專利名稱：抗瘧用取代氨基－氮雜－環(huán)烷類化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的化合物，它們是符合通用分子式I的取代氨基-氮雜-環(huán)烷類化合物。本發(fā)明還涉及包括這些化合物的制備工藝，包含一種或更多種符合通用分子式I的化合物的藥物組合物，特別是它們作為惡性瘧原蟲蛋白酶-瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II或相關(guān)的天冬氨酸蛋白酶的抑制劑的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
瘧疾是二十一世紀影響人類的最嚴重和最復(fù)雜的健康問題之一。該疾病影響著全世界大約3億人口，每年導(dǎo)致100萬至150萬人死亡。瘧疾是有四種原生性寄生瘧原蟲引起的傳染性疾病，其中惡性瘧原蟲是四種中危害最嚴重的一種。研制針對惡性瘧原蟲的疫苗的所有嘗試迄今為止都是失敗的。因此，針對瘧疾的療法和預(yù)防措施局限于藥物。然而對于許多目前可利用的抗瘧藥都產(chǎn)生了抗藥性，而且這種趨勢在迅速蔓延，因而急需新藥。
惡性瘧原蟲通過雌性按蚊的叮咬進入人體。瘧原蟲屬寄生物開始時在肝臟中繁殖，傳染周期的后期則在紅細胞中繁殖。在此階段，寄生物降解血紅蛋白，利用降解產(chǎn)物作為生長所需的養(yǎng)分[1]。血紅蛋白的降解通過絲氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶進行。天冬氨酸蛋白酶已被證實對于寄生物的生長必不可少。天冬氨酸蛋白酶的一種非選擇性抑制劑，胃酶抑素，能抑制體外紅細胞中惡性瘧原蟲的生長。對于胃酶抑素的類似物，我們得到了相同的結(jié)果[2]，[3]。這些結(jié)果表明對于寄生物天冬氨酸蛋白酶的抑制干擾了惡性瘧原蟲的生長周期。因此，天冬氨酸蛋白酶是抗瘧藥研制針對的目標。
本發(fā)明涉及一些新的低分子量的非肽的抑制劑鑒定，它們能夠作為惡性瘧原蟲蛋白酶-瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II或其它相關(guān)的天冬氨酸蛋白酶的抑制劑，用于治療和/或預(yù)防瘧疾。
符合通用分子式I的化合物用于抑制瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II，HIV蛋白酶，人組織蛋白酶D，人組織蛋白酶E和人腎素，并分別進行檢測，以確定其生物活性和選擇性的范圍。體外測定HIV，瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II，人組織蛋白酶D和人組織蛋白酶E的熒光共振能量轉(zhuǎn)換(FRET)測定測定條件根據(jù)文獻報道[4-7]選定。FRET測定在白色的多層吸附板(Fluoronunc，cat n°437842 A)中進行。測定緩沖液由50mM乙酸鈉pH5，12.5％甘油，0.1％牛血清蛋白和392mM氯化鈉組成(對于HIV蛋白酶而言)。
每孔孵育物包括-160μl緩沖液-10μl抑制劑(DMSO中)-10μl相應(yīng)的底物(DMSO中)(見表A)，最終濃度為1μM-20μl酶，最終達到每測定管中含x ng(x＝10ng/瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II測定管，x＝100ng/HIV蛋白酶測定管，x＝10ng/人組織蛋白酶E測定管和x＝20ng/人組織蛋白酶D檢定管)反應(yīng)通過加入酶引發(fā)。測定在37℃下分別進行30分鐘(對于人組織蛋白酶E而言)，40分鐘(對于瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II和HIV蛋白酶而言)，120分鐘(對于人組織蛋白酶D而言)。反應(yīng)通過加入10％(v/v)的1M堿性三羥甲基氨基甲烷(Tri-base)溶液而終止。通過測量460nm處的熒光來監(jiān)測產(chǎn)物的不斷生成。
所有檢測物的自動熒光在不存在底物和酶的情況下，在檢測緩沖液中測定，該值從最終信號中減去。
表A天冬氨酸蛋白酶熒光測定使用條件的總結(jié)(at＝測定管)腎素中酶的體外測定腎素中酶的體外測定在聚丙烯板(Nurc，cat No 4-42587A)中進行。測定緩沖液由100mM磷酸鈉組成，pH7.4，包括0.1％牛血清蛋白。孵育物包括每孔190μl酶混和物和10μl腎素抑制劑(DMSO中)。酶混和物在4℃下預(yù)混合，其包括·人重組腎素(0.16ng/m1)·合成人十四肽腎素底物(0.5μM)·硫酸羥基喹啉(0.1mM)混合物在37℃下孵育3小時。
為測定酶催化活性及其抑制作用，用酶免疫測定法(EIA)檢測不斷生成的血管緊張素I。10μl培育物或標準物轉(zhuǎn)移到預(yù)先涂覆有血管緊張素I和牛血清蛋白(AngI-BSA)的共價配合物的免疫板上。加入190μl血管緊張素I抗體，在4℃下過夜進行初次孵育。免疫板清洗3次，然后和生物素基化的抗兔抗體在室溫下孵育1小時。隨后免疫板被清洗，和抗生蛋白鏈菌素過氧化酶復(fù)合體在室溫下孵育30分鐘。免疫板清洗后，加入過氧化物酶底物ABTS(2，2’-連氮基-二(3-乙基-苯基噻唑啉磺酸鹽))，免疫板在室溫下孵育10-30分鐘。加入0.1M枸櫞酸pH4.3使反應(yīng)中止，通過微板讀數(shù)計在405nm處對免疫板進行評價。表1用于抑制瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II的選定化合物的IC50值(nM)
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本發(fā)明涉及新穎的低分子量的有機化合物，它們是通用分子式I的取代氨基-氮雜-環(huán)烷類化合物 通用分子式I其中Q表示-SO2-R1；-CO-R1；-CO-NH-R1；-CO-N(R1)(R2)；-CO-OR1；-(CH2)p-R1；-(CH2)p-CH(R1)(R2)；X表示-SO2-R1；-CO-R1；-CO-NH-R1；-CO-N(R1)(R2)；-CO-OR1；-(CH2)p-R1；-(CH2)p-CH(R1)(R2)；氫；R1，R2和R3表示低級烷基；低級鏈烯基；芳基；雜芳基；環(huán)芳基；雜環(huán)基；芳基-低級烷基；雜芳基-低級烷基；環(huán)烷基-低級烷基；雜環(huán)基-低級烷基；芳基-低級鏈烯基；雜芳基-低級鏈烯基；環(huán)烷基-低級鏈烯基；雜環(huán)基-低級鏈烯基；R4表示氫；-CH2-OR5；-CO-OR5；R5表示氫；低級烷基；環(huán)烷基；芳基；雜芳基；雜環(huán)基；環(huán)烷基-低級烷基；芳基-低級烷基；雜芳基-低級烷基；雜環(huán)基-低級烷基；
t表示整數(shù)0或1，如果t表示整數(shù)0，則R4不存在；m表示整數(shù)2，3或4；n表示整數(shù)1或2；p表示整數(shù)0，1或2；和純的對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體混合物，純的非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體，非對映的外消旋體混合物及其藥物上可接受的鹽類。
在通式I的定義中-如果沒有別的表述的話-“低級”指包含1至7個碳原子的直鏈或支鏈基團，最好是1至4個碳原子，因為這些原子能任意地被羥基或低級烷氧基取代。低級烷基基團的例子有甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，己基，庚基。低級烷氧基基團的例子有甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丁氧基，仲丁氧基和叔丁氧基等。作為芳香環(huán)上兩相鄰碳原子上的取代基的低級亞烷基二氧基基團最好是亞甲基二氧基和亞乙基二氧基。作為芳香環(huán)上兩相鄰碳原子上的取代基的低級亞烷基氧基基團最好是亞乙基氧基和亞丙基氧基。低級烷?；睦佑幸阴；；投□；?。低級亞烯基包括亞乙烯基，亞丙烯基和亞丁烯基等。
“環(huán)烷基”，無論單獨的或結(jié)合的，指包含3至6個碳原子的飽和的環(huán)狀烴體系，例如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基和環(huán)己基，它們可以被低級烷基基團取代。
“雜環(huán)基”，無論單獨的或結(jié)合的，指飽和的或不飽和的(但不是芳香族的)五元，六元或七元環(huán)，這些環(huán)包含1個或2個氮原子，氧原子或硫原子，可以相同，也可以不同，這些環(huán)可以被低級烷基，低級鏈烯基，芳基，芳基-低級烷氧基，芳氧基，氨基，二(低級烷基)-氨基，烷?；?氨基，鹵基，硝基，羥基，低級烷氧基，苯氧基取代；這些環(huán)的例子有嗎啉基，哌嗪基，四氫吡喃基，二氫吡喃基，1，4-二烷基，吡咯烷基，四氫呋喃基，二氫吡咯基，咪唑烷基，二氫吡唑基，吡唑烷基等和這些類型的環(huán)被上文所列出的取代基取代后得到的取代衍生物。
“雜芳基”，無論單獨的或結(jié)合的，指包含1至4個氮原子的六元芳香環(huán)；包含1至3個氮原子的苯并稠六元芳香環(huán)；包含1個氧原子，1個氮原子或1個硫原子的五元芳香環(huán)；包含1個氧原子，1個氮原子或1個硫原子的苯并稠五元芳香環(huán)；包含1個氧原子和1個氮原子的五元芳香環(huán)及其苯并稠環(huán)衍生物；包含1個硫原子和1個氮原子或1個氧原子的五元芳香環(huán)及其苯并稠環(huán)衍生物；包含3個氮原子的五元芳香環(huán)及其苯并稠環(huán)衍生物或四唑環(huán)；這些環(huán)的例子有呋喃基，噻吩基，吡咯基，吡啶基，吲哚基，喹啉基，異喹啉基，二氫喹啉基；四氫喹啉基；四氫異喹啉基，咪唑基，三嗪基，噻嗪基，噠嗪基，唑基等，這些環(huán)體系可以被單個，二個或三個芳基；芳氧基；芳基-低級烷氧基；低級烷基；低級鏈烯基；低級烷基-羰基；氨基；低級烷基-氨基；二(低級烷基)-氨基；低級烷?；?氨基；ω-氨基-低級烷基；鹵基；羥基；羧基；低級烷氧基；乙烯氧基；烯丙氧基；ω-羥基-低級烷基；硝基；氰基；脒基；三氟甲基；低級烷基-磺?；热〈?。
“芳基”，無論單獨的還是結(jié)合的，指六元芳香環(huán)和諸如萘基或茚基等稠合體系，這些環(huán)體系可以被單個，二個或三個芳基；芳氧基；芳基-低級烷氧基；低級烷基；低級鏈烯基；低級烷基-羰基；芳基-羰基；氨基；低級烷基-氨基；芳基-氨基；二(低級烷基)-氨基；低級烷?；?氨基；ω-氨基-低級烷基；鹵基；羥基；羧基；低級烷氧基；乙烯氧基；烯丙氧基；ω-羥基-低級烷基；ω-羥基-低級烷氧基；硝基；氰基；脒基；三氟甲基；低級烷基-磺?；热〈?br> 為清楚起見，應(yīng)該理解在通式I至V和權(quán)利要求1至5的定義中，省略了關(guān)于“環(huán)烷基”，“雜環(huán)基”，“雜芳基”，“芳基”這些取代基的表述，然而在閱讀通用分子式I至V和權(quán)利要求1至5的定義時，我們應(yīng)該把它們包含在其中。
“藥物上可接受的鹽類”表示包括和氫氯酸或氫溴酸，硫酸，磷酸，硝酸，檸檬酸，甲酸，乙酸，馬來酸，酒石酸，甲磺酸，對甲苯磺酸等無機酸或有機酸形成的鹽，如果符合通用分子式I的化合物本質(zhì)上是酸性的，那么也包括和氫氧化鈉，氫氧化鉀，氫氧化鈣等如堿或堿土的無機堿形成的鹽類。
通用分子式I的化合物可包括一個或多個不對稱碳原子，并且能夠以光學(xué)上的純的對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體和非對映的外消旋體混合物的形式被制備。
本發(fā)明包含所有這些形式?；旌衔锟梢酝ㄟ^本領(lǐng)域已知的方式進行分離，如柱色譜，薄層色譜，高效液相色譜，結(jié)晶等方法。
符合通式I的化合物和它們的藥物上可接受的鹽類可以藥物組合物的形式用于疾病的治療。它們尤其可用于瘧疾的預(yù)防或治療。這些組合物可以腸內(nèi)的或口服的形式給藥，如片劑，糖衣片，明膠膠囊，乳劑，溶液或混懸劑，也可以鼻用的形式給藥，如噴霧劑，或以直腸栓劑的形式給藥。這些化合物也可以分子內(nèi)的，胃腸道外的，靜脈內(nèi)的形式給藥，如以注射液的形式。
這些藥物組合物不但可以含有符合分子式I的化合物，還可以含有它們同無機和/或有機賦形劑結(jié)合的藥物上可接受的鹽，這些賦形劑常用于藥物工業(yè)，如乳糖，玉米或其衍生物，滑石，硬脂酸或這些材料的鹽。
對明膠膠囊而言，植物油，蠟，脂肪，液體的或半液體的多元醇等可被使用?？墒褂盟嘣?，蔗糖，葡萄糖等制備溶液和糖漿。可使用水，多元醇，乙醇，甘油，植物油，卵磷脂，脂質(zhì)體等制備注射劑。可使用天然油或氫化油，蠟，脂肪酸(脂肪)，液體的或半液體的多元醇等制備栓劑。
這些組合物還可包括防腐劑，穩(wěn)定劑，增粘劑或調(diào)節(jié)劑，增溶劑，甜味劑，染色劑，增味劑，改變滲透壓的鹽，緩沖劑，抗氧劑等。
通用分子式I的化合物也可和一種或更多種其它在治療上有用的物質(zhì)相結(jié)合使用，如和其它抗瘧藥相結(jié)合，這些抗瘧藥有喹啉(奎寧，氯喹，阿莫地喹，甲氟喹，伯氨喹，他非諾喹等，過氧化物抗瘧藥(青篙素衍生物)，乙胺嘧啶-磺胺多辛抗瘧藥(如Fansidar等)，羥萘醌(如阿托代醌等)，acroline型抗瘧藥(如咯萘啶等)等。
劑量可在寬的范圍內(nèi)變化，但應(yīng)與具體的情況相適應(yīng)。一般地，對于一個體重約為70kg的成年人來說，口服劑量應(yīng)在每天3mg左右至3g左右之間，在10mg左右至1g左右之間更好，最好應(yīng)在5mg至300mg之間。每天最好服用相同量的1至3劑藥。按慣例，兒童應(yīng)根據(jù)體重和年齡相應(yīng)地減少劑量。
較好的化合物是具有分子式II的化合物 分子式II其中x，Q，t，R3和R4同上面通用分子式I中的定義和純的對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體混合物，純的非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體，非對映的外消旋體混合物及其藥物上可接受的鹽類。
還有較好的化合物是具有分子式III的化合物 分子式III其中Q，t，R3和R4同上面通式I中的定義和純的對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體混合物，純的非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體，非對映的外消旋體混合物及其藥物上可接受的鹽。
特別優(yōu)選的化合物還有是具有分子式IV的化合物 分子式IV
其中Q同上面通用分子式I中的定義和純的對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體混合物，純的非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體，非對映的外消旋體混合物及其藥物上可接受的鹽。 和純的對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體混合物，純的非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體，非對映的外消旋體混合物及其藥物上可接受的鹽類。
本發(fā)明中通用分子式I的化合物可根據(jù)下面列出的一般反應(yīng)順序來制備，其中R1，R2，R3，R4，R5，Q，X，t，m，n和p同上面通用分子式I中的定義(出于簡潔和清楚的緣故，僅描述能生成具有分子式I至V的化合物的可能合成部分)。某些步驟的一般方法參見19-23頁。
方案1取代4-氨基-N-芐基-哌啶類化合物的制備 還原氨基化反應(yīng)的典型步驟(化合物2的合成)胺(1)和醛{R3-CHO}(1.5eq.)在無水甲醇中混合，攪拌6小時?；旌衔锶缓笥门饸浠c(1.5eq.)處理，攪拌2小時。加入純化的大孔樹脂15或其它合適的清除劑，懸浮液搖動12小時。通過過濾分離出樹脂，然后用甲醇洗滌樹脂。加入2M的甲醇銨溶液把仲胺2從樹脂中除去。30分鐘后樹脂排出液體，然后用甲醇洗滌樹脂。把濾液蒸干，得到純的仲胺2。
?；磻?yīng)的典型步驟(化合物3的合成)向胺2的無水乙酸乙酯溶液中加入真空干燥的大孔樹脂21或其它合適的清除劑，然后加入羧酸氯{R1-(CO)-Cl}(1.5eq.)。懸浮液搖動2小時后，加入等量的水以使過量的羧酸氯水解，搖動繼續(xù)進行1小時。通過過濾除去樹脂，用乙酸乙酯洗滌樹脂，把溶液蒸干，得到純的酰胺3。
羧酸氯化合物{R1-(CO)-Cl}可以由相應(yīng)的羧酸原位生成，如文獻所述(Devos，A.；Remion，J；Frisque-hesbain，A.-M.；Colens，A；Ghosez，L.，J.Chem.Soc.，Chem.Commun. 1979，1180)。
由胺2合成氨磺酰衍生物可以按照類似于上文所述的步驟進行。
尿素衍生物可以由胺2在二氯甲烷中與等量的異氰酸酯反應(yīng)生成。
二次還原氨基化反應(yīng)的典型步驟(化合物6的合成)胺(2)和醛或酮{R1R2CO}(1.5eq.)在無水二氯甲烷中混合，加入三乙酰氧基氫硼化鈉(1.3eq.)。溶液攪拌48小時后，加入甲醇，用與處理胺2相同的方式處理反應(yīng)混合物。
方案2取代4-氨基-N-(低級烷基-芳基)-哌啶類化合物的制備
N-叔丁氧基羰基(Boc)保護的4-氨基-哌啶7(方案2)可以經(jīng)過兩步制備，首先是4-羥基-N-叔丁氧基羰基(Boc)-哌啶在諸如二氯甲烷(DCM)等惰性溶液中與甲磺酰氯反應(yīng)生成4-甲磺酰氧基-N-叔丁氧基羰基-哌啶，反應(yīng)在堿存在的條件下，如三乙胺(TEA)下進行。甲磺酰氧基被氮化鈉取代，然后由于氮化物的官能性對氨基基團的還原生成7。胺7按照上文所述的還原氨基化反應(yīng)的典型步驟轉(zhuǎn)變?yōu)橹侔??；衔?，10，11和12也可按照上文所述的典型步驟合成。叔丁氧基羰基的解保護可以在諸如二乙醚、二氧六環(huán)等溶劑中和氫氯酸作用進行或在二氯甲烷(DCM)中和三氟乙酸(TFA)作用進行。衍生物13，14，15和16變成完全衍生的最終化合物17，18，19和20的二次還原氨基化反應(yīng)可按照上文所述的典型步驟進行?；衔?3，14，15和16也能通過和異氰酸酯，?；?，磺酰氯等?；噭┓磻?yīng)，生成環(huán)氮原子上具有尿素，酰胺或磺酰胺官能性而不是具有胺官能性的產(chǎn)物。
基于3-氨基-哌啶模板的化合物(見方案3)可以3-氨基-N-叔丁氧基羰基-哌啶為原材料進行制備，原材料的制備方法同7。所有其它化學(xué)轉(zhuǎn)變可按照方案2中所述方法進行。
基于五元或七元環(huán)模板的化合物(見方案4)可按照上文所述的步驟進行制備。七元環(huán)35可通過在醚合三氟化硼存在的條件下，1-芐基-4-哌啶酮和重氮基乙酸乙酯進行環(huán)拉伸而生成。然后進行水解，在10％HCl中對溶液加熱進行脫羧反應(yīng)生成模板35。接著按照二次還原氨基化反應(yīng)的典型步驟可得到胺36。
方案3
方案4
方案5“羥甲基類似物”的合成 根據(jù)圖5中所示實施例的合成，其它衍生物可通過改變原材料進行制備。
所有化學(xué)轉(zhuǎn)變均可按照文獻中所述的已知標準工藝或上文所述的典型步驟進行。
下面用實施例來說明本發(fā)明，但并沒有限制發(fā)明的范圍。所有溫度均用℃表示。
縮寫詞列表Boc或boc 叔丁氧基羰基Cbz 芐氧基羰基DBU 1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(1，5-5)DCM 二氯甲烷DMF 二甲基甲酰胺DMSO 二甲基亞砜EtOAc乙酸乙酯TEA 三乙胺TFA 三氟乙酸THF 四氫呋喃TLC 薄層色譜一般步驟和實施例下面的化合物可按照上文所述的合成通式所包含的化合物的步驟進行制備。所有化合物均用1H-NMR(300MHz)進行表征，偶爾用13C-NMR(75MHz)進行表征(Varian Oxford，300MHz；相對于所用溶劑的化學(xué)位移以ppm給出；峰裂數(shù)s＝單峰，d＝雙峰，t＝三重峰；m＝多重峰)，用LC-MS(Waters Micromass；帶有電噴霧探針和Alliance 2790 HT的ZMD平臺；柱子2×30mm，Gromsil ODS4，3μm，120A；梯度0-100％乙腈水溶液，6分鐘，含0.05％的甲酸；流量0.45ml/min；tr以分鐘或Finnigan AQA/HP1100給出；柱子Develosil C30 Aqua，50×4.6mm，5μm；梯度5-95％乙腈水溶液，1分鐘，含0.03％的三乙胺；流量4.5ml/min)和TLC(薄層色譜板Merck，硅膠60 F254)進行表征，偶爾用熔點進行表征。a)一般步驟還原氨基化反應(yīng)的典型步驟A)胺和醛(1.5eq.)(作為原材料使用，為已知化合物或其合成方法分別在上下文中描述)在無水甲醇中混合，攪拌6小時?；旌衔锶缓笥门饸浠c(1.5eq.)處理，攪拌2小時。加入純化的大孔樹脂15或其它合適的清除劑，懸浮液搖動12小時。然后通過過濾分離出樹脂，用甲醇洗滌樹脂。加入2M甲醇銨溶液將仲胺從樹脂中除去。30分鐘后樹脂排出液體，然后用甲醇洗滌樹脂。把濾液蒸干，得到純的仲胺。
?；磻?yīng)的典型步驟B)向胺的無水乙酸乙酯溶液中加入真空干燥的大孔樹脂21或其它合適的清除劑，然后加入羧酸氯(1.5eq.)。懸浮液搖動2小時后，加入等量的水以使過量的羧酸氯水解，搖動繼續(xù)進行1小時。通過過濾除去樹脂，用乙酸乙酯洗滌樹脂，把溶液蒸干，得到純的酰胺。
二次還原氨基化反應(yīng)的典型步驟C)胺和醛(1.5eq.)在無水二氯甲烷中混合，加入三乙酰氧基氫硼化鈉(1.3eq.)。溶液攪拌48小時后，加入甲醇，用與步驟A)中所描述的相同的方式處理反應(yīng)混合物。
Suzuki偶合反應(yīng)的典型步驟D)向溴化物的甲苯溶液中加入硼酸(1.1eq.)的異丙醇溶液和2M的碳酸鉀(5eq.)水溶液。混合物用氮氣凈化10分鐘，然后加入三苯基膦鈀(0.03eq.)。加熱回流6小時后，水加入被冷卻的反應(yīng)混合物中，用乙酸乙酯萃取產(chǎn)品。有機相用鹽水洗滌，并加入硫酸鈉干燥。把溶劑蒸干，得到粗產(chǎn)品醛，用液閃色譜法(乙酸乙酯/庚烷梯度)進行提純。b)實施例實施例1按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺a)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-(4-芐氧基芐基)-N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝4.95；ES+561.7實施例2按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺b)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-戊基-N-(3-苯丙基)苯甲酰胺LC-MStR＝4.82；ES+483.5實施例3按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺c)和4-丁氧基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-(4-芐氧基芐基)-N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-丁氧基苯甲酰胺LC-MS；tR＝4.57；ES+563.44實施例4按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺c)和4-乙基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-(4-芐氧基芐基)-N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-乙基苯甲酰胺LC-MStR＝4.32；ES+519.41實施例5按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺c)和庚酰氯反應(yīng)生成 庚酸(4-芐氧基芐基)-[4-(1-芐基)哌啶基]酰胺LC-MStR＝4.42；ES+499.39實施例6按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺c)和十二烷酰氯反應(yīng)生成 十二烷酸(4-卞氧基芐基)-[4-(1-芐基)哌啶基]酰胺LC-MStR＝5.22；ES+569.56實施例7按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺d)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-戊基-N-(4-苯氧基芐基)苯甲酰胺LC-MStR＝4.80；ES+547.46實施例8按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺d)和4-丁氧基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-丁氧基-N-(4-苯氧基芐基)苯甲酰胺LC-MStR＝4.60；ES+549.47實施例9按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺d)和十二烷酰氯反應(yīng)生成 十二烷酸[4-(1-芐基)哌啶基]-(4-苯氧基芐基)酰胺LC-MStR＝5.16；ES+555.50實施例10按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺e)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-N-(3，4-二-芐氧基芐基)-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝5.05；ES+667.55實施例11按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺e)和4-丁氧基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-N-(3，4-二-芐氧基芐基)-4-丁氧基苯甲酰胺LC-MStR＝4.83；ES+669.49實施例12按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺e)和4-乙基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-N-(3，4-二-芐氧基芐基)-4-乙基苯甲酰胺LC-MStR＝4.59；ES+625.61實施例13按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺e)和十二烷酰氯反應(yīng)生成 十二烷酸[4-(1-芐基)哌啶基]-(3，4-二-芐氧基芐基)酰胺LC-MStR＝5.49；ES+675.74實施例14按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺f)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-N-(4-聯(lián)苯基)甲基-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝4.82；ES+531.46實施例15按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺f)和4-丁氧基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-N-(4-聯(lián)苯基)-4-丁氧基苯甲酰胺LC-MStR＝4.49；ES+533.43實施例16按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺f)和十二烷酰氯反應(yīng)生成 十二烷酸[4-(1-芐基)哌啶基]-(4-聯(lián)苯基)甲基酰胺LC-MStR＝5.22；ES+539.51實施例17
按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺g)和4-叔丁基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-叔丁基-N-(2-戊基-3-苯基烯丙基)苯甲酰胺LC-MStR＝4.93；ES+537.48實施例18按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺h)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-戊基-N-(4-三氟甲基芐基)苯甲酰胺LC-MStR＝4.58；ES+523.43實施例19按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺h)和4-丁氧基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-丁氧基-N-(4-三氟甲基芐基)苯甲酰胺LC-MStR＝4.34；ES+525.48實施例20按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺h)和十二烷酰氯反應(yīng)生成 十二烷酸[4-(1-芐基)哌啶基]-(4-三氟甲基芐基)酰胺LC-MStR＝5.03；ES+531.43實施例21按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺i)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-(3-芐氧基-4-甲氧基芐基)-N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝4.62；ES+591.43實施例22按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺j)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-(4-芐氧基-3-甲氧基芐基)-N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝4.70；ES+591.46實施例23按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺j)和十二烷酰氯反應(yīng)生成 十二烷酸(4-芐氧基-3-甲氧基芐基)-[4-(1-芐基)哌啶基]酰胺LC-MStR＝5.12；ES+599.71實施例24按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺k)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-N-(4-丁基芐基)-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝5.02；ES+511.56實施例25按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺1)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-N-(4-丁氧基芐基)-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝4.92；ES+527.58實施例26按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺m)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-戊基-N-(4-戊基芐基)苯甲酰胺LC-MStR＝5.14；ES+525.60實施例27按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺a)和4-丁基苯基異氰酸酯反應(yīng)生成 1-(4-芐氧基芐基)-1-[4-(1-芐基)哌啶基]-3-(4-丁基苯基)脲LC-MStR＝4.70；ES+562.53實施例28按照典型步驟B)，由圖4所示方法制備的仲胺n)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[(1S)-1-(4-芐氧基苯基)-2-羥乙基]-N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝4.47；ES+591.61實施例29按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺a)和4-丙基苯磺酰氯反應(yīng)生成 N-(4-芐氧基芐基)-N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-丙基苯磺酰胺LC-MStR＝4.63；ES+569.56實施例30按照典型步驟C)，由典型步驟A)得到的仲胺m)和4-三氟甲基苯甲醛反應(yīng)生成 [4-(1-芐基)哌啶基]-(4-戊基芐基)-(4-三氟甲基芐基)酰胺LC-MStR＝4.91；ES+509.60實施例31按照典型步驟C)，由典型步驟A)得到的仲胺m)和4-聯(lián)苯基甲醛反應(yīng)生成 [4-(1-芐基)哌啶基]-4-聯(lián)苯基甲基-4-(戊基芐基)酰胺LC-MStR＝4.84；ES+517.55實施例32按照典型步驟C)，由典型步驟A)和B)得到的仲胺o)和3-甲?；秽磻?yīng)生成 N-[4-(4′-氰基聯(lián)苯基)甲基]-N-{4-[1-(3-呋喃基)甲基]哌啶基}-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝1.05；ES+546.19實施例33按照典型步驟C)，由典型步驟A)得到的仲胺p)和4-戊基苯甲醛反應(yīng)生成 2-(4-((4′-{[4-(1-芐基)哌啶基]-(4-戊基芐基)-氨基}甲基)聯(lián)苯基)氧基)乙醇LC-MStR＝4.32；ES+577.49實施例34按照典型步驟C)，由圖4所示方法制備的仲胺q)和4-戊基苯甲醛反應(yīng)生成 (rac.)-4-[4-(1-芐基氮雜環(huán)庚基)聯(lián)苯基]甲基-(4-戊基芐基)胺LC-MStR＝4.41；ES+531.53實施例35按照典型步驟B)，由圖4所示方法制備的仲胺q)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 (rac.)-N-[4-(1-芐基)氮雜環(huán)庚基]-N-(4-聯(lián)苯基甲基)-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝4.94；ES+545.42實施例36按照典型步驟B)，由典型步驟A)得到的仲胺r)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成 N-[(3S)-3-(1-芐基)吡咯烷基]-N-(4-聯(lián)苯基甲基)-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝5.08；ES+517.44實施例37按照典型步驟B)，由典型步驟C)得到的仲胺s)和4-戊基苯甲酰氯反應(yīng)生成
N-(4-芐氧基苯基)-N-[4-(1-芐基)哌啶基]-4-戊基苯甲酰胺LC-MStR＝4.57；ES+547.84附加實施例，
aLC-MS由Finningan AQA/HP系統(tǒng)測定。
更多實施例 C)參比實施例(例如商業(yè)上不可獲得的原材料)參比實施例1按照典型步驟D)，4-甲酰基苯基硼酸和2-(4-溴代苯氧基)乙醇偶合生成 4-[4′-(2-羥基乙氧基)]聯(lián)苯基甲醛參比實施例2按照典型步驟D)，4-甲?；交鹚岷?-溴-2-氟代苯偶合生成 4-(2′-氟代聯(lián)苯基)甲醛參比實施例3按照典型步驟D)，4-甲酰基苯基硼酸和1-溴-3-三氟甲基苯偶合生成 參比實施例4按照典型步驟D)，4-甲?；交鹚岷?-溴-2-氯代苯偶合生成 4-(2′-氯代聯(lián)苯基)甲醛參比實施例5按照典型步驟D)，4-甲?；交鹚岷?-溴代嘧啶偶合生成 5-(4-嘧啶基)苯甲醛參比實施例6按照典型步驟D)，4-甲?；交鹚岷?-溴-3-(三氟甲氧基)苯偶合生成 4-(3′-三氟甲氧基聯(lián)苯基)甲醛參比實施例7按照典型步驟D)，4-甲酰基苯基硼酸和1-溴-3，4-二甲氧基苯偶合生成 4-(3′，4′-二甲氧基聯(lián)苯基)甲醛參比實施例8按照典型步驟D)，4-甲?；交鹚岷?-溴-苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯偶合生成 5-(4-苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯基)苯甲醛參比實施例9按照典型步驟D)，4-甲?；交鹚岷?-溴代吡啶偶合生成 3-(4-吡啶基)苯甲醛參比實施例10按照典型步驟D)，4-甲?；交鹚岷?-溴代吡啶偶合生成 4-(4-吡啶基)苯甲醛參比實施例11按照典型步驟D)，4-甲?；交鹚岷?-溴代芐腈偶合生成 4-(4′-甲?；?lián)苯基)腈參比實施例12按照典型步驟D)，4-甲?；交鹚岷?-溴代甲苯偶合生成 4-(3′-甲基聯(lián)苯基)甲醛參比實施例13下面的聯(lián)芳基衍生物可按照典型步驟D)制備
權(quán)利要求
1.通用分子式I的化合物 其中Q表示-SO2-R1；-CO-R1；-CO-NH-R1；-CO-N(R1)(R2)；-CO-OR1；-(CH2)p-R1；-(CH2)p-CH(R1)(R2)；X表示-SO2-R1；-CO-R1；-CO-NH-R1；-CO-N(R1)(R2)；-CO-OR1；-(CH2)p-R1；-(CH2)p-CH(R1)(R2)；氫；R1，R2和R3表示低級烷基；低級鏈烯基；芳基；雜芳基；環(huán)芳基；雜環(huán)基；芳基-低級烷基；雜芳基-低級烷基；環(huán)烷基-低級烷基；雜環(huán)基-低級烷基；芳基-低級鏈烯基；雜芳基-低級鏈烯基；環(huán)烷基-低級鏈烯基；雜環(huán)基-低級鏈烯基；R4表示氫；-CH2-OR5；-CO-OR5；R5表示氫；低級烷基；環(huán)烷基；芳基；雜芳基；雜環(huán)基；環(huán)烷基-低級烷基；芳基-低級烷基；雜芳基-低級烷基；雜環(huán)基-低級烷基；t表示整數(shù)0或1，如果t表示整數(shù)0，則R4不存在；m表示整數(shù)2，3或4；n表示整數(shù)1或2；p表示整數(shù)0，1或2；和純的對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體混合物，純的非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體，非對映的外消旋體混合物及其藥物上可接受的鹽類。
2.具有分子式II的化合物 分子式II其中x，Q，t，R3和R4同上面通用分子式I中的定義和純的對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體混合物，純的非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體，非對映的外消旋體混合物及其藥物上可接受的鹽類。
3.具有分子式III的化合物 分子式III其中Q，t，R3和R4同上面通用分子式I中的定義和純的對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體混合物，純的非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體，非對映的外消旋體混合物及其藥物上可接受的鹽類。
4.具有分子式IV的化合物 分子式IV其中Q已同上面通式I中的定義和純的對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體混合物，純的非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體，非對映的外消旋體混合物及其藥物上可接受的鹽類。
5.具有分子式V的化合物 和純的對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體混合物，純的非對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物，非對映的外消旋體，非對映的外消旋體混合物及其藥物上可接受的鹽類。
6.實施例1至140的任一個中描述的作為最終產(chǎn)品的化合物。
7.包含一種或多種權(quán)利要求1至6的任一項中所述的化合物和惰性賦形劑的藥物組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其用于治療需要抑制天冬氨酸蛋白酶的疾病。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其用于治療和瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II作用相關(guān)的，以及需要對瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II的選擇性抑制的紊亂病癥。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其用于瘧疾的治療或預(yù)防。
11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其用于由原生性感染(例如恰一克二氏病，昏睡病等)引起的疾病的治療或預(yù)防。
12.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物組合物，除包含一種或多種符合通式I的化合物，還包含已知的瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II，已知的HIV蛋白酶或已知的組織蛋白酶D或E的抑制劑。
13.根據(jù)權(quán)利要求8至11的任一項中所述的藥物組合物的制備工藝，其特征在于將一種或多種根據(jù)權(quán)利要求1至6的任一項中所述的活性組分和惰性賦形劑以本領(lǐng)域已知的方式混合在一起。
14.至少一種符合通用分子式I的化合物的用于疾病的治療或預(yù)防的應(yīng)用。
15.上文所描述的發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明涉及一些新穎的化合物，它們是符合通用分子式I的取代氨基－氮雜－環(huán)烷類衍生物。本發(fā)明還涉及包括這些化合物的制備工藝，包含一種或更多種符合通用分子式I的化合物的藥物組合物，特別是它們作為惡性瘧原蟲蛋白酶—瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶II或相關(guān)的天冬氨酸蛋白酶的抑制劑的應(yīng)用。
文檔編號C07D211/58GK1458923SQ01815832
公開日2003年11月26日 申請日期2001年9月6日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月25日
發(fā)明者克里斯托夫博斯, 瓦爾特·菲施利, 索拉格·邁耶, 西爾維婭·理查德－比洛－斯泰恩, 托馬斯·韋勒 申請人:?？铺厝R茵藥品有限公司