專利名稱：生產(chǎn)3'－核苷前體藥物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種制備3′-?；?′或3′-分支呋喃核糖核苷的前體藥物的方法。
背景技術(shù)：
歷史上通常通過對核苷5′-羥基?；蚱渌揎椃椒▉碓O(shè)計核苷前體藥物。Novirio制藥有限公司(現(xiàn)在的Idenix Pharmaceuticals)發(fā)現(xiàn)，通過給藥核苷的?；问娇稍黾幽承?′或3′-分支核苷(即，在2′或3′-位上具有四個非氫取代基的核苷)的穩(wěn)定性和生物利用度(如參見，WO01/90121(USSN 09/864,078)；WO01/92282(USSN 09/863,816)；PCT/IB03/03901 (USSN 10/609,298)；PCT/IB03/03246(USSN10/608,907)；和PCT/US03/20431(USSN 10/607,909))。用于制備這些核苷和核苷類似物的氨基酸酯的方法是首先使用合適的分支β-D或β-L核苷，該核苷任選可用合適的保護(hù)基團(tuán)來保護(hù)，例如甲硅烷基，接著進(jìn)行脫保護(hù)，這都可通過所屬領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法來進(jìn)行(Zhang等Tetrahedron Letters1992,331177-80；Greene等，ProtectiveGroups in Organic Synthesis，John Wiley & Sons，第2版(1991)；Kerr等，J Pharmaceutical Sciences，1994，83582-6；Tang等，J.Org.Chem.，1999 64(3)747-754；和Cavelier等，Tetrahedron Letters，1996，375131-4)。然后在合適的質(zhì)子化或非質(zhì)子化溶劑中并在合適的反應(yīng)溫度下，在任選存在合適的偶聯(lián)劑的情況下，將任選保護(hù)的分支核苷與合適的?；w偶聯(lián)在一起，供體如?；群?或酰基酸酐或活化的酸，用以提供分支核苷的2′或3′前體藥物(參見SyntheticCommunications，1978，8(5)327-33；J.Am.Chem.Soc.，1999，121(24)5661-5；Bryant等，Antimicrob.Agents Chemother.，2001，45，229-235；Standring等，Antiviral Chem.& Chemother，2001，12(Suppl.1)，119-129；Benzaria等，Antiviral Res.，2001，50，A79；Pierra等，Antiviral Res.，2001，50，A79；和Cretton-Scott等，Antiviral Res.，2001，50，A44)。偶聯(lián)劑的實例有任何能使化合物或部分與另一個相連的試劑，包括但不限于，各種碳化二亞胺、CDI、BOP和羰二咪唑。例如，在合成2′-分支核苷的3′前體藥物時，核苷優(yōu)選不進(jìn)行保護(hù)，而通過碳化二亞胺偶聯(lián)劑直接與烷醇或氨基酸殘基連接。
Matulic-Adamic等(U.S.6,248,878)報道了核苷類似物的合成，該類似物包含通過氧原子和取代的嘧啶堿在3′位上連上含磷基團(tuán)的呋喃核糖環(huán)。含磷基團(tuán)包括二硫酯或氨基磷酸酯，或可以是寡核苷酸的部分。這些化合物是前體藥物，因為它們進(jìn)一步反應(yīng)，以提供最終期望的核苷和核苷類似物?；衔镉枚嗖脚悸?lián)法合成，呋喃核糖用作起始原料，其在C-1上具有羥基或乙酸基并在C-2-、C-3和C-5上具有苯甲酰保護(hù)基以及4-OSiMe3嘧啶，用以產(chǎn)生1-(2，3，5-三-O-苯甲酰-核糖-呋喃基)-嘧啶-4-酮；接著向第一步反應(yīng)的產(chǎn)物加入含氨的甲醇以去除苯甲酰保護(hù)基；然后將DMT-C1/Pyr與未保護(hù)的化合物產(chǎn)物反應(yīng)，從而導(dǎo)致在呋喃核糖的5′-O位加成DMT。5′-O-DMT取代的呋喃核糖產(chǎn)物與TBDMS-Cl、AgNO3和Pyr/THF反應(yīng)。然后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的磷酸化以產(chǎn)生3′-含磷的化合物。所提出的每種合成方法包括至少4至7步。
1999年，McCormick等描述了鳥苷3′-碳酸鹽的制備方法，其中利用了未保護(hù)的核糖作為起始原料(McCormick等，J Am.Chem.Soc.1999，121(24)5661-5)。McCormick通過連續(xù)逐步導(dǎo)入O-和N-配糖鍵、應(yīng)用某些保護(hù)基、磺化并最后脫保護(hù)來合成化合物。McCormick等在室溫下將未保護(hù)的鳥苷與BOC-酸酐、DMAP、Et3N和DMSO反應(yīng)以直接獲得鳥苷3′-碳酸鹽。
Tang等披露制備了2′-C-β-甲基-胞嘧啶核糖核苷的氨基磷酸酯前體藥物的方法(Tang等，J Org.Chem.，1999，64747-754)。Tang等在Lewis酸(SnCl4)存在的情況下，將1，2，3，5-四-O-苯甲?；?2-C-甲基-β-D呋喃核糖與預(yù)先硅烷化的4-N-苯甲?；奏みM(jìn)行反應(yīng)，以此作為合成的第一步(同上，在748頁，方案1a)。
由于2′-和3′-分支核苷的3′-?；绑w藥物具有用作病毒疾病治療劑的重要作用，其中疾病包括黃熱病病毒、鼠疫病毒和顯著的丙型肝炎，提供將酰基選擇性地添加到核苷3′-OH的有效方法將會是有好處的。
所以，本發(fā)明的一個目的是提供一種制備2′-和3′-分支核苷的3′-?；苌锏姆椒?，該方法能用作商業(yè)規(guī)模的生產(chǎn)方法。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種這些化合物的合成方法，該方法最小化了反應(yīng)中的步驟數(shù)。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種方法，該方法僅利用無毒、不昂貴的試劑，需要最少的特殊設(shè)備或反應(yīng)條件，并在短時間內(nèi)進(jìn)行完成。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種制備這些化合物的有效方法，該方法獲得了高產(chǎn)的產(chǎn)物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及一種選擇性3′-?；秽颂腔?′或3′-分支核苷的一步方法。呋喃核糖核苷在2′和3′位帶有羥基。該方法實現(xiàn)了酰化3′-羥基而非2′-羥基的效果。
在一個
具體實施例方式
中，本發(fā)明的方法利用了不昂貴的試劑，不需要特殊的反應(yīng)條件和特殊的設(shè)備。例如，本發(fā)明的方法能以約98％的純度和約54％的產(chǎn)量提供2′或3′-分支核苷的3′-核苷前體藥物。
本發(fā)明的一個有益的方面是其僅需要一步。在一個具體實施方式
中，反應(yīng)僅進(jìn)行約1小時。在本發(fā)明一個特定具體實施方式
中，能用該方法選擇性地酯化3′-OH而不需要保護(hù)其他游離的羥基，如5′-羥基。相當(dāng)令人驚訝的是，能用該發(fā)現(xiàn)的方法很方便地實現(xiàn)選擇性?；瘞в卸嗔u基的化合物。
例如，在存在偶聯(lián)劑(如CDI)和堿(如TEA)的情況下，并可任選存在堿性催化劑(如DMAP)，例如在質(zhì)子化溶劑(如DMF和/或THF)中，發(fā)現(xiàn)將核苷與保護(hù)的有機(jī)酸反應(yīng)會導(dǎo)致向核苷3′-OH上選擇性地添加保護(hù)的有機(jī)酸，從而形成核苷的3′-前體藥物。該方法僅以一步完成，并且形成前體藥物產(chǎn)物所需的時間比現(xiàn)有方法顯著地減少。在本發(fā)明一個具體實施方式
中，產(chǎn)量超過50％。
在一個
具體實施例方式
中，本發(fā)明的方法包括將2′或3′-分支的呋喃核糖核苷類似物與?；?、低級烷醇或有機(jī)羧酸衍生物反應(yīng)，從而提供出3′-核苷衍生物的前體藥物。在另一個具體實施方式
中，本發(fā)明的方法包括將核苷類似物與羧酸衍生物反應(yīng)，除了在感興趣的基團(tuán)上，所述羧酸衍生物在所有功能基團(tuán)上具有保護(hù)基，該反應(yīng)能提供出具有酯部分的核苷前體藥物。在另一個具體實施方式
中，羧酸衍生物是天然產(chǎn)生的或非天然產(chǎn)生的氨基酸。
作為本發(fā)明的一個示例，本發(fā)明的方法包括將核苷與游離3′-OH反應(yīng)的單個步驟，游離3′-OH如4-氨基-1-(3，4-二羥基-5-羥甲基-3-甲基-四氫-呋喃-2-基)-IH-嘧啶-2-酮，反應(yīng)用BOC-纈氨酸/CDI和DMAP/TEA/DMF進(jìn)行以形成核苷的3′-O-纈氨酰酯，如2-叔-丁氧羰基氨基-3-甲基-丁酸5-(4-氨基-2-氧-2H-嘧啶-1-基)-4-羥基-2-羥甲基-4-甲基-四氫-呋喃-3-基酯。
在一個
具體實施例方式
中，BOC(t-丁氧基羰基)用作氨基酸的保護(hù)基?？墒?，本方法不限于使用BOC，任何氮保護(hù)基，如，?；蚣坠柰榛?，都可以使用(參見Greene等，Protective Groups in OrganicSynthesis，John Wiley & Sons，第3版(1999))。而且，CDI (羰基二咪唑)可以用任何偶聯(lián)劑替代，如碳化二亞胺，從而用于合成偶極的聚酰胺和多肽。
反應(yīng)能在任何質(zhì)子化溶劑中進(jìn)行。在一個具體實施方式
中，使用了DMF或DMSO(二甲亞砜)。在另一個具體實施方式
中，可將THF(四氫呋喃)用作助溶劑。
相似的，任何叔胺都可以替代TEA，例如，二異丙基乙胺和N-乙基嗎啉。
核苷和核苷類似物不僅限于示例的化合物，而是包括了取代和未取代的核苷堿，包括嘌呤堿、嘧啶堿、吡咯嘧啶、三唑吡啶、咪唑吡啶、吡唑嘧啶、和如下非天然產(chǎn)生的堿。任選取代的5-元環(huán)可在呋喃O原子的位置上包含O、S或CH2基團(tuán)。這些核苷和核苷類似物的所有立體異構(gòu)體和互變形式也都包括于此。
附圖簡要說明

圖1是一個非限制性的例子，圖示了直接酯化本發(fā)明嘧啶核苷3′-OH的方法。
圖2是一個非限制性的例子，圖示了直接酯化本發(fā)明嘌呤核苷3′-OH的方法。
圖3是現(xiàn)有技術(shù)中在鳥苷3′-OH處進(jìn)行衍生化的方案。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供一種通過選擇性?；瘉碇苽溆兴幬锘钚缘?′或3′-分支呋喃核糖核苷的3’-前體藥物的改進(jìn)方法。
令人預(yù)想不到的發(fā)現(xiàn)是，在存在偶聯(lián)劑(如CDI)、堿(如TEA)的情況下，并可任選存在堿性催化劑(如DMAP)和質(zhì)子化溶劑(如DMF和/或THF)的情況下，將2′或3′-分支核苷與保護(hù)的有機(jī)酸反應(yīng)會導(dǎo)致向核苷3′-OH上選擇性地添加保護(hù)的有機(jī)酸，從而形成核苷的3′-前體藥物。由于該方法僅以一步完成，所以形成前體藥物產(chǎn)物所需的時間比現(xiàn)有方法顯著地減少了。在本發(fā)明一個具體實施方式
中，產(chǎn)量超過50％。
該方法的另一個預(yù)想不到的好處包括使用低成本的試劑。該方法的另一個預(yù)想不到的好處包括不用極端的反應(yīng)條件。另外，因為該方法不需要特殊的設(shè)備或儀器，所以為用戶節(jié)省了額外的成本。進(jìn)一步，該方法使其容易地進(jìn)行規(guī)?；纳a(chǎn)。
圖1和2是本發(fā)明非限制性的具體實施方案。如圖1所述的方法中，4-氨基-1-(3，4-二羥基-5-羥基甲基-3-甲基-四氫-呋喃基)-1H-嘧啶-2-酮與BOC-保護(hù)的纈氨酸反應(yīng)，該纈氨酸在THF或DMF中由CDI活化。該方法所用的溶劑中，THF和DMF能用作助溶劑。TEA可以用任何叔胺替代，例如，二異丙基乙胺或N-乙基嗎啉，而且DMF可以用其他質(zhì)子化溶劑替代，例如DMSO(二甲亞砜)或NMP(N-甲基吡咯烷酮)。該示例的方法的反應(yīng)時間約為1小時。
能用該方法衍生的核苷和核苷類似物不僅限于示例的化合物，而能包括取代和未取代的核苷堿，包括嘌呤堿、嘧啶堿、吡咯嘧啶、三唑吡啶、咪唑吡啶、吡唑嘧啶、和如下非天然產(chǎn)生的堿。任選取代的5-元環(huán)可在呋喃O原子的位置上包含O、S或CH2基團(tuán)。這些核苷和核苷類似物的所有立體異構(gòu)體和互變形式也都包括于此。
方法步驟的詳細(xì)說明帶有游離或反應(yīng)性3′-OH(或-SH)的核苷可以購買到，或通過公開或未公開的方法制備，包括標(biāo)準(zhǔn)的還原、氧化、取代和/或偶聯(lián)技術(shù)。在主要的具體實施方式
中，核苷為2’或3’-分支核苷，在另一可選實施方式中，帶有游離3′-OH(或-SH)的核苷為2′-脫氧核苷，如2′-脫氧胞苷或2′-脫氧胸苷，它們能購買到，或通過公開或未公開的方法制備，包括標(biāo)準(zhǔn)的還原和偶聯(lián)技術(shù)。在本發(fā)明另一個具體實施方式
中，帶有游離3′-OH的核苷為2′-分支核苷，如4-氨基-1-(3，4-二羥基-5-羥基甲基-3-甲基-四氫-呋喃基)-1H-嘧啶-2-酮(β-D-2′-C-甲基-胞苷)或9-(2′-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-6-N-甲基-腺嘌呤，它們可以購買到，或通過公開或未公開的方法制備，包括標(biāo)準(zhǔn)的氧化、取代和/或偶聯(lián)技術(shù)。在本發(fā)明另一個具體實施方式
中，帶有游離3′-OH的核苷為3′-分支核苷，它們可以購買到，或通過公開或未公開的方法制備，包括標(biāo)準(zhǔn)的氧化、取代和/或偶聯(lián)技術(shù)。起始原料的另一個例子為β-D-2′-C-甲基-N-甲基-嘌呤。
任選保護(hù)的有機(jī)酸可以購買到，或通過公開或未公開的方法制備。在本發(fā)明一個具體實施方式
中，任選保護(hù)的有機(jī)酸是任選保護(hù)的氨基酸，如Boc-保護(hù)的氨基酸，優(yōu)選Boc-保護(hù)的L-纈氨酸。氨基酸的游離氨基可用合適的保護(hù)基選擇性地保護(hù)，優(yōu)選用?；?，如-(C＝O)-芳烷基、-(C＝O)-烷基或-(C＝O)-芳基，優(yōu)選BOC(丁氧基羰基)，保護(hù)是通過所屬領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法來進(jìn)行的，如Greene等，Protective Grours in Organic Synthesis，John Wiley and Sons，第2版，1991所教導(dǎo)的。本發(fā)明的方法不僅限于將BOC用作保護(hù)基。其他可用的保護(hù)基有，例如，取代和未取代的甲硅烷基；取代和未取代的醚基，如C-O-芳烷基、C-O-烷基，或C-O-芳基；脂肪族基團(tuán)，如?；蛞阴；?，其具有直鏈或分支的烷基部分；以及不會不利影響本發(fā)明原料、試劑和條件的任何基團(tuán)，這些是所屬領(lǐng)域技術(shù)人員已知的并如Greene等，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley and Sons， 第2版(1991)所教導(dǎo)的。
在偶聯(lián)劑和堿存在的情況下，3′-選擇性?；暮塑湛赏ㄟ^任選保護(hù)的有機(jī)酸與帶有游離3′-OH(或-SH)的核苷反應(yīng)而制備出來。合適的偶聯(lián)劑包括EDC(1-[3-(二甲基氨基)-丙基]-3-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽；也被稱作DEC)、CDI(羰基二咪唑)、BOP試劑(苯并三唑-1-基氧-三(二甲基氨基)-磷六氟磷酸)、Mitsunobu試劑(即，偶氮二甲酸二異丙酯和偶氮二甲酸二乙酯)和三苯基膦、其他碳化二亞胺或所屬領(lǐng)域技術(shù)人員已知的相似偶聯(lián)劑，然而優(yōu)選的是CDI。合適的堿包括TEA(三乙胺)、二異丙基乙胺、N-乙基嗎啉、任何脂肪族叔胺或其它合適的胺、或其組合，優(yōu)選TEA，它們可任選與堿催化劑聯(lián)合使用，如與DMAP。
任選保護(hù)的有機(jī)酸和/或偶聯(lián)劑可與核苷以任何摩爾比率反應(yīng)，該比率能使反應(yīng)以可接受的速率進(jìn)行而不產(chǎn)生過多的副產(chǎn)物，如輕微的摩爾量過量，例如相對于核苷，以約1.0至約1.5摩爾過量的偶聯(lián)劑，優(yōu)選約1.1至約1.25摩爾過量，和/或約1.0至約1.5摩爾過量的任選保護(hù)的有機(jī)酸，優(yōu)選約1.1至約1.25摩爾過量。在一個具體實施方式
中，可使用過量的堿來反應(yīng)。如果堿與堿催化劑聯(lián)合使用，如與DMAP則然后在一個具體實施方式
中，堿催化劑，如DMAP以催化量使用，例如相對于核苷，以約0.1∶1摩爾量比率。
在一個
具體實施例方式
中，同時或在合適的時間段和溫度中連續(xù)加入試劑，從而使反應(yīng)以可接受的速率進(jìn)行而不產(chǎn)生過多的副產(chǎn)物。
在一個
具體實施例方式
中，在加入核苷和/或堿之前，任選保護(hù)的有機(jī)酸與偶聯(lián)劑攪拌在一起。例如，任選保護(hù)的有機(jī)酸，如任選保護(hù)的氨基酸，例如Boc-L-纈氨酸，能與偶聯(lián)劑攪拌在一起，如CDI。該反應(yīng)可在任何溫度下完成，所述溫度要使反應(yīng)以可接受的速率進(jìn)行而不促進(jìn)分解或產(chǎn)生過多的副產(chǎn)物。優(yōu)選的條件是從約室溫至約25℃，反應(yīng)進(jìn)行約1小時至一個半小時，然后加熱至約40-50℃，持續(xù)約20-30分鐘，優(yōu)選在惰性條件下，例如在氬氣中。該活化的任選保護(hù)的有機(jī)酸可以在任何溶劑中制備，所述溶劑與溫度和試劑的溶解性相適宜。溶劑可由任何極性非質(zhì)子化溶劑組成，包括但不限于丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二氧己環(huán)、乙腈、二氯甲烷、二氯乙烷、二乙醚、吡啶、二甲基甲酰胺(DMF)、DME、二甲亞砜(DMSO)、二甲基乙酰胺、或其任何組合，然而優(yōu)選的是THF。
在一個
具體實施例方式
中，在加入任選保護(hù)的有機(jī)酸和/或偶聯(lián)劑之前，帶有游離3′-OH(或-SH)的核苷，如2′-脫氧胞苷、2′-脫氧胸苷、4-氨基-1-(3，4-二羥基-5-羥基甲基-3-甲基-四氫-呋喃基)-1H-嘧啶-2-酮或9-(2′-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-6-N-甲基-腺嘌呤或9-(2′-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-6-N-甲基-嘌呤，其與堿攪拌在一起，任選存在有堿催化劑，如DMAP，。例如，帶有游離3′-OH(或-SH)的核苷可與堿攪拌在一起，任選存在有堿催化劑，如DMAP。該反應(yīng)可在任何溫度下完成，所述溫度要使反應(yīng)以可接受的速率進(jìn)行而不促進(jìn)分解或產(chǎn)生過多的副產(chǎn)物。優(yōu)選的條件是能使核苷完全溶解在溶劑中的溫度，例如在約95-100℃進(jìn)行約20-30分鐘，優(yōu)選在惰性條件下，例如在氬氣中。該活化的核苷可以在任何溶劑中制備，所述溶劑與溫度和試劑的溶解性相適宜。溶劑可由任何極性非質(zhì)子化溶劑組成，包括但不限于丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二氧己環(huán)、乙腈、二氯甲烷、二氯乙烷、二乙醚、吡啶、二甲基甲酰胺(DMF)、DME、二甲亞砜(DMSO)、二甲基乙酰胺、或其任何組合，然而優(yōu)選的是DMF。
在本發(fā)明的一個具體實施方式
中，之后，活化的有機(jī)酸(和偶聯(lián)劑)與活化的核苷(和堿，任選存在有堿催化劑，如DMAP)攪拌在一起?？梢砸淮稳考尤雰煞N溶液或在合適的時間段和溫度內(nèi)逐漸加入，從而使反應(yīng)以可接受的速率進(jìn)行而不產(chǎn)生過多的副產(chǎn)物。在本發(fā)明的一個具體實施方式
中，活化的任選保護(hù)的有機(jī)酸在約2小時期間逐漸加入。在本發(fā)明的一個可選的具體實施方式
中，快速加入活化的任選保護(hù)的有機(jī)酸，例如，在約2分鐘期間。該反應(yīng)可在任何溫度下完成，所述溫度要使反應(yīng)以可接受的速率進(jìn)行而不促進(jìn)分解或產(chǎn)生過多的副產(chǎn)物。在一個實例中，在加入活化的任選保護(hù)的有機(jī)酸期間，反應(yīng)溶液約為80-100℃，然后在約80-90℃保持約1小時，然后冷卻至室溫，優(yōu)選在惰性條件下，例如在氬氣中。在一個具體實施方式
中，在加入活化的任選保護(hù)的有機(jī)酸期間，溫度不低于80℃。
可使反應(yīng)進(jìn)行至消耗完絕大多數(shù)的核苷，在此期間，可以監(jiān)視反應(yīng)的進(jìn)程，例如通過定期取樣進(jìn)行TLC或HPLC分析。
一旦反應(yīng)進(jìn)行到所需要的位點時，在用酸終止反應(yīng)前，任選通過現(xiàn)有已知的方法去除一些更具揮發(fā)性的溶劑(如，THF)和堿(如TEA)，所述已知的方法如在約30℃的溫度下抽真空。
在優(yōu)選的具體實施方式
中，本發(fā)明的方法在一個封閉系統(tǒng)中完成，不進(jìn)行任何中間純化步驟，即″一容器″合成。
然后，如果需要，可用酸如用乙酸將反應(yīng)溶液中和至pH約7.5至約7.75。
然后，前面任何沒有去除的溶劑(如DMF)可以通過任何現(xiàn)有已知的方法來去除，例如在約35℃的溫度下抽真空。
產(chǎn)物可以通過現(xiàn)有已知的方法從粗溶液中提取出來，方法包括標(biāo)準(zhǔn)的萃取和結(jié)晶技術(shù)。例如，粗溶液可與有機(jī)溶劑混合在一起，如乙酸乙酯、二氯甲烷、或叔丁基甲基醚(MTBE)、和水。兩層能被分層，可再用有機(jī)溶劑萃取水層，如乙酸乙酯、二氯甲烷、或叔丁基甲基醚(MTBE)。加入有機(jī)溶劑并分離所形成的水層的方法可以按需要重復(fù)許多次。合并有機(jī)層并任選用飽和鹽水溶液洗滌。然后用酸性水溶液萃取形成的有機(jī)層，例如丙二酸的水溶液。然后檢查有機(jī)層，例如通過TLC(薄層層析)進(jìn)行，從而達(dá)到所有期望的產(chǎn)物都從有機(jī)層中去除了。在一個具體實施方式
中，之后合并酸性水溶液萃取物，冷卻，例如以冰浴進(jìn)行，冷卻至約0-10℃，并中和到pH約7.4，例如用諸如三乙胺的堿來中和，從而使預(yù)期的產(chǎn)物能從溶液中沉淀出來。在一個可選的具體實施方式
中，之后合并酸性水溶液萃取物，冷卻，例如以冰浴進(jìn)行，冷卻至約0-10℃，并中和到pH約7.4，例如用諸如三乙胺的堿來中和，并用有機(jī)溶劑來萃取水層，如用MTBE。加入有機(jī)溶劑并分離所形成的水層的方法可以按需要重復(fù)許多次?？捎酶稍飫└稍锖喜⒌挠袡C(jī)層，如用硫酸鎂或硫酸鈉，并接著進(jìn)行濃縮，例如在真空條件下進(jìn)行。
如果需要，3′-選擇性酯化的核苷可通過現(xiàn)有已知的任何方法來制成藥學(xué)上可接受的鹽。藥學(xué)上可接受的鹽包括衍生自藥學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸和堿的那些鹽。合適鹽的非限制性例子包括衍生自無機(jī)酸的那些，如，鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、二碳酸、碳酸等，以及用有機(jī)酸形成的鹽，如氨基酸殘基、乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、蘋果酸、丙二酸、抗壞血酸、檸檬酸、苯甲酸、丹寧酸、棕櫚酸、褐藻酸、多聚谷氨酸、對甲苯磺酸、甲磺酸、萘磺酸、萘二磺酸、α-酮戊二酸、α-甘油磷酸和聚半乳糖醛酸。藥學(xué)文獻(xiàn)中所公知的大量其他酸中，合適的鹽包括那些衍生自堿金屬的，如鋰、鉀和鈉，堿土金屬的，如鈣和鎂。合適的鹽包括那些衍生自其它金屬陽離子的，如鋅、鉍、鋇、鋁、銅等，或由胺形成的陽離子，如氨、N，N-二芐基乙烯基-二胺、D-葡萄糖胺、四乙銨、或乙烯基-二胺。進(jìn)一步，合適的鹽包括衍生自酸和堿組合的那些，例如，丹寧酸鋅鹽等。所以，在本發(fā)明一個具體實施方式
中，在溶劑中，如諸如EtOH的極性質(zhì)子化溶劑中，在3′-位3′-選擇性酯化的核苷可與藥學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸進(jìn)行反應(yīng)，如HCl，從而提供藥學(xué)上可接受的鹽，如鹽酸鹽，以此作為最終產(chǎn)物。
示例的
具體實施例方式
在一個具體實施方式
中，所提供的選擇性酯化2′-分支呋喃核糖核苷的3′羥基位置的方法包括a)在有機(jī)溶劑中以足以溶解核苷的溫度和時間來加熱第一種2′分支呋喃核糖核苷溶液；b)向第一種溶液中加入叔胺和堿催化劑；并c)向第一種溶液中加入第二種溶液，第二種溶液包含有機(jī)溶劑中的保護(hù)的氨基酸和碳化二亞胺偶聯(lián)劑。
第一種溶液可任選加熱到至少80℃，保持至少20分鐘?？蛇x地，在步驟c)中，第一種溶液維持在至少80℃的溫度，并且以至少1小時的時間跨度來加入第二種溶液。可選地，該方法進(jìn)一步包括以至少80℃的溫度加熱合并的第一和第二種溶液約至少1個半小時。第一種溶液中的有機(jī)溶劑如極性非質(zhì)子化溶劑，例如DMF。第二種溶液中的有機(jī)溶劑如極性非質(zhì)子化溶劑，例如THF或DMF。權(quán)利要求64的方法進(jìn)一步包括用酸中和產(chǎn)物溶液。叔胺如三乙胺，堿催化劑如DMAP。保護(hù)的氨基酸可以是保護(hù)的L-纈氨酰氨基酸。
在一個
具體實施例方式
中，含N-(叔-丁氧基羰基)-L-纈氨酸的無水THF或DMF溶液加入到CDI中，并在氬氣中于25℃攪拌約1.5小時，然后于40-50℃進(jìn)行約20分鐘。4-氨基-1-(3，4-二羥基-5-羥基甲基-3-甲基-四氫-呋喃基)-IH-嘧啶-2-酮加入到裝有氬氣管的另一個長頸瓶中，其量相對于溶于DMF中的N-(叔-丁氧基羰基)-L-纈氨酸，剛好略少于1∶1的摩爾比率，向其中加入TEA和DMAP。然后4-氨基-1-(2，3-二羥基-5-羥基甲基-2-甲基-四氫-呋喃基)-1H-嘧啶-2-酮被加熱到100℃的外部溫度，持續(xù)20分鐘或直至嘧啶-2-酮衍生化合物完全溶解，之后，加入TEA和DMAP。該混合物在約97℃(外部溫度)加熱約20分鐘。然后在約2小時的時間跨度下以不低于82℃(內(nèi)部溫度)的溫度，緩慢加入含N-(叔-丁氧基羰基)-L-纈氨酸的THF溶液。接著，反應(yīng)混合物于約82℃加熱約1小時，之后將其冷卻至室溫。一旦冷卻后，在真空條件下于30℃的溫度去除TEA和THF。
接著用乙酸將溶液中和至pH約7.69，并在真空條件下于35℃的溫度去除DMF。溶液用乙酸乙酯處理，粗產(chǎn)物與乙酸乙酯和水?dāng)嚢柙谝黄?。兩層被分開，再用乙酸乙酯萃取水層。接著合并兩個有機(jī)層并用飽和鹽水溶液洗滌；用丙二酸水溶液萃取形成的有機(jī)層。然后通過TLC(薄層層析)檢查有機(jī)層，從而達(dá)到所有期望的產(chǎn)物都從有機(jī)層中去除了。
然后合并酸性水溶液萃取物，以冰浴冷卻，并用TEA中和到pH約7.4。在該pH處，固體從溶液中沉淀出來了。向水層加入乙酸乙酯，收集白色固體并真空過濾干燥，從而得到前體藥物產(chǎn)物。
用于酯化方法的合適的核苷任何帶有游離3′-OH(或-SH)的核苷或核苷類似物可用于本發(fā)明的方法中。所以，本發(fā)明包括制備核苷或核苷類似物的3′-前體藥物的方法，其包括在單個封閉系統(tǒng)中反應(yīng)(即″一容器″合成)(a)帶有游離3′-OH(或-SH)的核苷或核苷類似物；(b)任選保護(hù)的有機(jī)酸，如任選保護(hù)的氨基酸，例如Boc-L-纈氨酸；(c)偶聯(lián)劑；和(d)堿，任選存在有堿催化劑。在另一個具體實施方案中，期望獲得核苷或核苷類似物3′-前體藥物的藥學(xué)上可接受的鹽。核苷或核苷類似物3′-前體藥物的藥學(xué)上可接受的鹽可利用現(xiàn)有已知的任何方法來制備，包括諸如進(jìn)一步向核苷或核苷類似物的3′-前體藥物中加入酸性鹽。
在一個
具體實施例方式
中，堿是嘌呤堿。在另一個具體實施方式
中，堿是嘧啶堿。在另一個具體實施方式
中，堿是吡咯嘧啶。在另一個具體實施方式
中，堿是三唑吡啶、咪唑吡啶、吡唑嘧啶。在特定的具體實施方式
中，堿是選自以下組的嘧啶堿胸腺嘧啶，胞嘧啶，5-氟胞嘧啶，5-甲基胞嘧啶，包括6-氮胞嘧啶的6-氮-嘧啶，2-和/或4-巰基嘧啶，尿嘧啶，5-鹵代尿嘧啶，C5-烷基嘧啶，C5-芐基嘧啶，C5-鹵代嘧啶，C5-乙烯基嘧啶，C5-炔屬的嘧啶，C5-?；奏ぃ珻5-羥基烷基嘌呤，C5-氨嘧啶，C5-氰基嘧啶，C5-硝基嘧啶，和C5-氨基嘧啶。
在特定的下一級的具體實施方式
中，堿選自以下組
和 在另一個特定的具體實施方式
中，堿是選自以下組的嘌呤堿N6-烷基嘌呤(包括N-甲基嘌呤)，N6-?；堰?其中?；荂(O)(烷基，芳基，烷基芳基，或芳基烷基)，N6-芐基嘌呤，N6-鹵代嘌呤，N6-乙烯基嘌呤，N6-炔屬的嘌呤，N6-酰嘌呤，N6-羥基烷基嘌呤，N6-硫烷基嘌呤，N2-烷基嘌呤，N2-烷基-6-硫代嘌呤，N2-烷基嘌呤，N2-烷基-6-硫代嘌呤，5-氮雜胞嘧啶、鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤，2，6-二氨基嘌呤，和6-氯嘌呤。
在另一個特定的下一級的具體實施方式
中，堿選自以下組
和 在本發(fā)明特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH；其中R是甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、環(huán)戊基、異戊基或新戊基。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH；其中R是甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、環(huán)戊基、異戊基或新戊基。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
在本發(fā)明另一個特定的下一級的優(yōu)選具體實施方式
中，在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是
其沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH。
定義和可選的試劑此處所用的術(shù)語“保護(hù)的”，除非另外說明，其指向氧、氮或磷原子添加的基團(tuán)用以防止其進(jìn)一步反應(yīng)或用于其他目的。大量氧、氮和磷的保護(hù)基對有機(jī)合成領(lǐng)域技術(shù)人員來說是已知的。
合適保護(hù)基的例子包括不僅限于，苯甲?；蝗〈蛭慈〈耐榛?、取代或未取代的芳基、取代或未取代的甲硅烷基；取代或未取代的芳香族或脂肪族的酯，例如，芳香族基團(tuán)，像苯甲?；?、甲苯甲酰(如，p-甲苯甲酰)、硝基苯甲?；?、氯代苯甲?；?；醚基，如-C-O-芳烷基、-C-O-烷基、或-C-O-芳基；以及脂肪族基團(tuán)，像酰基或乙?；ㄈ魏稳〈蛭慈〈姆枷阕寤蛑咀宓孽；?(C＝O)-芳烷基、-(C＝O)-烷基或-(C＝O)-芳基；其中?；姆枷阕寤蛑咀宀糠挚梢允侵辨溁蚍种У?；它們都可以進(jìn)一步任選由不受反應(yīng)影響的基團(tuán)取代，所述反應(yīng)包括改進(jìn)的合成(參見Greene等，Protective Groups inOrganic Synthesis，John Wiley and Sons，第2版(1991))。為了將醚用作保護(hù)基，可直接參考Saischek等的U.S.6,229,00，在此其納入?yún)⒖?，其中它報道了將醚用作保護(hù)基可對試劑和方法條件的穩(wěn)定性帶來顯著的益處，尤其是在呋喃戊糖苷的5′-位上。這對分開、分離、和純化預(yù)期產(chǎn)物帶來了根本性的好處，并因此在產(chǎn)物的百分產(chǎn)量上帶來了根本性的好處。
氨基酸保護(hù)基優(yōu)選是BOC(丁氧基羰基)、-(C＝O)-芳烷基、-(C＝O)-烷基或-(C＝O)-芳基。在本發(fā)明一個具體實施方式
中，氨基酸保護(hù)基是BOC(丁氧基羰基)。
在本申請的全文中，術(shù)語“取代”指由一個或多個指定的取代基進(jìn)行的單或多取代。當(dāng)披露或要求單取代時，化合物可以由那個取代基取代一次或超過一次。當(dāng)披露或要求多取代時，取代的化合物可以由一個或多個所披露或要求的取代基部分獨立地取代一次或多次。
此處所用的術(shù)語″烷基″，除非另外說明，其指飽和的、直鏈的、分支的、或環(huán)狀的、伯、仲、叔烴，其一般為C1至C10，而且其明確包括甲基、三氟甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、環(huán)戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、環(huán)己基、環(huán)己基甲基、甲基戊基和二甲基丁基。術(shù)語包括取代或未取代的烷基?？梢栽谝粋€或多個位置上取代烷基的部分選自鹵素(包括氟、氯、溴或碘)，羥基(如CH2OH)，氨基(如，CH2NH2、CH2NHCH3或CH2N(CH3)2)，烷基氨基，芳基氨基，烷氧基，芳氧基，硝基，疊氮(如，CH2N3)，氰基(CH2CN)，磺酸，硫酸，膦酸，磷酸鹽或膦酸鹽，它們中的任何或全部都可以是未保護(hù)的或按需進(jìn)一步保護(hù)的，如所屬領(lǐng)域技術(shù)人員已知的和如Greene等，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley and Sons，第2版(1991)所教導(dǎo)的。
術(shù)語“烷基氨基”和“芳基氨基”各自指具有一個或多個烷基或芳基取代基的氨基。
術(shù)語″烷芳基″和″烷基芳基″指帶有芳基取代基的烷基。術(shù)語“芳烷基”和“芳基烷基”指帶有烷基取代基的芳基。
術(shù)語″鹵素″包括氯、溴、碘、和氟。
此處所用的術(shù)語″芳基″，除非另外說明，其指苯基、二苯基或萘基。術(shù)語包括取代或未取代的部分。芳基可以用一種或多種選自以下組的部分取代羥基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、硫酸、膦酸、磷酸鹽、或膦酸鹽，它們中的任何或全部都可以是未保護(hù)的或按需進(jìn)一步保護(hù)的，如所屬領(lǐng)域技術(shù)人員已知的和如Greene等，Protective Grouts in Organic Synthesis，John Wileyand Sons，第2版(1991)所教導(dǎo)的。
術(shù)語“?；卑ㄔ谄渌?b>具體實施方式
中的羧酸酯，其中在一個具體實施方式
中，酯基的非羰基部分選自直鏈、分支、或環(huán)烷基或低級烷基、包括甲氧基甲基的烷氧基烷基、包括苯甲基的芳烷基、諸如苯氧基甲基的芳氧基烷基、包括苯基的芳基，其任選用鹵素、C1至C4烷基或C1至C4烷氧基取代，諸如烷基或芳烷基磺?；幕撬狨?，其包括甲基磺酰基，單-、二-或三-磷酸酯、三苯甲基或單甲氧基三苯甲基、取代的芐基、三烷基甲硅烷基，例如二甲基-叔丁基甲硅烷基)或二苯基甲基甲硅烷基。術(shù)語″羧酸″和″羧酸酯″各自包括RC(＝O)OH和RC(＝O)O-R′的結(jié)構(gòu)。在此處，無論R或R′為何，非羰基部分都如，直鏈、分支、或環(huán)烷基或低級烷基、包括甲氧基甲基的烷氧基烷基、包括苯甲基的芳烷基、諸如苯氧基甲基的芳氧基烷基、包括苯基的芳基，其任選用鹵素、C1至C4烷基或C1至C4烷氧基取代。包括在本文范圍內(nèi)的還有磺酸酯，如烷基或芳烷基磺?；浒谆酋；?，單-、二-或三-磷酸酯、三苯甲基或單甲氧基三苯甲基、取代的芐基、三烷基甲硅烷基，例如二甲基-叔丁基甲硅烷基)或二苯基甲基甲硅烷基。
術(shù)語氨基酸包括天然產(chǎn)生的和合成的α、β、γ或δ氨基酸，其包括但不僅限于，蛋白質(zhì)中出現(xiàn)的氨基酸，即甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸、精氨酸和組氨酸。在優(yōu)選的具體實施方式
中，氨基酸是L-型的。在另一個優(yōu)選的具體實施方式
中，氨基酸是L-纈氨酰?？蛇x的，氨基酸可以是如下的衍生物丙氨酰、纈氨酰、亮氨酰、異亮氨酰、脯氨酰、苯丙氨酰、色氨酰、甲硫氨酰、甘氨酰、絲氨酰、蘇氨酰、半胱氨酰、酪氨酰、天冬酰胺酰、谷氨酰胺酰、天冬氨酰、谷氨酰、賴氨酰、精氨酰、組氨酰、β-丙氨酰、β-纈氨酰、β-亮氨酰、β-異亮氨酰、β-脯氨酰、β-苯丙氨酰、β-色氨酰、β-甲硫氨酰、β-甘氨酰、β-絲氨酰、β-蘇氨酰、β-半胱氨酰、β-酪氨酰、β-天冬酰胺酰、β-谷氨酰胺酰、β-天冬氨酰、β-谷氨酰、β-賴氨酰、β-精氨?；颚?組氨酰。
術(shù)語“非天然氨基酸”指具有氨基末端但在自然界中沒發(fā)現(xiàn)的羧酸。該術(shù)語要包括D-氨基酸和L-氨基酸以及其互變或立體異構(gòu)形式。
術(shù)語核苷堿包括但不限于嘌呤或嘧啶堿。嘌呤或嘧啶堿的例子包括但不限于腺嘌呤，N6-烷基嘌呤，N6-?；堰?其中酰基是C(O)(烷基，芳基，烷基芳基，或芳基烷基)，N6-芐基嘌呤，N6-鹵代嘌呤，N6-乙烯基嘌呤，N6-炔屬的嘌呤，N6-?；堰?，N6-羥基烷基嘌呤，N6-硫烷基嘌呤，N2-烷基嘌呤，N2-烷基-6-硫代嘌呤，胸腺嘧啶，胞嘧啶，5-氟胞嘧啶，5-甲基胞嘧啶，包括6-氮胞嘧啶的6-氮嘧啶，2-和/或4-巰基嘧啶，尿嘧啶，包括5-氟尿嘧啶的5-鹵代尿嘧啶，C5-烷基嘧啶，C5-芐基嘧啶，C5-鹵代嘧啶，C5-乙烯基嘧啶，C5-乙炔基嘧啶，C5-?；奏?，C5-羥基烷基嘌呤，C5-氨嘧啶，C5-氰基嘧啶，C5-硝基嘧啶，和C5-氨基嘧啶，N2-烷基嘌呤，N2-烷基-6-硫代嘌呤，5-氮雜胞嘧啶基，5-氮雜尿嘧啶基，三唑吡啶基，咪唑吡啶基，吡咯嘧啶基，和吡唑嘧啶基。嘌呤堿包括但不限于鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2，6-二氨基嘌呤、和6-氯嘌呤。堿上的功能性氧和氮基團(tuán)可以按需要或期望來保護(hù)。合適的保護(hù)基對所屬領(lǐng)域技術(shù)人員來說是公知的，其包括三甲基甲硅烷基、二甲基己基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基和叔丁基二苯基甲硅烷基、三苯甲基、烷基、和諸如乙酰基和丙?；孽；?、甲基磺酰基、和p-甲苯基磺?；??？蛇x的，嘌呤或嘧啶堿可任選被取代，從而形成可行的能在體內(nèi)裂解的前體藥物。合適取代基的例子包括?；糠?、胺或環(huán)丙基(如，2-氨基、2，6-二氨基或環(huán)丙基鳥苷)。
本發(fā)明的方法不限于核苷、保護(hù)的氨基酸酯、和示例的試劑的應(yīng)用。本發(fā)明合適的可選的試劑都可用在以上的那些地方中。例如，可以用二異丙基乙胺、N-乙基嗎啉、或任何脂肪族叔胺來代替TEA(三乙胺)；DMF(二甲基甲酰胺)可以用任何極性質(zhì)子化溶劑代替，例如DMSO(二甲亞砜)，然而從反應(yīng)混合物中處理和去除的方便性上考慮，優(yōu)選DMF；而CDI可由任何能偶聯(lián)的試劑代替，包括但不限于，Mitsunobu試劑(即，偶氮二甲酸二異丙酯和偶氮二甲酸二乙酯)和三苯基膦或除了羰基二咪唑之外的碳化二亞胺。
本發(fā)明的方法不限于將BOC用作保護(hù)基。其他保護(hù)基如取代或未取代的甲硅烷基；取代或未取代的醚基，如-C-O-芳烷基、-C-O-烷基、或-C-O-芳基；脂肪族基團(tuán)，如?；蛞阴；?，其具有直鏈或分支的烷基部分；以及不會不利影響本發(fā)明可用的原料、試劑和條件的那些基團(tuán)，其為所屬領(lǐng)域技術(shù)人員已知并如Greene等，Protective Groupsin Organic Synthesis，John Wiley and Sons，第2版(1991)所教導(dǎo)的。
本發(fā)明的方法不限于核苷、保護(hù)的氨基酸酯、和示例的試劑的應(yīng)用。本發(fā)明合適的可選的試劑都可用在以上的那些地方中。例如，可以用任何合適的胺來代替TEA(三乙胺)，包括但不限于，二異丙基乙胺、N-乙基嗎啉、或任何脂肪族叔胺；DME(1，2-二甲氧基乙烷)可以用任何合適的極性非質(zhì)子化溶劑代替，例如THF(四氫呋喃)或任何醚。在剛加入MgSO4之前和之后用THF洗滌產(chǎn)物液可以用丙酮洗滌來代替。當(dāng)然，對于大規(guī)模的流程，優(yōu)選丙酮為溶劑。
另外，DMF(二甲基甲酰胺)可以用任何極性溶劑代替，例如，DMSO(二甲亞砜)，然而從反應(yīng)混合物中處理和去除的方便性上考慮，優(yōu)選DMF。
EDC(1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽(也被稱為DEC))可由任何能偶聯(lián)的試劑代替，包括但不限于，CDI(羰基二咪唑)、BOP試劑(苯并三唑-1-基氧-三(二甲基氨基)-磷六氟磷酸)、或所屬領(lǐng)域技術(shù)人員已知的相似偶聯(lián)劑。
任何有機(jī)溶劑，如甲苯，可替代乙腈。氨是用于替代甲醇中的甲醇鈉的可選試劑，而諸如DMSO的極性溶劑可替代DMF。任何其他硅烷化試劑都可替代TBDPSCI，任何氟化鹽都可替代NH4F，而諸如TFA的其他酸可用于替代HCl。
本發(fā)明基本的優(yōu)點是其能以一步進(jìn)行。其他優(yōu)點包括使用不昂貴的試劑、并且僅需要所屬領(lǐng)域技術(shù)人員公知的普通方法和設(shè)備，而不需要復(fù)雜的步驟和昂貴的儀器。
本發(fā)明在以下非限制性的實施例中將進(jìn)一步舉例說明。本文中運用的實施例用以闡明、幫助理解本發(fā)明。它們是本發(fā)明方法和產(chǎn)品的示例，但不要而且并不應(yīng)該理解成以任何方式限制本發(fā)明及以下提出的權(quán)利要求。在不偏離本發(fā)明精神和范圍的情況下，等同的、相似的或合適的溶劑、試劑、或反應(yīng)條件可以替代在此處所述的那些溶劑、試劑、和/或反應(yīng)條件。
實施例實施例12-叔-氧羰基氨基-3-甲基-丁酸5-(4-氨基-2-氧-2H-嘧啶-1-基)-4-羥基-2-羥甲基-4-甲基-四氫-呋喃-3-基酯N-(叔-丁氧羰基)-L-纈氨酸(46.50g，214mmol.)、羰基二咪唑(34.70g，214mmol.)和無水四氫呋喃(1000mL)的溶液裝在2L圓底細(xì)頸瓶中，在氬氣下于25℃攪拌1.5小時，然后于40-50℃攪拌20分鐘。在另一個的5L的5-頸圓底細(xì)頸瓶中，裝上高過頭的攪拌器、冷卻塔、溫度計、加樣漏斗和氬氣導(dǎo)管，向其中加入4-氨基-1-(3，4-二羥基-5-羥基甲基-3-甲基-四氫-呋喃-2-基)-1H-嘧啶-2-酮(50.0g，195mmol.)和無水N，N-二甲基甲酰胺(1000mL)。該混合物于100℃加熱20分鐘直至所有的嘧啶-2-酮衍生化合物溶解，然后向溶液中加入三乙胺(500mL)和4-二甲基氨基吡啶(2.38g，19mmol)。接著該混合物于97℃加熱20分鐘并通過加樣漏斗以2小時的時間段緩慢加入四氫呋喃溶液，維持溫度不低于82℃。反應(yīng)混合物于82℃加熱1小時并通過HPLC(產(chǎn)物＝68％，SM＝11％，并且約在12分鐘處的雜質(zhì)＝17％，去除二甲基氨基吡啶)監(jiān)視過程。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后在真空條件下于30℃去除三乙胺和四氫呋喃。然后用乙酸將溶液中和至pH7.69。在真空條件下于35℃去除N，N-二甲基甲脒并用乙酸乙酯(2×200mL)處理。粗產(chǎn)物與乙酸乙酯(500mL)和水(300mL)攪拌在一起。分開雙層，并用乙酸乙酯(500mL)萃取水層。合并的有機(jī)層用飽和鹽水溶液(500mL)洗滌。接著用丙二酸的水溶液(4×400mL，10wt.％)萃取有機(jī)層。用TLC(硅土，二氯甲烷中含20％甲醇)檢測有機(jī)層以確定所有預(yù)期的產(chǎn)物都從有機(jī)層中去除了。合并酸性水提取物，在冰浴上冷卻，并用三乙胺中和至pH7.40，從而使固體從溶液中析出。然后向水層加入乙酸乙酯。通過真空過濾來收集白色固體。真空干燥獲得固體，獲得81.08g 99.01純度(HPLC)的產(chǎn)物。
實施例29-(2′-C-甲基-3′-O-纈氨酰-β-D-呋喃核糖基)-6-N-甲基腺嘌呤二鹽酸N-(叔-丁氧羰基)-L-纈氨酸((8.84g，41mmol)、羰基二咪唑(6.60g，41mmol)的無水四氫呋喃溶液(200mL)在氬氣下于室溫攪拌1小時，然后于50℃攪拌30分鐘。在另一個細(xì)頸瓶中，裝上高過頭的攪拌器、冷卻塔、溫度計、加樣漏斗和氬氣導(dǎo)管，使9-(2′-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-6-N-甲基-腺嘌呤(1，圖2，10g，34mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(200mL)中。該溶液于100℃加熱，加入三乙胺(100mL)，溫度穩(wěn)定在96℃?？焖偌尤牖罨腂oc-纈氨酸(在2分鐘的時間段內(nèi))并將溫度降至81℃，然后穩(wěn)定在85℃。反應(yīng)混合物在該溫度下攪拌，然后冷卻到25℃。在43℃減壓去除三乙胺和四氫呋喃。然后將溶液降溫至10℃并用乙酸中和至pH 7.7。接下來，用二氯甲烷(100mL)和鹽水(100mL)稀釋混合物。激烈振蕩該混合物10分鐘，分層，用2×100mL二氯甲烷萃取水層。用10％丙二酸水溶液(4×100mL)萃取有機(jī)層。向合并的丙二酸提取物中加入叔丁基甲基醚(MTBE，200mL)，將混合物冷卻至10℃，并加入三乙胺以達(dá)到pH7.1。分層并用MTBE(2×200mL)萃取水層。用無水硫酸鈉干燥合并的MTBE層并真空濃縮成微黃色的白色固體。真空干燥獲得固體，得到14.64g(88％產(chǎn)率)97.87％純度(HPLC AUC)的Boc-val核苷(2，圖2)。
化合物2(13.0g，26.3mmol)的乙醇溶液(130mL)在圓底細(xì)頸瓶中攪拌，所述細(xì)頸瓶裝有氬氣導(dǎo)管和冷卻塔。向該溶液加入濃縮的鹽酸(37％，6.5mL)。反應(yīng)溫度升高，回流。在導(dǎo)入鹽酸一小時后開始形成固體。3小時后，HPLC顯示僅有0.6％的起始原料了。然后真空過濾收集固體并用乙醇(80mL)和MTBE(40mL)洗濾塊。然后在40℃用MTBE(100mL)粉碎粗產(chǎn)物。真空干燥產(chǎn)物3小時后，獲得8.50g(70％)產(chǎn)物(3，圖2)，純度為98.55％(HPLC，AUC)。
1H NMR(DMSO-d6)δppm 9.7(寬s，1H)，8.9-8.8(m，4H，)，8.45(s，1H)，6.04(s，1H，H-1′)，5.43(d，1H，H-3′，J＝5.1Hz)，4.30-4.28(m，1H，H-4′)，3.96-3.95(m，1H，CH)，3.85-3.64(m，2H，H-5,H-5″)，3.10(d，3H，CH3NH，J＝2.1Hz)，2.3-2.2(m，1H，CH)，1.02-0.97(m，6H，(CH3)2CH)，0.92(s，3H，CH3)。13C NMR(DMSO-d3)δppm 167.99，150.26，146.58，140.67，11 8.99，91.32，80.61，78.89，74，56，29.29，29.0，25.50，20.48，18.55，17.72。
本發(fā)明可以其優(yōu)選的具體實施方式
所述的那樣為參考。根據(jù)本發(fā)明前面詳細(xì)的描述，本發(fā)明的變體和修改對于所屬領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。
權(quán)利要求
1.一種選擇性酯化2′-分支呋喃核糖核苷的3′羥基位置的方法，任選在一容器系統(tǒng)中，包括反應(yīng)a)2′分支呋喃核糖核苷，b)任選保護(hù)的有機(jī)酸；c)偶聯(lián)劑；和d)堿，任選在堿催化劑存在的情況下。
2.權(quán)利要求1的方法，其中2′分支呋喃核糖核苷是下式的2′-C-甲基分支核苷 其中堿是嘌呤、嘧啶、吡咯嘧啶、三唑吡啶、咪唑吡啶、或吡唑嘧啶。
3.權(quán)利要求2的方法，其中堿是嘧啶堿。
4.權(quán)利要求2的方法，其中嘧啶堿選自以下組胸腺嘧啶，胞嘧啶，5-氟胞嘧啶，5-甲基胞嘧啶，包括6-氮胞嘧啶的6-氮-嘧啶，2-和/或4-巰基嘧啶，尿嘧啶，5-鹵代尿嘧啶，C5-烷基嘧啶，C5-芐基嘧啶，C5-鹵代嘧啶，C5-乙烯基嘧啶，C5-炔屬的嘧啶，C5-?；奏?，C5-羥基烷基嘌呤，C5-氨嘧啶，C5-氰基嘧啶，C5-硝基嘧啶，和C5-氨基嘧啶。
5.權(quán)利要求3的方法，其中嘧啶堿選自以下組 和
6.權(quán)利要求2的方法，其中堿是嘌呤堿。
7.權(quán)利要求6的方法，其中嘌呤堿選自以下組N6-烷基嘌呤，N6-?；堰?其中酰基是C(O)(烷基，芳基，烷基芳基，或芳基烷基)，N6-芐基嘌呤，N6-鹵代嘌呤，N6-乙烯基嘌呤，N6-炔屬的嘌呤，N6-酰嘌呤，N6-羥基烷基嘌呤，N6-硫烷基嘌呤，N2-烷基嘌呤，N2-烷基-6-硫代嘌呤，N2-烷基嘌呤，N2-烷基-6-硫代嘌呤，5-氮雜胞嘧啶、鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤，2，6-二氨基嘌呤，和6-氯嘌呤。
8.權(quán)利要求6的方法，其中嘌呤堿選自以下組 和
9.權(quán)利要求16的方法，其中堿是吡咯嘧啶。
10.權(quán)利要求16的方法，其中堿是三唑吡啶、咪唑吡啶、或吡唑嘧啶。
11.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
12.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
13.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
14.權(quán)利要求1的方法，其中要3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
15.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
16．權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
17．權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
18．權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下；其中R是甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、環(huán)戊基、異戊基或新戊基。
19.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
20.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 并且其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
21.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
22.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 并且其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
23.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
24.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
25.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
26.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
27.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
28.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
29.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
30.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下；其中R是甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、環(huán)戊基、異戊基或新戊基。
31.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
32.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
33.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
34.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
35.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
36.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
37.權(quán)利要求1的方法，其中要3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
38.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
39.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
40.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
41.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
42.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
43.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
44.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
45.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
46.權(quán)利要求1的方法，其中要在3′-位選擇性酯化的2′-C-甲基分支核苷是 其中反應(yīng)任選發(fā)生在沒有保護(hù)游離的2′-和/或5′-OH的情況下。
47.權(quán)利要求1的方法，其中任選保護(hù)的有機(jī)酸是任選保護(hù)的氨基酸。
48.權(quán)利要求50的方法，其中任選保護(hù)的氨基酸是任選保護(hù)的L-纈氨酰。
49.權(quán)利要求51的方法，其中任選保護(hù)的L-纈氨酰是Boc-L-纈氨酰。
50.權(quán)利要求1的方法，其中偶聯(lián)劑選自以下的組EDC(1-[3-(二甲基氨基)-丙基]-3-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽)；CDI(羰基二咪唑)、BOP試劑(苯并三唑-1-基氧-三(二甲基氨基)-磷六氟磷酸)、以及Mitsunobu試劑和三苯基膦。
51.權(quán)利要求1的方法，其中偶聯(lián)劑是碳化二亞胺。
52.權(quán)利要求51的方法，其中偶聯(lián)劑是CDI。
53.權(quán)利要求1的方法，其中堿選自以下的組TEA(三乙胺)、二異丙基乙胺和N-乙基嗎啉。
54.權(quán)利要求1的方法，其中堿是叔胺。
55.權(quán)利要求54的方法，其中叔胺是三乙胺。
56.權(quán)利要求1的方法，其中堿催化劑是DMAP。
57.權(quán)利要求1的方法，其中任選保護(hù)的有機(jī)酸和核苷的摩爾比率是1.0至1.5。
58.權(quán)利要求57的方法，其中摩爾比率是1.0至約1.2。
59.權(quán)利要求1的方法，其中偶聯(lián)劑和核苷的摩爾比率是1.0至1.5。
60.權(quán)利要求59的方法，其中摩爾比率是1.0至1.2。
61.權(quán)利要求1的方法，其中反應(yīng)在至少80℃的溫度進(jìn)行至少20分鐘。
62.權(quán)利要求61的方法，其中反應(yīng)在氬氣中進(jìn)行。
63.權(quán)利要求1的方法，其中2′-分支呋喃核糖核苷溶于溶劑中。
64.一種選擇性酯化2′-分支呋喃核糖核苷的3′羥基位置的方法，包括a)在有機(jī)溶劑中以足以溶解核苷的溫度和時間來加熱第一種2′分支呋喃核糖核苷溶液；b)向第一種溶液中加入叔胺和堿催化劑；并c)向第一種溶液中加入第二種溶液，第二種溶液包含有機(jī)溶劑中的保護(hù)的氨基酸和碳化二亞胺偶聯(lián)劑。
65.權(quán)利要求64的方法，其中在步驟a)中，第一種溶液在至少80℃加熱至少20分鐘。
66.權(quán)利要求64的方法，其中在步驟c)中，第一種溶液維持在至少80℃的溫度，并且以至少1小時的時間跨度來加入第二種溶液。
67.權(quán)利要求66的方法，進(jìn)一步包括在至少80℃的溫度加熱合并的第一種和第二種溶液至少約一個半小時。
68.權(quán)利要求64的方法，其中在第一種溶液中的有機(jī)溶劑是DMF。
69.權(quán)利要求64的方法，其中在第二種溶液中的有機(jī)溶劑是THF或DMF。
70.權(quán)利要求64的方法，進(jìn)一步包括用酸中和產(chǎn)物溶液。
71.權(quán)利要求64的方法，其中叔胺是三乙胺并且堿催化劑是DMAP。
72.權(quán)利要求64的方法，其中保護(hù)的氨基酸是保護(hù)的L-纈氨酰氨基酸。
73.權(quán)利要求1的方法，其中反應(yīng)發(fā)生在溶劑或溶劑混合物中，其中溶劑或多種溶劑是極性非質(zhì)子化溶劑。
74.權(quán)利要求73的方法，其中溶劑選自以下的組丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二氧己環(huán)、乙腈、二氯甲烷、二氯乙烷、二乙醚、吡啶、二甲基甲酰胺(DMF)、DME、二甲亞砜(DMSO)、二甲基乙酰胺、及其組合。
全文摘要
本發(fā)明提供一種進(jìn)行選擇性3′－?；秽颂腔?′或3′－分支核苷的一步方法。這些化合物可用作抗病毒劑，尤其可用于治療需要施治的宿主中的黃病毒(Flaviviridae)感染。
文檔編號C07H19/073GK1751058SQ200380109820
公開日2006年3月22日 申請日期2003年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月23日
發(fā)明者理查德·斯托勒, 阿德爾·穆薩, 史蒂文·馬蒂厄 申請人:埃迪尼克斯(開曼)有限公司