本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，具體涉及一種黃連素碳納米點(diǎn)及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、膿毒癥是因宿主對(duì)感染的反應(yīng)失調(diào)而導(dǎo)致的危及生命的器官功能障礙綜合征。在全世界范圍內(nèi)，膿毒癥居高不下的發(fā)病率和病死率使其成為危重癥患者死亡的首要原因。腸道是防止腸道微生物和毒素入侵體內(nèi)的有效屏障，腸屏障受損是導(dǎo)致膿毒癥患者死亡的始動(dòng)因素。目前，臨床上尚未成功開發(fā)出有針對(duì)性的治療膿毒癥腸屏障損傷的有效藥物，探索膿毒癥腸屏障損傷的機(jī)制及有效的防治策略，是目前臨床上亟待解決的問題。

2、黃連作為傳統(tǒng)上品中藥材，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，在我國(guó)沿用已有千年之久。黃連素作為黃連主要藥效成分的中藥單體物質(zhì)，具有抗炎、抗氧化、抗凋亡等生物學(xué)效應(yīng)，但存在給藥途徑受限、分子量難以穿過生物膜屏障等諸多因素，限制了其廣泛應(yīng)用。碳納米點(diǎn)是一種新型零維光致發(fā)光納米材料，具備可調(diào)節(jié)的熒光發(fā)射波長(zhǎng)、良好的光穩(wěn)定性、水溶性、生物相容性以及低生物毒性等優(yōu)勢(shì)，在生物醫(yī)學(xué)治療、光催化、化學(xué)傳感等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用前景，但是碳納米點(diǎn)在治療膿毒癥腸屏障損傷中的應(yīng)用未見報(bào)道。如何制備一種對(duì)膿毒癥腸屏障損傷具有良好治療作用、能夠經(jīng)靜脈注射并且無毒副作用的碳納米點(diǎn)中藥納米材料藥物是目前膿毒癥腸屏障損傷治療中亟待解決的問題之一。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是提供一種黃連素碳納米點(diǎn)及其制備方法與應(yīng)用，以解決現(xiàn)有缺乏治療膿毒癥腸屏障損傷有效藥物，黃連素由于自身給藥途徑受限，難以穿過生物膜等因素導(dǎo)致的對(duì)于膿毒癥腸損傷治療效果不佳等問題。

2、本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下：

3、一種黃連素碳納米點(diǎn)的制備方法，包括以下步驟：

4、將黃連素水溶液進(jìn)行水熱反應(yīng)后，過濾，離心收集溶液，制得。

5、本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明以黃連素為唯一碳源，通過水熱法進(jìn)行高熒光碳納米點(diǎn)的合成，方法簡(jiǎn)單，成本低廉，安全綠色，無需添加其他化學(xué)試劑，避免了其他化學(xué)物質(zhì)帶來的潛在毒性，通過合成得到的黃連素碳納米點(diǎn)尺寸小，具有較好的水溶性，能夠透過細(xì)胞膜，易于腸組織細(xì)胞攝取，能夠有效的應(yīng)用于膿毒癥引起的腸屏障損傷的治療中。

6、進(jìn)一步地，黃連素水溶液的濃度為0.5-2mg/ml。

7、優(yōu)選地，黃連素水溶液的濃度為1mg/ml。

8、進(jìn)一步地，水熱反應(yīng)的溫度為200-250℃，時(shí)間為5-10h。

9、優(yōu)選地，水熱反應(yīng)的溫度為220℃，時(shí)間為8h。

10、進(jìn)一步地，過濾采用孔徑為0.20-0.25μm的pesm膜。

11、優(yōu)選地，過濾采用孔徑為0.22μm的pesm膜。

12、進(jìn)一步地，離心過程中溫度為3-5℃，轉(zhuǎn)速為4000-6000rpm，時(shí)間為4-6min。

13、優(yōu)選地，離心過程中溫度為4℃，轉(zhuǎn)速為5000rpm，時(shí)間為5min。

14、一種黃連素碳納米點(diǎn)，采用上述制備方法制得。

15、上述黃連素碳納米點(diǎn)在制備治療膿毒癥腸屏障損傷的藥物中的應(yīng)用。

16、本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明制得的黃連素碳納米點(diǎn)能夠有效改善膿毒癥小鼠的生存率，顯著減輕膿毒癥小鼠的腸組織病理學(xué)損傷、炎癥反應(yīng)和緊密連接蛋白丟失，能夠顯著減輕lps引起的腸上皮細(xì)胞死亡和腸上皮細(xì)胞屏障通透性異常，從而起到有效治療膿毒癥腸屏障損傷的作用，且該黃連素碳納米點(diǎn)對(duì)小鼠多個(gè)臟器無顯著影響或損傷作用，對(duì)腸上皮細(xì)胞的增殖活力無抑制作用，幾乎無生物毒性。

17、一種治療膿毒癥腸屏障損傷的藥物，活性成分包括上述黃連素碳納米點(diǎn)。

18、進(jìn)一步地，藥物為黃連素碳納米點(diǎn)水溶液。

19、進(jìn)一步地，黃連素碳納米點(diǎn)水溶液的濃度為1-10mg/ml。

20、優(yōu)選地，黃連素碳納米點(diǎn)水溶液的濃度為5mg/ml。

21、本發(fā)明具有以下有益效果：

22、(1)本發(fā)明以黃連素為唯一碳源，建立了一種方法簡(jiǎn)單、成本低廉、安全綠色的水熱法合成高熒光碳納米點(diǎn)的方法，該方法無需添加其他化學(xué)試劑，避免了合成過程中其他化學(xué)物質(zhì)所帶來的潛在毒性。

23、(2)本發(fā)明制備的黃連素碳納米點(diǎn)，尺寸在1-5nm范圍內(nèi)，并且具有較好的水溶性，能更好的透過細(xì)胞膜，易于腸組織細(xì)胞攝取，解決了當(dāng)碳納米點(diǎn)直徑＞100nm時(shí)，單核-巨噬細(xì)胞具有較高幾率識(shí)別和去除碳納米點(diǎn)的問題，以及機(jī)體細(xì)胞對(duì)分子狀態(tài)的中藥單體攝取率較低的問題。

24、(3)本發(fā)明制備的黃連素碳納米點(diǎn)，能夠有效改善膿毒癥小鼠的生存率，顯著減輕膿毒癥小鼠的腸組織病理學(xué)損傷、炎癥反應(yīng)和緊密連接蛋白丟失，并且顯著減輕lps引起的腸上皮細(xì)胞死亡和腸上皮細(xì)胞屏障通透性異常，表明黃連素碳納米點(diǎn)對(duì)膿毒癥引起的腸屏障損傷具體確切的保護(hù)作用，為其用于治療膿毒癥腸屏障損傷提供了良好的理論基礎(chǔ)。

25、(4)本發(fā)明制備的黃連素碳納米點(diǎn)，對(duì)小鼠的肝腎功能無顯著影響，對(duì)小鼠的多個(gè)重要臟器均無損傷作用，并且對(duì)腸上皮細(xì)胞的增殖活力無抑制作用，表明黃連素碳納米點(diǎn)幾乎無生物毒性，為其安全應(yīng)用提供了有力證據(jù)。

技術(shù)特征：

1.一種黃連素碳納米點(diǎn)的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃連素碳納米點(diǎn)的制備方法，其特征在于，所述黃連素水溶液的濃度為0.5-2mg/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃連素碳納米點(diǎn)的制備方法，其特征在于，所述水熱反應(yīng)的溫度為200-250℃，時(shí)間為5-10h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃連素碳納米點(diǎn)的制備方法，其特征在于，所述過濾采用孔徑為0.20-0.25μm的pesm膜。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃連素碳納米點(diǎn)的制備方法，其特征在于，所述離心過程中溫度為3-5℃，轉(zhuǎn)速為4000-6000rpm，時(shí)間為4-6min。

6.一種黃連素碳納米點(diǎn)，其特征在于，采用權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的制備方法制得。

7.權(quán)利要求6所述的黃連素碳納米點(diǎn)在制備治療膿毒癥腸屏障損傷的藥物中的應(yīng)用。

8.一種治療膿毒癥腸屏障損傷的藥物，其特征在于，活性成分包括權(quán)利要求6所述的黃連素碳納米點(diǎn)。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的治療膿毒癥腸屏障損傷的藥物，其特征在于，藥物為黃連素碳納米點(diǎn)水溶液。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的治療膿毒癥腸屏障損傷的藥物，其特征在于，所述黃連素碳納米點(diǎn)水溶液的濃度為1-10mg/ml。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種黃連素碳納米點(diǎn)及其制備方法與應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。其制備方法包括以下步驟：將黃連素水溶液進(jìn)行水熱反應(yīng)后，過濾，離心收集溶液，制得。本發(fā)明以黃連素為唯一碳源，通過水熱法進(jìn)行高熒光碳納米點(diǎn)的合成，方法簡(jiǎn)單，成本低廉，安全綠色，無需添加其他化學(xué)試劑，避免了其他化學(xué)物質(zhì)帶來的潛在毒性，通過合成得到的黃連素碳納米點(diǎn)尺寸小，具有較好的水溶性，能夠透過細(xì)胞膜，易于腸組織細(xì)胞攝取，能夠通過減輕膿毒癥小鼠的腸組織病理學(xué)損傷、炎癥反應(yīng)和緊密連接蛋白丟失，顯著減輕LPS引起的腸上皮細(xì)胞死亡和腸上皮細(xì)胞屏障通透性異常，有效的應(yīng)用于膿毒癥引起的腸屏障損傷的治療中。

技術(shù)研發(fā)人員：楊濤,許建剛,丁玲,李曼,王蕾,耿立成
受保護(hù)的技術(shù)使用者：天津市人民醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10