=395。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例52N(4-[5-(1-氨基-1-甲基-2-吡啶-4-基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-{[(2甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(另一路線方案8)
N-(4-[5-(1-氨基-1-甲基-2-吡啶-4-基乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-([(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺是由中間體III和中間體I利用類似于實(shí)施例70所述的方法制備。1H NMR(d4-MeOH)δ8.77(d,J=6.0Hz,2H),7.78(d,J=64Hz,2H),6.96(d,J=l 1.7Hz,2H),3.78(app ABX,JAB,JAX,JBx=13.5Hz,2H),3.37(s,3H),3.24(d,J=6.8Hz,2H),3.16(s,3H),1.94(s,3H),1.06(d,J=6.0,3H),0.87-0.81(m,1H),0.72-0.66(m,1H),0.43(dt,J=8.7,4.6Hz,1H),0.26(dt,J=8.6,4.8Hz,1H)。HRMS(ES,M+H)計(jì)算值C22H29N7O3S472.2126,實(shí)測(cè)值472.2163。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
表IV-二唑衍生物
實(shí)施例87N-(4-[5-(1-氨基-1-甲基-2-(4-氟苯基)乙基)-1,3,4-二唑-2-基]-6-(甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(另一路線方案8,第2欄) 向中間體m(0.051g,0.091mmol)在0.80mL DMF中的溶液內(nèi)于0℃下加入1M含在THF中的NaHMDS(0.13mL,1.30mmol),該反應(yīng)變?yōu)樗{(lán)色。5分鐘后,用注射器加入4-氟芐基溴化物在DMF中的1M溶液(0.180mL,0.180mmol),當(dāng)加料完畢后,該反應(yīng)變?yōu)辄S色。30分鐘后,加入0.125mL H2O和0.025mL 1H HCl。1.5小時(shí)后,加入0.125mL 1N HCl,使該反應(yīng)進(jìn)行15小時(shí),隨后加載在SCX離子交換柱,用MeOH洗脫,隨后用含在MeOH中的2M NH3洗脫。由堿性餾分分離不純的所需產(chǎn)物,其進(jìn)一步通過制備HPLC純化(5->95% CH3CN/H2O,約30min,加入的0.1% TFA,C18 PRO YMC 20×150mm)冷凍干燥后得到N-(4-{5-[1-氨基-2-(4-氟苯基)-1-甲基乙基]-1,3,4-二唑-2-基}-6-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的絮狀黃色固體。1HNMR(d4-MeOH,400MHz)δ7.12-7.03(m,5H),6.91(s,1H),3.59(dd,J=14.8,6.2Hz,1H),3.43-3.39(m,3H),3.31(s,3H),3.16(s,3H),3.15(s,3H),1.84(s,3H),1.02(d,J=6.0Hz,3H),0.80-0.70(m,2H),0.46(m,1H),0.26(m,1H);高分辯質(zhì)譜(FT/ICR)計(jì)算值M+H=503.2235實(shí)測(cè)值503.2279。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
其他二唑衍生物按照下表5所述的方法制備。
表5-二唑衍生物 實(shí)施例91 步驟A將4-氨基2,6-二氯吡啶(2.0g,12.2mmol)懸浮在甲苯(50mL)中,向其中加入苯甲醛(6.24mL,30.7mmol)。該反應(yīng)加熱回流12小時(shí)并且用Dean-Stark設(shè)備收集水。隨后真空除去溶劑。該殘余物溶于乙醇(25mL)和加熱至50℃。滴加NaBH4(1.86g,61mmol)。該反應(yīng)隨后加熱75℃達(dá)2小時(shí)。真空除去溶劑,加入水(100mL)和將該溶液用EtOAc(3×100mL)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌(1×100mL),用MgSO4干燥,過濾,和濃縮。通過硅膠色譜純化(20%EtOAc/Hex)得到該芐基苯胺(2.93g,94%)。LCMS[M+H]=253。1H NMR(CDCl3)δ7.40-7.14(m,5H),6.46(s,2H),4.35(d,J=5.5Hz,2H)步驟B向步驟A的苯胺(0.079g,0.31mmol)中的溶液內(nèi)加入溴甲基環(huán)丙烷(0.05g,0.37mmol),隨后加入NaH(60%分散體,0.014g,0.37mmol)。該溶液在室溫下攪拌30分鐘,隨后用H2O中止。該溶液用EtOAc(3×30mL)萃取,此后合并的有機(jī)層用MgSO4干燥,過濾和濃縮。通過硅膠色譜純化(15% EtOAc/Hex)得到環(huán)丙基甲基苯胺(0.078g,81%)。
LCMS[M+H]=307.11H NMR(CDCl3)δ7.36-7.13(m,5H),6.51(s,2H),4.64(s,2H),3.29(d,J=6.6Hz,2H),1.08-1.6(m,1H),0.60-0.55(m,2H),0.24-0.21(m,2H)步驟C將步驟B的二氯吡啶(0.078g,0.25mmol),N-甲基甲基磺酰胺(0.033g,0.30mmol),K3PO4(0.075g,0.35mmol),和Xanphos(0.01g,0.17mmol)的二烷溶液(2mL)用吹入氬氣15分鐘來脫氣。加入Pd2(dba)3g,0.05mmol)并且將該溶液加熱至100℃達(dá)12小時(shí)。冷卻該溶液并用H2O(30mL)稀釋。該溶液用EtOAc(3×30mL)萃取和合并的有機(jī)層用MgSO4干燥,過濾,和濃縮。通過硅膠色譜純化(20% EtOAc/Hex)得到所需磺酰胺(0.034g,35%)。
LCMS[M+H]=380.31H NMR(CDCl3)δ7.35-7.19(m,3H),7.16(d,J=7.1Hz,2H),6.68(s,1H),6.46(s,1H),4.62(s,2H),3.31(d,J=6.5Hz,2H),3.29(s,3H),2.93(s,3H),1.12-1.08(m,1H),0.58-0.55(m,2H),0.24-.21(m,2H)。
步驟D向步驟C的磺酰胺在DMF(4mL)中的溶液內(nèi)加入氰化鋅(0.17g,1.45mmol),隨后加入Pd(PPh3)4(0.017g,0.15mmol)。將該溶液加熱至85℃達(dá)48小時(shí)。將反應(yīng)混和物用H2O(30mL)稀釋并且用EtOAc(3,×30mL)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌(1×50mL),用MgSO4干燥,過濾,濃縮。通過硅膠色譜純化(30% EtOAc/Hex)得到該氰基吡啶(0.27g,81%)。
LCMS[M+H]=371.11H NMR(CDCl3)δ7.36-7.26(m,3H),7.15(d,J=7.2Hz,2H),6.87(s,1H),6.82(s,1H),4.68(s,2H),3.36(d,J=6.5Hz,2H),3.30(s,3H),2.92(s,3H),1.12-1.09(m,1H),0.61(d,J=7.6Hz,2H),0.27(d,J=4.9Hz,2H)。
步驟E向步驟D的氰基吡啶(0.15g,0.41mmol)在9∶1EtOH/H2O(10mL)中的溶液內(nèi)加入固體KOH(0.26g,4.1mmol)。將該溶液加熱至85℃達(dá)16小時(shí)。冷卻該溶液,用1N HCl酸化,并且用EtOAc(3×30mL)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌(1×50mL),用MgSO4干燥,過濾和濃縮。該殘余物無需進(jìn)一步純化即可使用。向該羧酸在DCM(5mL)中的溶液內(nèi)加入肼基苯基丙氨酸(0.16g,0.59mmol),DIPEA(0.023g,1.78mmol)和BOP試劑(0.25g,0.59mmol)。該反應(yīng)在室溫下攪拌1小時(shí),隨后通過硅膠色譜純化(5%MeOH/氯仿)得到二酮基肼(0.30g,77%)LCMS[M+H]=665.11H NMR(CDCl3)δ7.41-7.16(m,11H),6.83(s,1H),4.72(s,2H),3.57(d,J=14Hz,1H),3.39(d,J=6.6Hz,2H),3.35(s,3H),3.10(d,J=14Hz,1H),2.91(s,3H),1.50(s,9H),1.45(s,3H),1.13-1.10(m,1H),0.59-0.55(m,2H),0.25(d,J=5.0Hz,2H)。
步驟F向步驟E的二酮基肼(0.30g,0.46mmol)的1,2-二氯乙烷溶液(3mL)內(nèi)加入burgess試劑(0.33g,1.4mmol)。將該溶液在120℃下微波處理8分鐘。通過硅膠色譜純化得到所需二唑(0.29g,62%)。
LCMS[M+H]=647.11H NMR(CDCl3)δ7.39-7.04(m,11H),6.75(s,1H),4.73(s,2H),3.54-3.48(m,2H),3.41(d,J=6.6Hz,2H),3.34(s,3H),3.03(s,3H),1.72(br s,3H),1.41(br s,9H),1.24-1.13(m,1H),0.60(q,J=7.9Hz,2H),0.26(q,J=5.3Hz,2H)。
步驟G向步驟F的二唑(0.027g,0.05mmol)的甲醇(5mL)溶液內(nèi)加入TFA(1.5mL),隨后加入催化量的Pd(OH)2。將該溶液經(jīng)氣球置于H2氣氛下達(dá)20分鐘。該溶液經(jīng)硅藻土過濾和真空濃縮得到完全脫保護(hù)的氨基吡啶。
LCMS[M+H]=457.11H NMR(CD3OD)δ7.31-7.21(m,3H),7.21(s,1H)。7.08(m,2H),6.69(s,1H),3.46(d,J=4.8Hz,2H),3.36(s,3H),3.17(s,3H),3.08(d,J=7.0Hz,2H),1.87(s,3H),1.14-1.08(m,1H),0.59(d,J=7.0Hz,2H),0.30(d,J=5.1Hz,2H)。
實(shí)施例92N-(4-(5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1H-吡唑-3-基)}-6-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺 向中間體n(62mg,0.09mmol)在0.5mL DMF中的溶液內(nèi)加入無水肼(14L,0.46mmol)。所得混合物在90℃下加熱回流18小時(shí)并且隨后冷卻至室溫。向其中加入2mL水和3mL乙酸乙酯。分離有機(jī)層,用鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥,和濃縮至干。通過反相色譜純化得到(1R)-1-(3-(2-(芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基)-6-[(異丙基磺?;?(甲基)氨基]吡啶-4-基}-1H-吡唑-5-基)-1-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯,將其溶于1mL含20% TFA的二氯甲烷中。1小時(shí)后,將該溶液濃縮得到標(biāo)題化合物,N-(4-(5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1H-吡唑-3-基)-6-(芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基)吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺。
1H NMR(400MHz,d4-MeOH)δ7.31-7.19(m,9H),7.01-6.99(m,2H),6.76(s,1H),6.71(s,1H),6.61(s,1H),4.96-4.76(m,2H),3.81-3.74(m,1H),3.69-3.63(m,1H)3.39(s,3H),3.35-3.22(m,4H),1.70(s,3H),1.14(d,J=6.8Hz,6H),0.94(d,J=6Hz,3H),0.87-0.84(m,1H),0.66-0.60(m,1H),0.42-0.38(m,1H),0.26-0.21(m,1H);LCMS[M+H]=587.2。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例93N-(4-(6-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]嘧啶-4-基}-6-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺 步驟A縮合將69mg(1.01mmol)乙醇鈉在1mL DMA中的混懸液滴加到81mg(1.01mmol)甲脒鹽酸鹽在1mL DMA中的溶液內(nèi),并且將該混和物劇烈攪拌5分鐘。將中間體n(68mg,0.10mmol)在1mL DMA中的溶液滴加到單一混合物中,將所得混合物加熱至110℃達(dá)30分鐘。隨后令其冷卻至室溫。加入水(10mL)且該混和物用乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有機(jī)物were washed with 3M aq.LiCI(3×25mL),用鹽水洗滌(25mL),用硫酸鈉干燥和濃縮。通過反相色譜純化得到(1R)-1-(6-{2-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(異丙基磺酰基)(甲基)氨基]吡啶-4-基}-3,4-二氫嘧啶-4-基)-1-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯,其為黃色油。LCMS[M+H]=701.3步驟B氧化和脫保護(hù)向上述步驟A的(1R)-1-(6-(2-(芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基)-6-[(異丙基磺?;?(甲基)氨基]吡啶-4-基}-3,4-二氫嘧啶-4-基)-1-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯(49mg,0.07mmol)在2mL甲苯中的溶液內(nèi)加入二氯二氰基醌(24mg,0.11mmol)。將所得溶液在120℃下加熱30分鐘,隨后冷卻至室溫并濃縮至干。通過反相色譜純化得到(1R)-1-(6-(2-(芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基)-6-[(異丙基磺?;?(甲基)氨基]吡啶-4-基}嘧啶-4-基)-1-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯,令其溶于1mL含20%TFA的二氯甲烷。令該混和物放置1小時(shí),濃縮得到該標(biāo)題化合物N-(4-{6-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]嘧啶-4-基}-6-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙-2-磺酰胺。1H NMR(400MHz,d4-MeOH)δ9.29(s,1H),7.66-7.65(m,1H),7.31-7.21(m,8H),7.02-7.01(m,2H),6.96-6.93(m,2H),4.98-4.60(m,2H),3.83-3.66(m,2H),3.38(s,3H),3.35-3.25(m,4H),1.81(s,3H),1.16(d,J=6.8Hz),0.96(dd,J=6Hz,J=1.8Hz,3H)0.90-0.82(m,1H),0.70-0.62(m,1H),0.45-0.40(m,1H),0.28-0.24(m,1H);LCMS[M+H]=599.1。
使用中間體A步驟B中的優(yōu)選對(duì)映異構(gòu)體反式-S,S從而制備優(yōu)選的對(duì)映純S,S,R實(shí)例。
實(shí)施例94N(2-(5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1,3,4-二唑-2-基}-6-[(環(huán)丙基甲基)(甲基)氨基]吡啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺 步驟A將在200mL吡啶中含有6.52g(40.0mmol)4-氨基-2,6-二氯吡啶的溶液用22.8g(200mmol)甲磺酰氯處理并在60℃下加熱72小時(shí)。冷卻反應(yīng)混和物并蒸發(fā)溶劑。所得殘余物再溶于200mL的二氯甲烷中并且用NaHCO3(50mL)、水(3×50mL)和鹽水(50mL)洗滌。有機(jī)相用MgSO4干燥,過濾,和濃縮。通過硅膠色譜純化(20% EtOAc/己烷)得到所需磺酰胺(5.30g,55%)和3.44g(27%)不期望的二磺酰胺。LCMS[M+H]=241.1
步驟B將在12.5g(176mmol)環(huán)丙基胺中含有步驟A的5.00g(20.7mmol)磺酰胺的溶液在125℃下在密封管內(nèi)加熱。72小時(shí)后,冷卻該反應(yīng)混合物并蒸發(fā)褐色殘余物,通過硅膠色譜純化(60% EtOAc/己烷)得到所需氨基吡啶(3.42g,60%)。LCMS[M+H]=276.1步驟C向在15mL DMF中含有1.00g(3.62mmol)步驟B的氨基吡啶和1.13g(7.98mmol)碘甲烷的0℃溶液內(nèi)加入191mg(7.98mmol)氫化鈉。將該溶液在室溫下攪拌月17小時(shí)并且用5mL水中止。將反應(yīng)混和物用100mL醚稀釋并用水(6×10mL)、隨后用鹽水(10mL)洗滌。有機(jī)相用MgSO4干燥,過濾和濃縮。通過硅膠色譜純化(30% EtOAc/Hex)得到該甲基化氨基吡啶(1.00g,91%)。LCMS[M+H]=304.1步驟D向在15mL DMF中含有1.00g(3.29mmol)步驟C的氯吡啶得到溶液內(nèi)加入氰化鋅(773mg,6.58mmol),隨后加入Pd(PPh3)4mg,0.658mmol)。該溶液在90℃下加熱24小時(shí),隨后使該反應(yīng)混合物冷卻并且用醚稀釋(100mL),隨后用H2O(6×10mL)洗滌。有機(jī)相用MgSO4干燥,過濾,和濃縮。通過硅膠色譜純化(30% EtOAc/Hex)得到所需氰基吡啶(2.66g,81%)。LCMS[M+H]=295.2步驟E向在9∶1 EtOH/H2O(10mL)中含有步驟D的氰基吡啶(150mg,0.51mmol)的溶液內(nèi)加入固體KOH(286mg,5.1mmol)。將該溶液加熱至85℃達(dá)16小時(shí)。冷卻反應(yīng)混和物,用3N HCl酸化,并且用EtOAc(3×30mL)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌(1×50mL),用MgSO4干燥,過濾和濃縮。殘余物無需進(jìn)一步純化即可使用。向該羧酸在DCM(5mL)中的溶液內(nèi)加入酰肼中間體I(140mg,0.48mmol),DIPEA(186mg,1.43mmol)和BOP試劑(212mg,0.48mmol)。該反應(yīng)在室溫下攪拌1小時(shí)并直接加載在硅膠柱(50%EtOAc/己烷)得到所需酰肼(150mg,53%)LCMS[M+H]=589.1步驟F向步驟E的酰肼(150mg,0.255mmol)的1,2-二氯乙烷溶液(3mL)內(nèi)加入Burgess試劑(182mg,0.764mmol)。將該溶液在140℃下微波處理8分鐘。通過硅膠色譜純化得到所需二唑(90mg,62%)。LCMS[M+H]=571.1 H NMR(CDCl3)δ7.29-7.19(m,5H),7.05(m,2H),6.79(s,1H),5.23(bs,1H),3.54-3.41(m,4H),3.38(s,3H),3.17(s,3H),2.92(s,3H),1.76(m,3H),1.41(br s,9H),1.24-1.13(m,1H),0.50(m,2H),0.26(m,2H)。
步驟G向步驟E的二唑(50mg,0.083mmol)的DCM(5mL)溶液內(nèi)加入TFA(1.5mL)。將該溶液攪拌30放置和濃縮。用醚研制得到50mg(100%)所需化合物,其為TFA鹽。LCMS[M+H]=471.11H NMR(CD3OD)δ7.41(s,1H),7.37-7.25(m,3H),7.05(m,2H),6.75(s,1H),3.54-3.41(m,4H),3.38(s,3H),3.17(s,3H),2.94(s,3H),1.86(m,3H),1.24-1.13(m,1H),0.50(m,2H),0.26(m,2H)。
下列縮寫適用于全文Me甲基Bu丁基i-Bu異丁基t-Bu叔丁基Et乙基Pr丙基i-Pr異丙基Ar芳基Ph苯基Py吡啶Ac乙?;鵈DC乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺HOAt1-羥基-7-氮雜-苯并三唑HOBt羥基苯并三唑DMFN,N′-二甲基甲酰胺THF四氫呋喃DMSO二甲基亞砜EDTA乙二胺四乙酸Boc叔丁氧基羰基
BOP苯并三唑-1-基氧基-三(二甲基氨基)CHAPS3-[(3-氯酰胺基丙基)二甲基銨]-2-羥基-1-并磺酸鹽TEA三乙胺TFA三氟乙酸NaHMDS六甲基二硅氮烷NCSN-氯琥珀酰亞胺DCE二氯乙烷DIPEA二異丙基乙胺DCM二氯甲烷DICN,N’-二異丙基碳二亞胺DCA1,2-二氯乙烷DMAN,N-二甲基乙酰胺Aq含水rt室溫HPLC高效液體色譜雖然本發(fā)明已經(jīng)參考某些具體實(shí)施方式
描述和說明,本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解許多適應(yīng)性變化、改變、修飾、替代、省略和添加的方法和方案可以在不脫離本發(fā)明的宗旨和范圍下獲得。所以,本發(fā)明本發(fā)明是由權(quán)利要求書的服務(wù)限定并且此類權(quán)利要求書盡可能地從廣義上進(jìn)行合理解釋。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物 其中X選自基團(tuán) 其中R11和R12獨(dú)立地選自(a)氫,(b)-C1-10烷基,(c)C2-10鏈烯基,(d)C2-10鏈炔基,(e)-C3-12環(huán)烷基,和(f)選自苯基和萘基的芳基;其中該烷基,環(huán)烷基,鏈烯基,鏈炔基或芳基未被取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-OH,(iii)-CN,(iv)-C1-10烷基,(v)-C3-12環(huán)烷基,和(vi)-O-C1-10烷基,Y1是N,并且Y2和Y4分別是CH,或Y2是N,和Y1和Y3分別是CH,或Y3是N,和Y1和Y2分別是CH;A選自基團(tuán)(1)氫,(2)-C1-10烷基,和(3)-C2-10鏈烯基,其中該烷基或鏈烯基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素,(b)-C3-12環(huán)烷基,(c)-OH,(d)-CN,(e)-O-C1-10烷基,(f)苯基,或(g)雜芳基選自吡嗪基,吡唑基,噠嗪基,吡啶基,嘧啶基,吡咯基,四唑基,呋喃基,咪唑基,三嗪基,吡喃基,噻唑基,噻吩基,苯硫基,三唑基,唑基,異唑基,噻唑基,二唑基,吲哚基,喹啉基,異喹啉基,苯并咪唑基,苯并呋喃基,吲哚炔基(indynyl)和苯并唑基,和該苯基和雜芳基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-OH,(iii)-CN,(iv)-O-C1-10烷基,(v)-C1-10烷基,或(vi)-C3-12環(huán)烷基;Q是-C0-3烷基,其中該烷基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(1)鹵素,(2)-C3-12環(huán)烷基,(3)-OH,(4)-CN,(5)-O-C1-10烷基,和(6)-C1-10烷基;R1是(1)選自苯基和萘基的芳基,(2)雜芳基選自吡嗪基,吡唑基,噠嗪基,吡啶基,嘧啶基,吡咯基,四唑基,呋喃基,咪唑基,三嗪基,吡喃基,噻唑基,噻吩基,苯硫基,三唑基,唑基,異唑基,噻唑基,二唑基,吲哚基,喹啉基,異喹啉基,苯并咪唑基,苯并呋喃基,吲哚炔基和苯并唑基,(3)-C1-10烷基,和(4)C3-8環(huán)烷基,該環(huán)烷基任選地與C6-10芳基稠合,其中該烷基,環(huán)烷基,芳基或雜芳基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素,(b)-C1-10烷基,其中該烷基是未取代或被鹵素取代,(c)-OH,(d)-CN,(e)-O-C1-10烷基,(f)-C3-12環(huán)烷基,和(g)-NR8R9;R2選自(1)-OH,和(2)-NR8R9,其中R8和R9選自(a)氫,(b)C1-10烷基,和(c)C0-6烷基-C6-10芳基,或當(dāng)R2是NR8R9,并且R8和A是氫時(shí),則Q,R1和R9可以連接在一起構(gòu)成-CH2CH2CH2-,當(dāng)R2是NR8R9時(shí),則Q、R1和A可以連接在一起構(gòu)成4或5碳烷基鏈,其中烷基鏈中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以用N、O或S原子,或SO2基團(tuán)替代;R4選自基團(tuán)(1)-C1-10烷基,或(2)-C3-12環(huán)烷基,其中該烷基和環(huán)烷基未被取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素,(b)-OH,(c)-CN,(d)-O-C1-10烷基,(e)-C1-10烷基,(f)-C3-12環(huán)烷基,(g)選自苯基和萘基的芳基,或(h)雜芳基選自吡嗪基,吡唑基,噠嗪基,吡啶基,嘧啶基,吡咯基,四唑基,呋喃基,咪唑基,三嗪基,吡喃基,噻唑基,噻吩基,苯硫基,三唑基,唑基,異唑基,噻唑基,二唑基,吲哚基,喹啉基,異喹啉基,苯并咪唑基,苯并呋喃基,吲哚炔基和苯并唑基,和該芳基和雜芳基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-OH,(iii)-CN,(iv)-O-C1-10烷基,(v)-C3-12環(huán)烷基,或(vi)-C1-10烷基;R7選自基團(tuán)(1)氫,(2)-C1-10烷基,和(3)選自苯基和萘基的芳基;其中該烷基和芳基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素,(b)-OH,(c)-CN,(d)-O-C1-10烷基,(e)-C3-12環(huán)烷基,(f)選自苯基和萘基的芳基,或(g)雜芳基選自吡嗪基,吡唑基,噠嗪基,吡啶基,嘧啶基,吡咯基,四唑基,呋喃基,咪唑基,三嗪基,吡喃基,噻唑基,噻吩基,苯硫基,三唑基,唑基,異唑基,噻唑基,二唑基,吲哚基,喹啉基,異喹啉基,苯并咪唑基,苯并呋喃基,吲哚炔基和苯并唑基;其中該環(huán)烷基,芳基或雜芳基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-OH,(iii)-CN,(iv)-O-C1-10烷基,(v)-C3-12環(huán)烷基,或(vi)選自苯基和萘基的芳基;或R4和R7可以相連構(gòu)成-CH2CH2CH2-;R5和R6獨(dú)立地選自(1)氫,(2)-C1-10烷基,(3)-C2-10鏈烯基,(4)-C2-10鏈炔基,和(5)-C1-10烷基-C3-12環(huán)烷基;其中該烷基,環(huán)烷基,鏈烯基或鏈炔基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素,(b)-OH,(c)-CN,(d)-C1-10烷基(e)-C3-12環(huán)烷基,(f)-O-C1-10烷基,(g)雜芳基選自吡嗪基,吡唑基,噠嗪基,吡啶基,嘧啶基,吡咯基,四唑基,呋喃基,咪唑基,三嗪基,吡喃基,噻唑基,噻吩基,苯硫基,三唑基,唑基,異唑基,噻唑基,二唑基,吲哚基,喹啉基,異喹啉基,苯并咪唑基,苯并呋喃基,吲哚炔基和苯并唑基,其中該雜芳基可以未取代或被鹵素取代;(h)苯基,或(i)-NR8R9;或R5和R6與它們所連的氮原子一起相連構(gòu)成4-6員環(huán),其未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)-C1-10烷基,(b)-C3-12環(huán)烷基,(c)-(CH2)正苯基,(d)-C2-10鏈烯基,或(e)-C2-10鏈炔基,其中該烷基,鏈烯基和鏈炔基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-OH,(iii)-CN,(iv)-O-C1-10烷基,或(v)-C3-12環(huán)烷基;和該環(huán)烷基和苯基是未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(i)鹵素,(ii)-C1-10烷基,(iii)-OH,(iv)-CN,(v)-C3-12環(huán)烷基,或(vi)-O-C1-10烷基;n是0,1,2,3或4;和其藥學(xué)可接受鹽,以及其各個(gè)對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。
2.權(quán)利要求1的化合物,其中Y1是N和Y2和Y3分別是CH。
3.權(quán)利要求1的化合物,其中R1是苯基和Q是CH2。
4.權(quán)利要求1的化合物,其中R2是-NR8R9。
5.權(quán)利要求1的化合物,其中A是C1-6烷基。
6.權(quán)利要求1的化合物,其中R4和R7是C1-10烷基。
7.權(quán)利要求1的化合物,其中X是二唑選自
8.權(quán)利要求1的化合物,其中X是唑選自
9.權(quán)利要求1的化合物,其中X是噻唑選自
10.權(quán)利要求1的化合物,它是式(II)的化合物 其中A,X,Y1,Y2,Y3,Q,R1,R2,R4,R5和R7如上述權(quán)利要求1定義,并且其藥學(xué)可接受鹽,以及其各個(gè)對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。
11.權(quán)利要求10的化合物,其中Y1是N和Y2和Y3分別是CH。
12.權(quán)利要求10的化合物,其中R1是苯基和Q是CH2。
13.權(quán)利要求10的化合物,其中R2是NR8R9。
14.權(quán)利要求10的化合物,其中X是二唑選自
15.權(quán)利要求10的化合物,其中X是唑選自
16.權(quán)利要求10的化合物,其中X是噻唑選自
17.權(quán)利要求10的化合物,其中R5是氫或C1-10烷基,其中該C1- 10烷基未取代或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(1)鹵素,(2)-OH,(3)-CN,(4)苯基,(5)-OC1-10烷基,或(6)-NR8R9。
18.權(quán)利要求17的化合物,其中R5是C1-10烷基,其中該C1-10烷基未取代或被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代。
19.式(III)的化合物 其中A,X,Q,R1,R2,R4,R5,R6和R7如上述權(quán)利要求1定義,以及其藥學(xué)可接受鹽,和其各個(gè)對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。
20.權(quán)利要求1的化合物,其選自基團(tuán)
21.藥物組合物,其中含有治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)可接受鹽和藥學(xué)可接受載體。
22.一種在需要其的患者中治療阿爾茨海默氏病的方法,包括給該患者施用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及2,4,6-取代吡啶基衍生化合物,其是β-促分泌酶的抑制劑并且有效治療其中涉及β-促分泌酶的疾病,例如阿爾茨海默氏病。本發(fā)明還涉及含有這些化合物的藥物組合物和這些化合物和組合物在治療其中涉及β-促分泌酶的疾病中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)B23K9/00GK1942467SQ200580011843
公開日2007年4月4日 申請(qǐng)日期2005年4月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月20日
發(fā)明者J·C·巴羅, G·B·麥戈伊, P·G·南特梅特, H·A·拉亞帕克斯, H·G·塞爾尼克, S·R·斯陶費(fèi)爾, J·P·瓦卡, S·J·斯塔徹爾, C·A·科伯恩, M·G·斯坦頓 申請(qǐng)人:默克公司