專利名稱：哌啶衍生物、其制備方法、以及含有該衍生物的用于治療阿耳茨海默氏病的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的哌啶衍生物及含有該衍生物的藥物組合物。尤其是，本發(fā)明涉及用于治療阿耳茨海默氏病的新的哌啶衍生物及其制備方法。
背景技術(shù)：
很顯然，二十一世紀(jì)將是富有的社會(huì)，人們追求高質(zhì)量的生活，具有健康且更長(zhǎng)久的生命，而沒(méi)有有害的疾病?？茖W(xué)的發(fā)展增加了具有較長(zhǎng)壽命的老年人的數(shù)量，由此它導(dǎo)致具有阿耳茨海默氏病的病人的比率突然增加，所述疾病由神經(jīng)退化引起。阿耳茨海默氏病不僅惡化個(gè)人和社會(huì)生活的質(zhì)量，也使病人和其他人感到痛苦。阿耳茨海默氏病是位于癌癥、心臟病和腦溢血之后的第四位高死亡原因。
對(duì)于發(fā)達(dá)國(guó)家的研究統(tǒng)計(jì)表明，患有阿耳茨海默氏病的病人的數(shù)量比例隨著年齡的增加而增加60多歲的人中有15-20％患有此病，70多歲的人中有30-40％，80多歲的人中有60％患有此病。也就是說(shuō)，在80多歲的人中情況變得很嚴(yán)重，每對(duì)配偶中的一個(gè)將患有阿耳茨海默氏病。在韓國(guó)還沒(méi)有精確的統(tǒng)計(jì)，但是已知在日本、美國(guó)和歐洲超過(guò)一千二百萬(wàn)的人患有這種病，可以預(yù)測(cè)在近期內(nèi)這些數(shù)字將很快增加。
有幾種原因?qū)е掳⒍暮Ｄ喜?。首先，阿耳茨海默氏病是由于神?jīng)遞質(zhì)-乙酰膽堿的濃度降低而引起的。具有季胺結(jié)構(gòu)的乙酰膽堿是一種在乙酰膽堿酯酶作用下水解得到膽堿的神經(jīng)遞質(zhì)。根據(jù)現(xiàn)有的研究，患有阿耳茨海默氏病的病人具有低濃度的乙酰膽堿，當(dāng)乙酰膽堿酯酶被抑制時(shí)，乙酰膽堿的濃度增加而改善阿耳茨海默氏病的癥狀。用于治療阿耳茨海默氏病的現(xiàn)有藥物為合成的乙酰膽堿酯酶抑制劑如Tarcrine(1)和多奈哌齊(Donepezil)(2)，如式1所示。目前在臨床檢查中使用的另一種物質(zhì)是石杉?jí)A甲(Huperzine)A，它也是一種乙酰膽堿酯酶抑制劑，得自Hupersia Serrata。
<式1>
<式2>
第二，通過(guò)研究阿耳茨海默氏病的遺傳因素來(lái)延遲阿耳茨海默氏病的進(jìn)展，所述遺傳因素涉及β-淀粉狀蛋白的合成、進(jìn)行、神經(jīng)元的累積、和在皮層中β-淀粉狀蛋白的沉積。同樣地，通過(guò)發(fā)現(xiàn)降低β-淀粉狀蛋白的細(xì)胞外濃度的控制因素，并選擇性地除去在腦內(nèi)的β-淀粉狀蛋白沉積物，可以治療阿耳茨海默氏病。β-淀粉狀蛋白聚集是阿耳茨海默氏病的主要原因，因此對(duì)此進(jìn)行了積極研究來(lái)抑制它的形成。
第三，通過(guò)使用雌激素、抗氧化劑、游離基清除劑或抗炎劑可以治療阿耳茨海默氏病。從而可以間接防止疾病進(jìn)展。
第四，通過(guò)防止突觸和神經(jīng)元的逐漸和不可逆的退化可治療阿耳茨海默氏病。
目前，已被美國(guó)的食品及藥物管理局(FDA)批準(zhǔn)的對(duì)于阿耳茨海默氏病的療法都是使用乙酰膽堿酯酶抑制劑。
在上述療法中，Tarcrine具有副作用如肝毒性、腹痙攣、嘔吐、和腹瀉；并且，它僅對(duì)約25％的患有阿耳茨海默氏病的病人有效。同時(shí)，與Tarcrine相比，多奈哌齊對(duì)于乙酰膽堿有較高的選擇性，并具有較低的副作用；然而，它治療該疾病的有效性比較低。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及對(duì)乙酰膽堿酯酶具有高的選擇性并有效抑制β-淀粉狀蛋白聚集的新的化合物，并提供了制備所述化合物的方法。
本發(fā)明還涉及制備包括上述化合物，用于治療阿耳茨海默氏病的藥物。
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了具有式3的新的哌啶衍生物。
<式3>
其中R′為芐基 或二苯甲基
R為(i)直鏈或支鏈的C1-C6烷基，(ii) 或(iii)-NHR2；R1為-H、-OH、鹵素、-NO2、-NH2、直鏈或支鏈的C1-C6烷基；X1為C；X2、X3、X4、X5和X6獨(dú)立地為CH或N；k為1至5的整數(shù)；和R2為H或 在式3中，優(yōu)選的是(i)當(dāng)R為直鏈或支鏈的C1-C6烷基時(shí)，R為-CH3或-(CH2)nCH3(其中n為2至5的整數(shù))；(ii)當(dāng)R為 R為 或 和(iii)當(dāng)R為-NHR2，R為或-NH2。
本發(fā)明人通過(guò)許多研究和實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，如式3所示的新的哌啶衍生物能治療阿耳茨海默氏病。上式3具有包括羧基的哌啶的基本結(jié)構(gòu)，其中R和R′被不同的官能團(tuán)取代以增強(qiáng)治療阿耳茨海默氏病的效力。
反應(yīng)圖式1表示了通過(guò)結(jié)合酶-乙酰膽堿酯酶和配體-新斯的明來(lái)抑制乙酰膽堿酯酶的功能的機(jī)制。如反應(yīng)圖式1所示，分解乙酰膽堿的乙酰膽堿酯酶具有官能性陰離子部位和酯部位，彼此相距6。在反應(yīng)部位之間的距離和相互作用對(duì)于這種酶與配體的反應(yīng)是重要因素，因此設(shè)計(jì)了哌啶結(jié)構(gòu)，使得在哌啶環(huán)上的氮原子將與陰離子部位相互作用，在酯基上的氧原子將與酯部位相互作用。此外，通過(guò)用不同的官能團(tuán)來(lái)取代哌啶，本發(fā)明驗(yàn)證了在哌啶衍生物和乙酰膽堿酯酶之間的構(gòu)效關(guān)系<反應(yīng)圖式1>
本發(fā)明可通過(guò)不同的合成方法來(lái)制得，下面描述的一個(gè)實(shí)例包括如下步驟(a)將式4的化合物和式5的化合物反應(yīng)，得到式6的化合物；(b)還原式6的化合物，得到式7的化合物；(c)將式7的化合物與RCOOH或R-N＝C＝O反應(yīng)，得到式3的化合物<式4>
<式5>
<式6>
<式7>
其中，取代基R、R′、R″、R1、R2、X1、X2、X3、X4、X5、X6、X和k如上式3中所述。
更具體地，該方法可用下面的反應(yīng)圖式2來(lái)描述<反應(yīng)圖式2>

式4表示的原料可通過(guò)不同的合成方法來(lái)制得，或可以購(gòu)買。得到式4的一個(gè)常規(guī)方法如下面的反應(yīng)圖式3所示<反應(yīng)圖式3>
本發(fā)明還提供了藥物組合物，所述組合物包括有效量的式3的吡啶衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽。式3的化合物能夠以藥學(xué)上可接受的鹽的形式包括在藥物組合物中，通過(guò)藥學(xué)上可接受的游離酸形成的酸式鹽可用作它的鹽。也就是說(shuō)，式3的化合物可容易地通過(guò)常規(guī)方法制為藥學(xué)上可接受的酸式鹽。有機(jī)酸和無(wú)機(jī)酸可用作游離酸，其中無(wú)機(jī)酸為鹽酸、溴酸、硫酸、或磷酸，有機(jī)酸可用檸檬酸、乙酸、乳酸、酒石酸、馬來(lái)酸、富馬酸、甲酸、丙酸、草酸、三氟乙酸、苯甲酸、葡糖酸、甲磺酸、羥基乙酸、琥珀酸、4-甲苯磺酸、谷氨酸、天冬氨酸等。
藥物組合物對(duì)于乙酰膽堿酯酶和β-淀粉狀蛋白聚集具有抑制作用。本發(fā)明的哌啶衍生物可以與藥學(xué)上可接受的載體一起口服給藥，也可以用適合的溶劑和稀釋劑來(lái)注射給藥。
(1)口服給藥本發(fā)明的哌啶衍生物能夠以膠囊或片劑的形式口服給藥。這里，普通賦形劑如淀粉、乳糖、滑石、硬脂酸鎂等可用作膠囊賦形劑。任何常規(guī)的賦形劑對(duì)于片劑也是可接受的，因?yàn)槠瑒┯深w粒制得。并且，其它常規(guī)載體也都是適合的。
另外，添加劑如淀粉、結(jié)晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙二醇、乳糖、聚乙烯基吡咯烷酮、山崳酸甘油酯(glyceryl behanate)等；和稀釋劑如葡萄糖、噴霧干燥的乳糖、快速流動(dòng)型(fast-flo)乳糖、無(wú)水乳糖、蔗糖、淀粉、淀粉1500、磷酸一氫鈣、磷酸氫鈣二水合物(emcompress)、微晶纖維素(avicel)等可以加入到藥物組合物中用于口服給藥。
濕粘合劑和顆粒溶液如水、乙醇、明膠溶液、淀粉糊劑溶液、蔗糖糖漿、聚乙烯基吡咯烷酮、纖維素衍生物等，和潤(rùn)滑劑如聚乙二醇4000、6000、8000，月桂基硫酸鈉、月桂基硫酸鎂、苯甲酸鈉、聚一硬脂酸亞乙酯、三乙酸甘油酯、硬脂酸鎂、硬脂酸鋅、鈣、硬脂酸、滑石、硬化植物油、液體石蠟、石蠟等，可以加入到組合物中用于口服給藥。
流態(tài)化劑如淀粉、滑石、二氧化硅、碳酸鎂、氧化鎂等，和粘合抑制劑如淀粉、滑石等，和其它添加劑如羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、乙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、聚丙烯酸、丙烯酸、丙烯酸衍生物、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇等可以加入到組合物中用于口服給藥。
(2)注射同時(shí)，對(duì)于注射，溶劑如醇衍生物、高級(jí)脂肪酸酯等，和稀釋劑，其包括磷酸鹽緩沖鹽水和生理鹽水，和防腐劑如苯甲酸鈉、對(duì)羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯，可加入到藥物組合物中用于注射。
例如，通過(guò)將吡啶衍生物溶解在醇中，并用磷酸鹽緩沖鹽水或生理鹽水稀釋，可制備注射用藥物組合物。
劑量本發(fā)明的式3化合物對(duì)于成人的有效量通常為0.01500mg/kg。此外，對(duì)于醫(yī)生的處方，這個(gè)劑量可分為每天1-6個(gè)可食用的量。
為了參考，下面引用了各種與本發(fā)明相關(guān)的文獻(xiàn)。這些參考文獻(xiàn)與發(fā)明一起構(gòu)成了本發(fā)明，背景介紹和發(fā)明詳述中的一些內(nèi)容引自這些參考文獻(xiàn)。
Wurtman，R.J.Sci.Am.1985，252，48. Davies，P.；Maloney，A.J.F.Lancet 1796，2，1404[3]Bowen，D.M.；Smith，C.B.；White，P.；Dawson，A.N.Brain 1976，99，459[4]Albert，A.；Gledhill，W.J.J.soc.Chem.Ind.1945，64，169[5]Sugimoto，H.；Iimura，Y.；Yamanishi，Y.；Yamatsu，K.J.Med.Chem.1995，38，4821[6]Murphy，M.F.；Hardiman，S.T.；Nash，R.J.；Huff，F(xiàn).J.；Demkovich，J.J.；Dobson，C.；Knappe，U.E.Ann.N.Y.Acadd.Sci.1991，640，253[7]Huff，F(xiàn).J.；Antuno，P.；Murphy，M.；Beyer，J.；Dobson，C.Ann.N.Y.Acad.Sci.1991，640，263[8]Volger，B.W.Clin.Pharm.1991，10，447[9]Rupniak，N.M.；Tye，S.J.；Brazeil，C.；Heald，A.；Iverson，S.D.；Pagella，P.G.；J.Neurol.Sci.1992，107，246[10]Chen，Y.L.；Nielsen，J.；Hedberg，K.；Dunaiskis，A.；Jones，S.；Russo，L.；Johnson，J.；Ives，J.；Liston，D.J.Med.Chem.1992，35，1429[11]Thomsen，T.；Bickel，U.；Fischer，J.P.；Kewitz，H.Dementia，1990，1，46[12]Dal-Bianco，P.；Maly，J.；Wobwer，C.；Lind，C.；Koch，G.；Hufgard，J.；Marschall，I.；Mraz，M.；Deecke，L.J.Neural.Trasm.Suppl.(Austria)，1991，33，59[13]Giacobini，E.；Becker，R.Clin.Neuropharmacol.1990，13(suppl2)，577[14]Kozikowski，A.P.；Theils，E.；Tang，X.C.；Hanin，I.Adv.med.Chem.1992，1，175 Hulme，E.C.；Birdsall.N.J.M.；Buckley，N.J.Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.1990，30，633[16]Mei，L.；Roeske，W.R.；Yamamura，H.I.Life Sci.1989，45，1831[17]Raffaele，K.C.；Berardi，A.；Asthana，S.；Morris，P.；Haxby，J.V.；soncart，T.T.Psychopharmacol.Bull.1991，27，315[18]Kumar.v.；Calache，M.Int.J.Clin.Pharmacol.Ther.Toxicol.1991，29，23[19]Gray，J.A.；Enz，A.；Spiegel，R.Trends Pharmacol.Sci.1989，85[20]Traub，M.；Freedman，S.B.Dementia，1992，3，189[21]Rupniak，N.M.J.；Iverson，S.J.；Iverson S.D.J.Neurol.Sci.1992，110，222[22]Sauerberg，P.；Olsen，P.H.；Nielsen，S.；Treppendahl，s.；sheardown，M.J.；Honore，T.；Mitch，C.H.；Ward，J.S.；Pike，A.J.；Bymaster，F(xiàn).P.；Sawyer，B.D.；Shanon，H.E.J.Med.Chem.1992，35，2274[23]Sapiro，G.；Floersheim，P.；Boelsterli，j.；Amstutz，R.；Bolliger，G.；Gammenthaler，H.；Gmelin，G.；Supavilai，P.；Walkinshaw，M.J.Med.Chem.1992，35，15[24]Nilsson，B.M.；Vargas，H.M.；Hacksell，U.J.Med Chem.1992，35，3270[25]Pang，Y.P.；Quiram，P.；Jelacic，T.；hong，F(xiàn).；Brimijoin，S.J.Biol.Chem.1996，271，23646[26]Mckenna，M.T.；proctoer，G.R.；Young，l.C.；Harvey，A.L.J.Med.Chem.1997，40，3516[27]Rampa，A.；bisi，A.；Valenti，P.；Recanatini，M.；Cavalli，a.；andrisano，V.；Cavrini，V.；Fin，L.；Buriani，A.；Giusti，P.J.Med.Chem.1998，41，3976[28]Badia，A.；Banos，J.E.；Camps，P.；Contreas，J.；Gorbig，d.M.；Munoz-Torrero，D.；Simon，M.；Vivas，N.M.Bioorg.Med.Chem.1998，6，427[29]Suzuki，T.；Usui，T.；Oka，M.；suzuki，ts.；Kataoka，T.Chem.Pharm.Bull.1998，46(8)，1265[30]Suzuki，T.；Uesaka H.；Hamajima，H.；Ikami，T.；Chem Pharm Bull 1999，47(6)，87[31]Messer，Jr.W.S.；Abuh，Y.F.；Liu，Y.；Periyasamy，S；Ngur，D.O.；Edgar，M.A.N.；El-Assadi S.S.，A.A.；Dunbar，P.G.；Roknich，S.；Rho，T.；Fang，Z.；Ojo，B.；Zhang，H.；Huzl，III，J.J.；Nagy，p.I.J. Med.Chem.1997，40，1230[32]Yu，Q.-S.；holloway，H.W.；utsuki，T.；Brossi，a.；Greig.N.H.J.Med.Chem.1999，42，1855[33]Al-Jafari，A.；Kamal，M.；Grieg，N.；Alhomida，A.；Perry，E.Biochem.Biophy.Res.Comm.1998，248，180[34]Ellman，G.；Courtney，D.；Andres，V.；Featherstone，R.Biochem.Pharm.1961.7，88[35]Jeyarasasingam，G.；Yeluashvili，M.；Quik，M.Neuropharm.2000，11，1173[36]Kuno，F(xiàn).；Otoguro，K.；Shiomi，K.；Iwai，Y.；Omura，S.J.Antibiotics 1996，49，742[37]Ehrenstein，G.；Galdzicki，Z.；Lange，G.D.Biophys.J.1997，73，1276[38]Kiely，J.；Moos，W.；Pavia，M.；Schwarz，R.；Woodard，G.Anal.Biochem.1991，196，439[39]Kamal，M.；Greig，N.；Alhomida，A.；Al-Jafari，A.Biochem.Pharm.2000，60，561附圖的簡(jiǎn)要說(shuō)明

圖1說(shuō)明了根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例1得到的哌啶衍生物對(duì)于乙酰膽堿酯酶活性的抑制；圖2說(shuō)明了根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例2得到的哌啶衍生物對(duì)于乙酰膽堿酯酶活性的抑制；圖3說(shuō)明了根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例3得到的哌啶衍生物對(duì)于乙酰膽堿酯酶活性的抑制；圖4說(shuō)明了根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例4得到的哌啶衍生物對(duì)于乙酰膽堿酯酶活性的抑制；和圖5說(shuō)明了根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例5得到的哌啶衍生物對(duì)于乙酰膽堿酯酶活性的抑制。
哌啶衍生物的制備實(shí)施例1
步驟14-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁酸乙酯的合成向28ml甲基異丁基酮(MIBK)中加入4-(二苯甲基氧基)哌啶(1.5g)、NaHCO3(1.42g)、碘化鉀(催化劑)和4-氯丁酸乙酯(1.2ml)。將所得混合物回流4小時(shí)。冷卻所得混合物，減壓濃縮。然后使用水和氯仿來(lái)萃取所得溶液。將有機(jī)溶液層用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(1.41g，收率66％)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.26(t，J＝15.2Hz，3H)1.77-1.93(m，6H)2.21-2.30(m，2H)2.32-2.42(m，4H)2.77-2.79(m，2H)3.41-3.44(m，1H)4.14(q，J＝15.2Hz，2H)5.53(s，1H)7.23-7.37(m，10H)步驟2 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇的合成將步驟1所得化合物(0.4g)溶解在醚中，然后在冰浴中冷卻。將LiAlH4(0.1g)緩慢加入到溶液中。使所得混合物在室溫下反應(yīng)1小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。使用水和酯來(lái)萃取所得溶液。將有機(jī)溶液層用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.15，收率43％)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.68-1.77(m，4H)1.78-1.94(m，4H)2.27-2.38(m，4H)2.76-2.79(m，2H)3.45-3.58(m，3H)5.51(s，1H)7.23-7.36 (m，10H)步驟3 4-[4-(二苯甲基氧基)]哌啶子基]丁基-4-硝基苯甲酸酯的合成向4ml氯仿中加入步驟2所得4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.11g)、4-硝基苯甲酸(0.1g)、4-二甲基氨基吡啶(DMAP，0.12g)和1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.1g)。然后使所得混合物在室溫下反應(yīng)3小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。用1N鹽酸酸化所得溶液，并使用氯仿來(lái)萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.12g，收率76％)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.65-1.89(m，8H)2.06-2.16(m，2H)2.39(t，J＝14.8Hz，2H)2.74-2.77(m，2H)3.45-3.48(m，1H)4.40(t，J＝12.9Hz，2H)5.53(s，1H)7.23-7.37(m，2H)8.21(d，J＝8.8Hz，2H)8.29(d，J＝8.7Hz，2H)實(shí)施例2 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基-4-氯苯甲酸酯的合成向5ml氯仿中加入由實(shí)施例1步驟2所得的4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.15g)、4-氯苯甲酸(0.11g)、4-二甲基氨基吡啶(0.16g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.1g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)2小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。用1N鹽酸來(lái)酸化所得溶液，使用氯仿來(lái)萃取。用4N氫氧化鈉洗滌有機(jī)溶液層，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.15g，收率71％)。
1H-NMR(CDCl3)1.62-1.90(m，8H)2.14-2.22(m，2H)2.39(t，J＝14.9Hz，2H)3.45-3.51(m，1H)4.3(t，J＝12.7Hz，2H)5.53(s，1H)727-7.37(m，10H)7.41(d，J＝8.5Hz，2H)7.97(d，J＝8.5Hz，2H)實(shí)施例3 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基4-氟苯甲酸酯的合成向5ml氯仿中加入由實(shí)施例1步驟2所得的4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.16g)、4-氟苯甲酸(0.1g)、4-二甲基氨基吡啶(0.17g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.1g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)2小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。用1N鹽酸來(lái)酸化所得溶液，并使用氯仿來(lái)萃取。有機(jī)溶液層用4N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體產(chǎn)物(0.16g，收率74％)。
1H-NMR(CDCl3)1.61-1.89(m，8H)2.11-2.14(m，2H)2.34(t，J＝15.2Hz，2H)2.69-2.77(m，2H)3.38-3.45(m，1H)4.29(t，J＝13.2Hz，2H)5.50(s，1H)7.07(t，J＝22.8Hz，2H)7.21-7.39(m，10H)8.02(d，d J＝19.6Hz，2H)實(shí)施例4 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基苯甲酸酯的合成向6ml氯仿中加入由實(shí)施例1步驟2所得的4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.21g)、苯甲酸(0.11g)、4-二甲基氨基吡啶(0.23g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.13g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)2小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，使用氯仿來(lái)萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.17g，收率63％)。
1H-NMR(CDCl3)1.67-1.91(m，8H)2.12-2.20(m，2H)2.40(t，J＝15.0Hz，2H)2.77-2.80(m，2H)3.44-3.50(m，1H)4.35(t，J＝12.7Hz，2H)5.54(s，1H)7.25-7.37(m，10H)7.42-7.47(m，2H)7.54-7.57(m，1H)8.05(d，J＝8.5Hz，2H)實(shí)施例5 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基4-異丙基苯甲酸酯的合成向12ml氯仿中加入由實(shí)施例1步驟2所得的4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.3g)、4-異丙基苯甲酸(0.22g)、4-二甲基氨基吡啶(0.32g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.19g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)3小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸來(lái)酸化，并使用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.28g，收率66％)。
1H-NMR(CDCl3)1.24(d，J＝14.4Hz，6H)1.58-1.86(m，8H)2.04-2.18(m，2H)2.34(t，J＝15.2Hz，2H)2.72-2.78(m，2H)2.97-2.90(m，1H)3.46-3.40(m，1H)4.28(t，J＝19.6Hz，2H)5.50(s，1H)7.34-7.19(m，12H)7.93(d，J＝16.0Hz，2H)實(shí)施例6 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基4-(叔丁基)苯甲酸酯的合成向5ml氯仿中加入實(shí)施例1步驟2所得的4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.15g)、4-叔丁基苯甲酸(0.12g)、4-二甲基氨基吡啶(0.16g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.1g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)3小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。反應(yīng)混合物用1N鹽酸酸化，用二氯甲烷來(lái)萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用無(wú)水硫酸鈉脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.19g，收率96％)。
1H-NMR(CDCl3)1.41(s，9H)1.72-1.86(m，8H)2.05-2.15(m，2H)2.34(t，J＝14.6Hz，2H)2.71-2.77(m，2H)3.39-3.47(m，1H)4.3(t，J＝12.5Hz，2H)5.51(s，1H)7.21-7.37(m，10H)7.42(d，J＝8.74Hz，2H)7.96(d，J＝10.56Hz，2H)實(shí)施例7 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基3-氯苯甲酸酯的合成向6ml氯仿中加入實(shí)施例1步驟2所得的4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.2g)、3-氯苯甲酸(0.14g)、4-二甲基氨基吡啶(0.22g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.13g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)4小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，使用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.092g，收率33％)。
1H-NMR(CDCl3)1.57-1.92(m，8H)2.10-2.18(m，2H)2.34(t，J＝14.8Hz，2H)2.73-2.79(m，2H)3.41-3.48(m，1H)4.31(t，J＝12.8Hz，2H)5.50(s，1H)7.20-7.39(m，11H)7.50(d，J＝8Hz，1H)7.89(d，J＝7.6Hz，1H)7.98(s，1H)實(shí)施例8 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基3-氟苯甲酸酯的合成向6ml氯仿中加入實(shí)施例1步驟2所得的4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.21g)、3-氟苯甲酸(0.13g)、4-二甲基氨基吡啶(0.23g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.13g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)3小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，用氯仿萃取。有機(jī)層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.0388g，收率14％)。
1H-NMR(CDCl3)1.66-1.92(m，8H)2.17-2.24(m，2H)2.40(t，J＝14.4Hz，2H)2.76-2.82(m，2H)3.44-3.49(m，1H)4.35(t，J＝12.8Hz，2H)5.53(s，1H)7.23-7.43(m，12H)7.72(d，J＝7.7Hz，1H)7.84(d，J＝7.7Hz，1H)實(shí)施例9 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基N-(4-氯苯基)氨基甲酸酯的合成向19ml乙腈中加入實(shí)施例1步驟2所得的4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.66g)、4-氯苯基異氰酸酯(0.3g)。將所得混合物回流4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，并減壓濃縮。然后使用水和氯仿來(lái)萃取所得溶液。有機(jī)溶液層用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.23g，收率24％)。
1H-NMR(CDCl3)1.68-1.94(m，6H)2.04-2.12(m，2H)2.22-2.28(m，2H)2.43(t，J＝13.4Hz，2H)2.76-2.82(m，2H)3.47-3.51(M，1H)4.18(t，J＝10.8Hz，2H)5.52(s，1H)6.85(s，1H)7.24-7.43(m，14H)實(shí)施例10 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基N-(4-氟代苯基)氨基甲酸酯的合成向14ml乙腈中加入實(shí)施例1步驟2所得的4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.48g)、4-氟代苯基異氰酸酯(0.23g)。將混合物回流4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，并減壓濃縮。然后使用水和氯仿來(lái)萃取所得混合物。有機(jī)溶液層用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.18g，收率24％)。
1H-NMR(CDCl3)1.66-1.92(m，6H)1.81-1.97(m，2H)2.09-2.16(m，2H)2.31(t，J＝12.2Hz，2H)2.74-2.82(m，2H)3.39-3.42(m，1H)4.12(t，J＝11.2Hz，2H)5.49(s，1H)6.67(s，1H)6.98(t，J＝10.6Hz，2H)7.14-7.25(m，12H)實(shí)施例11 4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基丁基煙酸酯的合成向8ml氯仿中加入實(shí)施例1步驟2所得的4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.14g)、煙酸(0.1g)、4-二甲基氨基吡啶(0.12g)、1-[3-(二甲基氨基)]丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.1g)。使混合物在室溫下反應(yīng)3小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。反應(yīng)混合物用1N鹽酸酸化，用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.12g，收率66％)。
1H-NMR(CDCl3)1.64-1.89(m，8H)2.14-2.17(m，2H)2.38(t，J＝14.9Hz，2H)2.75-2.78(m，2H)3.46-3.51(m，1H)4.38(t，J＝12.9Hz，2H)5.53(s，1H)7.24-7.39(m，11H)8.35(d，J＝4.9Hz，1H)8.78(d，J＝4.8Hz，1H)9.23(s，1H)實(shí)施例12步驟14-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁酸乙酯的合成向12ml N，N-二甲基甲酰胺中加入4-(芐氧基)哌啶(0.8g)、碳酸氫鈉(1.05g)、碘化鉀(用作催化劑)、4-氯丁酸乙酯(0.88ml)。將所得混合物回流4小時(shí)。冷卻所得混合物，減壓濃縮。然后使用水和氯仿來(lái)萃取所得混合物。有機(jī)溶液層用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(1.05g，收率82％)。
1H-NMR(CDCl3)1.22(t，J＝16.8Hz，3H)1.67-1.91(m，6H)2.09-2.19(m，2H)2.27-2.36(m，4H)2.78-2.81(M，2H)3.38-3.42(m，1H)4.10(q，J＝16.8Hz，2H)4.51(s，2H)7.23-7.34(M，5H)步驟2 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇的合成將步驟1所得的混合物(4.8g)溶解在醚中，在冰浴中冷卻。將LiAlH4(0.1g)緩慢加入到溶液中。使所得混合物在室溫下反應(yīng)1小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。然后使用水和酯來(lái)萃取所得溶液。有機(jī)溶液層用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(3.44g，收率83％)。
1H-NMR(CDCl3)1.62-1.76(m，6H)1.84-1.91(m，2H)2.21-2.31(m，4H)2.70-2.76(m，2H)3.42-3.56(m，3H)4.48(s，2H)7.19-7.30(m，5H)步驟3 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基4-硝基苯甲酸酯的合成向14ml氯仿中加入步驟2所得的4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.37g)、4-硝基苯甲酸(0.35g)、4-二甲基氨基吡啶(0.51g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.3g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)2小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.58g，收率64％)。
1H-NMR(CDCl3)1.64-1.91(m，8H)2.12-2.18(m，2H)2.40(t，J＝14.9Hz，2H)2.76-2.82(m，2H)3.42-3.48(m，1H)4.40(t，J＝12.9Hz，2H)4.55(s，1H)7.27-7.36(m，5H)8.21(d，J＝10.7Hz，2H)8.29(d，J＝10.6Hz，2H)實(shí)施例13 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基4-氯苯甲酸酯的合成向30ml氯仿中加入實(shí)施例12步驟2所得的4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.8g)、4-氯苯甲酸(0.71g)、4-二甲基氨基吡啶(0.64g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.11g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)4小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.74g，收率61％)。
1H-NMR(CDCl3)1.68-1.94(m，8H)2.15-2.22(m，2H)2.40(t，J＝14.7Hz，2H)2.78-2.84(m，2H)3.42-3.46(m，1H)4.34(t，J＝12.6Hz，2H)4.56(s，2H)7.28-7.37(m，5H)7.42(d，J＝8.4Hz，2H)7.98(d，J＝8.4Hz，2H)實(shí)施例14 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基4-氟苯甲酸酯的合成向14ml氯仿中加入實(shí)施例12步驟2所得的4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.37g)、4-氟苯甲酸(0.3g)、4-二甲基氨基吡啶(0.51g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.3g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)2小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.34g，收率63％)。
1H-NMR(CDCl3)1.61-1.78(m，6H)1.84-1.90(m，2H)2.10-2.16(m，2H)2.34(t，J＝15.2Hz，2H)2.71-2.78(m，2H)3.38-3.44(m，1H)4.29(t，J＝13.2Hz，2H)4.51(s，2H)7.07(t，J＝23.2Hz，2H)7.21-7.34(m，5H)8.02(d，d J＝20.0Hz，2H)實(shí)施例15 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基苯甲酸酯的合成向14ml氯仿中加入實(shí)施例12步驟2所得的4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.3g)、苯甲酸(0.26g)、4-二甲基氨基吡啶(0.51g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.3g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)2小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.35g，69％收率)。
1H-NMR(CDCl3)1.58-1.79(m，6H)1.88-1.96(m，2H)2.08-2.16(m，2H)2.35(t，J＝15.2Hz，2H)2.74-2.78(m，2H)3.36-3.44(m，1H)4.30(t，J＝13.2Hz，2H)4.51(s，2H)7.21-7.33(m，5H)7.38-7.45(m，2H)7.50-7.54(m，1H)8.01(d，J＝9.6Hz，2H)實(shí)施例16 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基4-異丙基苯甲酸酯的合成向20ml氯仿中加入實(shí)施例12步驟2所得的4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.63g)、4-異丙基苯甲酸(0.59g)、4-二甲基氨基吡啶(0.50g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.88g)。所得混合物在室溫下反應(yīng)3小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.62g，收率64％)。
1H-NMR(CDCl3)1.24(d，J＝8.2Hz，6H)1.63-1.77(m，6H)1.80-1.94(m，2H)2.10-2.14(m，2H)2.39(t，J＝14.9Hz，2H)2.76-2.81(m，2H)2.90-2.97(m，1H)3.38-3.44(m，1H)4.33(t，J＝12.7Hz，2H)4.56(s，2H)7.29-7.37(m，12H)7.94(d，J＝8.2Hz，2H)實(shí)施例17 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基4-(叔丁基)苯甲酸酯的合成向30ml氯仿中加入實(shí)施例12步驟2所得的4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.35g)、4-叔丁基苯甲酸(0.36g)、4-二甲基氨基吡啶(0.49g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.28g)。所得混合物在室溫下反應(yīng)2小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用無(wú)水硫酸鈉脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.42g，收率76％)。
1H-NMR(CDCl3)1.32(s，9H)1.64-1.78(m，6H)1.86-1.92(m，2H)2.08-2.14(m，2H)2.35(t，J＝15.2Hz，2H)2.72-2.77(m，2H)3.37-3.41(m，1H)4.29(t，J＝12.8Hz，2H)4.51(s，2H)7.23-7.36(m，5H)7.42(d，J＝8.0Hz，2H)7.94(d，J＝8.0Hz，2H)實(shí)施例18 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基3-氯苯甲酸酯的合成向12ml氯仿中加入實(shí)施例12步驟2所得的4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.43g)、3-氯苯甲酸(0.38g)、4-二甲基氨基吡啶(0.60g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.34g)。所得混合物在室溫下反應(yīng)4小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.31g，收率47％)。
1H-NMR(CDCl3)1.57-1.77(m，6H)1.89-1.96(m，2H)2.08-2.14(m，2H)2.31(t，J＝14.8Hz，2H)2.71-2.78(m，2H)3.36-3.42(m，1H)4.30(t，J＝12.8Hz，2H)4.51(s，2H)7.21-7.38(m，6H)7.48(d，J＝8.0Hz，1H)7.86(d，J＝7.6Hz，1H)7.94(s，1H)實(shí)施例19 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基3-氟苯甲酸酯向26ml氯仿中加入實(shí)施例12步驟2所得的4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.7g)、3-氟苯甲酸(0.56g)、4-二甲基氨基吡啶(0.97g)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.56g)。使所得混合物在室溫下反應(yīng)4小時(shí)，然后加入水來(lái)結(jié)束反應(yīng)。所得溶液用1N鹽酸酸化，用氯仿萃取。有機(jī)溶液層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.49g，收率48％)。
1H-NMR(CDCl3)1.64-1.79(m，6H)1.89-1.94(m，2H)2.08-2.17(m，2H)2.35(t，J＝15.2Hz，2H)2.73-2.84(m，2H)3.39-3.44(m，1H)4.31(t，J＝12.8Hz，2H)4.51(s，2H)7.24-7.66(m，7H)7.80(d，J＝2.8Hz，1H)7.79(d，J＝3.2Hz，1H)實(shí)施例20 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基N-(4-氯苯基)氨基甲酸酯的合成向26ml乙腈中加入實(shí)施例12步驟2所得的4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.7g)、4-氯苯基異氰酸酯(0.42g)。將混合物回流4小時(shí)。冷卻所得混合物，減壓濃縮。然后使用水和氯仿來(lái)萃取所得混合物。有機(jī)溶液層用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.67g，收率61％)。
1H-NMR(CDCl3)1.53-1.69(m，6H)1.89-1.99(m，2H)2.08-2.16(m，2H)2.32(t，J＝15.2Hz，2H)2.68-2.74(m，2H)3.38-3.43(m，1H)4.14(t，J＝12.8Hz，2H)4.51(s，2H)6.67(s，1H)7.21-7.32(m，9H)實(shí)施例21 4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基N-(4-氟代苯基)氨基甲酸酯的合成向37ml乙腈中加入實(shí)施例12步驟2所得的4-[4-(芐氧基)哌啶子基]-1-丁醇(0.99g)、4-氟代苯基異氰酸酯(0.49ml)。將混合物回流5小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，減壓濃縮。然后使用水和氯仿來(lái)萃取所得混合物。有機(jī)溶液層用硫酸鎂脫水，過(guò)濾，減壓濃縮。然后進(jìn)行柱色譜分離，從而得到題述微黃色液體粗產(chǎn)物(0.72g，48％收率)。
1H-NMR(CDCl3)1.59-1.71(m，6H)1.88-1.94(m，2H)2.12-2.18(m，2H)2.36(t，J＝14.8Hz，2H)2.78-88(m，2H)3.42-3.48(m，1H)4.18(t，J＝12.6Hz，2H)4.56(s，2H)6.78(s，1H)7.02(t，J＝8.6Hz，2H)7.28-7.36(m，7H)測(cè)定乙酰膽堿酯酶抑制效果的實(shí)驗(yàn)1.試劑用于測(cè)定乙酰膽堿酯酶(AChE)活性的化合物如乙酰膽堿酯酶(V-S型得自electric eel)、乙酰膽堿碘化物、5，5-二硫代-雙(2-硝基苯甲酸)和溴化新斯的明為Sigma Chemical Co.，U.S.A.的產(chǎn)品，選擇高純度的試劑作為其它試劑。
2.儀器和設(shè)備SmartSpec3000為UV分光計(jì)，由BioRad Company制造；MettlerAB204S為化學(xué)天平，由Toledo company制造；pH計(jì)360由BeckmanCompany制造；其它儀器如制冰機(jī)、水浴、冷凍設(shè)備為標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品。
3.乙酰膽堿酯酶活性的測(cè)定使用用于測(cè)定酶活性的改進(jìn)的Ellman′s方法來(lái)進(jìn)行乙酰膽堿酯酶活性的測(cè)定。將酶分為適當(dāng)?shù)牧?，保持?80℃下。實(shí)驗(yàn)中使用的酶的最終濃度為0.03單位濃度。將1000μM乙酰膽堿碘化物溶于0.1M磷酸鈉緩沖液(pH8.0)，用作底物。對(duì)于染料試劑，使用溶解在10ml磷酸鈉緩沖液(0.1M，pH7.0)中的5，5-二硫代-雙-(2-硝基苯甲酸)(39.6mg)和碳酸氫鈉(15mg)。
酶反應(yīng)的過(guò)程如下所述。在將200μl DTNB和100μl酶(0.03U)加入到2ml磷酸鈉緩沖液(pH8.0)中后，將所得混合物在37℃預(yù)加熱10分鐘。向所得混合物中加入200μl底物，使其反應(yīng)3分鐘。在412nm波長(zhǎng)處測(cè)量最終反應(yīng)物的光譜。通過(guò)定量劑量反應(yīng)來(lái)測(cè)定與活性抑制相關(guān)的IC50值。結(jié)果概述于表1a和表1b。
抑制β-淀粉狀蛋白聚集的測(cè)定實(shí)驗(yàn)1.試劑作為測(cè)量β-淀粉狀蛋白聚集的物質(zhì)，β-淀粉狀蛋白(1-42)為American Peptide Co.，U.S.A.的產(chǎn)品；硫代黃素T(thioflavin T)、磷酸鹽緩沖鹽片劑和二甲基亞砜(DMSO，99.5％)為Sigma Chemical Co.，U.S.A.的產(chǎn)品，選擇高純度的試劑作為其它試劑。
2.裝置和設(shè)備RF-5300PC為熒光分光計(jì)，由Shimadzu Corp.制造；Mettler AB204S為化學(xué)天平，由Toledo company制造；pH計(jì)360由Beckman Company制造；其它裝置如制冰機(jī)、水浴、冷凍設(shè)備為標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品。
3.測(cè)量β-淀粉狀蛋白(1-42)聚集的實(shí)驗(yàn)在測(cè)量β-淀粉狀蛋白聚集時(shí)使用熒光分析。將該肽化合物放在深冷器(-80℃)中，測(cè)量所用的最終濃度為5μM。將需要分析的化合物溶解在99.5％DMSO中，將硫代黃素T(5μM)溶解在0.01 M磷酸鈉緩沖液中制得熒光物質(zhì)。
聚集反應(yīng)的步驟如下所述。向0.01M磷酸鈉緩沖液(92.5μl)中加入固定濃度的化合物(5μl)進(jìn)行測(cè)量，并加入5μM β-淀粉狀蛋白1-42(2.5μl)。將所得混合物在37℃保持26小時(shí)，進(jìn)行聚集。向其中加入5μM硫代黃素T(2000μl)，然后用熒光分光計(jì)測(cè)量熒光強(qiáng)度。將熒光分光計(jì)的波長(zhǎng)設(shè)定在Ex＝446nm(狹縫寬度＝5nm)、Em＝490nm(狹縫寬度＝10nm)，通過(guò)定量劑量反應(yīng)來(lái)測(cè)量與聚集抑制相關(guān)的IC50值。結(jié)果概述于表1a。
如表1a所示，作為實(shí)施例2合成的式3哌啶衍生物，其中R為氯芐基，R′為二苯甲基，以最低濃度(0.3μM)使用，可抑制50％的酶活性。因此，它們可用作治療阿耳茨海默氏病的藥物成分。同樣，作為實(shí)施例6合成的哌啶衍生物，其中R為叔丁基，R′為二苯甲基，以最低濃度使用，抑制β-淀粉狀蛋白聚集。通常，用二苯甲基而不是芐基取代的R′有利于抑制乙酰膽堿酯酶和β-淀粉狀蛋白。
急性毒性試驗(yàn)為了將化合物包括在治療阿耳茨海默氏病的藥物組合物中，該化合物必須是無(wú)毒的。對(duì)通過(guò)實(shí)施例2合成的代表性化合物(抑制乙酰膽堿酯酶的最佳物質(zhì))和通過(guò)實(shí)施例6合成的代表性化合物(抑制β-淀粉狀蛋白聚集的最佳物質(zhì))進(jìn)行了對(duì)于動(dòng)物的急性毒性測(cè)試。這個(gè)試驗(yàn)遵循韓國(guó)食品及藥物管理局(Korea Food&Drug Administration)的規(guī)定。對(duì)幾組ICR小鼠(雄性，重量30±3g)，其中一組包括4個(gè)小鼠，立即用上述化合物進(jìn)行腹膜內(nèi)注射，濃度為50mg/kg至500mg/kg，在10天內(nèi)觀察死亡率和重量變化。用于試驗(yàn)的化合物用小麥胚芽油稀釋。結(jié)果，用實(shí)施例2和實(shí)施例6的化合物注射的兩個(gè)組中都沒(méi)有出現(xiàn)死亡。盡管實(shí)施例2化合物的500mg/kg注射(6.96％)組和實(shí)施例6化合物的200mg/kg注射(6.31％)組在注射第一天出現(xiàn)了一些重量損失，但是從第二天開始重量持續(xù)增加。此外，在動(dòng)物活動(dòng)性方面沒(méi)有問(wèn)題。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，可以預(yù)計(jì)化合物的致死劑量遠(yuǎn)高于500mg/kg的濃度，這表明這些物質(zhì)的使用非常安全。結(jié)果概述于表2(實(shí)施例2的化合物)和表3(實(shí)施例6的化合物)。
對(duì)于在實(shí)施例2中合成的化合物的毒性實(shí)驗(yàn) 對(duì)于在實(shí)施例6中合成的化合物的毒性實(shí)驗(yàn) 本申請(qǐng)的化合物具有哌啶環(huán)結(jié)構(gòu)，所述哌啶環(huán)具有丁基羧酸酯官能團(tuán)、和芐氧基或二苯甲基官能團(tuán)。通過(guò)設(shè)計(jì)和合成，考慮到丁基羧酸酯基和芐氧基或二苯甲基對(duì)于哌啶母結(jié)構(gòu)的反應(yīng)部位的距離和反應(yīng)性，該化合物可用作治療物質(zhì)。此外，當(dāng)給電子基團(tuán)和吸電子基團(tuán)作為哌啶取代基引入時(shí)，化合物的反應(yīng)性表明，對(duì)于乙酰膽堿酯酶和β-淀粉狀蛋白聚集具有良好抑制效果。最后，該化合物表明，在進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)時(shí)，即使使用500mg/kg的注射量也不會(huì)對(duì)小鼠產(chǎn)生毒性。
本發(fā)明的工業(yè)實(shí)用性如上文所述，本發(fā)明作為阿耳茨海默氏病的治療物質(zhì)極為有用，因?yàn)樗谝种埔阴Ｄ憠A酯酶和β-淀粉狀蛋白聚集方面具有優(yōu)良性能，所述酶和蛋白聚集與該疾病的產(chǎn)生相關(guān)。
權(quán)利要求
1.一種具有式3的哌啶衍生物<式3> 其中R′為芐基 或二苯甲基 R為(i)直鏈或支鏈的C1-C6烷基，(ii) 或(iii)-NHR2；R1為-H、-OH、鹵素、-NO2、-NH2、直鏈或支鏈的C1-C6烷基；X1為C；X2、X3、X4、X5和X6獨(dú)立為CH或N；k為1至5的整數(shù)；和R2為H或
2.如權(quán)利要求1所述的吡啶衍生物，其中R選自下列部分(i)-CH3、-(CH2)nCH3(其中n為2至5的整數(shù))，
3.如權(quán)利要求1所述的吡啶衍生物，其中吡啶衍生物選自4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基-4-硝基苯甲酸酯；4-[4-(二苯甲基氧氧)哌啶子基]丁基-4-氯苯甲酸酯；4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基-4-氟苯甲酸酯；4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基苯甲酸酯；4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基-4-異丙基苯甲酸酯；4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基-4-(叔丁基)苯甲酸酯；4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基-3-氯苯甲酸酯；4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基-3-氟苯甲酸酯；4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基-N-(4-氯苯基)氨基甲酸酯；4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基-N-(4-氟代苯基)氨基甲酸酯；4-[4-(二苯甲基氧基)哌啶子基]丁基煙酸酯；4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基-4-硝基苯甲酸酯；4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基-4-氯苯甲酸酯；4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基-4-氟苯甲酸酯；4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基苯甲酸酯；4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基-4-異丙基苯甲酸酯；4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基-(叔丁基)苯甲酸酯；4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基-3-氯苯甲酸酯；4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基-3-氟苯甲酸酯；4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基-N-(4-氯苯基)氨基甲酸酯；和4-[4-(芐氧基)哌啶子基]丁基-N-(4-氟代苯基)氨基甲酸酯。
4.一種制備權(quán)利要求1的吡啶衍生物的方法，所述方法包括如下步驟(a)將式4的化合物和式5的化合物反應(yīng)，得到式6的化合物；(b)還原式6的化合物，得到式7的化合物；(c)將式7的化合物與RCOOH或R-N＝C＝O反應(yīng)，得到式3的化合物<式3> <式4> <式5> <式6> <式7> 其中，R′為芐基 或二苯甲基 R為(i)直鏈或支鏈的C1-C6烷基，(ii) 或(iii)-NHR2；R1為-H、-OH、鹵素、-NO2、-NH2、直鏈或支鏈的C1-C6烷基；X1為C；X2、X3、X4、X5和X6獨(dú)立地為CH或N；k為1至5的整數(shù)；和R2為H或 R″為C1-C4烷基；和X為鹵族元素。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，所述方法包括由下面的反應(yīng)圖式2表示的步驟<反應(yīng)圖式2>
6.一種治療阿耳茨海默氏病的藥物組合物，所述組合物包括有效量的權(quán)利要求1的吡啶衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，所述組合物另外包括藥學(xué)土可接受的載體。
8.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中所述組合物用于口服給藥，其另外包括(i)膠囊賦形劑；(ii)片劑賦形劑；(iii)添加劑，所述添加劑選自淀粉、結(jié)晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙二醇、乳糖、聚乙烯基吡咯烷酮和山崳酸甘油酯；(iv)稀釋劑；(v)濕粘合劑；(vi)潤(rùn)滑劑；(vii)流態(tài)化劑；或(viii)粘合抑制劑。
9.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中所述組合物用于注射，其另外包括(i)溶劑；(ii)稀釋劑；或(iii)防腐劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的哌啶衍生物，其具有抑制乙酰膽堿酯酶和β－淀粉狀蛋白聚集的效果，所述β－淀粉狀蛋白為引起阿耳茨海默氏病的蛋白，本發(fā)明還涉及使用包含所述衍生物的組合物來(lái)治療阿耳茨海默氏病，哌啶衍生物如式3所示。
文檔編號(hào)C07D211/44GK1571784SQ02820467
公開日2005年1月26日 申請(qǐng)日期2002年10月16日 優(yōu)先權(quán)日2001年10月16日
發(fā)明者權(quán)英二, 姜釘鎬, 李和庭, 李尚宰, 金度完, 李康薰, 韓先一, 尹裕善 申請(qǐng)人:Stc納拉有限公司