專利名稱：表沒食子兒茶素沒食子酸酯的分離制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及茶多酚或兒茶素混合物中表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的分離制備方法，屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域。
表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)是茶葉初提藥物中間體茶多酚所含酯型兒茶素的一種，由于其優(yōu)異的抗氧化、抗癌等藥效性能，已被國際上認(rèn)為“是繼紫杉醇之后從植物中提取的最為理想的抗癌新藥”。
茶多酚或兒茶素混合物中EGCG的分離提取，目前一般采用HPLC法，以O(shè)DS為固定相，甲醇、甲酸、N，N-二甲基乙酰胺等有機(jī)溶劑為流動(dòng)相，(戚向陽，謝筆鈞、胡慰望，精細(xì)化工1994，11(1)40-46)。此法雖可將EGCG與混合物中的其它成份分離，但上述有機(jī)溶劑均為有毒試劑，不僅有害工作環(huán)境，而且會(huì)給產(chǎn)品帶來難以消除的毒性殘留物，同時(shí)，所制備的產(chǎn)品為順式EGCG，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易氧化和自身縮聚合，生成附加價(jià)值低的茶紅素、茶褐素，致使產(chǎn)品的純度和產(chǎn)率都大為降低。
為了保護(hù)環(huán)境，消除產(chǎn)品中的毒性殘留物，提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性，特提出本發(fā)明。
本發(fā)明避開有毒的有機(jī)溶劑，采用全程綠色無污染分離制備工藝，在固液分離時(shí)采用膜蒸餾濃縮或滲透汽化技術(shù)，以防止產(chǎn)品氧化或縮聚合，同時(shí)，在不另增加分離提取工序的情況下，將順式EGCG異構(gòu)化處理變成反式EGCG，使其在保持EGCG的抗氧化、抗癌等藥效性能的前提下消除其不穩(wěn)定性。具體工藝過程包括對(duì)茶多酚的溶解、過濾、HPLC分離、餾分截取、濃縮、膜蒸餾濃縮、真空干燥，最后得EGCG產(chǎn)品。
在需要EGCG反式結(jié)構(gòu)產(chǎn)品時(shí)，可以首先對(duì)茶多酚進(jìn)行異構(gòu)化處理，再進(jìn)行溶解分離。
與現(xiàn)有方法相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)采用人體無害有機(jī)溶劑乙醇、乙酸等為HPLC流動(dòng)相，實(shí)現(xiàn)EGCG的綠色分離制備，從源頭上消除了有害物質(zhì)對(duì)產(chǎn)品的污染，使所得產(chǎn)品完全符合綠色藥品、綠色保健品的要求。
采用減壓膜蒸餾或滲透汽化技術(shù)，在常溫下進(jìn)行濃縮干燥，不僅所得產(chǎn)品EGCG純度高、不易氧化，而且節(jié)省能源；在不增加分離、純化工序的情況下，將順式EGCG異構(gòu)化，生成反式EGCG，使在保持EGCG原藥效性能的前提下，產(chǎn)品穩(wěn)定性大大增強(qiáng)，不縮聚，不氧化，且反式產(chǎn)品的附加價(jià)值較原EGCG產(chǎn)品提高近20倍，從而獲得更高的經(jīng)濟(jì)效益。
實(shí)施例茶多酚中EGCG的分離制備茶多酚系多酚類化合物的混合物，其中含有沒兒茶素(EC)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)40-50％、表沒食子兒茶素(EGC)、表兒茶素雙沒食子酸酯、沒食子兒茶素雙沒食子酸酯等兒茶素成分。具體操作步驟如下1.兒茶素混合物的異構(gòu)化取一定量兒茶素混合物樣品，磨細(xì)，以210～230nm的紫外光惰性氣氛照射2.5h進(jìn)行異構(gòu)化。取適量異構(gòu)化產(chǎn)品與同量兒茶素混合物樣品用乙醇溶解，測(cè)定并比較旋光度，計(jì)算異構(gòu)化產(chǎn)率約為97％。
2.HPLC制備柱分離取適量異構(gòu)化產(chǎn)品用乙醇超聲溶解，過濾得樣品溶液，以C18為色譜固定相，15％乙醇--0.2％乙酸水溶液為流動(dòng)相，進(jìn)行HPLC分離。截取富含EGCG餾分。
3.膜蒸餾濃縮、真空干燥結(jié)晶將累計(jì)的富含EGCG餾分采用膜蒸餾技術(shù)濃縮結(jié)晶得濃縮液，將濃縮液真空干燥(溫度為35℃)即可得反式EGCG純品(如未異構(gòu)化處理，則所得產(chǎn)品為順式EGCG)。
權(quán)利要求
1.一種表沒食子兒茶素沒食子酸酯的分離制備工藝，其特征在于本發(fā)明包括對(duì)茶多酚的溶解、過濾、HPLC分離、餾分截取、濃縮、膜蒸餾濃縮、真空干燥，具體工藝參數(shù)如下a.HPLC制備柱分離，對(duì)過濾濾液以C18為色譜固定相，15％乙醇--0.2％乙酸水溶液為流動(dòng)相，進(jìn)行HPLC分離，截取富含EGCG餾分；b.膜蒸餾濃縮、真空干燥結(jié)晶，將累計(jì)的富含EGCG餾分采用膜蒸餾技術(shù)濃縮結(jié)晶得濃縮液，將濃縮液于35℃真空干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于在需要EGCG反式結(jié)構(gòu)產(chǎn)品時(shí)，可以首先對(duì)茶多酚進(jìn)行異構(gòu)化處理，再進(jìn)行溶解分離，異構(gòu)化的條件為以210～230nm的紫外光惰性氣氛照射兒茶素混合物2.5h，用乙醇溶解。
全文摘要
一種表沒食子兒茶素沒食子酸酯的分離制備工藝,包括對(duì)茶多酚的HPLC分離、餾分截取、膜蒸餾濃縮等。本發(fā)明采用減壓膜蒸餾或滲透汽化技術(shù),在常溫下進(jìn)行濃縮干燥,不僅所得產(chǎn)品EGCG純度高、不易氧化,而且節(jié)省能源;在不增加分離、純化工序的情況下,可以將順式EGCG異構(gòu)化,生成反式EGCG,在保持EGCG原藥效性能的前提下,產(chǎn)品穩(wěn)定性大大增強(qiáng),不縮聚,不氧化,且反式產(chǎn)品的附加價(jià)值較原EGCG產(chǎn)品提高近20倍,從而獲得更高的經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)C07D311/62GK1370776SQ0110687
公開日2002年9月25日 申請(qǐng)日期2001年2月21日 優(yōu)先權(quán)日2001年2月21日
發(fā)明者周春山, 鐘世安, 蔣新宇 申請(qǐng)人:中南大學(xué)