一株貪銅菌及其在金合成中的應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】一株貪銅菌及其在金合成中的應(yīng)用，屬于微生物【技術(shù)領(lǐng)域】。該菌株分離于大連理工大學(xué)牛角山泥土樣品，2014年6月4日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCCNo.9266。該菌株SHE為革蘭氏陰性菌，菌體為短桿狀，經(jīng)16SrRNA基因序列測(cè)定，其與Cupriavidussp.具有最高的相似性，因此該菌分類(lèi)命名為Cupriavidussp.SHE，菌株16SrRNA基因序列的GenBank登錄號(hào)為KJ875863。該菌株具有合成金顆粒的能力，可催化氯金酸合成不同形態(tài)及尺寸的金顆粒，顯示了其在金合成領(lǐng)域具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一株貪銅菌及其在金合成中的應(yīng)用 【技術(shù)領(lǐng)域】
[〇〇〇1] 本發(fā)明涉及一株貪銅菌及其在金合成中的應(yīng)用，屬于微生物【技術(shù)領(lǐng)域】。 【背景技術(shù)】
[0002] 隨著工業(yè)化進(jìn)程的發(fā)展，傳統(tǒng)礦石資源的需求持續(xù)增加，從而導(dǎo)致礦山的開(kāi)采力 度隨之增強(qiáng)。目前世界上礦產(chǎn)資源原礦品位下降嚴(yán)重，嵌布的粒度也越來(lái)越小。因此，對(duì) 于低品位、尾礦以及難處理礦產(chǎn)的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用成為了目前冶金領(lǐng)域的一個(gè)重要研究方 向。相比于傳統(tǒng)的物化冶金技術(shù)，微生物冶金不僅具有過(guò)程簡(jiǎn)單、環(huán)境友好無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)， 在對(duì)低品位礦石中的金屬回收、難開(kāi)發(fā)礦石的預(yù)處理以及礦區(qū)的尾礦污染治理等方面具有 潛在的優(yōu)勢(shì)。在目前流行的生物氧化提金技術(shù)中，關(guān)鍵步驟是利用微生物還原吸附的絡(luò)合 金粒子，實(shí)現(xiàn)變廢為寶，該領(lǐng)域正成為國(guó)內(nèi)外的研究熱點(diǎn)。
[0003] 目前已有較多關(guān)于微生物或其代謝產(chǎn)物還原Au7Au3+絡(luò)合物生成單質(zhì)金的報(bào)道。 He等人利用可將氯金酸（HAuC14)中的Au3+還原為不同大 小和形貌的金納米顆粒；Nangia等對(duì)細(xì)菌的Au3+還原 機(jī)理進(jìn)行了考察，認(rèn)為該還原過(guò)程是由依賴(lài)于輔酶NADPH的還原酶實(shí)現(xiàn)的；Xie等人發(fā)現(xiàn) 牛血清蛋白可在室溫下對(duì)Au 3+進(jìn)行還原從而生成納米金顆粒。然而已有報(bào)道中，絕大多 數(shù)微生物所介導(dǎo)的Au7Au3+還原反應(yīng)生成的金顆粒均為納米級(jí)大小（直徑小于200 nm)， 并不利于實(shí)際廢水中金的回收，因此獲取可直接合成大粒徑金顆粒的菌株具有重要意義。 2006年Science上一篇報(bào)道指出CH34 (隨后被重新鑒定為 Copriariofe 可以將HAuC14中的Au3+還原為肉眼可見(jiàn)的24 K純金，首次 證明微生物能直接合成金顆粒，但相關(guān)研究屈指可數(shù)，特別是國(guó)內(nèi)對(duì)該領(lǐng)域的相關(guān)研究十 分匱乏。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一株貪銅菌及其在金合成中的應(yīng)用，該菌株可以催化 碰11(：1 4合成不同形態(tài)的金顆粒，在金合成領(lǐng)域中具有重要應(yīng)用價(jià)值。
[0005] 本發(fā)明所涉及一株貪銅菌（拉丁文分類(lèi)命名sp. SHE)，所述菌株 的登記入冊(cè)編號(hào)為CGMCC No. 9266,保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中 心，保藏單位地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，保藏日 期為2014年6月4日。所述貪銅菌是革蘭氏陰性菌，菌體為短桿狀，其16S rRNA基因序 列的Genbank登錄號(hào)為KJ875863。
[0006] 所述菌株篩選自大連理工大學(xué)牛角山泥土樣品，菌株的培養(yǎng)條件：LB培養(yǎng)基的組 成為NaCl 10 g/L、蛋白胨10 g/L、酵母粉5 g/L、pH 7.0;將100 mL培養(yǎng)基于121°C高溫 高壓滅菌20 min，在30°C，150 rpm條件下培養(yǎng)菌株至對(duì)數(shù)中后期。
[0007] 所述的一株貪銅菌株應(yīng)用于金顆粒的合成。
[0008] 本發(fā)明的有益效果是：一株貪銅菌分離自大連理工大學(xué)牛角山泥土樣品，其對(duì)金 顆粒具有較好的合成能力，該菌株SHE在HAuC14濃度為0. 1-5 mM條件下均能夠合成金顆 粒，因此該菌株在金合成領(lǐng)域具有一定的應(yīng)用潛力。
[0009] 【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[〇〇1〇] 圖1貪銅菌株SHE掃描電鏡圖片。
[0011] 圖2貪銅菌株SHE的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。
[0012] 圖3貪銅菌株SHE的在LB培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線。
[0013] 圖4不同HAuC14濃度下SHE合成金顆粒紫外全波掃描圖。
[0014] 圖5貪銅菌株SHE合成金顆粒的透射電鏡表征。
[0015] 圖6不同HAuC14濃度下SHE合成金顆粒的質(zhì)量。
[0016] 【具體實(shí)施方式】
[0017] 實(shí)施例1 :本發(fā)明菌株的獲得 本發(fā)明有關(guān)一株貪銅菌SHE，2014年于大連理工大學(xué)牛角山上的泥土樣品經(jīng)過(guò)反復(fù)的 平板稀釋涂布法，將樣品涂布在無(wú)機(jī)鹽（(NH4)2S04 2. 0 g/L、KH2P04 2. 0 g/L、Na2HP0412H20 3. 28 g/L、FeCl3 0. 00025 g/L、吲哚 100 mg/L)平板上，30 °C，150rpm 條件下培養(yǎng)獲得菌 液。菌株SHE的細(xì)胞形態(tài)為短桿狀，大小為0.5 μ m左右，掃描電鏡照片如圖1。
[0018] 實(shí)施例2 :菌株的16S rRNA分子鑒定 提取貪銅菌SHE的基因組DNA，通過(guò)PCR擴(kuò)增16S rRNA基因序列，利用BLAST程序?qū)π?列進(jìn)行同源對(duì)比，得到與其最相近的菌種為貪銅菌，二者16S rRNA基因序列相似性為99%， 因此判定SHE為貪銅菌。圖2為16S rRNA基因的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，SHE菌株的16Sr RNA基因 序列如下：
【權(quán)利要求】
1. 一株貪銅菌（Copriahote sp. SHE)，其特征是：所述菌株的登記入冊(cè)編號(hào)為CGMCC No. 9266,保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏單位地址為北京 市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，保藏日期為2014年6月4日。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一株貪銅菌，其特征在于：所述菌株的培養(yǎng)條件：LB培養(yǎng)基 的組成為NaCl 10 g/L、蛋白胨10 g/L、酵母粉5 g/L、pH 7.0;將100 mL培養(yǎng)基于121°C 高溫高壓滅菌20 min，在30°C，150 rpm條件下培養(yǎng)菌株至對(duì)數(shù)中后期。
3. 權(quán)利要求1所述的一株貪銅菌應(yīng)用于金顆粒的合成。
【文檔編號(hào)】B22F9/24GK104109650SQ201410352091
【公開(kāi)日】2014年10月22日 申請(qǐng)日期:2014年7月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月23日
【發(fā)明者】曲媛媛, 沈娥, 馬橋, 劉紫嫣, 周豪, 張照婧, 王經(jīng)偉, 沈文麗, 李端行, 李會(huì)杰, 周集體 申請(qǐng)人:大連理工大學(xué)