專利名稱：癌癥治療藥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以氨柔比星或其藥學上可接受的鹽為有效成分、在與抗HER2抗體的聯(lián)合用藥療法中使用的癌癥治療藥。
氨柔比星的特征在于在機體內(nèi)容易地還原得到的代謝物(氨柔比星醇(amrubicinol)蒽環(huán)骨架上13位的羥基化物)具有比氨柔比星更強的抗癌活性。而阿霉素和柔紅霉素沒有這樣的特性(CancerChemother.Pharmacol.，30，51-57(1992))。此外，在兔子慢性實驗模型中，氨柔比星的心臟毒性遠遠低于阿霉素(Invest.New Drug，15，219-225，(1997))。
已知蒽環(huán)類抗癌藥雖然構(gòu)造類似，但存在如下所述適應癥和作用機理等的不同。
柔紅霉素和伊達比星對白血病有效，但對實體癌卻無效。而阿霉素、表柔比星、吡柔比星和阿柔比星對實體癌有功效(日本醫(yī)藥品集第23版2000、藥業(yè)時報社)。柔紅霉素、阿霉素對DNA合成與RNA合成有同等程度的阻礙作用，而阿柔比星、麻西羅霉素對RNA合成的阻礙作用要比對DNA合成的阻礙作用強，抗腫瘤作用的表現(xiàn)機理完全不同(JJSHP 27，1087-1110，(1991))。柔紅霉素、阿霉素的13位酮被還原后，其細胞增殖抑制作用減弱，而伊達比星則是其還原體也顯示出同等程度的抑制作用(Cancer Chemother.Pharmacol.，30，51-57(1992))。另一方面，氨柔比星的還原體顯示出很強的抑制作用(Jpn.J.cancer Res.89，1067-1073，(1998))。在小鼠實驗系列中發(fā)現(xiàn)，阿霉素的靜脈給藥無腫瘤選擇性，而氨柔比星在靜脈給藥卻有腫瘤選擇性(Jpn.J.Cancner Res.89，1061-1066，(1998))。阿霉素的嵌入活性約比氨柔比星和氨柔比星醇強大約10倍(Jpn.J.Cancer Res.89，1229-1238，(1998))。阿霉素、柔紅霉素多數(shù)分布在細胞核里，而氨柔比星、伊達比星則多數(shù)分布在細胞質(zhì)里(Ann.Haematol.69，S13-S17，(1994)，Jpn.J.Cancer Res.89，1229-1238，(1998)，Urol.Res.25，125-130，(1997))。氨柔比星、氨柔比星醇在50％抑制細胞增殖的濃度可使拓撲異構(gòu)酶II介導的可分裂復合體充分穩(wěn)定，而阿霉素在50％抑制細胞增殖的濃度則不能使可分裂復合體穩(wěn)定(Jpn.J.Cancer Res.89，1229-1238，(1998))。
如上所述，即使同為蒽環(huán)類化合物，其作用機理也有很大的不同，適應癥也不同。其中阿霉素和氨柔比星、氨柔比星醇的化學結(jié)構(gòu)雖然非常近似，但抗癌作用的作用機理還是有很大不同。
最近，有關(guān)于將蒽環(huán)類化合物阿霉素與HerceptinTM聯(lián)合用藥產(chǎn)生抗癌作用的報告，在體外實驗中已確認，阿霉素與HerceptinTM聯(lián)合用藥具有相加的效果(M.Pegram et al.，Oncogene，18，2241-2251(1999))。但是因為有報道顯示如果將阿霉素和HerceptinTM聯(lián)合使用，在臨床上會高頻率地出現(xiàn)心臟毒性(Genentech公司互聯(lián)網(wǎng)主頁)，所以聯(lián)合用藥療法未被認為是一定有效的方法。HerceptinTM是人上皮細胞生長因子受體2蛋白質(zhì)(human epidermal growth factorreceptor 2 protein，以下簡稱HER2)的一種抗體，被用作乳癌的治療藥物。
發(fā)明的公開本發(fā)明的目的是提供通過將氨柔比星或其藥學上可接受的鹽與抗HER2抗體(如HerceptinTM)聯(lián)合用藥而得到的癌癥治療藥。
本發(fā)明者們旨在提高氨柔比星的抗癌作用，對其與各種藥物聯(lián)合用藥的效果進行研究，發(fā)現(xiàn)通過與HerceptinTM聯(lián)合用藥能達到預期的效果。即發(fā)現(xiàn)通過將氨柔比星與HerceptinTM聯(lián)合用藥，對癌細胞株有協(xié)同作用，同時對心臟毒性影響很小，從而完成了本發(fā)明。比較本發(fā)明和阿霉素的HerceptinTM聯(lián)合用藥療法，如前所述，阿霉素與HerceptinTM聯(lián)合用藥只有相加效果，而本發(fā)明具有協(xié)同作用。此外，阿霉素與HerceptinTM聯(lián)合用藥有高頻度的心臟毒性，難以用于臨床，而本發(fā)明對心臟毒性影響很小，有望成為新的癌癥治療藥。本發(fā)明與阿霉素的這些效果差異，可認為是氨柔比星和阿霉素的作用機理差異的反映。
本發(fā)明的要點如下(1)以氨柔比星或其藥學上可接受的鹽為有效成分、在與抗HER2抗體的聯(lián)合用藥療法中使用的癌癥治療藥。
(2)上述(1)記載的治療藥，其中癌癥是乳癌、胃癌、腎癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宮體癌或肺癌。
(3)上述(1)或(2)記載的治療藥，其中癌癥是HER2高表現(xiàn)型的癌癥。
(4)上述(1)～(3)任何一項中記載的治療藥，其中抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日時，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是0.5～3.0mg/kg/日。
(5)上述(4)記載的治療藥，其中氨柔比星或其藥學上可接受的鹽每3周連續(xù)3日給藥，抗HER2抗體每周給藥。
(6)上述(1)～(3)任何一項中記載的治療藥，其中抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日時，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是1.5～9.0mg/kg/日。
(7)上述(6)記載的治療藥，其中氨柔比星或其藥學上可接受的鹽每3周給藥，抗HER2抗體每周給藥。
(8)上述(1)～(7)任何一項中記載的治療藥，其特征在于氨柔比星或其藥學上可接受的鹽與抗HER2抗體的用量比在兩者開始給藥的一周里為2∶1～8∶1。
(9)氨柔比星或其藥學上可接受的鹽在制造可與抗HER2抗體聯(lián)合用藥的癌癥治療藥中的應用。
(10)上述(9)記載的應用，其中癌癥是乳癌、胃癌、腎癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宮體癌或肺癌。
(11)上述(9)或(10)記載的應用，其中癌癥是HER2高表現(xiàn)型的癌癥。
(12)上述(9)～(11)任何一項中記載的應用，其中抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日時，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是0.5～3.0mg/kg/日。
(13)上述(12)記載的應用，其中氨柔比星或其藥學上可接受的鹽每3周連續(xù)3日給藥，抗HER2抗體每周給藥。
(14)上述(9)～(11)任何一項中記載的應用，其中抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日時，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是1.5～9.0mg/kg/日。
(15)上述(14)記載的應用，其中氨柔比星或其藥學上可接受的鹽每3周給藥，抗HER2抗體每周給藥。
(16)上述(9)～(15)任何一項中記載的應用，其特征在于氨柔比星或其藥學上可接受的鹽與抗HER2抗體的用量比在兩者開始給藥的一周里為2∶1～8∶1。
(17)癌癥的治療方法，其特征在于將有效量的抗HER2抗體與有效量的氨柔比星或其藥學上可接受的鹽聯(lián)合用藥。
(18)上述(17)記載的治療方法，其中癌癥是乳癌、胃癌、腎癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宮體癌或肺癌。
(19)上述(17)或(18)記載的治療方法，其中癌癥是HER2高表現(xiàn)型的癌癥。
(20)上述(17)～(19)任何一項中記載的治療方法，其特征在于抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是0.5～3.0mg/kg/日。
(21)上述(20)記載的治療方法，該方法包括將氨柔比星或其藥學上可接受的鹽每3周連續(xù)3日給藥，將抗HER2抗體每周給藥。
(22)上述(17)～(19)任何一項中記載的治療方法，其特征在于抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是1.5～9.0mg/kg/日。
(23)上述(22)記載的治療方法，該方法包括將氨柔比星或其藥學上可接受的鹽每3周給藥，將抗HER2抗體每周給藥。
(24)上述(17)～(23)任何一項中記載的治療方法，其特征在于氨柔比星或其藥學上可接受的鹽與抗HER2抗體的用量比在兩者開始給藥的一周里為2∶1～8∶1。
(25)用于癌癥治療的試劑盒，該試劑盒包括含有氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的第1組合物、含有抗HER2抗體的第2組合物。
(26)上述(1)～(25)任何一項中記載的治療藥、應用、方法、試劑盒等，其中將Herceptin用作抗HER2抗體。
本發(fā)明的癌癥治療藥是以有效量的氨柔比星、氨柔比星醇或其藥學上可接受的鹽為有效成分，可與有效量的抗HER2抗體聯(lián)合用藥的癌癥治療藥。
以氨柔比星、氨柔比星醇或其藥學上可接受的鹽為有效成分的本發(fā)明癌癥治療藥通過與抗HER2抗體聯(lián)合用藥，能提高抗HER2抗體的癌癥治療效果。
氨柔比星、氨柔比星醇的藥學上可接受的鹽的例子有酸加成鹽和堿加成鹽。酸加成鹽的例子有鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽等無機酸鹽；檸檬酸鹽、草酸鹽、乙酸鹽、甲酸鹽、丙酸鹽、苯甲酸鹽、三氟乙酸鹽、反丁烯二酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、天冬氨酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、樟腦-磺酸鹽等有機酸鹽。堿加成鹽的例子有鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、銨鹽等無機堿鹽；三乙基銨鹽、三乙醇銨鹽、吡啶鎓鹽、二異丙基銨鹽等有機堿鹽等。
抗HER2抗體是指HER2(人上皮細胞生長因子受體2蛋白質(zhì)(human epidermal growth factor receptor 2 protein))的抗體，具有抑制HER2高表現(xiàn)型癌細胞增殖的作用。本抗體含有多克隆抗體、單克隆抗體、嵌合抗體、擬人化抗體等，可通過公知的方法制備得到。例如抗HER2單克隆抗體可通過WO89/06692中記載的方法制備得到。擬人化抗HER2抗體可通過WO94/04679中記載的方法制備得到?？笻ER2抗體的優(yōu)選例子有擬人化抗體，具體如trastuzumab(Trastuzumab、HerceptinTM、Genentech社)。
雖然對本發(fā)明的癌癥治療藥的治療對象沒有特別限定，但優(yōu)選HER2高表現(xiàn)型的癌。比如乳癌、胃癌、腎癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宮體癌和肺癌等，特別優(yōu)選乳癌。
對于癌癥患者，可以先給予氨柔比星或其藥學上可接受的鹽，也可以先給予抗HER2抗體，或同時給藥。在不是同時給藥的情況下，可以適當決定兩者的給藥時間間隔。
根據(jù)本發(fā)明，因為氨柔比星和抗HER2抗體聯(lián)合用藥有協(xié)同作用，所以氨柔比星或其藥學上可接受的鹽與抗HER2抗體以低于通常用量的低用量聯(lián)合用藥，就能獲得癌癥治療效果。因此通過本發(fā)明，可將因提高氨柔比星或其藥學上可接受的鹽和抗HER2抗體的用量而引起的副作用控制在最小范圍內(nèi)。
在本發(fā)明中，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽通常能以非口服的形式(如靜脈內(nèi)、皮下、或肌肉注射、膀胱內(nèi)、局部、直腸、經(jīng)皮、或經(jīng)鼻的形式)給藥。優(yōu)選靜脈內(nèi)給藥。此外也可以口服給藥，用于口服給藥的劑型的例子有片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、散劑、液體劑、糖漿劑或懸浮劑等。
本發(fā)明中的氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量、給藥次數(shù)，隨患者的癥狀、年齡、體重、給藥形式、聯(lián)合用藥的抗HER2抗體的給藥量、給藥次數(shù)等不同而不同。作為注射劑給藥時，通常對于成年人約10mg～約1000mg/日，優(yōu)選約30mg～約500mg/日，可以一次或分成數(shù)次給藥?？诜o藥時，通常對于成年人約100mg～約3000mg/日，優(yōu)選約300mg～約1500mg/日，可以一次或分成數(shù)次給藥。并且可以以約1日～約30日的間隔反復給藥。
本發(fā)明中，抗HER2抗體通常在可能的靶癌細胞部位以非口服形式給藥，或靜脈內(nèi)給藥。靜脈內(nèi)給藥時，優(yōu)選控制在約30分鐘～約90分鐘內(nèi)進行靜脈輸液。為了非口服給藥，可將抗HER2抗體與藥學上可接受的非經(jīng)口用賦形劑一起，制成注射用給藥劑型(溶液、懸浮液、乳劑)。這樣的賦形劑本身是無毒的、非治療物質(zhì)。這樣的賦形劑的例子有水、生理鹽水、林格溶液、葡萄糖溶液、和5％的人血清白蛋白。也可使用非揮發(fā)性油和油酸乙酯等非水性賦形劑也能使用。賦形劑可以含有增加等張性和化學穩(wěn)定性的物質(zhì)如緩沖劑、穩(wěn)定劑等物質(zhì)。
本發(fā)明中的抗HER2抗體的給藥量、給藥次數(shù)隨患者的癥狀、年齡、體重、給藥形式、聯(lián)合用藥的氨柔比星的給藥量、給藥次數(shù)等不同而不同。通常對于成年人約5mg～約1000mg/日，優(yōu)選約10mg～約300mg/日，可以一次或分成數(shù)次給藥。并且可以以約5日～約10日的間隔反復給藥。
說明本發(fā)明的癌抑制作用的優(yōu)選形式。如鹽酸氨柔比星和HerceptinTM聯(lián)合用藥的用量比優(yōu)選2∶1～8∶1。如實施例1中所示，因為氨柔比星在機體內(nèi)很容易轉(zhuǎn)換成活性代謝物氨柔比星醇，所以可以認為氨柔比星醇與HerceptinTM的體外聯(lián)合用藥表現(xiàn)出協(xié)同作用的濃度比2∶1～8∶1反映了鹽酸氨柔比星與HerceptinTM的用量比。
在對癌患者進行治療的情況下，鹽酸氨柔比星與HerceptinTM在開始給藥的一周里的用量比也同樣優(yōu)選2∶1～8∶1。
鹽酸氨柔比星的給藥方式在約1.5～約9.0mg/kg的用量下單次給藥，或在約0.5～約3.0mg/kg的用量下連續(xù)3日給藥，間隔3周反復給藥。優(yōu)選靜脈內(nèi)給藥。HerceptinTM的給藥方式在約0.1～約4.5mg/kg的用量范圍內(nèi)靜脈給藥，每周給藥一次。
鹽酸氨柔比星和HerceptinTM的給藥以3周為一個循環(huán)。在各循環(huán)中優(yōu)選同一日期開始給藥。即，在將鹽酸氨柔比星連續(xù)3日給藥時，優(yōu)選在各循環(huán)的第1、2、3日給予鹽酸氨柔比星，第1、8、15日給予HerceptinTM。
本發(fā)明還包含用于癌癥聯(lián)合用藥治療的試劑盒，該試劑盒包括(a)含有以氨柔比星或其藥學上可接受的鹽為活性成分的第1組合物、和(b)含有以抗HER2抗體為活性成分的第2組合物。
鹽酸氨柔比星和HerceptinTM聯(lián)合用藥對心臟毒性影響很小，這可以通過使用對HerceptinTM反應的猴子的實驗進行確認。即，雖然鹽酸阿霉素和HerceptinTM靜脈內(nèi)給藥時，表現(xiàn)出很強的心臟毒性，但同樣條件下，即使給予2倍量的鹽酸氨柔比星，恒河猴也沒有表現(xiàn)出心臟毒性。給予鹽酸阿霉素的2倍量的鹽酸氨柔比星，是以兩者的治療劑量為基礎(chǔ)。
體外聯(lián)合用藥效果評價法用人的乳癌細胞研究鹽酸氨柔比星、鹽酸氨柔比星醇和鹽酸阿霉素與HerceptinTM的體外聯(lián)合用藥效果。通過Pegram等的方法算出Combination index(CI)來評價聯(lián)合用藥效果(M.Pegram et al.，Oncogene，18，2241-2251(1999)。
因為氨柔比星醇是氨柔比星的活性代謝物，所以也作為受驗物質(zhì)。氨柔比星醇可以通過文獻記載的方法(Ishizumi et al.，J.Org.Chem.，52，4477-4485(1987)進行制備。
通過ATCC(美國模式培養(yǎng)物保藏所)得到人的乳癌細胞株BT-474(HER2高表現(xiàn)型的細胞株)。在含有同等量的D-MEM(Dulbecco’sModified Eagle Medium)培養(yǎng)基和F-12(Nutrient Mixture F-12)培養(yǎng)基以及2.5mM L-谷氨酰胺、10％牛胎兒血清(FCS)、和2.5μg/ml兩性霉素B的培養(yǎng)基上，繼代培養(yǎng)人的乳癌細胞株BT-474。培養(yǎng)在37℃、5％CO2下，在保溫箱中進行。以下的實驗也采用本培養(yǎng)基。
如下制備受驗物質(zhì)。
把HerceptinTM溶解在添附的溶解液中制成21mg/ml的保存液。之后用培養(yǎng)基將其稀釋為2倍水平使用。
鹽酸氨柔比星和鹽酸氨柔比星醇在使用時用蒸餾水稀釋到1mg/ml，過濾滅菌后用培養(yǎng)基將其稀釋為2倍水平使用。
從協(xié)和發(fā)酵會社得到鹽酸阿霉素。向10mgバイアル中加入5ml滅菌水制成2mg/ml的溶液使用。
用胰蛋白酶處理繼代中的人乳癌細胞BT-474，并在懸浮于培養(yǎng)基后，接種到96孔板中。接種濃度是1×104個細胞/0.1ml/孔。接種后在37℃、5％CO2下，在保溫箱中培養(yǎng)一晚(0日)。
向單劑評價組中添加受驗物稀釋液0.05ml/孔和培養(yǎng)基0.05ml/孔，向聯(lián)合用藥評價組中添加受驗物稀釋液0.05ml/孔和HerceptinTM稀釋液0.05ml/孔(1日)。各藥物的最終濃度如下鹽酸氨柔比星是0.0625～16μg/ml，鹽酸氨柔比星醇是0.00625～1.6μg/ml，鹽酸阿霉素是0.00625～1.6μg/ml，HerceptinTM是0.000781～0.4μg/ml。藥物處理組n＝3，非處理組(對照組)n＝6。
在37℃、5％CO2下，在保溫箱中培養(yǎng)至4日。
在4日，在各孔中添加0.02ml的WST溶液(含有1.3mg/ml WST-1(2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2，4-二磺苯基)-2H-四唑鎓，鈉鹽)和0.14mg/ml 1-甲氧基PMS(1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸甲酯)的磷酸緩沖液(PBS))。之后在37℃、5％CO2下，在保溫箱中培養(yǎng)2～4小時，用MICROPLATE READER Model 3550-UV(Biorad公司)測定吸光度，從而測定活細胞數(shù)。
為了得到一定的增殖抑制率(fa)，通過式①求出必要的鹽酸氨柔比星、鹽酸氨柔比星醇、鹽酸阿霉素和HerceptinTM的濃度D。以Df1、Df2作為單劑的濃度，以D1、D2作為聯(lián)合用藥時的濃度，通過式②算出Combination index(CI)(M.Pegram et al.，Oncogene，18，2241-2251(1999))。
fa＝1-fD＝Dm×{fa/(1-fa))1/m……①CI＝D1/Df1+D2/Df2+(D1×D2)/(Df1×Df2)……②關(guān)于f、Dm、m用以下方法算出。
f＝(各藥物濃度下的吸光度的平均值)/(藥物濃度為0mg/ml時的吸光度的平均值)吸光度A420-A630相對于藥物濃度的常用對數(shù)，用(1/f)-1的常用對數(shù)繪圖，用最小二乘法劃回歸直線，求出其傾斜度m和X截距。X截距的值用IC50值(抑制50％細胞增殖所需的藥物濃度)的常用對數(shù)表示(如上所述，用Dm表示IC50值，鹽酸氨柔比星、鹽酸氨柔比星醇、鹽酸阿霉素下標為1，HerceptinTM的下標為2。)。
如上所述算出CI和增殖抑制率fa。求出fa為0.9時的CI值。CI＝1時表示相加作用，CI＜1時表示協(xié)同作用，CI＞1時表示拮抗作用。
實施例1鹽酸氨柔比星醇、鹽酸阿霉素與HerceptinTM的聯(lián)合用藥效果使用上述聯(lián)合用藥效果的評價方法，測定鹽酸氨柔比星醇與HerceptinTM用量比為2∶1，鹽酸阿霉素與HerceptinTM用量比同樣為2∶1時的聯(lián)合用藥效果。求出fa為0.9時的CI值，如下表1所示。表1

D1、D2、Df1、Df2的單位是(μg/ml)。
根據(jù)以上結(jié)果可以看出，本發(fā)明的鹽酸氨柔比星醇與HerceptinTM聯(lián)合用藥時，CI值比1.0小得多，具有明確的協(xié)同作用。而鹽酸阿霉素與HerceptinTM聯(lián)合用藥時，CI值大致等于1.0，是相加作用而不是協(xié)同作用。這樣可以看出HerceptinTM和鹽酸氨柔比星醇、鹽酸阿霉素聯(lián)合用藥效果的巨大差異。
實施例2鹽酸氨柔比星醇與HerceptinTM的用量比和聯(lián)合用藥效果使鹽酸氨柔比星醇和HerceptinTM用量比在2∶1～8∶1的范圍內(nèi)變化，使用上述聯(lián)合用藥效果的評價方法，進行聯(lián)合用藥效果評價試驗。求出fa為0.9時的CI值，結(jié)果如下表2所示。表2

D1、D2、Df1、Df2的單位是μg/ml。
如上表2所示，在用量比為2∶1～8∶1范圍內(nèi)，任何一個CI值都小于1.0，可以確定鹽酸氨柔比星醇和HerceptinTM聯(lián)合用藥具有明顯的協(xié)同作用。
實施例3鹽酸氨柔比星和HerceptinTM的聯(lián)合用藥效果使用上述聯(lián)合用藥效果的評價方法，評價鹽酸氨柔比星和HerceptinTM的聯(lián)合用藥效果。進行鹽酸氨柔比星和HerceptinTM的用量比為40∶1的聯(lián)合用藥效果試驗。求出fa為0.9時的CI值，結(jié)果如下表3所示。表3

D1、D2、Df1、Df2的單位是μg/ml。
如上表3所示，在鹽酸氨柔比星和HerceptinTM聯(lián)合用藥時，CI值比1.0小，因此可以確定其具有協(xié)同作用。
綜上所述，通過基于Pegram法的聯(lián)合用藥效果評價方法，通過Combination index(CI)來判定聯(lián)合用藥效果，可以斷定鹽酸氨柔比星和HerceptinTM聯(lián)合用藥、鹽酸氨柔比星醇和HerceptinTM聯(lián)合用藥具有顯著的協(xié)同作用。
實施例4用猴子進行的心臟毒性實驗用恒河猴實驗來評價鹽酸氨柔比星和HerceptinTM聯(lián)合用藥時是否對心臟毒性有影響。即，采用鹽酸阿霉素和HerceptinTM靜脈給藥后表現(xiàn)出強烈心臟毒性的條件，用2倍量的鹽酸氨柔比星代替鹽酸阿霉素給藥，來判定是否有恒河猴心臟毒性。
以2.92mg/kg(35mg/m2)的給藥量，以3周間隔向恒河猴的靜脈內(nèi)給予阿霉素7～8次，在開始給藥后的第140～150天，觀察心臟的病理組織，確認心肌細胞的空泡形成(Toxicology，13，263-273，1979，E.J.Gralla，et.al.)。此外，在對人給予HerceptinTM時，按首次給藥4mg/kg，以后每周給藥2mg/kg的進度進行。
根據(jù)以上事項，如下設定給藥組。
①未給藥組②鹽酸阿霉素2～4mg/kg，iv，8q3w③鹽酸阿霉素2～4mg/kg，iv，8q3wHerceoptinTM4mg/kg，之后每周2mg/kg，iv，給藥24次④鹽酸氨柔比星4～8mg/kg，iv，8q3w⑤鹽酸氨柔比星4～8mg/kg，iv，8q3wHerceptinTM4mg/kg，之后每周2mg/kg，iv，給藥24次在開始給藥后的第140～150天解剖，進行心臟的病理組織診斷。通過比較心肌細胞的障礙性來評價心臟毒性。
產(chǎn)業(yè)上的利用性通過本發(fā)明，可提供對治療癌癥患者有用的癌癥聯(lián)合用藥治療劑。更具體地說，就是通過鹽酸氨柔比星和HerceptinTM聯(lián)合用藥實現(xiàn)協(xié)同的抗癌作用，從而通過與HerceptinTM聯(lián)合用藥，提高鹽酸氨柔比星的抗腫瘤治療效果。更具體地說，即使對鹽酸氨柔比星難以發(fā)揮作用的癌細胞種類，通過與HerceptinTM聯(lián)合用藥也能對其發(fā)揮作用。此外，由于協(xié)同的聯(lián)合用藥效果反過來可以減少鹽酸氨柔比星的投藥量，因此使減少副作用的抗癌治療成為可能。
權(quán)利要求
1.癌癥治療藥，該藥以氨柔比星或其藥學上可接受的鹽為有效成分，用于與抗HER2抗體的聯(lián)合用藥療法。
2.權(quán)利要求1記載的治療藥，其中癌癥是乳癌、胃癌、腎癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宮體癌或肺癌。
3.權(quán)利要求1或2記載的治療藥，其中癌癥是HER2高表現(xiàn)型的癌癥。
4.權(quán)利要求1～3任何一項中記載的治療藥，其中抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日時，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是0.5～3.0mg/kg/日。
5.權(quán)利要求4記載的治療藥，其中氨柔比星或其藥學上可接受的鹽每3周連續(xù)3日給藥，抗HER2抗體每周給藥。
6.權(quán)利要求1～3任何一項中記載的治療藥，其中抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日時，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是1.5～9.0mg/kg/日。
7.權(quán)利要求6記載的治療藥，其中氨柔比星或其藥學上可接受的鹽每3周給藥，抗HER2抗體每周給藥。
8.權(quán)利要求1～7任何一項中記載的治療藥，其特征在于氨柔比星或其藥學上可接受的鹽與抗HER2抗體的用量比在兩者開始給藥的一周里為2∶1～8∶1。
9.氨柔比星或其藥學上可接受的鹽在制造可與抗HER2抗體聯(lián)合用藥的癌癥治療藥中的應用。
10.權(quán)利要求9記載的應用，其中癌癥是乳癌、胃癌、腎癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宮體癌或肺癌。
11.權(quán)利要求9或10記載的應用，其中癌癥是HER2高表現(xiàn)型的癌癥。
12.權(quán)利要求9～11任何一項中記載的應用，其中抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日時，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是0.5～3.0mg/kg/日。
13.權(quán)利要求12記載的應用，其中氨柔比星或其藥學上可接受的鹽每3周連續(xù)3日給藥，抗HER2抗體每周給藥。
14.權(quán)利要求9～11任何一項中記載的應用，其中抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日時，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是1.5～9.0mg/kg/日。
15.權(quán)利要求14記載的應用，其中氨柔比星或其藥學上可接受的鹽每3周給藥，抗HER2抗體每周給藥。
16.權(quán)利要求9～15任何一項中記載的應用，其特征在于氨柔比星或其藥學上可接受的鹽與抗HER2抗體的用量比在兩者開始給藥的一周里為2∶1～8∶1。
17.癌癥的治療方法，其特征在于將有效量的抗HER2抗體與有效量的氨柔比星或其藥學上可接受的鹽聯(lián)合用藥。
18.權(quán)利要求17記載的治療方法，其中癌癥是乳癌、胃癌、腎癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宮體癌或肺癌。
19.權(quán)利要求17或18記載的治療方法，其中癌癥是HER2高表現(xiàn)型的癌癥。
20.權(quán)利要求17～19任何一項中記載的治療方法，其特征在于抗HER2抗體的給藥量是0.1～4.5mg/kg/日，氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的給藥量是0.5～3.0mg/kg/日。
21.權(quán)利要求20記載的治療方法，該方法包括每3周連續(xù)3日給予氨柔比星或其藥學上可接受的鹽，每周給予抗HER2抗體。
22.權(quán)利要求17～19任何一項中記載的治療方法，其特征在于以0.1～4.5mg/kg/日給予抗HER2抗體，以1.5～9.0mg/kg/日給予氨柔比星或其藥學上可接受的鹽。
23.權(quán)利要求22記載的治療方法，該方法包括每3周給予氨柔比星或其藥學上可接受的鹽，每周給予抗HER2抗體。
24.權(quán)利要求17～23任何一項中記載的治療方法，其特征在于氨柔比星或其藥學上可接受的鹽與抗HER2抗體的用量比在兩者開始給藥的一周里為2∶1～8∶1。
25.用于癌癥治療的試劑盒，該試劑盒包括含有氨柔比星或其藥學上可接受的鹽的第1組合物、以及含有抗HER2抗體的第2組合物。
全文摘要
以氨柔比星或其藥學上可接受的鹽為有效成分、用于與抗HER2抗體的聯(lián)合用藥療法的癌癥治療藥。
文檔編號C07K16/32GK1466464SQ01816215
公開日2004年1月7日 申請日期2001年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2000年7月28日
發(fā)明者野口俊弘, 馬場朱美, 花田充治, 治, 美 申請人:住友制藥株式會社