專利名稱：一種提取銀杏總黃酮的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種從銀杏提取物中再提純的工藝。
銀杏葉的藥用價值已得到世界各國醫(yī)學科學工作者的證實和臨床肯定，銀杏葉中所含主要有效成分是黃酮甙類，達33種之多，約占干重的6％；其次為銀杏內酯，共5種，約占干重的0．8％；白果內酯1種，約占干重的0．7％。目前，以銀杏葉為原料，從中提取主要藥理活性成分銀杏總黃酮、萜內酯的工藝及方法很多，有關產品的標準規(guī)定含黃酮≥24％，內酯≥6％。如德國生產的天波寧(TEBONIN)、法國生產的坦納康(TANAKAN)等均執(zhí)行以上規(guī)定。中國上海中藥研究所1997年公開的“高含量銀杏葉黃酮內酯浸膏及其制備方法”中浸膏含黃酮≥44％(其中黃酮甙≥24％)，內酯≥6％，控制銀杏酸≤10ppm。雖然上述這些方法及參數符合國際通用標準，但是產品所含有效成分黃酮甙類的百分比較低。
本發(fā)明的目的是提供一種從銀杏提取物中分離高含量銀杏黃酮甙類的工藝方法。
本發(fā)明的目的是由以下技術方案實現的一種提取銀杏總黃酮的方法，它以銀杏提取物為原料，包括如下工序，1．除脂取銀杏提取物若干重量單位，加入5倍量注射用水于分液漏斗內，再加入2-3倍量乙醚，充分振搖提取后，分出水層，棄去醚層。
然后，在上述水溶液中再加入5倍量水，邊加熱邊攪拌至完全溶解。
2．制取黃酮類化合物的沉淀物加入新制備的25％石灰乳至PH值12以上，充分攪拌至反應完全，減壓抽濾，水洗至無色，濾液棄去。
3．置換黃酮加乙醇，將沉淀混懸于95％乙醇中，充分攪拌；加硫酸，在上述溶液中加入40％H2SO4，調整PH值至5，充分攪拌，靜置過濾；加氫氧化鈉，在上述濾液中加入40％NaOH，調整PH值至7，過濾。
4．回收乙醇將濾液減壓，回收乙醇，濃縮至無乙醇后，再加入適量注射用水，加熱溶解。
5．干燥加少許活性炭，加熱至沸，靜置5分鐘抽濾，濾液在80℃以下恒溫干燥，得成品。
上述提取銀杏總黃酮的方法，所述活性炭的加入量為溶液體積的3-5％。
上述提取銀杏總黃酮的方法，所述置換黃酮工序中，當在完成調PH值后、過濾之前，為使雜質完全沉淀，可在5-8℃溫度下冷藏靜置12小時。
上述提取銀杏總黃酮的方法，所述回收乙醇工序中，濾液的減壓壓力為0．5-0．7個大氣壓，本提純工藝是根據銀杏黃酮類的分子基本結構特點及所表現出的溶解性、弱酸性等理化性質給予綜合考慮，利用物理化學相結合的方法進行的，其優(yōu)點是可以從銀杏提取物中分離出高含量的銀杏總黃酮，其黃酮甙類(以槲皮素甙、山奈酚甙、異鼠李素甙計)含量可達49．8％，且使有害雜質銀杏酸含量等于零，其它雜質如鞣質、蛋白質等也被除盡，該工藝操作簡便、安全、快捷、產率高、經濟效益性好，適合大規(guī)模工業(yè)生產。
本提純工藝的原理分析如下已知銀杏葉醇提物中主要生物藥理活性成分是黃酮甙類和萜內酯類，還含有其它成分，如蛋白質及酶、單糖、低聚糖、多糖、色素、無機鹽、鞣質、白果酸等。在設計本提純工藝時，考慮到注射劑為水溶液制劑，而萜內脂為脂溶性成分，不溶于水，只得去除，而一些水溶性成分如鞣質、蛋白質、白果酸、酶、單糖、多糖、低聚糖、色素、無機鹽等，盡管在銀杏葉醇提物制取時也剔除了一部分，但在制備注射劑時必須剔除干凈，特別是鞣質、蛋白質、白果酸等有害雜質。
黃酮甙類化合物可溶于水、乙醇、甲醇、乙酸乙脂中，在熱水中溶解度增大，難溶于乙醚、苯、氯仿等有機溶劑。由于其結構中含多個酚羥基，所以顯一定的酸性，能溶于堿液中，加酸后又析出沉淀，因此可以利用該性質提取黃酮類化合物。
在提純工藝中加入乙醚使脂溶性成分溶解后分離除去，如內酯、甙元等。加入石灰乳Ca(OH)2使得鈣離子在一定PH值下與黃酮類化合物生成不溶性的鈣鹽或是螯合物，自水中沉淀析出，同時可能含有的有機酸、香豆素、酚類化合物、酸性皂甙、鞣質、多元酚、部分蛋白質、一些多糖、酸性樹脂等成分也均與鈣離子結合而沉淀下來，但由于黃酮類化合物酸性較弱，所形成的鈣鹽和螯合物不穩(wěn)定，加入H2SO4后就又游離出來轉至乙醇溶液中。實驗證明，大部分被認為有效成分的化合物在PH值4-6時基本上都溶解，而酸性較強的化合物，如有機酸、酸性樹脂、酸性皂甙、鞣酸等與鈣離子形成的鹽較穩(wěn)定，在此PH值時基本不能溶解，此外，多數PH值12時不產生沉淀的蛋白質在PH值4-6時也都沉淀析出。再用NaOH調整PH值為7，可進一步除去硫酸鈣、硫酸鈉、鞣質、鈉鹽等。減壓蒸餾乙醇后，隨著乙醇濃度的降低，一些醇溶性、脂溶性的但化學性質與黃酮近似的不溶性雜質會逐漸析出，這時用活性炭吸附即可剔除，活性炭還可吸附提純物中的熱原(細菌內毒素)。由于黃酮甙類在溫度過高時易分解、易焦糖化，因此干燥時溫度不宜過高，以控制在100℃以下為宜。
以下結合實施例對本發(fā)明作進一步詳述取銀杏葉粉(市售商品，標定含總黃酮不低于24％)40g，加入200ml注射用水，置1000ml容積分液漏斗內，再加入80ml乙醚，充分振搖提取后，分出水層，棄去醚層。在水溶液中再加入200ml水，邊加熱邊攪拌至完全溶解，加新鮮制備的25％石灰乳至PH值12以上，充分攪拌至反應完全，減壓抽濾，水洗至無色，濾液棄去，將沉淀混懸于95％乙醇中，充分攪拌均勻，然后加濃度為35-40％的H2SO4，充分攪拌調PH值為5，過濾，濾液加濃度40％NaOH調PH值至7，5-8℃，冷藏靜置12小時，過濾，濾液減壓回收乙醇，減壓壓力為0．5-0．7個大氣壓，沸點降至60℃，濃縮至無乙醇后再加入50ml注射用水，加熱溶解，加溶液體積的3-5％活性炭，加熱至沸，靜置5分鐘抽濾，濾液80℃恒溫干燥，即得銀杏總黃酮結晶，重量約為10克。
權利要求
1．一種提取銀杏總黃酮的方法，它以銀杏提取物為原料，其特征在于，它包括如下工序，A．除脂取銀杏提取物若干重量單位，加入5倍量注射用水于分液漏斗內，再加入2-3倍量乙醚，充分振搖提取后，分出水層，棄去醚層。然后，在上述水溶液中再加入5倍量水，邊加熱邊攪拌至完全溶解。B．制取黃酮類化合物的沉淀物加入新制備的25％石灰乳至PH值12以上，充分攪拌至反應完全，減壓抽濾，水洗至無色，濾液棄去。C．置換黃酮加乙醇，將沉淀混懸于95％乙醇中，充分攪拌；加硫酸，在上述溶液中加入40％H2SO4，調整PH值至5，充分攪拌，靜置過濾；加氫氧化鈉，在上述濾液中加入40％NaOH，調整PH值至7，過濾。D．回收乙醇將濾液減壓，回收乙醇，濃縮至無乙醇后，再加入適量注射用水，加熱溶解。E．干燥加活性炭，加熱至沸，靜置5分鐘抽濾，濾液在80℃以下恒溫干燥，得成品。
2．根據權利要求1所述的提取銀杏總黃酮的方法，其特征在于，所述銀杏提取物為銀杏葉粉，其標定含總黃酮不低于24％。
3．根據權利要求2所述的提取銀杏總黃酮的方法，其特征在于，所述活性炭的加入量為溶液體積的3-5％。
4．根據權利要求3所述的提取銀杏總黃酮的方法，其特征在于，所述置換黃酮工序中，當在完成調PH值后、過濾之前，可在5-8℃溫度下冷藏靜置12小時。
5．根據權利要求4所述的提取銀杏總黃酮的方法，其特征在于，在所述回收乙醇工序中，濾液的減壓壓力為0．5-0．7個大氣壓。
全文摘要
一種提取銀杏總黃酮的方法,該方法根據銀杏黃酮類分子的溶解性、弱酸性等理化性質,采用除脂、制取黃酮類化合物的沉淀物、置換黃酮、回收乙醇、干燥等工序進行提純,去除雜質,使產品含黃酮甙達49.8%。本方法提取純度高,工藝操作簡便、安全、快捷,適合于大規(guī)模工業(yè)化生產。
文檔編號C07D311/30GK1293191SQ0012980
公開日2001年5月2日 申請日期2000年10月24日 優(yōu)先權日2000年10月24日
發(fā)明者巴偉松 申請人:巴偉松