香菇液化專用菌種培養(yǎng)基及相應的培養(yǎng)法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種香菇液化專用菌種配方和培養(yǎng)法。
【背景技術】
[0002] 食用菌是中國最具現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展特征的優(yōu)勢產(chǎn)業(yè)之一。這不僅因為中國是世界最 大的食用菌生產(chǎn)和消費國，食用菌生產(chǎn)量大面廣，而且更重要的是食用菌產(chǎn)業(yè)在生物技術 產(chǎn)業(yè)化和農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展中的良好載體和突出地位。目前我國的食用菌產(chǎn)業(yè)體系，有很多 不適應全球市場經(jīng)濟的要素，其中最主要的是產(chǎn)業(yè)經(jīng)營的集約化、專業(yè)化程度低，生產(chǎn)要素 落后，生產(chǎn)工藝不盡完善，缺乏關鍵技術的支撐，其中最具代表性的是菌種的集約化高效繁 育技術，成了產(chǎn)業(yè)面臨的主要瓶頸。目前普遍采用的傳統(tǒng)三級固體菌種繁育工藝，生產(chǎn)效率 低，培養(yǎng)周期長，菌種染菌率高，無法突破手工化、作坊式低效生產(chǎn)模式，使規(guī)模企業(yè)與散戶 制種處在同一競爭平臺，這是造成目前食用菌生產(chǎn)安全、質(zhì)量事故頻發(fā)的主要根源，也是食 用菌企業(yè)效益欠佳的主要原因。國外如日本、韓國食用菌工廠化生產(chǎn)中目前已普遍采用液 體菌種技術，而我國在此領域缺乏規(guī)?；a(chǎn)成功的經(jīng)驗與技術，所以加強菌種在規(guī)?；?生產(chǎn)中應用的研發(fā)，利用現(xiàn)代生物科技和生物工程技術，實現(xiàn)菌種（菌袋）的高效繁育已迫 在眉睫。
[0003]傳統(tǒng)三級固體菌種繁育工藝有3步（試管母種-瓶裝原種-瓶裝栽培種）：第1級 為試管母種，配方為PDA為主（去皮鮮馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20、水1000ml)，培 養(yǎng)時間7-15天（根據(jù)菇種而異，香菇一般為12-15天），1支母種轉接5瓶原種。第2級為 瓶裝原種（750ml)，配方以木肩、麩皮培養(yǎng)基為主（如香菇原種配方細木肩78%、麩皮20%、 白糖1 %、石膏1 %，含水量60 % )，培養(yǎng)時間45-60天（根據(jù)菇種而異），1瓶原種可轉接 50瓶栽培種。第3級為瓶裝栽培種（750ml)，配方以木肩、麩皮培養(yǎng)基為主（同原種配方， 培養(yǎng)時間35-45天（根據(jù)菇種而異），1瓶栽培種（濕重600克培養(yǎng)料）可轉接20個出菇 袋，每袋出菇袋需要固體菌種30克。上述3級種工藝全程培養(yǎng)周期87-120天。該方法所 得的菌種按照常規(guī)的接種出菇袋法培育鮮菇時染菌率一般為5-10%。備注說明：上述固體 菌種在原種（第2級）、栽培種（第3級）階段由于培養(yǎng)時間長，培養(yǎng)環(huán)境差，加上封口不規(guī) 范，會在發(fā)滿菌絲的成品菌種表面隱形染菌，這種隱性感染的菌種被接種后，會變成顯性的 污染（此時雜菌比食用菌菌絲生長快）。所以現(xiàn)有固體菌種風險很大，且很難避免。
[0004] 目前現(xiàn)有的食用菌液體發(fā)酵菌種（也稱深層發(fā)酵）工藝流程為3步（試管母 種-三角瓶搖床發(fā)酵液體原種-發(fā)酵罐深層發(fā)酵液體栽培種）：第1級為母種，（制作法同 前）培養(yǎng)時間7-15天（根據(jù)葫種而異，香葫一般為12-15天），1支母種轉接2-3瓶三角瓶搖 床發(fā)酵液體原種（200ml)。第2級為三角瓶搖床發(fā)酵液體原種（500ml三角瓶中放入200ml 培養(yǎng)液），配方以去皮鮮馬鈴薯、葡萄糖、酵母膏、蛋白胨等為主，搖床培養(yǎng)時間7-10天（根 據(jù)菇種而異），1瓶液體原種可轉接2000ml的3級發(fā)酵罐培養(yǎng)液（10 %接種量）。第3級為 發(fā)酵罐深層發(fā)酵液體栽培種，配方同三角瓶搖床液體原種培養(yǎng)基，發(fā)酵需專用深層發(fā)酵罐 或發(fā)酵系統(tǒng)，培養(yǎng)時間3-5天（根據(jù)菇種而異），1升液體菌種可轉接100個出菇袋。上述 液體菌種繁育工藝全程培養(yǎng)周期22-30天。該方法所得的菌種按照常規(guī)的接種出菇袋法培 育鮮菇時染菌率一般為2-5%。備注說明：液體發(fā)酵菌種工藝理論上菌種純度高，大規(guī)模發(fā) 酵生產(chǎn)的染菌率在1% -5%之間（3級發(fā)酵罐中），加上染菌（細菌性為主）往往在發(fā)酵后 期，常規(guī)在線檢驗很難發(fā)現(xiàn)，導致用液體發(fā)酵菌種接種產(chǎn)生大批量出菇袋污染的生產(chǎn)事故， 教訓慘痛。另外，液體菌種由于培養(yǎng)需用高濃度的有機氮和糖源等營養(yǎng)成分，這些成分殘留 在菌液中被接入出菇袋，由于操作時不可避免有雜菌帶入，所以殘留的營養(yǎng)就成為了雜菌 的溫床，增加了出菇袋接種后的污染風險。這是液體發(fā)酵菌種不能大規(guī)模應用于食用菌生 產(chǎn)的主要問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種培養(yǎng)周期短、菌種質(zhì)量高的香菇液化專用菌 種培養(yǎng)基及相應的培養(yǎng)法。
[0006] 為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供一種香菇液化專用菌種培養(yǎng)基，其由以下重 量份的成分組成：
[0007]
【主權項】
1. 香菇液化專用菌種培養(yǎng)基，其特征是由以下重量份的成分組成：
2. 根據(jù)權利要求1所述的香菇液化專用菌種培養(yǎng)基，其特征是由以下重量份的成分組 成：
3. 權利要求1或2所述的培養(yǎng)基的制備法，其特征是包括如下步驟： 將玉米淀粉、細麩皮、小麥纖維素、石膏混合均勻，得配料I; 將葡萄糖、酵母浸膏、牛肉蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂加入水中，充分攪拌，得配料II; 將配料I和配料II充分混合后，得香菇液化專用菌種培養(yǎng)基。
4. 利用權利要求1或2所述的培養(yǎng)基進行的香菇液化菌種培養(yǎng)法，其特征是：將香菇 母種依次進行以下步驟： 1)、菌種制作： 將香菇液化專用菌種培養(yǎng)基裝入培養(yǎng)瓶中，蓋好微孔膜透氣蓋，高溫高壓滅菌，得滅菌 后培養(yǎng)基； 按照每200g的香菇液化專用菌種培養(yǎng)基對應4. 8?5. 2g香菇母種的接種量，于無菌 條件下在滅菌后培養(yǎng)基中接入香菇母種，22?24°C黑暗培養(yǎng)25?26天，得液化專用固體 菌種； 2)、液化菌種制備： 將液化專用固體菌種在無菌條件下先經(jīng)高速均質(zhì)，然后按照1:100的稀釋度稀釋，稀 釋后的所得物在稀釋罐內(nèi)于溫度為20-23°C、通氣比為1 :0.4(v/v/min)的條件下液化4? 6分鐘；得香菇液化菌種。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種香菇液化專用菌種培養(yǎng)基，其由以下重量份的成分組成：玉米淀粉40-50份、葡萄糖1-2份、小麥纖維素15-20份、細麩皮15-23份、酵母浸膏1-1.5份、牛肉蛋白胨1-1.5份、磷酸二氫鉀2-3份、硫酸鎂1-1.5份、石膏2份、水100份。本發(fā)明還同時公開了利用上述培養(yǎng)基進行的香菇液化菌種培養(yǎng)法，依次進行以下步驟：將香菇液化專用菌種培養(yǎng)基高溫高壓滅菌，于無菌條件下在滅菌后培養(yǎng)基中接入香菇母種，22～24℃黑暗培養(yǎng)25～26天；將所得的液化專用固體菌種進行稀釋處理，得香菇液化菌種。
【IPC分類】C05G1-00, A01G1-04
【公開號】CN104557211
【申請?zhí)枴緾N201510028938
【發(fā)明人】陳再鳴, 何伯偉, 陳青, 余維良, 鄭明海
【申請人】浙江大學
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年1月20日