專利名稱：制備6－亞烷基青霉烯衍生物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制備6-亞烷基青霉烯衍生物的新方法，該衍生物可與廣譜β-內(nèi)酰胺酶抑制劑和抗菌劑同樣重要。
背景技術(shù)：
β-內(nèi)酰胺酶是由細(xì)菌產(chǎn)生的酶，它可水解β-內(nèi)酰胺抗生素，同樣也是細(xì)菌產(chǎn)生抗性的主要原因。青霉素和頭孢菌素是臨床上使用最頻和最廣的β-內(nèi)酰胺抗生素。但是，不同病原菌對β-內(nèi)酰胺抗生素的抗性增強(qiáng)已經(jīng)對維持細(xì)菌感染的有效治療產(chǎn)生了破壞性后果。(Coleman，K.Expert Opin.Invest.Drugs 1995，4，693；Sutherland，R.Infection1995，23(4)191；Bush，K，Cur.Pharm.Design 1999，5，839-845)與細(xì)菌對β-內(nèi)酰胺抗生素的抗性發(fā)展相關(guān)的最重要的公知的機(jī)理是產(chǎn)生了A類、B類和C類絲氨酸β-內(nèi)酰胺酶。上述酶降解了β-內(nèi)酰胺抗生素，導(dǎo)致了抗菌活性的喪失。A類酶優(yōu)先水解青霉素，而C類內(nèi)酰胺酶具有利于頭孢菌素水解的底物外形。(Bush，K.；Jacoby，G.A.；Medeiros，A.A.Antimicrob.Agents Chemother.1995，39，1211)。到目前為止，已經(jīng)報(bào)導(dǎo)了超過250種不同的β-內(nèi)酰胺酶(Payne，D.J，Du，W和Bateson，J.H.Exp.Opin.Invest.Drugs 2000，247.)，需要新一代的廣譜β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。β-內(nèi)酰胺抗生素與抑制上述酶的化合物結(jié)合使用可大大降低細(xì)菌對上述抗生素的抗性。
市售的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑如棒酸、舒巴克坦和他巴克坦都對產(chǎn)生A類酶的病原菌有效。對A類β-內(nèi)酰胺酶(如PCI和TEM-1)的滅活機(jī)制已經(jīng)作了闡述。(Bush，K.；Antimicrob.Agents Chemother.1993，37，851；Yang，Y.；Janota，K.；Tabei，K.；Huang，N.；Seigal，M.M.；Lin，Y.I.；Rasmussen，B.A.和Shalaes，D.M.J.Biol.Chem.2000，35，26674-26682)但是，上述化合物對產(chǎn)生C類酶的微生物沒有效果。棒酸與阿莫西林和替卡西林結(jié)合使用；類似地，舒巴克坦與氨芐西林，他巴克坦與氧哌嗪西林結(jié)合使用。EP0041768A、EP0120613A、EP0150781、EP0210065、WO87/00525、EP0003960B1、GB2042514A、GB2042515A、EP0087792A、EP0115308A、GB2124614B、EP0150984A、EP0087792、EP0115308、EP81301683.9、EP84301255.0、EP85100520.7、EP85100521.5、EP86305585.1、EP86305584、EP88311786.3、EP88311787.1、EP87300193.7、WO93/03042、WO94/10178、WO95/28935和WO95/17184公開了作為β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的6-(取代的亞甲基)青霉烯。EP0232966B1公開了制備6-(取代的亞甲基)青霉烯及其中間體的方法。根據(jù)該專利，通式I的化合物可通過四步法來制備，該方法由(5R，6S)6-溴青霉烯-3-甲酸對甲氧基苯甲酯A和醛在引火試劑如正丁基鋰/二苯基胺或二(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰的存在下于-78℃起始(方案1)。該方法的第三步，即還原消除步驟分別得到E和Z化合物異構(gòu)體D和F，比例為5∶1。
方案1
發(fā)明概述本發(fā)明涉及制備通式I化合物的方法 其中A和B中的一個(gè)表示氫，另一個(gè)是任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的稠合雙環(huán)雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的稠合三環(huán)雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的環(huán)烷基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的烷基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的鏈烯基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的炔基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的飽和或部分飽和的雜芳基；其中任一所述的含有NH環(huán)原子的雜芳基部分可任選地在所述氮上被R1取代。
R5是H、C1-C6烷基、C5-6環(huán)烷基、或CHR3OCOC1-C6烷基或其鹽；R1是H、任選的取代的烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基或單或雙環(huán)的飽和雜環(huán)、任選的取代的環(huán)烷基、任選的取代的鏈烯基、任選的取代的炔基，條件是直接與N相連的碳原子上不存在雙鍵或三鍵；任選的取代的全氟烷基、-S(O)p任選的取代的烷基或芳基，其中p是0-2、任選的取代的-C＝O雜芳基、任選的取代的-C＝O芳基、任選的取代的-C＝O烷基、任選的取代的-C＝O環(huán)烷基、任選的取代的-C＝O單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的C1-C6烷基芳基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基、任選的取代的芳基-C1-C6烷基、任選的取代的雜芳基-C1-C6烷基、任選的取代的C1-C6烷基單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的8-16碳原子的芳基鏈烯基、-CONR6R7、-SO2NR6R7、任選的取代的芳基烷氧基烷基、任選的取代的-烷基-O-烷基芳基、任選的取代的-烷基-O-烷基雜芳基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、任選的取代的芳氧基芳基、任選的取代的芳氧基雜芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基雜芳基、任選的取代的烷基芳氧基烷基胺、任選的取代的烷氧基羰基、任選的取代的芳氧基羰基、或任選的取代的雜芳氧基羰基；R2是H、任選的取代的C1-C6烷基、任選的取代的C2-C6鏈烯基、任選的取代的C2-C6炔基、鹵素、氰基、N-R6R7、任選的取代的C1-C6烷氧基、羥基；任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基、COOR6、任選的取代的烷基芳氧基烷基胺、任選的取代的芳氧基、任選的取代的雜芳氧基、任選的取代的C3-C6鏈烯基氧基、任選的取代的C3-C6炔基氧基、C1-C6烷基氨基-C1-C6烷氧基、烷撐二氧基、任選的取代的芳氧基-C1-C6烷基胺、C1-C6全氟烷基、S(O)q任選的取代的C1-C6烷基、S(O)q任選的取代的芳基，其中q是0、1或2、CONR6R7、胍基或環(huán)狀胍基、任選的取代的烷基芳基、任選的取代的芳基烷基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基、任選的取代的雜芳基-C1-C6烷基、任選的取代的C1-C6烷基單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的8-16碳原子的芳基鏈烯基、-SO2NR6R7、任選的取代的芳基烷氧基烷基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、任選的取代的芳氧基芳基、任選的取代的芳氧基雜芳基、任選的取代的雜芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基雜芳基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、或任選的取代的烷基芳氧基烷基胺；R3是氫、C1-C6烷基、C5-C6環(huán)烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基；R6和R7獨(dú)立的是H、任選的取代的C1-C6烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳基、任選的取代的芳基烷基、任選的取代的雜芳基烷基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基，R6和R7可一起形成3-7元的飽和環(huán)系，任選地具有一個(gè)或兩個(gè)雜原子，如N-R1、O、S＝(O)n，n＝0-2；所述方法包括(a)適當(dāng)取代的醛17A′-CHO17
其中A′是當(dāng)B為氫時(shí)上文所定義的A，或當(dāng)A為氫時(shí)上文所定義的B在路易斯酸和弱堿的存在下與結(jié)構(gòu)16的6-溴青霉烯衍生物縮合 其中R是對硝基苯甲基，低溫下形成中間體羥醛產(chǎn)物18 其中A′和R如上文所定義；(b)中間體18與?；然蛲ㄊ?R8)Cl或(R8)2O的酸酐、或與通式C(X1)4的四鹵代甲烷，和三苯基膦反應(yīng)，其中R8是烷基SO2、芳基SO2、烷基CO、或芳基CO；X1是Br、I、或Cl；形成中間體化合物19 其中R9是X1或OR8，其中R8、X1、A′和R如上文所定義；和(c)通過還原消除方法將中間體化合物19轉(zhuǎn)化為所要的通式I化合物，其中R5是氫；如果需要的話轉(zhuǎn)化為制藥上可接受的鹽或酯，其中R5是C1-C6烷基、C5-C6環(huán)烷基、或CHR3OCOC1-C6烷基。
本發(fā)明還提供了結(jié)構(gòu)16的6-溴青霉烯衍生物
其中R是上文步驟(a)中所用的對硝基苯甲基。
本發(fā)明還提供了制備通式16的(5R，6S)6-溴青霉烯-3-甲酸-4-硝基苯甲酯的方法，包括下列步驟(A)(i)6-氨基青霉烷酸在有機(jī)溶劑和水中與氫溴酸反應(yīng)形成6-溴衍生物21 和(ii)在堿存在的有機(jī)溶劑中利用4-硝基苯甲基溴將6-溴青霉烷酸21衍生物轉(zhuǎn)化為6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯22 其中R是對硝基苯甲基；(B)氧化6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯22形成6-溴青霉烷酸4-硝基苯甲酯-1-氧化物23
(C)6-溴青霉烷酸4-硝基苯甲-1-氧化物23與2-巰基苯并噻唑在芳族溶劑中回流形成(2R)-2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-3-烯酸-4-硝基苯甲酯24；(D)(2R)-2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-3-烯酸-4-硝基苯甲酯24溶解于有機(jī)溶劑中，與有機(jī)叔堿反應(yīng)形成2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯25；(E)在約-10℃至約-30℃，通過在有機(jī)酸、乙酸酐/有機(jī)叔堿和三烷基或三芳基膦存在的芳族有機(jī)溶劑中反應(yīng)將2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯25轉(zhuǎn)化為2-[(3S，4R)-3-溴-4-甲酰基硫基-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯26；(F)所述的2-[(3S，4R)-3-溴-4-甲?；蚧?2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯26在-70℃至-90℃溶解于有機(jī)溶劑中，通過臭氧處理的氧3-4小時(shí)，繼而利用亞磷酸鹽試劑進(jìn)行分子內(nèi)環(huán)化形成(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸-4-硝基苯甲酯16。
該方法可利用下面的步驟方便地進(jìn)行步驟1在-10℃至-30℃，6-氨基青霉烷酸20在48％w/w氫溴酸和亞硝酸鈉或亞硝酸鉀溶液的存在下溶解于有機(jī)溶劑(優(yōu)選甲醇或THF)和水中，形成6-溴衍生物21。該6-溴青霉烷酸21衍生物可分離，或就地在有機(jī)堿或無機(jī)堿(優(yōu)選碳酸鈉或鉀)存在的有機(jī)溶劑(優(yōu)選THF或DMF)中利用4-硝基苯甲基溴轉(zhuǎn)化為6-溴青霉烷酸4-硝基苯甲酯22。
步驟2通過步驟1所述的方法獲得的產(chǎn)物6-溴青霉烷酸4-硝基苯甲酯22可分離或在同一容器中轉(zhuǎn)化為6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23(即步驟1；連續(xù)形成)，利用任一公知的氧化劑如3-氯過苯甲酸(mcpba)或過氧化氫將22氧化為6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23。
步驟3步驟2的產(chǎn)物，即6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23，可通過在芳族溶劑(優(yōu)選甲苯或二甲苯)中6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23與2-巰基苯并噻唑回流轉(zhuǎn)化為(2R)-2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-3-烯酸-4-硝基苯甲酯24。
步驟4步驟3的產(chǎn)物，即(2R)-2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-3-烯酸-4-硝基苯甲酯24可溶解于有機(jī)溶劑(優(yōu)選甲苯或二甲苯)中，室溫與有機(jī)叔堿(優(yōu)選三乙胺)反應(yīng)得到2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯25。
步驟5步驟4的產(chǎn)物，即2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯25，在約-10℃至約-30℃(優(yōu)選約-15至-20℃)，通過在有機(jī)酸(優(yōu)選甲酸)、乙酸酐/有機(jī)叔堿(優(yōu)選吡啶)和三烷基或三芳基膦(優(yōu)選三苯基膦)存在的芳族有機(jī)溶劑(優(yōu)選甲苯)中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為2-[(3S，4R)-3-溴-4-甲酰基硫基-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯26。
本發(fā)明的一種選擇性的實(shí)施方案涉及化合物23向26的連續(xù)轉(zhuǎn)化，不用分離中間體步驟2的產(chǎn)物，即6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23在回流的芳族有機(jī)溶劑(優(yōu)選甲苯)中與巰基苯并噻唑反應(yīng)優(yōu)選1-3小時(shí)，并在0至-20℃用三乙胺處理3-4小時(shí)。處理之后，該反應(yīng)混合物在-10℃至-40℃連續(xù)加入有機(jī)酸(優(yōu)選甲酸)和酸酐(乙酸酐)，有機(jī)叔堿(優(yōu)選吡啶)和三烷基或三芳基膦。
步驟6來自步驟5或連續(xù)轉(zhuǎn)化的產(chǎn)物2-[(3S，4R)-3-溴-4-甲酰基硫基-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯26在-70℃至-90℃溶解于有機(jī)溶劑(優(yōu)選乙酸乙酯)中，通過臭氧處理的氧3-4小時(shí)，繼而利用亞磷酸鹽試劑(優(yōu)選三甲基亞磷酸鹽)進(jìn)行分子內(nèi)環(huán)化。由乙酸乙酯∶己烷中結(jié)晶出(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸-4-硝基苯甲酯16。
本發(fā)明還涉及下面通式(16)所表示的化合物
在上述的制備方法中(步驟1到步驟6)，通式16表示的化合物是用于制備通式I的6-(取代的亞甲基)青霉烯的中間體。
通式16表示的化合物是晶體衍生物(X-射線粉末衍射參數(shù)如表2所示)。
該中間體的晶體性質(zhì)賦予了穩(wěn)定性，從而延長了儲(chǔ)存期限。通式16化合物的穩(wěn)定數(shù)據(jù)如表1所示。
步驟7(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸-4-硝基苯甲酯16與適當(dāng)取代的醛(如上文所定義)反應(yīng)以完成羥醛縮合步驟，可在路易斯酸(優(yōu)選無水MgBr2或MgBr2∶醚合物) 和有機(jī)叔堿(優(yōu)選Et3N、吡啶、二甲基氨基吡啶(DMAP)、或二異丙基乙胺三烷基胺)存在的非質(zhì)子極性有機(jī)溶劑(優(yōu)選THF和/或乙腈)中在-10℃至-40℃進(jìn)行。通式18的中間體羥醛產(chǎn)物在同一容器中0℃至-10℃被官能團(tuán)化得到酯離去基團(tuán)，如與?；然蛩狒磻?yīng)得到乙酸酯，與三氟甲基磺酸酸酐(triflic anhydride)得到三氟甲基磺酸酯(triflate)，或與甲苯磺酰氯得到甲苯磺酸酯；或者，如果分離通式18，它可通過將18與四鹵代甲烷和三苯基膦室溫在適合的有機(jī)溶劑優(yōu)選CH2Cl2中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為鹵素衍生物。
步驟8最后一步，即得到通式I化合物的還原消除步驟可通過將羥醛產(chǎn)物混合物室溫(優(yōu)選20℃-35℃)溶解在有機(jī)溶劑(優(yōu)選THF/乙腈)，pH6.0-8.5，優(yōu)選6.5-7，pH磷酸鹽緩沖液和活化金屬如鋅、錫或鋁的混合物中來進(jìn)行。堿金屬鹽產(chǎn)物可通過反相離子交換樹脂柱色譜法進(jìn)行純化。
有選擇性地，步驟7和步驟8可在同一容器中連續(xù)進(jìn)行，不用分離羥醛中間體。
最后一步，即還原消除步驟可通過將羥醛產(chǎn)物溶解在有機(jī)溶劑(如THF或乙腈)和6.5-7.0的磷酸緩沖液中并通過Pd/C在10-100psi(優(yōu)選40psi)壓力下氫化來進(jìn)行。
有代表性的實(shí)例如方案A所示，該方案闡述了本發(fā)明。在方案A中列出了適合的反應(yīng)條件，但是也可使用其它的不違背本發(fā)明精神的反應(yīng)條件。例如，可使用更短或更長的反應(yīng)時(shí)間；通常反應(yīng)時(shí)間越長反應(yīng)越完全。
PNB＝對硝基苯甲基amcpba(0，89eq)/DMF-CH2Cl2/0℃，20nin.結(jié)晶；b(1)HCOOH(4.4mol eq)/AC2O(4.4mol eq)/吡啶(1.03mol eq)/MeCN，-15℃，5min；(2)Ph3P(1.02mol eq)-15℃，1h.(3)過柱；(4)結(jié)晶；c(1)O3，AcOEt，-70℃，1.75hrs；(2)P(OMe)3(4.8mol eq)，回流，45min；(3)結(jié)晶優(yōu)選方案本發(fā)明提供了制備通式I化合物的方法 其中A和B中的一個(gè)表示氫，另一個(gè)是任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的稠合三環(huán)雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的環(huán)烷基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的烷基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的鏈烯基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的炔基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的飽和或部分飽和的雜芳基。
R5是H、體內(nèi)可水解的酯，如C1-C6烷基、C5-6環(huán)烷基、CHR3OCOC1-C6或鹽如Na、K、或Ca。
R1是H、任選的取代的-C1-C6烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基或單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的-C3-C7環(huán)烷基、任選的取代的-C3-C6鏈烯基、任選的取代的-C3-C6炔基，條件是直接與N相連的碳原子上不存在雙鍵或三鍵；任選的取代的-C1-C6全氟烷基、-S(O)p任選的取代的烷基或芳基，其中p是2、任選的取代的-C＝O雜芳基、任選的取代的-C＝O芳基、任選的取代的-C＝O(C1-C6)烷基、任選的取代的-C＝O(C3-C6)環(huán)烷基、任選的取代的-C＝O單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的C1-C6烷基芳基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基、任選的取代的芳基-C1-C6烷基、任選的取代的雜芳基-C1-C6烷基、任選的取代的C1-C6烷基單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的8-16碳原子的芳基鏈烯基、-CONR6R7、-SO2NR6R7、任選的取代的芳基烷氧基烷基、任選的取代的-烷基-O-烷基芳基、任選的取代的-烷基-O-烷基雜芳基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、任選的取代的芳氧基芳基、任選的取代的芳氧基雜芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基雜芳基、任選的取代的烷基芳氧基烷基胺、任選的取代的烷氧基羰基、任選的取代的芳氧基羰基、任選的取代的雜芳氧基羰基。優(yōu)選的R1基團(tuán)是H、任選的取代的烷基、任選的取代的芳基、-C＝O(C1-C6)烷基、C3-C6鏈烯基、C3-C6炔基、任選的取代的環(huán)烷基、SO2烷基、SO2芳基、任選的取代的雜環(huán)、-CONR6R7、和任選的取代的雜芳基。
R2是H、任選的取代的C1-C6烷基、任選的取代的具有1-2個(gè)雙鍵的C2-C6鏈烯基、任選的取代的具有1-2個(gè)三鍵的C2-C6炔基、鹵素、氰基、N-R6R7、任選的取代的C1-C6烷氧基、羥基；任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基、COOR6、任選的取代的烷基芳氧基烷基胺、任選的取代的芳氧基、任選的取代的雜芳氧基、任選的取代的C3-C6鏈烯基氧基、任選的取代的C3-C6炔基氧基、C1-C6烷基氨基-C1-C6烷氧基、烷撐二氧基、任選的取代的芳氧基-C1-C6烷基胺、C1-C6全氟烷基、S(O)q任選的取代的C1-C6烷基、S(O)q-任選的取代的芳基，其中q是0、1或2、CONR6R7、胍基或環(huán)狀胍基、任選的取代的C1-C6烷基芳基、任選的取代的芳基烷基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基、任選的取代的雜芳基-C1-C6烷基、任選的取代的C1-C6烷基單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的8-16碳原子的芳基鏈烯基、SO2NR6R7、任選的取代的芳基烷氧基烷基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、任選的取代的芳氧基芳基、任選的取代的芳氧基雜芳基、取代的雜芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基雜芳基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、任選的取代的烷基芳氧基烷基胺。優(yōu)選的R2基團(tuán)是H、任選的取代的烷基、任選的取代的烷氧基、任選的取代的雜芳基、鹵素、CN、羥基、任選的取代的雜環(huán)、-CONR6R7、COOR6、任選的取代的芳基、S(O)q-烷基、和S(O)q-芳基。R3是氫、C1-C6烷基、C5-C6環(huán)烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基。
R4是H、任選的取代的C1-C6烷基，R4中的一個(gè)是OH、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O，或R4R4可與連結(jié)它們的碳一起形成5-8元的螺環(huán)系，有或無選自N、O、S＝(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子；R6和R7獨(dú)立的是H、任選的取代的C1-C6烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳基、任選的取代的芳基烷基、任選的取代的雜芳基烷基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基，R6和R7可一起形成3-7元的飽和環(huán)系，任選的具有一個(gè)或兩個(gè)雜原子，如N-R1、O、S＝(O)n，n＝0-2。
化學(xué)定義術(shù)語烷基意思是直鏈或支鏈的含有1-12，優(yōu)選1-6個(gè)碳原子的烷基部分。
術(shù)語鏈烯基意思是直鏈和支鏈的2-8個(gè)碳原子含有至少一個(gè)雙鍵的鏈烯基部分，沒有三鍵，優(yōu)選具有1或兩個(gè)雙鍵的鏈烯基部分。上述鏈烯基部分可以E或Z構(gòu)象存在；本發(fā)明化合物包括兩種構(gòu)象。在鏈烯基中，與雙鍵鍵合的碳原子上不應(yīng)當(dāng)存在雜原子如O、S、或N-R1；術(shù)語炔基包括直鏈和支鏈的2-6個(gè)碳原子含有至少一個(gè)三鍵的炔基，優(yōu)選炔基部分具有一個(gè)或兩個(gè)三鍵。在炔基中，與雙鍵或三鍵鍵合的碳原子上不應(yīng)當(dāng)存在雜原子如O、S、或N-R1；術(shù)語環(huán)烷基指具有3-7個(gè)碳原子的脂環(huán)烴。
此處使用的術(shù)語全氟烷基指具有至少一個(gè)碳原子和兩個(gè)或多個(gè)氟原子的直鏈和支鏈飽和脂肪烴。實(shí)例包括CF3、CH2CF3、CF2CF3和CH(CF3)2。
術(shù)語鹵素定義為Cl、Br、F和I。
如果烷基、鏈烯基、炔基、或環(huán)烷基是“任選的取代的”，下列基團(tuán)中的一種或兩種是可能的取代基硝基、-芳基、-雜芳基、烷氧基羰基-、-烷氧基、-烷氧基烷基、烷基-O-C2-C4烷基-O-、-氰基、-鹵素、-羥基、-N-R6R7、-三氟甲基、-三氟甲氧基、芳基烷基、烷基芳基、R6R7N-烷基-、HO-C1-C6-烷基-、烷氧基烷基-、烷基-S-、-SO2N-R6R7、-SO2NHR6、-CO2H、CONR6R7、芳基-O-、雜芳基-O-、-S(O)s-芳基(其中s＝0-2)、-烷基-O-烷基-NR6R7、-烷基芳基-O-烷基N-R6R7、C1-C6烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、烷氧基烷基-O-、R6R7N-烷基-、和-S(O)s-雜芳基(其中s＝0-2)；烷基、鏈烯基、炔基和環(huán)烷基優(yōu)選的取代基包括鹵素、硝基、芳基、雜芳基、烷氧基羰基-、烷氧基、-烷氧基烷基、-氰基、羥基、和-N-R6R7。
芳基定義為選自下列基團(tuán)的芳香烴部分苯基、α-萘基、β-萘基、聯(lián)苯基、蒽基、四氫萘基、芴基、茚滿基、亞聯(lián)苯基、苊基。
雜芳基定義為芳雜環(huán)系(單環(huán)或雙環(huán))，其中的雜芳基部分選自(1)呋喃、噻吩、吲哚、氮雜吲哚、噁唑、噻唑、異噁唑、異噻唑、咪唑、N-甲基咪唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、吡咯、N-甲基吡咯、吡唑、N-甲基吡唑、1，3，4-噁二唑、1，2，4-三唑、1-甲基-1，2，4-三唑、1H-四唑、1-甲基四唑、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并呋喃、苯并異噁唑、苯并咪唑、N-甲基苯并咪唑、氮雜苯并咪唑、吲唑、喹唑啉、喹啉、和異喹啉；(2)雙環(huán)芳雜環(huán)，其中苯基、吡啶、嘧啶或吡地嗪環(huán)是(a)與具有一個(gè)氮原子的6元芳(不飽和)雜環(huán)稠合；(b)與具有兩個(gè)氮原子的5或6元芳(不飽和)雜環(huán)稠合；(c)與具有一個(gè)氮原子和一個(gè)氧原子或一個(gè)硫原子的5元芳(不飽和)雜環(huán)稠合；或(d)與具有一個(gè)選自O(shè)、N或S的雜原子的5元芳(不飽和)雜環(huán)稠合。
如果芳基或雜芳基是′任選的取代的′，下列基團(tuán)中的一個(gè)或兩個(gè)是可能的取代基硝基、-芳基、-雜芳基、烷氧基羰基-、-烷氧基、-烷氧基烷基、烷基-O-C2-C4烷基-O-、-氰基、-鹵素、-羥基、-N-R6R7、-三氟甲基、-三氟甲氧基、芳基烷基、烷基芳基、R6R7N-烷基-、HO-C1-C6-烷基-、烷氧基烷基-、烷基-S-、-SO2N-R6R7、-SO2NHR6、-CO2H、CONR6R7、芳基-O-、雜芳基-O-、-S(O)s-芳基(其中s＝0-2)、-烷基-O-烷基-NR6R7、-烷基芳基-O-烷基N-R6R7、C1-C6烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、烷氧基烷基-O-、R6R7N-烷基-、和-S(O)s-雜芳基(其中s＝0-2)；芳基和雜芳基優(yōu)選的取代基包括烷基、鹵素、-N-R6R7、三氟甲基、-三氟甲氧基、芳基烷基、和烷基芳基。
芳基烷基定義為芳基-C1-C6烷基-；芳基烷基部分包括芐基、1-苯乙基、2-苯乙基、3-苯基丙基、2-苯基丙基等。術(shù)語′任選的取代的′指在如上文所定義的芳基或烷基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基取代。
烷基芳基定義為C1-C6烷基-芳基-。術(shù)語′任選的取代的′指在如上文所定義的芳基或烷基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基取代。
雜芳基-C1-C6-烷基定義為雜芳基取代的烷基部分，其中烷基鏈?zhǔn)?-6碳原子(直鏈或支鏈)的。烷基雜芳基部分包括雜芳基-(CH2)1-6-等。術(shù)語′任選的取代的′指在如上文所定義的烷基或雜芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基取代。
C1-C6烷基雜芳基定義為與雜芳基部分連結(jié)的含有1-6個(gè)碳原子的烷基鏈(直鏈或支鏈)，該雜環(huán)部分與分子的其它部分鍵合。Ex.C1-C6-烷基雜芳基-。術(shù)語′任選的取代的′指在如上文所定義的烷基或雜芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基取代；飽和或部分飽和的雜環(huán)基定義為選自下列部分的雜環(huán)吖丙啶基、氮雜環(huán)丁烷基、1，4-二噁烷基、六氫氮雜基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并噁唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異噁唑基、二氫異噻唑基、二氫噁二唑基、二氫噁唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁烷基、二氫-1，4-二噁烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫喹啉基和四氫異喹啉基。
C1-C6烷基單或雙環(huán)飽和或部分飽和的雜環(huán)定義為通過碳原子或氮原子與雜環(huán)(如前文所定義)相連的C1-C6烷基(直鏈或支鏈)，烷基鏈的另一端與分子的其它部分相連。術(shù)語′任選的取代的′指在前文所定義的分子的烷基或雜環(huán)部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；芳基烷氧基烷基定義為芳基-C1-C6烷基-O-C1-C6烷基-。術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的烷基和/或芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；烷氧基烷基定義為C1-C6烷基-O-C1-C6烷基。術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的烷基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；芳氧基烷基定義為芳基-O-Cl-C6烷基。術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的烷基或芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；雜芳基烷氧基烷基定義為雜芳基-C1-C6烷基-O-C1-C6烷基。術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的烷基或雜芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；芳氧基芳基定義為芳基-O-芳基-。術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；
芳氧基雜芳基定義為芳基-O-雜芳基-或-芳基-O-雜芳基；在該定義中，芳基部分或雜芳基部分可與分子的剩余部分相連；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的芳基部分或雜芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；烷基芳氧基芳基定義為芳基-O-芳基-C1-C6烷基；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；烷基芳氧基雜芳基定義為雜芳基-O-芳基-C1-C6烷基-；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的芳基部分或雜芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；烷基芳氧基烷基胺定義為R6R7N-C1-C6烷基-O-芳基-C1C6烷基；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的烷基或芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；R6和R7如前文所定義；烷氧基羰基定義為C1-C6烷基-O-C＝O-；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的烷氧基部分的烷基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；芳氧基羰基定義為芳基-O-C＝O-；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；雜芳氧基羰基定義為雜芳基-O-C＝O-；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的雜芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；烷氧基定義為C1-C6烷基-O-；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的烷基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；芳氧基定義為芳基-O-；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；雜芳氧基定義為雜芳基-O-；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的雜芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；鏈烯基氧基定義為C3-C6鏈烯-O-；實(shí)例類似于烯丙基-O-、丁-2-烯-O部分；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的鏈烯基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代，條件是與雙鍵相連的碳原子上不存在雜原子如O、S或N-R1；炔基氧基定義為C3-C6炔烴-O-；實(shí)例類似于CH三鍵C-CH2-O-部分；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的炔烴部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代，條件是與雙鍵或三鍵相連的碳原子上不存在雜原子如O、S或N-R1；烷基氨基烷氧基定義為R6R7N-C1-C6-烷基-O-C1-C6-烷基-，其中與氧相連的末端烷基與分子的其它部分相連。術(shù)語R6和R7如上文所定義；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的烷基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；亞烷基二氧基定義為-O-(CH2)2-O-；芳氧基烷基胺定義為R6R7N-C1-C6-烷基-O-芳基-，其中芳基與分子的其它部分相連；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的烷基或芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；芳基鏈烯基定義為芳基-C2-C8鏈烯烴-，條件是與雙鍵相連的碳原子上不存在雜原子如O、S或N-R1；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的鏈烯烴或芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；雜芳氧基烷基定義為雜芳基-O-C1-C6烷基-；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的雜芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；雜芳氧基芳基定義為雜芳基-O-芳基-，其中芳基部分與分子的其它部分相連；術(shù)語′任選的取代的′指前文所定義的雜芳基部分或芳基部分未被取代或被1或2個(gè)取代基所取代；烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基和烷硫基烷氧基是其中的烷基鏈具有1-6個(gè)碳原子(直鏈或支鏈)的部分。芳氧基、雜芳氧基、芳硫基和雜芳硫基是其中的芳基和雜芳基如前文所定義的部分。芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、芳基烷硫基和雜芳基烷硫基是其中的芳基和雜芳基如前文所定義和其中的烷基鏈?zhǔn)?-6個(gè)碳原子(直鏈或支鏈)的部分。
芳氧基烷基、雜芳氧基烷基、芳氧基烷氧基和雜芳氧基烷氧基是其中的烷基是1-6個(gè)碳原子的取代基。術(shù)語單烷基氨基和二烷基氨基指具有一個(gè)或兩個(gè)烷基的部分，其中烷基鏈?zhǔn)?-6個(gè)碳原子的，該基團(tuán)可相同或不同。術(shù)語單烷基氨基烷基和二烷基氨基烷基指具有一個(gè)或兩個(gè)烷基(相同或不同)的單烷基氨基和二烷基氨基部分，該烷基鍵合到連結(jié)有含有1-3個(gè)碳原子的烷基的氮原子上。
說明書和權(quán)利要求書中使用的表述″稠合的三環(huán)雜芳基″意思是含有三個(gè)稠合環(huán)的基團(tuán)，其中至少一個(gè)環(huán)具有芳香特性(即滿足休克爾規(guī)則(4n+2))。稠合的三環(huán)雜芳基含有1-6個(gè)選自O(shè)、S、N和N-R1的雜原子。稠合的三環(huán)雜芳基必須通過一個(gè)碳原子，優(yōu)選至少一個(gè)芳環(huán)上的一個(gè)碳原子與通式I分子的剩余部分鍵合。稠合的三環(huán)雜芳基可含有1-3個(gè)芳環(huán)和0-2個(gè)非芳環(huán)。稠合的三環(huán)雜芳基中的每個(gè)芳環(huán)可含有5-7個(gè)選自CR2、O、S、N、和N-R1的環(huán)原子(包括橋頭原子)。稠合的三環(huán)雜芳基中的每個(gè)芳環(huán)可含有0-3個(gè)選自O(shè)、S、N和N-R1的雜原子。如果有的話，稠合的三環(huán)雜芳基中的非芳環(huán)可含有5-8個(gè)環(huán)原子(包括橋頭原子)和含有0-4個(gè)選自N、N-R1、O或S(O)n的雜原子，其中n是0-2。在稠合的三環(huán)雜芳基的每一個(gè)非芳環(huán)中，非橋頭碳原子的一個(gè)或兩個(gè)可彼此任選地被一個(gè)或兩個(gè)R4取代，每個(gè)R4可獨(dú)立地相同或不同。
稠合三環(huán)雜芳基的實(shí)例包括環(huán)的大小和排列(5-5-5) 在通式1-A和1-B中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6和Z7獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z7中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4可獨(dú)立的是C或N。
環(huán)的大小和排列(5-5-6)
在通式2-A和2-B中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7和Z8獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z8中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4可獨(dú)立的是C或N。
環(huán)的大小和排列(5-6-5) 在通式3-A和3-B中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7和Z8獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z8中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4可以是C或N。
環(huán)的大小和排列(5-6-6) 在通式4-A、4-B和4-C中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7和Z8獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z8中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。
環(huán)的大小和排列[5-5-(非芳環(huán))]
在通式5-A和5-B中，Z1、Z2、Z3和Z4獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z4中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。W1、W2和W3獨(dú)立地選自CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、和NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；和t＝1-3。
環(huán)的大小和排列[5-6-(非芳環(huán))] 在通式6-A、6-B和6-C中，Z1、Z2、Z3、Z4和Z5獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z5中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1和Y2獨(dú)立的是C或N。W1、W2和W3獨(dú)立地選自CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、和NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；和t＝1-3。
環(huán)的大小和排列[5-(非芳環(huán))-5]
在通式7-A和7-B中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5和Z6獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z6中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。W1和W2獨(dú)立地選自CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、和NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；和t＝1-3。
環(huán)的大小和排列[5-(非芳環(huán))-6] 在通式8-A和8-B中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6和Z7獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z7中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。W1和W2獨(dú)立地選自CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、或NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；和t＝1-3。
環(huán)的大小和排列[5-(非芳環(huán))-(非芳環(huán))] 在通式9-A和9-B中，Z1、Z2和Z3獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z3中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1和Y4獨(dú)立的是C或N；Y2和Y3獨(dú)立的是CH或N；W1、W2、W3、W4和W5獨(dú)立地選自CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、或NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；t＝0-2和u＝1-3。
環(huán)的大小和排列(6-5-6) 在通式10-A和10-B中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8和Z9獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z9中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。
環(huán)的大小和排列(6-6-6) 在通式11-A、11-B和11-C中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9和Z10獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z10中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。
環(huán)的大小和排列[6-5-(非芳環(huán))]
在通式12-A和12-B中，Z1、Z2、Z3、Z4和Z5獨(dú)立地選自CR2、N、O、S或N-R1，條件是上述的Z1-Z5中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。W1、W2、W3獨(dú)立是O、N-R1、或S(O)r(r＝0-2)，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；和t＝1-4。
環(huán)的大小和排列[6-6-(非芳環(huán))] 在通式13-A、13-B和13-C中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5和Z6獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z6中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、或NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；和t＝1-3。
環(huán)的大小和排列[6-(非芳環(huán))-6]
在通式14-A、14-B和14-C中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7和Z8獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z8中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、或NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；和t＝1-2。
環(huán)的大小和排列[6-(非芳環(huán))-(非芳環(huán))] 在通式15-A、15-B和15-C中，Z1、Z2、Z3和Z4獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，上述的Z1-Z4中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子。Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。W1、W2、W3和W4獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、和NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；t＝1-3和u＝1-3。
說明書和權(quán)利要求書中使用的表述′稠合雙環(huán)雜芳基′意思是含有兩個(gè)稠合環(huán)的基團(tuán)，其中一個(gè)環(huán)具有芳香性[即休克爾規(guī)則(4n+2)]，另一個(gè)環(huán)是非芳環(huán)；稠合雙環(huán)雜芳基含有1-6個(gè)選自O(shè)、S、N、和N-R1的雜原子；稠合雙環(huán)雜芳基通過通式I中所示的芳環(huán)中的碳原子與分子的剩余部分鍵合；稠合雙環(huán)雜芳基的芳環(huán)含有5-6個(gè)選自CR2、N、O、S或N-R1的環(huán)原子(包括橋頭原子)。稠合雙環(huán)雜芳基中的芳環(huán)含有0-3個(gè)選自O(shè)、S、N、和N-R1的雜原子；稠合雙環(huán)雜芳基的非芳環(huán)含有5-8個(gè)選自CR4R4、N、N-R1、O、S(O)n的環(huán)原子(包括橋頭原子)，其中n＝0-2。稠合雙環(huán)雜芳基的非芳環(huán)含有0-4個(gè)選自N、N-R1、O或S(O)n的雜原子，其中n＝0-2。
稠合雙環(huán)雜芳基的實(shí)例包括 在通式16-A中，Z1、Z2和Z3獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，Z1-Z3中的一個(gè)是碳原子，與通式I所示的分子的剩余部分鍵合。當(dāng)Z中的一個(gè)是CR2時(shí)，另兩個(gè)Z可以是兩個(gè)N，或一個(gè)N和O、S、N-R1的不破壞芳香性的任一組合；當(dāng)兩個(gè)Z是CR2時(shí)，另一個(gè)Z可以任一不破壞芳香性的組合任選地選自N、O、S或N-R1；W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S、SO、SO2、O、N-R1、C＝O；條件是沒有會(huì)形成飽和環(huán)系的S-S或O-O或S-O鍵形成；t＝1-4。
在通式16-B中，Z1、Z2和Z3獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，Z1-Z3中的一個(gè)是碳原子，與通式I所示的分子的剩余部分鍵合。
當(dāng)Z中的一個(gè)是CR2時(shí)，那么另兩個(gè)Z可以任一不破壞芳香性的組合獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1；當(dāng)兩個(gè)Z是N時(shí)，那么環(huán)上的另一個(gè)碳與通式I所示分子的青霉烯部分鍵合；W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S、SO、SO2、O、N-R、t＝1-4；Y1和Y2＝N或C；條件是當(dāng)芳雜環(huán)是咪唑時(shí)，飽和環(huán)不能含有與橋頭碳相連的S。
在通式16-C中，Z1、Z2、Z3和Z4獨(dú)立的是CR2或N，Z1-Z4中的一個(gè)是碳原子，與分子的剩余部分鍵合。
W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S、SO、SO2、O或N-R1；條件是沒有會(huì)形成飽和環(huán)系的S-S或O-O或S-O鍵形成；t＝1-4。
Y1和Y2獨(dú)立的是C或N。
發(fā)明方法在路易斯酸，優(yōu)選無水鹵化鎂，更優(yōu)選MgBr2或MgBr2∶醚合物和弱堿如三乙胺、DMAP、或二異丙基乙胺的存在下，在低溫優(yōu)選約-20℃至-40℃，通式I的化合物可以溫和容易的方法通過適當(dāng)取代的醛17與結(jié)構(gòu)16的6-溴青霉烯衍生物縮合來制備。(方案2)中間體羥醛產(chǎn)物18可被?；然蛩狒麅?yōu)選地官能團(tuán)化為乙酸酯、三氟甲基磺酸酯或甲苯磺酸酯19；或者，如果分離通式18，它可通過將18與四鹵代甲烷和三苯基膦室溫在適合的有機(jī)溶劑優(yōu)選CH2Cl2中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為鹵素衍生物?；衔?9可順利地利用金屬如活化鋅和磷酸鹽緩沖液在溫和的溫度優(yōu)選約20℃-35℃、pH約6.5-8.0，或通過催化劑優(yōu)選Pd/C氫化通過還原消除方法轉(zhuǎn)化為所要的產(chǎn)物。應(yīng)當(dāng)注意，還原消除步驟應(yīng)當(dāng)進(jìn)行到羧基去保護(hù)。如果羧酸酯氧上的保護(hù)基是對硝基苯甲基取代基，那么還原消除和去保護(hù)可通過一步來完成。但是，如果保護(hù)基不是對硝基苯甲基取代基，可根據(jù)保護(hù)基的性質(zhì)分兩步進(jìn)行。產(chǎn)物可被分離為游離酸或堿金屬鹽。上述的兩步法可通過不分離中間體19的完整方法在一步中完成。根據(jù)收率和經(jīng)濟(jì)可行性，該方法是相對簡單和非常高效的方法，可用于制備多種化合物。該方法適用于大規(guī)模合成，適用于多種醛。
方案2 R9＝OR8或X1
本發(fā)明的一個(gè)重要方面涉及穩(wěn)定的溴代青霉烯中間體16的用途。中間體的穩(wěn)定性與其中分解被最小化的羥醛縮合步驟有關(guān)[也與儲(chǔ)藏期穩(wěn)定性有關(guān)]。在本發(fā)明中，關(guān)鍵的中間體16，其中R＝對硝基苯甲基，是穩(wěn)定的和結(jié)晶的中間體。在本發(fā)明中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)中間體16比中間體Q更穩(wěn)定。中間體16和Q的對比熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)如下表所示。
(表1)中間體16顯著的穩(wěn)定性提高了化合物的儲(chǔ)藏時(shí)間和規(guī)模擴(kuò)大可行性。如上文所述，用對硝基苯甲基保護(hù)羧基減少了本方法中制備結(jié)構(gòu)I最后化合物的步驟數(shù)。通過X-射線衍射研究中間體的晶體性質(zhì)。
表2列出了通式16的X-射線粉末參數(shù)。
1)通過HPLC分析檢驗(yàn)。
溫度40℃為固體狀態(tài)。
HPLC條件柱子Inertsil SIL 100-5 4.6×150mm(GL Science Inc.)流動(dòng)相乙酸乙酯∶正己烷(10∶35vv)波長312nM；流速1.0ml/min@室溫。
表2峰#2θd值(Q)強(qiáng)度(cps)相對強(qiáng)度1 9.540 9.2631 1575 282 13.560 6.5246 1225 223 15.460 5.7268 3913 704 18.680 4.7462 2509 455 19.180 4.6236 820 156 19.940 4.4491 1366 257 21.060 4.2149 699 138 22.360 3.9727 1652 309 23.740 3.7448 5560 10010 24.260 3.6657 3560 6411 24.940 3.5673 1958 3512 25.180 3.5338 1799 3213 25.780 3.4529 878 1614 26.540 3.3558 1514 2715 26.900 3.3117 1136 2016 28.900 3.0869 2206 4017 29.220 3.0538 1507 2718. 29.720 3.0035 1473 2619 30.560 2.9229 906 1620 31.200 2.8644 815 1521 31.480 2.8395 888 1622 34.700 2.5830 906 1623 36.700 2.4467 785 1424 37.780 2.3792 862 1625 38.980 2.3087 762 1426 40.180 2.2425 728 1327 41.220 2.1883 718 13有利地是，在本發(fā)明的還原消除步驟中，非常優(yōu)先地形成所要的“Z”異構(gòu)體(約50∶1)45-55∶1。在反應(yīng)混合物中沒有觀察到“E”異構(gòu)體形成。還原消除步驟也可將中間體19通過10％Pb/C氫化來進(jìn)行。
本發(fā)明中使用的中間體16可由市售的6-氨基青霉烷酸(6-APA)20來制備。(方案3)。它可通過方案3所描述的方法轉(zhuǎn)化為溴代青霉烯16。6-氨基青霉烷酸(6-APA)20通過單容器法轉(zhuǎn)化為溴-PNB衍生物22。該衍生物氧化為亞砜23，再進(jìn)行開環(huán)反應(yīng)得到24?；衔?4通過方案3的方法轉(zhuǎn)化為16。有利地是，在本發(fā)明中，化合物23向26的轉(zhuǎn)化可在一個(gè)容器中進(jìn)行，不用分離中間體24和25。如此獲得的溴代青霉烯16與醛17(參見方案2)在無水MgRr2或市售MgBr2∶O(Et)2的存在下反應(yīng)。羥醛產(chǎn)物以乙酸酯的形式被收集，溴代乙酸酯19可方便地與活化鋅(如新鮮的用0.1NHCl活化的)和磷酸鹽緩沖液(6.5pH)室溫反應(yīng)轉(zhuǎn)化為最后的產(chǎn)物I。該產(chǎn)物可方便地通過公知的方法如二價(jià)陰離子HP-21柱色譜法純化。開始可用水洗脫柱子除去無機(jī)雜質(zhì)，然后用10％的MeCN；水洗脫。通過該方法獲得的產(chǎn)物純度為98％，可通過結(jié)晶法進(jìn)一步純化。利用Et3N/和MgBr2的羥醛縮合反應(yīng)是非常高效和一般的。本發(fā)明可延伸到多種醛來制備通式結(jié)構(gòu)I的最后產(chǎn)物。
本發(fā)明涉及制備通式I化合物的方法 其中A和B中的一個(gè)表示氫，另一個(gè)是任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的稠合雙環(huán)雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的稠合三環(huán)雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的環(huán)烷基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的烷基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的鏈烯基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的炔基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的飽和或部分飽和的雜芳基。
R5是H、體內(nèi)可水解的酯，選自C1-C6烷基、C5-6環(huán)烷基、CHR3OCOC1-C6或選自Na、K、和Ca的鹽；R2是H、任選的取代的C1-C6烷基、任選的取代的具有1-2個(gè)雙鍵的C2-C6鏈烯基、任選的取代的具有1-2個(gè)三鍵的C2-C6炔基、鹵素、氰基、N-R6R7、任選的取代的C1-C6烷氧基、羥基；任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基、COOR6、任選的取代的烷基芳氧基烷基胺、任選的取代的芳氧基、任選的取代的雜芳氧基、任選的取代的C3-C6鏈烯基氧基、任選的取代的C3-C6炔基氧基、C1-C6烷基氨基-C1-C6烷氧基、烷撐二氧基、任選的取代的芳氧基-C1-C6烷基胺、C1-C6全氟烷基、S(O)q任選的取代的C1-C6烷基、S(O)q-任選的取代的芳基，其中q是0、1或2、CONR6R7、胍基或環(huán)狀胍基、任選的取代的C1-C6烷基芳基、任選的取代的芳基烷基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基、任選的取代的雜芳基-C1-C6烷基、任選的取代的C1-C6烷基單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的8-16碳原子的芳基鏈烯基、SO2NR6R7、任選的取代的芳基烷氧基烷基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、任選的取代的芳氧基芳基、任選的取代的芳氧基雜芳基、取代的雜芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基雜芳基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、任選的取代的烷基芳氧基烷基胺。優(yōu)選的R2基團(tuán)是H、任選的取代的烷基、任選的取代的烷氧基、任選的取代的雜芳基、鹵素、CN、羥基、任選的取代的雜環(huán)、-CONR6R7、COOR6、任選的取代的芳基、S(O)q-烷基、和S(O)q-芳基。R3是氫、C1-C6烷基、C5-C6環(huán)烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基。
R6和R7獨(dú)立的是H、任選的取代的C1-C6烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳基、任選的取代的芳基烷基、任選的取代的雜芳基烷基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基，R6和R7可一起形成3-7元的飽和環(huán)系，任選的具有一個(gè)或兩個(gè)雜原子，如N-R1、O、S＝(O)n，n＝0-2。
制備通式I化合物的方法包括步驟1在-10℃至-30℃，溶解于有機(jī)溶劑(優(yōu)選甲醇或THF)和水中的6-氨基青霉烷酸20在48％w/w氫溴酸和亞硝酸鈉或鉀溶液的存在下轉(zhuǎn)化為6-溴衍生物。該6-溴青霉烷酸21衍生物可分離，或就地在有機(jī)堿或無機(jī)堿(優(yōu)選碳酸鈉或鉀)存在的有機(jī)溶劑(優(yōu)選THF或DMF)中利用4-硝基苯甲基溴轉(zhuǎn)化為6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯22。
步驟2通過步驟1所述的方法獲得的產(chǎn)物6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯22可分離或在同一容器中轉(zhuǎn)化為6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23(即步驟1；連續(xù)形成)，利用氧化劑如3-氯過苯甲酸(mcpba)或過氧化氫將22氧化為6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23。
步驟3步驟2的產(chǎn)物，即6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23，可通過在芳族溶劑(優(yōu)選甲苯)中6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23與2-巰基苯并噻唑(HSBT)回流轉(zhuǎn)化為(2R)-2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-3-烯酸-4-硝基苯甲酯24。
步驟4步驟3的產(chǎn)物，即(2R)-2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-3-烯酸4-硝基苯甲酯24可溶解于有機(jī)溶劑(優(yōu)選甲苯)中，室溫與有機(jī)叔堿(優(yōu)選三乙胺)反應(yīng)得到2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯25。
步驟5步驟4的產(chǎn)物，即2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯25，在約-10℃至約-30℃，通過在有機(jī)酸(優(yōu)選甲酸)、乙酸酐/有機(jī)叔堿(優(yōu)選吡啶)和三烷基或三芳基膦(優(yōu)選三苯基膦)存在的芳族有機(jī)溶劑(優(yōu)選甲苯)中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為2-[(3S，4R)-3-溴-4-甲酰基硫基-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯26。
不用分離中間體化合物23向26的連續(xù)轉(zhuǎn)化步驟2的產(chǎn)物，即6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23在回流的芳族有機(jī)溶劑(優(yōu)選甲苯)中與巰基苯并噻唑反應(yīng)1-3小時(shí)，并在0至-20℃用三乙胺處理3-4小時(shí)。處理之后，該反應(yīng)混合物在-10℃至-40℃連續(xù)加入有機(jī)酸(優(yōu)選甲酸)和酸酐(乙酸酐)，有機(jī)叔堿(優(yōu)選吡啶)和三烷基或三芳基膦。
步驟6來自步驟5或連續(xù)轉(zhuǎn)化的產(chǎn)物2-[(3S，4R)-3-溴-4-甲酰基硫基-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯26在-70℃至-90℃溶解于有機(jī)溶劑(優(yōu)選乙酸乙酯)中，通過臭氧處理的氧3-4小時(shí)，繼而利用亞磷酸鹽試劑(優(yōu)選三甲基亞磷酸鹽)進(jìn)行分子內(nèi)環(huán)化。由乙酸乙酯∶己烷中結(jié)晶出(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸-4-硝基苯甲酯16。
用下面通式(16)表示的化合物 在上述的制備方法(步驟1-步驟6)中，通式16表示的化合物是用于制備通式I的6-(取代的亞甲基)青霉烯的中間體。
通式16表示的化合物是晶體衍生物(X-射線粉末衍射參數(shù)如表2所示)。
該中間體的晶體性質(zhì)給予了穩(wěn)定性，從而延長了儲(chǔ)存期限。通式16化合物的穩(wěn)定數(shù)據(jù)如表1所示。
步驟7(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸-4-硝基苯甲酯16與適當(dāng)取代的醛(如上文所定義)反應(yīng)以完成羥醛縮合步驟，可在路易斯酸(優(yōu)選無水MgBr2或MgBr2∶醚合物) 和有機(jī)叔堿(優(yōu)選三乙胺、DMAP、或二異丙基乙基胺)存在的非質(zhì)子極性有機(jī)溶劑(優(yōu)選THF和乙腈)中在-10℃至-40℃進(jìn)行。通式18的中間體羥醛產(chǎn)物在同一容器中0℃至-10℃被官能團(tuán)化，與?；然蛩狒磻?yīng)得到乙酸酯，與三氟甲基磺酸酸酐得到三氟甲基磺酸酯，或與甲苯磺酰氯得到甲苯磺酸酯；或者，如果分離通式18，它可通過將18與四鹵代甲烷和三苯基膦室溫在適合的有機(jī)溶劑優(yōu)選CH2Cl2中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為鹵素衍生物。
步驟8最后一步，即得到通式I化合物的還原消除步驟可通過將羥醛產(chǎn)物混合物室溫(優(yōu)選20℃-35℃)溶解在有機(jī)溶劑(優(yōu)選THF/腈)，6.5-7.0pH磷酸鹽緩沖液和活化金屬如鋅、錫或鋁的混合物中來進(jìn)行。堿金屬鹽產(chǎn)物可通過反相樹脂柱色譜法進(jìn)行純化。
有選擇性地，步驟7和步驟8可在同一容器中連續(xù)進(jìn)行，不用分離羥醛中間體。
最后一步，即還原消除步驟可通過將羥醛產(chǎn)物溶解在有機(jī)溶劑和6.5-7.0的磷酸緩沖液中并通過Pd/C在10-100psi(優(yōu)選40psi)壓力下氫化來進(jìn)行。
方案3 PNB＝對硝基苯基amcpba(0，89eq)/DMF-CH2Cl2/0℃，20min.結(jié)晶；b(1)HCOOH(4.4mol eq)/AC2O(4.4mol eq)吡啶(1.03mol eq)/MeCN，-15℃，5min；(2)Ph3P(1.02mol eq)-15℃，1h.(3)過柱；(4)結(jié)晶；c(1)O3，AcOEt，-70℃，1.75hrs；(2)P(OMe)3(4.8mol eq)，回流，45min；(3)結(jié)晶實(shí)驗(yàn) 實(shí)施例1制備(5R)-(Z)-6-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基亞甲基)青霉烯-3-甲酸鈉步驟16-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯在-10℃，6-氨基青霉烷酸(5.0g)加入到甲醇(44mL)、水(14mL)和48％w/w氫溴酸(14mL)的冷卻溶液中。加入完成后，混合物冷卻至-15℃。亞硝酸鈉溶液(2.4g溶解于6.6mL水中)5分鐘內(nèi)加入，所得的溶液不冷卻再攪拌30分鐘。氯化鈉(2.4g)溶解于反應(yīng)溶液中。反應(yīng)混合物用二氯甲烷(2×36mL)萃取。合并后的有機(jī)層用鹽水(36mL)洗滌，干燥(MgSO4)，并在25℃減壓濃縮至20mL。殘余的溶液含有6-溴青霉烷酸，用于它的下一反應(yīng)中。
無水碳酸鉀(2.9g)、二甲基甲酰胺(40mL)、和4-硝基苯甲基溴(5.0g)連續(xù)地加入到殘余溶液中，混合物在35-40℃攪拌1小時(shí)。反應(yīng)溶液倒入到水(33mL)和二氯甲烷(41mL)的混合物中，分出有機(jī)層。有機(jī)層用水(40mL)和鹽水(40mL)洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用乙酸乙酯-己烷(4/1)洗脫，獲得題列化合物，無色固體(7.2g，75％)。
1H-NMR(δ，CDCl3)1.41(s，3H)，1.62(s，3H)，4.61(s，1H)，4.83(d，1H，J＝1.5Hz)，5.25 and 5.34(AB，2H，J＝13.0Hz)，5.41(d，1H，J＝1.5Hz)，7.56(d，2H，J＝8.7Hz)，8.26(d，2H，J＝8.7Hz)。
步驟26-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯-1-氧化物6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯(1.36g)溶解于二氯甲烷(20mL)中并冷卻至0℃。3-氯過苯甲酸(0.56g)加入到溶液中并攪拌10分鐘。反應(yīng)溶液用飽和碳酸氫鈉、水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并減壓蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用乙酸乙酯-己烷(1/1)洗脫，獲得題列化合物，無色固體(1.4g，定量的)。
1H-NMR(δ，CDCl3)1.17(s，3H)，1.69(s，3H)，4.60(s，1H)，5.04(d，1H，J＝1.5Hz)，5.10(d，1H，J＝1.5Hz)，5.30 and 5.37(AB，2H，J＝12.9Hz)，7.56(d，2H，J＝8.7Hz)，8.27(d，2H，J＝8.7Hz)。
6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯-1-氧化物的連續(xù)制備6-氨基青霉烷酸(500g)-10℃加入到甲醇(3.5L)、水(1.36L)、和48％w/w氫溴酸(1.36L)的冷卻溶液中。加入完成后，混合物冷卻至-15℃。30分鐘內(nèi)加入亞硝酸鈉溶液(235g溶解于660mL水中)，所得的溶液不用冷卻再攪拌30分鐘。氯化鈉(240g)溶解于該反應(yīng)溶液中。反應(yīng)混合物用二氯甲烷(2×3L)萃取。合并后的有機(jī)層用鹽水(3L)洗滌，干燥(MgSO4)，25℃減壓濃縮至1.6L。殘余溶液含有6-溴青霉烷酸，用于它的下一反應(yīng)中。
無水碳酸鉀(288g)、二甲基甲酰胺(2.8L)和4-硝基苯甲基溴(500g)連續(xù)地加入到殘余溶液中，混合物35-40℃攪拌1小時(shí)。反應(yīng)溶液倒入到水(2.8L)和二氯甲烷(3.4L)的混合物中，分出有機(jī)層。有機(jī)層用水(2.8L)和鹽水(3L)洗滌并冷卻至-2℃。有機(jī)層含有6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯，用于它的下一反應(yīng)中。
3-氯過苯甲酸(355g)15分鐘加入到有機(jī)層中并攪拌10分鐘。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(4.8L)稀釋，并用飽和碳酸氫鈉(7.6L)洗滌。分出有機(jī)層，用乙酸乙酯(3.9L)再萃取水層。合并后的有機(jī)層用水(3.9L)和鹽水(3.9L)洗滌，干燥(MgSO4)，30℃減壓蒸發(fā)。殘余固體用乙酸乙酯(1.8L)研制30分鐘并在1小時(shí)內(nèi)向該混合物中逐滴地加入己烷(5.4L)。過濾固體，濾餅用乙酸乙酯-己烷(1/4，0.8L)洗滌。固體風(fēng)干1小時(shí)，真空干燥并在室溫過夜。獲得題列化合物，淺黃色結(jié)晶固體(768g，77％)。
步驟3(2R)-2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-3-烯酸對硝基苯甲酯
6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯-1-氧化物(4.31g)和巰基苯并噻唑(1.67g)在回流的甲苯(14mL)中加熱1小時(shí)，同時(shí)補(bǔ)充共沸分出的水(迪安-斯達(dá)克裝置)。冷卻至室溫后，反應(yīng)溶液減壓蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用乙酸乙酯-己烷(2/5)洗脫，獲得題列化合物，淺黃色固體(5.67g，98％)。
1H-NMR(δ，CDCl3)1.92(s，3H)，4.87(s，1H)，5.05(s，1H)，5.10(d，1H，J＝1.7Hz)，5.21(s，4H)，7.39(t，1H，J＝7.1Hz)，7.41-7.50(m，3H)，7.81(d，1H，J＝8.0Hz)，7.90(d，1H，J＝8.0Hz)，8.20(d，2H，J＝8.8Hz)。
步驟-42-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸對硝基苯甲酯(2R)-2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-3-烯酸對硝基苯甲酯(5.1g)溶解于甲苯(50mL)中，冷卻至0℃，用三乙胺(0.12mL)處理。0℃攪拌2小時(shí)后，反應(yīng)溶液用1M的HCl、水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用乙酸乙酯-己烷洗脫(1/3)，獲得題列化合物，無色固體(4.16g，81％)。更多的極性餾分(fraction)含有對稱的二硫化物，無色固體(0.68g，19％)。
1H-NMR(δ，CDCl3)2.01(s，3H)，2.24(s，3H)，5.01(d，1H，J＝1.7Hz)，5.24和5.30(AB，2H，J＝13.1Hz)，5.35(d，1H，J＝1.7Hz)，7.34-7.42(m，1H)，7.48-7.57(m，1H)，7.80(d，1H，J＝8.0Hz)，7.90(d，1H，J＝8.0Hz)，8.14(d，3H，J＝8.7Hz)。
對稱的二硫化物；1H-NMR(δ，CDCl3)2.01(s，6H)，2.29(s，6H)，4.73(d，2H，J＝1.7Hz)，5.06(d，2H，J＝1.7Hz)，5.32(s，4H)，7.54(d，4H，J＝8.6Hz)，8.24(d，4H，J＝8.6Hz)。
步驟52-[(3S，4R)-3-溴-4-甲?；蚧?2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸對硝基苯甲酯2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸對硝基苯甲酯(3.16g)懸浮在甲苯(20mL)中，冷卻至-20℃。連續(xù)地加入甲酸(1.10g)、乙酸酐(2.45g)、和吡啶(0.44g)?；旌衔锢鋮s至-20℃。5分鐘內(nèi)分次地加入三苯基膦(1.45g)。-15～-10℃再攪拌1小時(shí)后，所得的懸浮液冷卻至-30℃，然后過濾。殘余固體用冷(-30℃)甲苯(15mL)沖洗。合并后的濾液連續(xù)地用冰-水(8mL)和冰冷鹽水(1mL)的混合物、冰-水(7mL)和冰冷鹽水(3mL)的混合物、冷的飽和碳酸氫鈉(2×11mL)、和冷鹽水(11mL)洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用乙酸乙酯-己烷洗脫(1/2)，由冷的異丙醇(10mL)中結(jié)晶出題列化合物。過濾出固體，用冷的異丙醇(6mL)洗滌，室溫真空干燥過夜。獲得題列化合物，無色結(jié)晶固體(1.87g，77％)m.p.104-106℃；1H-NMR(δ，CDCl3)2.00(s，3H)，2.30(s，3H)，4.82(d，1H，J＝1.9Hz)，5.32 and 5.38(AB，2H，J＝13.3Hz)，5.81(d，1H，J＝1.9Hz)，7.61(d，2H，J＝8.6Hz)，8.25(d，2H，J＝ 8.6Hz)，10.09(s，1H)。
由6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯-1-氧化物連續(xù)制備2-[(3S，4R)-3-溴-4-甲酰基硫基-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸對硝基苯甲酯6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯-1-氧化物(766g)和巰基苯并噻唑(294g)在回流的甲苯(2.4L)中加熱1小時(shí)，同時(shí)補(bǔ)充共沸分出的水(迪安-斯達(dá)克裝置)。反應(yīng)混合物冷卻至0℃并用三乙胺(25mL)處理。在0℃攪拌2小時(shí)后，所得的懸浮液冷卻至-20℃。維持在-10℃以下連續(xù)地加入甲酸(360g)、乙酸酐(798g)、和吡啶(145g)?；旌衔锢鋮s至-20℃。維持在-15℃～-10℃之間10分鐘內(nèi)分次地加入三苯基膦(473g)。-15～-10℃再攪拌1小時(shí)后，所得的懸浮液冷卻至-30℃，然后過濾。殘余固體用冷(-30℃)甲苯(500mL)沖洗。合并后的濾液連續(xù)地用冰-水(2mL)和冰冷鹽水(0.26L)的混合物、冰-水(1.72L)和冰冷鹽水(0.8L)的混合物、冷的飽和碳酸氫鈉(2×2.6L)、和冷鹽水(2.6L)洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠(6Kg)柱色譜法，用乙酸乙酯-己烷洗脫(1/2)，由冷的異丙醇(800mL)中結(jié)晶出題列化合物。過濾出固體，用冷的異丙醇(400mL)洗滌，風(fēng)干1小時(shí)，室溫通過P2O5真空干燥過夜。獲得題列化合物，紅黃色結(jié)晶固體(553g，70％)
步驟6(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯2-[(3S，4R)-3-溴-4-甲酰基硫基-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸對硝基苯甲酯(300g)溶解于乙酸乙酯(7.5L)中并冷卻至-70℃。臭氧化的氧通過劇烈攪拌的溶液大約1.5小時(shí)，直到持續(xù)為藍(lán)色。該溶液用氮?dú)鈨艋?.5小時(shí)，-70℃用三甲基膦(384mL)處理?；旌衔锞徛郎?，室溫?cái)嚢?7小時(shí)。該溶液然后加熱至回流，緩慢地維持45分鐘。冷卻至室溫后，混合物用乙酸乙酯(1.25L)稀釋，并用水(2×2.5L)和鹽水(2.5L)洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并在25℃減壓蒸發(fā)。殘余固體用乙酸乙酯(0.6L)研制。50分鐘內(nèi)逐滴地向該混合物中加入己烷(0.45L)。過濾固體，濾餅用乙酸乙酯-己烷(1/1，2×200mL)和乙酸乙酯-己烷(1/2，300mL)洗滌。固體風(fēng)干1小時(shí)，真空干燥在室溫過夜。獲得題列化合物(109.6g，42％)，無色結(jié)晶固體。
m.p.148-151℃；1H-NMR(□，CDCl3)5.20(d，1H，J＝0.9Hz)，5.29和5.43(AB，2H，J＝13.5Hz)，5.81(d，1H，J＝1.5Hz)，7.37(d，1H，J＝0.9Hz)，7.60(d，2H，J＝8.7Hz)，8.25(d，2H，J＝8.7Hz)。
步驟7利用Ph2NLi和MgBr2醚合物制備(5R)-6-[乙酰氧基-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)甲基]-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯MgBr2醚合物(335mg)在室溫氬氣下加入到(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯(385mg)的無水THF(12mL)溶液中?；旌衔锢鋮s至-78℃。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。-20℃通過向二苯基胺(220mg)的無水THF溶液(4mL)中加入正丁基鋰(0.87mL，1.5mol/L的正己烷溶液)制備二苯基酰胺鋰，一次性(in one portion)加入到劇烈攪拌的懸浮液中。15-20秒后，該劇烈攪拌的混合物一次性用2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲醛(170mg)的無水乙腈溶液(5mL)處理。反應(yīng)混合物-78℃攪拌1小時(shí)并用乙酸酐(133mg)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌1小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂盟望}水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用乙酸乙酯-己烷(1/2～1/1)洗脫，獲得題列化合物，兩種非對映體的混合物(3/1，無色無定形固體，447mg，77％)。
主要非對映體1H NMR(δ，CDCl3)2.00(s，3H)，3.76-3.86(m，2H)，4.10-4.21(m，2H)，5.27和5.45(AB，2H，J＝13.6Hz)，6.23(s，1H)，6.30(s，1H)，7.15(s，1H)，7.48(s，1H)，7.59-7.65(m，2H)，8.24(d，2H，J＝8.6Hz)。
次要非對映體1H NMR(δ，CDCl3)2.24(s，3H)，3.76-3.86(m，2H)，4.10-4.21(m，2H)，5.27和5.45(AB，2H，J＝13.6Hz)，6.08(s，1H)，6.79(s，1H)，6.91(s，1H)，7.44(s，1H)，7.59-7.65(m，2H)，8.24(d，2H，J＝8.6Hz)。
利用無水MgBr2和Et3N制備(5R)-6-[乙酰氧基-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-甲基]-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲醛(88mg)室溫氬氣下加入到無水MgBr2(115mg)的無水乙腈(4mL)溶液中。30分鐘內(nèi)無色粉末沉淀。加入(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯(200mg)的無水THF溶液(4mL)，冷卻至-20℃，一次性加入三乙胺(0.18mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌3小時(shí)并用乙酸酐(0.99mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌16小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?％的檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)，通過Celite(硅藻土)墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用乙酸乙酯-己烷(1/2～1/1)洗脫，獲得題列化合物，兩種非對映體的混合物(10/1，無色無定形固體，286g，90％)。
利用MgBr2醚合物和Et3N制備(5R)-6-[乙酰氧基-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-甲基]-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯MgBr2醚合物代替無水MgBr2用于該反應(yīng)，分離產(chǎn)物，收率84％。

步驟8(5R)-(Z)-6-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基亞甲基]青霉烯-3-甲酸鈉(5R)-6-[乙酰氧基-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-甲基]-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯(500mg)溶解于THF(7.0mL)和乙腈(3.2mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(2.0g)和0.5M的磷酸鹽緩沖液(pH6.5，10.2mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)?；旌衔镉盟♂?，冷卻至3℃，加入1M的NaOH將pH調(diào)整至8。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯混合并用Celite墊片過濾。該墊片用水洗滌，分出水層。水層通過HPLC分析含有224mg(79％)的題列化合物，35℃高真空濃縮。濃縮物經(jīng)過Daiaion HP-21(20mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用10％的乙腈-水洗脫得到題列化合物的純化活性餾分。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥得到題列化合物，黃色無定形固體(213mg，75％)。無定形固體產(chǎn)物溶解于水(1.9mL)中。丙酮(8mL)加入到溶液中，同時(shí)室溫?cái)嚢?，冷卻至3℃，然后攪拌30分鐘。在3℃丙酮加入到混合物中，每30分鐘2mL，共4小時(shí)的時(shí)間(共加入16mL丙酮)。3℃攪拌1小時(shí)后，固體過濾，濾餅用丙酮(2mL)洗滌。固體在避光下風(fēng)干1小時(shí)，真空干燥室溫過夜獲得題列化合物(200mg，71％)，黃色結(jié)晶固體。
1H NMR(δ，D2O)3.82(d，2H，J＝7.4Hz)，4.14-4.20(m，2H)，6.42(s，1H)，6.82(s，1H)，6.96(s，1H)，7.42(s，1H)。
由(5R)-6-[乙酰氧基-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)甲基]-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯連續(xù)制備(5R)-(Z)-6-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基亞甲基)青霉烯-3-甲酸鈉(5R)-6-[乙酰氧基-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-甲基]-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯(110.1g)室溫氬氣下加入到無水MgBr2(143.4g)的無水乙腈(5L)溶液中。30分鐘內(nèi)無色的粉末沉淀。6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯-1-氧化物(250g)的無水THF溶液(5L)通過PTFE管12分鐘內(nèi)在正氬氣壓力下轉(zhuǎn)移到懸浮液中。反應(yīng)混合物冷卻至-20℃后，一次性加入三乙胺(217mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌3小時(shí)并用乙酸酐(133g)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌16小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴?20L)稀釋并用5％檸檬酸(10L)水溶液、飽和碳酸氫鈉(10L)、和鹽水(10L)洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯(1.4L)洗滌。濾液30℃減壓濃縮。根據(jù)HPLC分析殘余的褐色油含有327g(86.7％)的羥醛產(chǎn)物。
殘余的褐色油產(chǎn)物用THF(5.4L)和乙腈(2.5L)溶解。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(1.5Kg)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，7.9L)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物維持在約35℃劇烈地?cái)嚢?.5小時(shí)?；旌衔锢鋮s至3℃并在3℃以下加入冰冷的1M NaOH(大約1750mL)調(diào)整pH至8?；旌衔镉靡宜嵋阴?4L)稀釋并用硅藻土墊片過濾。該墊片用水(2.5L)洗滌并分出水層。水層，根據(jù)HPLC測定，含有137g(64％)，35℃高真空下濃縮至8.85Kg(約8L)。
濃縮物經(jīng)過Sepabeads SP-207(7L，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水(14L)洗脫，然后用20％乙腈-水洗脫得到(5R)-(Z)-6-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基亞甲基)青霉烯-3-甲酸鈉的純化的活性餾分。
合并后的餾分35℃高真空下濃縮至1.25Kg(約1L，經(jīng)HPLC測定含有130g(61％)(5R)-(Z)-6-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基亞甲基)青霉烯-3-甲酸鈉)。丙酮(2.5L)加入到濃縮物中并室溫?cái)嚢??；旌衔锢鋮s至3℃，然后攪拌30分鐘。在3℃，丙酮4小時(shí)內(nèi)每30分鐘625mL加入到混合物(共加入丙酮5L)。3℃攪拌1小時(shí)后固體過濾，濾餅用丙酮(800mL)洗滌。固體避光下風(fēng)干1小時(shí)，室溫真空干燥過夜得到題列化合物(112g，50％來自(5R)-6-[乙酰氧基-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-甲基]-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯)，黃色結(jié)晶固體。利用氫解方法由(5R)-6-[乙酰氧基-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-甲基]-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯制備(5R)-(Z)-6-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基亞甲基)青霉烯-3-甲酸鈉(5R)-6-[乙酰氧基-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-甲基]-6-溴青霉烯-3-甲酸-4-硝基苯甲酯(116mg)和10％Pd/C(50％濕的，58mg)加入到THF(4ml)和0.5mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.5，4ml)的混合物中?；旌衔锸覝?0psi壓力的H2下氫化1小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入1M NaOH調(diào)整pH至8.0。混合物再過濾，濾液用乙酸乙酯洗滌。合并后的水層35℃減壓下濃縮，經(jīng)過Diaion HP-21樹脂(7ml，Mitsubishi Kasei Co.Ltd)柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用10％的乙腈；水洗脫。合并后的純餾分35℃減壓下濃縮并冷凍干燥得到題列化合物，黃色無定形固體。
實(shí)施例2 步驟13，1′-二甲基-3H，1′H-[2，4′]二咪唑基-4-甲醛叔丁氧化鉀(3.23g)在0℃加入到1H，1′H-[2，4′]二咪唑基-4-甲醛(1.95g)的無水DMF(140mL)溶液和18-冠-6(634mg)的混合物中。反應(yīng)混合物攪拌10分鐘并用碘甲烷(1.85mL)處理。在30℃攪拌后，然后室溫?cái)嚢?7小時(shí)。反應(yīng)混合物減壓下濃縮。殘余物用H2O-CHCl3溶解并分離。水層用氯仿萃取。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下蒸發(fā)。粗產(chǎn)物用硅膠柱色譜法(氯仿-甲醇＝9/1)純化。獲得題列化合物(887mg，39％)和它的位置異構(gòu)體1，1′-二甲基-1H，1′H-[2，4′]二咪唑基-4-甲醛(296mg，13％)，淺桃紅色固體。
3，1′-二甲基-3H，1′H-[2，4′]二咪唑基-4-甲醛1H NMR(δ，CDCl3)3.78(s，3H)，4.37(s，3H)，7.51(d，1H，J＝1.0Hz)，7.62(d，1H，J＝1.0Hz)，7.76(s，1H)，9.71(s，1H)。
1，1′-二甲基-1H，1′H-[2，4′]二咪唑基-4-甲醛1H NMR(δ，CDCl3)3.76(s，3H)，4.10(s，3H)，7.47(d，1H，J＝0.9Hz)，7.57(s，1H)，7.59(d，1H J＝0.9Hz)，9.85(s，1H)。
步驟2(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基-(3，1′-二甲基-3H，1′H-12，4′]二咪唑基-4-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯3，1′-二甲基-3H，1′H-[2，4′]二咪唑基-4-甲醛(171mg)室溫氮?dú)庀录尤氲綗o水MgBr2(800mg)無水乙腈(20mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(346mg)的無水THF溶液(20mL)加入到該混合物，冷卻至-20℃，一次性加入三乙胺(0.768mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并用4-二甲基氨基吡啶(22mg)和乙酸酐(0.17mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌17小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用氯仿-甲醇(9/1)洗脫。獲得題列化合物(507.6mg，91.4％)。
1H NMR(δ，CDCl3)2.19(s，3H)，3.75(s，3H)，4.03(s，3H)，5.29(d，1H，J＝13.5Hz)，5.42(d，1H，J＝13.5Hz)，6.03(s，1H)，6.65(s，1H)，7.34(s，1H)，7.48(d，1H，J＝1.2Hz)，7.55(d，1H，J＝1.2Hz)，7.59-7.61(m，3H)，8.23-8.26(m，2H)。
步驟3(5R)，(6Z)-6-(3，1′-二甲基-3H，1′H-[2，4′]二咪唑基-4-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基-(3，1′-二甲基-3H，1′H-[2，4′]二咪唑基-4-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(596mg)溶解于THF(8.3mL)和乙腈(3.9mL)中。新鮮活化的鋅粉(2.38g)和0.5M的磷酸鹽緩沖液(pH6.5，12.2mL)加入到該混合物中。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)溶液用乙酸乙酯混合并用硅藻土墊片過濾。該墊片用水洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(60mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水，然后用5％-10％乙腈-水洗脫。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(66.3mg，19％)。
Mp 113℃(dec)；1H NMR(δ，D2O)3.31(s，3H)，3.52(s，3H)，5.74(s，1H)，6.43(s，2H)，6.70(s，1H)，7.27(s，1H)，7.46(s 1H)實(shí)施例3
步驟12-苯甲基-1H-咪唑-4-甲醛2-苯基-乙酰脒(2g)加入到2-溴-3-異丙氧基丙烯醛(2.88g)的CHCl3(30mL)溶液中。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后三乙胺(2.09mL)加入到混合物中并加熱至回流6小時(shí)?；旌衔锢鋮s至室溫，用CHCl3稀釋，并用10％碳酸氫鉀和洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用乙酸乙酯-己烷洗脫(3/1)。粗化合物由乙酸乙酯和正己烷中結(jié)晶獲得題列化合物(1.10g，40％)。
1H NMR(δ，CDCl3)4.17(s，2H)，7.24-7.36(m，5H)，7.72(brs，1H)，9.60(brs，1H)，10.28(brs，1H)。
步驟22-苯甲基-4-甲酰基-咪唑-1-甲酸-4-硝基苯甲酯2-苯甲基-1H-咪唑-4-甲醛(1g)和碳酸氫鈉(1.13g)溶解于二噁烷(30mL)和水(30mL)中。在0℃，48.7％氯甲酸對硝基苯甲酯(PNZCl)的二噁烷(2.62g)溶液加入到該溶液中并攪拌2.5小時(shí)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋并用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)，減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用氯仿-丙酮(9/1)洗脫。獲得題列化合物，淡褐色油(1.97g，100％)。
1H NMR(δ，CDCl3)4.46(s，2H)，5.42(s，2H)，7.19-7.30(m，5H)，7.44-7.47(m，2H)，8.06(s，1H)，8.21-8.25(m，2H)，9.91(s，1H)。
步驟3(5R，6RS)-6-{(RS)-乙酰氧基-[2-苯甲基-1-(4-硝基-苯甲氧基羰基)-1H-咪唑-4-基]-甲基}-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯2-苯甲基-4-甲?；溥?1-甲酸4-硝基苯甲酯(1.9g)的無水乙腈(10mL)溶液室溫氮?dú)庀录尤氲綗o水MgBr2(2.41g)的無水乙腈(50mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(2g)的無水THF溶液(60mL)加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入三乙胺(1.8mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物在-20℃攪拌2小時(shí)，并用4-二甲基氨基吡啶(127mg)和乙酸酐(0.98mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌16小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用H2O、飽和碳酸氫鈉、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用乙酸乙酯-己烷洗脫(2/3～1/1)。獲得題列化合物，兩種非對映體的混合物(3/2，淺黃色無定形固體，2.8g，70％)。
1H NMR(δ，CDCl3)2.00(s，0.6×3H)，2.26(s，0.4×3H)，4.34-4.37(m，2H)，5.25-5.47(m，4H)，6.02(s，0.4×1H)，6.22(s，0.6×1H)，6.25(s，0.6×1H)，6.85(d，0.4×1H，J＝1.5Hz)，7.14-7.62(m，11H)，8.21-8.25(m，4H)。
步驟4(5R)，(6Z)-6-(2-苯甲基-1H-咪唑-4-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽(5R，6RS)-6-{(RS)-乙酰氧基-[2-苯甲基-1-(4-硝基苯甲氧基羰基)-1H-咪唑-4-基]-甲基}-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(2.5g)溶解于THF(35mL)和乙腈(16.3mL)中。新鮮活化的鋅粉(10g)和0.5M的磷酸鹽緩沖液(pH6.4，51.3mL)加入到混合物中。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)?；旌衔锢鋮s至9℃，加入1M NaOH水溶液調(diào)整pH至7.5。反應(yīng)溶液用乙酸乙酯混合并用硅藻土墊片過濾。該墊片用水洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(250mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水，然后用5-10％乙腈-水洗脫。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(780mg，67％)。
Mp 146℃(dec)；1H NMR(δ，D2O)3.92(s，2H)，6.39(d，1H，J＝0.8Hz)，6.74(s，1H)，6.89(s，1H)，7.13-7.16(m，3H)，7.21-7.25(m，3H)。
實(shí)施例4 步驟14-甲?；?2-噻唑-2-基咪唑-1-甲酸-4-硝基苯甲酯2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-甲醛(570mg)溶解于無水CH2Cl2(35mL)中。0℃N，N′-二異丙基乙胺和48.7％的氯甲酸對硝基苯甲酯(PNZCl)的二噁烷(1.69mL)溶液連續(xù)地加入到該溶液中并攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物用CHCl3稀釋并用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)，減壓濃縮。殘余物由乙酸乙酯和正己烷中結(jié)晶得到題列化合物(1.05g，92％)。
1H NMR(δ，CDCl3)5.49(s，2H)，7.50(d，2H，J＝8.8Hz)，7.55(d，1H，J＝3.4Hz)，7.89(d，1H，J＝3.1Hz)，8.19(s，1H)，8.24(dq，2H，J＝8.8，2.0Hz)，9.97(s，1H)。
步驟2(5R)，(6Z)-6-(2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽4-甲?；?2-噻唑-2-基-咪唑-1-甲酸-4-硝基苯甲酯(940mg)室溫氮?dú)庀录尤氲綗o水MgBr2(1.26g)的無水乙腈(35mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.01g)的無水THF溶液(28mL)加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入三乙胺(0.942mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2.8小時(shí)，并一次性用4-二甲基氨基吡啶(64mg)和乙酸酐(0.495mL)處理。反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃，在0℃攪拌20小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?.1M磷酸鹽緩沖液(pH7)、飽和碳酸氫鈉、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物用硅膠柱色譜法(乙酸乙酯-己烷＝1/1～只用乙酸乙酯)粗略地提純，獲得粗的(5R，6RS)-6-{(RS)-乙酰氧基-[1-(4-硝基苯甲氧基羰基)-2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-基]-甲基}-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(860mg)。
步驟3粗的(5R，6RS)-6-{(RS)-乙酰氧基-[1-(4-硝基苯甲氧基羰基)-2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-基]-甲基}-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(860mg)溶解于THF(12mL)和乙腈(5.6mL)中。新鮮活化的鋅粉(3.44g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.4，17.6mL)加入到該溶液中。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。混合物用乙酸乙酯混合并用硅藻土墊片過濾。該墊片用水洗滌并分出水層。水層35℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(90mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用2.5-5％乙腈-水洗脫。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(126mg，11％由7而來)。
Mp 145℃(dec)；1H NMR(δ，D2O)6.40(d，1H，J＝0.7Hz)，6.81(s，1H)，6.89(s，1H)，7.38(s，1H)，7.48(d，1H，J＝3.1Hz)，7.71(d，1H，J＝3.3Hz)。
實(shí)施例5 步驟11-甲基-2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-甲醛室溫，叔丁氧化鉀(494mg)加入到2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-甲醛(717mg)和18-冠-6(106mg)的無水THF(30mL)和無水DMF(10mL)混合溶液中。反應(yīng)混合物攪拌10分鐘并用碘甲烷(0.274mL)處理。室溫?cái)嚢?7.5小時(shí)后，減壓濃縮。殘余物用乙酸乙酯溶解并過濾。濾液減壓蒸發(fā)。粗產(chǎn)物硅膠柱色譜法(乙酸乙酯-己烷＝1/1)純化。獲得題列化合物(410mg，53％)和它的位置異構(gòu)體1-甲基-2-噻唑-2-基-1H-咪唑-5-甲醛(240mg，31％)，白色固體。
1-甲基-2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-甲醛1H NMR(δ，CDCl3)4.21(s，3H)，7.44(d，1H，J＝3.2Hz)，7.68(s，1H)，7.89(d，1H，J＝3.2Hz)，9.91(s，1H)。
1-甲基-2-噻唑-2-基-1H-咪唑-5-甲醛1H NMR(δ，CDCl3)4.48(s，3H)，7.51(d，1H，J＝3.1Hz)，7.82(s，1H)，7.97(d，1H，J＝3.1Hz)，9.82(s，1H)。
步驟2(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基-(1-甲基-2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯1-甲基-2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-甲醛(380mg)室溫氮?dú)庀录尤氲綗o水MgBr2(1.03g)的無水乙腈(28mL)溶液中。10分鐘內(nèi)沉淀出無色粉末。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(760mg)的無水THF溶液(28mL)溶液加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入三乙胺(0.768mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并一次性用4-二甲基氨基吡啶(48mg)和乙酸酐(0.371mL)處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃，在0℃攪拌22小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用乙酸乙酯-己烷(3/2)洗脫。獲得題列化合物，兩種非對映體的混合物(1/1，淺黃色無定形固體，673.4mg，52％)。
1H NMR(δ，CDCl3)2.00(s，0.5×3H)，2.28(s，0.5×3H)，4.12(s，3H)，5.28(d，0.5×1H，J＝13.5Hz)，5.29(d，0.5×1H，J＝13.5Hz)，5.44(d，0.5×1H，J＝13.5Hz)，5.47(d，0.5×1H，J＝13.5Hz)，6.16(s，0.5×1H)，6.30(s，0.5×1H)，6.42(s，0.5×1H)，6.87(d，0.5×1H，J＝0.8Hz)，6.92(d，0.5×1H，J＝0.8Hz)，7.19(s，0.5×1H)，7.34-7.36(m，1H)，7.47(s，0.5×1H)，7.50(s，0.5×1H)，7.60-7.64(m，2H)，7.83-7.85(m，1H)，8.23-8.26(m，1H)。
步驟3(5R)，(6Z)-6-(1-甲基-2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基-(1-甲基-2-噻唑-2-基-1H-咪唑-4-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(604mg)溶解于THF(8.5mL)和乙腈(3.9mL)中。新鮮活化的Zn粉(2.41g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.4，23.6mL)加入到該混合物中。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)溶液用乙酸乙酯混合并用用硅藻土墊片過濾。該墊片用水洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(60mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用5％乙腈-水和10％乙腈-水洗脫。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(231mg，64％)。
Mp 214℃(dec)；1H NMR(δ，D2O)3.91(s，3H)，6.44(s，1H)，6.84(s，1H)，6.91(s，1H)，7.43(s，1H)，7.60(d，1H，J＝3.3Hz)，7.84(d，1H，J＝3.3Hz)。
實(shí)施例6 步驟14-甲?；?2-苯基咪唑-1-甲酸-4-硝基苯甲酯4-甲?；?2-苯基咪唑(624mg)和碳酸氫鈉(791mg)溶解于二噁烷(3.6mL)、THF(3.6mL)和水(7.2mL)中。室溫48.7％的氯甲酸對硝基苯甲酯(PNZCl)的二噁烷(2.08mL)溶液加入到該混合物中并攪拌2.5小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂名}水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并減壓濃縮。殘余物由乙酸乙酯和正己烷中結(jié)晶得到題列化合物(956mg，75％)。
1H NMR(δ，CDCl3)5.41(s，2H)，7.32(d，2H，J＝8.6Hz)，7.40-7.51(m，3H)，7.56-7.58(m，2H)，8.17-8.20(m，2H)，8.22(s，1H)，9.97(s，1H)。
步驟2(5R，6RS)-6-{(RS)-乙酰氧基-[1-(4-硝基苯甲氧基羰基)-2-苯基-1H-咪唑-4-基]-甲基}-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯4-甲酰基-2-苯基咪唑-1-甲酸-4-硝基苯甲酯(568mg)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(587mg)的無水THF溶液(15mL)室溫氮?dú)庀逻B續(xù)地加入到無水MgBr2(622.4mg)的無水乙腈(15mL)溶液中?；旌衔锢鋮s至-20℃，一次性加入三乙胺(0.494mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌1.5小時(shí)，并用乙酸酐(0.277mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌27小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋，并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用乙酸乙酯-己烷(2/3～1/1)洗脫。獲得題列化合物，三種非對映體的混合物(6/4/1.5，淺黃色無定形固體，986mg，86％)。
1H NMR(δ，CDCl3)2.04(s，0.35×3H)，2.10(s，0.13×3H)，2.30(s，0.52×3H)，5.25-5.43(m，4H)，6.09(s，0.52×1H)，6.22(s，0.13×1H)，6.31(s，0.35×1H)，6.33(s，0.35×1H)，6.87(s，0.13×1H)，6.92(d，0.52×1H，J＝1.4Hz)，7.31-7.76(m，11H)，8.17-8.25(m，4H)。
步驟3(5R)，(6Z)-6-(2-苯基-1H-咪唑-4-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸(5R，6RS)-6-{(RS)-乙酰氧基-[1-(4-硝基苯甲氧基羰基)-2-苯基-1H-咪唑-4-基]甲基}-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(4)(1.15g)溶解于THF(16.1mL)和乙腈(7.5mL)中。新鮮活化的鋅粉(4.6g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.4，23.6mL)加入到該混合物中。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)溶液用乙酸乙酯混合并用硅藻土墊片過濾。該墊片用水洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(100mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用5-10％乙腈-水洗脫。合并后的餾分高35℃真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(322mg，63％)。
Mp 281℃(dec)；1H NMR(δ，D2O)6.32(s，1H)，6.76(s，1H)，6.79(s，1H)，7.22(s，1H)，7.24-7.33(m，3H)，7.60-7.63(m，2H)。
實(shí)施例7 步驟1(5R，6S)-6-溴-6-[(S)-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)羥基甲基]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-甲醛(2.63g)室溫氮?dú)庀录尤氲綗o水MgBr2(3.8g)的無水乙腈(124mL)溶液中。30分鐘內(nèi)沉淀出無色粉末。
(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(6.2g)的無水THF溶液(124mL)加入到該混合物中?；旌衔锢鋮s至-20℃后，一次性加入三乙胺(5.21mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2.5小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用乙酸乙酯-己烷洗脫(3/1～只用乙酸乙酯)。獲得題列化合物3和它的非對映體的混合物(10/1，淡褐色無定形固體，6.63g，79％)，通過硅膠柱色譜法從混合物中分離出題列化合物(3.20g，38％)。1HNMR(δ，CDCl3)3.80-3.89(m，2H)，4.15-4.25(m，2H)，5.22(s，1H)，5.31(d，1H，J＝13.5Hz)，5.45(d，1H，J＝13.5Hz)，6.12(s，1H)，7.12(s，1H)，7.42(s，1H)，7.62(d，2H，J＝8.6Hz)，8.22-8.25(m，2H)。
步驟2(5R，6S)-6-[(S)-(2，3-二氫-咪唑[2，1-b]噻唑-6-基)-羥基甲基]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸(5R，6S)-6-溴-6-[(S)-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)羥基甲基]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(2.0g)溶解于THF(28mL)和乙腈(13mL)中。新鮮活化的鋅粉(8.0g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.4，41mL)加入到該混合物中。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)?；旌衔锢鋮s至3℃，加入1M NaOH水溶液將pH調(diào)整至7.5。反應(yīng)溶液用乙酸乙酯混合并用硅藻土墊片過濾。該墊片用水洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(200mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用2.5％乙腈-水洗脫。合并后的餾分在35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，淺黃色無定形固體(171mg，13％)。
Mp 152℃；1H NMR(δ，D2O)3.91(t，2H，J＝7.4Hz)，4.23(t，2H，J＝7.4Hz)，4.33-4.35(m，1H)，5.07(d，1H，J＝5.5Hz)，5.70(d，1H，J＝1.6Hz)，7.05(d，1H，J＝1.0Hz)，7.24(s，1H)。
實(shí)施例8制備(5R，6Z)-6-[(5-苯甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3.2-c]吡啶-2-基)亞甲基]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟15-苯甲?；?4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-甲酸乙酯向攪拌的無水DMF(7.3g，100mmol)中，在0℃-5℃之間緩慢地加入POCl3(12.25g，80mmol)。加完后，固化的團(tuán)塊溶解于CH2Cl2(20ml)中并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。溫度再冷卻至0℃，緩慢地加入1-苯甲?；?4-哌啶酮的CH2Cl2溶液。加完后，反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，倒入壓碎的冰和乙酸鈉中。室溫?cái)嚢?0分鐘。用CH2Cl2萃取；水充分洗滌；無水MgSO4干燥并濃縮。粗產(chǎn)物溶解于CH2Cl2中，室溫緩慢地加入巰基乙酸乙酯(9.6g，80mmol)/Et3N(10.1g，100mmol)。反應(yīng)混合物回流2小時(shí)并用水停止。CH2Cl2層用水充分洗滌；無水MgSO4干燥；過濾并濃縮。產(chǎn)物用SiO2柱色譜法純化，用50％乙酸乙酯；己烷洗脫。黃色的油；收率6.4gms(25％)；M+H 316。
步驟2(5-苯甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)甲醇在0℃向攪拌的LAH(2.0gms)懸浮液中緩慢地加入5-苯甲?；?4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-甲酸乙酯(6.0g，19mmol)的THF溶液。加完后，反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，用飽和NH4Cl停止。用CHCl3稀釋并過濾。濾液用飽和的鹽水溶液洗滌，無水MgSO4干燥。過濾，不用純化用于下一步中。收率4.5g，91％。黃色液體。
步驟32-甲?；?5-苯甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶向攪拌的(5-苯甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)甲醇(4.0g，15.4mmol)的CH2Cl2(300ml)溶液中加入活化的MnO2(20g，過量)，室溫?cái)嚢?8小時(shí)。最后，反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾并用CHCl3洗滌。反應(yīng)混合物用水充分洗滌；干燥并濃縮。發(fā)現(xiàn)該產(chǎn)物是純的，不用純化用于下一步驟中。收率3.0g(76％)；(M+H257)。
步驟46-[(乙酰氧基)(5-苯甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯室溫氬氣下，2-甲酰基(5-苯甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶(565mg，2.2mmol)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(772mg，2.0mmol)的無水THF溶液(20mL)連續(xù)地加入到無水MgBr2∶O(Et)2(390mg，1.5mmol)的無水乙腈(15mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(2.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并用乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫。收集的餾分減壓下濃縮，非對映體的混合物用于下一步驟中。淺黃色無定形固體；收率550mg，40％；M+H 687。
步驟-5(5R，6Z)-6[(5-苯甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)亞甲基]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸6-[(乙酰氧基)(5-苯甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)甲基-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(450mg，0.65mmol)溶解于THF(20mL)和乙腈(10mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(5.2g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，28mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入0.1M NaOH將pH調(diào)整至8.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮得到黃色沉淀。產(chǎn)物通過HP21樹脂反相柱色譜法純化。柱子先用去離子水(2升)洗脫，然后用10％CAN∶水洗脫。收集含有產(chǎn)物的餾分，室溫減壓下濃縮。黃色固體用丙酮洗滌并過濾。干燥。收率50mg，18％；黃色晶體；mp.198℃；(M+H)411。
1H NMR(DMSO-d6)d2.7(m，2H)，2.8(bm，2H)，3.4(m，2H)，3.8(s，2H)，6.3(s，1H)，6.5(s，1H)，7.1(s，1H)，7.28(s，1H)，7.4(s，5H)。
實(shí)施例9制備(5R)，(6Z)-6-(7-甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸、鈉鹽步驟1咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲酸乙酯溴丙酮酸乙酯(62.9g)室溫加入到2-氨基吡嗪(24.8g)的DME(258mL)溶液中并攪拌2.5小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至0℃并攪拌30分鐘得到淡褐色沉淀物。沉淀過濾并用Et2O洗滌得到淡褐色晶體。沉淀(66.1g)的EtOH(1.29L)懸浮液回流溫度下加熱變?yōu)槌吻宓娜芤?。回?小時(shí)候后，反應(yīng)混合物減壓濃縮，然后與CHCl3和飽和NaHCO3水溶液混合?；旌衔镉霉柙逋翂|片過濾，分出的有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用CHCl3-MeOH(99/1-97/3)洗脫，所收集的餾分減壓下濃縮，繼而由CHCl3-Et2O中重結(jié)晶。獲得題列化合物，淺桃紅色結(jié)晶。收率10.9g，22％)。
1H NMR(CDCl3)d1.46(t，3H，J＝7.2Hz)，4.49(q，2H，J＝7.2Hz)，7.96(d，1H，J＝4.7Hz)，8.08(dd，1H，J＝1.2，4.7Hz)，8.26(s，1H)，9.21(d，1H，J＝1.2Hz)。
步驟25，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲酸乙酯，鹽酸鹽0.46M的HCl-EtOH(169mL)和10％Pd-C(50％濕的)(1.37g)加入到咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(13.7g)的EtOH(546mL)溶液中?；旌衔锸覝?0psi的H2下氫化15小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，Pd-C用EtOH洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用CHCl3-MeOH(9/1-2/1)洗脫。獲得題列化合物，褐色結(jié)晶，收率10.4g，63％。
1H NMR(CDCl3)d 1.38(t，3H，J＝7.1Hz)，3.90(t，2H，J＝5.7Hz)，4.40(q，2H，J＝7.1Hz)，4.59(t，2H，J＝5.7Hz)，4.80(s，2H)，8.20(s，1H)。
步驟37-甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲酸乙酯Et3N(3.44mL)、37％HCHO水溶液(2.02mL)和NaBH3CN(1.78g)室溫連續(xù)地加入到5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲酸乙酯鹽酸鹽(5.2g)的MeOH(75mL)溶液中，氮?dú)庀聰嚢?.5小時(shí)?；旌衔镉肅H2Cl2稀釋并用50％K2CO3水溶液洗滌。有機(jī)層干燥(K2CO3)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用CHCl3-丙酮(1/1-1/2)洗脫。獲得題列化合物，橙色的油。收率2.68g，57％)。
1H NMR(CDCl3)d 1.37(t，3H，J＝7.1Hz)，2.50(s，3H)，2.85(t，2H，J＝5.5Hz)，3.69(s，2H)，4.06(t，2H，J＝5.5Hz)，4.36(t，2H，J＝7.1Hz)，7.52(s，1H)。
步驟47-甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲醛-78℃氮?dú)庀?.01M的DIBAL的甲苯(13.6mL)溶液加入到7-甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(1.8g)的無水CH2Cl2(86mL)溶液中，并攪拌2小時(shí)。混合物用1M HCl停止。反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾。濾液用50％K2CO3水溶液洗滌，水層用CH2Cl2萃取三次。合并后的有機(jī)層干燥(K2CO3)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用CHCl3-MeOH(19/1-9/1)洗脫。獲得題列化合物5，無色結(jié)晶。收率591mg，42％)。
1H NMR(CDCl3)d 2.51(s，3H)，2.87(t，2H，J＝5.5Hz)，3.70(s，2H)，4.10(t，2H，J＝5.5Hz)，7.53(s，1H)，9.82(d，1H，J＝1.4Hz)。
步驟5(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基(7-甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(非對映體混合物)7-甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲醛是室溫氮?dú)庀录尤氲綗o水MgBr2(4.05g)的無水乙腈(97mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(3.32g)的無水THF溶液(97mL)加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入Et3N(3.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物在-20℃攪拌4.5小時(shí)并用乙酸酐(1.36mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌17小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用CHCl3-丙酮(9/1-2/1)洗脫。獲得題列化合物，兩種非對映體的混合物。紅色的油，收率1.13g。
1H NMR(CDCl3)d 1.20(s，0.81×3H)，2.24(s，0.19×3H)，2.48(s，3H)，2.80～2.84(m，2H)，3.57～3.67(m，2H)，3.97～4.02(m，2H)，5.27(d，1H，J＝13.6Hz)，5.42(d，0.19×1H，J＝13.6Hz)，5.45(d，0.81×1H，J＝13.6Hz)，6.07(s，0.19×1H)，6.30(s.0.81×2H)，6.79(s，0.19×1H)，6.80(s，0.19×1H)，7.02(s，0.81×1H)，7.44(s，0.19×1H)，7.47(s，0.81×1H)，7.60(d，0.19×2H，J＝8.2Hz)，7.62(d，0.81×2H，J＝8.6Hz)，8.22～8.26(m，2H)。
步驟6(5R)，(6Z)-6-(7-甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)13.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽.
(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基(7-甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.11g)溶解于THF(32mL)和乙腈(32mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(4.46g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，48mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾，冷卻至3℃，加入1M的NaOH將pH調(diào)整至7.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(20mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用H2O-MeCN(1/0～95/5)洗脫。合并后的餾分在35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體。收率417mg，65％
mp 200℃(dec)；1H NMR(D2O)d 2.32(s，3H)，2.79～2.81(m，2H)，3.54(s，2H)，3.95(t，2H，J＝5.6Hz)，6.39(s，1H)，6.85(s，1H)，6.87(s，1H)，7.26(s，1H)。
實(shí)施例10制備(5R)，(6Z)-7-氧代-6-(5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽2-酮哌嗪2-酮哌嗪按照Merk組(USP5,629,322)的方法進(jìn)行制備。
步驟14-對硝基苯甲氧基羰基-2-酮哌嗪0℃48.7％的對硝基苯甲氧基羰基氯的1，4-二噁烷(10.7mL)溶液加入到2-酮哌嗪(2.21g)和二異丙基乙胺(4.6mL)的二氯甲烷(110mL)溶液中并在0℃攪拌0.5小時(shí)。水(300mL)加入到反應(yīng)混合物中，并用二氯甲烷(3×100mL)萃取。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用CHCl3-甲醇(30∶1)洗脫，獲得題列化合物，白色固體(7.1g，定量的)。
1H NMR(d，CDCl3)3.42-3.45(m，2H)，3.74(t，2H，J＝5.4Hz)，4.19(s，2H)，5.26(s，2H)，6.39(brs，1H)，7.52(d，2H，J＝8.6Hz)，8.24(d，2H，J＝8.6Hz)。
步驟25-甲氧基-4-對硝基苯甲氧基羰基-1，2，3，6-四氫吡嗪四氟硼酸三甲基氧鎓(97％，3.7g)室溫加入到4-對硝基苯甲氧基羰基-2-酮哌嗪(6.7g)的無水二氯甲烷(120mL)溶液中并攪拌17小時(shí)。反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液處理，并分出有機(jī)層。水層用乙酸乙酯(3×100mL)萃取，然后合并后的有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓濃縮，獲得題列化合物，淡褐色固體。收率；5.7g，80.6。
1H NMR(d，CDCl3)3.48(m，2H)，3.57(m，2H)，3.70(s，3H)，3.97(s，2H)，5.26(s，2H)，7.52(d，2H，J＝8.7Hz)，8.23(d，2H，J＝8.7Hz)。
步驟32-亞氨基-4-對硝基苯甲氧基羰基哌嗪5-甲氧基-4-對硝基苯甲氧基羰基-1，2，3，6-四氫哌嗪(5.7g)和氯化銨(1.6g)的無水乙醇(100mL)混合物加熱至回流4小時(shí)。然后反應(yīng)混合物減壓下濃縮。二氯甲烷(100mL)加入到殘余物中，并用水(3×50mL)萃取，然后合并后的水層用二氯甲烷洗滌。水層用10％碳酸鉀水溶液中和，然后用二氯甲烷(8×50mL)萃取。合并后的有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮，獲得題列化合物，白色固體。收率4.9g，91.2％。
1H NMR(dCDCl3)3.49(brs，4H)，3.98(brs，2H)，5.26(s，2H)，7，52(d，2H，J＝8.6Hz)，8.23(d，2H，J＝8.6Hz)。
步驟47-對硝基苯甲氧基羰基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲醛(9)和7-對硝基苯甲氧基羰基-5，6，7，8四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-3-甲醛2-溴-3-羥基丙烯醛(2.8g)，對甲苯磺酸一水合物(33mg)和2-丙醇(3.5mL)的環(huán)己烷(28mL)混合物共沸直到蒸汽溫度升至80℃。反應(yīng)混合物減壓下濃縮。殘余物溶解于無水乙腈(30mL)中。室溫加入2-亞氨基-4-對硝基苯甲氧基羰基哌嗪(4.7g)的無水乙腈(310mL)溶液。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后真空分出反應(yīng)溶液。殘余物溶解于乙酸乙酯(170mL)中，加入三乙胺(2.4mL)，然后反應(yīng)混合物加熱至回流1.5小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后水(170mL)加入到該反應(yīng)混合物中并分出。水層用二氯甲烷(2×100mL)萃取。合并后的有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用CHCl3-甲醇(50∶1)洗脫，獲得題列化合物，褐色固體，(收率2.9g，51.6％)和它的位置異構(gòu)體(橙色無定形固體，收率；0.8g，14.9％)。
1H NMR(d，CDCl3)3.99(t，2H，J＝5.4Hz)，4.14(t，2H，J＝5.4Hz)，4.85(s，2H)，5.29(s，2H)，7.54(d，2H，J＝8.6Hz)，7.57(s，1H)，8.24(d，2H，J＝8.6Hz)，9.85(s，1H)。
位置異構(gòu)體1H NMR(d，CDCl3)3.95(t，2H，J＝5.4Hz)，4.44(t，2H，J＝5.4Hz)，4.87(s，2H)，5.29(s 2H)，7.54(d，2H，J＝8.7Hz)，7.78(s，1H)，8 24(d，2H，J＝8.7Hz)，9.71(s，1H)。
步驟5(5R)-6-[乙酰氧基-(7-對硝基苯甲氧基羰基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-l-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-對硝基苯甲酯室溫氮?dú)庀?-對硝基苯甲氧基羰基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲醛(1.6g)的無水乙腈(25mL)溶液加入到MgBr2(2.2g)的無水乙腈(55mL)溶液中，然后混合物攪拌10分鐘。加入(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.8g)的無水THF(80mL)溶液，混合物冷卻至-20℃，然后一次性加入三乙胺(1.6mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌3小時(shí)并用4，4-二甲基氨基吡啶(58.3mg)和乙酸酐(0.89mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。10％檸檬酸水溶液(320mL)加入到該反應(yīng)混合物中，水層用乙酸乙酯(3×160mL)萃取。有機(jī)層用水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用CH2Cl2-丙酮(20∶1)洗脫，獲得題列化合物，兩種非對映體混合物(81∶19，褐色泡沫無定形固體。收率2.1g，59.9％。
1H NMR(d，CDCl3)2.01(s，2.43H)，2.24(s，0.57H)，3.93-，3.96(m，2H)，4.02-4.05(m，2H)，4.74-4.76(m，2H)，5.28(d，1H，J＝13.5Hz)，5.28(s，2H)，5.45(d，1H，J＝13.5Hz)，6.07(s，0.19H)，6.29(s，0.81H)，6.31(s，0.81H)，6.80(s，0.19H)，6.83(s，0.19H)，7.08(s，0.81H)，7.43(s，0.19H)，7.46(s，0.81H)，7.54(d，2H，J＝8.6Hz)，7.61(d，2H，J＝8.8Hz)，8.24(d，4H，J＝8.3Hz)。
步驟6(5R)，(6Z)-7-氧代-6-(5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽(5R)-6-[乙酰氧基-(7-對硝基苯甲氧基羰基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸對硝基苯甲酯(2.0g)溶解于THF(63mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(7.9g)和0.5mol/L的磷酸鹽緩沖液(pH6.5，63mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)溶液通過硅藻土墊片過濾，該墊片用水(150mL)和正丁醇(150mL)洗滌。分出水層，然后有機(jī)層用水(2×50mL)萃取。合并后的水層濃縮至61g并經(jīng)過Diaion HP-21樹脂(80mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)柱色譜法。吸附后，柱子用水，然后用5％乙腈水溶液洗脫。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體。收率172mg，20.1％mp 150℃(dec)；1HNMR(d，D2O)3.02(t，2H，J＝5.6Hz)，3.82(s，2H)，3.89(d，2H，J＝5.6Hz)，6.38(s，1H)，6.84(s，1H)，6.87(s，1H)，7.24(s，1H)；IR(KBr)實(shí)施例11制備(5R，6Z)-6-{[5-(4-甲氧基苯甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基]亞甲基}-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟16，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2，5(4H)-二甲酸-5-叔丁基-2-乙酯6，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2，5(4H)-二甲酸-5-叔丁基-2-乙酯根據(jù)實(shí)施例5(步驟1)所述的方法進(jìn)行制備。由1-哌啶甲酸叔丁酯(9.9g，50mmol)，POCl3(6.3g，40mmol)和DMF(3.8g，50mmol)起始。氯甲?；虚g體與巰基乙酸乙酯(6.0g，50mmol)和Et3N反應(yīng)。產(chǎn)物通過SiO2柱色譜法純化并用3∶1己烷∶乙酸乙酯純化。收率8.7g，56％；白色液體。(M+H)312。
步驟22-(羥基甲基)-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯2-(羥基甲基)-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯根據(jù)實(shí)施例5(步驟2)所述的方法進(jìn)行制備。由6，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2，5(4H)-二甲酸-5-叔丁基-2-乙酯(1.0g，3.21mmol)和LiAIH4(500mg，過量)起始，分離到807mg(92％收率)醇衍生物，白色液體。(M+H)270。
步驟32-(甲?；?-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯2-(甲酰基)-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯根據(jù)實(shí)施例5(步驟3)所述的方法進(jìn)行制備。由2-(羥基甲基)-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(1.0g3.7mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液和活化MnO2(5g，過量)起始，分離到800g(81％收率)的醛衍生物，褐色固體。(M+H)268。
步驟42-(甲酰基)-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]-5(4H)吡啶2-(甲?；?-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]-5(4H)吡啶由2-(甲酰基)-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(1.0g3.7mmol)溶解于CH2Cl2(20ml)、MeOH(90％，20ml)和1N.HCl的二噁烷(10ml)中開始制備。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?8小時(shí)。最后反應(yīng)混合物濃縮至干，不用純化用于下一步驟中。收率750mg(HCl鹽，定量的)；M+H 168。
步驟52-甲?；鵞5-(4-甲氧基苯甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并][3，2-c]吡啶向攪拌的2-(甲?；?-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]-5(4H)吡啶(1.4g，5.2mmol)的DMF(20ml)溶液中，室溫加入4-甲氧基苯甲基氯(0.94g，6.2mmol)和N，N-二異丙基乙胺(10ml，過量)。反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)并用水停止。反應(yīng)混合物用氯仿萃取；用水充分洗滌并通過無水MgSO4干燥。過濾并濃縮。產(chǎn)物通過SiO2柱色譜法純化，用乙酸乙酯洗脫。淺黃色油。收率470mg，35％；M+H 288。
步驟64-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)[5(4-甲氧基苯甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯室溫氬氣下，2-甲酰基[5-(4-甲氧基苯甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并][3，2-c]吡啶(574mg，2.0mmol)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(772mg，2.0mmol)的無水THF溶液(20mL)連續(xù)地加入到無水MgBr2∶O(Et)2(390mg，1.5mmol)的無水乙腈(15mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(2.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)，并用乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫。所收集的餾分減壓濃縮，非對映體的混合物用于下一步驟中。淺黃色無定形固體；收率550mg，40％；M+H 714和716。
步驟-7(5R，6Z)-6-{[ 5-(4-甲氧基苯甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)]亞甲基}-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸4-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)[5(4-甲氧基苯甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯(300mg，0.42mmol)溶解于THF(20mL)和乙腈(10mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(5.2g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，28mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，并加入0.1M的NaOH將pH調(diào)整至8.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層35℃高真空下濃縮得到黃色沉淀。產(chǎn)物用HP21樹脂反相柱色譜法純化。柱子先用去離子水(2升)洗脫，然后用10％CAN∶水洗脫。收集含有產(chǎn)物的餾分并在室溫減壓下濃縮。黃色固體用丙酮洗滌并過濾。干燥。收率50mg，18％；黃色結(jié)晶；mp.127℃；(M+H)441。
1H NMR(DMSO-d6)d 2.7(m，2H)，2.8(bm，2H)，3.4(m，2H)，3.74(s，3H)3.8(s，2H)，6.6(s，1H)，6.88(dd，2H)，7.14(s，1H)，7.24(dd，2H)，7.4(s，1H)，7.59(s，1H)。
實(shí)施例12制備(5R)，(6Z)-6-(5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噻嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟15-甲硫基-3，6-二氫-2H-[1，4]噻嗪鹽酸鹽5-甲硫基-3，6-二氫-2H-[1，4]噻嗪鹽酸鹽根據(jù)USP5,629,322所述的方法進(jìn)行制備。
步驟23-亞氨基硫代嗎啉鹽酸鹽5-甲硫基-3，6-二氫-2H[1，4]噻嗪氫碘化物(7.1g)溶解于10％K2CO3水溶液(150mL)中，水層用CH2Cl2(5×70mL)萃取。合并后的有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾并減壓濃縮。氯化銨(1.7g)加入到獲得的殘余物的無水乙醇(128mL)中，加熱至回流1小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫。真空分出反應(yīng)溶液，獲得亞氨基硫代嗎啉鹽酸鹽，褐色固體(4.3g，定量的)。
1H NMR(d，DMSO-d6)3.15(t，2H，J＝5.9Hz)，3.74(t，2H，J＝5.9Hz)，3.83(s，2H)，8.97(brs，1H)，9.38(brs，1H)，9.99(brs，1H)。
步驟35，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c] [1，4]噻嗪-2-甲醛和5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噻嗪-3-甲醛2-溴-3-羥基丙烯醛(7，4.3g)、對甲苯磺酸一水合物(52mg)和2-丙醇(5.3mL)的環(huán)己烷(43mL)混合物共沸直到蒸汽溫度升至80℃。反應(yīng)混合物減壓濃縮。殘余物溶解于無水乙醇(28mL)中。室溫加入3-亞氨基硫代嗎啉鹽酸鹽(4.3g)的無水乙醇(143mL)和28％甲醇鈉的甲醇溶液(5.0mL)混合物。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后真空分出反應(yīng)溶液。殘余物溶解于氯仿(128mL)中，加入三乙胺(3.6mL)，然后反應(yīng)混合物加熱至回流2.5小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后減壓濃縮。殘余物溶解于二氯甲烷(300mL)中并用50％K2CO3水溶液(2×100mL)洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用CHCl3-丙酮(10∶1)洗脫，獲得5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噻嗪-2-甲醛(褐色固體，445mg，10.3％)和5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噻嗪-3-甲醛(褐色固體，872mg，20.2％)。
5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噻嗪-2-甲醛1H NMR(d，CDCl3)3.07(t，2H，J＝5.7Hz)，3.95(s，2H)，4.33(t，2H，J＝5.7Hz)，7.55(s，1H)，9.83(s，1H)。
5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噻嗪-3-甲醛1H NMR(d，CDCl3)3.05(t，2H，J＝5.7Hz)，3.98(s，2H)，4.61(t，2H，J＝ 5.7Hz)，7.73(s，1H)，9.69(s，1H)。
步驟4(5R)，(6Z)-6-(5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噻嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽室溫氮?dú)庀拢?，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噻嗪-2-甲醛(9,392mg)的無水乙腈(20mL)溶液加入到MgBr2(1.1g)的無水乙腈(20mL)溶液中，然后混合物攪拌10分鐘。加入(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.0g)的無水THF(40mL)溶液，混合物冷卻至-20℃，然后一次性加入三乙胺(0.8mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌3.5小時(shí)并用4-二甲基氨基吡啶(30mg)和乙酸酐(0.44mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌14小時(shí)。10％檸檬酸水溶液(240mL)加入到反應(yīng)混合物中，水層用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并后的有機(jī)層用水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法粗略地純化，用CH2Cl2-丙酮(50∶1)洗脫，獲得粗的(5R)-6-[乙酰氧基-(5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噻嗪-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸對硝基苯甲酯固體。
以上獲得的固體通過SiO2柱色譜法純化，用505乙酸乙酯∶己烷洗脫。所獲得的淺黃色固體溶解于THF(17mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(2.2g)和0.5mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.5，17mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)溶液通過硅藻土墊片過濾，該墊片用水(40mL)和正丁醇(30mL)洗滌。分出水層，然后有機(jī)層用0.5mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.5，2×10mL)萃取。合并后的水層濃縮至23g，加入1mol/L的NaOH將pH調(diào)整至7.25，經(jīng)過Diaion HP-21樹脂(30mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用10％乙腈水溶液洗脫。合并后的活性餾分在35℃高真空下濃縮，冷凍干燥得到(5R)，(6Z)-6-(5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噻嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽，黃色無定形固體(168mg，20.9％)。
mp 135℃(dec)；1H NMR(d，D2O)3.00(t，2H，J＝5.7Hz)，3.80(AB，2H，J＝16.7，18.1Hz)，4.19(t，2H，J＝5.7Hz)，6.44(d，1H，J＝0.8Hz)，6.89(s，1H)，6.93(s，1H)，7.29(s，1H)；M+H＝322。
實(shí)施例13制備(5R)，(6Z)-6-(6，7-二氫-5H-吡咯并[l，2-a]咪唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟16，7-二氫-5H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2-甲醛28％甲醇鈉(5.26g)室溫加入到4，5-二氫-3H-吡咯-2-基胺鹽酸鹽(3.27g)的乙醇(250mL)溶液中。室溫?cái)嚢?分鐘后，2-溴-3-丙氧基丙烯醛(5.79g)室溫加入到該混合物中，然后反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)至干。殘余物溶解于CHCl3(300mL)中，加入三乙胺(3.8mL)?；旌衔锛訜嶂粱亓?小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，50％K2CO3洗滌，無水K2CO3干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用CHCl3-丙酮(2∶1)洗脫，獲得6，7-二氫-5H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2-甲醛(41％，1.51g)，淺黃色固體。
1H NMR(d，CDCl3)2.62-2.7(m，2H)，2.90-2.94(m，2H)，4.07(t，2H，J＝7.2Hz)，7.59(s，1H)，9.80(s，1H)。
步驟2(5R)，(6Z)-6-(6，7-二氫-5H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽室溫氬氣下，6，7-二氫-5H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2-甲醛(1.36g)加入到無水MgBr2(5.64g)的無水乙腈(155mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(3.86g)的無水THF溶液(155mL)加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入Et3N(4.18mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌3小時(shí)，并用乙酸酐(1.89mL)和DMAP(370mg)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌14.5小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?M檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物溶解于THF(166mL)和乙腈(77mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(23.2g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，243mL)。反應(yīng)容器熔箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入1M NaOH將pH調(diào)整至8。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。向水層中加入1M NaOH再將pH調(diào)整至8。所得的混合物35℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(20mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用H2O-MeCN(1/0-9/1)洗脫得到純化的活性餾分，(5R)，(6Z)-6-(6，7-二氫-5H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥得到題列化合物，黃色無定形固體(681mg，24％，pH7.8)。
mp 190℃(dec)；1H NMR(d，D2O)2.48-2.56(m，2H)，2.74-2.79(m，2H)，3.94-3.99(m，2H)，6.47(d，1H，J＝0.7Hz)，6.94(s，1H)，6.95(s，1H)，7.36(s，1H)；(M+H)291。
實(shí)施例14制備(5R，6Z)-6-(咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸。
步驟1咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯溴丙酮酸乙酯(9.8g，50mmol)室溫逐滴地加入到攪拌的2-氨基苯并噻唑(7.5g，50mmol)的DMF(100ml)溶液中。加入后，反應(yīng)混合物加熱至回流6小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并用冰冷的水停止。水層用NH4OH中和，過濾所分出的固體。用水充分洗滌并干燥。獲得的粗產(chǎn)物不用純化用于下一步驟中。褐色固體；收率10g，81％；M+H248。mp97℃。
步驟2咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲醇0℃緩慢地向攪拌的LiAlH4(2.0g，過量)的無水THF漿狀物中加入咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯(4.9g，20mmol)的THF(100ml)溶液。加入后，反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，并用飽和NH4Cl/NH4OH停止。所分出的固體用氯仿/MeOH(3∶1)稀釋并用硅藻土墊片過濾。有機(jī)層用飽和NaCl洗滌一次，通過無水MgSO4干燥。過濾并濃縮。獲得的褐色固體不用純化用于下一步驟中。收率3.8g，93％；M+H 205；mp131℃。
步驟32-甲?；?咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑向攪拌的咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲醇(2.04g，10mmol)的二氯甲烷(200ml)溶液中加入活化的MnO2(15g，過量)。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?4小時(shí)并用硅藻土墊片過濾。反應(yīng)混合物濃縮，產(chǎn)物通過硅膠柱色譜法純化，并用75％乙酸乙酯；己烷洗脫。褐色固體；收率800mg，40％；M+H 203。
步驟44-硝基苯甲酯-6-[(乙酰氧基)(咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸2-甲酰基咪唑并[2，1-b]苯并噻唑(444mg，2.2mmol)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(772mg，2mmol)的無水THF溶液(20mL)室溫氬氣下連續(xù)地加入到無水MgBr2∶醚合物(619mg2.4mmol)的無水乙腈(15mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(2.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并用乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?％的檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)，用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱，然后柱子用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫。所收集的餾分減壓下濃縮，非對映體的混合物用于下一步驟中。淺黃色無定形固體；收率850mg，67％；mp69℃；M+H630。
步驟-5(5R)，(6Z)-6-(咪唑并[1，2-b][1，3]苯并噻唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸4-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)(咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯(500mg，0.79mmol)溶解于THF(17mL)和乙腈(36mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(5.2g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，28mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入1N HCl將pH調(diào)整至7.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮得到黃色沉淀。該沉淀物溶解于乙腈中，裝載到HP-21反相柱上。用去離子水(2L)然后用10％乙腈∶水洗脫。收率105mg，35％；黃色結(jié)晶；mp233℃；M+H 356。
1H NMR(DMSO-d6)□6.51(s，1H)，6.53(s，1H)，7.09(s，1H)，7.47(t，1H，J＝7.5Hz)，7.54(t，1H，J＝7.5Hz)，8，06(t，1H)，8.62(s，1H)。
實(shí)施例15制備(5R，6Z)-6-[(7-甲氧基咪唑并[2，1-b] [1，3]苯并噻唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸.
步驟17-甲氧基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯7-甲氧基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯根據(jù)實(shí)施例1(步驟1)所述的方法制備。由6-甲氧基-2-氨基苯并噻唑(27g，0.15mol)和溴丙酮酸乙酯(39.9g，0.2mol)起始，分離到24g(43％收率)的7-甲氧基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯，褐色固體。(M+H)277。
步驟27-甲氧基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲醇7-甲氧基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲醇根據(jù)實(shí)施例1(步驟2)的方法進(jìn)行制備。由7-甲氧基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯(12.5g，43.5mmol)和LiAlH4溶液(43.5ml，0.5M的THF溶液)起始，分離到4.0g(40％收率)的醇衍生物，褐色固體。(M+H)235。
步驟32-甲酰基-7-甲氧基咪唑并[2，1-b]苯并噻唑2-甲酰基-7-甲氧基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑根據(jù)實(shí)施例1(步驟3)的方法進(jìn)行制備。由7-甲氧基咪唑并[2，1-b]苯并噻唑-2-甲醇(4.0g，17mmol)的二氯甲烷/DMF(300mL∶50mL)溶液和活化的MnO2(12g，過量)起始，分離到822mg(21％收率)的醛衍生物，褐色固體。(M+H)233。
步驟44-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)(7-甲氧基咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸2-甲酰基-7-甲氧基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑(822mg，3.5mmol)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.364，3.54mmol)的無水THF溶液(40mL)室溫氬氣下連續(xù)地加入到無水MgBr2∶醚合物(1.3g，5mmol)的無水乙腈(15mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(2.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并用乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱，然后柱子用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫。所收集的餾分減壓下濃縮，非對映體的混合物用于下一步驟中。淺黃色無定形固體；收率2.24g，95％；M+H 660。
步驟-5(5R)，(6Z)-6-[(7-甲氧基咪唑并[1，2-b][1，3]苯并噻唑-2-基亞甲基)]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸4-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)(7-甲氧基咪唑并[2，1-b] [1，3]苯并噻唑-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯(659mg，1.0mmol)溶解于THF(17mL)和乙腈(36mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(5.2g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，28mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入1N HCl將pH調(diào)整至7.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層35℃高真空下濃縮得到黃色沉淀。沉淀過濾并用H2O、MeCN、丙酮洗滌得到題列化合物。收率68mg；23％；黃色晶體；mp284；M+H386。
1H NMR(DMSO-d6)□3.89(s，3H)，6.58(s，1H)，6.64(s，1H)，7.14(s，1H)，7.2(dd，1H，J＝6.0Hz)，7.75(d，1H，J＝3.0Hz)，8，03(d，J＝6.0Hz 1H)，8.62(s，1H)。
實(shí)施例16制備(5R，6Z)-6-[(7-氯咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟17-氯咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯7-氯咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯根據(jù)實(shí)施例1(步驟1)所述的方法制備。由6-氯-2-氨基苯并噻唑(9.2g，50mmol)和溴丙酮酸乙酯(11.6g，60mmol)起始，分離到8.5g(60％收率)7-氯咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯，褐色固體。(M+H)281。
步驟27-氯咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲醇7-氯咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲醇根據(jù)實(shí)施例1(步驟2)的方法制備。由7-氯咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯(9.0g，32.1mmol)和LiAlH4(4.0g，過量)起始，分離到5.5g(72％收率)醇衍生物，褐色固體。mp166℃(M+H)239。
步驟32-甲?；?7-氯咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑2-甲?；?7-氯咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑根據(jù)實(shí)施例1(步驟3)的方法制備。由7-氯咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲醇(4.0g16.8mmol)的二氯甲烷/MeOH(300mL∶50mL)溶液和活化MnO2(20g，過量)起始，分離到2.2g(55％收率)的醛衍生物，褐色固體。(M+H)236。
步驟44-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)(7-氯咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸2-甲酰基-7-氯咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑(270mg，1.14mmol)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(500mg，1.14mmol)無水THF溶液(20mL)室溫氬氣下連續(xù)地加入到無水MgBr2∶O(Et)2(390mg，1.5mmol)的無水乙腈(15mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(2.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)，并用乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫。所收集的餾分減壓下濃縮，非對映體的混合物用于下一步驟中。淺黃色無定形固體；收率495mg，65％；M+H 665。
步驟-5(5R)，(6Z)-6-[(7-氯咪唑并[1，2-b][1，3]苯并噻唑-2-基亞甲基)]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸4-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)(7-氯咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯(450mg，0.67mmol)溶解于THF(20mL)和乙腈(10mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(5.2g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，28mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入0.1N NaOH將pH調(diào)整至8.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮得到黃色沉淀。產(chǎn)物用HP21樹脂反相柱色譜法純化。柱子先用去離子水(2L)洗脫，后用10％乙腈∶水洗脫。收集含有產(chǎn)物的餾分，室溫減壓下濃縮。黃色固體用丙酮洗滌，過濾并干燥。收率80mg，18％；黃色結(jié)晶；mp240℃；(M+H+Na)412。
1H NMR(DMSO-d6)□6.6(s，2H)，7.1(s，1H)，7.62(dd，1H)，8.11(d，1H)，8.2(s，1H)，8.6(s，1H)。
實(shí)施例17制備(5R)，(6Z)-6-咪唑并[1，2-a]喹啉-2-基亞甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸咪唑并[1，2-a]喹啉-2-甲醛咪唑并[1，2-a]喹啉-2-甲醛(4)根據(jù)Westwood及其合作者(J.Med.Chem.1988，31，1098-1115)的方法制備。
步驟1(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基咪唑并[1，2-a]喹啉-2-基甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯咪唑并[1，2-a]喹啉-2-甲醛(1.09g)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(2.22g)的無水THF溶液(75.5mL)室溫氬氣下連續(xù)地加入到無水MgBr2(2.5g)的無水乙腈(75.5mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(1.85mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并用乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?％的檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉，和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱，然后柱子用CHCl3-丙酮(1/0～95/5)洗脫。所收集的餾分減壓濃縮，繼而由CHCl3-Et2O中重結(jié)晶得到題列化合物的一種異構(gòu)體。(淺黃色晶體，收率1.3g，38％)。
1H NMR(CDCl3)□2.37(s，3H)，5.29(d，1H，J＝13.5Hz)，5.45(d，1H，J＝13.5Hz)，6.22(s，1H)，7.14(s，1H)，7.46～7.52(m，3H)，7.56(d，1H，J＝9.6Hz)，7.62(d，2H，J＝8.6Hz)，7.64～7.69(m，1H)，7.83(dd，1H，J＝1.1，7.9Hz)，7.93(d，1H，J＝8.3Hz)，7.99(s，1H)，8.25(d，2H，J＝8.6Hz)。
步驟2(5R)，(6Z)-6-咪唑并[1，2-a]喹啉-2-基亞甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基咪唑并[1，2-a]喹啉-2-基甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.3g)溶解于THF(17mL)和乙腈(36mL)中。迅速地加入新鮮活化的Zn粉(5.2g)和0.5M磷酸緩沖液(pH6.5，28mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入1N HCl將pH調(diào)整至7.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮得到黃色沉淀。沉淀過濾并用H2O、乙腈和丙酮洗滌得到題列化合物，收率297mg，38％，黃色結(jié)晶mp205℃。
1H NMR(D2O)d 6.19(s，1H)，6.36(s，1H)，6.87(s，1H)，6.96(d，1H，J＝9.5Hz)，7.32(d，1H，J＝9.5Hz)，7.33(s，1H)，7.44～7.57m，4H)。
實(shí)施例18制備(5R)，(6Z)-6-(6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟1制備6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-2-甲酸乙酯；2-氯環(huán)戊酮(11.8g，100mmol)和硫脲(8.0g101 mmol)的混合物在乙醇∶THF(1∶2)中回流16小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，所分離的白色固體過濾。(9.0g分離出的)固體溶解于無水乙醇(100ml)和甲醇鈉(1.9g2.7g，51mmol)中。向該溶液中加入溴丙酮酸乙酯(10.0g)并室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后回流48小時(shí)。最后反應(yīng)混合物冷卻至室溫并濃縮。殘余物用氯仿萃取并用水充分洗滌。產(chǎn)物通過硅膠柱色譜法純化并用50％乙酸乙酯∶己烷洗脫。紅色半固體；收率3.0g；M+H 237。
該酯用LiAlH4還原，所得的醇用活化的MnO2氧化。所獲得的醛用于下一步驟中。
步驟3制備(6R)-6-[(乙酰氧基)(6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-2-基)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯2-甲?；?6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑(600mg，3.1mmol)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.2g，3mmol)d無水THF溶液(20mL)室溫氬氣下連續(xù)地加入到無水MgBr2∶O(Et)2(1.2g，3.0mmol)的無水乙腈(15mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(2.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并用乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫。所收集的餾分減壓下濃縮，非對映體的混合物用于下一步驟中。淺黃色無定形固體；收率850mg，45％；M+H 620。
步驟4制備(5R)，(6Z)-6-(6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸(5R)-6-[(乙酰氧基)(6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-2-基)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(850mg，1.37mmol)溶解于THF(20mL)和乙腈(10mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(5.2g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，28mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入0.1N NaOH將pH調(diào)整至8.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層35℃高真空濃縮得到黃色沉淀。產(chǎn)物用HP21樹脂反相柱色譜法純化。柱子先用去離子水(2L)洗脫，后用10％乙腈∶水洗脫。收集含有產(chǎn)物的餾分，室溫減壓下濃縮。黃色固體用丙酮洗滌，過濾并干燥。收率138mg，29％；黃色晶體；mp 192℃；(M+H+Na)346.1H NMR(DMSO-d6)□8.2(s，1H)，7.1(s，1H)，6.55(s，1H)，6.4(s，1H)，3.01(m，2H)，2.51(m，4H)。
實(shí)施例19制備(5R)，(6Z)-6-(咪唑并[1.2-a]喹喔啉-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫代-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽咪唑并[1，2-a]喹喔啉-2-甲醛咪唑并[1，2-a]喹喔啉-2-甲醛根據(jù)Westwood及其合作者(J.Med.Chem.1998，31，1098-1115)的方法進(jìn)行制備。
步驟1(5R，6RS)-6-((RS)-乙酰氧基咪唑并[1，2-a]喹喔啉-2-基甲基)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸對硝基苯甲酯咪唑并[1，2-a]喹喔啉-2-甲醛(505mg)的無水乙腈(33mL)溶液室溫氮?dú)庀录尤氲組gBr2(1.1g)的無水乙腈(20mL)中，混合物攪拌10分鐘。加入(5R，6RS)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(931g)的無水THF(25mL)溶液后，混合物冷卻至-20℃，然后一次性加入三乙胺(0.8mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌4小時(shí)，并用4，4-二甲基氨基吡啶(58mg)和乙酸酐(0.44mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌16小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入10％的檸檬酸水溶液(200mL)，水層用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。有機(jī)層用水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用CH2Cl2-丙酮(50∶1)洗脫，獲得題列化合物，非對映體的混合物(78∶22，淡褐色泡沫無定形，1.0g，68.9％)。
1H NMR(CDCl3)□2.07(s，0.66H)，2.38(s，2.34H)，5.30(d，1H，J＝13.5Hz)，5.45(d，0.78H，J＝13.5Hz)，5.48(d，0.22H，J＝13.5Hz)，6.24(s，0.78H)，6.46(s，0.22H)，6.63(s，0.22H)，7.18(s，0.78H)，7.50(s，0.78H)，7.52(s，0.22H)，7.61(d，1.56H，J＝8.7Hz)，7.63(d 0.44H，J＝8.8Hz)，7.64-7.67(m，1H)，7.68-7.73(m，1H)，7.92-7.95(m，1H)，8.08(s，0.78H)，8.13-8.16(m，1H)，8.24(d，1.56H，J＝8.7Hz)，8.25(d，0.44H，J＝8.8Hz)，8.33 (s，0.22H)，9.05(s，0.78H)，9.09(s，0.22H)。
步驟2(5R)，(6Z)-6-(咪唑并[1.2-a]喹喔啉-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽(5R，6RS)-6-((RS)-乙酰氧基咪唑并[1，2-a]喹喔啉-2-基甲基)-6-溴-7-氧代-4-硫代-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-對硝基苯甲酯(951mg)和10％Pd-C(50％濕的，477mg)加入到THF(48mL)和0.5mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.5，48mL)的混合物中?；旌衔锸覝?00kPa下氫化4小時(shí)。反應(yīng)溶液過濾，Pd-C用水和正丁醇洗滌。分出水層，然后有機(jī)層用水萃取。合并后的水層濃縮至57g，經(jīng)過Diaion HP-21樹脂(60mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用5，10，15和20％的乙腈∶水溶液(每種60mL)洗脫。合并后的餾分在35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體，收率148mg(26.1％)，mp300℃(分解)。
1H NMR(D2O)□5.92(s，1H)，6.23(s，1H)，6.66(s，1H)，7.11-7.22(m，3H)，7.25(d，1H，J＝7.9Hz)，7.50(s，1H)，8.03(s，1H)；IR(KBr)3413，1748，1592，1553cm-1；Imax(H2O)340，293，237，218nm。
實(shí)施例20制備(5R)，(6Z)-6-(5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c] [1，4]噁嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫代-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟1嗎啉-3-酮嗎啉-3-酮可根據(jù)USP5，349，045的方法制備。
步驟2嗎啉-3-硫酮嗎啉-3-酮(4.7g)和Lawesson試劑(10.3g)的無水THF(94mL)混合物加熱至回流1.5小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，真空分出反應(yīng)溶劑。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法并用CHCl3-甲醇(50∶1)洗脫獲得黃色固體。粗產(chǎn)物由己烷-乙酸乙酯中重結(jié)晶得到題列化合物(4.0g，72.2％)，黃色粉末。
1H NMR(CDCl3)δ3.45(t，2H，J＝5.1Hz)，3.91(t，2H，J＝5.1Hz)，4.55(s，2H)。
步驟35-甲硫基-3，6-二氫-2H-[1，4]噁嗪嗎啉-3-硫酮(4.7g)和碘甲烷(13mL)的無水CH2Cl2(140mL)混合物室溫?cái)嚢?5小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，固體用CH2Cl2洗滌。所獲得的固體用50％K2CO3水溶液(150mL)溶解，水層用CH2Cl2(8×100mL)萃取。合并后的CH2Cl2層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮，獲得題列化合物，淺黃色油(3.6g，67.8％)。
1H NMR(CDCl3)δ2.32(s，3H)，3.71-3.74(m，4H)，4.14-4.15(m，2H)。
步驟43-亞氨基嗎啉鹽酸鹽5-甲硫基-3，6-二氫-2H-[1，4]噁嗪(3.6g)和氯化銨(1.5g)的無水乙醇(136mL)混合物加熱至回流1小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫。真空分出反應(yīng)溶劑，獲得題列化合物，淡褐色固體(3.6g，97.7％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ3.34(m，2H)，3.86(t，2H，J＝5.2Hz)，4.47(s，2H)。
步驟55，6-二氫-8H-咪唑并[2.1-c] [1.4]噁嗪-2-甲醛(9)和5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c] [1，4]噁嗪-3-甲醛2-溴-3-羥基丙烯醛(4.1g)，對甲苯磺酸一水合物(52mg)和2-丙醇(5.2mL)的環(huán)己烷(42mL)混合物共沸直到蒸汽溫度升至80℃。反應(yīng)混合物減壓濃縮。殘余物溶解于無水乙醇(50mL)中。室溫加入3-亞氨基嗎啉鹽酸鹽的(3.4g)無水乙醇(200mL)溶液和28％甲醇鈉(4.8g)的甲醇溶液的混合物。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后真空分出反應(yīng)溶劑。殘余物溶解于氯仿(125mL)中，加入三乙胺(3.5mL)，然后反應(yīng)混合物加熱至回流2小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后減壓濃縮。殘余物溶解于二氯甲烷(300mL)中，并用50％K2CO3水溶液(2×100mL)洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，并用CHCl3-丙酮(4∶1)洗脫獲得題列化合物(淺橙色固體，1.4g，36.3％)和另一種位置異構(gòu)體。(淺橙色固體，609mg，16.1％)。
所要的產(chǎn)物1H NMR(CDCl3)δ4.08-4.15(m，4H)，4.88(s，2H)，7.58(s，1H)，9.85(s，1H)。
不想要的位置異構(gòu)體1H NMR(CDCl3)δ4.06(t，2H，J＝5.2Hz)，4.40(t，2H，J＝5.2Hz)，4.90(s，2H)，7.75(s，1H)，9.72(s，1H)。
步驟6(5R)，(6Z)-6-(5，6-二氫-8H-咪唑并[2.1-c][1.4]噁嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫代-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噁嗪-2-甲醛(1.2g)的無水乙腈(66mL)溶液室溫氮?dú)庀录尤氲組gBr2(3.6g)的無水乙腈(66mL)溶液中，然后混合物攪拌10分鐘。加入(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯(3.4g)的無水THF(132mL)溶液，混合物冷卻至-20℃，然后一次性加入三乙胺(2.8mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌4小時(shí)并用4-二甲基氨基吡啶(100mg)和乙酸酐(1.5mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌18小時(shí)。10％檸檬酸水溶液(1L)加入到該反應(yīng)混合物中，水層用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。合并后的有機(jī)層用水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮，獲得粗的(5R)-6-[乙酰氧基-(5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噁嗪-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸對硝基苯甲酯，褐色無定形固體。
向(5R)-6-[乙酰氧基-(5，6-二氫-8H-咪唑并[2，1-c][1，4]噁嗪-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸對硝基苯甲酯的THF(72mL)溶液中迅速地加入新鮮活化的鋅粉(14g)和0.5mol/L的磷酸鹽緩沖液(pH6.5，72mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?.5小時(shí)。反應(yīng)溶液用硅藻土墊片過濾，該墊片用水(170mL)和正丁醇(170mL)洗滌。分出水層，然后有機(jī)層用0.5mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.5，2×50mL)萃取。合并后的水層濃縮至90g，加入1mol/L NaOH將pH調(diào)整至7.5，經(jīng)過Diaion HP-21樹脂(120mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用5％乙腈水溶液洗脫。合并后的活性餾分35℃高真空濃縮，冷凍干燥得到題列化合物，黃色無定形固體(756mg，29.1％)。
Mp 130℃(dec)；1H NMR(DMSO-d6)δ3.98-4.01(m，2H)4.04-4.07(m，2H)，4.74(AB，2H，J＝15.3，22.9Hz)，6.40(d，1H，J＝0.8Hz)，6.55(s，1H)，6.95(d，1H，J＝0.6Hz)，7.54(s，1H)；lR(KBr)3412，1741，1672，1592，1549 cm-1；λmax(H2O)304nm。
實(shí)施例21制備(6R)，(6Z)-6-(5，6-二氫-4H-吡咯并[1，2-b]吡唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫代-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟15，6-二氫-4H-吡咯并[1，2-b]吡唑-2-甲酸乙酯根據(jù)Ranganathan及其合作者(Indian J.Chem.1991，30B，169-175)相同的方法制備題列化合物。
步驟25，6-二氫-4H-吡咯并[1，2-b]吡唑-2-基)甲醇MeOH(2.73mL)室溫氮?dú)庀录尤氲絃iBH4(1.63g)的THF(180mL)溶液中，然后5，6-二氫-4H-吡咯并[1，2-b]吡唑-2-甲酸乙酯(8.11g)加入到該懸浮液中，在40℃攪拌2小時(shí)。混合物用pH1的1mol/L的HCl停止并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。向溶液中加入固體K2CO3到將pH調(diào)整至8，混合物用AcOEt萃取。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓濃縮獲得題列化合物，褐色晶體(4.87g，78％)。
1H NMR(CDCl3)δ2.44(t，1H，J＝5.8Hz)，2.54-2.62(m，2H)，2.87(t，2H，J＝7.4Hz)，4.10(t，2H，J＝7.2Hz)，4.63(d，2H，J＝5.8Hz)，5.96(s，1H)。
步驟35，6-二氫-4H-吡咯并[1，2-b]吡唑-2-甲醛MnO2(活化的)(24.4g)加入到(5，6-二氫-4H-吡咯并[1，2-b]吡唑-2-基)甲醇(4.87g)的CHCl3(350mL)溶液中并在氮?dú)庀禄亓?小時(shí)。反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用正己烷-AcOEt(1/1-1/2)洗脫。獲得題列化合物，黃色油(4.35g，91％)。
1H NMR(CDCl3)δ2.63-2.71(m，2H)，2.95(t，2H，J＝7.4Hz)，4.22(t，2H，J＝7.4Hz)，6.52(s，1H)，9.89(s，1H)。
步驟4(5R)，(6Z)-6-(5，6-二氫-4H-吡咯并[1.2-b]吡唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽室溫氮?dú)庀?，6-二氫-4H-吡咯并[1，2-b]吡唑-2-甲醛(1.36g)加入到無水MgBr2(5.52g)的無水乙腈(148mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(cont.97％)(3.97g)的無水THF溶液(148mL)加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入Et3N(4.18mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌4小時(shí)并用乙酸酐(1.89mL)和DMAP(123mg)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌14小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、水和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。
殘余物溶解于THF(106mL)和乙腈(49mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(22.5g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，155mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?.5小時(shí)。反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層冷卻至3℃，加入1M NaOH將pH調(diào)整至8.0?；旌衔?5℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(79mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用H2O-MeCN(1/0-9/1)洗脫。合并后的餾分在35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(848mg，29％，pH7.1)。
Mp 190℃(dec)；1H NMR(D2O)δ2.49(m，2H)，2.78(t，2H，J＝7.4Hz)，4.02(t，2H，J＝7.4Hz)，6.01(s，1H)，6.29(s，1H)，6.90(s，2H)。
實(shí)施例22制備(5R)(6Z)-7-氧代-6-(4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基亞甲基)-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟1四氫吡啶并[1，2-c][1，2，3] 噁二唑酮0℃氮?dú)庀?，濃HCl(1.96mL)和NaNO2(2.2g)加入到DL-哌啶酸(3.04g)的H2O(21mL)溶液中并攪拌1小時(shí)。該溶液用CH2Cl2萃取，有機(jī)層用鹽水洗滌?；旌衔锝?jīng)Na2SO4干燥并減壓濃縮得到粗的(2RS)-1-亞硝基哌啶-2-甲酸，淺黃色晶體。
0℃氮?dú)庀氯宜狒?1.93g)加入到粗(2RS)-1-亞硝基哌啶-2-甲酸的THF(92mL)溶液中并在0℃攪拌5小時(shí)，室溫?cái)嚢?小時(shí)。該溶液減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用正己烷-AcOEt(1/1-0/1)洗脫。獲得題列化合物，無色晶體(1.10g，33％)。
1H NMR(CDCl3)δ1.93-1.99(m，2H)，2.08-2.15(m，2H)，2.65(t，2H，J＝6.5Hz)，4.26(t，2H，J＝6.1Hz)。
步驟24，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]吡啶-2-甲酸乙酯氮?dú)庀?，丙炔酸乙?804mg)加入到四氫吡啶并[1，2-c][1，2，3]噁二唑酮(1.04g)的鄰二甲苯(15mL)溶液中并回流16小時(shí)。該溶液減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用正己烷-AcOEt(2/1-1/1)洗脫。獲得題列化合物，黃色的油(871mg，65％)，和4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲酸乙酯，黃色的油(345mg，26％)。
1H NMR(CDCl3)δ1.39(t，3H，J＝7.1Hz)，1.84-1.91(m，2H)，2.02-2.09(m，2H)，2.82(t，2H，J＝6.4Hz)，4.22(t，2H，J＝6.2Hz)，4.39(q，2H，J＝7.1Hz)，6.53(s，1H)。
步驟3(4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)甲醇室溫氮?dú)庀翸eOH(0.29mL)加入到LiBH4(cont.90％)(174mg)的THF(19mL)溶液中，然后4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]吡啶-2-甲酸乙酯(862mg)加入到該懸浮液中，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)，40℃攪拌1.5小時(shí)?；旌衔镉胮H1的1mol/L的HCl停止并室溫?cái)嚢?小時(shí)。固體K2CO3加入到該溶液中將pH調(diào)整至8，混合物用AcOEt萃取。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮題列化合物，淺黃色油(691mg，95％)。
1H NMR(CDCl3)δ1.80-1.87(m，2H)，1.98-2.05(m，2H)，2.77(t，2H，J＝6.4Hz)，2.81-2.84(br，1H)，4.09(t，2H，J＝6.1Hz)，4.62(d，2H，J＝5.3Hz)，5.96(s，1H)。
步驟44，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]吡啶-2-甲醛MnO2(活化的)(3.36g)氮?dú)庀录尤氲?4，5，6，7四氫吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)甲醇(673mg)的CHCl3(44mL)溶液中并回流1小時(shí)。反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用正己烷-AcOEt(2/1-1/2)洗脫。獲得題列化合物，淺黃色油(510mg，77％)。
1H NMR(CDCl3)δ1.90(m，2H)，2.10(m，2H)，2.84(t，2H，J＝6.4Hz)，4.23(t，2H，J＝6.2Hz)，6.52(s，1H)，9.92(s，1H)。
步驟5(5R)(6Z)-7-氧代-6-(4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基亞甲基)-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽室溫氮?dú)庀拢?，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]吡啶-2-甲醛(483mg)加入到無水MgBr2(1.81g)的無水乙腈(48mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(cont.97％)(1.28g)的無水THF溶液(48mL)加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入Et3N(1.35mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并用乙酸酐(0.61mL)和DMAP(40mg)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌16小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、水和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。
殘余物溶解于THF(35mL)和丙酮(16mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(7.43g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，51mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?.5小時(shí)。反應(yīng)混合物通過硅藻土墊片過濾。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層冷卻至3℃，加入1M NaOH將pH調(diào)整至8.0?；旌衔?5℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(105mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用H2O-MeCN(1/0-85/15)洗脫。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(427mg，41％，pH7.7)。
Mp 190℃(dec)；1H NMR(D2O)δ1.67-1.71(m，2H)，1.85-1.89(m，2H)，2.64(t，2H，J＝6.3Hz)，3.97(t，2H，J＝6.1Hz)，5.97(s，1H)，6.25(s，1H)，6.85(s，1H)，6.88(s，1H)。
實(shí)施例23制備(5R)，(6Z)-6-(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽步驟15-甲氧基-1-甲基-3，6-二氫-1H-吡嗪-2-酮根據(jù)S.Rajappa和B.G.Advani(Tetrahedron.1973，29，1299-1302)相同的方法制備題列化合物。
步驟25-氨基-1-甲基-3，6-二氫-1H-吡嗪-2-酮5-甲氧基-1-甲基-3，6-二氫-1H-吡嗪-2-酮(2.3g)和氯化銨(936mg)的無水乙醇(32mL)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后回流2小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并減壓蒸發(fā)。殘余物用氯仿在室溫研制30分鐘。沉淀過濾并真空干燥。獲得5-氨基-1-甲基-3，6-二氫-1H-吡嗪-2-酮鹽酸鹽，淡褐色粉末(1.7g，66％)。
5-氨基-1-甲基-3，6-二氫-1H-吡嗪-2-酮鹽酸鹽(662mg)的甲醇(10mL)溶液0℃加入10％碳酸鉀水溶液，然后在0℃攪拌40分鐘?；旌衔餃p壓下濃縮。在室溫殘余物用氯仿(18mL)和甲醇(2mL)研制30分鐘。沉淀過濾并真空干燥。獲得淡褐色粉末化合物(515mg，定量的)。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.88(s，3H)，3.94(s，2H)，4.42(s，2H)。
步驟37-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲醛和7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-3-甲醛2-溴-3-異丙氧基丙烯醛(1.3g)的無水乙腈(60mL)溶液室溫加入到5-氨基-1-甲基-3，6-二氫-1H-吡嗪-2-酮(782mg)的無水乙腈(60mL)溶液中。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?0小時(shí)，加入三乙胺(0.95mL)，然后回流2小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后減壓蒸發(fā)。殘余物溶解于氯仿(10mL)中，并用50％K2CO3水溶液(10mL)洗滌。水層用萃取氯仿。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法并用CHCl3-MeOH(95∶5)洗脫獲得題列化合物，7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲醛，淺黃色固體(541mg，49.1％)和它的位置異構(gòu)體7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫-咪唑并[1，2-a]吡嗪-3-甲醛，淺黃色固體(128mg，11.6％)。
7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲醛1HNMR(CDCl3)δ3.17(s，3H)，4.68(s，2H)，4.78(s，2H)，7.66(s，1H)，9.83(s，1H)。
7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫-咪唑并[1，2-a]吡嗪-3-甲醛1HNMR(CDCl3)δ3.16(s，3H)，4.70(s，2H)，5.03(s，2H)，7.82(s，1H)，9.73(s，1H)。
步驟4(5R，6RS)-6-[乙酰氧基(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸4-硝基苯甲酯室溫氮?dú)庀?-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲醛(319mg)加入到無水MgBr2(786mg)的無水乙腈(32mL)溶液中。
(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基-苯甲酯(687mg)的無水THF溶液(32mL)溶液加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入三乙胺(0.60mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌3小時(shí)，并用4-二甲基氨基吡啶(44mg)和乙酸酐(0.35mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌20小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ズ虷2O稀釋。分出有機(jī)層后，水層用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層并用5％檸檬酸水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用氯仿洗脫。獲得題列化合物，非對映體的混合物(黃色無定形固體；410mg，38％)。
1H NMR(δ，CDCl3)2.03(s，0.7×3H)，2.09(s，0.3×3H)，3.15(s，3H)，4.59-4.62(m，2H)，4.66(s，0.3×2H)，4.67(s，0.7×2H)，5.28(d，1H，J＝13.5Hz)，5.43(d，0.3×1H，J＝13.5Hz)，5.45(d，0.7×1H，J＝13.5Hz)，6.07(s，0.3×1H)，6.28(s，0.7×1H)，6.32(s，0.7×1H)，6.83(s，0.3×1H)，6.86(s，0.3×1H)，7.10(s，0.7×1H)，7.44(s，0.3×1H)，7.47(s，0.7×1H)，7.60(d，0.7×2H，J＝8.6Hz)，7.61(d，0.3×2H，J＝8.6Hz)，8.24(d，2H，J＝8.6Hz)。
步驟5(5R)，(6Z)-6-(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽和(5R)，(6E)-6-(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽(5R，6RS)-6-[乙酰氧基-(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基-苯甲酯(481mg)溶解于THF(6.7mL)和乙腈(3.1mL)中。新鮮活化的鋅粉(1.92g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，9.9mL)加入到該混合物中。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)溶液用乙酸乙酯混合并用硅藻土墊片過濾。該墊片用水洗滌并分出水層。水層冷卻至3℃，加入1M的NaOH將pH調(diào)整至8.0。混合物35℃高真空下濃縮，并冷凍干燥。殘余物通過制備HPLC(Inertsil ODS-2，GLScience Inc.，10×250mm，0.05mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.1)∶CH3CN＝93∶7，4.0mL/min.)分離。分離出的餾分(5R)，(6Z)-6-(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽和(5R)，(6E)-6-(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽分別冷卻至3℃，加入1MNaOH將pH調(diào)整至8.0。每種溶液在35℃高真空下濃縮。每種濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(60mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫然，然后用5％乙腈-水洗脫。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥分別獲得題列化合物(5R)，(6Z)-6-(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽，黃色無定形固體(125mg，44.4％，Mp115-117℃(分解)和化合物(5R)，(6E)-6-(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽，黃色無定形固體(19mg，6.7％)。
化合物(5R)，(6Z)-6-(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽1HNMR(δ，D2O)2.99(s，3H)，4.54(s，2H)，4.66(s，2H)，6.38(s，1H)，6.85(s，1H)，6.90(s1H)，7.30(s，1H)。
化合物(5R)，(6E)-6-(7-甲基-6-氧代-5，6，7，8-四氫-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽
1HNMR(δ，D2O)2.94(s，3H)，4.45(s，2H)，4.56(s，2H)，6.22(s，1H)，6.48(s，1H)，6.94(s，1H)，7.69(s1H)。
實(shí)施例24制備(5R)(6Z)-6-(6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噻嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟1(3R)-硫代嗎啉-3-甲酸根據(jù)Shiraiwa及其合作者(Biosci.Biotechnol.Biochem.1998，62，2382-2387)相同的方法制備題列化合物。
步驟23-氧代-3a，4，6，7-四氫-3H-2-氧雜-5-硫雜-1-氮雜-7a-azonionidenide0℃氮?dú)庀?，NaNO2(3.14g)加入到(3R)-硫代嗎啉-3-甲酸(4.96g)的1mol/L的HCl(33.7mL)溶液中，并攪拌0.5小時(shí)。該溶液用CHCl3(5次)萃取，有機(jī)層用鹽水洗滌?；旌衔锿ㄟ^MgSO4干燥并減壓濃縮得到粗的(3R)-4-亞硝基硫代嗎啉-3-甲酸，淺黃色結(jié)晶。
0℃氮?dú)庀氯宜狒?7.07g)加入到粗的(3R)-4-亞硝基硫代嗎啉-3-甲酸的THF(169mL)溶液中并在0℃攪拌3小時(shí)，在室溫?cái)嚢?7小時(shí)。該溶液減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用正己烷-AcOEt(1/1-0/1)洗脫。獲得題列化合物，淺褐色結(jié)晶(3.41g，64％)。
1H NMR(CDCl3)δ3.15(t，2H，J＝5.5Hz)，3.71(s，2H)，4.54(t，2H，J＝5.5Hz)。
步驟36.7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c] [1，4]噻嗪-2-甲酸乙酯氮?dú)庀卤菜嵋阴?2.33g)加入到3-氧代-3a，4，6，7-四氫-3H-2-氧雜-5-硫雜-1-氮雜7a-azonioindenide(3.41g)的鄰二甲苯(72mL)溶液中并回流15小時(shí)。該溶液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用正己烷-AcOEt(2/1-1/1)洗脫。獲得題列化合物，黃色的油(3.13g，68％)，和另一種不需要的位置異構(gòu)體6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噻嗪-3-甲酸乙酯，黃色的油(556mg，12％)。
1H NMR(CDCl3)δ1.31(t，3H，J＝7.1Hz)，3.04(t，2H J＝5.7Hz)，3.81(s，2H)，4.32(q，2H，J＝7.1Hz)，4.40(t，2H，J＝5.7Hz)，6.54(s，1H)。
步驟4(6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c] [1，4]噻嗪-2-基)甲醇室溫氮?dú)庀翷iBH4(cont.90％)(536mg)和MeOH(0.9mL)加入到6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噻嗪-2-甲酸乙酯(3.13g)的THF(59mL)溶液中并在40℃攪拌3小時(shí)。混合物用pH1的1mol/L的HCl停止，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。向該溶液中加入固體K2CO3，將pH調(diào)整至8，混合物用AcOEt萃取。有機(jī)層干燥(K2CO3)并過濾。濾液減壓下濃縮獲得題列化合物，淺黃色油(2.51g，定量的)。
1H NMR(CDCl3)δ2.58(br，1H)，3.07(t，2H，J＝5.7Hz)，3.84(s，2H)，4.33(t，2H，J＝5.7Hz)，4.63(d，2H，J＝3.9Hz)，6.05(s，1H)。
步驟56，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噻嗪-2-甲醛MnO2(活化的)(11.46g)加入到(6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噻嗪-2-基)甲醇(2.31g)的CHCl3(135mL)溶液中并在氮?dú)庀禄亓?小時(shí)。反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾。濾液減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用正己烷-AcOEt(1/1)洗脫。獲得題列化合物，淺黃色結(jié)晶(1.78g，78％)。
1H NMR(CDCl3)δ3.15(t，2H，J＝5.8Hz)，3.90(s，2H)，4.48(t，2H，J＝5.8Hz)，6.58(s，1H)，9.92(s，1H)。
步驟6(5R)(6Z)-6-(6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c] [1，4]噻嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽室溫氮?dú)庀?，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噻嗪-2-甲醛(841mg)加入到無水MgBr2(1.88g)的無水乙腈(39mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸4-硝基苯甲酯(cont.99.7％)(1.93g)的無水THF溶液(39mL)加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入Et3N(2.79mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌3小時(shí)并用乙酸酐(0.94mL)和DMAP(61mg)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌17小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂?％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、水和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。
殘余物溶解于THF(83mL)和乙腈(39mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(7.72g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，122mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?.5小時(shí)。反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層冷卻至3℃，加入1M NaOH將pH調(diào)整至8.0?；旌衔?5℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(150mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用H2O-MeCN(1/0-85/15)洗脫。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(371mg，22％，pH8.0)。
Mp 190℃(dec)；1H NMR(D2O)δ3.03(t，2H，J＝5.7Hz)，3.75(s，2H)，4.22(t，2H，J＝5.7Hz)，6.07(s，1H)，6.27(s，1H)，6.86(s，1H)，6.89(s，1H)。
實(shí)施例25制備(5R)(6Z)-7-氧代-6-(4H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-基亞甲基)-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟13-氧代-3a，4-二氫-3H，6H-2-氧雜-5-硫雜-1-氮雜6a-azonio-3a-pentalenide0℃氮?dú)庀?，濃HCl(15mL)和NaNO2(16.6g)加入到L-硫代脯氨酸(24.3g)的H2O(166mL)溶液中并攪拌2小時(shí)。該溶液用CH2Cl2萃取，有機(jī)層通過MgSO4干燥并減壓濃縮得到粗的N-亞硝基衍生物，黃色固體。
0℃氮?dú)庀氯宜狒?5.0mL)加入到粗的N-亞硝基硫代脯氨酸的THF(350mL)溶液中并在0℃攪拌5小時(shí)。該溶液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用正己烷-AcOEt(1∶1)洗脫。獲得題列化合物，淡褐色固體(4.0g，15.1％)。
1H NMR(CDCl3)δ4.04(t，2H，J＝1.7Hz)，5.40(t，2H，J＝1.7Hz)。
步驟24H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-甲酸乙酯丙炔酸乙酯(3.1mL)氮?dú)庀录尤氲?-氧代-3a，4-二氫-3H，6H-2-氧雜-5-硫雜-1-氮雜-6a-azonio-3a-pentalenide(4.0g)的鄰二甲苯(130mL)溶液中并回流19小時(shí)。該溶液冷卻至室溫并減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用正己烷-AcOEt(4∶1)洗脫。獲得題列化合物，黃色固體(2.7g，49.3％)，和4H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-甲酸乙酯，淺黃色結(jié)晶(1.2g，21.7％)。
1H NMR(CDCl3)δ1.40(t，3H，J＝7.1Hz)，4.11(d，2H，J＝2.1Hz)，4.40(q，2H，J＝7.1Hz)，5.24(t，2H，J＝1.6Hz)，6.61(s，1H)。
步驟3(4H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-基)甲醇室溫氮?dú)庀翷iBH4(cont.90％)(459mg)加入到4H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-甲酸乙酯(2.5g)和MeOH(0.77mL)的乙醚(126mL)溶液中，然后回流1.5小時(shí)?；旌衔镉?mol/L的HCl(25mL)停止，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)?；旌衔镉蔑柡吞妓釟溻c溶液中和并分離。水層用二氯甲烷(10×25mL)萃取。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用AcOEt洗脫。獲得題列化合物，淺黃色固體(1.7g，87.9％)。
1H NMR(CDCl3)δ2.95(t，1H，J＝5.6Hz)，4.07(s，2H)，4.62(d，2H，J＝5.1Hz)，5.13(t，1H，J＝1.6Hz)，6.04(s，1H)。
步驟44H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-甲醛二甲基亞砜(2.2mL)的無水二氯甲烷(8mL)溶液-78℃逐滴地加入到草酰氯(2.0mL)的無水二氯甲烷(110mL)溶液中。反應(yīng)混合物在相同的溫度下攪拌15分鐘。(4H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-基)甲醇(1.7g)的無水二氯甲烷(40mL)溶液-78℃逐滴地加入到該反應(yīng)混合物中，再繼續(xù)攪拌15分鐘。反應(yīng)混合物升至-45℃并攪拌1小時(shí)。逐滴地加入三乙胺(11.3mL)，反應(yīng)混合物升至0℃。20分鐘后，加入飽和氯化銨溶液(50mL)和水(100mL)并分離。水層用AcOEt(3×150mL)萃取。合并后的有機(jī)層用水(200mL)和鹽水(200mL)洗滌，干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用己烷-AcOEt(1∶1)洗脫。獲得題列化合物，黃色固體(1.7g，定量的)。
1H NMR(CDCl3)δ4.13(s，2H)，5.26(d，2H，J＝1.4Hz)，6.59(s，1H)，9.90(s，1H)。
步驟5(5R)(6Z)7-氧代-6-(4H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-基亞甲基)-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽4H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-甲醛(1.7g)的無水乙腈(92mL)溶液室溫氮?dú)庀录尤氲組gBr2(5.0g)的無水乙腈(92mL)溶液中，然后混合物攪拌10分鐘。加入(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸對硝基苯甲酯(4.3g)的無水THF(184mL)溶液，混合物冷卻至-20℃，然后一次性加入三乙胺(7.4mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌3小時(shí)并用4-二甲基氨基吡啶(138mg)和乙酸酐(2.1mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。1mol/L檸檬酸水溶液(1000mL)加入到該反應(yīng)混合物中，水層用乙酸乙酯(3×400mL)萃取。合并后的有機(jī)層用水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮，獲得粗的(5R)-6-[乙酰氧基-(4H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸對硝基苯甲酯，褐色無定形固體。
迅速地向粗的(5R)-6-[乙酰氧基-(4H-5-硫雜-1，6a-二氮并環(huán)戊二烯-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸對硝基苯甲酯的THF(100mL)溶液中加入新鮮活化的鋅粉(19.3g)和0.5mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.5，100mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?.5小時(shí)。反應(yīng)溶液用硅藻土墊片過濾，該墊片用水(200mL)和正丁醇(200mL)洗滌。水層分離，然后有機(jī)層用0.5mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.5，2×50mL)萃取。合并后的水層濃縮至90g，加入1mol/L的NaOH將pH調(diào)整至8.0并經(jīng)過Diaion HP-21樹脂(180mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用15％乙腈水溶液洗脫。合并后的活性餾分在35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(634mg，17.4％，pH7.25)。
Mp 150℃(dec)；1H NMR(D2O)δ4.00(s，2H)，5.09(s，2H)，6.14(s，1H)，6.36(s，1H)，6.91(s，1H)，6.92(s，1H)；IR(KBr)3381，1752，1683，1600，1558cm-1；λmax(H2O)292，196nm。
實(shí)施例26制備(5R)(6Z)-6-(7H-咪唑并[1.2-c]噻唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟1噻唑烷-4-酮根據(jù)MarvinM.和AllenR.Harkness.(Tetrahedron Letters.1994，35，6971-6974)相同的方法制備題列化合物。
步驟2噻唑烷-4-硫酮Lawesson試劑(33.5g)加入到噻唑烷-4-酮(14.2g)的無水THF(690mL)溶液中，反應(yīng)混合物回流2小時(shí)?；旌衔锢鋮s至室溫并減壓蒸發(fā)。殘余物室溫用CHCl3∶MeOH＝7∶3溶液(65mL)研制30分鐘。沉淀過濾并用CHCl3∶正己烷＝7∶3溶液(15mL)洗滌并真空干燥。獲得噻唑烷-4-硫酮，淺黃色粉末(10.7g，65％)。
1H NMR(CDCl3)δ4.08(s，2H)，4.70(s，2H)。
步驟34-甲硫基-2，5-二氫噻唑碘甲烷(28.4g)加入到沸騰的噻唑烷-4-硫酮(9.5g)的氯仿(400mL)溶液中，反應(yīng)混合物回流1.5小時(shí)。向反應(yīng)混合物中30-60分鐘的間隔分五份再加入碘甲烷(56.8g)。再回流1小時(shí)后，反應(yīng)混合物冷卻至室溫。然后加入10％碳酸鉀水溶液(200mL)并在室溫?cái)嚢?5分鐘。分出有機(jī)層后，水層用CHCl3(100mL×3)萃取。有機(jī)層合并，干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮并真空干燥。干燥后，獲得題列化合物，褐色的油(11.0g，定量的)。
1H NMR(CDCl3)δ2.51(s，3H)，3.91(t，2H，J＝3.5Hz)，5.21(t，2H，J＝3.5Hz)。
步驟4噻唑烷-4-亞基胺4-甲硫基-2，5-二氫噻唑(10.7g)和氯化銨(6.4g)的無水乙醇(400mL)混合物回流27.5小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并減壓蒸發(fā)。殘余物溶解于氯仿(300mL)和10％碳酸鉀水溶液(200mL)中，然后室溫?cái)嚢?0分鐘。分出有機(jī)層后，水層用氯仿(100mL×5)萃取。有機(jī)層合并，干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮并真空干燥獲得粗的噻唑烷-4-亞基胺(5.5g)，褐色固體，包括副產(chǎn)物，是乙氧基衍生物，和起始物質(zhì)4-甲硫基-2，5-二氫噻唑。這三種化合物的比例通過1H-NMR測定分別為61∶34∶5。
1H NMR(CDCl3)δ3.75(t，2H，J＝2.8Hz)，4.97(t，2H，J＝2.9Hz)。
步驟57H-咪唑并[1，2-c]噻唑-2-甲醛2-溴-3-異丙氧基丙烯醛(6.9g)的無水乙腈(326mL)溶液室溫加入到粗噻唑烷-4-亞基胺(3.3g)的無水乙腈(326mL)溶液中。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?9.5小時(shí)，加入三乙胺(4.9mL)，然后回流2小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后減壓蒸發(fā)。殘余物溶解于二氯甲烷(300mL)中并用50％碳酸鉀水溶液(20g)洗滌。過濾并分離后，水層用二氯甲烷(50mL×4)萃取。有機(jī)層合并，干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用CHCl3-MeOH(100∶3)洗脫獲得粗的7H-咪唑并[1，2-c]噻唑-2-甲醛，褐色固體。
該粗產(chǎn)物在0℃由CHCl3-正己烷(1St∶30∶5，2nd∶30∶60)重結(jié)晶兩次，得到所需要的醛，淺褐色結(jié)晶(收率1.84g，15％)。
1H NMR(CDCl3)δ4.09(t，2H，J＝1.3Hz)，5.08(t，2H，J＝1.2Hz)，7.63(s，1H)，9.81(s，1H)。
步驟6(5R)(6Z)-6-(7H-咪唑并[1，2-c]噻唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽
7H-咪唑并[1，2-c]噻唑-2-甲醛(841mg)室溫氮?dú)庀录尤氲綗o水MgBr2(2.93g)的無水乙腈(116mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(cont.99.7％)(2.51g)的無水THF溶液(116mL)加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入Et3N(2.20mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌4小時(shí)并用乙酸酐(1.26mL)和DMAP(160mg)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、水和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。
殘余物溶解于THF(53mL)和乙腈(25mL)中。新鮮活化的鋅粉(15.1g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，78mL)加入到該混合物中。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?.5小時(shí)。反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層冷卻至3℃，加入1M NaOH將pH調(diào)整至8.0。混合物35℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(321mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用H2O-MeCN(1/0-9/1)洗脫。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(1.1g，51％，pH7.5)。
Mp 145℃(dec)；1H NMR(D2O)δ3.85(s，2H)，4.88(s，2H)，6.32(s，1H)，6.78(s，1H)，6.85(s，1H)，7.27(s，1H)。
實(shí)施例27制備(5R，6Z)-7-氧代-6-[(4-氧代-6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4] 噁嗪-2-基)亞甲基]-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸.
步驟11-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-1H-吡唑-3，5-二甲酸二乙酯氮?dú)庀?，?，5-吡唑二甲酸二乙酯(2.17g，10mmol)的乙腈(10ml)溶液中加入碳酸鉀(2.07g，15mmol)，和2-溴乙氧基叔丁基二甲基硅烷(2.90g，12mmol)?；旌衔锘亓鲾嚢?8小時(shí)。然后冷卻至室溫，用乙酸乙酯(20ml)稀釋，并通過酸式硅酸鎂過濾。過濾器墊片用2×10ml乙酸乙酯洗脫，合并后的濾液蒸發(fā)。殘余物溶解于己烷中，通過硅膠(70g)柱。用己烷(100ml)洗脫后，柱子用乙酸乙酯洗脫。乙酸乙酯洗脫液蒸發(fā)得到3.71g無色的油；MS m/e 371(MH+)。
步驟21-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-1H-吡唑-3，5-二甲醇0℃氮?dú)庀?，?-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-1H-吡唑-3，5-二甲酸二乙酯(0.74g，2mmol)的二氯甲烷(8ml)溶液中加入12ml的1.0M氫化二異丁基鋁的二氯甲烷溶液。0℃攪拌0.5小時(shí)后，混合物升至室溫0.5小時(shí)。然后用15ml飽和氯化銨溶液停止并用乙酸乙酯萃取。有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)得到0.44g白色固體；mp82-83℃；MS m/e 287(MH+)。
步驟31-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-1H-吡唑-3，5-二甲醛向攪拌的1-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-1H-吡唑-3，5-二甲醇(1.18g，4mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入4-甲基嗎啉-N-氧化物(2.89g，24mmol)和分子篩4A(4g)。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?0分鐘，然后用過鐐酸四丙基銨(0.15g，0.4mmol)處理。繼續(xù)攪拌2小時(shí)。二氯甲烷溶液濃縮，并用乙醚(40ml)稀釋。混合物通過硅膠(40g)墊片過濾，過濾器墊片用2×20ml乙醚洗脫。合并后的洗脫液用1N HCl和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)得到0.79g白色固體；mp63-64℃；MSm/e 283(MH+)。
步驟44-氧代-6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噁嗪-2-甲醛0℃向1-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-1H-吡唑-3，5-二甲醛(1.02g，6.07mmol)的THF(30ml)溶液中加入6.68ml的1.0M氟化四丁基銨的THF溶液。攪拌1小時(shí)后，混合物用10ml的飽和氯化銨溶液處理，并用乙酸乙酯萃取。有機(jī)溶液用鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，通過酸式硅酸鎂過濾并蒸發(fā)。粗的膠體用己烷洗滌，真空干燥，然后溶解于二氯甲烷(20ml)中。向該溶液中加入4-甲基嗎啉-N-氧化物(2.89g，24mmol)和分子篩4A(6g)。混合物室溫?cái)嚢?0分鐘，然后用用過鐐酸四丙基銨(0.11g，0.3mmol)處理。繼續(xù)攪拌2小時(shí)。該二氯甲烷溶液濃縮并用乙酸乙酯(40ml)稀釋?；旌衔锿ㄟ^硅膠(40g)墊片過濾，過濾器墊片用2×20ml乙酸乙酯洗脫。合并后的洗脫液用1N HCl和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到0.30g白色固體；mp135-136℃；MS m/e167(MH+)。
步驟5(5R)-6-[(乙酰氧基)(4-氧代-6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噁嗪-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯室溫氮?dú)庀孪騇gBr2(0.46g，2.52mmol)的乙腈溶液(13ml)加入4-氧代-6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噁嗪-2-甲醛(0.14g，0.84mmol)，同時(shí)攪拌。然后加入(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(0.32g，0.84mmole)的THF(13ml)溶液，混合物冷卻至-20℃。加入三乙胺(0.35ml，2.52mmol)，混合物-20℃黑暗中攪拌4小時(shí)。然后用乙酸酐(0.2ml，2.0mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(12mg，0.1mmol)處理，在0℃維持18小時(shí)。混合物濃縮，殘余物溶解于乙酸乙酯中。乙酸乙酯溶液用5％檸檬酸，飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過硅膠(EtOAc-CH2Cl2/1∶5)色譜法得到0.27g的灰白色固體；mp107-110℃；MS m/e 595(MH+)。
步驟6(5R，6Z)-7-氧代-6-[(4-氧代-6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噁嗪-2-基)亞甲基]-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸氮?dú)庀孪?5R)-6-[(乙酰氧基)(4-氧代-6，7-二氫-4H-吡唑并[5，1-c][1，4]噁嗪-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(0.22g，0.37mmol)的THF(15ml)溶液中加入15ml的磷酸鹽緩沖液(0.5M，pH6.5)和80mg的10％Pd/C?；旌衔镌?0-50psi下氫化3小時(shí)，然后通過硅藻土過濾。過濾器墊片用THF洗滌，濾液用乙酸乙酯萃取。有機(jī)萃取液通過無水硫酸鎂干燥并蒸發(fā)。殘余物用乙醚洗滌得到0.07g黃色固體；MS m/e 320(MH+)；1H NMR(DMSO-d6)δ4.55-4.57(m，2H)，4.76-4.80(m，2H)，6.50(s，1H)，6.63(s，1H)，7 58(s，1H)，7.76(s，1H)。
實(shí)施例28制備6-(6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]吡喃-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟1制備6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]吡喃-2-甲醛POCl3(3.83ml，50mmol)3分鐘內(nèi)逐滴地加入到冰冷的DMF(3.85ml，50mmol)中。加入DCM(20ml)，當(dāng)反應(yīng)介質(zhì)成為糊狀時(shí)移走浴液。反應(yīng)保持在23℃2小時(shí)。然后再冷卻至0℃。然后在3分鐘內(nèi)逐滴地加入4H-吡喃-4-酮(5克，50mmol)的10mlDCM溶液。反應(yīng)保持在0℃2小時(shí)。將混合物倒入到冰和乙酸鈉溶液中并用DCM(2×200)萃取。合并后的有機(jī)層通過無水硫酸鎂干燥。過濾出干燥劑并濃縮得到5.0克產(chǎn)物。該化合物溶解于DCM(200ml)中，加入6.0克的2-6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]硫代吡喃-2-甲醛乙酸乙酯和10mlTEA?；旌衔锘亓?8小時(shí)。然后用水洗滌，通過硫酸鎂干燥。然后過濾并濃縮，用20乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行快速色譜法。所收集的產(chǎn)物溶解于100mlTHF中，注入LAH(150ml，0.5M的THF溶液)，在23℃保持10分鐘。然后回流18小時(shí)。在23℃通過加入水來停止，最后加入1N HCl使混合物澄清。用乙酸乙酯(2×200ml)萃取，合并后的有機(jī)層通過硫酸鎂干燥。過濾并濃縮得到2.3克產(chǎn)物。粗產(chǎn)物溶解于DCM(300ml)和二氧化錳(加入15克)中。反應(yīng)在23℃進(jìn)行0.5小時(shí)。然后2×15克的氧化劑每半小時(shí)以后加入。該產(chǎn)物然后用硅藻土墊片過濾并濃縮。快速柱色譜法得到1.206克(14％收率)油狀產(chǎn)物。
H-NMRδ9.84(s，1H)，7.41(s，1H)，4.74(s，2H)，4.00(t，2H，J＝5.6Hz)，2.96(t，2H，J＝5.6Hz)；MS169.1(M+H)步驟2制備6-(6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]吡喃-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]吡喃-2-甲醛(336mg，2mmol)溶解于20ml乙腈中，然后氮?dú)庀录尤脘寤V(516mg，2mmol)?；旌衔?3℃攪拌半小時(shí)。然后立刻注入6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(770mg，2mmol)的20mlTHF溶液，混合物立即冷卻至-20℃，然后注入三乙胺(1ml)，混合物-20℃攪拌3小時(shí)。然后注入乙酸酐(0.4ml)，混合物在0℃攪拌18小時(shí)。反應(yīng)介質(zhì)然后用400ml乙酸乙酯稀釋，用100ml的5％檸檬酸、100ml飽和碳酸氫鈉和100ml鹽水洗滌。有機(jī)層然后通過硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。利用20％乙酸乙酯的己烷溶液通過快速柱色譜法得到491mg(41％)產(chǎn)物。該產(chǎn)物然后溶解于15mlTHF和15ml磷酸鹽緩沖水溶液(pH＝6.5)中。混合物然后在0.5克10％Pd/C45psi氫氣中氫化1小時(shí)。然后用硅藻土墊片過濾并真空濃縮分出大部分THF。該溶液然后冷卻至0℃，并用1N氫氧化鈉堿化至pH＝8。然后用2升水，再用5％乙腈的水溶液通過反相HPLC純化。水然后通過真空濃縮分出，收集到100mg(38％)產(chǎn)物；MP＞250℃；
H-NMRδ7.36(s，1H)，7.15(s，1H)，6.55(s，1H)，6.44(s，1H)，4.61(s，2H)，3.88(m，2H)，2.86(m，2H)，2.27(m，2H)，1.43(t，3H)MS320.3(M-H)實(shí)施例29制備6-(6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]硫代吡喃-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟1制備6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]硫代吡喃-2-甲醛POCl3(4.02mol，43mmol)3分鐘內(nèi)逐滴地加入到冰冷的DMF(3.34ml，43mmol)中。加入DCM(20mol)，當(dāng)反應(yīng)介質(zhì)成為糊狀時(shí)移走浴液。反應(yīng)保持在23℃2小時(shí)。然后再冷卻至0℃。然后在3分鐘內(nèi)逐滴地加入四氫硫代吡喃-4-酮(5克，43mmol)的10mol DCM溶液。反應(yīng)保持在0℃2小時(shí)。用DCM(250ml)稀釋，然后用冰冷200ml飽和乙酸鈉水溶液洗滌。有機(jī)層通過硫酸鈉干燥。過濾出干燥劑并濃縮，利用10％乙酸乙酯的己烷溶液經(jīng)快速柱色譜法得到1.3克(8mmol)產(chǎn)物。該化合物溶解于DCM(100ml)中并加入1.2ml(11mmol)的2-巰基乙酸乙酯和1ml TEA?；旌衔锘亓?8小時(shí)。然后用水洗滌并通過硫酸鎂干燥。過濾、濃縮并用20乙酸乙酯的己烷溶液經(jīng)快速色譜法得到1.1克(11％收率)產(chǎn)物H-NMRδ6.68(s，1H)，4.73(s，2H)，3.68(s，2H)，3.04(t，2H，J＝7.6Hz)，2.91(t，2H，J＝7.6Hz).；MS(EI)185.99(M+)1.1克(4.8mmol)6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]硫代吡喃-2-甲酸乙酯溶解于100ml THF中，注入LAH(40ml，0.5M的DMG溶液)，反應(yīng)在23℃保持10分鐘。然后回流18小時(shí)。在23℃用水(10ml)停止。輕輕的倒出有機(jī)層，剩余物用20ml DCM洗滌。合并后的有機(jī)層硫酸鈉干燥。過濾，濃縮并用10-20％乙酸乙酯進(jìn)行柱色譜法得到940mg粗產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物溶解于DCM(40ml)和二氧化錳(加入2克)中。反應(yīng)在23℃進(jìn)行半小時(shí)。該產(chǎn)物然后用硅藻土墊片過濾濃縮。快速色譜法得到320mg(36％)產(chǎn)物。
H-NMRδ9.82(s，1H)，7.46(s，1H)，3.56(s，2H)，3.15(t，2H，J＝7.2Hz)，2.95(t，2H，J＝7.2Hz).；MS(El)228.02(M+)步驟2制備6-(6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]硫代吡喃-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸
6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]硫代吡喃-2-甲醛(320mg，1.72mmol)溶解于17ml乙腈中，然后氮?dú)庀录尤脘寤V醚合物(450mg，1.74mmol)?；旌衔?3℃攪拌半小時(shí)。然后立刻注入6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基-苯甲酯(660mg，1.72mmol)的17ml THF溶液，混合物立即冷卻至-20℃，然后注入三乙胺(1ml)，混合物-20攪拌3小時(shí)。然后注入乙酸酐(0.4ml)，混合物在0℃攪拌18小時(shí)。反應(yīng)介質(zhì)然后用400ml乙酸乙酯稀釋并用100ml的5％檸檬酸，100ml飽和碳酸氫鈉和100ml鹽水洗滌。有機(jī)層然后硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。利用20％乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行快速柱色譜法得到461mg(44％)產(chǎn)物。該產(chǎn)物然后溶解于20ml THF和20ml磷酸鹽緩沖水溶液(pH＝6.5)中?；旌衔锶缓笤?.5克10％Pd/C40psi氫氣下氫化一個(gè)半小時(shí)。然后用硅藻土墊片過濾并真空濃縮分出大部分THF。該溶液然后冷卻至0℃并用1N氫氧化鈉堿化至pH＝8。然后用2升水，再用5％乙腈水溶液通過反相HPLC純化。水然后通過真空濃縮分出，收集到21mg(8.6％)產(chǎn)物。
MP＞250℃H-NMR7.34(s，1H)，7.18(s，1H)，6.59(s，1H)，6.44(s，1H)，3.71(s，2H)，2.93(s，2H)，2.50(s，2H).；MS338.0(M+H)實(shí)施例30制備6-(5-甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟1制備(5-甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)-甲醇6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]吡啶-2，5-二甲酸二乙酯(46克，163mmol)溶解于200mlTHF中。在23℃該溶液中注入LAH(1M，THF)300ml。然后在23℃攪拌18小時(shí)。反應(yīng)用10ml水停止，直接通過硫酸鈉干燥。過濾并濃縮得到29.3克(160mmol，98％)粗產(chǎn)物。
H-NMR6.55(s，1H)，4.70(s，2H)，3.41(s，2H)，2.86(t，2H，J＝5.6Hz)，2.73(t，2H，J＝5.6Hz)，2.38(s，3H)；MS184.0(M+H)步驟2制備5-甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-甲醛DMSO(1.7mol，24mmol)的5mlCH2Cl2溶液冷卻至-50-60℃。在50℃，5分鐘內(nèi)加入草酰氯(1ml，11mmol)的20mlDCM溶液。混合物在-50℃保持5分鐘，然后在50℃加入1.67克(9mmol)的(5-甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)-甲醇的20ml DCM溶液，混合物在50℃再攪拌15分鐘。然后在-50℃加入三乙胺(7ml)，5分鐘后移走浴液，混合物自然升溫至23℃。用100ml水洗滌并用100ml乙酸乙酯萃取。合并后的有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾，濃縮，用0-15％甲醇的乙酸乙酯溶液進(jìn)行快速柱色譜法得到736mg(45％收率)產(chǎn)物。
H-NMR9.81(s，1H)，7.42(s，1H)，3.56(s，2H)，3.00(t，2H，J＝5.6Hz)，2.91(t，2H，J＝5.6Hz)，2.51(s，3H)；MS182.1(M+H)步驟3制備6-(5-甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸2-甲?；?6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]吡啶-5-甲酸乙酯(724mg，4mmol)溶解于40ml乙腈中，然后氮?dú)庀录尤脘寤V醚合物(1.2克，4.65mmol)?；旌衔?3℃攪拌半小時(shí)。然后立刻注入6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.54克，4mmol)的40ml THF溶液，混合物立即冷卻至-20℃。然后注入三乙胺(2ml)，混合物-20℃攪拌3小時(shí)。然后注入乙酸酐(0.66ml)，混合物0℃攪拌48小時(shí)。反應(yīng)介質(zhì)然后用500ml乙酸乙酯稀釋，并用50ml的5％的檸檬酸，50ml飽和碳酸氫鈉和50ml鹽水洗滌。另外300ml乙酸乙酯用于洗滌每一種水溶液。合并后的有機(jī)層然后通過硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，用20％乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行快速柱色譜法得到1.56克(64％收率)產(chǎn)物。該產(chǎn)物然后溶解于20mlTHF和20ml磷酸鹽緩沖水溶液(pH＝6.5)中?；旌衔锶缓笥?.5克10％Pd/C在40psi氫氣下氫化2小時(shí)。然后用硅藻土墊片過濾，真空濃縮分出大部分THF。該溶液然后冷卻至0℃，并用1N氫氧化鈉堿化至pH＝8。然后用2升水，再用5％乙腈的水溶液通過反相HPLC純化。水然后通過真空濃縮分出，收集到112mg(13％)產(chǎn)物。
MP＞250℃H-NMRδ7.48(s，1H)，7.37(s，1H)，7.21(s，1H)，7.10(s，1H)，3.41(s，2H)，2.88(s，2H)，2.68(s，2H)，2.37(s，3H)；MS335.0(M+H)實(shí)施例31制備2-(2-羧基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-6-亞基甲基)-6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]吡啶-5-甲酸乙酯2-甲酰基-6，7-二氫-4H-噻吩并[3，2-c]吡啶-5-甲酸乙酯(480mg，2mmol)溶解于20ml乙腈中，然后氮?dú)庀录尤脘寤V醚合物(516mg，2mmol)?；旌衔?3℃攪拌半小時(shí)。然后立刻注入6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基-苯甲酯(770mg，2mmol)的20ml THF溶液，混合物立即冷卻至-20℃。然后注入三乙胺(1ml)，混合物在-20℃攪拌3小時(shí)。然后注入乙酸酐(0.4ml)，混合物0℃攪拌48小時(shí)。反應(yīng)介質(zhì)然后用200ml乙酸乙酯稀釋，并連續(xù)地用50ml 5％檸檬酸，50ml飽和碳酸氫鈉和50ml鹽水洗滌。有機(jī)層然后通過硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，用20％乙酸乙酯的己烷溶液通過快速柱色譜法得到690mg(50％，收率)產(chǎn)物。該產(chǎn)物的餾分(456mg，0.69mmol)然后溶解于15mlTHF和15mol磷酸鹽緩沖水溶液(pH＝6.5)中?；旌衔锶缓笥?.5克10％Pd/C在40psi氫氣下氫化2小時(shí)。然后用硅藻土墊片過濾，真空濃縮分出大部分THF。該溶液然后冷卻至0℃，并用1N氫氧化鈉堿化至pH＝8。然后用2升水，再用5％乙腈的水溶液通過反相HPLC純化。水然后通過真空濃縮分出，收集到18mg(5％)產(chǎn)物。
MP＞250℃H-NMR7.35(s，1H)，7.24(s，1H)，6.61(s，1H)，6.45(s，1H)，4.48(s，2H)，4.08(四重峰，2H，J＝7.2Hz)，3.68(m，2H)，2.87(m，2H)，1.20(t，3H，J＝7.2Hz)；MS393.0(M+H)實(shí)施例32制備7-氧代-6-(6，7，8，9-四氫-5H-咪唑并[1，2-a]氮雜-2-基亞甲基)-4-硫雜-l-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟1制備6，7，8，9-四氫-5H-咪唑并[1，2-a]氮雜-2-甲醛硫代己內(nèi)酰胺(6.45克，50mmol)溶解于400ml CH2Cl2中，再加入碘甲烷(16ml，5eq)?；旌衔锏?dú)庀聰嚢?8小時(shí)。然后用100ml碳酸鉀(50％，aq.)處理。有機(jī)層然后經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾并濃縮后獲得7.3克產(chǎn)物。該產(chǎn)物溶解于300ml乙醇中，加入2.83克氯化銨?；旌衔锘亓?小時(shí)。然后真空分出溶劑。一半該產(chǎn)物加入200ml乙醇，然后加入1.35克(25mmol)甲醇鈉和4.8克(25mol)2-溴-3-異丙氧基丙烯醛，混合物23℃攪拌2小時(shí)。然后分出溶劑，加入200ml氯仿和10ml三乙胺?；旌衔锘亓?小時(shí)，然后冷卻至23℃。反應(yīng)介質(zhì)在300ml DCM和2×150碳酸鉀(50％)間分配。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾并濃縮后獲得2.1克油狀產(chǎn)物。
H-NMR9.62(s，1H)，7.60(s，1H)，6.61(s，1H)，6.45(s，1H)，4.58(s，2H)，2.96(2m，H)，1.90(m，2H)，1.72(m，2H)；MS164.9(M+H)步驟2制備7-氧代-6-(6，7，8，9-四氫-5H-咪唑并[1，2-a]氮雜-2-基亞甲基)-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸6，7，8，9-四氫-5H-咪唑并[1，2-a]氮雜-2-甲醛(1.312克，8mmol)溶解于80ml乙腈中，然后氮?dú)庀录尤脘寤V醚合物(2.94克，8mmol)?；旌衔?3℃攪拌半小時(shí)。然后立刻注入6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.155克，3mmol)的60mlTHF溶液，混合物立即冷卻至-20℃。然后注入三乙胺(4ml)，混合物-20℃攪拌4小時(shí)。然后注入乙酸酐(1ml)，混合物0℃攪拌20小時(shí)。反應(yīng)介質(zhì)然后用500ml乙酸乙酯稀釋，并用100ml的5％檸檬酸，100ml飽和碳酸氫鈉和100ml鹽水洗滌。有機(jī)層然后經(jīng)硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，用20％乙酸乙酯的己烷溶液通過快速柱色譜法得到800mg產(chǎn)物。該產(chǎn)物然后溶解于20mlTHF和20ml磷酸鹽緩沖水溶液(pH＝6.5)中?；旌衔锶缓笥?.5克10％Pd/C在40psi氫氣下氫化1小時(shí)。然后用硅藻土墊片過濾，真空濃縮分出大部分THF。該溶液然后冷卻至0℃，并用1N氫氧化鈉堿化至pH＝8。然后用2升水，再用5％乙腈的水溶液通過反相HPLC純化。水然后通過真空濃縮分出，收集到131mg(31％)產(chǎn)物。
MP＞250℃H-NMRδ7.78(s，1H)，7.02(s，1H)，6.94(s，1H)，6.36(s，1H)，3.92(m，2H)，2.80(m，2H)，1.78(m，2H)，1.61(m，2H)，1.54(m，2H)；MS318.2(M+H)。
實(shí)施例33(5R)，(6Z)-6-(7-苯甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟17-苯甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲酸乙酯Et3N(6.27mL)、PhCHO(4.92mL)室溫連續(xù)地加入到5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲酸乙酯鹽酸鹽(9.47g)的EtOH(81mL)溶液中，并在氮?dú)庀聰嚢?小時(shí)。然后NaBH3CN(2.97g)加入到該反應(yīng)混合物中并攪拌19小時(shí)?；旌衔镉霉柙逋翂|片過濾，CH2Cl2稀釋，并用50％K2CO3水溶液洗滌。有機(jī)層干燥(K2CO3)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用CHCl3-丙酮(1/0-9/1)和CHCl3-MeOH(19/1-9/1)洗脫。獲得題列化合物，淺黃色晶體(4.16g，36％)。
1H NMR(CDCl3)δ1.36(t，3H，J＝7.1Hz)，2.87(t，2H，J＝5.2Hz)，3.71(s，2H)，3.75(s，2H)，4.01(m，2H)，4.34(q，2H，J＝7.1Hz)，7.25-7.34(m，5H)，7.51(s，1H)。
步驟27-苯甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲醛1.01M DIBAL的甲苯(1mL+0.2mL+0.3mL)溶液-78℃氮?dú)庀录尤氲?-苯甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(283mg)的無水CH2Cl2(5mL)溶液中并攪拌1.5小時(shí)?；旌衔镉?M HCl(5mL)停止。反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾。濾液用50％K2CO3水溶液洗滌，水層用CH2Cl2萃取。合并后的有機(jī)層干燥(K2CO3)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用CHCl3-丙酮(9/1-4/1)和CHCl3-MeOH(19/1)洗脫。獲得題列化合物，無色結(jié)晶(148mg，61％)。
1H NMR(CDCl3)δ2.90(t，2H，J＝5.5Hz)，3.74(s，2H)，3.76(s，2H)，4.06(t，2H，J＝5.5 Hz)，7.28～7.35(m，5H)，7.53(s，1H)，9.80(s，1H)。
步驟3(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基(7-苯甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(非對映體混合物)7-苯甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-甲醛(139mg)室溫氮?dú)庀录尤氲綗o水MgBr2(325mg)的無水乙腈(8.7mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(223mg)的無水THF溶液(8.7mL)加入到該混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入Et3N(0.24mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌5小時(shí)并用乙酸酐(0.11mL)和DMAP(7mg)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉、水和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用正己烷-AcOEt(3/1-1/1)洗脫。獲得題列化合物，兩種非對映體的混合物(80/20，紫色無定形固體，233mg，61％)。
1H NMR(CDCl3)δ1.99(s，0.8×3H)，2.23(s，0.2×3H)，2.83～2.89(m，2H)，3.68(d，2H，J＝4.9Hz)，3.71(s，2H)，3.94～4.13(m，2H)，5.27(d，1H，J＝13.6Hz)，5.41(d，0.2×1H，J＝13.6Hz)，5.45(d，0.8×1H，J＝13.6Hz)，6.05(s，0.2×1H)，6.28(s.0.8×1H)，6.31(s，0.8×1H)，6.790(s，0.2×1H)，6.793(s，0.2×1H)，7.01(s，0.8×1H)，7.27～7.36(m，5H)，7.42(s，0.2×1H)，7.46(s，0.8×1H)，7.61(d，2H，J＝8.6Hz)，8.22(d，2H，J＝8.6Hz)。
步驟4(5R)，(6Z)-6-(7-苯甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1.2-a]吡嗪-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基(7-苯甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.27g)溶解于THF(55mL)和乙腈(25mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(5.08g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，80mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層冷卻至3℃，加入1M NaOH將pH調(diào)整至8.0。混合物35℃高真空下濃縮。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(79mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用H2O-MeCN(1/0-4/1)洗脫。合并后的餾分在35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(390mg，49％，pH7.7)。
Mp 180℃(dec)；1H NMR(D2O)δ2.84～2.95(m，2H)，3.61(d，2H，J＝7.2Hz)，3.67(s，2H)，3.96(t，2H，J＝5.7Hz)，6.43(s，1H)，6.89(s，1H)，6.93(s，1H)，7.28～7.37(m，6H)。
實(shí)施例34制備(5R，6Z)-7-氧代-6-{[5-(吡啶-3-基甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)]亞甲基}-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟12-甲?；鵞5-(吡啶-3-基甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并][3，2-c]吡啶室溫向攪拌的2-(甲酰基)-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]-5(4H)吡啶(1.05g，5.2mmol)的DMF(20ml)溶液中加入3-吡啶甲基氯鹽酸鹽(0.852g，5.2mmol)和N，N-二異丙基乙胺(10ml，過量)。反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)并用水停止。反應(yīng)混合物用氯仿萃?。挥盟浞窒礈觳⒂脽o水MgSO4干燥。過濾并濃縮。產(chǎn)物通過SiO2柱色譜法純化，用乙酸乙酯洗脫。淺黃色半固體。收率800mg，59％；M+H259。
步驟24-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)[5(吡啶-3-基甲基)-4，5，67-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯2-甲酰基[5-(吡啶-3-基甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并][3，2-c]吡啶(516mg，2.0mmol)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(772mg，2.0mmol)的無水THF溶液(20mL)室溫氬氣下連續(xù)地加入到無水MgBr2∶O(Et)2(390mg，1.5mmol)的無水乙腈(15mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(2.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)，并用乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫。所收集的餾分減壓下濃縮，非對映體的混合物用于下一步驟中。淺黃色無定形固體；收率700mg，51％；M+H 685和687。
步驟-3(5R.6Z)-6-{[5-(吡啶-3-基甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3.2-c]吡啶-2-基)]亞甲基}-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸4-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)[5(吡啶-3-基甲基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯(686mg，1.0mmol)溶解于THF(20mL)和乙腈(10mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(5.2g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，28mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入0.1M NaOH將pH調(diào)整至8.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮得到黃色沉淀。產(chǎn)物用HP21樹脂反相柱色譜法純化。開始柱子用去離子水(2升)洗脫，然后用10％CAN∶水洗脫。收集含有產(chǎn)物的餾分并在室溫減壓濃縮。黃色固體用丙酮洗滌并過濾。干燥。收率50mg，12％；黃色結(jié)晶；mp.134-136℃；(M+H)412。
1H NMR(DMSO-d6)δd 2.8(m，2H)，2.92(bm，2H)，3.6(m，2H)，3.86(s，2H)，6.3(s，1H)，6.41(s，1H)，7.17(s，1H)，7.29(s，1H)，7.35(m，1H)，7.7(m，1H)，8.48(d，1H)，8.54(s，1H)。
實(shí)施例35制備(5R，6Z)-7-氧代-6-{[5-(吡啶-3-基羰基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)]亞甲基}-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟12-甲?；鵞5-(吡啶-3-基羰基)-4，5，6，7-四氫噻吩并][3，2-c]吡啶向攪拌的2-(甲酰基)-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]-5(4H)吡啶(606mg，3.0mmol)的DMF(20ml)溶液中室溫加入煙酰氯鹽酸鹽(531mg，3.0mmol)和N，N-二異丙基乙胺(10ml，過量)。反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)并用水停止。反應(yīng)混合物用氯仿萃?。挥盟浞窒礈觳⑼ㄟ^無水MgSO4干燥。過濾并濃縮。產(chǎn)物通過SiO2柱色譜法純化，并用乙酸乙酯洗脫。淺黃色半固體。收率600mg，73％；M+H 273。
步驟24-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)[5(吡啶-3-基羰基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)羰基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯2-甲?；鵞5-(吡啶-3-基羰基)-4，5，6，7-四氫噻吩并][3，2-c]吡啶(400mg，1.4mmol)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(772mg，2.0mmol)的無水THF溶液(20mL)室溫氬氣下連續(xù)地加入到無水MgBr2∶O(Et)2(619mg，2.4mmol)的無水乙腈(15mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(2.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并用和乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫。所收集的餾分減壓下濃縮，非對映體的混合物用于下一步驟中。淺黃色無定形固體；收率300mg，30％；M.pt.71℃；M+H 701。
步驟-3(5R，6Z)-6-{[5-(吡啶-3-基羰基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3.2-c]吡啶-2-基]}亞甲基}-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽4-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)[5(吡啶-3-基羰基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯(800mg，1.14mmol)溶解于THF(20mL)和乙腈(10mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(5.2g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，28mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入0.1M NaOH將pH調(diào)整至8.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層35℃高真空下濃縮得到黃色沉淀。產(chǎn)物用HP21樹脂反相柱色譜法純化。柱子先用去離子水(2升)洗脫，然后用10％CAN∶水洗脫。收集含有產(chǎn)物的餾分并在室溫減壓濃縮。黃色固體用丙酮洗滌并過濾。干燥。收率50mg，12％；黃色結(jié)晶；mp.195℃；(M+H)426。
實(shí)施例36制備(5R，6Z)-7-氧代-6-{[5-(苯基乙?；?-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)]亞甲基}-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟12-甲?；鵞5-(苯基乙?；?-4，5，6，7-四氫噻吩并][3，2-c]吡啶室溫向攪拌的2-(甲酰基)-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]-5(4H)吡啶(0.41mg，2mmol)的DMF(20ml)溶液中加入苯基乙酰氯(0.35mg，2.2mmol)和N，N-二異丙基乙胺(10ml，過量)。反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)并用水停止。反應(yīng)混合物用氯仿萃取；用水充分洗滌并通過無水MgSO4干燥。過濾并濃縮。該產(chǎn)物通過SiO2柱色譜法純化并用乙酸乙酯洗脫。白色固體。收率510mg，89％；M+H 286。
步驟24-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)[5(苯基乙?；?-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基]甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯2-甲?；鵞5-(苯基乙?；?-4，5，6，7-四氫噻吩并][3，2-c]吡啶(340mg，1.2mmol)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(390mg，1.0mmol)的無水THF溶液(20mL)室溫氬氣下連續(xù)地加入到無水MgBr2∶O(Et)2(310mg，1.2mmol)的無水乙腈(15mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(2.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并用乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫。所收集的餾分減壓下濃縮，非對映體的混合物用于下一步驟中。淺黃色無定形固體；收率360mg，50％；M+H 713。
步驟-3(5R，6Z)-6-{[5-(苯基乙?；?-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基)]亞甲基}-7-氧代-4-硫雜-l-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸4-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)[5(苯基乙?；?-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶-2-基]甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯(300mg，0.4mmol)溶解于THF(50mL)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，28mL)中。在10％Pd/C(80mg)存在下，在40psi壓力下氫化2小時(shí)，最后，反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾并濃縮。所分離的黃色固體溶解于乙酸乙酯中并用水充分洗滌。有機(jī)層干燥并濃縮。所分離的黃色固體用乙醚研制并過濾。黃色固體用乙醚充分洗滌，發(fā)現(xiàn)95％是純化合物。收率160mg，91％；黃色固體；mp.166-169℃；(M+H)439。
實(shí)施例37制備(5R，6Z)-6-[(7-甲基咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟17-甲基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯7-甲基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯根據(jù)實(shí)施例1(步驟1)所述的方法制備。由6-甲基-2-氨基苯并噻唑(3.2g，20mmol)和溴丙酮酸乙酯(4.0g，20.4mmol)起始，分離到3.0g(57％收率)7-甲基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯，褐色固體。(M+H)261。
步驟22-甲酰基-7-甲基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-78℃向攪拌的7-甲基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑-2-甲酸乙酯(4.0g，15.38mmol)無水THF溶液中加入DIBAL(1M的甲苯溶液)(16.0ml，16mmol)。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌并緩慢地升至室溫。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?0分鐘，并用飽和NH4Cl停止。反應(yīng)混合物用氯仿萃取并用水充分洗滌。有機(jī)層通過無水MgSO4干燥；過濾并濃縮。殘余物通過SiO2柱色譜法純化，用氯仿∶甲醇(20∶1)洗脫。褐色固體；(M+H)217；收率800mg(24％)步驟34-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)(7-甲基咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯2-甲?；?7-甲基咪唑并[2，1-b]-苯并噻唑(432mg，2.0mmol)和(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(772mg，2.0mmol)的無水THF溶液(20mL)室溫氬氣下連續(xù)地加入到無水MgBr2∶O(Et)2(566mg，2.0mmol)的無水乙腈(15mL)溶液中。冷卻至-20℃后，一次性加入Et3N(2.0mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物-20℃攪拌2小時(shí)并用乙酸酐(1.04mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌15小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后柱子用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫。所收集的餾分減壓下濃縮，非對映體的混合物加入到下一步驟中。淺黃色無定形固體；收率400mg，31％；M+H 645。
步驟-4(5R)，(6Z)-6-[(7-甲基咪唑并[1，2-b][1，3]苯并噻唑-2-基亞甲基)]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸4-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)(7-甲基咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯(350mg，0.54mmol)溶解于THF(20mL)和乙腈(10mL)中。迅速地加入新鮮活化的鋅粉(5.2g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5，28mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。反應(yīng)混合物室溫劇烈地?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，冷卻至3℃，加入0.1N NaOH將pH調(diào)整至8.5。濾液用乙酸乙酯洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮得到黃色沉淀。產(chǎn)物用HP21樹脂反相柱色譜法純化。柱子先用去離子水(2L)洗脫再用10％乙腈∶水洗脫。收集含有產(chǎn)物的餾分，室溫減壓下濃縮。黃色固體用丙酮洗滌，過濾并干燥。收率110mg，55％；黃色結(jié)晶；mp178℃(分解)；(M+H+Na)392。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.56(s，1H)，7.93(d，1H)，7.83(s，1H)，7.38(d，1H)，7.07(s，1H)，6.51(s，2H)，2.42(s，3H)。
步驟-4(5R)，(6Z)-6-[(7-甲基咪唑并[1，2-b][1，3]苯并噻唑-2-基亞甲基)]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸(方法B)4-硝基苯甲基-6-[(乙酰氧基)(7-甲基咪唑并[2，1-b][1，3]苯并噻唑-2-基)甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸酯(350mg，0.54mmol)溶解于THF(40mL)和6.5pH磷酸鹽緩沖液(40ml)中，并在室溫40psi壓力下通過Pd/C(10％，200mg)氫化3小時(shí)。最后，反應(yīng)混合物用硅藻土墊片過濾并用乙腈洗滌。反應(yīng)混合物濃縮至40ml并冷卻至0℃，加入1N NaOH將pH調(diào)整至8.5。產(chǎn)物直接裝載通過HP21樹脂反相柱色譜法。柱子先用去離子水(2L)洗脫，后用10％乙腈:水洗脫。餾分被濃縮，黃色固體用丙酮洗滌，過濾并干燥。收率110mg，55％的黃色固體。
實(shí)施例38制備(5R)，(6Z)-6-(4，5，6，7-四氫-1，3a，3b，8-四氮雜環(huán)戊二烯并[a]茚-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽步驟15，6，7，8-四氫-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-基胺
12.7％的HCl的乙醇(5.35mL)溶液和10％Pd-C(50％濕的)(2.5g)加入到[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-基胺(2.5g)的乙醇(72mL)混合物中。反應(yīng)混合物在室溫400Kpa的氫氣下氫化3天?；旌衔镞^濾并減壓濃縮。殘余物用飽和碳酸鉀溶液處理并用氯仿萃取。有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。獲得題列化合物，淺黃色固體(2.31g，90％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.88-1.94(m，2H)，1.98-2.05(m，2H)，2.77(t，2H，J＝6.2Hz)，3.95(t，2H，J＝6.2Hz)，4.09(brs，2H)。
步驟24，5，6，7-四氫-1，3a，3b，8-四氮雜環(huán)戊二烯并[a]茚-2-甲酸乙酯溴丙酮酸乙酯(10.23g)加入到5，6，7，8-四氫-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-基胺(5.8g)的1，2-二甲氧基乙烷(320mL)的混合物中。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)并在減壓下濃縮至100mL。通過加入乙醚(200mL)，繼而過濾獲得沉淀。該沉淀溶解于乙醇(175mL)中，并在保護(hù)管(shieldtube)中110℃攪拌20小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并減壓濃縮。殘余物用飽和碳酸鉀溶液處理并用氯仿萃取。有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用乙酸乙酯-甲醇(1/1)洗脫。獲得題列化合物，淺黃色固體(7.56g，77％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.42(t，3H，J＝7.1Hz)，2.14-2.25(m，4H)，3.11(t，2H，J＝6.1Hz)，4.37(t，2H，J＝5.7Hz)，4.41(q，2H，J＝7.1Hz)，7.57(s，1H)。
步驟34，5，6，7-四氫-1，3a，3b，8-四氮雜環(huán)戊二烯并[a]茚-2-甲醛1.01M氫化二異丁基鋁的甲苯(1.06mL)溶液-78℃氮?dú)庀轮鸬蔚丶尤氲?，5，6，7-四氫-1，3a，3b，8-四氮雜環(huán)戊二烯并[a]茚-2-甲酸乙酯(100mg)的無水THF(5mL)溶液中。反應(yīng)混合物-78℃攪拌30分鐘，并用乙醇(約1mL)處理?；旌衔锷郎刂?℃并在0℃攪拌1小時(shí)。反應(yīng)溶液用乙酸乙酯(20mL)稀釋，并用0.5mL飽和氯化銨溶液處理，超聲處理約5分鐘(直到沉淀足以沉積)。混合物干燥(Na2SO4)并用硅藻土墊片過濾。濾液減壓下濃縮。殘余物由二氯甲烷和乙醚中結(jié)晶得到題列化合物(47.4mg，58％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ2.16-2.27(m，4H)，3.14(t，2H，J＝6.1Hz)，4.39(t，2H，J＝5.7Hz)，7.53(s，1H)，10.01(s，1H)。
步驟4(5R，6RS)-6-{(RS)-乙酰氧基-[4，5，6，7-四氫-1，3a，3b，8-四氮雜環(huán)戊二烯并[a]茚-2-基]-甲基}-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基-苯甲酯4，5，6，7-四氫-1，3a，3b，8-四氮雜環(huán)戊二烯并[a]茚-2-甲醛(2.97g)室溫氮?dú)庀录尤氲綗o水MgBr2(4.45g)的無水乙腈(110mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基-苯甲酯(2.97g)的無水THF溶液(110mL)加入到該反應(yīng)混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入三乙胺(6.45mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線。混合物-20℃攪拌1.2小時(shí)后，一次性加入乙酸酐(2.9mL)。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌16.5小時(shí)。混合物用乙酸乙酯稀釋并用H2O和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，用乙酸乙酯-正己烷(3/1)洗脫，然后用乙酸乙酯-甲醇(5/1)洗脫。獲得題列化合物，褐色無定形固體(651.6mg，13％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ2.10-2.24(m，4H)，2.29(s，3H)，3.04-3.07(m，2H)，4.28-4.32(m，2H)，5.27(d，1H，J＝13.7Hz)，5.43(d，1H，J＝13.7Hz)，6.19(s，1H)，6.91(s，1H)，7.01(s，1H)，7.49(s，1H)，7.59-7.62(m，2H)，8.23-8.25(m，2H)。
基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽(5R，6RS)-6-{(RS)-乙酰氧基-[4，5，6，7-四氫-1，3a，3b，8-四氮雜環(huán)戊二烯并[a]茚-2-基]-甲基}-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(643.6mg)溶解于THF(9mL)和乙腈(4.2mL)中。新鮮活化的鋅粉(2.57g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.4，13.2mL)加入到該反應(yīng)混合物中。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線?；旌衔锸覝貏×业?cái)嚢?小時(shí)。混合物冷卻至9℃，加入1M NaOH水溶液將pH調(diào)整至7.5。反應(yīng)溶液用乙酸乙酯混合并用硅藻土墊片過濾。該墊片用水洗滌。水層在35℃高真空下濃縮至20mL。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(60mL，Mitsubishi Kasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用2.5-10％的乙腈-水洗脫。合并后的餾分35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(68mg，18％，pH7.4)。MP 175℃(分解)；
1H-NMR(400MHz，D2O)δ1.85-2.03(m，4H)，2.85-2.99(m，2H)，4.07-4.14(m，2H)，6.34(s，1H)，6.74(s，1H)，6.76(s，1H)，7.28(s，1H)。
實(shí)施例39制備(5R，6E)-6-[(10-苯甲基-11-氧代-10，11-二氫二苯并[b，f][1，4]氧氮雜(oxazepine)-8-基)亞甲基]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟1制備8-(羥基甲基)二苯并[b，f][1，4]氧氮雜-11(10H)-酮；氫化鋁鋰(11mL，11mmole)室溫氮?dú)庀戮徛丶尤氲?1-氧代-10，11-二氫二苯并[b，f][1，4]氧氮雜-8-甲酸甲酯(1.346g，5mmole)的THF溶液中。反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)45分鐘，然后用2N的HCl停止直到pH值達(dá)到2-3。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)分出所有的THF，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取5次，有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。獲得所要的化合物(白色固體)，46％收率。
步驟2制備11-氧代-10，11-二氫二苯并[b，f][1，4]氧氮雜-8-甲醛；8-(羥基甲基)二苯并[b，f][1，4]氧氮雜-11(10H)-酮(0.241g，1mmole)的乙腈溶液室溫氮?dú)庀录尤敕肿雍Y(1g)中，然后4-甲基嗎啉-N-氧化物(0.175g，1.5mmole)再加入到該反應(yīng)混合物中?；旌衔飻嚢?0分鐘后，加入過鐐酸四丙基銨(0.0176g，0.05mmole)，反應(yīng)通過薄層色譜法檢測直到反應(yīng)完成。用10ml乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)混合物，通過小的快速硅膠柱。收集所有的含有所要產(chǎn)物的乙酸乙酯，用1N HCl萃取有機(jī)層再用鹽水洗滌。有機(jī)層通過硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。獲得所要的化合物(白色固體)，83％的收率。
步驟3制備10-苯甲基-11-氧代-10，11-二氫二苯并[b，f][1，4]氧氮雜8-甲醛；無水碳酸鉀(0.207g，1.5mmole)和苯甲基溴(0.205g，1.2mmole)室溫氮?dú)庀录尤氲?1-氧代-10，11二氫二苯并[b，f][1，4]氧氮雜-8-甲醛(0.240g，1mmole)的乙腈溶液中。反應(yīng)混合物然后回流4小時(shí)，并冷卻至室溫。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，通過酸式硅酸鎂墊片過濾并濃縮。用硅膠柱和50％乙酸乙酯的己烷溶液純化。獲得所要的化合物(淡黃色油)，收率63％。
步驟4制備6-[乙酰氧基-(10-苯甲基-11-氧代-10，11-二氫二苯并[b，f][1，4]氧氮雜-8-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯；10-苯甲基-11-氧代-10，11-二氫二苯并[b，f][1，4]氧氮雜-8-甲醛(0.250g，0.759mmole)的乙腈溶液室溫氮?dú)庀录尤脘寤V(0.419g，2.28mmole)中。然后，(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(0.292g，0.758mmole)的無水THF溶液加入到該混合物中。15分鐘后，反應(yīng)混合物冷卻至-20℃，加入三乙胺(0.317mL，2.27mmole)。反應(yīng)燒瓶用箔片覆蓋以遮擋光線。-20℃4小時(shí)后，用乙酸酐(0.358mL，3.795mmole)和DMAP(0.00927g，0.0759mmole)處理。將反應(yīng)混合物升溫至0℃，放入冰箱中過夜。反應(yīng)溶液濃縮，用乙酸乙酯溶解，并用5％檸檬酸水溶液，飽和NaHCO3，水和鹽水洗滌。有機(jī)層在硫酸鈉中干燥，過濾并濃縮。用硅膠柱和1∶15乙酸乙酯/CH2Cl2純化。獲得所要的化合物(淡黃色固體)，41％的收率。
步驟5制備6-(10-苯甲基-11-氧代-10，11-二氫二苯并[b，f][1，4]氧氮雜-8-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽；0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5)加入到6-[乙酰氧基-(10-苯甲基-11-氧代-10，11-二氫二苯并[b，f][1，4]氧氮雜-8-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(0.210g，0.273mmole)的THF溶液中，繼而加入10％Pd-C(0.0546g)。然后反應(yīng)混合物在40psi下氫化3小時(shí)。通過硅藻土墊片過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)分出THF，用乙酸乙酯萃取該混合物并用水和鹽水洗滌。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。用最小量的離心(distal)水溶解NaHCO3，加入到該反應(yīng)混合物中，伴隨著加入少量的乙酸乙酯直到pH值達(dá)到7-8，蒸發(fā)乙酸乙酯。用反相柱(MCI Gel CHP20P)和變化量的乙腈(0％-20％)水溶液純化。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)分出乙腈和水，冷凍干燥該化合物。獲得所要的產(chǎn)物(黃色固體)，24％的收率。MP179℃。
1H NMR(DMSO)δ 1.755-1.825(s，1H)，2.497-2.506(d，2H)，5.243-5.434(m，2H)，6.516-6.770(m，1H)，7.039-7.792(m，11H)。
實(shí)施例40制備6-(5-乙氧基-7，8-二氫-6H-3，4，8b-三氮雜-as-indacen-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸步驟1制備4-乙氧基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并嘧啶-2-基胺(SMRoss，L.O.；Goodman，L.；Baker，B.R.J.Am.Chem.Soc.1059，81，3108)5.1克4-氯-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并嘧啶-2-基胺溶解于200ml二甲苯和30ml無水乙醇中。然后加入6.8克乙醇鈉，混合物回流3小時(shí)。然后真空分出溶劑，100ml水加入到該殘余物中。過濾，濾餅用水(50ml)洗滌。該固體再真空干燥數(shù)小時(shí)。所要的產(chǎn)物重5.3克(98％收率)。
Mp133.8-134.9℃。
H-NMR(300MHz，CDCl3)δ.6.23(s，NH2)，4.28(四重峰，2H，J＝6.9Hz)，2.6(m，2H)，1.93(m，2H)，1.27(t，CH3，J＝6.9Hz)；MS180.0(M+H)步驟2制備5-乙氧基-7，8-二氫-6H-3，4，8b-三氮雜-as-indacene-2-甲酸乙酯5.2克(29mmol)4-乙氧基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并嘧啶-2-基胺溶解于100ml無水THF中。然后5分鐘內(nèi)逐滴地加入溴丙酮酸鹽(5.4ml，)?；旌衔?3℃攪拌1小時(shí)。然后過濾并用乙醚洗滌得到8.7克固體。該固體然后溶解于50ml乙醇中并回流2小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并在350ml氯仿和200ml飽和碳酸氫鈉間分配。有機(jī)層分離，通過硫酸鎂干燥。過濾出干燥劑，濃縮得到6.5克產(chǎn)物。
MP168.6-168.7℃。
H-NMR(300MHz，CDCl3)δ.7.69(s，1H)，4.50 (四重峰，2H，J＝7.2Hz)，4.40 (四重峰，2H，J＝7.2Hz)，3.11(t，2H，J＝9.6Hz)，2.88(t，2H，J＝9.6Hz)，2.88(m，2H)，1.43(t，2H，J＝7.2Hz).；MS276.2(M+H)步驟3制備5-乙氧基-7，8-二氫-6H-3，4，8b-三氮雜-as-indacene-2-甲醛1.925克的5-乙氧基-7，8-二氫-6H-3，4，8b-三氮雜-as-indacene-2-甲酸乙酯溶解于40ml二氯甲烷中，然后冷卻至-78℃。然后5分鐘內(nèi)加入DIBAL(1M，21ml，3eq.)。反應(yīng)介質(zhì)然后用2ml乙醇停止，并在350ml二氯甲烷和100ml 1N氫氧化鈉間分配。水層再用150ml氯仿洗滌，合并后的有機(jī)層干燥經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到相應(yīng)的醇。該醇然后溶解于150ml二氯甲烷中，然后加入10克二氧化錳?；旌衔镌?3℃攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物然后通過硅藻土墊片過濾并濃縮得到1.1克(68％)所要的醛。MP237.2～237.3℃。
H-NMR(300MHz，CDCl3)δ.9.94(s，1H，CHO)，8.39(s，1H)，4.46(四重峰，2H，J＝7.2Hz)，3.2(m，2H，CH2)，2.85(m，2H，CH2)，2.24(m，2H，CH2)，1.38(t，3H，CH3，J＝7.2Hz)；MS232.1(M+H)步驟4制備6-[乙酰氧基-(5-乙氧基-7，8-二氫-6H-3，4，8b-三氮雜-as-indacen-2-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯5-乙氧基-7，8二氫-6H-3，4，8b-三氮雜-as-indacene-2-甲醛(693mg，3mmol)的30ml乙腈溶液中加入1.03克的溴化鎂醚合物?；旌衔镌?3℃攪拌半小時(shí)。然后一分鐘內(nèi)注入6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.155克，1eq.)的30ml無水THF溶液，反應(yīng)混合物然后冷卻至-20℃。然后注入三乙胺(0.7ml，eq.)，反應(yīng)混合物-20℃攪拌5小時(shí)。然后注入乙酸酐(0.377ml，eq.)，反應(yīng)混合物在0℃保持18小時(shí)。反應(yīng)介質(zhì)然后用400ml乙酸乙酯稀釋并用100ml 5％檸檬酸、100ml飽和碳酸氫鈉和100ml鹽水洗滌。有機(jī)層然后通過硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。利用20％乙酸乙酯的己烷溶液由快速柱色譜法得到1.1克產(chǎn)物。
MP118.7～119.1℃H-NMR(300MHz，CDCl3)δ.8.35(d，2H，J＝11Hz)，7.63(m，2H)，7.41(d，1H，J＝6.9Hz)，7.08(d，1H，J＝11Hz)，6.47(s，1H)，5.55(4H，CH2)，4.54(m，2H)，3.09(m，2H)，2.93(m，2H)，2.32(m，2H)，1.41(t，J＝9.6Hz)；MS660.1(M+H)步驟5制備6-(5-乙氧基-7，8-二氫-6H-3，4，8b-三氮雜-as-indacen-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸6-[乙酰氧基-(5-乙氧基-7，8-二氫-6H-3，4，8b-三氮雜-as-indacen-2-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.03克，1.565mmol)懸浮在20ml THF和20ml pH＝6.5磷酸鹽緩沖水溶液中?；旌衔锶缓笤?5psi氫氣下氫化2小時(shí)。然后用硅藻土墊片過濾，真空濃縮分出大部分THF。該溶液然后冷卻至0℃并用1N氫氧化鈉堿化至pH＝8。然后利用1升水，再用5％～25％乙腈和水通過反相HPLC純化。水然后通過真空濃縮分出，收集到100mg的產(chǎn)物。
MP＞250℃H-NMR(300MHz，CDCl3)δ.7.52(s，1H)，6.95(s，1H)，6.54(s，1H)，4.73(m，2H)，3.06(m，2H)，2.84(m，2H)，2.27(m，2H)，1.43(t，3H)；MS383.2(M+H)。
實(shí)施例41(5R，6E&Z)-7-氧代-6-(4H，10H-吡唑并[5，1-c][1，4]苯并氧氮雜(benzoxazepin)-2-基亞甲基)-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟1制備1-(2-氟苯甲基)-1H-吡唑-3，5-二甲酸酯2-氟苯甲基溴(2.0ml，16.58mmol)氮?dú)庀录尤氲?，5-吡唑二甲酸二乙酯(3.01g，14.18mmol)，Cs2CO3(5.57g，17.1mmol)和乙腈(140ml)的混合物中。加熱至60℃2小時(shí)，然后冷卻至室溫。過濾并濃縮該反應(yīng)溶液。向所得的殘余物中加入水(～200mL)并用EtOAc萃取。用水和鹽水洗滌該有機(jī)物。有機(jī)物通過硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。獲得1-(2-氟苯甲基)-1H-吡唑-3，5-二甲酸二乙酯(淡黃色油)，定量的收率。
步驟2制備1-(2-氟苯甲基)-1H-吡唑-3，5-甲烷二醇1M DIBAL-H的THF(90ml，90mmol)溶液0℃氮?dú)庀录尤氲?-(2-氟苯甲基)-1H-吡唑-3，5-二甲酸二乙酯(4.80g，14.99mmol)的CH2Cl2(90ml)溶液中。2小時(shí)后用NH4Cl(aq)停止，形成懸浮液。過濾并用EtOAc萃取，用鹽水洗滌。有機(jī)物經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。硅膠柱和5％MeOH的CH2Cl2溶液純化。獲得3.4g二醇化合物(澄清的油)，收率96％。
步驟3制備4H，10H-吡唑并[5，1-c][1，4]苯并氧氮雜-2-甲醛二醇化合物(3.83g，16.21mmol)的HMPA(24ml)溶液氮?dú)庀录尤氲絅aH(60％，1.34g，33.5mmol)的甲苯(330ml)懸浮液中。迅速地加熱至95℃3小時(shí)，并冷卻至室溫。用水停止并用EtOAc萃取。有機(jī)物用水和鹽水洗滌。有機(jī)物經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。用硅膠柱和2％MeOH的CH2Cl2溶液純化。獲得4H，10H-吡唑并[5，1-c][1，4]苯并氧氮雜-2-基甲醇(白色固體)。收率0.71g，20％。
4H，10H-吡唑并[5，1-c][1，4]苯并氧氮雜-2-基甲醇(0.71g，3.28mmol)，4甲基嗎啉-N-氧化物(1/198g，10.23mmol)，分子篩(粉末，4埃)(3.32g)和乙腈(0.07M)在氮?dú)庀路旁谝黄稹＜尤脒^鐐酸四丙基銨(0.113g，0.322mmol)，3小時(shí)后反應(yīng)溶液通過硅藻土過濾并濃縮。用硅膠柱和1∶1EtOAc/己烷純化。獲得4H，10H-吡唑并[5，1-c][1，4]苯并氧氮雜-2-甲醛(白色固體)。收率0.31g，44％。
步驟4制備6-[乙酰氧基-(4H，10H-吡唑并[5，1-c][1，4]苯并氧氮雜-8-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯；4H，10H-吡唑并[5，1-c][1，4]苯并氧氮雜-2-甲醛(0.19g，0.887mmol)的乙腈(14ml)溶液氮?dú)庀录尤氲組gBr2(0.49g，2.66mmol)中。25分鐘后加入6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸4-硝基苯甲酯(0.342g，0.888mmol.)的THF(14ml)溶液。15分鐘后反應(yīng)冷卻至-20℃。10分鐘后加入Et3N(3eq)，將反應(yīng)物置于黑暗中。6.5小時(shí)后加入Ac2O(0.42ml，4.45mmol)和DMAP(0.011g，0.0900mmol)。升溫至0℃，放入制冷器中過夜。反應(yīng)溶液濃縮，所得的殘余物溶解于EtOAc中。用5％檸檬酸(aq)和飽和NaHCO3(aq)洗滌。再用水和鹽水洗滌。有機(jī)物經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。用硅膠預(yù)制板和1∶2EtOAc/己烷純化。獲得縮合產(chǎn)物。(黃色樹脂/固體)。收率0.31g，54％的收率。
步驟5(5R，6E&Z)-7-氧代-6-(4H，10H-吡唑并[5，1-c ][1，4]苯并氧氮雜-2-基亞甲基)-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽步驟60.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.5)(18mL)加入到縮合產(chǎn)物(5)(0.300g，0.468mmol)的THF(18mL)溶液中。加入Pd/C(0.102g)，反應(yīng)混合物在40psi下氫化2小時(shí)。通過硅藻土過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)分出THF。用EtOAc萃取。有機(jī)物通過硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。NaHCO3(0.08g，0.952mol)溶解于少量的水中并加入到濃縮的有機(jī)物中，同時(shí)加入少量的EtOAc。過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)分出EtOAc。用反相柱(MCI GelCHP20P)和變化量的乙腈(0％-15％)水溶液純化。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)由所收集的餾分中分出乙腈和大部分水。冷凍干燥剩余物獲得41mg(5R，6E)-7-氧代-6-(4H，10H-吡唑并[5，1-c][1，4]苯并氧氮雜-2-基亞甲基)-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸，鈉鹽(6)(黃色固體)，22％收率。HPLC發(fā)現(xiàn)純度為77％，E/Z異構(gòu)體比例為3∶2。
1H-NMR(δ，DMSO-d6)5.366(m，4H)，5.649(m，4H)，6.326(t，2H)，6.444(s，2H)，6.551(s，2H)，6.640(s，2H)，6.810(s，2H)，6.974(m，2H)，7.249(m，2H)，7.355(m，2H).m/z(M+H)390.0
實(shí)施例42(5R)，(6Z)-6-(5H-咪唑并[2，1-a]異吲哚-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽步驟1制備5H-咪唑并[2.1-a]異吲哚-2-甲醛2-溴-3-異丙氧基丙烯醛(4.97g)的無水乙腈(3mL)溶液加入到3-氨基-1H-異吲哚(3.4g)的無水乙腈(100mL)混合物中。反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?.25小時(shí)。然后三乙胺(3.6mL)加入到該混合物中并加熱至回流2小時(shí)?；旌衔锢鋮s至室溫，用乙酸乙酯稀釋并用20％碳酸氫鉀洗滌。通過硅藻土墊片過濾后，有機(jī)層干燥(MgSO4)并減壓濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用乙酸乙酯-己烷(3/1-4/1)洗脫。粗化合物由乙酸乙酯和正己烷中結(jié)晶，得到題列化合物(1.04g，22％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.01(s，2H)，7.28-7.52(m，3H)，7.90(s，1H)，7.91-7.93(m，1H)，9.92(s，1H)。
步驟2制備(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基-(5H-咪唑并[2，1-a]異吲哚-2-基)-甲基]-6-溴-7-氫代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基-苯甲酯5H-咪唑并[2，1-a]異吲哚-2-甲醛(736.8mg)室溫氮?dú)庀录尤氲綗o水MgBr2(1.8g)的無水乙腈(50mL)溶液中。(5R，6S)-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.55g)的無水THF溶液(50mL)加入到該反應(yīng)混合物中，冷卻至-20℃，一次性加入三乙胺(1.34mL)。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線?；旌衔?20℃攪拌2小時(shí)，用乙酸酐(0.76mL)一次性處理。反應(yīng)混合物升溫至0℃并在0℃攪拌18小時(shí)?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂尣⒂肏2O、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)并用硅藻土墊片過濾。該墊片用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠柱色譜法，然后用乙酸乙酯-己烷(2/3-1/1)洗脫。獲得題列化合物，兩種非對映體的混合物(5/1，淺黃色無定形固體，1.8g，73％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.02(s，0.84×3H)，2.27(s，0.16×3H)，4.89-4.94(m，2H)，5.29(d，1H，J＝13.6Hz)，5.47(d，1H，J＝13.6Hz)，6.18(s，0.16×1H)，6.40(s，0.84×1H)，6.42(s，0.84×1H)，6.94(d，0.16×1H，J＝0.9Hz)，7.18(d，0.16×1H，J＝0.7Hz)，7.35-7.48(m，3H)，7.51(s，0.84×1H)，7.60-7.64(m，2H)，7.79-7.83(m，1H)，8.23-8.27(m，2H)。
步驟3(5R)，(6Z)-6-(5H-咪唑并[2，1-a]異吲哚-2-基亞甲基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸鈉鹽(5R，6RS)-6-[(RS)-乙酰氧基-(5H-咪唑并[2，1-a]異吲哚-2-基)-甲基]-6-溴-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸-4-硝基苯甲酯(1.5g)溶解于THF(21mL)和乙腈(9.8mL)中。新鮮活化的鋅粉(6g)和0.5M磷酸鹽緩沖液(pH6.4，30.8mL)加入到該反應(yīng)混合物中。反應(yīng)容器用箔片覆蓋以遮擋光線?；旌衔锸覝貏×业?cái)嚢?小時(shí)。混合物冷卻至9℃，加入1M NaOH水溶液將pH調(diào)整至7.5。反應(yīng)溶液用乙酸乙酯混合并用硅藻土墊片過濾。該墊片用水洗滌并分出水層。水層在35℃高真空下濃縮至25mL。濃縮物經(jīng)過Diaion HP-21(100mL，MitsubishiKasei Co.Ltd.)樹脂柱色譜法。吸附后，柱子用水洗脫，然后用5-15％乙腈-水洗脫。合并后的餾分在35℃高真空下濃縮，冷凍干燥獲得題列化合物，黃色無定形固體(527mg，58％)。Mp170℃(分解)；1H NMR(400MHz，D2O)δ4.62(s，2H)，6.27(s，1H)，6.56(s，1H)，6.78(s，1H)，7.22-7.31(m，4H)，7.52(d，1H，J＝6.7Hz)。
權(quán)利要求
1.制備通式I化合物的方法 其中A和B中的一個(gè)表示氫，另一個(gè)是任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的稠合雙環(huán)雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的稠合三環(huán)雜芳基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的環(huán)烷基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的烷基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的鏈烯基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的炔基、任選地被一個(gè)或兩個(gè)R2取代的飽和或部分飽和的雜芳基；其中任一所述的含有NH環(huán)原子的雜芳基部分可任選地在所述氮上被R1取代；R5是H、C1-C6烷基、C5-6環(huán)烷基、或CHR3OCOC1-C6烷基或其鹽；R1是H、任選的取代的烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基或單或雙環(huán)的飽和雜環(huán)、任選的取代的環(huán)烷基、任選的取代的鏈烯基、任選的取代的炔基，條件是直接與N相連的碳原子上不存在雙鍵或三鍵；任選的取代的全氟烷基、-S(O)p任選的取代的烷基或芳基，其中p是0-2、任選的取代的-C＝O雜芳基、任選的取代的-C＝O芳基、任選的取代的-C＝O烷基、任選的取代的-C＝O環(huán)烷基、任選的取代的-C＝O單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的C1-C6烷基芳基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基、任選的取代的芳基-C1-C6烷基、任選的取代的雜芳基-C1-C6烷基、任選的取代的C1-C6烷基單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的8-16碳原子的芳基鏈烯基、-CONR6R7、-SO2NR6R7、任選的取代的芳基烷氧基烷基、任選的取代的-烷基-O-烷基芳基、任選的取代的-烷基-O-烷基雜芳基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、任選的取代的芳氧基芳基、任選的取代的芳氧基雜芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基雜芳基、任選的取代的烷基芳氧基烷基胺、任選的取代的烷氧基羰基、任選的取代的芳氧基羰基、或任選的取代的雜芳氧基羰基；R2是H、任選的取代的C1-C6烷基、任選的取代的C2-C6鏈烯基、任選的取代的C2-C6炔基、鹵素、氰基、N-R6R7、任選的取代的C1-C6烷氧基、羥基；任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基、COOR6、任選的取代的烷基芳氧基烷基胺、任選的取代的芳氧基、任選的取代的雜芳氧基、任選的取代的C3-C6鏈烯基氧基、任選的取代的C3-C6炔基氧基、C1-C6烷基氨基-C1-C6烷氧基、烷撐二氧基、任選的取代的芳氧基-C1-C6烷基胺、C1-C6全氟烷基、S(O)q任選的取代的C1-C6烷基、S(O)q任選的取代的芳基，其中q是0、1或2、CONR6R7、胍基或環(huán)狀胍基、任選的取代的烷基芳基、任選的取代的芳基烷基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基、任選的取代的雜芳基-C1-C6烷基、任選的取代的C1-C6烷基單或雙環(huán)飽和雜環(huán)、任選的取代的8-16碳原子的芳基鏈烯基、-SO2NR6R7、任選的取代的芳基烷氧基烷基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、任選的取代的芳氧基芳基、任選的取代的芳氧基雜芳基、任選的取代的雜芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳氧基雜芳基、任選的取代的芳氧基烷基、任選的取代的雜芳氧基烷基、或任選的取代的烷基芳氧基烷基胺；R3是氫、C1-C6烷基、C5-C6環(huán)烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基；R6和R7獨(dú)立的是H、任選的取代的C1-C6烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳基、任選的取代的芳基烷基、任選的取代的雜芳基烷基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基，R6和R7可一起形成3-7元的飽和環(huán)系，任選地具有一個(gè)或兩個(gè)雜原子，如N-R1、O、S＝(O)n，n＝0-2；所述方法包括(a)適當(dāng)取代的醛17A′-CHO17其中A′是當(dāng)B為氫時(shí)上文所定義的A，或當(dāng)A為氫時(shí)上文所定義的B在路易斯酸和弱堿的存在下與結(jié)構(gòu)16的6-溴青霉烯衍生物縮合 其中R是對硝基苯甲基，低溫下形成中間體羥醛產(chǎn)物18 其中A′和R如上文所定義；(b)中間體18與?；然蛲ㄊ?R8)Cl或(R8)2O的酸酐、或與通式C(X1)4的四鹵代甲烷，和三苯基膦反應(yīng)，其中R8是烷基SO2、芳基SO2、烷基CO、或芳基CO；X1是Br、I、或Cl；形成中間體化合物19 其中R9是X1或OR8，其中R8、X1、A′和R如上文所定義；和(c)通過還原消除方法將中間體化合物19轉(zhuǎn)化為所要的通式I化合物，其中R5是氫；如果需要的話轉(zhuǎn)化為制藥上可接受的鹽或酯，其中R5是C1-C6烷基、C5-C6環(huán)烷基、或CHR3OCOC1-C6烷基。
2.權(quán)利要求1的方法，其中的路易斯酸是無水鹵化鎂。
3.權(quán)利要求2的方法，其中的路易斯酸是無水MgBr2。
4.權(quán)利要求1-3中任一的方法，其中的弱堿是三乙胺、DMAP或二異丙基乙胺。
5.權(quán)利要求1-4中任一的方法，其中的低溫是約-20℃至約-40℃。
6.權(quán)利要求1-5中任一的方法，其中的中間體化合物19是乙酸酯、三氟甲基磺酸酯或甲苯磺酸酯。
7.權(quán)利要求1-6中任一的方法，其中的中間體化合物19不進(jìn)行分離。
8.權(quán)利要求1-7中任一的方法，其中的步驟(c)在溫和的溫度下進(jìn)行。
9.權(quán)利要求8的方法，其中的溫和溫度是約20℃至35℃。
10.權(quán)利要求1-9中任一的方法，其中的還原消除步驟利用活化的鋅和磷酸鹽緩沖液在pH約6.5-8.0，或通過催化劑氫化來進(jìn)行。
11.權(quán)利要求10的方法，其中的催化劑是Pd/C。
12.權(quán)利要求1-11中任一的方法，其中的A或B是稠合的三環(huán)雜芳基。
13.權(quán)利要求1-11中任一的方法，其中的A或B是稠合的雙環(huán)雜芳基。
14.權(quán)利要求13的方法，其中的稠合雙環(huán)雜芳基具有以下結(jié)構(gòu)通式 其中，Z1、Z2和Z3獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1、Z2、或Z3中的一個(gè)是碳原子，與通式I所示的分子的剩余部分鍵合；W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S、SO、SO2、O、N-R1、C＝O；條件是沒有會(huì)形成飽和環(huán)系的S-S或O-O或S-O鍵形成；t＝1-4；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；和R4是H，任選的取代的C1-6烷基，R4中的一個(gè)是OH、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S＝(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子。
15.權(quán)利要求13的方法，其中的稠合雙環(huán)雜芳基具有以下結(jié)構(gòu)通式 其中，Z1、Z2和Z3獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z3中的一個(gè)是碳原子，與分子的剩余部分鍵合；W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S、SO、SO2、O、或N-R1；t＝1-4；Y1和Y2獨(dú)立的是N或C；條件是如果雙環(huán)芳雜環(huán)中的芳環(huán)部分是咪唑，那么非芳環(huán)部份不能含有與橋頭碳相連的S；R1和R2如權(quán)利要求1所定義；R4是H，任選的取代的C1-6烷基，R4中的一個(gè)是OH、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S＝(O)n(其中n＝0-2)、和N-R1的雜原子；和R6和R7獨(dú)立的是H、任選的取代的C1-C6烷基、任選的取代的芳基、任選的取代的雜芳基、任選的取代的C1-C6烷基芳基、任選的取代的芳基烷基、任選的取代的雜芳基烷基、任選的取代的C1-C6烷基雜芳基，或R6和R7可一起形成3-7元的飽和環(huán)系，任選地具有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、或S的雜原子。
16.權(quán)利要求13的方法，其中的稠合雙環(huán)雜芳基是 其中Z1、Z2、Z3和Z4獨(dú)立的是CR2或N，條件是Z1-Z4中的一個(gè)是碳原子，與分子的剩余部分鍵合；W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S、SO、SO2、O或N-R1；條件是沒有會(huì)形成飽和環(huán)系的S-S或O-O或S-O鍵形成；t＝1-4；Y1和Y2獨(dú)立的是C或N；R1、R2、R4、R6、和R7如權(quán)利要求13所定義。
17.權(quán)利要求12的方法，其中的稠合三環(huán)雜芳基具有通式 或 其中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6和Z7獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z7中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；和Y1、Y2、Y3和Y4可獨(dú)立的是C或N。
18.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 或 其中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7和Z8獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z8中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；和Y1、Y2、Y3和Y4可獨(dú)立的是C或N。
19.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 其中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7和Z8獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z8中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；和Y1、Y2、Y3和Y4可以是C或N。
20.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 或 其中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8和Z9獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z9中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；和Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。
21.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 或 其中，Z1、Z2、Z3和Z4獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z4中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N；W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、和NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；R4是H，任選的取代的C1-6烷基，OH(條件是兩個(gè)R4不都是OH)、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子；和t＝1-3。
22.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 或 其中，Z1、Z2、Z3、Z4和Z5獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z5中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；Y1和Y2獨(dú)立的是C或N；W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、或NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；R4是H，任選的取代的C1-6烷基，OH(條件是兩個(gè)R4不都是OH)、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子；和t＝1-3。
23.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 或 其中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5和Z6獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1；條件是Z1-Z6中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N；W1和W2獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、N-R1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；R4是H，任選的取代的C1-6烷基，OH(條件是兩個(gè)R4不都是OH)、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子；和t＝1-3。
24.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 或 其中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6和Z7獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z7中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N；W1和W2獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、或NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；R4是H，任選的取代的C1-6烷基，OH(條件是兩個(gè)R4不都是OH)、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子；和t＝0-3。
25.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 或 其中，Z1、Z2和Z3獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z3中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；Y1和Y4獨(dú)立的是C或N；Y2和Y3獨(dú)立的是CH或N；W1、W2、W3、W4和W5獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、或NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；R4是H，任選的取代的C1-6烷基，OH(條件是兩個(gè)R4不都是OH)、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子；t＝0-2；和u＝1-3。
26.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 或 其中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8和Z9獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z9中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；和Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。
27.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 其中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9和Z10獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z10中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；和Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N。
28.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 或 其中，Z1、Z2、Z3、Z4和Z5獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z5中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N；W1、W2、W3獨(dú)立是CR4R4、O、N-R1、或S(O)r(r＝0-2)，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；R4是H，任選的取代的C1-6烷基，OH(條件是兩個(gè)R4不都是OH)、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子；和t＝1-4。
29.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 其中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5和Z6獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z6中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N；W1、W2和W3獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、或NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；R4是H，任選的取代的C1-6烷基，OH(條件是兩個(gè)R4不都是OH)、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子；和t＝1-3。
30.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 其中，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7和Z8獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z8中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N；W1和W2獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、或NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；R4是H，任選的取代的C1-6烷基，OH(條件是兩個(gè)R4不都是OH)、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子；和t＝1-2。
31.權(quán)利要求12的方法，其中的三環(huán)雜芳基是 其中，Z1、Z2、Z3和Z4獨(dú)立的是CR2、N、O、S或N-R1，條件是Z1-Z4中之一是與分子的青霉烯部分相連的碳原子；Y1、Y2、Y3和Y4獨(dú)立的是C或N；W1、W2、W3、W4和W5獨(dú)立的是CR4R4、S(O)r(r＝0-2)、O、和NR1，條件是沒有可形成飽和環(huán)的S-S、S-O或O-O鍵形成；R1、R2、R6和R7如權(quán)利要求1所定義；R4是H，任選的取代的C1-6烷基，OH(條件是兩個(gè)R4不都是OH)、C1-6烷氧基、-S-C1-C6烷基、COOR6、-NR6R7、-CONR6R7；或R4R4可一起為＝O或R4R4與它們相連的碳原子一起形成5-8元的螺環(huán)系，存在或不存在選自N、O、S(O)n(其中n＝0-2)、N-R1的雜原子；t＝1-3；和u＝1-3。
32.結(jié)構(gòu)16的6-溴青霉烯衍生物 其中R是對硝基苯甲基。
33.制備權(quán)利要求32的(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸-4-硝基苯甲酯的方法，包括下列步驟A)(i)6-氨基青霉烷酸在有機(jī)溶劑和水中與氫溴酸反應(yīng)形成6-溴衍生物21 和(ii)在堿存在的有機(jī)溶劑中利用4-硝基苯甲基溴將6-溴青霉烷酸21衍生物轉(zhuǎn)化為6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯22 其中R是對硝基苯甲基；(B)氧化6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯22形成6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯-1-氧化物23 (C)6-溴青霉烷酸對硝基苯甲酯-1-氧化物23與2-巰基苯并噻唑在芳族溶劑中回流形成(2R)-2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-3-烯酸-4-硝基苯甲酯24；(D)(2R)-2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-3-烯酸-4-硝基苯甲酯24溶解于有機(jī)溶劑中，與有機(jī)叔堿反應(yīng)形成2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯25；(E)在約-10℃至約-30℃，通過在有機(jī)酸、乙酸酐/有機(jī)叔堿和三烷基或三芳基膦存在的芳族有機(jī)溶劑中反應(yīng)將2-[(3S，4R)-4-(苯并噻唑-2-基二硫基)-3-溴-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯25轉(zhuǎn)化為2-[(3S，4R)-3-溴-4-甲?；蚧?2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯26；(F)所述的2-[(3S，4R)-3-溴-4-甲?；蚧?2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]-3-甲基丁-2-烯酸-4-硝基苯甲酯26在-70℃至-90℃溶解于有機(jī)溶劑中，通過臭氧處理的氧3-4小時(shí)，繼而利用亞磷酸鹽試劑進(jìn)行分子內(nèi)環(huán)化形成(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸-4-硝基苯甲酯16。
34.權(quán)利要求1制備通式I化合物的方法 如權(quán)利要求1所定義，其中步驟(a)中使用的(5R，6S)-6-溴青霉烯-3-甲酸-4-硝基苯甲酯16根據(jù)權(quán)利要求33來制備。
35.權(quán)利要求33或權(quán)利要求34的方法，其中的6-氨基青霉烷酸溶解于甲醇或THF中。
36.權(quán)利要求33-35中任一的方法，其中步驟(A)(i)在48％w/w的氫溴酸和亞硝酸鈉或鉀溶液的存在下進(jìn)行。
37.權(quán)利要求33-36中任一的方法，其中步驟(A)(i)在約-10℃至約-30℃的溫度進(jìn)行。
38.權(quán)利要求33-37中任一的方法，其中步驟(A)(ii)中的堿是碳酸鈉或鉀，有機(jī)溶劑是THF或DMF。
39.權(quán)利要求33-38中任一的方法，其中步驟(C)中的芳族溶劑是甲苯或二甲苯。
40.權(quán)利要求33-39中任一的方法，包括化合物23向26的連續(xù)轉(zhuǎn)化，其中不用分離中間體。
41.權(quán)利要求40的方法，其中，6-溴青霉烷酸-4-硝基苯甲酯-1-氧化物23在回流的芳族有機(jī)溶劑中與巰基苯并噻唑反應(yīng)，并在約0至-20℃用三乙胺處理形成反應(yīng)混合物；所述的反應(yīng)混合物在約-10℃至-40℃順序地加入有機(jī)酸和酸酐，有機(jī)叔堿和三烷基或三芳基磷酸鹽。
全文摘要
本發(fā)明提供了制備通式I化合物的方法，該化合物用于治療細(xì)菌感染或疾病。
文檔編號(hào)C07D499/88GK1649881SQ03809695
公開日2005年8月3日 申請日期2003年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2002年5月1日
發(fā)明者T·阿貝, H·馬特蘇納加, A·米希拉, C·薩托, H·尤斯羅戈奇, K·薩托, T·塔卡薩基, A·M·溫卡特桑, T·S·曼索爾 申請人:惠氏公司