專利名稱：具有抗癌活性的雙苯十一酮類化合物的制作方法
一、所屬領(lǐng)域本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一類具有抗癌活性的化合物。
背景技術(shù)：
在全世界，癌癥每年奪取600萬人的生命，并把1000萬人置于死亡邊緣。在中國，每年有160萬人罹患癌癥。世界衛(wèi)生組織預(yù)測癌癥將是21世紀(jì)的人類的“頭號殺手”。癌癥的治療離不開藥物，其預(yù)防也離不開藥物。癌癥的化學(xué)治療近年來有飛速發(fā)展，新抗癌藥不斷出現(xiàn)。由于化學(xué)合成藥開發(fā)多集中在蒽環(huán)類及第二代鉑類化合物，其創(chuàng)造性較差，已很難預(yù)期療效有大幅度的提高，而植物品種繁多成分復(fù)雜，發(fā)現(xiàn)新結(jié)構(gòu)的有效成分的研究空間很大，因而以植物藥為主的天然抗癌藥物開發(fā)越來越受到重視。如來源于天然植物的新抗癌藥物紫杉醇、喜樹堿等被視為二十世紀(jì)抗癌藥物研究的重大發(fā)現(xiàn)。經(jīng)驗表明，從天然植物中篩選活性成分發(fā)現(xiàn)新藥的機(jī)率高，而且較經(jīng)濟(jì)，發(fā)現(xiàn)的新成分可為開發(fā)新藥提供豐富的先導(dǎo)化合物。因此，在分子生物學(xué)及生物工程迅猛發(fā)展的現(xiàn)在，不少制藥工業(yè)又走向回歸自然的大道。目前國內(nèi)外用于癌癥治療的植物來源的藥物品種歸納起來，大體可分為以下幾類1.紫杉醇類藥物這類藥物包括紫杉醇(Paclitaxel，商品名Taxol)及其衍生物。紫杉醇是從太平洋紫杉的樹皮中分離出來的抗癌成分。它作用于腫瘤細(xì)胞分裂過程中的紡綞體微管蛋白，具有促微管聚合作用，破壞腫瘤細(xì)胞的分裂，明顯誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。但實驗表明，其可引起骨髓抑制和神經(jīng)毒性；因其水溶性差常用的表面活性劑聚羥乙基蓖麻油在臨床可能會引起的低血壓，呼吸困難，皮疹等過敏反應(yīng)，肝功能損傷等不良反應(yīng)。另外，由于其全合成的方法尚在研究階段，且藥材資源有限，藥品價格相對較高，不利于廣泛應(yīng)用于臨床。
2.喜樹堿類藥物喜樹堿(Camptotheicin)是個含吡咯異喹啉環(huán)的五環(huán)內(nèi)酯生物堿。它具有明顯抑制拓樸異構(gòu)酶I(Topoisomerase)的作用。它能引起DNA單鏈斷裂，不能再度連接，從而抑制DNA合成。因而它既能治療快速增長的腫瘤，也能治療增長緩慢的實體腫瘤。另外，還有10-羥基喜樹堿及在其基礎(chǔ)上進(jìn)行的結(jié)構(gòu)修飾衍生出的幾類藥物，如托樸泰康，Topotecan等。此類藥物在臨床上，其表現(xiàn)出骨髓抑制和胃腸道反應(yīng)等毒副作用。
3.鬼臼毒素類衍生物藥物鬼臼毒素(Podophyllotoxin)是從植物鬼臼根莖中分離得到的木脂體化合物。它通過抑制腫瘤細(xì)胞分裂過程中紡綞體的微管聚合，阻斷細(xì)胞生長。但其毒性很大。經(jīng)衍生化生成4′-去甲表鬼臼毒素則毒性明顯降低，而其作用機(jī)理已改變成為拓樸異構(gòu)酶II的抑制劑。但此類藥物溶解度都較小，有較嚴(yán)重的骨髓抑制等副作用，且易產(chǎn)生耐藥性。
4.雷公藤內(nèi)脂醇類藥物雷公藤是有毒中藥，其主要成分為四環(huán)二萜內(nèi)酯類化合物雷公藤內(nèi)酯醇和(Triptolide)，雷公藤內(nèi)酯二醇和(Tripdiolide)，雷公藤內(nèi)酯酮(Triptonide)，雷醇內(nèi)酯(Triptolidenol)等。其中雷公藤內(nèi)酯醇有可能成為一個引人注意的新藥，它能治療實體腫瘤，不易產(chǎn)生耐藥性，與其他抗癌藥物有協(xié)同作用。但其同樣因毒性較大，有待深入研究。
由此看出現(xiàn)今從天然產(chǎn)物中尋找抗癌藥物中以生物堿結(jié)構(gòu)藥物居多且多具有較大的毒副作用，因而需要尋找毒副作用較小用藥更為安全且結(jié)構(gòu)新穎，療效高，不易產(chǎn)生耐藥性的抗癌化合物將是今后抗癌藥物研究的重點所在。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一類雙苯十一酮類(diarylundecanone)化合物，是具有抗癌活性的非生物堿類的新結(jié)構(gòu)化合物，是一類潛在的可以治療癌癥的藥物。以下為該類化合物結(jié)構(gòu)式。
結(jié)構(gòu)式中R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R9，R10＝H，OH，OCH3，Cl，Br，I，CH3，NH2，OAc，CH2OH，CnH2nOH，CHO，COOH，COONa，COOK，CH2NH3，CnH2nNH3(n＝1.2...)，HS，NHCO，CNOH，CH2O2，CHO3，CH2S2，NO2。
本發(fā)明的目的可以通過從天然產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)或合成該類化合物來達(dá)到。
本發(fā)明可以通過以下方式得以實現(xiàn)云南產(chǎn)小喬木紫金牛(Ardisiaarborescens)用50％-95％乙醇提取，減壓得浸膏，將浸膏按照1∶5比例分散于甲醇中，用石油醚萃取脫脂，蒸干甲醇后用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相減壓蒸干得浸膏，經(jīng)過硅膠柱低壓層析體系CHCl3/MeOH(50∶1，20∶1，10∶1 and 5∶1梯度洗脫，再經(jīng)由多次柱層析及重結(jié)晶得化合物。
經(jīng)檢測，該類化合物具有抑癌細(xì)胞生長的作用。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點1、提取出的化合物具有抗癌活性；2、提取方法簡單易行。
具體實施例方式
下面結(jié)合實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實例一從云南產(chǎn)小喬木紫金牛(Ardisia arborescens)3kg用95％乙醇常溫提取，減壓得浸膏200g浸膏，將浸膏分散于1L含水10％的甲醇中，用石油醚5L萃取脫脂，蒸干甲醇后再用乙酸乙酯5L萃取6次，乙酸乙酯相減壓蒸干得浸膏50g。乙酸乙酯部分(23g)進(jìn)行硅膠柱層析[硅膠690g；洗脫劑CHCl3/MeOH(50∶1，20∶1，10∶1 and 5∶1)梯度洗脫]得到四個部分。用硅膠柱層析(petroleum ether/Me2CO 3∶1)，再經(jīng)由聚酰胺柱層析(CHCl3/MeOH，15∶1)純化，由Fr.4分離得到該化合物(100mg)。經(jīng)重結(jié)晶(氯仿)后可以得到無色針狀結(jié)晶11-(2，6-二羥基-苯酚)-1-(2，4，6-三羥基-苯酚)-十一烷-1-酮，結(jié)構(gòu)見下圖

采用SRB法進(jìn)行抗癌活性篩選。SRB可與生物大分子中的氨基酸結(jié)合，其在515nm的OD讀數(shù)與細(xì)胞數(shù)呈良好線性關(guān)系，故可作為細(xì)胞數(shù)的定量。因此根據(jù)酶標(biāo)儀測出的OD值變化，可求出抗癌藥物作用的瘤細(xì)胞數(shù)量變化，以此求出50％腫瘤細(xì)胞生長抑制所需藥物濃度(GI50)。
GI50＝(加藥細(xì)胞OD-對照平板測定的細(xì)胞的OD)/(加藥細(xì)胞濃度-對照平板測定的細(xì)胞濃度)。
結(jié)果表明此化合物對神經(jīng)癌細(xì)胞N-04及肺癌細(xì)胞Lu-04的GI50值分別為38.35，24.56μg/ml。并且有明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系，隨藥物的濃度增加，細(xì)胞存活率下降(見下表)。
RBS法測定2種腫瘤細(xì)胞的存活率(％)

權(quán)利要求
1.具有抗癌活性的雙苯十一酮類化合物，具有以下結(jié)構(gòu)式 結(jié)構(gòu)式中R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R9，R10＝H，OH，OCH3，Cl，Br，I，CH3，NH2，OAc，CH2OH，CnH2nOH，CHO，COOH，COONa，COOK，CH2NH3，CnH2nNH3(n＝1、2...)，HS，NHCO，CNOH，CH2O2，CHO3，CH2S2，NO2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗癌活性的雙苯十一酮類化合物，其特征是優(yōu)選的R1，R3，R4，R6，R10＝OH；R2，R5，R7，R9，R10＝H。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的具有抗癌活性的雙苯十一酮類化合物可從云南產(chǎn)小喬木紫金牛(Ardisia arborescens)中提取分離得到。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的具有抗癌活性的雙苯十一酮類化合物可通過化學(xué)合成方法獲得。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的具有抗癌活性的雙苯十一酮類化合物可對云南產(chǎn)小喬木紫金牛(Ardisia arborescens)用50％-95％乙醇提取，減壓得浸膏，將浸膏按照1∶5比例分散于甲醇中，用石油醚萃取脫脂，蒸干甲醇后用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相減壓蒸干得浸膏，經(jīng)過硅膠柱低壓層析體系CHCl3/MeOH(50∶1，20∶1，10∶1 and 5∶1梯度洗脫，再經(jīng)由多次柱層析及重結(jié)晶得化合物。。
6.權(quán)利要求1或2所述的具有抗癌活性的雙苯十一酮類化合物在制備抗癌藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一類具有抗癌活性的化合物。針對目前抗癌藥物市場情況公開了一種具有抗癌活性的雙苯十一酮類化合物，可以通過從云南產(chǎn)小喬木紫金牛(Ardisia arborescens)中提取分離得到，具有抑癌細(xì)胞生長的作用。
文檔編號C07C49/00GK1699323SQ20041002256
公開日2005年11月23日 申請日期2004年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月20日
發(fā)明者吳鳳鍔, 鄭穎 申請人:中國科學(xué)院成都生物研究所