專利名稱：用作HIV整合酶抑制劑的四氫－4H－吡啶并[1,2－а]嘧啶和相關(guān)化合物的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶、其相關(guān)化合物及其藥學上可接受的鹽，它們的合成、以及它們作為HIV整合酶抑制劑的應用。本發(fā)明化合物及其藥學上可接受的鹽在預防或治療由HIV引起的感染和在治療AIDS或延遲AIDS的發(fā)生中是有用的。
背景技術(shù)：
一種命名為人類免疫缺陷病毒(HIV)的逆轉(zhuǎn)錄病毒是包括免疫系統(tǒng)進行性破壞(獲得性免疫缺陷綜合征，AIDS)和中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)變性在內(nèi)的綜合性疾病的病原體。這種病毒就是先前已知的LAV、HTLV-III或ARV。逆轉(zhuǎn)錄病毒復制的一個通常特征是將前病毒DNA病毒-編碼的整合酶插入到宿主細胞基因組，這是HIV在人體T-淋巴細胞和單核細胞內(nèi)復制的必需步驟。相信整合過程在三個步驟由整合酶介導由病毒DNA序列裝配穩(wěn)定的核蛋白質(zhì)復合體；從線性前病毒DNA的3′端分裂兩條核苷酸；在宿主靶位制造的錯列的切口上共價結(jié)合前病毒DNA的凹進的3′OH端。過程的第四步，已形成的裂口的修復合成，可以由細胞酶完成。
HIV的核苷酸序列顯示在一個開放閱讀框架中存在pol基因[Ratner，L.等，Nature，313，277(1985)]。氨基酸序列同系物提供證據(jù)表明pol系列編碼逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和HIV蛋白酶[Toh，H.等，EMBO J.4，1267(1985)；Power，M.D.等，Science，231，1567(1986)；Pearl，L.H.等，Nature，329，351(1987)]。所有這些三種酶都顯示對HIV的復制很重要。
已知用作HIV復制的抑制劑的某些抗病毒化合物在治療AIDS和類似疾病方面是有效的藥物，包括逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑如疊氮胸苷(AZT)和依法韋倫以及整合酶抑制劑如茚地那韋和奈非那韋。本發(fā)明的化合物是HIV整合酶抑制劑和HIV復制抑制劑。在體外對整合酶的抑制作用和HIV在細胞內(nèi)的復制的抑制作用是體外在HIV感染細胞中抑制由重組的整合酶催化的鏈轉(zhuǎn)換反應的直接結(jié)果。本發(fā)明的特別優(yōu)勢在于高度特異性地抑制HIV整合酶和HIV復制。
發(fā)明簡述本發(fā)明涉及新的吡啶并嘧啶衍生物和相關(guān)化合物。這些化合物在抑制HIV整合酶、預防由HIV引起的感染、治療由HIV引起的感染以及在預防、治療AIDS和/或ARC和延遲AIDS和/或ARC的發(fā)作中是用的，不論是以化合物或者是其藥學上可接受的鹽或者水合物(適當?shù)臅r候)，或者作為藥用組合物成分，與其它的HIV/AIDS抗病毒劑、抗感染藥、免疫調(diào)節(jié)劑、抗生素或疫苗一起聯(lián)合使用與否。更具體地說，本發(fā)明包括式I化合物，以及其藥學上可接受的鹽 R1是H或NR2R5；R2是CH3；R5是1)C(O)CH2SO2CH3，2)C(O)C(O)N(CH3)2，3)SO2N(CH3)2，或4)SO2R20，其中R20是 或
或者任選R2和R5和與其連結(jié)的氮原子一起形成錯誤！從編輯域代碼不能產(chǎn)生目標體，或 R3是氫；R4是1)對氟芐基，2)4-氟-3-甲基芐基，3)3-氯芐基，或4)3-氯-4-甲基芐基；R12和R14均為H，除非當R5是C(O)C(O)N(CH3)2以及R4是對氟芐基和n是1時，則R12和R14或者都是H或者都是CH3；和n為等于的0、1或2的整數(shù)。
本發(fā)明還包括含有本發(fā)明的化合物的藥用組合物和制備這些藥用組合物的方法。本發(fā)明還包括治療AIDS的方法、延遲AIDS的發(fā)生的方法、預防AIDS的方法、預防由HIV引起的感染的方法，和治療由HIV引起的感染的方法。
本發(fā)明的其它實施方案、方面和特征或者在隨后的說明、實施例和附加的權(quán)利要求書中進一步加以描述或者從中體現(xiàn)出來。
發(fā)明詳述本發(fā)明包括上述的式I化合物，及其藥學上可接受的鹽。這些化合物和其藥學上可接受的鹽是HIV整合酶的抑制劑。
本發(fā)明的一個實施方案是式I化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R1是NR2R5；n為等于1或2的整數(shù)；以及所有其它的變量如上述最初的定義。
本發(fā)明的另一個實施方案是式I化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R1是NR2R5；R2是CH3；R5是
1)C(O)C(O)N(CH3)2或2)SO2R20，其中R20是 R3是氫；R4是對氟芐基或4-氟-3-甲基芐基；R12和R14均為H，除非當R5是C(O)C(O)N(CH3)2以及R4是對氟芐基和n是1時，R12和R14或者都是H或者都是CH3；和n為等于的1或2的整數(shù)。
本發(fā)明還包括了式II化合物，或其藥學上可接受的鹽 其中R1是氫、NR2R5、OR2、SR2、SOR2、SO2R2、SO2NR2R5，或OC(O)NR2R5；R3是氫；R4是 R2是1)氫，2)CH3，或3) 和R5是1)C(O)CH3，2)C(O)CH2SO2CH3，3)CH3，4)C(O)C(O)N(CH3)2，5)SO2CH3，6)SO2N(CH3)2，7)C(O)CH2N(CH3)2，8)SO2CH2SO2CH3，9)C(O)CF3，10) 或12) 或R2和R5，與其連接的氮原子一起，形成選自以下的雜環(huán) 和 本發(fā)明的另一個實施方案是選自于下表1所列化合物的化合物，或其藥學上可接受的鹽。
本發(fā)明的其它實施方案包括如下(a)包含式I化合物和藥學上可接受的載體的藥用組合物。
(b)藥用組合物，它包含通過組合(例如，混合)有效量的式I化合物和藥學上可接受的載體制備的產(chǎn)品。
(c)(a)或(b)的藥用組合物，它進一步包含有效治療量的選自HIV/AIDS抗病毒劑、免疫調(diào)節(jié)劑和抗感染藥的HIV感染/AIDS治療藥物。
(d)(c)的藥用組合物，其中的HIV感染/AIDS治療藥物是選自HIV整合酶抑制劑、非-核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的抗病毒劑。
(e)用于抑制HIV整合酶、治療或預防由HIV引起的感染，或預防、治療AIDS或延遲AIDS的發(fā)生的組合，所述組合為有效治療量的式I化合物和有效治療量的選自HIV/AIDS抗病毒劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗感染藥的HIV感染/AIDS治療藥物。
(f)(e)的組合，其中的HIV感染/AIDS治療藥物是選自HIV蛋白酶抑制劑、非-核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的抗病毒劑。
(g)一種在有此需要的患者中抑制HIV整合酶的方法，該方法包括給予所述患者有效治療量的式I化合物。
(h)一種在有此需要的患者中治療或預防由HIV引起的感染的方法，該方法包括給予所述患者有效治療量的式I化合物。
(i)(h)的方法，其中式I化合物是與至少一種抗病毒劑的有效治療量聯(lián)合給予的，所述抗病毒劑選自HIV蛋白酶抑制劑、非-核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。
(j)一種在有此需要的患者中預防、治療AIDS或延遲AIDS的發(fā)生的方法，該方法包括給予所述患者有效治療量的式I化合物。
(k)(j)的方法，其中所述化合物是與有效治療量的至少一種抗病毒劑聯(lián)合給予的，所述抗病毒劑選自HIV蛋白酶抑制劑、非-核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。
(l)一種在有此需要的患者中抑制HIV整合酶的方法，該方法包括給予所述患者(a)、(b)、(c)或(d)的藥用組合物或者(e)或(f)的組合。
(m)一種在有此需要的患者中預防或治療由HIV引起的感染的方法，該方法包括給予所述患者(a)、(b)、(c)或(d)的藥用組合物或者(e)或(f)的組合。
(n)一種在有此需要的患者中預防、治療AIDS或延遲AIDS的發(fā)生的方法，該方法包括給予所述患者(a)、(b)、(c)或(d)的藥用組合物或者(e)或(f)的組合。
本發(fā)明還包括將本發(fā)明的化合物(i)用于，(ii)作為藥物用于，或(iii)用來制備藥物用于(a)抑制HIV整合酶，(b)治療或預防由HIV引起的感染，或(c)預防、治療AIDS或延遲AIDS的發(fā)生。在這些應用中，本發(fā)明化合物能夠任選與一種或多種選自HIV/AIDS抗病毒劑、抗感染藥和免疫調(diào)節(jié)劑的HIV/AIDS治療藥物聯(lián)合使用。
本發(fā)明化合物可有不對稱的中心，并且除了特別提到之外，可作為立體異構(gòu)體的混合物或單獨的非對映異構(gòu)體，或?qū)τ丑w的混合物，且所有異構(gòu)的形式均被包含在本發(fā)明中。
本發(fā)明的N-取代的羥基嘧啶酮化合物也可作為其互變異構(gòu)體出現(xiàn)，例如以下式I化合物的互變異構(gòu)體 可以理解本發(fā)明包括所有式I(或II)的羥基嘧啶酮化合物的互變異構(gòu)體，包括單一的和混合的。
本發(fā)明化合物在抑制HIV整合酶、預防或治療由人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的感染和預防、治療或延遲作為后果的病理疾病如AIDS的發(fā)生是有用的。預防AIDS、治療AIDS、延遲AIDS的發(fā)生，或預防或治療由HIV引起的感染被定義為包括，但不限于，治療廣泛的HIV感染狀態(tài)AIDS，ARC(AIDS相關(guān)復癥)，有癥狀的和無癥狀的，和實際的或潛在的暴露于HIV。例如，本發(fā)明化合物在治療疑似通過諸如輸血、體液交換、叮咬、意外針刺或手術(shù)中暴露于病人血液的途徑而暴露于HIV后的HIV感染中是有用的。
本發(fā)明的代表性化合物的抑制作用在一項整合酶的鏈轉(zhuǎn)移活性的測定中已經(jīng)得到檢驗。該測定以在WO 02/30930中描述的方式進行。對于重組整合酶來說，該測定還與Wolfe，A.L.等，J.Virol.1996，701424-1432一致，除了(i)該測定使用預先裝配的整合酶鏈轉(zhuǎn)移復合物；(ii)鏈轉(zhuǎn)移反應是在抑制劑存在下，在2.5mM MgCl2中，用0.5-5nM的3′FITC標記的靶DNA底物進行的；和(iii)使用堿性磷酸酶綴合的抗FTTC抗體和化學發(fā)光堿性磷酸酶底物檢測鏈轉(zhuǎn)移產(chǎn)物。在該項測定中，本發(fā)明的代表性化合物表現(xiàn)出鏈轉(zhuǎn)移活性的抑制作用。例如，在下表1列出的化合物在整合酶測定中得到檢驗并證明IC50約為5微摩爾或更少。對使用預先裝配的復合物操作該項測定的進一步的說明在Hazuda等，J.Virol.1997，717005-7011；Hazuda等，Drug Design and Discovery 1997，1517-24；和Hazuda等，Science 2000，287646-650中被發(fā)現(xiàn)。
本發(fā)明的某些代表性化合物在一項測定T-淋巴細胞急性HIV感染的抑制作用中也已經(jīng)得到檢驗，依照Vacca，J.P.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1994，914096中所述操作。這些化合物--包括在下表1列出的化合物--被證明IC95約為20微摩爾或更少。
本發(fā)明化合物還能夠作為HIV核糖核酸酶H(RNase H)的抑制劑起作用。利用RNA-和DNA-依賴的聚合酶和RNase H酶的活性，1型人類免疫缺陷病毒(HIV-1)逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)在細胞進入后催化基因組RNA轉(zhuǎn)化為雙鏈前病毒DNA。HIV-1 RT是由p66和p51多肽組成的不對稱二聚體。RT的催化活性在p66亞基的離散部位上傳導；即，p66的N末端催化RNA-和DNA-依賴的聚合酶活性，和在C末端的p15結(jié)構(gòu)域催化RNase H的活性。RNase H對于裂解在逆轉(zhuǎn)錄過程中RNA:DNA異源雙鏈中間體的RNA鏈是必需的。本發(fā)明化合物能夠選擇性地結(jié)合并抑制HIV-1RT的RNase H結(jié)構(gòu)域。所述化合物的RNase H抑制活性可用本領域熟知的適當?shù)臏y定方法檢測，例如在Shaw-Reid等，J.Biol.Chez.2003，278(5)2777-2780中所述的測定法。因此，本發(fā)明包括在需要這樣的抑制的患者中抑制HIV-1 RNase H的方法，該方法包括給予所述患者有效量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明還包括將本發(fā)明化合物(i)用于、(ii)當作藥物用于、或(iii)用來制備藥物用于抑制HIV RNase H。
本發(fā)明化合物可以藥學上可接受的鹽的形式給藥。術(shù)語“藥學上可接受的鹽”指的是具有母體化合物的效力的且并不是生物學的或其它方面不合需要(例如，既不是毒性也不是其它的對其接受者有害)的鹽。適合的鹽包括酸加成鹽，其可由例如本發(fā)明化合物的溶液與藥學上可接受的酸諸如鹽酸、硫酸、醋酸、三氟乙酸或苯甲酸混合而成。當本發(fā)明化合物攜帶一個酸性部分，則其適合的藥學上可接受的鹽可包括堿金屬鹽(例如，鈉或鉀鹽)、堿土金屬鹽(例如，鈣或鎂鹽)，和與合適的有機配基形成的鹽如季銨鹽。還有，如果存在酸(-COOH)或醇基團，藥學上可接受的酯可被用于修飾所述化合物的溶解性或水解特性。
為了抑制HIV整合酶或HIV RNase H、預防或治療HIV感染或者預防、治療AIDS或延遲AIDS發(fā)作的目的，本發(fā)明化合物可以口服、胃腸外(包含皮下注射、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、胸骨內(nèi)注射或輸注技術(shù))、通過吸入噴霧、或經(jīng)直腸，以含有有效量的本發(fā)明化合物和常規(guī)的無毒的藥學上可接受的載體、輔料及賦形劑的藥用組合物的單位劑量的形式給予。
涉及本發(fā)明化合物的術(shù)語“給予”和其不同說法(例如，“給予”化合物)是指向需要治療的個體提供所述化合物或化合物的前藥。當本發(fā)明化合物或其前藥與一種或多種活性藥物(如用于治療HIV感染或AIDS的抗病毒藥)聯(lián)合提供時，“給予”和其不同說法分別被理解為包括同時和序貫給予本發(fā)明化合物或其前藥和其它藥物。
在此使用的術(shù)語“組合物”意指包含由特定量的特定成分組成的產(chǎn)品，以及任何由于直接或間接地混合了特定量的特定成分而制成的產(chǎn)品。
“藥學上可接受的”指藥用組合物的成分必須彼此適配并對其接受者無害。
術(shù)語“對象”(作為選擇，在此處適宜作為“患者”解)在此處使用是指被治療、觀察或試驗的客體動物，優(yōu)選哺乳類動物，更優(yōu)選人。
在此處使用的術(shù)語“治療有效量”意指活性化合物或藥劑的劑量，其在組織、系統(tǒng)、動物或人引起研究者、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)生所探尋的生物學或醫(yī)學反應，包括緩解或預防待治療或預防的疾病和病癥的癥狀。該術(shù)語在此還包含足夠抑制HIV整合酶和/或RNase H以及因此引起正探尋的反應的活性化合物的劑量。當活性化合物(例如，活性成分)作為鹽被給予時，則活性成分的劑量作為化合物的游離酸或游離堿的形式來參考。
藥用組合物可以是口服的懸浮液或片劑或膠囊、鼻噴霧劑、無菌可注射制劑，例如無菌可注射的水性或油性懸浮液或栓劑的形式。這些組合物能夠用本領域熟知的方法和某些賦形劑制備。適合的方法和成分在Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，A.RGennaro編輯，Mack出版社，1990中描述，其全文通過引用結(jié)合到本文中。
本發(fā)明化合物可以按哺乳類(例如，人)體重每天0.001到1000mg/kg范圍的劑量以單一劑量或分劑量口服給予。一個優(yōu)選的劑量范圍是按體重每天0.01到500mg/kg以單一劑量或分劑量口服。另一個優(yōu)選的劑量范圍是按體重每天0.1到100mg/kg單一劑量或分劑量口服。為了口服給藥，組合物可以以含有1.0到500毫克的活性成分的片劑或膠囊的形式提供，具體地說，含有1、5、10、15、20、25、50、75、100、150、200、250、300、400和500毫克的活性成分，以根據(jù)癥狀調(diào)整被治療的患者的劑量。對任何具體患者用量的特定劑量水平和頻率可能不同并且將依多種因素不同而異，這些因素包括使用的特定化合物的活性、該化合物的代謝穩(wěn)定性和作用的時間長度、年齡、體重、健康狀況、性別、飲食、給藥的方式和次數(shù)、排泄速率、聯(lián)合用藥情況、具體病情的嚴重程度和接受治療的患者情況。
如上所提到的，本發(fā)明還涉及本發(fā)明的HIV整合酶抑制劑化合物與一種或多種治療HIV感染或AIDS有用的藥物的聯(lián)合應用。例如，不管是在暴露前和/或暴露后的期間，本發(fā)明化合物可以有效地與有效量的一種或多種在治療HIV感染或AIDS上是有用的HIV/AIDS抗病毒劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗感染藥或疫苗聯(lián)合給予，例如在WO 01/38332的表1或在WO 02/30930的表中公開的那些，此兩篇文獻的全文通過引用結(jié)合到本文中。將會理解的是將本發(fā)明化合物與HIV/AIDS抗病毒劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗感染藥或疫苗聯(lián)合用藥的范圍不限于上文提到的WO 01/38332和WO 02/30930的表中所列出的那些，但是原則上包括了與任何對治療AIDS有用的藥用組合物的任何組合。HIV/AIDS抗病毒劑和其它藥物將通常以其本領域報道的常規(guī)劑量范圍和給藥方案用于這些組合中，包括例如，在Physicians′Desk Reference，第57版，Thomson PDR，2003中描述的用量。在這些組合中本發(fā)明化合物的劑量范圍與那些在上面闡明的一樣。
在本說明書、尤其是流程和實施例中使用的縮寫包括如下AIDS＝獲得性免疫缺陷綜合征，ARC＝AIDS相關(guān)復征，Bn＝芐基，CBZ(或Cbz)＝芐氧羰基，DBU＝1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯，DMAD＝乙炔二羧酸二甲基酯，DMF＝N，N-二甲基甲酰胺，DMSO＝二甲基亞砜，EtOAc＝乙酸乙酯，F(xiàn)IA-MS＝流注分析-質(zhì)譜測定，h＝小時，HIV＝人類免疫缺陷病毒，HPLC＝高效液相色譜，IPA＝異丙醇，LDA＝二異丙基氨化鋰，Me＝甲基，MeOH＝甲醇，NMP＝N-甲基吡咯烷酮，NMR＝核磁共振，Pd/C＝披鈀碳催化劑，RP-HPLC＝反相HPLC，TFA＝三氟乙酸，THF＝四氫呋喃。
本發(fā)明化合物可按照隨后的反應流程和實施例、或其修正的方法，使用易得的起始原料和試劑容易地制備。在下面顯示的反應中，也可使用本身為本領域的普通專業(yè)人員所知的變量，但是沒有提及過多細節(jié)。此外，按照隨后的反應方案和實施例，其它制備本發(fā)明化合物的方法將容易地為本領域的普通專業(yè)人員所明白。除非另外定義，列于流程1、A、B、C或D的變量有以下含義P^是氫或保護基團，例如酯，但不限于苯甲酸酯和新戊酸酯一樣的酯，或者醚，但不限于芐基醚，所述保護基團通常在使甲酯轉(zhuǎn)移為酰胺所采用的條件下被除去或者用不同的步驟除去。保護基團典型地用于合成和/或純化理由。
R^是氫或C1-6烷基。
Y是氫或NRsaRsb。
Rsa是C1-6烷基、C(O)Rsc、C(O)C(O)NRscRsd、SO2Rsc、SO2NRscRsd、C(O)CH2SO2Rsc、C(O)CH2NRscRsd、SO2CH2SO2Rsc、或CH(CH3)Rsc或者Rsa和Rsb，與它們連接的氮原子一起，形成含1或2個雜原子的雜環(huán)。
Rsb是氫、C1-6烷基，或C(O)CF3、或Rsa和Rsb，與它們連接的氮原子一起，形成含1或2個雜原子的雜環(huán)。
Rsc是C1-6烷基、芳基、未取代的或被C1-6烷基、C(O)CH2SO2C1-6烷基或(CH2)1-6芳基取代的5-或6-元雜芳基環(huán)。
Rsd是C1-6烷基。
Rs5是Rsc、C(O)NRscRsd、CH2SO2Rsc、CH2NRscRsd、NRscRsd或CH2SO2Rsc。
Rs1是氫。
Rs2是CH2Rse，其中Rse是未取代的芳基或被鹵素取代的芳基。
本發(fā)明化合物能夠通過使適當?shù)陌放c合適取代的下列物質(zhì)偶合制備，這些物質(zhì)是3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸烷基酯(或羧酸或鹵化物)或3-羥基-4-氧代-4，6，7，8-四氫吡咯并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸烷基酯(或羧酸或鹵化物)或3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸烷基酯(或羧酸或鹵化物)或3-羥基-4-氧代-6，7，8，9，10，11-六氫-4H-嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸烷基酯(或羧酸或鹵化物)，如流程1所示。
流程1 化合物1使羧酸衍生物與胺偶合形成甲酰胺的方法為本領域所熟知。適合的方法已有描述，例如在Jerry March，Advanced Organic Chemistry，第3版，John Wiley & Sons，1985，pp.370-376中。式1-2的胺可用在Richard Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCH出版公司，1989，pp 385-438中描述的方法，或其常規(guī)變化的方法來制備。
流程A描述了酰胺(carboxamide)A-5的通用合成法。在適當?shù)臏囟?如從20到150℃下)，在諸如DMF、甲醇、乙醇、甲苯、NMP的溶劑中，甲酯A-4可與胺1-2反應，生成最終化合物A-5。甲酯A-4可通過三個合成途徑之一的方法被合成。在第一個途徑中，在堿的存在下，鹽酸脒A-1a(sX＝H；sY＝H)可與2-(芐氧基)-3-氧代琥珀酸二甲酯反應，得到保護的甲酯中間體A-2，后者能夠容易地去保護得到甲酯A-4。在第二個途徑中，從芐氧基氨基甲酸叔丁基酯經(jīng)三個步驟得到的amidoxine A-1b(sX＝OH；sY＝H)可與DMAD反應得到環(huán)狀的中間體A-3a，后者能夠在適當?shù)娜軇?如二甲苯)中經(jīng)過加熱重排獲得甲酯A-5。在第三條途徑，amidoxyme A-1c(sX＝H；sY＝OH)可以在適當?shù)娜軇?如乙腈)中與DMAD反應得到中間體A3-b，后者經(jīng)過在適當?shù)娜軇?如二甲苯)中加熱重排獲得甲酯A-4。所有這三種途徑都能夠適用于包含環(huán)狀取代基的脒和amidoxymes。
流程A在實施例1中被作為例證。
流程A 流程B顯示了制備本發(fā)明化合物的方法，這些化合物在3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺核的9-位上含有胺、醚、硫醚、亞砜或砜基團。從甲酯A-4開始，通過先用適合的保護基團保護在A-4上的羥基基團(如轉(zhuǎn)化為苯甲酸酯或新戊酸酯或者轉(zhuǎn)化為芐氧基)，然后用溴化劑(如NBS)與被保護的A-4接觸，可得到溴代衍生物B-1。然后溴代衍生物B-1可用親核試劑(″Nu″；如胺、硫醇或醇化物)處理后得到(分離或不分離)甲酯中間體B-2，其與所需的胺反應得到終產(chǎn)物B-3。如果親核試劑是硫醇或包含可氧化的硫，獲得亞砜或砜的氧化步驟可能包括在流程中。如果親核試劑包含酯，該酯在合成B-3后采用常規(guī)化學方法轉(zhuǎn)化為酰胺。流程B在實施例2中被作為例證。
流程B 流程C描述了含有脂肪族環(huán)取代基諸如酰胺、磺酰胺、磺酰脲、氨基甲酸酯或脲的衍生物C-3或C-4的通用合成法。溴代衍生物B-1可被芐胺C-1處理，然后氫化或直接與胺C-1a反應得到中間體C-2，然后后者可用胺1-2處理(分離或不分離)，再與羧酸偶合或者與碳酰氯(或磺酰氯或氨磺酰氯)或異氰酸酯反應得到終產(chǎn)物C-3。如果C-3包含Rs4＝Rs3O(CO)CO，則它能夠進一步與諸如胺的親核試劑反應得到產(chǎn)物C-4。流程C在實施例3、4和6中被作為例證。最后兩個步驟可以顛倒。
流程C 流程D顯示了純手性的化合物C-3、C3a，b和C-4的合成。溴代衍生物B-1被手性胺D-1置換生成非對映異構(gòu)體混合物，隨后或同時移去保護基團。在9-位的氨基基團被醛或酮D-2還原性地烷基化生成中間體D-3。非對映異構(gòu)體混合物用結(jié)晶法或色譜法能夠被分離生成單一的非對映異構(gòu)體D-3a，b。Rs6能夠被氫化去除得到純手性的C-2a，b中間體。隨后與胺1-2反應和與羧酸偶合或用酰氯(或磺酰氯或氨磺酰氯)或異氰酸酯處理，得到最終的純手性產(chǎn)物C-3a，b。當在流程C中存在外消旋化合物C-3的情況下，能夠?qū)嵤└郊拥牟襟E以產(chǎn)生純手性的C-4化合物。流程D在實施例5和7中被作為例證。
流程D P^＝H或保護基團Rs6＝手性烷基殘基(例如(S)-a-甲基芐基)Rsp，Rsq＝H或C1-6烷基Rs4＝Rs5CO或Rs5SO2或Rs5(Rs6)NSO2或Rs5OCO，Rs3O(CO)CORs5(Rs6)NCOsX＝Cl或Br或OH以下的實施例僅用作說明本發(fā)明和其實踐。這些實施例不被解釋為對本發(fā)明在范圍或精神上的限制。
實施例1N-(4-氟代芐基)-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺步驟1a芐氧基(4-氰基丁基)氨基甲酸叔丁基酯(Bergeron，R.J.，McManis，J.S.，Tetrahedron 45(16)，4939-4944(1989)。
向芐氧基氨基甲酸叔丁基酯的無水二甲基甲酰胺的溶液中加入5mol％的碘化鈉并分批加入1.36當量氫化鈉(60％分散于礦物油中)?；旌衔镉谑覝叵聰嚢?5min后加入1.05當量4-氯戊腈。將混合物加熱至85℃并攪拌3.5h?；旌衔锢鋮s至室溫后，用水淬滅并以乙醚萃取。濃縮合并的有機相，用半飽和的含水硫代硫酸鈉、水和鹽水洗滌。有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并在減壓下濃縮。使用石油醚洗去油性殘余物，在高真空下干燥，得到淡黃色油狀的芐氧基(4-氰基丁基)氨基甲酸叔丁基酯。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(m，5H)，4.84(s，2H)，3.45(t，J＝6.4Hz，2H)，2.34(t，J＝6.8Hz，2H)，1.70(m，4H)，1.52(s，9H).MS m/z271(M+H)+.
步驟2a1-(芐氧基)哌啶-2-亞胺鹽酸鹽將芐氧基(4-氰基丁基)氨基甲酸叔丁基酯溶解于4M HCl的1，4-二氧六環(huán)溶液中，將該混合物在室溫攪拌18h。減壓下除去溶劑，殘余物用乙酸乙酯和乙醚處理。形成的固體用乙醚洗滌、過濾并在高真空下干燥，得到淺黃色固體狀的1-(芐氧基)哌啶-2-亞胺鹽酸鹽鹽酸鹽。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.53(s，1H)，8.97(s，1H)，7.57-7.41(m，5H)，5.05(s，2H)，3.67(t，J＝6.0Hz，2H)，2.64(t，J＝6.4Hz，2H)，1.90-1.84(m，2H)，1.69-1.63(m，2H).MS m/z205(M+H)+.
步驟3a2-亞氨基哌啶-1-醇鹽酸鹽將(1-芐氧基)哌啶-2-亞胺鹽酸鹽的甲醇溶液(包含披鈀碳(10％w/w))在氫氣壓下攪拌3h。濾掉催化劑，溶液在減壓下濃縮至干燥。殘余物用乙醚研研、過濾并在高真空下干燥，得到淺黃色固體狀的2-亞氨基哌啶-1-醇鹽酸鹽。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.76(s，1H)，8.82(s，1H)，8.49(s，1H)，3.63(t，J＝6.0Hz，2H)，2.63(t，J＝6.0Hz，2H)，1.87(m，2H)，1.66(m，2H).13C-NMR(150MHz，DMSO-d6)δ159.06，50.92，25.76，22.01，17.22.
MS m/z115(M+H)+.
步驟4a2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-5，6，7，8-四氫-2H-[1，2，4]噁二唑并[2，3-a]吡啶-2-羧酸甲酯向2-亞氨基哌啶-1-醇鹽酸鹽的氯仿溶液中加入三乙胺。該混合物在室溫下攪拌5分鐘，然后冷卻至0℃并在攪拌中滴加1.2當量乙炔二羧酸二甲基酯。移去冷浴并在室溫下攪拌該混合物1小時。減壓除去溶劑，使該溶液在乙酸乙酯和半飽和的氯化銨水溶液之間分配。水相進一步用乙酸乙酯萃取。合并的有機相經(jīng)硫酸鈉干燥且通過硅膠過濾。在真空中去除溶劑得到淡黃色油狀的2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-5，6，7，8-四氫-2H-[1，2，4]噁二唑并[2，3-α]吡啶-2-羧酸甲酯。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ3.82(s，3H)，3.70(s，3H)，3.51(m，1H)，3.36(m，1H)，3.31(d，J＝16.6Hz，1H)，2.98(d，J＝16.6Hz，1H)，2.53(m，2H)，1.94(m，2H)，1.74(m，2H).13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ169.15，168.88，164.97，103.27，55.71，52.97，51.84，42.26，26.06，23.49，22.83.
MS m/z257(M+H)+.
步驟5a3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯將2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-5，6，7，8-四氫-2H-[1，2，4]噁二唑并[2，3-a]吡啶-2-羧酸甲酯的無水鄰二甲苯溶液放入雙頸圓底燒瓶中。燒瓶上裝有溫度計并用隔膜封閉。加熱該混合物至148-150℃達5h。移去熱浴并將混合物在室溫放置16h。向含有沉淀物的該混合物中加入乙醚。5分鐘后濾去沉淀物，用乙醚洗滌并在真空中干燥。得到淡棕色固體狀的產(chǎn)物3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.03(s，1H)，3.86(t，J＝6.0Hz，2H)，3.80(s，3H)，2.75(t，J＝6.8Hz，2H)，1.90-1.70(m，4H).13C-NMR(150MHz，DMSO-d6)δ165.81，158.65，148.60，143.10，127.07，51.98，42.87，30.32，20.91，18.40.
MS m/z225(M+H)+.
下面的過程是合成3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯的備選途徑。
步驟1b2-(芐氧基)-3-氧代琥珀酸二甲酯將(芐氧基)乙酸甲酯(1eq)和草酸二甲酯(1.2eq)在干燥的THF中的溶液冷卻至-78℃并滴加入LDA(2M在THF-庚烷中，1.2eq)。攪拌一小時后移去冷浴，并且繼續(xù)再攪拌一小時。于0℃通過倒入冷的1N HCl水溶液猝滅反應，水相用EtOAc萃取；有機相用鹽水洗滌，干燥并濃縮得到無須進一步純化即可使用的粗品。
步驟2b3-(芐氧基)-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯于室溫往在步驟1b制備的氧代琥珀酸酯(1eq)的MeOH溶液中加入商業(yè)上可獲得的2-亞氨基哌啶鹽酸鹽(1.5eq)。在另外滴加純的DBU(4.5eq)后，攪拌反應混合物2天。蒸發(fā)掉溶劑得到殘余物，使其溶于EtOAc中并且用1N HCl和鹽水洗滌；有機相在Na2SO4上干燥，去除溶劑。粗品無須進一步純化即可使用。
用快速色譜法(石油醚/EtOAc 1∶2到1∶5)純化該產(chǎn)物的分析用樣品，并且得到以下光譜數(shù)據(jù)1H-NMR(400Mz，CDCl3)δ7.49-7.30(m，5H)，5.25(s，2H)，4.00(t，J＝6.2Hz，2H)，3.86(s，3H)，2.94(t，J＝6.6Hz，2H)，2.01-1.95(m，2H)，1.92-1.87(m，2H).
13C-NMR(75MHz，CDCl3)δ164.1，159.3，154.1，141.1，140.6，136.0，128.1，127.8，127.7，73.8，52.2，42.7，30.9，21.0，18.4.
MS m/z315(M+H)+.
步驟3b3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯將在步驟2b制備的中間體3-(芐氧基)-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯溶解于MeOH中并于室溫下向其中加入有催化作用的10％Pd/C。在H2氣下攪拌混合物3.5小時。濾過催化劑并蒸發(fā)掉甲醇得到殘余物，于后者中加入乙醚；過濾得到淡棕色固體狀的3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯，其光譜特性與在步驟5a中描述的化合物相同。
步驟6N-(4-氟芐基)-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺將在步驟3b或步驟5a中得到的3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯溶液和4-氟代芐胺(2當量)的甲醇溶液進行攪拌并加熱到65℃達22h。減壓除去溶劑并用制備型RP-HPLC，使用水(0.1％TFA)和乙腈(0.1％TFA)作為洗脫劑(柱C18)得到標題產(chǎn)物。凍干合并的產(chǎn)物部分，獲得蓬松的白色物質(zhì)樣的標題化合物。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.12(s，1H)，9.35(m，1H)，7.36(m，2H)，7.15(m，2H)，4.44(m，2H)，3.84(t，J＝6.4Hz，2H)，2.80(t，J＝6.8Hz，2H)，1.90-1.73(m，4H).MS m/z318(M+H)+.
實施例2N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-嗎啉-4-基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺鹽酸鹽步驟13-(苯甲酰氧基)-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯往3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯(按照實施例1所得到的)的吡啶溶液中加入苯甲酸酐(1.55當量)。將該混合物在室溫中攪拌16h。減壓除去溶劑，使該殘余物在乙酸乙酯和0.5M含水HCl之間分配。水相用乙酸乙酯萃取以及合并的有機相用0.5M含水HCl、水和鹽水洗滌。有機相經(jīng)硫酸鈉干燥、過濾和在真空中濃縮至干。用快速色譜法(洗脫劑石油醚/乙酸乙酯，1∶2)得到無色固體狀的標題化合物。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.07(m，2H)，7.78(m，1H)，7.62(m，2H)，3.86(t，J＝6.0Hz，2H)，3.74(s，3H)，2.92(t，J＝6.4Hz，2H)，1.93-1.81(m，4H).MS m/z329(M+H)+.
步驟23-(苯甲酰氧基)-9-溴代-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯將3-(苯甲酰氧基)-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯、N-溴代-琥珀酰亞胺(1.2當量)和聯(lián)苯甲?；^氧化物(70％，0.13當量)在四氯化碳中的混合物在回流下攪拌一小時。將該混合物冷卻至室溫，濾去琥珀酰亞胺，在減壓下除去溶劑?？焖偕V法(洗脫劑石油醚/乙酸乙酯，1∶1)后得到淺黃色油狀的3-(苯甲酰氧基)-9-溴代-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.08(m，2H)，7.79(m，1H)，7.63(m，2H)，5.58(m，1H)，4.24(m，1H)，3.77(s，3H)，3.72(m，1H)，2.43-2.35(m，1H)，2.30-2.05(m，3H).MS m/z409/407(M+H)+.
步驟3N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-嗎啉-4-基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺。
向3-(苯甲酰氧基)-9-溴代-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯的DMF溶液中加入嗎啉(3當量)，將該混合物在室溫攪拌1h。在減壓下除去溶劑，殘余物用乙醚研磨。將該粗制物質(zhì)溶解于甲醇中，加入4-氟代-芐胺(3當量)，將該混合物在65℃攪拌1.5h。在減壓下除去溶劑，用制備型RP-HPLC提純產(chǎn)物，使用水(0.1％TFA)和乙腈(0.1％TFA)作為洗脫劑(柱C18)。凍干合并的產(chǎn)物部分，并再溶解于1N HCl中。在減壓下除去溶劑，使殘余物從水/乙腈中凍干得到淡粉紅色的蓬松物質(zhì)樣的N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-嗎啉-4-基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺鹽酸鹽。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.34(s，1H)，10.99(s，1H)，10.47(s，1H)，7.44(m，2H)，7.16(m，2H)，4.85(m，1H)，4.60-4.40(m，3H)，4.10-3.85(m，4H)，3.60-3.05(m，5H被水信號掩蓋)，2.35-2.15(m，2H)，2.03-1.80(m，2H).MS m/z403(M+H)+.
實施例3(+/-)-9-[[(二甲氨基)磺?；鵠(甲基)氨基]-N-(4-氟芐基)-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺C-3步驟19-[芐基(甲基)氨基]-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯鹽酸鹽往攪拌的溴代衍生物3-(苯甲酰氧基)-9-溴代-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯(在實施例2，步驟2中獲得)的無水二甲基甲酰胺的溶液中加入N-芐基-N-甲胺(3當量)。將該混合物于室溫攪拌1.5h，之后加入乙醚和2M HCl的乙醚溶液。攪拌該混合物5分鐘，過濾形成的沉淀物以及溶液在減壓下被濃縮至干。得到淺黃油狀的標題粗產(chǎn)物，其包含過量的N-芐基-N-甲胺鹽酸鹽，無須進一步純化即可使用。
MS m/z344(M+H)+。
步驟23-羥基-9-(甲基氨基)-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯將步驟1所得的粗品的甲醇溶液(包含披鈀碳(10％w/w))在氫氣壓下攪拌達3h。濾去催化劑且溶液在減壓下被濃縮至干。殘余物用乙醚研磨，過濾并在高真空下干燥，得到黃色固體樣粗品，其無須進一步純化即可使用于下一步驟。
MS m/z254(M+H)+。
步驟3N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-(甲基氨基)-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺往在步驟2所得的粗品的無水甲醇溶液中加入過量的三乙胺。在減壓和然后在高真空下除去溶劑。使油性殘余物溶解于無水甲醇并加入4-氟代-芐胺(3.1當量th.)。攪拌該混合物并加熱至60℃過夜。在冷卻至室溫后在減壓下除去溶劑。殘余物用乙醚研磨，在高真空下放置15min。得到黃色固體樣標題粗產(chǎn)物，其包含過量的4-氟代-芐胺(約3.5當量)并無須進一步純化即可使用。
MS m/z347(M+H)+。
步驟4(+/-)-9-[[(二甲氨基)磺?；鵠(甲基)氨基]-N-(4-氟芐基)-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺往在步驟3所得的粗品化合物在2∶1四氫呋喃和2M氫氧化鈉水溶液的混合物中的溶液中加入N，N-二甲基氨磺酰氯(4.6當量)。將該混合物于室溫攪拌16h。在減壓下濃縮該混合物，產(chǎn)物由制備型RP-HPLC分離，使用水(0.1％TFA)和乙腈(0.1％TFA)作為洗脫劑(柱C18)。凍干合并的產(chǎn)物部分，獲得蓬松的、淡粉紅色物質(zhì)的標題化合物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ11.95(s，1H)，9.13(m，1H)，7.38(m，2H)，7.04(m，2H)，4.98(m，1H)，4.56(m，2H)，4.36(m，1H)，3.62(m，1H)，2.84(s，6H)，2.57(s，3H)，2.38-1.85(m，4H).
13C-NMR(100MH.z，CDCl3)δ167.53，162.55，160.11，157.74，145.76 144.11，132.70，128.89，128.81，124.82，114.60，114.39，58.06，42.93，41.53，37.00，29.03，23.89，20.09.
MS m/z454(M+H)+.
實施例4(+/-)-N1-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N1，N2，N2-三甲基乙二酰胺(ethanediamide)步驟1(+/-)-N1-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N1，N2，N2-三甲基乙二酰胺往攪拌的粗品N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-(甲基氨基)-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺(如在實施例3，步驟3中所述合成)的二氯甲烷溶液中加入6當量三乙胺和6當量氯代氧代乙酸甲基酯。于室溫下攪拌該混合物2h，在減壓下除去溶劑，使殘余物溶解于二甲胺(2M)的四氫呋喃溶液中。將該混合物在57℃攪拌過夜。冷卻至室溫后，在減壓下除去溶劑，用制備型RP-HPLC分離產(chǎn)物，使用水(0.1％TFA)和乙腈(0.1％TFA)作為洗脫劑(柱C18)。凍干合并的產(chǎn)物部分，得到淡粉紅色的蓬松物質(zhì)樣的標題化合物。經(jīng)NMR檢測該產(chǎn)物為旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.05(s，0.2H)，11.89(s，0.8H)，9.21(m，0.8H)，8.74(m，0.2H)，7.40-7.28(m，2H)，7.20-7.10(m，2H)，5.17(m，0.8H)，4.63-4.35(m，2.2H)，4.13-4.00(m，1H)，3.65-3.53(m，部分被水信號掩蓋)，2.95-2.75(m，9H)，2.15-1.80(m，4H).13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ167.87，167.73，165.92，165.46，164.51，164.30，162.42，160.01，157.50，157.41，146.27，146.18，145.76，145.49，134.44，129.43，129.35，129.08，129.00，125.17，125.05，115.07，114.85，57.47，53.60，43.14，41.37，36.49，35.95，32.92，32.64，32.36，28.19，23.88，22.12，19.67，19.35.
MS m/z446(M+H)+.
實施例5(+)-N1-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N1，N2，N2-三甲基乙二酰胺步驟1(+)3-羥基-2-(甲氫羰基)-N-甲基-4-氧代-N-[(1S)-1-苯乙基]-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-銨三氟乙酸鹽于-30℃，向含(1S)-1-苯乙胺(4.5當量)的7∶3(v/v)的甲醇和水的混合物中加入溴代衍生物3-(苯甲酰氧基)-9-溴代-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-羧酸甲酯(如在實施例2，步驟2中所述合成)(1.0當量)。將該混合物于-30℃劇烈攪拌1.5h。移去冷浴，在室溫下繼續(xù)攪拌1h。用乙酸調(diào)節(jié)pH至約5后加入37％的含水甲醛(11.5當量)和氰基氫硼化鈉(3.25當量)。于室溫下攪拌20分鐘后，在減壓下將體積減少至約1/4。過濾形成的白色沉淀物，濾液用三氟乙酸酸化至pH 2-3。將該溶液施用于陽離子交換樹脂柱(Varian MEGA BONDELUTE SCX)上，以甲醇洗滌柱，粗產(chǎn)物被2M氨水的甲醇液洗脫。將合并的洗脫液在減壓下濃縮至干，使油狀殘余物溶解于甲醇中，用三氟乙酸中和。除去溶劑后得到油狀殘余物。生成的1∶3比率的非對映異構(gòu)體通過制備型RP-HPLC純化分離(柱C18)，洗脫劑為水(0.1％TFA)，乙腈(0.1％TFA)。主要的非對映異構(gòu)體作為第二峰被洗脫，凍干后得到淡粉紅色固體樣的標題化合物。
1H-NMR(500MHz，吡啶-d5)δ7.53(m，2H)，7.39(m，2H)，7.29(m，1H)，4.45(m，1H)，4.38(m，1H)，4.14(m，1H)，3.91(s，3H)，3.80(m，1H)，2.13(s，3H)，1.95-1.82(m，3H)，1.70-1.60(m，1H)，1.49(d，J＝6.4Hz，3H).
MS m/z358(M+H)+.
步驟2(-)-3-羥基-2-(甲氧羰基)-N-甲基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-銨三氟乙酸鹽將(+)3-羥基-2-(甲氧羰基)-N-甲基-4-氧代-N-[(1S)-1-苯乙基]-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-三氟乙酸銨的甲醇溶液(包含披鈀碳(10％w/w))在氫氣壓下攪拌1.5h。濾去催化劑且溶液在減壓下被濃縮至干，得到淡粉紅色油狀標題化合物。
1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ4.41(m，1H)，4.14(m，1H)，3.99(s，3H)，3.91(m，1H)，2.86(s，3H)，2.50(m，1H)，2.26(m，1H)，2.08(m，1H)，1.86(m，1H).
MS m/z254(M+H)+.
步驟3(+)-N1-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N1，N2，N2-三甲基乙二酰胺將(-)-3-羥基-2-(甲氧羰基)-N-甲基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-銨三氟乙酸鹽、對-氟代芐胺(2.2當量)和三乙胺(1.3當量)的甲醇溶液攪拌并加熱至65℃ 3h。在真空下除去溶劑，將殘余物溶解于無水二氯甲烷中。加入氯代氧代乙酸甲基酯(5當量)和三乙胺(5當量)，將該混合物在室溫攪拌50min。在減壓下除去溶劑，且將殘余物溶解于2M二甲胺的四氫呋喃溶液中。將該混合物在57℃攪拌過夜。冷卻至室溫后，在減壓下除去溶劑，用制備型RP-HPLC分離產(chǎn)物，使用水(0.1％TFA)和乙腈(0.1％TFA)作為洗脫劑(柱C18)。凍干合并的產(chǎn)物部分，得到蓬松的白色物質(zhì)樣的標題化合物(ee94.4％)。
將該化合物溶解于乙酸乙酯/庚烷(3∶2.5(v/v)混合物)中并且放置在室溫下四天。倒掉形成沉淀的上清液，在減壓下濃縮，自水/乙腈中凍干殘余物，得到對映體純(enantiopure)的標題產(chǎn)物e.e.100％(e.e.由手性HPLC Chiralpak AS檢測，流動相0.2％TFA正-Hex/IPA)，其光譜特性與在實施例4、步驟1中描述的化合物相同。20D＝+36.5±2.5°(c＝0.63于乙醇中)。
實施例6(+/-)-N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺標題化合物按照在實施例4中描述的，但有以下變化的合成順序制備。
步驟11-(芐氧基)氮雜庚環(huán)-2-亞胺將叔丁基-(芐氧基)-(5-氰基戊基)-氨基甲酸酯(按照在實施例1-步驟1a中描述的方法從6-溴己腈開始合成)溶解于HCl的EtOH飽和溶液并攪拌此混合物45分鐘。向溶液中鼓泡通入氮氣以去除過剩的HCl。在減壓下除去溶劑，且將溶解于1，4-二氧六環(huán)中的殘余物用三乙胺處理以調(diào)節(jié)pH到10。去除乙醇，含有過量的氯化三乙銨和6-[(芐氧基)氨基]己酸乙酯的標題化合物不需進一步純化即可被使用。用制備型RP-HPLC來純化分析用樣品，使用水(0.1％TFA)和乙腈(0.1％TFA)作為洗脫劑(柱C18)。凍干合并的產(chǎn)物部分。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)δ9.39(s，1H)，8.81(s，1H)，7.61-7.52(m，2H)，7.48-7.38(m，3H)，5.03(s，2H)，4.02-3.93(m，2H)，2.70-2.59(m，2H)，1.69-1.54(m，6H).
MS m/z219(M+H)+.
步驟2(+/-)-N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺向攪拌的粗品N-(4-氟芐基)-3-羥基-10-(甲基氨基)-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-甲酰胺(從1-(芐氧基)氮雜庚環(huán)-2-亞胺開始，按照在實施例3-步驟3中類似6-元系列使用的方法合成)的二氯甲烷溶液中加入3當量三乙胺、2eq的(二甲氨基)(氧代)醋酸鉀、2.2當量1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和2.2當量1-羥基苯并三唑。將該混合物于室溫攪拌過夜。在減壓下除去溶劑，使殘余物在乙酸乙酯和1M HCl水溶液之間分配。水相用乙酸乙酯提取，合并的有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并在真空下濃縮至干。標題產(chǎn)物通過制備型RP-HPLC分離，使用水(0.1％TFA)和乙腈(0.1％TFA)作為洗脫劑(柱C18)。凍干合并的產(chǎn)物部分，獲得蓬松的、白色物質(zhì)樣的標題化合物。經(jīng)1H NMR檢測該產(chǎn)物為旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)δ12.29(bs，0.1H)，11.95(bs，0.9H)，9.30(bs，0.9H)，8.45(bt，0.1H)，7.38(dd，J＝8.33，5.5Hz，1.8H)，7.33(dd，J＝8.33，5.5Hz，0.2H)，7.15(t，J＝9.0Hz，2H)，5.45-5.25(m，0.9H)，4.94(dd，J＝14,5.7Hz，1.0H)，4.84-4.79(m，0.1H)，4.57-4.43(m，2H)，3.54(dd，J＝14,11Hz，0.9H)，3.28-3.18(m，0.1H)，3.05(s，0.3H)，2.92(s，2.7H)，2.90(s，5.4H)，2.81(s，0.3H)，2.76(s，0.3H)，2.19-1.78(m，5H)，1.41-1.27(m，1H).
MS m/z460(M+H)+.
實施例7(-)-N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基)-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺步驟1(2E)-2-[(氮雜庚環(huán)-2-亞基(azepan-2-ylidene)氨基)氧基]丁-2-烯二酸二甲酯和(2Z)-2-[(氮雜庚環(huán)-2-亞基氨基)氧基]丁-2-烯二酸二甲酯攪拌下，往氮雜庚環(huán)-2-酮肟的乙腈混懸液中滴加入1.1當量乙炔二羧酸二甲酯。將該混合物于室溫攪拌1小時。在減壓下除去溶劑，得到(2E)-2-[(氮雜庚環(huán)-2-亞基氨基)氧基]丁-2-烯酸二甲酯和(2Z)-2-[(氮雜庚環(huán)-2-亞基氨基)氧基]丁-2-烯酸二甲酯比例為8/1的黃色油狀的混合物。為了更好地對標題化合物進行特征鑒定，用制備型RP-HPLC純化少量的粗品，使用水(0.1％TFA)和乙腈(0.1％TFA)作為洗脫劑(柱C18)。凍干合并的產(chǎn)物部分。
異構(gòu)體E1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)δ7.08(bs，1H)，5.63(s，1H)，3.77(s，3H)，3.59(s，3H)，3.19-3.11(m，2H)，2.29-2.21(m，2H)，1.66-1.42(m，6H).
13C-NMR(125MHz，DMSO-d6，300K)δ166.20，162.81，161.90，161.61，92.38，52.42，50.92，42.28，29.84，29.32，28.81，25.40.
MS m/z271(M+H)+.
異構(gòu)體Z1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)6.66(bs，1H)，5.63(s，1H)，3.74(s，3H)，3.61(s，3H-3，3.24-3.16(m，2H)，2.20-2.12(m，2H)，1.65-1.44(m，6H).
13C-NMR(125MHz，DMSO-d6，300K)δ165.01，163.01，161.45，154.11，101.09，52.32，51.05，42.24，29.93，29.31，28.45，25.14.
MS m/z271(M+H)+.
步驟23-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸甲酯將比例為8/1的(2E)-2-[(氮雜庚環(huán)-2-亞基氨基)氧基]丁-2-烯酸二甲酯和(2Z)-2-[(氮雜庚環(huán)-2-亞基氨基)氧基]丁-2-烯酸二甲酯的混合物溶解于鄰二甲苯中并回流。16h后在減壓下除去溶劑，用NaHCO3在水中的飽和溶液提取溶解于乙酸乙酯中的殘余物。加入6M HCl水溶液將水相的pH調(diào)節(jié)至約3，該溶液用二氯甲烷提取。有機相經(jīng)硫酸鈉干燥和濃縮。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)δ10.12(s，1H)，4.29-4.16(m，2H)，3.80(s，3H)，2.95-2.78(m，2H)，1.79-1.41(m，6H).
13C-NMR(100MHz，DMSO-d6，300K)6165.79，158.54，153.41，143.55，126.61，52.04，43.02，35.75，28.76，26.94，24.58.
MS m/z239(M+H)+.
步驟33-(苯甲酰氧基)-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸甲酯向3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸甲酯的嘧啶溶液中，加入苯甲酸酐(1.1當量)和催化量的二甲基氨基吡啶。將該混合物于室溫攪拌3h。在減壓下除去溶劑，使殘余物分配于二氯甲烷和1M HCl水溶液之間。水相用二氯甲烷提取，合并的有機相用1M HCl水溶液和鹽水洗滌。有機相經(jīng)硫酸鈉干燥、過濾和在真空濃縮至干。經(jīng)過快速色譜法(洗脫液石油醚/乙酸乙酯，6∶4)后得到棕色固體樣的標題化合物。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)δ8.07(dd，J＝8.6，1.3Hz，2H)，7.78(t，J＝7.5Hz，1H)，7.62(t，J＝7.9Hz，2H)，4.31-4.29(m，2H)，3.74(s，3H)，3.06-3.04(m，2H)，1.82-1.65(m，6H).
13C-NMR(75MHz，DMSO-d6，300K)δ162.78，162.65，162.43，157.01，140.29，135.23，134.18，129.63，128.86，127.59，52.46，43.13，36.07，28.47，26.12，23.68.
MS m/z343(M+H)+.
步驟43-(苯甲酰氧基)-10-溴代-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氧嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸甲酯將3-(苯甲酰氧基)-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸甲酯、N-溴代-琥珀酰亞胺(2當量)和α，α′-偶氮異丁腈(0.45當量)在四氯化碳中的混合物于回流下攪拌14小時。使該混合物冷卻至室溫，過濾琥珀酰亞胺，在減壓下除去溶劑。經(jīng)過快速色譜法(洗脫液為石油醚/乙酸乙酯，8∶2)后得到淺黃色固體樣的3-(苯甲酰氧基)-10-溴代-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸甲酯。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)δ8.07(dd，J＝8.3，0.9Hz，2H)，7.79(t，J＝7.5Hz，1H)，7.63(t，J＝7.9Hz，2H)，5.63(dd，J＝5.9，2.2Hz，1H)，4.98(dd，J＝14.3，6.1Hz，1H)，3.97(dd，J＝14.3，11.0Hz，1H)，3.76(s，3H)，2.31-2.13(m，2H)，2.10-1.79(m，3H)，1.-1.61-1.48(m，1H).
13C-NMR(75MHz，DMSO-d6，300K)δ162.65，162.14，157.22，157.10，139.45，136.59，134.37，129.72，128.94，127.36，53.56，52.67，42.37，31.52，25.78，24.40.
MS m/z423/421(M+H)+.
步驟53-羥基-4-氧代-10-{[(1R)-1-苯乙基]氨基}-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸甲酯將3-(苯甲酰氧基)-10-溴代-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸甲酯(1.0當量)加入到溶解于N，N-二甲基甲酰胺的(1R)-1-苯乙基胺(2.2當量)和三乙胺(1當量)的溶液中。將該混合物在室溫劇烈攪拌2小個時，然后在50℃再攪拌30分鐘。在減壓下除去溶劑，得到無需進一步純化即可使用的標題粗產(chǎn)物(1∶1非對映異構(gòu)體的混合物)。在另一個備選的方法(步驟5A)中，于-30℃，將固體3-(苯甲酰氧基)-10-溴代-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸甲酯(1.0當量)加入到溶解于7∶3甲醇/水混合物的(1R)-1-苯乙基胺溶液(4.5當量)中。反應進行過夜，然后將溫度提升至室溫，濃縮溶劑，得到白色固體，將其過濾并棄去。用二氯甲烷從母液中提取標題化合物(為7∶3非對映異構(gòu)體的混合物)，其無需進一步純化即可用于下一步驟。
MS m/z358(M+H)+。
步驟6N-(4-氟芐基)-3-羥基-4-氧代-10-{[(1R)-1-苯乙基]氨基}-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-甲酰胺將對氟代芐胺(3當量)加入到溶解于甲醇中的3-羥基-4-氧代-10-{[(1R)-1-苯乙基]氨基}-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-羧酸甲酯(如在步驟5或步驟5A中所述制備)中。將該混合物在70℃攪拌過夜，然后冷卻至室溫，以直接用于步驟7。在備選方法(步驟6A)中，在減壓下除去溶劑，使粗產(chǎn)物從乙腈結(jié)晶數(shù)次，得到單一的為4-氟代芐銨鹽的d.e.＞95％的標題化合物非對映異構(gòu)體。
步驟7(+)N-(4-氟芐基)-3-羥基-10-{甲基[(1R)-1-苯乙基]氨基}-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-甲酰胺將在步驟6中得到的N-(4-氟芐基)-3-羥基-4-氧代-10-{[(1R)-1-苯乙基]氨基}-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-2-甲酰胺溶解于甲醇并且用乙酸調(diào)節(jié)其pH至約5，然后加入37％含水甲醛(6當量)和氰基氫硼化鈉(6.25當量)。于室溫攪拌該混合物過夜。在減壓下除去溶劑，殘余物(溶解于最少量的甲醇中)用三氟乙酸酸化至pH 2-3。將該溶液施加于陽離子交換樹脂柱(Varian MEGA BOND ELUTE SCX)上，以甲醇洗滌柱，用2M氨的甲醇溶液洗脫粗產(chǎn)物。合并的洗脫液在減壓下被濃縮至干得到油狀的殘余物。該產(chǎn)物，非對映異構(gòu)體的混合物，由制備型RP-HPLC純化分離((柱C18)，洗脫液為水(0.1％TFA)、乙腈(0.1％TFA)。標題非對映異構(gòu)體在第一峰時洗脫，凍干后得到白色固體樣的標題化合物(TFA鹽)。
在備選的方法(步驟7A)中，使步驟6A的產(chǎn)物以如同步驟6的產(chǎn)物相同的方式反應，得到不用HPLC分離的單一非對映異構(gòu)體。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6-TFA，300K)δ9.42(t，J＝6.2Hz，1H)，9.20(bs，1H)，7.60(bd，J＝7.3Hz，2H)，7.51-7.29(m，5H)，7.21(t，J＝8.9Hz，2H)，4.98-4.75(m，3H)，4.69(dd，J＝15.5，6.9Hz，1H)，4.47(dd，J＝15.5，5.5Hz，1H)，3.66(t，J＝12.8Hz，1H)，2.94-2.81(m，3H)，1.97-1.81(bm，2H)，1.79-1.33(m，7H).
MS m/z465(M+H)+.20D＝+62±2(c＝0.1于氯仿中)。
步驟8(-)2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-N-甲基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-銨三氟乙酸鹽將步驟7(或7A)產(chǎn)物的TFA鹽的甲醇溶液(含披鈀碳(10％，w/w))于氫氣壓下攪拌4h。濾掉催化劑，將該溶液在減壓下濃縮至干，得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6-TFA，300K)δ9.88(bs，1H)，9.56(bs，1H)，9.14(bs，1H)，7.41(dd，J＝8.6，5.7Hz，2H)，7.17(t，J＝8.8Hz，2H)，4.92(dd，J＝14.6，4.6Hz，1H)，4.72(bm，1H)，4.58-4.44(m，2H)，3.51(dd，J＝13.9，11.7Hz，1H)，2.66(t，J＝4.9Hz，3H)，2.29(d，J＝13.3Hz，1H)，2.02-1.57(m，4H)，1.45-1.27(m，1H).
MS m/z361(M+H)+.20D＝-4±2(c＝0.4于甲醇中)。
步驟9(-)N-(-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺將氯代氧代乙酸甲酯(2-6當量)和N-乙基二異丙基胺(4當量)加入到步驟8的化合物三氟醋酸銨的氯仿溶液中。將該混合物在室溫中攪拌1小時。在減壓下除去溶劑，使溶解于2M二甲胺的甲醇溶液中的殘余物在室溫中攪拌6小時。在減壓下除去溶劑，使溶解于二氯甲烷中的殘余物用1M HCl的水溶液洗滌。有機相在無水Na2SO4上被干燥，在減壓下除去溶劑。用制備型RP-HPLC分離標題化合物，使用水(0.1％TFA)和乙腈(0.1％TFA)作為洗脫液(柱C18)。凍干合并的產(chǎn)物部分，獲得99.5％對映體過量(e.e.由手性HPLC檢測，Chiralpak AD，流動相0.2％TFA 正-Hex/0.2％TFA乙醇(含3％甲醇))的標題化合物。將溶解于乙腈的化合物用含水KOH處理，然后冷凍干燥得到標題化合物的非晶形鉀鹽。
1H-NMR光譜與在實施例6中描述的化合物的一樣。
13C-NMR(100MHz，DMSO-d6，300K)δ168.01，165.80，165.03，161.30(d，JC-F＝243Hz)，157.68，149.67，145.94，134.59，129.56(d，JC-F＝8.5Hz)，124.72，115.10(d，JC-F＝21Hz)，55.88，42.42，41.56，36.24，32.79，32.34，28.83，27.10，26.15.
MS m/z460(M+H)+.20D＝-72±2(c＝0.1于氯仿中)。
實施例8外旋轉(zhuǎn)的N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺步驟1ω-羥基N-甲基氨基腈3的制備
原料MW 當量 摩爾 Wt.(g)Vol.(mL)密度DHP 84.1210.250021.10 22.93 0.925％H2SO498.080.1220.0305 60mL40％MeNH231.060.2440.06104.74 5.3 0.902MeNH2.HCl 67.5151.250 84.4NaCN49.0110.250012.25IPAc 900于20-35℃，向5％H2SO4水溶液中加入3，4-二氫-2H-吡喃(DHP；21.1g)。生成的溶液在20-35℃中老化1h。將該反應混合物冷卻至0-5℃，并且用40％的含水甲胺中和至pH＝6-7。分別向該反應混合物中加入鹽酸甲胺和氰化鈉。生成的溶液在室溫中老化36h。用IPAc(6×150mL)萃取該反應混合物。濃縮合并的有機層，得到總體積約150mL(檢測產(chǎn)率約91％)，可用于下一步驟。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.81(m，1H)，3.45(m，2H)，2.47(s，3H)，1.90-1.40(m，6H).
步驟2ω-羥基N-甲基N-Boc-氨基腈4的制備 原料M W 當量摩爾 Wt.(g) Vol.(mL)氨基腈3142.20 1 0.210629.95(Boc)2° 218.25 1.050.221148.35％NH2OH/ 351O％NH4ClIPAc 80于室溫下，向ω-羥基N-甲基氨基腈3(0.2106摩爾)的IPAc(來自步驟1)的溶液中加入(Boc)2O(48.3g)。將生成的溶液在30-35℃中老化2h(100％轉(zhuǎn)化，經(jīng)1H NMR分析)。將該反應混合物冷卻至0-5℃，并加入5％NH2OH/10％NH4Cl(35mL)。將該反應混合物在10-20℃中老化3h。相分離后，水層用IPAc(80mL)萃取，合并的有機層用鹽水(50mL)洗滌，然后濃縮并且溶劑換成為IPA(總體積230mL)，將其用于下一步驟。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ5.18(m，1H)，3.64(q，J＝5.7Hz，2H)，2.88(s，3H)，1.88-1.75(m，3H).1.65-1.61(m，2H)，1.49-1.46(m，1H)，1.18(s，9H).
步驟3羥基脒5的制備 原料 MW 當量摩爾 Wt.(g)Vol.(mL) 密度N-Box-氨基- 242.31 1 0.210651.03腈450％NH2OH 33.03 1.250.263317.40 16.20 1.078IPA 180MeOH 600于室溫下，向N-Box-氨基腈4(0.2106摩爾)的IPA溶液(總體積230mL)中加入50％羥基胺(16.2mL)。將生成的溶液在60℃中老化3h。然后濃縮該反應混合物，將該溶劑換成為甲醇溶液(總體積230mL)，將其用于下一步驟。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.53(br s，1H)，4.84(br s，2H)，4.64(t，J＝7.1Hz，1H)，3.71-3.62(m，2H)，2.72(s，3H)，2.00(br s，1H)，1.92-1.82(m，1H)，1.76(1.55(m，3H)，1.49(s，9H)，1.42-1.23(m，2H).
HPLC條件柱Zorbax，Rx C8 250×4.6mm；溫度30℃；于210nm檢測；流動相0.1％aq H3PO4(A)/MeCN(B)；梯度90∶10(A)/(B)至10∶90經(jīng)過15min，10∶90保留5min，10∶90至90∶10(A)/(B)經(jīng)過10秒；流速1mL/min。保留時間偕胺肟-6.152分鐘和6.256分鐘(兩個異構(gòu)體)。
步驟4O-烯偕胺肟6的制備 原料 MW 當量摩爾 Wt.(g) Vol.(mL)密度羥基脒5275.35 1 0.210657.93DMAD 142.11 1.050.221131.4227.10 1.16MeOH異丙基苯 500于室溫下，向羥基脒5(約0.2106摩爾)的甲醇溶液(總體積230mL)中加入乙炔二羧酸二甲酯(27.10mL)。將生成的溶液在室溫中老化16h。濃縮該反應混合物，于40-60℃將溶劑換成為異丙基苯溶液(總體積430mL)。該溶液被用于下一步驟。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ5.82(s，0.28H)，5.73(s，0.72H)，5.44(br s，1.77H)，5.25(br s，0.56H)，4.61(m，1H)，3.89(s，0.84H)，3.84(s，2.16H)，3.72(s，2.16H)，3.68(s，0.84H)，3.65-3.58(m，2H)，2.73(s，0.84H)，2.71(s，2.16H)，1.90-1.52(m，4H)，1.47(s，9H)，1.43-1.30(m，2H).
HPLC條件柱Zorbax，Rx C8 250×4.6mm；溫度30℃；于210nm檢測；流動相0.1％aq H3PO4(A)/MeCN(B)；梯度90∶10(A)/(B)至10∶90經(jīng)過15min，10∶90保留5min，1090至90∶10(A)/(B)經(jīng)過10秒；流速1mL/min。保留時間偕胺肟6-12.051分鐘、12.315分鐘，比率約3.6∶1。
步驟5嘧啶7的制備 原料 MW 當量 摩爾 Wt.(g)Vol.(mL)密度O-烯 417.45 10.210687.91amidoxime6異丙基苯 430(總)5％NaHCO384.11.44 0.3032 510EtOAc 750鹽水 150THF將O-烯偕胺肟6(約0.2106摩爾)的異丙基苯溶液(總體積430mL)于120℃(內(nèi)溫)加熱12h。然后將該反應混合物冷卻至60℃、濃縮至總體積250mL，然后用EtOAc(250mL)稀釋，并冷卻至25-35℃。然后緩慢加入5％碳酸氫鈉(330mL，約1當量)，將生成的溶液在25-35℃老化0.5h。相分離后，用5％碳酸氫鈉(180mL)再次提取有機相。合并的水提物用5N HCl酸化至pH＝2-3，并用EtOAc(3×250mL)提取。用鹽水(150mL)洗滌合并的有機層。濃縮該有機溶液，將溶劑換成為THF(總收率約30-40％，KF約100-150ppm)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ10.66(br s，2H)，4.77(m，1H)，4.01(s，3H)，3.72-3.67(m，2H)，2.77(s，3H)，2.20-1.55(m，5H)，1.48(s，9H)，1.43-1.35(m，1H).
HPLC條件柱Zorbax，Rx C8250×4.6mm；溫度30℃；于210nm檢測；流動相0.1％aq H3PO4(A)/MeCN(B)；梯度90∶10(A)/(B)至10∶90經(jīng)過15min，10∶90保留5min，10∶90至90∶10(A)/(B)經(jīng)過10秒；流速1mL/min。保留時間嘧啶7-9.905分鐘步驟6雙甲磺?；?嘧啶8的制備 原料MW當量 摩爾 Wt.(g) Vol.(mL)密度嘧啶7385.4110.09029 43.5(80％)TEA 101.1930.270927.437.80.726MsCl114.5530.270931.021.01.480THF 575K2CO3138.2110.09029 12.5MeOH 200EtOAc400于0-5℃，用1h，往嘧啶7(43.5g，純度約80％，0.09029摩爾)的THF(275mL)溶液中同時緩慢加入TEA(37.8mL)和MsCl(21.0mL)。將生成的溶液在同樣的溫度下老化4h。濾去固體物，用THF(3×100mL)洗滌。濃縮合并的濾液，將溶劑換成為甲醇(總體積200mL)。于10-20℃，往三甲磺酰基-嘧啶的甲醇溶液中加入碳酸鉀(12.5g，0.09029摩爾)。將生成的溶液在同樣的溫度下老化6-10h(用HPLC監(jiān)測)。用5N HCl中和該反應混合物至pH＝6-7，并濃縮至總體積約100mL。加入16％鹽水(100mL)，并用EtOAc(3×100mL)提取生成的溶液。用鹽水(50mL)洗滌合并的有機層、濃縮，將溶劑換成為DMF。由選擇性地水解三甲磺?；?嘧啶產(chǎn)生1當量的副產(chǎn)物(MeSO3Me)，可通過與DMF在60-65℃共沸去除(用1H NMR監(jiān)測，直到＜10摩爾％)。雙甲磺酰基-嘧啶8的DMF的濃度為約0.3M(總體積300mL)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ11.00(br s，1H)，4.78(d，J＝7.8Hz，1H)，4.24-4.15(m，2H)，3.95(s，3H)，3.50(s，3H)，2.99(s，3H)，2.81(s，3H)，2.12-2.11(m，1H)，1.90-1.76(m，2H)，1.46(s，9H)，1.43-1.35(m，2H).
HPLC條件柱Zorbax，Rx C8 250×4.6mm；溫度30℃；于210nm檢測；流動相0.1％aq H3PO4(A)/MeCN(B)；梯度90∶10(A)/(B)至10∶90經(jīng)過15min，10∶90保留5min，10∶90至90∶10(A)/(B)經(jīng)過10秒；流速1mL/min。保留時間三甲磺?；?嘧啶-14.140分鐘；雙甲磺?；?嘧啶-12.760分鐘。
步驟7七元環(huán)-嘧啶甲磺酸酯9的制備 原料 MW當量摩爾 Wt.(g)Vol.(mL)雙甲磺?；?541.591 0.09029 48.90嘧啶8Cs2CO3325.821.2 0.108335.30DMF于室溫下，向雙甲磺?；?嘧啶8(0.09029摩爾)的DMF(總體積300mL)溶液中加入碳酸銫(35.30g)。將生成的漿液在55℃老化2-3h(轉(zhuǎn)化76％，經(jīng)HPLC檢測)。中和至pH＝7后，該反應混合物用250mL水稀釋、用IPAc(2×250mL)提取。用鹽水(2×200mL)洗滌合并的有機層。濃縮有機層得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物一半經(jīng)過短柱(硅膠，己烷∶EtOAc 2∶1)純化得到所需產(chǎn)物9(6.00g，純度98A％)，和9a(2.3g，純度40A％)。從DHP到環(huán)化的產(chǎn)物的總收率經(jīng)校正后約13％。
1H NMR(CDCl3，400MHz)對于化合物9
δ5.34(m，1H)，5.22(m，1H)，3.93(s，3H)，3.51(s，3H)，3.47(m，1H)，2.97(s，3H)，2.20-2.05(m，3H)，1.90-1.65(m，2H)，1.44(s，9H)，1.24(m，1H).
對于化合物9a11.86(br s，1H)，7.90-7.55(br s，1H)，7.31(dd，J＝8.5，5.4Hz，2H)，7.06(t，J＝8.5Hz，2H)，5.40-4.90(m，2H)，4.53-4.40(m，2H)，3.45-3.23(m，1H)，2.23-2.05(m，3H)，1.86-1.76(m，1H)，1.74-1.64(m，1H)，1.47-1.37(m，1H)，1.30(s，9H).
HPLC條件柱Zorbax，Rx C8 250×4.6mm；溫度30℃；于210nm檢測；流動相0.1％ aq H3PO4(A)/MeCN(B)；梯度90∶10(A)/(B)至10∶90經(jīng)過15min，10∶90保留5min，10∶90至90∶10(A)/(B)經(jīng)過10秒；流速1mL/min。保留時間七元環(huán)-嘧啶甲磺酸酯913.969分鐘；七元環(huán)-嘧啶9a13.141分鐘。
使用LiH的備選方法也被采用于室溫下，向雙甲磺酰基-嘧啶8(65mg)的二氧六環(huán)(1mL)溶液中加入LiH粉末。將生成的混合物在65℃老化4h。然后，將該反應混合物冷卻至室溫，加入1N HCl猝滅過量的LiH。溶液用EtOAc(2×5mL)提取。合并的有機層用鹽水洗滌，然后濃縮。用快速層析(硅膠，己烷∶EtOAc＝2∶1)純化殘余物得到七元環(huán)-嘧啶甲磺酸酯9(45.6mg，85％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ5.34(m，1H)，5.22(m，1H)，3.93(s，3H)，3.51(s，3H)，3.47(m，1H)，2.97(s，3H)，2.20-2.05(m，3H)，1.90-1.65(m，2H)，1.44(s，9H)，1.24(m，1H).
步驟8七元環(huán)-嘧啶酰胺化合物10的制備
原料 MW當量 摩爾 Wt.(g) Vol.(mL)密度七元環(huán)-445.491 0.01347 6.000嘧啶94-氟芐胺 125.153 0.04041 5.060 5.221.09EtOH 80向七元環(huán)-嘧啶甲磺酸酯9(6g)的EtOH(80mL)溶液中加入4-氟代芐胺(5.060g)。將生成的溶液回流8h(經(jīng)HPLC檢測100％轉(zhuǎn)化)。將該反應混合物濃縮至總體積約20mL，并加入80mL的EtOAc。往生成的溶液中加入20％的鹽水(15mL)、4N HCl(15mL)和水(10mL)。相分離后，水層用EtOAc(25mL)反提取。合并的有機層用4NHCl∶20％鹽水(1∶1，3×15mL)、鹽水(15mL)洗滌。有機溶液被濃縮至總體積約30mL。用1h往該溶液中緩慢加入正己烷(70mL)。將生成的漿液于0-5℃老化1h。濾掉結(jié)晶固體，用正己烷∶EtOAc(4∶1，50mL)洗滌，在用氮清掃的真空下干燥得到七元環(huán)-嘧啶酰胺化合物10(5.30g，86％，HPLC＞97A％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ11.85(br s，1H)，7.84(br s，0.5H)，7.68(br s，0.5H)，7.31(m，2H)，7.04(m，2H)，5.404.90(m，2H)，4.53(m，2H)，3.38(m，1H)，2.87(s，3H)，2.20-2.15(m，3H)，1.90-1.40(m，3H)，1.37(s，9H).
HPLC條件柱Zorbax，Rx C8 250×4.6mm；溫度30℃；于210nm檢測；流動相0.1％aq H3PO4(A)/MeCN(B)；梯度90∶10(A)/(B)至10∶90經(jīng)過15min，10∶90保留5min，10∶90至90∶10(A)/(B)經(jīng)過10秒；流速1mL/min。保留時間七元環(huán)-嘧啶10-15.467分鐘。
步驟9七元環(huán)-嘧啶酰胺鹽酸鹽11的制備
原料 MW 當量摩爾 gmL 密度七元的460.50 1 0.001846 0.8500嘧啶氨基化合物10HCl(氣) 36.468 0.014780.5389EtOAc 3.5于-30到-20℃，向乙酸乙酯(3.5mL)溶液中鼓泡通入HCl氣體(0.5389g)。于-30到-20℃，將N-Boc-七元環(huán)-嘧啶酰胺10(結(jié)晶固體)加入HCl-EtOAc溶液中。用2.5h將生成的溶液緩慢溫暖至室溫，并在室溫中老化0.5h(經(jīng)HPLC檢測100％轉(zhuǎn)化)。用EtOAc(7mL)稀釋該反應混合物。將生成的漿液于0-5℃老化1h。濾掉結(jié)晶固體，用EtOAc、正己烷洗滌，在用氮清掃的真空下干燥得到所需產(chǎn)物11(分離收率98％，純度＞97A％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ12.35(s，1H)，9.96(t，J＝6.3Hz，1H)，9.51(br s，1H)，9.19(br s，1H)，7.42(dd，J＝8.5，5.6hz，2H)，7.19(t，J＝8.5Hz，2H)，4.92(dd，J＝14.5，5.1Hz，1H)，4.71(m，1H)，4.57-4.45(m，2H)，3.52(t，J＝14.5Hz)，2.65(t，J＝5.0HZ，3H)，2.30(br d，J＝12.6Hz，1H)，1.99-1.92(m，1H)，1.90-1.75(m，2H)，1.68-1.60(m，1H)，1.41-1.33(m，1H).
HPLC條件柱Zorbax，Rx C8 250×4.6mm；溫度30℃；于210nm檢測；流動相0.1％aq H3PO4(A)/MeCN(B)；梯度90∶10(A)/(B)至10∶90經(jīng)過15min，10∶90保留5min，10∶90至90∶10(A)/(B)經(jīng)過10秒；流速1mL/min。保留時間七元環(huán)-嘧啶鹽酸鹽118.118分鐘。
步驟10外旋轉(zhuǎn)的N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺14的制備
原料MW當量 摩爾 Wt.(g) Vol.(mL) 密度酸12(純96％) 117.1051.0000.122氯甲酸乙酯 125.154.8 0.9600.1040.092 1.1354-NMM 101.154.8 0.9600.0971 0.106 0.9200THF 3嘧啶396.8410.2000.0794鹽酸鹽11二甲胺 45.07 6.25 1.2500.1410.158 0.89002N HCl于0-5℃，往酸12(122mg)的THF(3mL)溶液中加入氯代甲酸乙酯(92μl)。然后，于0-5℃，往該反應混合物中緩慢加入4-NMM(106μl)。將反應混合物在同樣的溫度下老化2h。于0-5℃，將作為固體的嘧啶鹽酸鹽11(79.4mg)加入到混合的酐溶液中，并在同樣的溫度下老化5h，然后于5-10℃再老化2h(經(jīng)HPLC檢測100％轉(zhuǎn)化)。將二甲胺水溶液(40％，158μl)加入反應混合物中，將該混合物于10-15℃老化1h，期間用HPLC監(jiān)測反應來確認完全轉(zhuǎn)化。于5-15℃，用2N HCl調(diào)節(jié)pH＝3-4來酸化反應混合物，分別加入EtOAc(6mL)和鹽水(2mL)。相分離后，有機層用1N HCl(2mL)、鹽水(2×2mL)洗滌。濃縮有機層至總體積1mL。在0.5h的時間內(nèi)緩慢加入正己烷(5mL)。將生成的漿液于0-5℃老化1h。濾掉結(jié)晶固體，用正己烷/EtOAc(5∶1)、MTBE洗滌，在用氮清掃的真空下干燥，得到標題化合物14(75.6mg，82％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ12.13(s，1H)，9.41(br s，1H)，7.38(dd，J＝8.5，5.4Hz，2H)，7.00(t，J＝8.5Hz，2H)，5.40(br s，1H)，5.29(dd，J＝14.5，6.0Hz，1H)，4.60(dd，J＝14.5，6.6Hz，1H)，4.52(dd，J＝14.5，6.3Hz，1H)，3.35(dd，J＝14.5，11.6Hz，1H)，3.04(s，3H)，3.01(s，3H)，2.98(s，3H)，2.23-2.12(m，3H)，1.95-1.81(m，2H)，1.58-1.49(m，1H).
HPLC條件柱Zorbax，Rx C8 250×4.6mm；溫度30℃；于210nm檢測；流動相0.1％aq H3PO4(A)/MeCN(B)；梯度90∶10(A)/(B)至10∶90經(jīng)過15min，10∶90保留5min，10∶90至90∶10(A)/(B)經(jīng)過10秒；流速1mL/min。保留時間標題化合物1412.191分鐘。
下表1列出了已經(jīng)制備的本發(fā)明化合物。表中提供了每一個化合物的結(jié)構(gòu)和名稱、經(jīng)過FIA-MS測定的分子離子加1(M+)或分子離子減1(M-)的質(zhì)量以及制備化合物的合成流程。




前述說明書告知了本發(fā)明的原則，及提供旨在說明的實施例，本發(fā)明的實踐包括所有通常的變化、改進和/或修飾，這些都在附屬的權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種式(I)化合物，或其藥學上可接受的鹽 R1是H或NR2R5；R2是CH3；R5是1)C(O)CH2SO2CH3，2)C(O)C(O)N(CH3)2，3)SO2N(CH3)2，或4)SO2R20，其中R20是 或 或者任選R2和R5與它們連結(jié)的氮原子一起形成錯誤！從編輯域代碼不能產(chǎn)生目標體，或者 R3是氫；R4是1)對氟芐基，2)4-氟代-3-甲基芐基，3)3-氯芐基，或4)3-氯代-4-甲基芐基；R12和R14均為H，除非當R5是C(O)C(O)N(CH3)2和R4是對氟芐基以及n是1時，則R12和R14或者都是H或者都是CH3；和n為等于的0、1或2的整數(shù)。
2.一種按照權(quán)利要求1的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R1是NR2R5；和n為1或2。
3.一種按照權(quán)利要求1的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R1是NR2R5；R2是CH3；R5是C(O)C(O)N(CH3)2，或SO2R20，其中R20是 R3是氫；R4是對氟芐基或4-氟代-3-甲基芐基；R12和R14均為H，除非當R5是C(O)C(O)N(CH3)2和R4是對氟芐基以及n是1時，則R12和R14或者都是H或者都是CH3；和n為等于1或2的整數(shù)。
4.一種式II化合物，或其藥學上可接受的鹽 其中R1是氫、NR2R5、OR2、SR2、SOR2、SO2R2、SO2NR2R5，或OC(O)NR2R5；R3是氫；R4是 R2是1)氫，2)CH3，或3) 和R5是1)C(O)CH3，2)C(O)CH2SO2CH3，3)CH3，4)C(O)C(O)N(CH3)25)SO2CH3，6)SO2N(CH3)2，7)C(O)CH2N(CH3)28)SO2CH2SO2CH3，9)C(O)CF3，10) 11) 或12) 或R2和R5，和與其連結(jié)的氮原子一起，形成選自以下的雜環(huán) 和
5.一種按照權(quán)利要求1的化合物，或其藥學上可接受的鹽，它選自N-(4-氟芐基)-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-嗎啉-4-基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；9-[[(二甲氨基)磺?；鵠-(甲基)氨基]-N-(4-氟芐基)-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；N1-(2-{[(4-氟芐基)氨基]-羰基}-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N1，N2，N2-三甲基乙二酰胺；(+)-N1-(2-{[(4-氟芐基)氨基]-羰基}-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N1，N2，N2-三甲基乙二酰胺；(-)-N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-{甲基[(甲基磺?；?乙?；鵠氨基}-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；N-(2-{[(4-氟代-3-甲基芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；N-(2-{[(3-氯代-4-甲基芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；N-(2-{[(3-氯芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-(6-甲基-1，1-二氧化-1，2，6-噻二嗪烷-2-基(thiadiazinan-2-yl))-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；(-)-N-(2-{[(4-氟代-3-甲基芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；(+)-N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-(6-甲基-1，1-二氧化-1，2，6-噻二嗪烷-2-基)-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-[甲基(吡咯烷-1-基磺酰基)氨基]-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；9-[(氮雜環(huán)丁烷-1-基磺酰基)(甲基)氨基]-N-(4-氟芐基)-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；(-)-N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-[甲基(嗎啉-4-基磺?；?氨基]-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；(+)-N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-[甲基(嗎啉-4-基磺?；?氨基]-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；(+)-9-[(氮雜環(huán)丁烷-1-基磺?；?(甲基)氨基]-N-(4-氟芐基)-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；(-)-9-[{[(二甲氨基)磺酰基]乙?；鶀(甲基)氨基]-N-(4-氟代-3-甲基芐基)-3-羥基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；(-)-N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-{甲基[(4-甲基哌嗪-1-基)磺?；鵠氨基}-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；(+)-N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-{甲基[(4-甲基哌嗪-1-基)磺?；鵠氨基}-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-{甲基[(4-甲基哌嗪-1-基)磺?；鵠氨基}-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；(-)N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；(+)N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；N-(2-{[(4-氟代-3-甲基芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；(+)-N-(2-{[(4-氟代-3-甲基芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；(-)-N-(2-{[(4-氟代-3-甲基芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-8，8-二甲基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺。
6.一種按照權(quán)利要求5的化合物，或其藥學上可接受的鹽，它選自；N-(2-{[(4-氟代-3-甲基芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；(+)-N-(2-{[(4-氟代-3-甲基芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；(-)-N-(2-{[(4-氟代-3-甲基芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；(-)-N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-{甲基[(4-甲基哌嗪-1-基)磺?；鵠氨基}-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；(+)-N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-{甲基[(4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基]氨基}-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；N-(4-氟芐基)-3-羥基-9-{甲基[(4-甲基哌嗪-1-基)磺?；鵠氨基}-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲酰胺；N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-8，8-二甲基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-9-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；(-)N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺；(+)N-(2-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-3-羥基-4-氧代-4，6，7，8，9，10-六氫嘧啶并[1，2-a]氮雜-10-基)-N，N’，N’-三甲基乙二酰胺。
7.一種藥用組合物，它包含治療有效量的依照權(quán)利要求1到6中任何一項的化合物，或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體。
8.依照權(quán)利要求1到6中任何一項的化合物，或其藥學上可接受的鹽在有此需要的患者中抑制HIV整合酶的應用。
9.依照權(quán)利要求1到6中任何一項的化合物，或其藥學上可接受的鹽在制備用于在有此需要的患者中抑制HIV整合酶的藥物中的用途。
10.依照權(quán)利要求1到6中任何一項的化合物，或其藥學上可接受的鹽在制備用于在有此需要的患者中預防或治療由HIV引起的感染，或者用于預防、治療AIDS或者延遲AIDS發(fā)生的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明描述了作為HIV整合酶的抑制劑和HIV復制的抑制劑的四氫－4H－吡啶并[1，2－a]嘧啶和式(I)的相關(guān)化合物，其中n為等于的0、1或2的整數(shù)，以及R
文檔編號C07DGK1753892SQ200380109921
公開日2006年3月29日 申請日期2003年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月27日
發(fā)明者B·克雷申齊, O·金策爾, E·穆拉利亞, F·奧爾維托, G·佩斯卡托雷, M·勞利, V·蘇馬 申請人:P·安杰萊蒂分子生物學研究所