專利名稱：苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯類化合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及有機(jī)化學(xué)、藥物化學(xué)和藥理學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯和苯丙酸丙苯酯類化合物和其關(guān)鍵中間體以及它們地制備方法和它們作為藥物的用途。
背景技術(shù)：
目前，由于工業(yè)發(fā)展中帶來的環(huán)境污染等問題，人類的生存環(huán)境質(zhì)量不斷下降，腫瘤疾病的發(fā)病率和致死率也不斷上升。然而治療腫瘤疾病的特效藥并不能令人滿意，并且目前抗腫瘤臨床所用細(xì)胞毒性藥物的選擇性不高所導(dǎo)致的對正常細(xì)胞的惡性殺傷，限制了該類藥物的普遍適用性。因此，尋找和發(fā)現(xiàn)新的選擇性高的細(xì)胞毒性抗腫瘤藥物是世界范圍內(nèi)的研究熱點。我們也致力于抗腫瘤藥物的研究。2003年中國臺灣學(xué)者Chen Jih-Jung等從薄葉風(fēng)藤中分離得到一個具有苯丙酸苯丙酯結(jié)構(gòu)的新化合物，并對其作了細(xì)胞毒性試驗，發(fā)現(xiàn)對小鼠白血病細(xì)胞(P-388)有一定的細(xì)胞毒性(Chen，J.J.，Duh，C.Y.，Huang，H.Y.and Chen，I.S.(2003)Helv.Chim.Acta.86，2058-2064.)。因此本發(fā)明的目的在于對這類化合物進(jìn)行合成和結(jié)構(gòu)改造，以期尋找對腫瘤細(xì)胞株生長產(chǎn)生更強(qiáng)抑制作用的苯丙酸苯丙酯化合物及其類似物。根據(jù)全世界尤其是中國的常發(fā)腫瘤疾病譜及腫瘤細(xì)胞的敏感性，我們選擇了人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)，鼻咽癌細(xì)胞(CNE)，口腔上皮癌細(xì)胞(KB)，人肺癌細(xì)胞(A549)，人子宮頸癌細(xì)胞(Hela)五株腫瘤細(xì)胞作為體外細(xì)胞毒活性藥理評價的指標(biāo)。
發(fā)明目的
本發(fā)明的目的在于提供一種具有細(xì)胞毒活性的化合物，具體而言，本發(fā)明提供了一種具有式(1)所示的苯丙烯酸苯丙烯酯和其類似物及其可藥用鹽或溶劑化物
式(1)
其中
取代基R6，R7，R8，R6′，R7′，或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，巰基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的烷胺基，1～15碳的不飽和烴基，1～15碳的不飽和烴氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芳氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的酰氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；取代基X選自氫(H)2，羥基(OH)2，氧，硫；基團(tuán)R選自氧，氮，含1-8個碳的亞烷基，含1-8個碳的亞烷胺基，含1-8個碳的亞烷氧基，含1-8個碳的亞烷硫基；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基。
本發(fā)明的另一目的是提供了具有細(xì)胞毒活性如式(2)所示的苯丙酸苯丙酯類化合物及其類似物以及其可藥用鹽或溶劑化物
式(2)
其中取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′及取代基X和基團(tuán)R的定義與式(1)的相同。
本發(fā)明的另一目的是提供了式(1)、式(2)化合物的制備方法。
本發(fā)明的又一目的是提供了式(1)和式(2)化合物的用于制備防治腫瘤疾病藥物的用途。
本發(fā)明的另一個目的是提供了一種含有式(1)、式(2)化合物的用于抗腫瘤疾病的藥物組合物。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種具有式(1)所示的苯丙烯酸苯丙烯酯類化合物和其類似物及其可藥用鹽或溶劑化物
式(1)
其中
取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，巰基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的烷胺基，1～15碳的不飽和烴基，1～15碳的不飽和烴氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芳氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的酰氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；取代基X選自氫(H)2，羥基(OH)2，氧，硫；基團(tuán)R選自氧，氮，含1-8個碳的亞烷基，含1-8個碳的亞烷胺基，含1-8個碳的亞烷胺基，，含1-8個碳的亞烷硫基；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基。
本發(fā)明優(yōu)選的式(1)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是，其中
當(dāng)式(1)中的取代基X為氧，取代基R為氧時，為式(I)所示的苯丙烯酸苯丙烯酯類化合物
其中
取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，巰基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的烷胺基，1～15碳的不飽和烴基，1～15碳的不飽和烴氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芳氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的酰氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基；
本發(fā)明優(yōu)選的式(I)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是，其中
R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，硝基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷胺基，含1～8個碳的烷氧基，含1～15個碳的不飽和烯氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基。
本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的式(I)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是，其中
R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，硝基，含1～8個碳的烷氧基，含1～15個碳的不飽和烯氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基。
本發(fā)明優(yōu)選的式(I)化合物包括
I-a.(E)-7-甲氧基-苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯；
I-b.(E)-(6，7，8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯；
I-c.(E)-(7-硝基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′-二甲氧基)苯丙烯酯；
I-d.(E)-(6，7，8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′，8′-三甲氧基)苯丙烯酸；
I-e.(E)-(7-甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′-二甲氧基)苯丙烯酯；
I-f.(E)-(6，7-二甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′-二甲氧基)苯丙烯酯；
I-g.(E)-(6，7，8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′-二甲氧基)苯丙烯酸；
I-h.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酸；
I-i.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)苯丙烯酯；
I-j.(E)-(7-羥基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯；
I-k.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-苯丙烯酯；
I-l.(E)-(6，7-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-苯丙烯酯；
I-m.(E)-(6，7-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)-苯丙烯酯；
I-n.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯；
I-o.(E)-(6，8-二甲氧基-7-O-(3″，4″-二氯)芐基)-苯丙烯酸-(E)-(6′，8′-二甲氧基-7′-O-(3，4-二氯)芐基)-苯丙烯酯；
I-p.(E)-(6，8-二甲氧基-7-O-(4″-溴)芐基)-苯丙烯酸-(E)-(6′，8′-二甲氧基-7′-O-(4-溴)芐基)-苯丙烯酯；
I-q.(E)-(6，8-二甲氧基-7-O-(3″-溴)芐基)-苯丙烯酸-(E)-(6′，8′-二甲氧基-7′-O-(3-溴)芐基)-苯丙烯酯；
I-r.(E)-(6，8-二甲氧基-7-O-(2″-碘，4″-溴)芐基)-苯丙烯酸-(E)-(6′，8′-二甲氧基-7′-O-(2-碘，4-溴)芐基)-苯丙烯酯；
I-s.(E)-(6，8-二甲氧基-7-O-香葉基)-苯丙烯酸-(E)-(6′，8′-二甲氧基-7′-O-香葉基)-苯丙烯酯；
本發(fā)明提供了一種具有式(2)所示的苯丙酸苯丙酯類化合物和其類似物及其可藥用鹽或溶劑化物
式(2)
其中
取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，巰基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的烷胺基，1～15碳的不飽和烴基，1～15碳的不飽和烴氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芳氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的酰氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；取代基X選自氫(H)2，羥基(OH)2，氧，硫；基團(tuán)R選自氧，氮，含1-8個碳的亞烷基，含1-8個碳的亞烷胺基，含1-8個碳的亞烷氧基，含1-8個碳的亞烷硫基；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基；
本發(fā)明優(yōu)選的式(2)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是當(dāng)式(2)中的取代基X為氧，取代基R為氧時，為式(II)所示的苯丙酸苯丙酯類化合物
其中
取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，巰基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的烷胺基，1～15碳的不飽和烴基，1～15碳的不飽和烴氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芳氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的酰氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基；
本發(fā)明優(yōu)選的式(II)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，其中
R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，硝基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷胺基，含1～8個碳的烷氧基，含1～15個碳的不飽和烯氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基含1～8個碳的烷胺基，或苯基。
本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的式(II)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是，其中
R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，硝基，含1～8個碳的烷氧基，含1～15個碳的不飽和烯氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基。
本發(fā)明優(yōu)選的式(II)化合物包括
II-a.7-甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯；
II-b.6，7，8-三甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯；
II-c.7-氨基-苯丙酸-6′，7′-二甲氧基-苯丙酯；
II-d.6，7-二甲氧基-苯丙酸-6′，7′-二甲氧基-苯丙酯；
II-e.7-甲氧基-苯丙酸-6′，7′-二甲氧基-苯丙酯；
II-f.7-甲基-苯丙酸-7′-甲基-苯丙酯；
II-g.6，7，8-三甲氧基-苯丙酸-6′，7′-二甲氧基-苯丙酯；
II-h.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-6′，7′-二甲氧基甲氧基-苯丙酯；
II-i.6，7-二甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基甲氧基-苯丙酯；
II-j.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基甲氧基-苯丙酯；
II-k.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸苯丙酯；
II-l.6，7-二甲氧基甲氧基-苯丙酸苯丙酯；
II-m.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯；
II-n.7-羥基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯；
本發(fā)明提供了一種如式(3)所示的式(1)和式(2)化合物的關(guān)鍵中間體苯丙烯類化合物及其類似物以及其可藥用鹽或溶劑化物
式(3)
其中取代基R6，R7，R8取代基X的定義與式(1)的相同；取代基R選自氫。巰基，胺基，羥基，含1-8個碳的烷基，含1-8個碳的烷胺基，含1-8個碳的烷氧基，含1-8個碳的烷硫基；
本發(fā)明優(yōu)選的式(3)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是，其中
R6，R7，R8可以相同或不同，分別獨立地選自氫，羥基，硝基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷胺基，含1～8個碳的烷氧基，含1～15個碳的不飽和烯氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基；取代基X選自氫(H)2，氧，硫；基團(tuán)R選自氫，巰基，胺基，羥基，含1～8個碳的烷氧基；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基。
本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的式(3)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是，其中
R6，R7，R8可以相同或不同，分別獨立地選自氫，羥基，硝基，含1～8個碳的烷氧基，含1～15個碳的不飽和烯氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基；取代基X是氫(H)2，氧；基團(tuán)R是羥基，含1～8個碳的烷氧基；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基。
本發(fā)明進(jìn)一步的實施方案是
當(dāng)式(3)化合物中的取代基X是氧，取代基R是乙氧基(CH3CH2O)時，如式(4)所示，為式I-1化合物
式(4)
其中取代基R6，R7，R8的定義與式(3)相同。
本發(fā)明的式I-1化合物包括
I-1-a.(E)-7-甲氧氧基苯丙酸乙酯；
I-1-b.(E)-6，7-二甲氧基甲氧基-苯丙酸乙酯；
I-1-c.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(4′-溴芐基)-苯丙酸乙酯；
I-1-d.(E)-7-硝基苯丙酸乙酯；
I-1-e.(E)-7-甲氧基甲氧基苯丙酸乙酯；
I-1-f.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(2′-氟，4′-溴芐基)-苯丙酸乙酯；
I-1-g.(E)-6，7-二甲氧基-苯丙酸乙酯；
I-1-h.肉桂酸乙酯；
I-1-i.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(3′-溴芐基)-苯丙酸乙酯；
I-1-j.(E)-6，7，8-三甲氧基-苯丙酸乙酯；
I-1-k.(E)-7-甲基-苯丙酸乙酯；
I-1-l.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(3′，4′-二氯芐基)-苯丙酸乙酯；
I-1-m.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-香葉基-苯丙酸乙酯；
當(dāng)式(3)化合物中的取代基X是氧，取代基R是羥基(OH)時，如式(5)所示，為式I-2化合物
式(5)
其中取代基R6，R7，R8的定義與式(3)相同。
本發(fā)明的式I-2化合物包括
I-2-a.(E)-7-甲氧基苯丙烯酸；
I-2-b.(E)-7-硝基苯丙烯酸；
I-2-c.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(2′-氟，4′-溴芐基)-苯丙烯酸；
I-2-d.(E)-6，7-二甲氧基-苯丙烯酸；
I-2-e.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(4′-溴芐基)-苯丙烯酸；
I-2-f.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(3′-溴芐基)-苯丙烯酸；
I-2-g.(E)-6，7，8-三甲氧基-苯丙烯酸；
I-2-h.(E)-6，7-二甲氧基甲氧基苯丙烯酸；
I-2-i.(E)-7-甲基-苯丙烯酸；
I-2-j.(E)-7-甲氧基甲氧基苯丙烯酸；
I-2-k.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(3′，4′-二氯芐基)-苯丙烯酸；
I-2-l.肉桂酸；
I-2-m.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-香葉基-苯丙烯酸；
當(dāng)式(3)化合物中的取代基代基X是氫(H2)，取基基R是羥基(OH)時，如式(6)所示，為式I-3化合物
式(6)
其中取代基R6，R7，R8的定義與式(3)相同。
本發(fā)明的式I-3化合物包括
I-3-a.(E)-7-甲氧基苯丙烯-1-醇；
I-3-b.(E)-6，7-二甲氧基甲氧基苯丙烯-1-醇；
I-3-c.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(4′-溴芐基)-苯丙烯-1-醇；
I-3-d.(E)-6，7，8-三甲氧基-苯丙稀-1-醇；
I-3-e.(E)-7-甲氧基甲氧基苯丙烯-1-醇；
I-3-f.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(3′，4′-二氯芐基)-苯丙烯-1-醇；
I-3-g.(E)-6，7-二甲氧基-苯丙烯-1-醇；
I-3-h.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(2′-氟，4′-溴芐基)-苯丙烯-1-醇；
I-3-i.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-(3′-溴芐基)-苯丙烯-1-醇；
I-3-j.(E)-7-甲基-苯丙烯-1-醇；
I-3-k.(E)-6，8-二甲氧基-7-O-香葉基-苯丙烯-1-醇；
本發(fā)明的另一目的是提供一種由中間體式(3)化合物制備式(1)、式(2)化合物的方法。該合成工藝路線特征(以取代基X為氧，取代基R為氧為例說明)是
以取代的苯甲醛化合物通過與三苯基乙氧羰基次甲基膦烷經(jīng)歷魏悌息(wittig)反應(yīng)制備得到式I-1化合物；由式I-1化合物經(jīng)過堿水解得到式I-2化合物；式I-1化合物通過氫化鋰鋁(LiAlH4)還原得到I-3化合物；式(1)化合物可由式I-2化合物與式I-3化合物在N，N-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)存在下通過酯化反應(yīng)制備得到式I化合物，或者由式I-2化合物與式I-3化合物在1，1′-二羰基咪唑(CDI)，1，8-二氮雜雙環(huán)[5，4，0]11烷-7-烯(DBU)存在下通過酯反應(yīng)得到。式(2)化合物可由式(1)化合物通過鈀碳(Pd-C)催化加氫反應(yīng)制得。優(yōu)選的式(1)化合物，式(2)化合物，式(3)化合物的具體制備過程如下所示
其中，當(dāng)式I化合物和式II化合物的取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′中含1～8個碳的烷胺基，含1～15個碳的飽和或不飽和烴基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芳烷基，含1～8個碳的?；?～8個碳的烷氧基烷基時，反應(yīng)要求初始原料即取代的苯甲醛需由該位未取代的苯甲醛化合物通過與生成該取代基的相關(guān)原料反應(yīng)制備而得。以取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′中含芳烷基氧基為例說明，當(dāng)取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′中含芳烷基氧基即由對應(yīng)位置含羥基的苯甲醛化合物與鹵代芳烷基反應(yīng)制備而得，以取代基R6，R8，R6′，R8′為甲氧基，R7，R7′為對溴芐氧基的式I化合物為例說明原料取代苯甲醛的制備，具體如下所示
其中，當(dāng)式I化合物和式II化合物的取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′中含羥基時，反應(yīng)要求初始原料即取代的苯甲醛需由含羥基的苯甲醛化合物通過甲氧基甲基氯(MOMCl)保護(hù)后制得，同時式I化合物和式II化合物都需經(jīng)過10％鹽酸(10％HCl)水解后制得。具體制備過程以取代基R6，R8，6′R8′氫，R7，R7′為羥基的式I化合物和式II化合物為例說明這類反應(yīng)，具體如下所示
i原料羥基保護(hù)
ii水解脫保護(hù)
本發(fā)明的式(1)化合物、式(2)化合物及式(3)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與藥學(xué)上常用的輻料或載體結(jié)合，制備得到具有腫瘤細(xì)胞生長抑制活性從而可以用于防治腫瘤的藥物組合物。上述各類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。
本發(fā)明的式(1)化合物、式(2)化合物及式(3)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與現(xiàn)已上市的抗腫瘤藥物如鉑類藥物順鉑(DDP)、喜樹堿類藥物伊立替康(Irinatecan、CPT-11)、長春花堿類藥物失碳長春花堿(Vinorebine，NVB諾維本)、脫氧胞昔類藥物吉西他濱(Gemcitabine，Gemzar，健擇)、足葉乙甙(Etoposide)、紫杉醇(Paditaxel)等聯(lián)合使用，制備得到具有腫瘤生長抵制活性的細(xì)胞毒性組合物，可用于治療腫瘤疾病。該類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。
下面通過實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。實施例給出了代表性化合物的合成及相關(guān)結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)以及部分活性數(shù)據(jù)。必須說明，下述實施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實質(zhì)對本發(fā)明進(jìn)行的簡單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
實施例1化合物I-i((E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)苯丙烯酯)的制備
本例涉及到具有細(xì)胞毒活性的式(1)化合物的一般合成方法。具體涉及化合物(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)苯丙烯酯的合成。將對甲氧甲氧基肉桂酸(292mg，1.4mmol)，N，N-二環(huán)己基碳二亞胺(318mg，1.5mmol)，4-二甲氨基吡啶(34mg，0.28mmol)溶于二氯甲烷中，在室溫下攪拌10分鐘，出現(xiàn)白色渾濁，加入對甲氧甲氧基肉桂醇(300mg，15mmol)的二氯甲烷溶液，在室溫下攪拌24小時。硅藻土過濾，濾液濃縮，粗品柱層析分離(正己烷/乙酸乙酯＝8∶1，粗品/硅膠＝1∶50)得到白色固體468mg，產(chǎn)率為87.0％。
化合物I-iRf(正己烷/乙酸乙酯4/1)0.6；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.48(6H，s)，4.84(2H，d，J＝6.4Hz)，5.21(4H，s)，6.25(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.37(1H，d，J＝16.0Hz)，6.66(1H，d，J＝16.0Hz)，7.00～7.49(8，m)，7.68(1H，d，J＝16.0Hz)。
根據(jù)實施例1的方法制備以下表一所示實施例2-19化合物
表一
下面列出表一中各化合物的理化數(shù)據(jù)
化合物I-a
白色固體，熔點63～64℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.71；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.84(6H，s)，4.84(2H，d，J＝6.4Hz)，6.26(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.35(1H，d，J＝16.0Hz)，6.66(1H，d，J＝16.0Hz)，6.83～75.0(8H，m)，7.69(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-b
白色固體，熔點62～63℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.21；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.78(H，s))，3.88(6H，s)，3.90(3H，s)，4.85(2H，d，J＝6.4Hz)，6.24(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.36(1H，d，J＝16.0Hz)，6.66(1H，d，J＝16.0Hz)，6.76～7.37(6H，m)，7.64(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-c
黃色固體，熔點89～90℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.26；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.89(3H，s)，3.91(3H，s)，4.88(2H，d，J＝6.8Hz)，6.24(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz)，6.58(1H，d，J＝16.0Hz)，6.82(1H，d，J＝16.0Hz)，6.95～7.18(7H，m)，7.75(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-d
白色固體，熔點60～62℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.27；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.83(3H，s)，3.86(3H，s)，3.87(3H，s)，3.88(3H，s)，3.89(3H，s)，3.90(3H，s)，4.87(2H，t，J＝6.4Hz，)6.30(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)6.40(1H，t，J＝16.0Hz)，6.64(2H，s)，6.64(1H，d，J＝16.0Hz)，6.77(2H，s)，7.66(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-e
白色固體，熔點66～67℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.22；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.84(3H，s)，3.89(3H，s)，3.91(3H，s)，4.85(2H，d，J＝6.8Hz)，6.24(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz)，6.36(1H，d，J＝16.0Hz)，6.65(1H，d，J＝16.0Hz)，6.80～7.49(7H，m)，7.69(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-f
白色晶體，熔點78～79℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.21；1HNMR(400MHZ，CDCl3)δ3.91(6H，s)，3.92(6H，s)，4.86(2H，d，J＝6.4Hz)，6.23(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.36(1H，d，J＝16.0Hz)，6.66(1H，d，J＝16.0Hz)，6.84～7.13(6H，m)，7.68(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-g
白色固體，熔點77～78℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.27；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.85(3H，s)，3.86(6H，s)，3.88(6H，s)，4.86(2H，d，J＝6.4Hz)，6.25(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.40(1H，d，J＝16.0Hz)，6.66(1H，d，J＝16.0Hz)，6.76～6.97(5H，m)7.65(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-h
白色固體，熔點65～66℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯4/1)0.38；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.48(3H，s)，3.52(3H，s)，3.53(3H，s)，4.84(2H，d，J＝6.4Hz)，5.21(2H，s)，5.24(2H，s)，5.26(2H，s)，6.25(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.37(1H，d，J＝16.0Hz)，6.63(1，d，J＝16.0Hz)，7.00～7.50(7H，m)，7.69(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-i
白色晶體，熔點30～31℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯4/1)0.60；1HNMR(400MHZ，CDCl3)δ3.48(6H，s)，4.84(2H，d，J＝6.4Hz)，5.21(4H，s)，6.25(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.37(1H，d，J＝16.0Hz)，6.66(1H，d，J＝16.0Hz)，7.00～7.48(8H，m)，7.68(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-j
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.18；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.93(3H，s)，4.87(2H，d，J＝6.8Hz)，5.90(1H，s)，6.36(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz)，6.37(1H，d，J＝16.0Hz)，6.71(1H，d，J＝16.0Hz)，6.94～7.43(8H，m)，7.67(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-k
白色固體，熔點52～53℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.54；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.49(3H，s)，4.88(2H，d，J＝6.4Hz，5.22(2H，s)，6.36(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.36(1H，d，J＝16.0Hz0，6.72(1H，d，J＝16.0Hz)，7.04～7.51(9H，m)，7.70(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-l
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.53；1HNMR(400MHZ，CDCl3δ3.52(3H，s)，3.53(3H，s)，4.87(2H，d，J＝6.8Hz，5.26(2H，s)，5.27(2H，s)，6.36(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz)，6.37(1H，d，J＝16.0Hz)，6.72(1H，d，J＝16.0Hz)，6.85～7.62(8H，m)，7.66(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-m
白色晶體，熔點32～33℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯4/1)032；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.48(3H，s)，3.52(3H，s)，3.53(3H，s)，4.84(2H，d，J＝6.4Hz)，5.18(2H，s)，5.26(2H，s)，5.27(2H，s)，6.25(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.37(1H，d，J＝16.0Hz)，6.66(1H，d，J＝16.0Hz)，6.99～7.38(7H，m)，7.65(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-n
白色固體，熔點49～50℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.20；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.48(3H，s)，3.82(3H，s)，4.84(2H，d，J＝6.8Hz)，5.21(2H，s)，6.24(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz)，6.36(1H，d，J＝16.0Hz)，6.66(1H，d，J＝16.0Hz)，6.83～7.49(8H，m)，7.68(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-o
白色固體，熔點101～104℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.33；1HNMR(400MHzH，CDCl3)δ3.83(3H，s)，3.84(3H，s)，3.86(3H，s)，3.87(3H，s)，4.87(2H，d，J＝6.4Hz)，4.97(2H，s)，5.00(2H，s)，6.28(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz)，6.40(1H，d，J＝16.0Hz)，6.63(1H，d，J＝16.0Hz)，6.63(2H，s)，6.65(1H，d，J＝16.0Hz)，6.75(2H，s)，7.26～7.30(2H，m)，7.39～7.42(2H，m)，7.65(2H，s)。
化合物I-p
白色固體，熔點88～91℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.31；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.81(3H，s)，3.82(3H，s)，3.83(3H，s)，3.85(3H，s)，4.87(2H，d，J＝6.8Hz)，4.97(2H，s)，5.00(2H，s)，6.29(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz)，6.39(1H，d，J＝16.0Hz)，6.60(1H，d，J＝16.0Hz)，6.62(2H，s)，6.74(2H，s)，7.35(4H，d，J＝6.8Hz)，7.47(4H，d，J＝6.8Hz)，7.64(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-q
白色膠狀，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.32；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.83(3H，s)，3.84(3H，s)，3.87(3H，s)，3.89(3H，s)，4.87(2H，d，J＝6.4Hz)，4.97(2H，s)，5.01(2H，s)，6.26(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.39(1H，d，J＝16.0Hz)，6.61(1H，d，J＝16.0Hz)，6.61(2H，s)，6.75(2H，s)，7.20(2H，m)7.37(2H，d，J＝8.0Hz)，7.42(2H，d，J＝8.0Hz)，7.64(1H，d，J＝16.0Hz)，7.71(2H，s)。
化合物I-r
白色固體，熔點75～78℃，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.38；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.81(3H，s)，3.82(3H，s)，3.84(3H，s)，3.85(3H，s)，4.87(2H，d，J＝6.4Hz)，5.05(2H，s)，508(2H，s)，6.25(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.40(1H，d，J＝16.0Hz)，6.61(2H，s)，6.63(1H，d，J＝16.0Hz)，6.74(2H，s)，7.20～7.29(4H，m)，7.48(2H，d，J＝8.0Hz)，7.64(1H，d，J＝16.0Hz)。
化合物I-s
淡黃液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.58；1HNMR(400Mz，CDCl3)δ1.59(6H，s)，1.67(12H，s)，2.04(8H，m)3.84(3H，s)，3.85(3H，s)，3.87(3H，s)，3.88(3H，s)，4.54(4H，m)，4.87(2H，d，J＝6.4Hz)，5.07(2H，m)，5.56(2H，m)，6.28(1H，dt，J＝16.0，6.4Hz)，6.40(1H，d，J＝16.0Hz)，6.60(2H，s)，6.63(1H，d，J＝16.0Hz)，6.75(2H，s)，7.65(1H，d，J＝16.0Hz)。
實施例20化合物II-j(4-甲氧基甲氧基-苯丙酸-4-甲氧基甲氧基-苯丙酯)的制備
本例涉及到具有細(xì)胞毒活性的式(2)化合物的一般合成方法。具體涉及化合物7，7′-二甲氧甲氧基苯丙酸丙苯酯的合成。將化合物(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)苯丙烯酯(50mg，0.13mmol)的乙酸乙酯(8mL)溶液加入裝有5mg 10％鈀碳的三頸瓶中，導(dǎo)入氫氣，室溫反應(yīng)過夜。硅藻土過濾，濾液濃縮，柱層析(正己烷/乙酸乙酯＝4∶1，粗品/硅膠＝1∶50)分離得到無色油滴48mg，產(chǎn)率達(dá)95.2％。
化合物II-j無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.67；
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.90(2H，m)，2.53((2H，t，J＝8.0Hz)，2.64(2H，t，J＝8.0Hz)，2.91(2H，t，J＝8.0Hz)，3.47(3H，s)，3.48(3H，s)，4.12(2H，t，J＝6.8Hz)，5.15(2H，s)，5.16(2H，s)，6.95～7.15(8H，m)。
根據(jù)實施例20的方法制備以下表二所示實施例21-33化合物
表2
化合物II-a
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.71；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.91(2H，m)，25.8(2H，t，J＝8.0Hz)，2.60(2H，t，J＝8.0Hz)，2.90(2H，t，J＝8.0Hz)，3.78(6H，s)，4.07(2H，t，J＝6.4Hz)，6.82～7.14(8H，m)。
化合物II-b
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.23；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.91(2H，m)2.61(2H，t，J＝8.0Hz)，2.63(2H，t，J＝8.0Hz)，2.90(2H，t，J＝8.0Hz)，3.78(3H，s)，3.81(3H，s)，3.84(6H，s)，4.09(2H，t，J＝6.4Hz)，6.42～7.73(6H，m)。
化合物II-c
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.13；1HNMR(400MHz，CEDCl3)δ1.91(2H，m)，2.58(2H，t，J＝8.0Hz)，2.63(2H，t，J＝8.0Hz)，2.85(2H，t，J＝8.0Hz)，3.86(3H，s)，3.87(3H，s)，4.10(2H，t，J＝6.4Hz)，5.30(2H，s)，6.43～7.02(7H，m)。
化合物II-d
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.26；1HNMR(400MHz，CDDl3)δ1.92(2H，m)，2.61(2H，t，J＝8.4Hz)，2.63(2H，t，J＝8.4Hz)，2.91(2H，t，J＝8.4Hz)，3.85(3H，s)，3.86(3H，s)，3.87(6H，s)，4.10(2H，t，J＝6.4Hz)，6.70(2H，s)，6.68～6.80(6H，m)。
化合物II-e
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.25；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.91(2H，m)，2.59(2H，t，J＝8.4Hz)，2.62(2H，t，J＝8.4Hz)，2.90(2H，t，J＝8.4Hz)，3.78(3H，s)，3.86(3H，s)，3.88(3H，s)，4.09(2H，t，J＝6.4Hz)，6.68～7.14(7H，m)。
化合物II-f
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.26；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.92(2H，m)，2.33(3H，s)，2.34(3H，s)，2.63(2H，t，J＝8.0Hz)，2.70(2H，t，J＝8.0Hz)，2.93(2H，t，J＝8.0Hz)，4.09(2H，t，J＝6.4Hz)，7.05～7.12(8H，m)。
化合物II-g
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.28；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.91(2H，m)，2.61(2H，t，J＝8.0Hz)，2.66(2H，t，J＝8.0Hz)，2.90(2H，t，J＝8.0Hz)，3.81(3H，s)，3.84(3H，s)，3.86(6H，s)，3.87(3H，s)，4.10(2H，t，J＝6.4Hz)，6.43～7.80(5H，m)。
化合物II-h
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.39；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.91(2H，m)，2.57(2H，t，J＝8.0Hz)，2.68(2H，t，J＝8.0Hz)，2.92(2H，t，J＝8.0Hz)，3.46(3H，s)，3.52(3H，s)，3.63(3H，s)，4.09(2H，t，J＝6.8Hz)，5.14(2H，s)，5.20(2H，s)，5.23(2H，s)，6.73～7.14(7H，m)。
化合物II-i
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.35；1HNMR(400MHz，CDCl3δ1.91(2H，m)，2.61(2H，t，J＝8.0Hz)，2.63(2H，t，J＝8.0Hz)，2.89(2H，t，J＝8.0Hz)，3.48(3H，s)，3.51(3H，s)，3.52(3H，s)，4.08(2H，t，J＝6.8Hz)，5.16(2H，s)，5.20(2H，s)，5.23(2H，s)，6.79～7.27(7H，m)。
化合物II-k
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.55；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.94(2H，m)，2.61(2H，t，J＝8.0Hz)，2.65(2H，t，J＝8.0Hz)，2.91(2H，t，J＝8.0Hz)，3.47(3H，s)，4.11(2H，t，J＝6.8Hz)，5.15(2H，s)，6.96～7.31(9H，m)。
化合物II-l
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.54；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.91(2H，m)，2.61(2H，t，J＝8.0Hz)，2.66(2H，t，J＝8.0Hz)，2.89(2H，t，J＝8.0Hz)，3.51(3H，s)，3.52(3H，s)，4.12(2H，t，J＝6.8Hz)，5.20(2H，s)，5.23(2H，s)，6.80～7.31(8H，m)。
化合物II-m
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.22；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.90(2H，m)，2.59(2H，t，J＝8.0Hz)，2.61(2H，t，J＝8.0Hz)，2.91(2H，t，J＝8.0Hz)，3.29(3H，s)，3.79(3H，s)，4.08(2H，t，J＝6.0Hz)，5.15(2H，s)，6.83～7.15(8H，m)。
化合物II-n
無色油滴，Rf(正己烷/乙酸乙酯3/1)0.18；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.92(2H，m)，258(2H，t，J＝8.0Hz)，2.64(2H，t，J＝8.0Hz)，2.88(2H，t，J＝8.0Hz)，3.79(3H，s)，4.07(2H，t，J＝6.0Hz)，5.38(1H，brs)，6.74～7.26(8H，m)。
為了更好地理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面分別用化合物對五種腫瘤細(xì)胞株生長的抑制作用的藥理實驗結(jié)果，說明其在制藥領(lǐng)域中的新用途。
實施例34化合物I-l對KB細(xì)胞的細(xì)胞毒活性
KB(口腔上皮癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法。細(xì)胞經(jīng)過24小時的孵育后，分別將新配的化合物I-l的二甲亞砜溶液加入到孔中，使孔中化合物最終濃度為100μg/mL。72小時后，加入10μL MTT(5mg/mL)的磷酸鹽緩沖液，再繼續(xù)在37℃培養(yǎng)4小時后，離心5分鐘除去未轉(zhuǎn)化的MTT，每孔中加入200μL二甲亞砜，以溶解還原的的MTT晶體甲臜(formazan)，所形成的formazan用酶標(biāo)儀在570nm波長下比色，細(xì)胞存活率由樣品相對于對照品的比值計算。
化合物I-l在濃度為100μg/mL時對KB細(xì)胞的抑制率為66.21％
實驗結(jié)論本實驗表明此類具有苯丙烯酸烯丙苯酯結(jié)構(gòu)的化合物，對KB細(xì)胞的生長具有一定的抑制作用，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)實施例34的方法，我們測試了本發(fā)明化合物對KB細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)見表三。
表三
實施例35化合物I-3-f對PC-3細(xì)胞的細(xì)胞毒活性
PC-3(前列腺癌)細(xì)胞用F-12培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如實施例34。
化合物I-3-f在濃度為100μg/mL時對PC-3細(xì)胞的抑制率為70.12％
實驗結(jié)論本實驗表明此類具有苯丙烯結(jié)構(gòu)的化合物，對PC-3細(xì)胞的生長具有一定的抑制作用，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)實施例35的方法，我們測試了本發(fā)明化合物對PC-3細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)見表四。
表四
實施例36化合物II-g對CNE細(xì)胞的細(xì)胞毒活性
CNE(鼻咽癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。以每孔5×103細(xì)胞的濃度加入到％孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如實施例34。
化合物II-g在濃度為100μg/mL時對CNE細(xì)胞的抑制率為48.75％
實驗結(jié)論本實驗表明此類具有苯丙酸丙苯酯結(jié)構(gòu)的化合物，對CNE細(xì)胞的生長具有一定的抑制作用，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)實施例36的方法，我們測試了本發(fā)明化合物對CNE細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)見表五。
表五
實施例37化合物I-g對A549細(xì)胞的細(xì)胞毒活性
A549(人肺癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如實施例34。
化合物I-g在濃度為100μg/mL時對A549細(xì)胞的抑制率為74.40％
實驗結(jié)論本實驗表明此類具有苯丙烯酸烯丙苯酯結(jié)結(jié)構(gòu)的化合物，對A549細(xì)胞的生長具有一定的抑制作用，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)實施例37的方法，我們測試了本發(fā)明化合物對A549細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)見表六。
表六
實施例38化合物I-n對Hela細(xì)胞的細(xì)胞毒活性
Hela(人子宮頸癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如實施例34。
化合物I-n在濃度為100μg/mL時對Hela細(xì)胞的抑制率為64.28％
實驗結(jié)論本實驗表明此類具有苯丙酸丙苯酯結(jié)構(gòu)的化合物，對Hela細(xì)胞的生長具有一定的抑制作用，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)實施例38的方法，我們測試了本發(fā)明化合物對Hela細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)見表七。
表七
為了更好地理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面分別用該類化合物的各種藥物劑型例如片劑、膠囊劑、注射劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑和軟膏劑的制備方法，說明其在制藥領(lǐng)域中的新應(yīng)用。
實施例39片劑
用含有權(quán)利要求1、權(quán)利要求2和權(quán)利要求3中化合物的化合物(以化合物II-m為例)2000mg，按照藥劑學(xué)一般壓片法混勻后加輔料8000mg，壓制成100片，每片重100mg。
實施例40膠囊劑
用含有權(quán)利要求1、權(quán)利要求2和權(quán)利要求3中化合物的化合物(以化合物I-k為例)2000mg，按照藥劑學(xué)膠囊劑的要求將8000mg輔料混勻后，裝入空心膠囊，每個膠囊重100mg。
實施例41注射劑
用含有權(quán)利要求1、權(quán)利要求2和權(quán)利要求3中化合物的化合物(以化合物II-n為例)2000mg，按照常規(guī)藥劑學(xué)方法，進(jìn)行活性炭吸附，經(jīng)0.65μ微孔濾膜過濾后，填入氮氣罐制成水針制劑。每只針劑罐裝2ml，共罐裝1000瓶。
實施例42氣霧劑
用含有權(quán)利要求1、權(quán)利要求2和權(quán)利要求3中化合物的化合物(以化合物II-e為例)2000mg，用適量丙二醇溶解后，加入蒸餾水及其他輔料后，制成200ml的澄清溶液即得。
實施例43栓劑
用含有權(quán)利要求1、權(quán)利要求2和權(quán)利要求3中化合物的化合物(以化合物I-3-f為例)2000mg，將之研細(xì)加入甘油適量，研勻后加入已熔化的甘油明膠，研磨均勻，傾入已涂潤滑劑的模型中，制得化合物I-3-f栓20顆。
實施例44膜劑
用含有權(quán)利要求1、權(quán)利要求2和權(quán)利要求3中化合物的化合物(以化合物I-g為例)2000mg，將聚乙烯醇、藥用甘油、水等攪拌膨脹后加熱溶解，80目篩網(wǎng)過濾，再將化合物II-l加入到濾液中攪拌溶解，涂膜機(jī)制膜200片。
實施例45滴丸劑
用含有權(quán)利要求1、權(quán)利要求2和權(quán)利要求3中化合物的化合物(以化合物II-e為例)2000mg，與明膠等基質(zhì)700mg加熱溶化混勻后，滴入低溫液體石蠟中，共制得滴丸100丸。
實施例46外用搽劑
用用含有權(quán)利要求1、權(quán)利要求2和權(quán)利要求3中化合物的化合物(以化合物II-m為例)2g，按照常規(guī)藥劑學(xué)方法，與乳化劑等輔料0.5g混合研磨，再加蒸餾水至50ml制成。
實施例47軟膏劑
用含有權(quán)利要求1、權(quán)利要求2和權(quán)利要求3中化合物的化合物(以化合物I-o為例)2000mg，研細(xì)后與凡士林等油性基質(zhì)198g研勻即得。
權(quán)利要求
1.一種式(1)所示的具有細(xì)胞毒活性的苯丙烯酸苯丙烯酯類衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物
其中
取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，巰基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的烷胺基，1～15碳的不飽和烴基，1～15碳的不飽和烴氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芳氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的酰氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；取代基X選自氫(H)2，羥基(OH)2，氧，硫；基團(tuán)R選自氧，硫，氮，含1-8個碳的亞烷基，含1-8個碳的亞烷胺基，含1-8個碳的亞烷氧基，含1-8個碳的亞烷硫基；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式(1)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，其中式(1)中的取代基X為氧，取代基R為氧，為式(I)所示的苯丙烯酸苯丙烯酯類化合物
其中
取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，巰基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的烷胺基，1～15碳的不飽和烴基，1～15碳的不飽和烴氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芳氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的酰氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的式(I)化合物，它們是
I-a.(E)-7-甲氧基-苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯；
I-b.(E)-(6，7，8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯；
I-c.(E)-(7-硝基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′-二甲氧基)苯丙烯酯；
I-d.(E)-(6，7，8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′，8′-三甲氧基)苯丙烯酯；
I-e.(E)-(7-甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′-二甲氧基)苯丙烯酯；
I-f.(E)-(6，7-二甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′-二甲氧基)苯丙烯酯；
I-g.(E)-(6，7，8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′-二甲氧基)苯丙烯酯；
I-h.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′，7′-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酯；
I-i.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)苯丙烯酯；
I-j.(E)-(7-羥基)苯丙烯酯-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯；
I-k.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-苯丙烯酯；
I-l.(E)-(6，7-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-苯丙烯酯；
I-m.E)-(6，7-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)-苯丙烯酯；
I-n.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯；
I-o.(E)-(6，8-二甲氧基-7-O-(3″，4″-二氯)芐基)-苯丙烯酸-(E)-(6′，8′-二甲氧基-7′-O-(3，4-二氯)芐基)-苯丙烯酯；
I-p.(E)-(6，8-二甲氧基-7-O-(4″-溴)芐基)-苯丙烯酸-(E)-(6′，8′-二甲氧基-7′-O-(4-溴)芐基)-苯丙烯酯；
I-q.(E)-(6，8-二甲氧基-7-O-(3″-溴)芐基)-苯丙烯酸-(E)-(6′，8′-二甲氧基-7′-O-(3-溴)芐基)-苯丙烯酯；
I-r.(E)-(6，8-二甲氧基-7-O-(2″-碘，4″-溴)芐基)-苯丙烯酸-(E)-(6′，8′-二甲氧基-7′-O-(2-碘，4-溴)芐基)-苯丙烯酯；
I-s.(E)-(6，8-二甲氧基-7-O-香葉基)-苯丙烯酸-(E)-(6′，8′-二甲氧基-7′-O-香葉基)-苯丙烯酯。
4.一種具有式(2)所示的具有細(xì)胞毒活性的苯丙酸苯丙酯類衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物
其中
取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，巰基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的烷胺基，1～15碳的不飽和烴基，1～15碳的不飽和烴氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芳氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的酰氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；取代基X選自氫(H)2，羥基(OH)2，氧，硫；基團(tuán)R選自氧，硫，氮，含1-8個碳的亞烷基，含1-8個碳的亞烷胺基，含1-8個碳的亞烷氧基，含1-8個碳的亞烷硫基；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的式(2)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，其中式(2)中的取代基X為氧，取代基R為氧，為式(II)所示的苯丙酸苯丙酯類化合物
其中
取代基R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，巰基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的烷胺基，1～15碳的不飽和烴基，1～15碳的不飽和烴氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芳氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的酰氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基。
6.根據(jù)權(quán)利要求式(II)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，其中
R6，R7，R8，R6′，R7′或R8′可以相同或不同，分別獨立地選自氫，硝基，含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷胺基，含1～8個碳的烷氧基，含1～15個碳的不飽和烯氧基，取代或未取代的芳烷氧基，含1～8個碳的烷氧基烷氧基，其條件是取代基R6，R7，R8，R6′，R7′和R8′不能同時是氫；
其中用于取代的取代基選自含1～8個碳的烷基，含1～8個碳的烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，含1～8個碳的烷胺基，或苯基。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的式(II)化合物，它們是
II-a.7-甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯；
II-b.6，7，8-三甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯；
II-c.7-氨基-苯丙酸-6′，7′-二甲氧基-苯丙酯；
II-d.6，7-二甲氧基-苯丙酸-6′，7′-二甲氧基-苯丙酯；
II-e.7-甲氧基-苯丙酸-6′，7′-二甲氧基-苯丙酯；
II-f.7-甲基-苯丙酸-7′-甲基-苯丙酯；
II-g.6，7，8-三甲氧基-苯丙酸-6′，7′-二甲氧基-苯丙酯；
II-h.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-6′，7′-二甲氧基甲氧基-苯丙酯；
II-i.6，7-二甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基甲氧基-苯丙酯；
II-j.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基甲氧基-苯丙酯；
II-k.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸苯丙酯；
II-l.6，7-二甲氧基甲氧基-苯丙酸苯丙酯；
II-m.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯；
II-n.7-羥基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯；
8.根據(jù)權(quán)利要求2中式I化合物的制備方法，包括將式I-2化合物與式I-3化合物在N，N-二環(huán)己基羰二亞胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)存在下通過酯化反應(yīng)制備得到式I化合物
或
將式I-2化合物與式I-3化合物在1，1′-二羰基咪唑(CDI)，1，8-二氮雜雙環(huán)[5，4，0]11烷-7-烯(DBU)存在下通過酯化反應(yīng)得式I化合物
其中取代基R6，R7，R8，R6′，R7′，R8′的定義與權(quán)利要求2相同。
9.根據(jù)權(quán)利要求5中式II化合物制備方法，包括將式I化合物通過鈀碳催化加氫反應(yīng)制備得到式II化合物
其中取代基R6，R7，R8，R6′，R7′，R8′的定義與權(quán)利要求5相同。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-7之一的化合物或者它們的可藥用鹽或它們的溶劑化物用于制備防治腫瘤疾病藥物的用途。
11.一種用于防治腫瘤疾病的藥物組合物，其含有治療有效量的作為活性成分的根據(jù)權(quán)利要求1-7之一的化合物或者它們的可藥用鹽或它們的溶劑化物和可藥用輔料。
12.一種用于防治腫瘤疾病的藥物組合物，其含有治療有效量的作為活性成分的根據(jù)權(quán)利要求1-7之一的化合物或者它們的可藥用鹽或它們的溶劑化物以及與其他抗腫瘤藥物組成的混合物和可藥用輻料。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或者12的藥物組合物，其選自注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑劑型藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有細(xì)胞毒活性的式(1)所示的苯丙烯酸苯丙烯酯類化合物和其類似物或者式(2)所示的苯丙酸苯丙酯類化合物和其類似物及其可藥用鹽或溶劑化物，本發(fā)明還涉及這些化合物的制備方法及其制備中間體化合物，本發(fā)明還涉及這些化合物的藥物用途和含有該化合物的藥物組合物。本發(fā)明的化合物具有一定的抑制腫瘤細(xì)胞生長活性，可預(yù)期作為抗腫瘤藥物用途。
文檔編號C07C205/00GK1796363SQ20041010289
公開日2006年7月5日 申請日期2004年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月29日
發(fā)明者趙昱, 周長新, 白驊, 胡利紅, 鄒宏斌, 巫秀美 申請人:浙江海正天華新藥研發(fā)有限公司