專(zhuān)利名稱(chēng)：一種丹參酮的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，更具體地說(shuō)涉及一種丹參酮的提取方法。
背景技術(shù)：
丹參(Salivia miltiorrihiza Bunge)是我國(guó)一種常用中藥，在臨床具有許多方面的療效，如鎮(zhèn)痛、止癢，對(duì)治療神經(jīng)衰弱性失眠、晚期血吸蟲(chóng)病引起的肝硬變和脾腫大，浮腫、婦科疾病和黃疸型傳染性肝炎的縮肝方面具有一定的療效。近年來(lái)的藥理功效證明，丹參還具有改善冠狀循環(huán)、抑制血栓性疾病的炕炎消腫的功效，已有成藥上市。丹參酮類(lèi)化合物是丹參酯溶性成份中的有效成份，是各種含有丹參藥物的指標(biāo)性成份。
目前，有關(guān)丹參酮的提取方法的報(bào)道很多。曹明成等[丹參提取工藝的實(shí)驗(yàn)研究，中成藥1996，第18卷，第3期]通過(guò)考察丹參酮IIA的提取率，對(duì)丹參的提取工藝進(jìn)行多因素的研究，提出了丹參酮IIA的最佳提取工藝，即加原藥材5倍量的乙醇，浸泡1h，同時(shí)通氣強(qiáng)化提取10min，回流30min。
劉重芳等[丹參不同提取工藝比較，中成藥1999，第21卷，第8期]通過(guò)丹參多種提取工藝的比較(傳統(tǒng)水煎法、乙醇回流法、動(dòng)態(tài)溫浸法、超聲波法、滲漉法等)，以丹參素、原兒條醛、丹參酮IIA為指標(biāo)成分，采用高效液相色譜法測(cè)定提取量，為丹參制劑的前處理提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
柳春宇等[正交試驗(yàn)對(duì)丹參提取工藝的初步研究，黑龍江醫(yī)藥2000，13(6)]以丹參中主要成分丹參酮為指標(biāo)。采用正交試驗(yàn)法對(duì)丹參的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)選。實(shí)驗(yàn)以乙醇用量、回流時(shí)間、乙醇濃度為因素，每個(gè)因索分三個(gè)水平。結(jié)果表明，乙醇濃度為95％，乙醇量為藥材量的8倍，回流時(shí)間為120min，為最佳提取工藝。
張軍等[丹參制劑的研究現(xiàn)狀及對(duì)其開(kāi)發(fā)的幾點(diǎn)思考，中草藥2001，32(10)]總結(jié)丹參藥材中兩類(lèi)有效部位——脂溶性丹參酮類(lèi)和水溶性丹參酚酸類(lèi)的藥理作用，分析丹參制劑的工藝現(xiàn)狀，歸納現(xiàn)有丹參制劑存在的局限性；提出運(yùn)用新輔料、新工藝解決丹參制劑局限性的思路。為開(kāi)發(fā)新制劑，提高中藥制劑技術(shù)含量提供了借鑒。
王鳳珍[提取方法對(duì)丹參活性成分的影響，陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào).2001，24(3)，49-49]選用不同的提取方法，制備丹參顆粒劑，測(cè)定制劑中丹參酮IIA的含量，比較提取方法對(duì)丹參活性成分的影響，優(yōu)化提取工藝。
另外，很多專(zhuān)利文獻(xiàn)也記載了有關(guān)丹參中脂溶性成份的提取方法。
中國(guó)專(zhuān)利[申請(qǐng)?zhí)枮?0120986.8和01120116.9]公開(kāi)了一種應(yīng)用高速逆流色譜法(HSCCC)從丹參中提取丹參酮的方法；中國(guó)專(zhuān)利[申請(qǐng)?zhí)?1130130.9]公開(kāi)了一種應(yīng)用二氧化碳超臨界萃取法提取丹參酮的方法。
綜上所述，上述所有方法均是針對(duì)丹參脂溶性有效部位中的某一成份，在工業(yè)生產(chǎn)中容易造成浪費(fèi)。
另外，提取丹參中脂溶性成份的方法多為乙醇提取法或者高速逆流色譜法或者超臨界萃取法等。有關(guān)乙醇和大孔樹(shù)脂結(jié)合提取丹參中脂溶性成份的方法尚未見(jiàn)報(bào)道。。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種由乙醇結(jié)合大孔樹(shù)脂提取丹參酮的方法。
本發(fā)明一種丹參酮的提取方法，其工藝步驟如下1.醇提?、俅继崛∵^(guò)程為將丹參飲片或粉碎后的丹參藥材，采用浸泡法在常溫或加熱狀態(tài)下，分離出主要含有丹參脂溶性成分的提取液和藥渣；②將上述步驟得到的藥渣加入適當(dāng)濃度的醇，加熱回流提取，得提取液與第一次提取得到的提取液合并，采用過(guò)濾、離心或沉淀的方法去除提取液中的固體雜質(zhì)，備用。
上述步驟所使用的醇均為C1～C5的低級(jí)醇，包括甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、正丁醇、戊醇及異戊醇等，其中，優(yōu)選為乙醇。
具體說(shuō)明如下①第一次提取，取丹參原藥材制成飲片，或用其它適當(dāng)方法粉碎，加20～30％的醇，加醇量一般為藥材量的5～15倍，常溫浸泡10～14小時(shí)；調(diào)節(jié)醇濃度至60～70％，加熱回流1～3小時(shí)。推薦方案為提取介質(zhì)為乙醇，濃度為25％，加醇量為生藥材的10倍左右，常溫浸泡12小時(shí)，調(diào)節(jié)乙醇濃度至65％，加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
②第二次提取，取上述得到的藥渣，加適當(dāng)濃度的醇，加熱回流提取，得藥液與第一次提取所得到的藥液合并，備用。優(yōu)選方案為取上述第一次提取得到的藥渣，加入60～70％的乙醇，加入量為藥渣體積的2～3倍，加熱回流0.5～1.5小時(shí)；推薦方案為加入65％的乙醇，加入量為藥渣體積的2.5倍，加熱回流1小時(shí)。
③合并上述得到的藥液，采用過(guò)濾、離心、自然沉淀等方法除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
本發(fā)明的技術(shù)方案的醇提法中，除了上述浸泡法外，還包括了超聲波提取或微波提取等方法。具體工藝條件如下超聲波提取超聲波提取方法是在浸泡的基礎(chǔ)上，提取過(guò)程在超聲波的條件下完成。具體條件為，頻率17.58KHz，提取時(shí)間55min，提取溫度50℃，超聲波能量每公斤藥材0.8-1.2瓦。超聲提取技術(shù)主要是利用超聲波的空化作用加速藥材中有效成份的浸出，另外超聲波的次級(jí)效應(yīng)，加機(jī)械震動(dòng)、乳化、擴(kuò)散。擊碎、化學(xué)效應(yīng)等也能加速提取成的擴(kuò)散釋放并充分與溶劑混合，利于提取。
微波提取微波提取法是在浸泡的基礎(chǔ)上，提取過(guò)程在微波的條件下完成。具體條件為提取時(shí)間40min，微波能量每公斤藥材為8～9.6千瓦。微波是利用微波能量來(lái)提高提取率的一種最新發(fā)展起來(lái)的新技術(shù)。它的原理是在微波場(chǎng)中，吸收微波能力的差異使得基體物質(zhì)的某些區(qū)域或萃取體系中的某些組分被選擇加熱，從而使得被提取的物質(zhì)從基體或體系中分離出來(lái)，進(jìn)入介電常數(shù)較小、微波吸收能力相對(duì)差的溶劑中。
2.柱層析法分離采用大孔吸附樹(shù)脂柱。將上述醇提取法得到的藥液加至大孔吸附樹(shù)脂柱上，分別采用一定濃度的醇梯度洗脫，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)和提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
其中，在上述柱層析分離中，采用的醇為C1～C5的低級(jí)醇，包括甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、正丁醇、戊醇及異戊醇等，醇的濃度分別為60～80％和85～95％；所述的樹(shù)脂可以是極性大孔吸附樹(shù)脂、弱極性大孔吸附樹(shù)脂以及非極性大孔吸附樹(shù)脂，其中極性大孔吸附樹(shù)脂為S-8，弱極性大孔吸附樹(shù)脂為AB-8或D101，非極性大孔吸附樹(shù)脂為D4020，弱極性大孔吸附樹(shù)脂為AB-8或D101為首選。
優(yōu)選方案為①將醇提取的藥液上大孔吸附樹(shù)脂柱(AB-8或D101)；②第一次使用60～80％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I；③第二次使用85～95％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II。推薦方案為第一次使用的乙醇濃度為70％；第二次使用的乙醇濃度為90％。
與現(xiàn)有的丹參酮提取方法相比，本發(fā)明方法具有如下優(yōu)勢(shì)1.本發(fā)明采用先用低濃度乙醇浸泡藥材，再加入高濃度進(jìn)行提取，解決了高濃度乙醇滲透性差而無(wú)法完全提取丹參藥材中脂溶性丹參酮的問(wèn)題。
2.采用60～70％的乙醇溶液提取，并直接通過(guò)大孔樹(shù)脂柱，避免了生產(chǎn)上使用高濃度的乙醇提取的危險(xiǎn)性，減少了回收乙醇的生產(chǎn)工序，使用生產(chǎn)操作更為簡(jiǎn)單可行，成本更低。
3.本發(fā)明采用一次性柱分離，就同時(shí)得到了隱丹參酮和丹參酮IIA提取物，提取分離率高，分別達(dá)到了0.25％和0.90％；同時(shí)，增加了柱容量，提高了分離效能，易于產(chǎn)業(yè)化。
4.本發(fā)明方法解決了丹參水提取后的藥渣再利用的問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)了變廢為寶，降低產(chǎn)品成本，為生產(chǎn)企業(yè)增加了經(jīng)濟(jì)效益。
圖1為采用實(shí)施例1的方法得到的丹參酮提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)的樣品色譜圖；圖2為采用實(shí)施例1的方法得到的丹參酮提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)的樣品色譜圖；圖3為二氫丹參酮I的色譜圖；
圖4為丹參酮IIA的色譜圖；圖5為丹參酮I的色譜圖；具體實(shí)施方式
下面結(jié)合對(duì)比例和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明，下述該實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而對(duì)本發(fā)明沒(méi)有限制。
實(shí)施例1丹參酮的提取方法步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度25％的乙醇適量，加醇量為生藥材的10倍左右，常溫浸泡12小時(shí)，調(diào)節(jié)乙醇濃度至65％，加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入65％的乙醇，加入量為藥渣體積的2.5倍，加熱回流1小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①將步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例2步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度20％的甲醇適量，加醇量為生藥材的5倍左右，常溫浸泡10小時(shí)，調(diào)節(jié)甲醇濃度至60％，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入60％的甲醇，加入量為藥渣體積的2倍，加熱回流0.5小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用60％的甲醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收甲醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用85％的甲醇洗脫，收集收集洗脫液，回收甲醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例3步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度22％的丙醇適量，加醇量為生藥材的5倍左右，常溫浸泡11小時(shí)，調(diào)節(jié)丙醇濃度至63％，加熱回流1.2小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入60％的丙醇，加入量為藥渣體積的2倍，加熱回流0.5小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用65％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用85％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例4步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度23％的異丙醇適量，加醇量為生藥材的7倍左右，常溫浸泡13小時(shí)，調(diào)節(jié)異丙醇濃度至64％，加熱回流1.3小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入60％的異丙醇，加入量為藥渣體積的2倍，加熱回流0.5小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用66％的異丙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收異丙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用89％的異丙醇洗脫，收集洗脫液，回收異丙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例5步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度29％的正丁醇適量，加醇量為生藥材的11倍左右，常溫浸泡13小時(shí)，調(diào)節(jié)正丁醇濃度至68％，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入60％的正丁醇，加入量為藥渣體積的2.5倍，加熱回流1.4小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用72％的正丁醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收正丁醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用91％的正丁醇洗脫，收集收集洗脫液，回收正丁醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例6步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度30％的戊醇適量，加醇量為生藥材的12倍左右，常溫浸泡12小時(shí)，調(diào)節(jié)戊醇濃度至69％，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入66％的戊醇，加入量為藥渣體積的2.6倍，加熱回流1.4小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用72％的正丁醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收正丁醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用91％的異丙醇洗脫，收集洗脫液，回收異丙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例7步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度30％的乙醇適量，加醇量為生藥材的12倍左右，常溫浸泡12小時(shí)，調(diào)節(jié)乙醇濃度至69％，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入66％的乙醇，加入量為藥渣體積的2.6倍，加熱回流1.4小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用72％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用91％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例8步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度29％的乙醇適量，加醇量為生藥材的11倍左右，常溫浸泡13小時(shí)，調(diào)節(jié)乙醇濃度至68％，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入60％的乙醇，加入量為藥渣體積的2.5倍，加熱回流1.4小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用72％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用91％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例9步驟一、醇提取(超聲波提取法)取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度25％的乙醇，加醇量為生藥材的11倍左右，超聲波提取，得提取液，備用。提取條件為超聲頻率17.58KHz，提取時(shí)間55min，溫度50℃，能量為0.8瓦。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例10步驟一、醇提取(超聲波提取法)取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度20％的乙醇，加醇量為生藥材的11倍左右，超聲波提取，得提取液，備用。提取條件為超聲頻率17.58KHz，提取時(shí)間55min，溫度50℃，能量為1.0瓦。
步驟二、柱層析法分離①驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例11步驟一、醇提取(超聲波提取法)取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度30％的乙醇，加醇量為生藥材的11倍左右，超聲波提取，得提取液，備用。提取條件為超聲頻率17.58KHz，提取時(shí)間55min，溫度50℃，能量為1.2瓦。
步驟二、柱層析法分離①驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例12步驟一、醇提取(微波提取法)取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度25％的乙醇，加醇量為生藥材的11倍左右，微波提取，得提取液，備用。提取條件為提取時(shí)間40min，微波能量為8千瓦。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例12步驟一、醇提取(微波提取法)取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度20％的乙醇，加醇量為生藥材的11倍左右，微波提取，得提取液，備用。提取條件為提取時(shí)間40min，微波能量為9千瓦。
步驟二、柱層析法分離①驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例13步驟一、醇提取(微波提取法)取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度30％的乙醇，加醇量為生藥材的11倍左右，微波提取，得提取液，備用。提取條件為提取時(shí)間40min，微波能量為9.6千瓦。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例14步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度25％的乙醇適量，加醇量為生藥材的10倍左右，常溫浸泡12小時(shí)，調(diào)節(jié)乙醇濃度至65％，加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入65％的乙醇，加入量為藥渣體積的2.5倍，加熱回流1小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D101型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例15步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度25％的乙醇適量，加醇量為生藥材的10倍左右，常溫浸泡12小時(shí)，調(diào)節(jié)乙醇濃度至65％，加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入65％的乙醇，加入量為藥渣體積的2.5倍，加熱回流1小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上S-8型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
實(shí)施例16步驟一、醇提取(浸泡法)第一次提取，取丹參原藥材制成飲片1000g，加入濃度25％的乙醇適量，加醇量為生藥材的10倍左右，常溫浸泡12小時(shí)，調(diào)節(jié)乙醇濃度至65％，加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。
第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入65％的乙醇，加入量為藥渣體積的2.5倍，加熱回流1小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。
步驟二、柱層析法分離①步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上D4020型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
權(quán)利要求
1.一種丹參酮的提取方法，其工藝步驟為步驟一、醇提取醇提取過(guò)程為將丹參飲片或粉碎后的丹參藥材，采用浸泡法在常溫或加熱狀態(tài)下，分離出主要含有丹參脂溶性成分的提取液和藥渣，備用；將藥渣再加入醇，加熱回流提取，得提取液與第一次提取得到的提取液合并，采用過(guò)濾、離心或沉淀的方法去除提取液中的固體雜質(zhì)，備用；步驟二、柱層析法分離將上述醇提取法得到的藥液加至大孔吸附樹(shù)脂柱上，采用醇梯度洗脫，得到提取物I和提取物II。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟一中的浸泡法采用以下方法實(shí)現(xiàn)，即①取丹參飲片或粉碎后的丹參原藥材，加20～30％的醇，加醇量為藥材量的5～15倍，常溫浸泡10～14小時(shí)；調(diào)節(jié)醇濃度至60～70％，加熱回流1～3小時(shí)，分離出藥液和藥渣，備用；②取上述得到的藥渣，加入60～70％的醇，加入量為藥渣體積的2～3倍，加熱回流0.5～1.5小時(shí)；合并兩次提取得到的藥液，過(guò)濾，備用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟二中的柱層析分離法采用以下方法實(shí)現(xiàn)，即①將醇提取的藥液上大孔吸附樹(shù)脂柱；②第一次使用60～80％的醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收醇，得到提取物I；③第二次使用85～95％的醇洗脫，收集洗脫液，回收醇，得到提取物II。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟一中的醇提法還包括了超聲波提取或微波提取等方法。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟一和步驟二中所取采用的醇為C1～C5的低級(jí)醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟一和步驟二中所取采用的醇為乙醇。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟二所述的大孔吸附樹(shù)脂包括極性大孔吸附樹(shù)脂、弱極性大孔吸附樹(shù)脂以及非極性大孔吸附樹(shù)脂。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或7所述的方法，其特征在于步驟二所述的大孔吸附樹(shù)脂為AB-8型弱極性大孔吸附樹(shù)脂。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于包括以下步驟步驟一、醇提取第一次提取，取丹參原藥材制成飲片，加低濃度25％的乙醇醇適量，加醇量為生藥材的10倍左右，常溫浸泡12小時(shí)，調(diào)節(jié)乙醇濃度至65％，加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，分離出藥渣和藥液，備用。第二次提取，取上述得到的丹參藥渣，加入65％的乙醇，加入量為藥渣體積的2.5倍，加熱回流1小時(shí)，得藥液；合并上述第一次和第二次提取得到的藥液，過(guò)濾，除去藥液中的固體雜質(zhì)，備用。步驟二、柱層析法分離①將步驟一中經(jīng)醇提取得到的藥液上AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱；②使用70％的乙醇洗脫，棄去初濾液，收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物I；③繼續(xù)使用90％的乙醇洗脫，收集收集洗脫液，回收乙醇，得到提取物II。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種丹參酮的提取方法，其中包括下述兩個(gè)步驟一、醇提取過(guò)程將丹參飲片或粉碎后的丹參藥材，采用浸泡法、超聲提取或微波提取等方法，在常溫或加熱狀態(tài)下，分離出主要含有丹參脂溶性成分的提取液和藥渣，備用；將藥渣再加入適當(dāng)濃度的醇，加熱回流提取，得提取液與第一次提取得到的提取液合并，采用過(guò)濾、離心或沉淀的方法去除提取液中的固體雜質(zhì)，備用。二、柱層析法分離將上述醇提取法得到的藥液加至大孔吸附樹(shù)脂柱上，分別采用一定濃度的醇梯度洗脫，得到提取物I(含有隱丹參酮和二氫丹參酮I)和提取物II(含有丹參酮IIA和丹參酮I)。
文檔編號(hào)C07C45/78GK1670019SQ200410018760
公開(kāi)日2005年9月21日 申請(qǐng)日期2004年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月17日
發(fā)明者鄭志剛, 楊?lèi)偽? 王雙明, 陸文亮 申請(qǐng)人:天津天士力現(xiàn)代中藥資源有限公司