專利名稱：虎杖提取高純白藜蘆醇工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物有效成份提取領(lǐng)域，特別是提供一種從虎杖中提取白藜蘆醇的工藝。
背景技術(shù)：
虎杖(Polygonum cuspidatum Sie bet Zucc)為蓼科蓼屬小灌木，為我國傳統(tǒng)中藥?，F(xiàn)代藥學(xué)研究證明其白黎蘆醇(Resveratrol)(3，4’，5三羥基二苯乙烯)具有抗癌、治療心血管疾病等多種藥理作用。
查新發(fā)現(xiàn)，國內(nèi)外關(guān)于“從虎杖中提取白藜蘆醇”方面的文獻(xiàn)和專利已有報道。中國專利CN1251363與法國專利FR2795964公開的提取工藝為在粉末狀虎杖原料中加入復(fù)合酶，在恒溫下進(jìn)行酶解反應(yīng)，48--72小時獲得酶解原料，再用溶劑萃取、濃縮獲得含白藜蘆醇的半成品，置24--120小時，并攪拌，然后用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，再經(jīng)進(jìn)一步純化處理，制得白藜蘆醇和白藜蘆醇甙。《天津藥學(xué)》發(fā)表的“虎杖的化學(xué)成份、藥理作用與提取分離”(1999-11-03)公開的工藝是將虎杖根粗粉用乙醇回流提取，回收乙醇至浸膏狀，加水溶解、過濾，水液濃縮，濃縮液用聚酰胺層析，再用20％乙醇洗脫得到白藜蘆醇甙?！短旖蜉p工業(yè)學(xué)院學(xué)報》(1999-04)發(fā)表的姚寶書等人的論文，介紹了從葡萄皮渣中提取白藜蘆醇的研究；中國專利CN1341587將虎杖粉用可與水混溶的有機(jī)溶劑提取，減壓蒸餾濃縮提取液，再加入蒸餾水，調(diào)pH到7.5-8.0，再用乙酸乙酯萃取并減壓蒸餾濃縮；中國專利CH1239141介紹了一種從葡萄莖、根、葉提取白藜蘆醇產(chǎn)品。
以上可知，現(xiàn)有的提取白藜蘆醇的工藝方法較多，但總的來說，現(xiàn)有工藝均技術(shù)相對陳舊，生產(chǎn)周期長，成本高，產(chǎn)品得率和質(zhì)量不高，操作繁瑣。

發(fā)明內(nèi)容
為克服上述缺點，本發(fā)明提供一種從虎杖中提取白藜蘆醇的工藝，其采有高效生物轉(zhuǎn)化技術(shù)提高虎杖白藜蘆醇含量，利用微波低溫、快速提取技術(shù)，簡化了工藝和操作程序，縮短了生產(chǎn)周期，降低了生產(chǎn)成本，提高了產(chǎn)品質(zhì)量。
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的工藝步驟包括(1)先將干燥虎杖根莖粉碎，過80目篩，加入白藜蘆醇誘導(dǎo)劑，該誘導(dǎo)劑為專用微生物，在最適溫度范圍內(nèi)培養(yǎng)，使虎杖白藜蘆醇類似物轉(zhuǎn)化為白藜蘆醇；(2)用40％乙醇與烴基醇混合溶劑微波萃取0.5-1小時；(3)離心過濾，然后在適當(dāng)溫度下，一定的真空度下進(jìn)行濃縮。
(4)柱層析分離，濃縮，結(jié)晶，最后得純度≥95％的白藜蘆醇和一定純度的副產(chǎn)物大黃素。
提取溶劑濃度比例對提取效率有很大影響，經(jīng)反復(fù)試驗，本發(fā)明的微波萃取最適條件為萃取溶劑組份體積比為40％乙醇∶烴基醇＝95∶5，微波頻率為3000-2000MHz，萃取時間30-60分鐘，溫度40℃-60℃。
轉(zhuǎn)化溫度及時間對虎杖中白藜蘆醇含量提高影響很大，本發(fā)明中生物轉(zhuǎn)化最適溫度為15℃-45℃，時間為24-84小時。
濃縮時溫度對白藜蘆醇的穩(wěn)定性有很大影響，本發(fā)明確定濃縮最佳溫度為45℃-60℃，真空度≤-65cmHg。
本發(fā)明采用高效生物轉(zhuǎn)化技術(shù)，提高虎杖材料中白藜蘆醇含量10-20倍。同時，采用微波萃取法，與常規(guī)溶劑提取法相比，大大縮短了提取時間，且提取效率高，避免了常規(guī)溶劑提取中白藜蘆醇易分解的不足，同時采用層析、結(jié)晶等分離、精制技術(shù)，獲得≥95％的白藜蘆醇和一定純度副產(chǎn)物大黃素二種產(chǎn)品。


附圖為本發(fā)明工藝流程圖1、虎杖原材料清洗、陰干、粉碎 2、預(yù)處理 3、微波提取 4、過濾、濃縮 5、柱層析 6、洗脫 7、白藜蘆醇主成分收集液 8、濃縮 9、結(jié)晶 10、高純白藜蘆醇 11、干燥、貯藏 12、大黃素具體實施方式
工藝步驟為(1)將陰干虎杖根莖粉碎，過80目篩，稱500g虎杖粉末。
(2)在500g虎杖粉末中加入適量白藜蘆醇專用微生物作轉(zhuǎn)化誘導(dǎo)劑，在溫度30℃下培養(yǎng)28小時；(3)用40％乙醇∶5％4-甲基-2-戊醇＝95∶5作為提取溶劑，用微波萃取，萃取時間1次/min×5次，每次中間間隔10min左右，并攪拌；(4)離心過濾，過濾液在45℃-50℃溫度、-65cm Hg真空度下進(jìn)行濃縮。
(5)柱層析分離，濃縮、結(jié)晶、冷凍干燥，最后分別得純度95.1％的白藜蘆醇2.51g，一定純度副產(chǎn)品大黃素3.03g。
權(quán)利要求
1.一種虎杖提取高純白藜蘆醇工藝，其工藝步驟包括(1)將干虎杖粉碎后，進(jìn)行預(yù)處理；(2)微波萃??；(3)離心過濾，減壓濃縮；(4)柱層析分離，濃縮，結(jié)晶；其特征在于，(1)預(yù)處理采用在虎杖原料中加入專用微生物，在15℃-45℃下培養(yǎng)24-84小時，對白藜蘆醇類似物進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化；(2)微波萃取的萃取劑采用40％乙醇與烴基醇混合溶劑；(3)濃縮溫度為45℃-60℃，真空度≤-65cmHg。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的虎杖提取高純白藜蘆醇工藝，其特征在于，生物轉(zhuǎn)化溫度為30℃。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的虎杖提取白藜蘆醇工藝，其特征在于，萃取溶劑體積比為40％乙醇∶5％4-甲基-2-戊醇＝95∶5，微波頻率3000-2000MHz，萃取時間30分鐘，溫度40℃-60℃。
全文摘要
本發(fā)明提供一種從虎杖中提取白藜蘆醇的工藝，其首先采用加入專用微生物進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化提高虎杖白藜蘆醇含量，利用40％乙醇與4－甲基－2－戊醇混合劑作為萃取溶劑，進(jìn)行微波提取。本發(fā)明簡化了工藝和操作程序，縮短了生產(chǎn)周期，降低了生產(chǎn)成本，提高了產(chǎn)品得率和含量。
文檔編號C07C37/70GK1513822SQ0213991
公開日2004年7月21日 申請日期2002年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月31日
發(fā)明者曹庸, 曹 庸 申請人:曹庸, 曹 庸