專利名稱：胡蘿卜素的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生化工程領(lǐng)域，更具體涉及一種已知菌種三孢布拉氏霉菌中胡蘿卜素的提取方法。
背景技術(shù)：
經(jīng)檢索中國專利，專利號為97109357.1，發(fā)明名稱為“三孢布拉氏霉菌中胡蘿卜素的提取方法”，該方法是A、將未干燥的菌絲體用極性有機(jī)溶劑混合處理；B、過濾收集菌絲體，用低沸點石油系有機(jī)溶劑在40-70℃萃取30-60分鐘，反復(fù)進(jìn)行兩次，萃取液加熱、濃縮；C、將B中得到的濃縮萃取液，加入1/5-1/2體積的無水乙醇，在0-10℃結(jié)晶，分離結(jié)晶，結(jié)晶母液加熱濃縮，加入鹽溶液，加熱攪拌，靜置脫膠，上層油在120-140℃和-650--750mmHg真空條件下通入120-140℃直接蒸汽進(jìn)行脫溶。再是用于處理未干燥菌絲體的極性有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、丙酮或其混合物，用量為霉菌體的1-10倍。該方法對結(jié)晶母液僅作了鹽水水化脫膠處理，存在著胡蘿卜素油溶品中脂肪酸含量過高，并仍有少量膠體物質(zhì)，不利于產(chǎn)品質(zhì)量提高，保存和應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種胡蘿卜素的提取方法，對萃取的胡蘿卜素溶液進(jìn)行處理，獲得高純度的胡蘿卜素晶體和低酸價的胡蘿卜素油溶品，使產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，更適用于藥品和保健品。
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)措施，用來生產(chǎn)胡蘿卜素的菌株為三孢布拉氏霉，該菌株已于1997年12月11日經(jīng)中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，編號CCTCCM97027。
將三孢布拉氏霉菌中的胡蘿卜素萃取液經(jīng)濃縮、堿煉、水洗、結(jié)晶、脫膠、脫溶等步驟，得到純度90-99％胡蘿卜素結(jié)晶和低酸價(≤4)的0.1-1％的胡蘿卜素油溶品。
具體步驟如下菌種如前所述，本發(fā)明使用的菌種已于1997年12月11日中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，編號為CCTCCM97027，胡蘿卜素產(chǎn)生菌為三孢布拉氏霉。
1、將三孢布拉氏霉菌菌體用石油系有機(jī)溶劑萃取胡蘿卜素，得到胡蘿卜素萃取液。
2、將胡蘿卜素萃取液濃縮到與菌體體積比為4-10∶1的比例的濃縮萃取液。
3、按胡蘿卜素萃取液中脂肪酸的含量計算用堿量，并用80-100％的乙醇水溶液配制堿液，其濃度為1.5-3.0N。
4、中和反應(yīng)溫度控制在40-60℃，萃取液和堿溶液的溫度相同，加堿液時間為1-20分鐘并進(jìn)行攪拌，加堿液后反應(yīng)1-60分鐘并攪拌，完成后保溫靜置20-200分鐘，上層為精煉胡蘿卜素萃取液，下層為皂腳。
5、將精煉胡蘿卜素萃取液用清水或0.1-5％Nacl鹽水洗至中性，水洗時的溫度控制在40-60℃，得到中性精煉萃取液。
6、水洗后的胡蘿卜素萃取液再經(jīng)濃縮、結(jié)晶、脫膠、脫溶等步驟獲得90-99％純度的胡蘿卜素晶體和低酸價的胡蘿卜素油溶品。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點和效果本發(fā)明工藝簡單，操作方便，通過用堿中和游離脂肪酸，提高了胡蘿卜素結(jié)晶純度，減少了胡蘿卜素油溶品中的脂肪酸含量，而且使其易于保存和質(zhì)量穩(wěn)定，更利于使用。將有良好的市場前景。
具體實施例方式
實施例1菌絲體293.1kg經(jīng)萃取得到胡蘿卜素萃取液2550L，測得萃取液酸價1.18mgKOH/ml，理論耗堿量為2.15kg NaOH，實際稱取2.3kg NaOH溶于25L 85％的乙醇水溶液中，在54℃條件下，在15分鐘內(nèi)邊攪拌邊將堿溶液加入到萃取液中，加堿完成后，繼續(xù)攪拌并保溫50分鐘，停止攪拌后保溫靜置2小時，反應(yīng)體系分為上、下兩相，將下相皂腳泵入皂腳處理罐，用清水洗滌上相精煉萃取液，水洗分8次進(jìn)行，每次加入15L水，水溫與精煉萃取液相同，加水時啟動攪拌，加水后繼續(xù)攪拌10分鐘，每次水洗攪拌后，靜置10-20分鐘，分層后排出下相水溶液，并測其pH值，上相繼續(xù)用水洗滌，至第8次水洗后，排出水溶液至中性，收得上相中性精煉萃取液2500升。將中性精煉萃取液濃縮至290升，在濃縮液中加入70升無水乙醇，在5℃攪拌30rpm條件下結(jié)晶72小時，經(jīng)抽濾得到的晶體用無水乙醇處理，干燥后獲得6kg，93％純度的胡蘿卜素晶體。結(jié)晶母液經(jīng)濃縮，脫溶可得到酸價為2.7的胡蘿卜素油溶品100L。
實施例2菌絲體256.7kg經(jīng)萃取得到胡蘿卜素萃取液2750L，測得萃取液酸價2.0mgKOH/ml，理論耗堿量為3.67kg NaOH，實際稱取4kg NaOH溶于40L 85％的乙醇水溶液中，在56℃條件下，在17分鐘內(nèi)邊攪拌邊將堿溶液加入到萃取液中，加堿完成后，繼續(xù)攪拌并保溫1小時，停止攪拌后保溫靜置3小時，反應(yīng)體系分為上、下兩相，將下相皂腳泵入皂腳處理罐，用清水洗滌上相精煉萃取液，水洗分10次進(jìn)行，每次加入15L水，水溫與精煉萃取液相同，加水時啟動攪拌，加水后繼續(xù)攪拌10分鐘，每次水洗攪拌后，靜置10-20分鐘，分層后排出下相水溶液，并測其pH值，上相繼續(xù)用水洗滌，至第10次水洗后，排出水溶液至中性，收得上相中性精煉萃取液2500升。將中性精煉萃取液濃縮至260升，在濃縮液中加入60升無水乙醇，在4℃攪拌30rpm條件下結(jié)晶72小時，經(jīng)抽濾得到的晶體用無水乙醇處理，干燥后獲得5kg，91％純度的胡蘿卜素晶體。結(jié)晶母液經(jīng)濃縮，脫溶可得到酸價為1.8的胡蘿卜素油溶品80L。
權(quán)利要求
1.一種胡蘿卜素的提取方法，它包括下列步驟A、將三孢布拉氏霉菌菌體用石油系有機(jī)溶劑萃取胡蘿卜素，得到胡蘿卜素萃取液；B、將胡蘿卜素萃取液濃縮到與菌體體積比為4-10∶1；C、按胡蘿卜素萃取液中脂肪酸的含量計算用堿量，用80-100％的乙醇水溶液配制堿液，其濃度為1.5-3.0N；D、中和反應(yīng)溫度控制在40-60℃，萃取液和堿溶液的溫度相同，加堿液時間為1-20分鐘并進(jìn)行攪拌，加堿液后反應(yīng)1-60分鐘并攪拌，完成后保溫靜置20-200分鐘，上層為胡蘿卜素萃取液，下層為皂腳。E、將胡蘿卜素萃取液用清水或0.1-5％Nacl鹽水洗至中性，水洗時的溫度控制在40-60℃；F、水洗后的胡蘿卜素萃取液再經(jīng)濃縮、結(jié)晶、脫膠、脫溶獲得胡蘿卜素晶體和低酸價的胡蘿卜素油溶品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種胡蘿卜素的提取方法,將三孢布拉氏霉菌菌體用石油有機(jī)溶劑萃取胡蘿卜素,得到萃取液,所得萃取液用適量的堿在40－60℃進(jìn)行精煉中和其中的游離脂肪酸,得到的萃取液用清水或鹽水洗滌至中性,得到中性萃取液,然后再將萃取液經(jīng)濃縮、結(jié)晶、脫膠和脫溶可得到胡蘿卜素晶體和油溶品。本發(fā)明獲得的胡蘿卜素晶體純度高,胡蘿卜素油溶品酸價低、質(zhì)量穩(wěn)定。
文檔編號C07C403/24GK1363554SQ0211543
公開日2002年8月14日 申請日期2002年1月15日 優(yōu)先權(quán)日2002年1月15日
發(fā)明者童驍, 宋建華, 陳明鍇, 陳濤 申請人:中國科學(xué)院武漢病毒研究所