專(zhuān)利名稱：新的羥基吲哚類(lèi)化合物、其作為磷酸二酯酶4抑制劑的應(yīng)用、以及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及被取代的4-和/或7-羥基吲哚類(lèi)化合物、其制備方法、包含這些化合物的藥物制劑以及是磷酸二酯酶4抑制劑的這些化合物作為用于治療可以通過(guò)用本發(fā)明的化合物抑制免疫活性細(xì)胞(例如巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞)中磷酸二酯酶4的活性來(lái)影響的疾病的活性化合物的藥學(xué)應(yīng)用。
背景技術(shù)：
由遞質(zhì)導(dǎo)致的細(xì)胞膜受體的活化導(dǎo)致了“第二信使”系統(tǒng)的活化。腺苷酸環(huán)化酶分別由AMP和GMP合成活性環(huán)AMP(cAMP)或環(huán)GMP(cGMP)。例如，環(huán)AMP和環(huán)GMP引起平滑肌細(xì)胞松弛或在炎性細(xì)胞中抑制介質(zhì)釋放或合成。磷酸二酯酶(PDEs)分解“第二信使”cAMP和cGMP。迄今為止，已知11類(lèi)PDE酶(PDE1-11)，這些類(lèi)的酶在其底物特異性(cAMP、cGMP或其兩者)方面彼此各不相同并且其取決于其它底物(例如鈣調(diào)蛋白)。這些同工酶在機(jī)體中具有不同的功能并且在各種類(lèi)型的細(xì)胞中以不同的程度進(jìn)行表達(dá)(Beavo，JA，Conti，M和Heaslip，RJ，-許多環(huán)核苷酸磷酸二酯酶，Mol.Pharmacol.1994，46399-405；Hall，IP，同工酶選擇性磷酸二酯酶抑制劑可能的臨床應(yīng)用，Br.J.clin.Pharmacol.1993，351-7)。對(duì)不同類(lèi)型PDE同工酶的抑制使得cAMP或cGMP在細(xì)胞中積聚——這是一種在治療學(xué)上有利用價(jià)值的情況(Torphy，TJ，Livi，GP，Christensen，SB，用于治療哮喘的新型磷酸二酯酶抑制劑，Drug News and Perspectives1993，6203-214)。
4型是在對(duì)過(guò)敏性炎癥而言很重要的細(xì)胞(淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞)中占主導(dǎo)地位的PDE同工酶(Torphy，JT和Undem，BJ，磷酸二酯酶抑制劑治療哮喘的新機(jī)會(huì)，Thorax 1991，46512-523)。因此，認(rèn)為用適宜的抑制劑來(lái)抑制PDE 4是一種治療許多過(guò)敏誘導(dǎo)的疾病的重要方法(Schudt，Ch，Dent，G，Rabe，K，磷酸二酯酶抑制劑，Academic Press London 1996)。
磷酸二酯酶4抑制劑的重要性質(zhì)是其抑制炎性細(xì)胞釋放腫瘤壞死因子α(TNFα)的能力。TNFα是一種重要的前炎性細(xì)胞因子，其對(duì)大量生物過(guò)程具有影響。TNFα從例如被活化的巨噬細(xì)胞、被活化的T-淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和腦中的星形膠質(zhì)細(xì)胞被釋放。其對(duì)嗜中性白細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞具有自活化作用，使得許多對(duì)組織有破壞性的介質(zhì)被釋放。在單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和T-淋巴細(xì)胞中，TNFα使得其它前炎性細(xì)胞因子，如GM-CSF(粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子)或白介素-8的釋放增加。由于其促進(jìn)炎癥和分解代謝作用，TNFα在許多疾病如氣道的炎癥、關(guān)節(jié)的炎癥、內(nèi)毒素性休克、組織排異反應(yīng)、AIDS和許多其它免疫疾病中起著重要作用。因此，磷酸二酯酶4的抑制劑也適于治療這些與TNFα有關(guān)的疾病。
慢性阻塞性肺疾病(COPD)在人群中十分普遍并且在經(jīng)濟(jì)上也很重要。在發(fā)達(dá)國(guó)家，COPD疾病占所有疾病費(fèi)用的約10-15％，并且在USA，所有死亡中約25％是由這種疾病造成的(Norman，PCOPD新進(jìn)展和治療機(jī)會(huì)，Drug News Perspec t.11(7)，431-437，1998)，但是，實(shí)際上患者在死亡時(shí)通常僅五十多歲(Nolte，DChronischeBronchitis-eine Volkskrankheit multifaktorieller Genese[慢性支氣管炎——一種分布廣泛的多起因疾病]，Atemw.-Lungenkrkh.20(5)，260-267，1994)。WHO估計(jì)在未來(lái)20年中，COPD將成為死亡最常見(jiàn)的三種原因之一。
慢性阻塞性肺疾病(COPD)的臨床現(xiàn)象包括許多涉及咳嗽和咳痰癥狀的慢性支氣管炎(bronchitides)的臨床現(xiàn)象，并且還包括肺功能漸進(jìn)性和不可逆性退化(特別是影響呼氣)。該疾病的起因是階段性的并且常常并發(fā)細(xì)菌感染(Rennard，SICOPD定義、流行病學(xué)、以及影響其發(fā)展的因素的綜述，Chest，113(4)增刊，235S-241S，1998)。在該疾病過(guò)程中，肺功能穩(wěn)定下降并且肺的氣腫性逐漸增加并且患者的呼吸困難變得越來(lái)越明顯。這種疾病顯著損害了患者的生活質(zhì)量(呼吸短促，對(duì)運(yùn)動(dòng)的耐受性低)并且顯著降低了其預(yù)期壽命。除環(huán)境因素外，主要的風(fēng)險(xiǎn)因子是抽煙(Kummer，F(xiàn)Asthma und COPD.[哮喘和COPD]Atemw.-Lungenkrkh.[氣道-肺疾病]20(5)，299-302，1994；Rennard，SICOPD定義、流行病學(xué)、以及影響其發(fā)展的因素的綜述，Chest，113(4)增刊，235S-241S，1998)并且，因此，男人比女人更頻繁地受到該疾病的影響。但是，因?yàn)榱?xí)慣的改變和女性煙民人數(shù)的增加，這種現(xiàn)象在將來(lái)可能會(huì)發(fā)生變化。
目前的治療僅以緩解癥狀為目標(biāo)而不會(huì)攻擊該疾病發(fā)展的原因。由于支氣管擴(kuò)張作用，在與毒蕈堿能(muscarinergic)拮抗劑(例如異丙托銨)聯(lián)合的適宜情況中，使用長(zhǎng)效β2-激動(dòng)劑(例如沙美特羅)改善了肺功能，并且通常使用這種物質(zhì)(Norman，PCOPD新進(jìn)展和治療機(jī)會(huì)，Drug News Perspect.11(7)，431-437，1998)。必需用抗生素治療的細(xì)菌感染在該COPD發(fā)作中起著重要的作用(Wilson，R感染在COPD中的作用，Chest，113(4)增刊，242S-248S，1998；Grossman，RF抗生素的價(jià)值和抗生素治療在COPD惡化中的結(jié)果，Chest，113(4)增刊，249S-255S，1998)。這種疾病的治療仍然不能令人滿意，特別是由于肺功能穩(wěn)步下降而不能令人滿意。涉及對(duì)抗炎性介質(zhì)、蛋白酶或粘連分子的新治療方法可能很有前景(Barnes，PJ慢性阻塞性疾病藥物研發(fā)的新機(jī)遇，TiPS 10(19)，415-423，1998)。
與使該疾病變復(fù)雜的細(xì)菌感染無(wú)關(guān)，在支氣管中可以發(fā)現(xiàn)由嗜中性粒細(xì)胞支配的慢性炎癥。認(rèn)為由嗜中性粒細(xì)胞釋放的介質(zhì)和酶特別是在氣道中觀察到的結(jié)構(gòu)改變的原因(肺氣腫)。所以，抑制嗜中性粒細(xì)胞活性是一種阻止或延遲COPD進(jìn)程(肺功能參數(shù)變差)的合理方法。前炎性細(xì)胞因子TNFα(腫瘤壞死因子)是粒細(xì)胞活化的重要刺激物。因此，已知TNFα刺激了由嗜中性粒細(xì)胞產(chǎn)生的氧自由基的形成(Jersmann，HPA；Rathjen，DA and Ferrante，ATNFα對(duì)LPS-誘導(dǎo)的嗜中性白細(xì)胞氧自由基產(chǎn)生的增強(qiáng)，Infection and Immunity，4，1744-1747，1998)。PDE4抑制劑還能十分有效地抑制TNFα從許多細(xì)胞的釋放，從而抑制了嗜中性粒細(xì)胞的活性。非特異性的PDE抑制劑己酮可可堿既能抑制氧自由基形成又能抑制嗜中性粒細(xì)胞的吞噬能力(Wenisch，C；Zedtwitz-Liebenstein，K；Parschalk，B andGraninger，W己酮可可堿在體外對(duì)嗜中性白細(xì)胞反應(yīng)性氧產(chǎn)生和用流式血細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行評(píng)估的吞噬能力的影響，Clin.Drug Invest.，13(2)99-104，1997)。
已知有許多PDE4抑制劑。這些物質(zhì)主要是黃嘌呤衍生物、咯利普蘭類(lèi)似物或硝喹宗衍生物(在Karlsson，J-A，Aldos，D，用于治療哮喘的磷酸二酯酶4抑制劑，Exp.Opin.Ther.Patents 1997，7989-1003中進(jìn)行了綜述)。但迄今不能將這些化合物中的任何一種用于臨床應(yīng)用。已經(jīng)意識(shí)到已知的PDE4抑制劑還具有許多副作用，如惡心和嘔吐，但是迄今不能充分控制這些副作用。因此，必需發(fā)現(xiàn)具有更好的治療寬度的新PDE4抑制劑。
已經(jīng)在許多場(chǎng)合對(duì)吲哚-3-基乙醛酸酰胺類(lèi)物質(zhì)和其制備方法進(jìn)行了描述。在各種情況中，可以通過(guò)與草酰鹵進(jìn)行反應(yīng)將在3位未被取代并且可以通過(guò)對(duì)可以通過(guò)商業(yè)途徑獲得的吲哚在1位進(jìn)行取代來(lái)進(jìn)行合成的吲哚轉(zhuǎn)化成吲哚-3-基乙醛酰鹵，然后，通過(guò)將其與氨或伯或仲胺反應(yīng)，得到相應(yīng)的吲哚-3-基乙醛酸酰胺(路線1)。
路線1 X＝鹵素因此，專(zhuān)利US 2,825,734和US 3,188,313描述了可以根據(jù)路線1制備的各種吲哚-3-基乙醛酸酰胺類(lèi)物質(zhì)。這些化合物在通過(guò)還原所形成的吲哚衍生物的制備中可用作中間體。專(zhuān)利US 3,642,803也描述了一些吲哚-3-基乙醛酸酰胺類(lèi)物質(zhì)。
Farmaco 22(1967)，229-244描述了5-甲氧基吲哚-3-基乙醛酸酰胺類(lèi)物質(zhì)的制備?？梢杂迷撨胚嵫苌镌倥c草酰氯反應(yīng)并將所得的吲哚-3-基乙醛酰氯與一種胺反應(yīng)。
此外，專(zhuān)利US 6,008,231也對(duì)吲哚-3-基乙醛酸酰胺類(lèi)物質(zhì)以及其制備方法進(jìn)行了描述。再一次使用路線1中所描述的反應(yīng)步驟和反應(yīng)條件。沒(méi)有描述4-或7-羥基吲哚衍生物。
在專(zhuān)利申請(qǐng)DE 198 18 964 A1中第一次對(duì)被取代的5-羥基吲哚基乙醛酸酰胺和6-羥基吲哚基乙醛酸酰胺類(lèi)物質(zhì)以及其制備方法以及其作為PDE-4抑制劑的應(yīng)用進(jìn)行了描述。但是，沒(méi)有公開(kāi)4-或7-羥基吲哚衍生物以及其制備和應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及通式1的被取代的羥基吲哚類(lèi)化合物， 其中n可以＝1或2，和R1(i)是-C1-10-烷基，其是直鏈或支鏈的并且可以任選地被取代一次或多次，可以被-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C16烷基)(C6-14芳基)、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-SO2C6-14芳基、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-COOH、-(CO)C15烷基或-O(CO)C1-5烷基取代，被具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)的飽和或單不飽和或多不飽和的碳環(huán)取代，或被具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)優(yōu)選地是N、O和S的雜原子的單-、二-或三環(huán)的飽和或單不飽和或多不飽和的雜環(huán)取代，其中所說(shuō)的C6-14芳基和碳環(huán)以及雜環(huán)取代基就其各部分而言可以任選地被取代一次或多次，其可以被-C1-6-烷基、-OH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-S-C1-6-烷基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-OSO2C1-6烷基、-COOH、-(CO)C1-5烷基或-O(CO)C1-5烷基取代，并且其中碳環(huán)和雜環(huán)取代基上的烷基可以各自任選地被-OH、-SH、-NH2、-F、-Cl、-Br、-I、-SO3H、-COOH取代一次或多次，或者(ii)-C2-10-鏈烯基，其是單不飽和或多不飽和的、直鏈或支鏈基團(tuán)，并且可以任選地被取代一次或多次，其可以被-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-SO2C6-14芳基、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-COOH、-(CO)C1-5-烷基或-O(CO)C1-5烷基取代，被具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)的飽和或單不飽和或多不飽和的碳環(huán)取代、或被具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)優(yōu)選地是N、O和S的雜原子的單-、二-或三環(huán)的飽和或單不飽和或多不飽和的雜環(huán)取代，其中所說(shuō)的C6-14芳基和碳環(huán)以及雜環(huán)取代基各自可以任選地被-C1-6-烷基、-OH，-NH2，-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-S-C1-6-烷基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-OSO2C1-6烷基、-COOH、-(CO)C1-5烷基或-O(CO)C1-5烷基取代一次或多次，并且其中所說(shuō)碳環(huán)和雜環(huán)取代基上的烷基各自可以任選地被-OH、-SH、-NH2、-F、-Cl、-Br、-I、-SO3H或-COOH取代一次或多次，R2和R3(i)在各種情況中各自彼此獨(dú)立地是氫或-C1-5-烷基，其可以任選地被-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-S-C1-6-烷基、-苯基或-吡啶基取代一次或多次，-苯基，其可以任選地被-C1-3烷基、-OH、-SH、-NH2、-NHC1-3-烷基、-N(C1-3-烷基)2、-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-3烷基、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-3-烷基、-S-C1-3-烷基或-O(CO)-C1-3-烷基取代一次或多次，-吡啶基，其可任選地被-C1-3烷基、-OH、-SH、-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-3-烷基、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-3-烷基、-S-C1-3烷基或-O(CO)-C1-3-烷基取代一次或多次，其中R2和R3僅有一個(gè)是氫并且其中碳環(huán)和雜環(huán)取代基上的烷基各自任選可以被-OH、-SH、-NH2、-F、-Cl、-Br、-I、-SO3H、-COOH、-(CO)C1-5-烷基、或-O(CO)C1-5-烷基取代一次或多次，或(ii)NR2R3一起形成一種可以包含最高至3個(gè)優(yōu)選N、S和O的雜原子并且可以任選地被-C1-3-烷基、-OH、-SH、-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-3-烷基、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-3-烷基、-S-C1-3-烷基或-O(CO)-C1-3-烷基取代一次或多次的飽和或不飽和的5-員或6-員環(huán)，R4和R5是-H或-OH，其中二者中至少一個(gè)必需是-OH。
在化合物1中，n優(yōu)選地是2。此外，R4優(yōu)選地是-OH并且R5指的是H。NR2R3優(yōu)選地是被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子，例如F、Cl、Br或I取代的苯基氨基或吡啶基氨基。R1有利地是被取代的芐基，其在苯環(huán)上具有優(yōu)選地位于該芐基亞甲基的鄰位上的取代基。此外，還特別優(yōu)選實(shí)驗(yàn)實(shí)施例中所提及的化合物。
本發(fā)明還涉及式1化合物生理學(xué)上可被耐受的鹽。
該生理學(xué)上可耐受的鹽可以用常規(guī)方法通過(guò)用無(wú)機(jī)或有機(jī)酸對(duì)堿進(jìn)行中和或者通過(guò)用無(wú)機(jī)或有機(jī)堿對(duì)酸進(jìn)行中和來(lái)獲得。適宜無(wú)機(jī)酸的實(shí)例有鹽酸、硫酸、磷酸或氫溴酸，而適宜有機(jī)酸的實(shí)例有羧酸、磺基酸或磺酸，如醋酸、酒石酸、乳酸、丙酸、乙醇酸、丙二酸、馬來(lái)酸、富馬酸、鞣酸、琥珀酸、藻酸、苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、枸櫞酸、蘋(píng)果酸、水楊酸、3-氨基水楊酸、抗壞血酸、撲酸、煙酸、異煙酸、草酸、氨基酸、甲磺酸、乙磺酸、2-羥基乙磺酸、乙烷-1，2-二磺酸、苯磺酸、4-甲基苯磺酸或萘-2-磺酸。適宜無(wú)機(jī)堿的實(shí)例有氫氧化鈉、氫氧化鉀和氨，適宜有機(jī)堿的實(shí)例有胺類(lèi)物質(zhì)，但優(yōu)選叔胺，如三甲胺、三乙胺、吡啶、N，N-二甲基苯胺、喹啉、異喹啉、α-甲基吡啶、β-甲基吡啶、γ-甲基吡啶、喹哪定或嘧啶。
此外，還可以用本身已知的方法通過(guò)用季銨化劑將具有叔氨基的衍生物轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的季銨鹽來(lái)獲得式1化合物生理學(xué)上可耐受的鹽。適宜的季銨化劑的實(shí)例有烷基鹵化物，如碘甲烷、溴乙烷和正-丙基氯化物，并且還有芳基烷基鹵化物，如芐基氯或2-苯基乙基溴化物。
此外，在包含不對(duì)稱碳原子的式1的化合物的情況中，本發(fā)明涉及D型、L型和D，L-混合物，并且在存在多個(gè)不對(duì)稱碳原子的情況下中，本發(fā)明還涉及非對(duì)映異構(gòu)形式。例如，可以用光學(xué)活性的酸用本身已知的方式將包含不對(duì)稱碳原子的并且通常為外消旋形式的式1的化合物分離成光學(xué)活性的異構(gòu)體。但是，還可以從開(kāi)始就用光學(xué)活性的起始物質(zhì)進(jìn)行制備，然后獲得作為終產(chǎn)物的相應(yīng)的光學(xué)活性或非對(duì)映異構(gòu)的化合物。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的這些化合物具有可用于治療應(yīng)用的重要的藥理學(xué)性質(zhì)。式1的化合物可以以其本身的形式被使用、彼此聯(lián)用或者與其它活性化合物聯(lián)用。本發(fā)明的化合物是磷酸二酯酶4抑制劑。因此，本發(fā)明主題的一部分是可用于治療其中抑制磷酸二酯酶4有價(jià)值的疾病的式1的化合物、其鹽以及包含這些化合物或其鹽的藥物制劑。
這些疾病包括例如關(guān)節(jié)炎癥，包括關(guān)節(jié)炎和類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及其它關(guān)節(jié)炎疾病，如類(lèi)風(fēng)濕性脊椎炎和骨關(guān)節(jié)炎。還可能可用于治療患有骨質(zhì)疏松、膿毒癥、膿毒性休克、革蘭氏陰性膿毒癥、中毒性休克綜合征、呼吸困難綜合征、哮喘或其它慢性肺疾病，如COPD、骨再吸收疾病或移植排斥反應(yīng)、或其它自體免疫性疾病，如紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化、腎小球性腎炎和葡萄膜炎、胰島素依賴性糖尿病和慢性脫髓鞘作用的患者。
此外，本發(fā)明的化合物還可用于治療感染，如病毒性感染和寄生蟲(chóng)感染，例如瘧疾的治療、利什曼病、感染誘導(dǎo)的發(fā)熱、感染誘導(dǎo)的肌肉痛、AIDS和惡病質(zhì)，并且還可用于非過(guò)敏性鼻炎。
本發(fā)明的化合物還可用作支氣管擴(kuò)張藥和用于預(yù)防哮喘。
此外，本發(fā)明式1的化合物還是嗜酸性細(xì)胞的積聚及其活性的抑制劑。因此，本發(fā)明的化合物還可用于其中嗜酸性細(xì)胞起一定作用的疾病。這些疾病包括例如氣道炎性疾病，如支氣管哮喘、過(guò)敏性鼻炎、變應(yīng)性結(jié)膜炎、特應(yīng)性皮炎、濕疹、變應(yīng)性脈管炎、嗜酸性細(xì)胞誘導(dǎo)的炎癥，如嗜酸性細(xì)胞筋膜炎、嗜酸性細(xì)胞肺炎和PIE綜合征(涉及嗜酸性粒細(xì)胞增多的肺浸潤(rùn))、蕁麻疹、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩氏病和增生性皮膚病，如牛皮癬或角化病。
本發(fā)明的主題還涉及還能用于抑制大鼠體內(nèi)LPS-誘導(dǎo)的肺嗜中性白細(xì)胞浸潤(rùn)的式1的化合物以及其鹽。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的該重要的藥理學(xué)性質(zhì)證明式1的化合物以及其鹽和包含這些化合物或其鹽的藥物制劑在治療學(xué)上可用于治療慢性阻塞性肺疾病。
本發(fā)明的化合物還具有神經(jīng)保護(hù)性并且可用于治療其中神經(jīng)保護(hù)有價(jià)值的疾病。這些疾病的實(shí)例有老年癡呆(阿耳茨海默氏病)、記憶力下降、帕金森氏病、抑郁、中風(fēng)和間歇性跛行。
本發(fā)明化合物其它可能的應(yīng)用有預(yù)防和治療前列腺疾病，如良性前列腺增生、頻尿、夜尿癥；治療失禁、由尿結(jié)石導(dǎo)致的絞痛、和男性和女性性功能障礙。
最后，本發(fā)明化合物還可用于抑制與鎮(zhèn)痛劑如嗎啡的重復(fù)應(yīng)用有關(guān)的藥物依賴性的形成，并且可用于減少與重復(fù)使用鎮(zhèn)痛劑有關(guān)的耐受性形成。
除常規(guī)的輔助物質(zhì)、載體物質(zhì)和添加劑外，用本發(fā)明化合物或其鹽的有效劑量來(lái)制備所說(shuō)的藥物。活性化合物的劑量可以根據(jù)給藥途徑、患者的年齡和體重、被治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度、以及類(lèi)似因素而變化。該日劑量可以一天給藥一次的單劑量形式被提供或被分成兩次或多次給藥并且一般為0.001-100mg。特別優(yōu)選的日給藥劑量為0.1-50mg。
適宜的給藥形式有口服、胃腸外、靜脈內(nèi)、經(jīng)皮、局部、吸入和經(jīng)鼻制劑。特別優(yōu)選的是使用本發(fā)明化合物的局部、吸入和經(jīng)鼻制劑?？梢允褂贸Ｒ?guī)的蓋侖制劑形式，如片劑、糖衣片、膠囊、可分散的粉末、顆粒、水溶液、水性或油性混懸液、糖漿、果汁或滴劑。
固體藥物形式可以包含惰性組分和載體物質(zhì)，如碳酸鈣、磷酸鈣、磷酸鈉、乳糖、淀粉、甘露醇、藻酸鹽、明膠、瓜爾膠、硬脂酸鎂、硬脂酸鋁、甲基纖維素、滑石粉、高分散的硅酸、硅油、高分子量的脂肪酸(如硬脂酸)、明膠、瓜爾膠、瓊脂或植物或動(dòng)物脂肪和油類(lèi)、或高分子量的固體聚合物(如聚乙二醇)；如果需要的話，適于口服給藥的制劑可以包含另外的所需的矯味劑和/或甜味劑。
可以將液體藥物形式滅菌和/或，任選可以包含輔助物質(zhì)，如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤(rùn)濕劑、滲透劑、乳化劑、涂布劑、增溶劑、用于調(diào)節(jié)滲透壓或用于緩沖的鹽、糖或糖醇、和/或粘度調(diào)節(jié)劑。
該類(lèi)添加劑的實(shí)例有酒石酸鹽和枸櫞酸鹽緩沖劑、乙醇和螯合劑(如乙二胺四乙酸以及其無(wú)毒的鹽)。適于用高分子量的聚合物，如液態(tài)聚氧化乙烯、微晶纖維素、羧甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖或明膠來(lái)調(diào)節(jié)粘度。固體載體物質(zhì)的實(shí)例有淀粉、乳糖、甘露醇、甲基纖維素、滑石粉、高分散的硅酸、高分子量的脂肪酸(如硬脂酸)、明膠、瓊脂、磷酸鈣、硬脂酸鎂、動(dòng)物和植物脂肪、以及高分子量的固體聚合物，如聚乙二醇。
用于胃腸外或局部應(yīng)用的油性混懸液可以是合成或半合成的植物油，如在各種情況中在脂肪鏈中具有8至22個(gè)C原子的液態(tài)脂肪酸酯，例如棕櫚酸、月桂酸、十三烷酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、豆蔻酸、山崳酸、十五烷酸、亞油酸、反油酸、brasidicacid、芥酸或油酸，可以用具有1至6個(gè)C原子的單羥基至三羥基醇對(duì)其進(jìn)行酯化，所說(shuō)的醇如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇或其異構(gòu)體、二醇或甘油。該類(lèi)脂肪酸酯的實(shí)例尤其是有可以通過(guò)商業(yè)途徑獲得的miglyols、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸異丙酯、PEG 6-癸酸、飽和脂肪酸的辛酸/癸酸酯、聚氧化乙烯甘油三油酸酯、油酸乙酯、蠟狀脂肪酸酯，如鴨尾腺體脂肪、椰子脂肪酸異丙酯、油酸油酯、油酸癸酯、乳酸乙酯、鄰苯二甲酸二丁酯、己二酸二異丙酯、多元醇脂肪酸酯等。不同粘度的硅油、或脂肪醇，如異十三烷醇、5-辛基十二烷醇、十六十八烷醇或油醇、或脂肪酸，如油酸也是適合的。還可以使用植物油，如蓖麻油、杏仁油、橄欖油、芝麻油、棉籽油、花生油或豆油。
適宜的溶劑、凝膠化劑和增溶劑是水或水可混溶的溶劑。適宜物質(zhì)的實(shí)例有醇類(lèi)，如乙醇或異丙醇、芐醇、2-辛基十二烷醇、聚乙二醇、鄰苯二甲酸酯、己二酸酯、丙二醇、甘油、二-或三丙二醇、蠟類(lèi)物質(zhì)、甲基溶纖劑、溶纖劑、酯類(lèi)、嗎啉、二噁烷、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、四氫呋喃、環(huán)己酮等等。
可以用可以在水或有機(jī)溶劑中溶解或膨脹的纖維素醚如羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素或乙基纖維素，或可溶性淀粉作為成膜劑。
還可能優(yōu)選凝膠化劑和成膜劑的混合物。在這種情況在中，特別是可以使用離子性大分子如羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸以及其鹽、半乙醇酸支鏈淀粉鈉、藻酸或丙二醇藻酸鹽如鈉鹽、γ-阿拉伯膠、黃原膠、瓜爾膠或角叉菜膠?？梢杂孟旅娴奈镔|(zhì)作為另外的制劑助劑甘油、不同粘度的石蠟、三乙醇胺、膠原、尿囊素和novantisolic acid。該制劑還可能需要使用表面活性劑、乳化劑或潤(rùn)濕劑，例如月桂基硫酸鈉、硫酸脂肪醇醚、N-月桂基-β-亞氨基二丙酸二-Na鹽、聚乙氧基化蓖麻油或脫水山梨醇單油酸酯、脫水山梨醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯類(lèi)物質(zhì)(例如吐溫)、油醇、卵磷脂、甘油單硬脂酸酯、聚氧化乙烯硬脂酸酯、烷基苯酚聚乙二醇醚、氯化十六烷基三甲銨或單-/二烷基丙二醇醚正磷酸單乙醇胺鹽。同樣可以用用于穩(wěn)定乳劑或防止活性物質(zhì)如抗氧劑例如生育酚或丁羥基茴香醚、或防腐劑如對(duì)-羥基苯甲酸酯的分解的穩(wěn)定劑如蒙脫石或膠體硅酸來(lái)制備所需的制劑。
用于胃腸外給藥的制劑可以存在于獨(dú)立的劑量單位形式，如安瓿或小瓶中。優(yōu)選使用活性化合物的溶液，優(yōu)選水溶液，并且特別是等滲的溶液，但是也可以是混懸液。這些注射形式還可以被制備成隨時(shí)可用的制劑形式或者僅僅在使用前才直接通過(guò)將活性化合物與所需的溶液或混懸劑混合來(lái)制備的形式，例如冷凍干燥物，任選可以包含其它固體載體物質(zhì)。
鼻內(nèi)制劑可以以水性或油性溶液或水性或油性混懸液的形式存在。其還可以以在使用前用適宜的溶液或混懸劑制備的冷凍干燥物的形式存在。
這些制劑是在常規(guī)的抗菌和無(wú)菌條件下制備、分裝和密封的。
本發(fā)明還涉及用于制備本發(fā)明化合物的方法。
根據(jù)本發(fā)明，R1、R2、R3、R4、R5具有上述含義和n＝1的通式1的化合物， 可以通過(guò)首先，以本身公知的方法，用?；?，優(yōu)選用亞硫酰氯或草酰氯將R1具有相同含義的式2的吲哚-3-羧酸轉(zhuǎn)化成相似的式3的吲哚-3-羧酰氯來(lái)進(jìn)行制備， 其中R4和R5是-H或-OR6，其中二者中至少一個(gè)必需是-OR6并且R6是一種保護(hù)基團(tuán)或離去基團(tuán)，特別是烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜芳基、?；⑼檠趸驶?、芳氧基羰基、氨基羰基、N-取代的氨基羰基、甲硅烷基、磺?；⑶疫€可以是螯合劑，如硼酸或磷酸化合物，并且還可以是共價(jià)或配位結(jié)合的金屬，如鋅、鋁或銅，
其中R1、R2和R3具有上述含義并且n＝1，并且R4和R5還具有式2和3所述含義的通式1的化合物可以由分離出來(lái)的式3的吲哚-3-羧酰氯通過(guò)將其與伯或仲胺進(jìn)行來(lái)獲得。該反應(yīng)有利地是在存在輔助的堿的情況下進(jìn)行的。可以使用的輔助的堿有過(guò)量的用作共反應(yīng)劑的胺——叔胺，優(yōu)選吡啶或三乙胺，和無(wú)機(jī)堿，優(yōu)選堿金屬氫氧化物或堿金屬氫化物。
可以通過(guò)消除仍然存在于R4和/或R5中的離去基團(tuán)R6來(lái)釋放出本發(fā)明式1的化合物。
既可以用酸又可以用堿來(lái)消除該-R6取代基，所說(shuō)的酸和堿如氫溴酸、鹽酸或氫碘酸，或氫氧化鈉、氫氧化鉀和碳酸鈉或碳酸鉀，以及活性路易斯酸，如AlCl3、BF3、BBr3或LiCl。各種情況中的消除反應(yīng)可以在不存在或存在另外的活化劑，如己烷-1，2-二硫醇或芐硫醇的情況下進(jìn)行，并且還可以用氫，在升高的壓力或正常壓力下，在存在適宜的催化劑如鈀或銥催化劑的情況下進(jìn)行醚裂解。
根據(jù)本發(fā)明，R1、R2和R3具有上述含義并且n＝2的通式1的化合物 可以通過(guò)首先用本身已知的方式通過(guò)將式4的吲哚化合物用草酰氯?；瑢⑵滢D(zhuǎn)化成類(lèi)似的式5的吲哚-3-基乙醛酰氯來(lái)進(jìn)行制備，
在式4中，R1具有與式1的含義相同的含義，R4和R5是-H或-OR6，其中二者中至少一個(gè)必需是-OR6并且R6是一種保護(hù)基團(tuán)或離去基團(tuán)，特別是烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜芳基、?；⑼檠趸驶?、芳氧基羰基、氨基羰基、N-取代的氨基羰基、甲硅烷基或磺?；?，并且還可以使螯合劑，如硼酸或磷酸化合物，并且還可以是共價(jià)或配位結(jié)合的金屬，如鋅、鋁或銅。
然后，由分離出來(lái)的式5的吲哚-3-基乙醛酰氯來(lái)形成R1、R2和R3具有上述含義和n＝2，并且R4和R5也具有上述對(duì)式4和5所述的含義的通式1的化合物，其是通過(guò)將所說(shuō)的式5的吲哚-3-基乙醛酰氯與伯或仲胺進(jìn)行反應(yīng)來(lái)形成所說(shuō)的通式1的化合物的。該反應(yīng)過(guò)程有利地是在存在輔助性堿的情況下進(jìn)行的。可以使用的輔助性堿有被用作共反應(yīng)劑的過(guò)量的胺，叔胺，優(yōu)選吡啶或三乙胺，并且還可以是無(wú)機(jī)堿，優(yōu)選堿金屬氫氧化物或堿金屬氫化物。
可以通過(guò)消除仍然存在于R4和/或R5中的離去基團(tuán)R6來(lái)將本發(fā)明式1的化合物釋放出來(lái)。
既可以用酸又可以用堿來(lái)消除該-R6取代基，所說(shuō)的酸和堿如氫溴酸、鹽酸或氫碘酸，或氫氧化鈉、氫氧化鉀和碳酸鈉或碳酸鉀，但也可以是活性路易斯酸，如AlCl3、BF3、BBr3或LiCl。各種情況中的消除反應(yīng)可以在不存在或存在另外的活化劑，如己烷-1，2-二硫醇或芐硫醇的情況下進(jìn)行的，并且還可以用氫，在升高的壓力或正常壓力下，在存在適宜的催化劑如鈀或銥催化劑的情況下進(jìn)行醚裂解。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例實(shí)施例1N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)-4-羥基吲哚-3-基]甲酰胺的制備這是一種制備其中n＝1的本發(fā)明式1化合物的實(shí)例性方法。
將3.22g 4-芐氧基-1-(4-氟芐基)-吲哚-3-甲酸(8.6mmol)混懸于15ml二氯甲烷中。在將其用水冷卻的同時(shí)，向其中加入1.8ml草酰氯(17.4mmol)。將該反應(yīng)混合物攪拌8小時(shí)。在此期間，4-芐氧基-1-(4-氟芐基)-吲哚-3-碳酰氯結(jié)晶出來(lái)。將其分離出來(lái)并將其溶解于18ml四氫呋喃(THF)中。
將1.14g氫化鈉(60％濃度)混懸于21ml THF中。在將該混懸液在約10℃下攪拌的同時(shí)，向其中滴加1.5g位于21ml THF中的4-氨基-3，5-二氯吡啶(8.6mmol)。在約15分鐘后，將前面所制備的4-芐氧基-1-(4-氟芐基)-吲哚-3-碳酰氯滴加到該改反應(yīng)混合物中。其后，將其全部在回流下煮沸3小時(shí)。然后，在將該反應(yīng)混合物冷卻后，向其中加入36ml乙酸乙酯和36ml水。進(jìn)行相分離并將有機(jī)相用水進(jìn)行洗滌。蒸餾掉溶劑并將殘余物用乙醇重結(jié)晶，然后將其進(jìn)行干燥。
將已經(jīng)用這種方式獲得的N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[4-芐氧基-1-(4-氟芐基)-吲哚-3-基]甲酰胺溶解于100ml二氯甲烷中。將該溶液加熱至回流，然后向其中滴加1ml位于10ml二氯甲烷中的BBr3。其后，將該混合物加熱至回流，在攪拌的同時(shí)，將其再回流3小時(shí)。在將其冷卻至10℃后，向其中加入100 1M NaHCO3溶液，從而得到8-9的pH。在此過(guò)程中，將該溫度保持在低于20℃的溫度上。隨后，將該混合物再攪拌3小時(shí)。將結(jié)晶出來(lái)的產(chǎn)物抽濾濾出，用水洗滌并干燥。將該粗品用乙醇重結(jié)晶。
收率1.4g(理論值的37.8％)熔點(diǎn)263-265℃實(shí)施例2N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-氯芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺的制備其是制備其中n＝2的本發(fā)明式1化合物的實(shí)例性方法將5.9g 7-芐氧基-1-(4-氯芐基)吲哚(17mmol)溶解于50ml叔-丁基甲基醚中。在0℃下在攪拌的同時(shí)，向其中滴加2.6ml草酰氯(30mmol)在10ml叔-丁基甲基醚的溶液。其后，將該混合物在回流下煮沸2小時(shí)。然后，在真空下蒸餾掉溶劑。得到固體殘余物形式的所得的7-芐氧基-1-(4-氯芐基)-吲哚-3-基乙醛酰氯，將其混懸于50ml四氫呋喃(THF)中。
在-5℃下，向2.7g氫化鈉在80ml THF中的混懸液中滴加2.77g 4-氨基-3，5-二氯吡啶(17mmo)在20ml THF中的溶液。其后，在攪拌的情況下，將該混合物在20℃的恒溫下保留1小時(shí)。然后，在約0℃下，向其中滴加之前所制得的7-芐氧基-1-(4-氯芐基)-吲哚-3-基-乙醛酰氯的混懸液。最后，將該反應(yīng)混合物在回流下煮沸4小時(shí)。在真空下除去溶劑。將殘余物與50ml乙酸乙酯和50ml水一起進(jìn)行攪拌。進(jìn)行相分離。將有機(jī)相用水進(jìn)行洗滌。在真空下蒸餾掉溶劑。將殘余物用異丙醇重結(jié)晶。
將已經(jīng)用這種方式獲得的N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[7-芐氧基-1-(4-氯芐基)-吲哚-3-基]乙醛酸酰胺溶解于100ml二氯甲烷中。將該溶液加熱至回流，并向其中滴加1ml BBr3在10ml二氯甲烷中的溶液。其后，將該混合物加熱至回流，在攪拌的同時(shí)，將其再回流3小時(shí)。在將該混合物冷卻至10℃后，向其中加入100ml 1M NaHCO3溶液，從而得到8-9的pH。在此過(guò)程中，將該溫度保持在低于20℃的溫度上。隨后，將該混合物再攪拌3小時(shí)。將已經(jīng)結(jié)晶出來(lái)的產(chǎn)物用抽濾濾出，用水洗滌并干燥。將該粗品用乙醇重結(jié)晶。
收率3.8g(理論值的47.5％)熔點(diǎn)245-247℃實(shí)施例3其它化合物的制備可以用給定的制備方法來(lái)制備許多其它的式1的化合物，在下面列出了其中的一些實(shí)例



本發(fā)明的化合物是有效的磷酸二酯酶4抑制劑。可以用體內(nèi)試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證其治療潛能，例如可以通過(guò)其抑制大鼠晚期哮喘反應(yīng)(嗜酸性粒細(xì)胞增多)和通過(guò)抑制LPS-誘導(dǎo)的中性白細(xì)胞增多的體內(nèi)試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證。
實(shí)施例4對(duì)磷酸二酯酶4的抑制作用用得自人多形核淋巴細(xì)胞(PMNLs)的酶制劑來(lái)對(duì)PDE4活性進(jìn)行測(cè)定。用枸櫞酸鹽使人血(血沉棕黃層)抗凝。通過(guò)在室溫(RT)下在700×g下離心20分鐘使位于上清液中的富含血小板的血漿與紅細(xì)胞和白細(xì)胞分離。通過(guò)隨后的葡聚糖沉積以及然后用Ficoll-Paque進(jìn)行的梯度離心將用于PDE4測(cè)定的PMNLs分離出來(lái)。在將細(xì)胞洗滌兩次后，通過(guò)在4℃下加入10ml低滲緩沖劑(155mM NH4Cl，10mM NaHCO3，0.1mMEDTA，pH＝7.4)使仍然存在的紅細(xì)胞在6分鐘內(nèi)溶解。將仍然完整的PMNLs再用PBS洗滌兩次并通過(guò)超聲處理使其溶解。在將其在4℃下在48000×g下離心1小時(shí)后獲得的上清液包含細(xì)胞溶質(zhì)的PDE 4部分，并將其用于所說(shuō)的PDE 4測(cè)量。
用進(jìn)行了修改的Firma Amersham Pharmacia Biotech方法，即SPA分析(閃爍迫近分析法)來(lái)測(cè)定磷酸二酯酶活性。該反應(yīng)混合物包含緩沖劑(50mM Tris-HCl(pH 7，4)，5mM MgCl2，100μM cGMP)、各種濃度的抑制劑、以及相應(yīng)的酶制劑。通過(guò)加入底物，即0.5μM[3H]-cAMP來(lái)開(kāi)始該反應(yīng)。終體積為100μl。將試驗(yàn)物質(zhì)制備成位于DMSO中的儲(chǔ)備液。該反應(yīng)混合物中的DMSO濃度為1％v/v。這種DMSO濃度對(duì)PDE活性沒(méi)有影響。在通過(guò)加入底物開(kāi)始反應(yīng)后，將這些樣品在37℃下培養(yǎng)30分鐘。通過(guò)加入規(guī)定數(shù)量的SPA小珠來(lái)終止該反應(yīng)并在一小時(shí)后，在β計(jì)數(shù)器上對(duì)這些樣品進(jìn)行測(cè)定。在存在100μM咯利普蘭情況下測(cè)定非特異性酶活性(即空白)并從試驗(yàn)值中減去這種值。用于PDE4分析的培養(yǎng)混合物包含100μM cGMP，以抑制可能存在的PDE 3的任何污染。
就對(duì)磷酸二酯酶4的抑制而言，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物的IC50值范圍為10-9至10-5M。對(duì)PDE 3、5和7型的選擇性因數(shù)為100至10 000。
將用所選擇的應(yīng)用實(shí)例所獲得的PDE 4抑制作用的結(jié)果示例性列于下表中

實(shí)施例5在用活性敏感的Brown Norway大鼠形成吸入卵清蛋白的激發(fā)后48小時(shí)對(duì)晚期嗜酸性粒細(xì)胞增多的抑制作用用已經(jīng)對(duì)卵清蛋白(OVA)活性敏感的雄性Brown Norway大鼠(200-250g)來(lái)檢測(cè)本發(fā)明物質(zhì)對(duì)肺嗜酸性細(xì)胞浸潤(rùn)所發(fā)揮的抑制作用。通過(guò)在第1、14和21天給每只動(dòng)物皮下注射10μg OVA以及20mg作為助劑的氫氧化鋁在0.5ml生理學(xué)氯化鈉溶液中的混懸液來(lái)完成敏化。除此之外，同時(shí)給每只動(dòng)物i.p.注射0.25ml Bordetalla百日咳疫苗稀釋物。在該試驗(yàn)的第28天，將這些動(dòng)物單獨(dú)放置在開(kāi)放的與頭/鼻接觸器械相連的11 Plexiglass箱中。使該動(dòng)物與包含1.0％卵清蛋白混懸液的氣霧劑進(jìn)行接觸(變應(yīng)原激發(fā))。所說(shuō)的卵清蛋白氣霧劑是用壓縮空氣(0.2MPa)-驅(qū)動(dòng)的霧化器(Bird micro霧化器，Palm Springs CA，USA)產(chǎn)生的。該接觸的時(shí)間為1小時(shí)，同時(shí)用包含0.9％氯化鈉溶液的氣霧劑對(duì)正常的對(duì)照組同樣霧化1小時(shí)。
在該變應(yīng)原激發(fā)48小時(shí)后，嗜酸性粒細(xì)胞大量遷移到動(dòng)物的肺中。同時(shí)，用過(guò)量的乙基烏拉坦(1.5g/kg體重，i.p.給藥)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉并用3×4ml Hank’s平衡溶液進(jìn)行支氣管肺泡灌洗(BAL)。然后，用自動(dòng)血球計(jì)(Bayer Diagnostics Technicon H 1 E)來(lái)測(cè)定所匯集的BAL液體中的總細(xì)胞數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)。對(duì)于各動(dòng)物而言，以106(Mio)/動(dòng)物為單位來(lái)計(jì)算BAL中的嗜酸性細(xì)胞(EOS)EOS/μ1×BAL回收率(ml)＝EOS/動(dòng)物。在各試驗(yàn)中都包含2個(gè)對(duì)照組(用生理學(xué)氯化鈉溶液霧化和用OVA溶液霧化)。
用下面的公式來(lái)計(jì)算用底物處理的試驗(yàn)動(dòng)物組中嗜酸性粒細(xì)胞增多的抑制百分比{((OVAC-SC)-(OVAD-SC))/(OVAC-SC)}×100％＝抑制％(SC＝用基質(zhì)處理和用0.9％氯化鈉溶液激發(fā)的對(duì)照組；OVAC＝用基質(zhì)處理和用1％卵清蛋白混懸液激發(fā)的對(duì)照組；OVAD＝用物質(zhì)處理和用1％卵清蛋白激發(fā)的試驗(yàn)組)在變應(yīng)原激發(fā)前2小時(shí)，以位于10％聚乙二醇300和0.5％5-羥乙基纖維素中的混懸液的形式腹膜內(nèi)或口服給予被試驗(yàn)物質(zhì)。用基質(zhì)以與實(shí)驗(yàn)物質(zhì)給藥方式相同的相同方式對(duì)對(duì)照組進(jìn)行處理。
在以10mg/kg腹膜內(nèi)給藥后，本發(fā)明的化合物將晚期嗜酸性粒細(xì)胞增多抑制了30％至100％，同時(shí)，在以30mg/kg口服給藥后，其將該增多抑制了30％至75％。
因此，本發(fā)明的化合物特別適于制備用于治療與嗜酸性細(xì)胞活性有關(guān)的疾病的藥物。
實(shí)施例6對(duì)Lewis大鼠體內(nèi)脂多糖(LPS)-誘導(dǎo)的肺中性白細(xì)胞增多癥的抑制作用用雄性Lewis大鼠(200-350g)測(cè)定本發(fā)明物質(zhì)抑制肺嗜中性白細(xì)胞浸潤(rùn)的能力。在實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，將這些動(dòng)物單獨(dú)放置在開(kāi)放的與頭/鼻接觸器械相連的11 Plexiglass箱中。使這些動(dòng)物與包含在PBS中的脂多糖懸浮液(100μg LPS/ml 0.1％羥胺溶液)的氣霧劑進(jìn)行接觸(LPS激發(fā)試驗(yàn))。該LPS/羥胺氣霧劑是用壓縮空氣(0.2MPa)驅(qū)動(dòng)的霧化器(Bird micronebulizer，Palm Springs CA，USA)產(chǎn)生的。接觸時(shí)間為40分鐘，用包含0.1％羥胺的PBS溶液的氣霧劑對(duì)正常的對(duì)照組同樣霧化40分鐘。
在LPS激發(fā)試驗(yàn)后6小時(shí)，有最大和大量嗜中性粒細(xì)胞遷移到動(dòng)物的肺中。此時(shí)，將動(dòng)物用過(guò)量的乙基烏拉坦(1.5g/kg體重，被i.p.給予)麻醉并并用3×4ml Hank’s平衡溶液進(jìn)行支氣管肺泡灌洗(BAL)。然后，用自動(dòng)血球計(jì)(Bayer Diagnostics Technicon H 1 E)來(lái)測(cè)定所匯集的BAL液體中的總細(xì)胞數(shù)和嗜中性粒細(xì)胞數(shù)。對(duì)于各動(dòng)物而言，以106(Mio)/動(dòng)物為單位來(lái)計(jì)算BAL中的嗜中性白細(xì)胞(NEUTRO)NEUTRO/μl×BAL回收率(ml)＝NEUTRO/動(dòng)物。
在各試驗(yàn)中都包含2個(gè)對(duì)照組(用0.1％羥胺的PBS溶液霧化和用100μg LPS/ml 0.1％羥胺的PBS溶液溶液霧化)。用下面的公式來(lái)計(jì)算用底物處理的試驗(yàn)組中中性白細(xì)胞增多的抑制百分比{((LPSC-SC)-(LPSD-SC))/(LPSC-SC)}×100％＝抑制％SC＝用基質(zhì)處理和用0.1％羥胺溶液激發(fā)的對(duì)照組；LPSC＝用基質(zhì)處理和用LPS(100μg/ml 0.1％羥胺溶液)激發(fā)的對(duì)照組；LPSD＝用物質(zhì)處理和用LPS(100μg/ml 0.1％羥胺溶液)激發(fā)的實(shí)驗(yàn)組。
在LPS激發(fā)試驗(yàn)前2小時(shí)，以位于10％聚乙二醇300和0.5％5-羥乙基纖維素中的混懸液的形式口服給予被試驗(yàn)物質(zhì)。用基質(zhì)以與實(shí)驗(yàn)物質(zhì)所用的給藥方式對(duì)對(duì)照組進(jìn)行處理。
在以1mg/kg口服給藥后，本發(fā)明的化合物將中性白細(xì)胞增多抑制了30％至90％，因此，其特別適于制備用于治療與嗜中性白細(xì)胞活性有關(guān)的疾病的藥物。
權(quán)利要求
1.通式1的羥基吲哚類(lèi)化合物或式1化合物的鹽類(lèi)， 其中n可以＝1或2，和R1(i)是-C1-10-烷基，其是直鏈或支鏈的，并且可以任選地被取代一次或多次，可以被-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C16烷基)(C6-14芳基)、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-SO2C6-14芳基、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-COOH、-(CO)C15烷基或-O(CO)C1-5烷基取代，被具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)的飽和或單不飽和或多不飽和的碳環(huán)取代、被具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)優(yōu)選地是N、O和S的雜原子的單-、二-或三環(huán)的飽和或單不飽和或多不飽和的雜環(huán)取代，其中所說(shuō)的C6-14芳基和碳環(huán)以及雜環(huán)取代基就其各部分而言可以任選地被取代一次或多次，其可以被-C1-6-烷基、-OH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-S-C1-6-烷基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-OSO2C1-6烷基、-COOH、-(CO)C1-5烷基或-O(CO)C1-5烷基取代，并且其中碳環(huán)和雜環(huán)取代基上的烷基各自可以任選地被-OH、-SH、-NH2、-F、-Cl、-Br、-I、-SO3H、-COOH取代一次或多次，或者(ii)-C2-10-鏈烯基，其是單不飽和或多不飽和的、直鏈或支鏈基團(tuán)，并且可以任選地被取代一次或多次，其可以被-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-SO2C6-14芳基、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-COOH、-(CO)C1-5烷基或-O(CO)C1-5烷基取代，被具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)的飽和或單不飽和或多不飽和的碳環(huán)取代、或被具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)優(yōu)選地是N、O和S的雜原子的單-、二-或三環(huán)的飽和或單不飽和或多不飽和的雜環(huán)取代，其中所說(shuō)的C6-14芳基和碳環(huán)以及雜環(huán)取代基各自可以任選地被-C1-6-烷基、-OH，-NH2，-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-S-C1-6-烷基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-OSO2C1-6烷基、-COOH、-(CO)C1-5烷基或-O(CO)C1-5烷基取代一次或多次，并且其中所說(shuō)碳環(huán)和雜環(huán)取代基上的烷基各自可以任選地被-OH、-SH、-NH2、-F、-Cl、-Br、-I、-SO3H或-COOH取代一次或多次，R2和R3(i)在各種情況中各自彼此獨(dú)立地是氫或-C1-5-烷基，其可以任選地被-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-S-C1-6-烷基、-苯基或-吡啶基取代一次或多次，-苯基，其可以任選地被-C1-3烷基、-OH、-SH、-NH2、-NHC1-3-烷基、-N(C1-3-烷基)2、-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-3烷基、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-3-烷基、-S-C1-3-烷基或-O(CO)-C1-3-烷基取代一次或多次，-吡啶基，其可任選地被-C1-3-烷基、-OH、-SH、-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-3-烷基、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-3-烷基、-S-C1-3烷基或-O(CO)-C1-3-烷基取代一次或多次，其中R2和R3僅有一個(gè)是氫并且其中碳環(huán)和雜環(huán)取代基上的烷基各自可以任選被-OH、-SH、-NH2、-F、-Cl、-Br、-I、-SO3H、-COOH、-(CO)-C1-5-烷基、或-O(CO)C1-5-烷基取代一次或多次，或(ii)NR2R3一起形成一種可以包含最高至3個(gè)優(yōu)選N、S和O的雜原子并且可以任選地被-C1-3-烷基、-OH、-SH、-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-3-烷基、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-3-烷基、-S-C1-3-烷基或-O(CO)-C1-3-烷基取代一次或多次的飽和或不飽和的5-員或6-員環(huán)，R4和R5是-H或-OH，其中二者中至少一個(gè)必需是-OH。
2.如權(quán)利要求1所述的式1化合物，其具有不對(duì)稱碳原子的D型或L型、或D，L混合物或當(dāng)存在一個(gè)以上不對(duì)稱碳原子時(shí)的非對(duì)映異構(gòu)體形式。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物，其特征在于n＝2。
4.如權(quán)利要求1至3中的一項(xiàng)所述的化合物，其特征在于R4＝-OH和R5＝-H。
5.如權(quán)利要求1至4中的一項(xiàng)所述的化合物，其特征在于-NR2R3是可以被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子取代的苯基氨基或吡啶基氨基。
6.如權(quán)利要求1至4中的一項(xiàng)所述的化合物，其特征在于R1是被取代的芐基。
7.如權(quán)利要求6所述的化合物，其特征在于所說(shuō)的芐基包含至少一個(gè)位于所說(shuō)苯基環(huán)鄰位的取代基。
8.如權(quán)利要求1至7中的一項(xiàng)所述的式1化合物，其選自N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)-4-羥基吲哚-3-基]羧酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-氯芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-氯芐基)-7-羥基吲哚-3-基]羧酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)-4-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2-氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(3-硝基芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2，6-二氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2，4-二氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2-氯芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2，6-二氯芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2-甲基芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2，6-二甲基芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-(1-己基-7-羥基吲哚-3-基)乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-(1-異丁基-7-羥基吲哚-3-基)乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-(1-環(huán)丙基甲基-7-羥基吲哚-3-基)乙醛酸酰胺，N-(2，6-二氯苯基)-[1-(4-氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(2，6-二氯苯基)-[1-(2-氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(4-吡啶基)-[1-(2-氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-吡啶基甲基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，1-(4-氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基)乙醛酸胡椒脂，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-羥基芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2-氯-6-氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2-三氟甲基芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-甲基-N-(吡啶-4-基)-[1-(2-氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(2，6-二甲基吡啶-4-基)-[1-(2-氟芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2-羧基芐基)-7-羥基吲哚-3-基]乙醛酸酰胺，以及其生理學(xué)上可耐受的鹽。
9.用于制備其中n＝1的權(quán)處要求1的式1化合物的方法，其特征在于用?；葘⑹?的吲哚3-羧酸轉(zhuǎn)化成相似的式3的吲哚-3-羧酰氯，通過(guò)與伯或仲胺反應(yīng)將其轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的酰胺，并通過(guò)消除保護(hù)基團(tuán)而將其中n＝1的式1的化合物釋放出來(lái)。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在用亞硫酰氯或草酰氯作為酰氯用于合成式3的吲哚-3-羧酰氯。
11.如權(quán)利要求9或10所述的方法，其特征在于將式3的吲哚-3-羧酰氯與伯或仲胺在存在輔助堿的情況下，優(yōu)選在存在過(guò)量的用作共反應(yīng)劑的胺、叔胺，例如吡啶或三乙胺的情況下并且還可以在存在無(wú)機(jī)堿，優(yōu)選堿金屬氫氧化物或堿金屬氫化物的情況下進(jìn)行反應(yīng)。
12.用于制備其中n＝2的權(quán)利要求1的式1化合物的方法，其特征在于用草酰氯將式4的吲哚轉(zhuǎn)化成相似的式5的吲哚-3-基乙醛酰氯，通過(guò)與伯或仲胺反應(yīng)而將其轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的酰胺，并通過(guò)消除保護(hù)基團(tuán)將其中n＝2的式1的化合物釋放出來(lái)。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于將式5的吲哚-3-基乙醛酰氯在存在輔助堿的情況下，優(yōu)選在存在過(guò)量的用作共反應(yīng)劑的胺，叔胺，例如吡啶或三乙胺的情況下并且還可以在存在無(wú)機(jī)堿，優(yōu)選堿金屬氫氧化物或堿金屬氫化物的情況下與伯或仲胺進(jìn)行反應(yīng)。
14.如權(quán)利要求1至8中的一項(xiàng)所述的式1化合物用作用于制備用于治療其中對(duì)磷酸二酯酶4進(jìn)行抑制具有治療價(jià)值的疾病的藥物的治療活性化合物的用途。
15.如權(quán)利要求1至8中的一項(xiàng)所述的式1化合物用作用于制備用于治療與嗜酸性細(xì)胞活性有關(guān)的疾病的藥物的治療活性化合物的用途。
16.如權(quán)利要求1至8中的一項(xiàng)所述的式1化合物用作用于制備用于治療與嗜中性白細(xì)胞活性有關(guān)的疾病的藥物的治療活性化合物的用途。
17.藥物，其含有除常規(guī)的生理學(xué)上可耐受的賦形劑和/或稀釋劑或輔助物質(zhì)外還包含一種或多種權(quán)利要求1至8中所述的化合物。
18.用于制備如權(quán)利要求17所述的藥物的方法，其特征在于將一種或多種如權(quán)利要求1至8中的一項(xiàng)所述的化合物與常規(guī)的藥用載體物質(zhì)和/或稀釋劑或其它輔助物質(zhì)一起加工成藥物制劑或在治療學(xué)上可應(yīng)用的形式。
19.如權(quán)利要求1至8中的一項(xiàng)所述的通式1的化合物和/或如權(quán)利要求17所述的藥物在彼此聯(lián)用或與其它藥物活性物質(zhì)聯(lián)用中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的被取代的4－或/和7－羥基吲哚、其制備方法、包含所說(shuō)化合物的藥物制劑以及所說(shuō)的是磷酸二酯酶4抑制劑的化合物作為治療可以通過(guò)抑制免疫活性細(xì)胞(例如，巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞)中磷酸二酯酶4活性而被所說(shuō)本發(fā)明化合物影響的疾病的活性物質(zhì)的應(yīng)用。
文檔編號(hào)C07D209/42GK1711082SQ200380103190
公開(kāi)日2005年12月21日 申請(qǐng)日期2003年11月14日 優(yōu)先權(quán)日2002年11月15日
發(fā)明者N·赫夫根, H·庫(kù)斯, U·埃格爾蘭德, C·倫德菲爾德特, H·哈滕豪爾, A·加斯帕里克 申請(qǐng)人:埃爾比昂股份公司