專利名稱：苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物,其藥用鹽,它們的制備方法和含有它們的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及<式1>表示的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物、其藥用鹽，制備其的方法和含有它們作為有效成分的藥物組合物，所述藥物組合物具有保護心臟免受缺血-再灌造成的損傷的功能。
<式1>
(其中R1、R2、R3、R4、R5、R6和*如說明書中所定義)。
背景技術(shù)：
缺血性心臟病由心肌缺血產(chǎn)生，心肌缺血由氧供應嚴重不足發(fā)展而來的，而氧供應嚴重不足則是由流向心臟的血流出于類似動脈硬化的原因被中斷而造成的(G.J.Grover，Can.J.Physiol.75，309，1997；G.D.Lopaschuk等，Science & Medicine 42，1997)。心肌缺血逐漸誘導細胞中的病理變化，導致不可逆的心肌損傷，甚至最后導致細胞和組織壞死。在損傷是可逆的早期，通過諸如PTCA(經(jīng)皮經(jīng)管冠狀動脈成形術(shù))和CABG(冠狀動脈旁路移植術(shù))的外科手術(shù)的再灌注或者使用血栓溶解劑，可以預防不可逆損傷，但是，通過再灌注治療恢復血流伴隨著被稱作再灌注損傷的進一步損傷現(xiàn)象(D.J.Hearse，Medicographia 18，22，1996)。很難清楚地分出缺血性損傷和再灌注介導的損傷。再灌注損傷是由再灌注療法產(chǎn)生的突然的血流恢復造成的，主要是由于活性氧自由基和鈣的過載。再灌注損傷包括許多事件，如心律不齊、血管損傷、心肌機能障礙和嚴重的神經(jīng)認知機能障礙。
為了延遲局部缺血造成的損傷和最小化再灌注損傷，以下研究正在活躍地進行著使用免疫調(diào)節(jié)劑的藥物療法，抑制凋亡的藥劑，離子通道調(diào)節(jié)劑等，用于提高血液運氧能力的人造血液制品，以及設(shè)備和操作程序的開發(fā)，但是迄今為止還沒有一個已經(jīng)投入商業(yè)使用。至于離子通道調(diào)節(jié)劑，Na-H交換劑(NHE)的抑制劑、腺苷A1/A2拮抗劑和KATP開啟劑(ATP-敏感的鉀通道開啟劑)吸引了我們的注意力。
根據(jù)早期的報道，二氮嗪，一種KATP開啟劑，能夠通過誘導黃素蛋白的氧化而抑制線粒體中氧自由基的產(chǎn)生，從而減小由氧化應激造成的損傷(A.A.Starkov，Biosci，Rep.17，273，1997；V.P.Skulachev，Q.Rev.Biophus.29，169，1996)，并且KATP的開啟涉及抗氧化酶的產(chǎn)生(S.Okubo等，Mol.andcell Biochem，196，3，1999)和刺激性氨基酸釋放的下降(J-L Moreau，G.Huber，Brain Res.，31，65，1999)。普通的KATP開啟劑不僅具有心臟保護活性，而且具有促血管舒張活性，這意味著冠狀和外周血管松弛使血壓下降，因此流向受損組織的血流減少，是心臟保護的負面因素。即，血管舒張是這些用于心臟保護的開啟劑的一種副作用。
首次發(fā)現(xiàn)于心肌中的KATP廣泛分布在許多器官和組織中，例如，胰腺的β-細胞、平滑肌、腎和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等，因此KATP已經(jīng)成為新型藥物開發(fā)的一個主要靶對象，但同時，很難開發(fā)選擇性地對特定器官或組織起作用的新型藥物。根據(jù)Atwal等的報道，KATP的心臟保護活性和促血管舒張活性是彼此不相關(guān)的，并且具有<式2>結(jié)構(gòu)的苯并吡喃基氰基胍(BMS-180448)特異性地響應心臟中的KATP，這點與常規(guī)的鉀通道開啟劑不同。據(jù)證實這些化合物具有相對弱的促血管舒張活性，因此它們能夠在沒有明顯的降壓作用的情況下保護心臟，這提供了一個開發(fā)缺血性心臟病新型治療藥的機會。
<式2>
因此，本發(fā)明的發(fā)明人合成了苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物，其中將在苯并吡喃的4-位取代的胍基環(huán)化成苯環(huán)，形成苯并咪唑環(huán)。本發(fā)明的發(fā)明人證實了本發(fā)明的化合物對缺血-再灌造成的損傷具有優(yōu)異的心臟保護效果，因而能夠有效地用作缺血-再灌相關(guān)疾病的保護劑或治療藥，從而完成了本發(fā)明。確切而言，所述化合物能夠用于治療諸如心肌梗死、不穩(wěn)定心絞痛等的缺血性心臟病，用于在溶解血栓療法或再灌注療法如PTCA(經(jīng)皮經(jīng)管冠狀動脈成形術(shù))和CABG(冠狀動脈旁路移植術(shù))中保護心臟，以及用于保護缺血-再灌相關(guān)的組織，如神經(jīng)細胞、腦、視網(wǎng)膜細胞、儲藏器官等。
發(fā)明概述本發(fā)明的一個目的是提供<式1>表示的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽。
本發(fā)明還有一個目的是提供用于制備<式1>表示的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽的方法。
本發(fā)明的再一個目的是提供含有<式1>表示的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽作為有效成分的藥物組合物。
優(yōu)選實施方案的詳細描述為了達到上述目的，本發(fā)明提供苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物，其藥用鹽，用于制備其的方法和含有它們作為有效成分的藥物組合物。
下面將詳細描述本發(fā)明。
本發(fā)明提供<式1>表示的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽<式1>
(其中，X是O、S或NCN；R1是NO2、NH2、H、CN、NHCOCH3、NHCOCF3或NHSO2CH3；R2是 CH2ORa或CH3，其中，Ra是C1～C4直鏈或支鏈烷基；Z是C2～C6直鏈或支鏈烷基；R3是OH或OCOCH3；R4是C1～C4直鏈或支鏈烷基；R5和R6獨立地為H、C1～C4直鏈或支鏈烷基、烷氧基或鹵素；*表示手性碳)。
除了<式1>表示的苯并吡喃衍生物外，本發(fā)明還提供其藥用鹽、溶劑化物和水合物。
<式1>表示的本發(fā)明苯并吡喃衍生物不僅包括外消旋混合物，而且還包括其中2、3或4-位中至少一個碳原子是手性碳的任何非對映異構(gòu)體。在<式1>中，如果2、3和4-位的碳原子都是手性的，則本發(fā)明的3，4-二氫苯并吡喃化合物是如下面<式3>中(I1)、(I2)、(I3)和(I4)所示的非對映異構(gòu)體形式。
<式3>
(其中X、R1、R2、R3、R4、R5和R6如<式1>中所定義)。
優(yōu)選的<式1>化合物包括1)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；2)(2R，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；3)(2S，3S，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；4)(2R，3S，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；5)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；6)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-3-甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；7)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-5，6-二甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；8)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-5，6-二甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；9)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-3，5，6-三甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；10)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-3，5，6-三甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；11)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-乙酰氧基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；12)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-乙酰氧基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；13)(2S，3R，4S)-6-乙酰氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；14)(2S，3R，4S)-6-乙酰氨基-3，4-二氫-3-乙酰氧基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；15)(2S，3R，4S)-6-苯甲酰氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；16)(2S，3R，4S)-6-(三氟乙?；?氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；17)(2S，3R，4S)-6-甲磺酰氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；18)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；19)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；20)(3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；21)(3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；22)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-硫代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；23)(3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-硫代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；24)(3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-硫代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；25)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二乙氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；26)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；27)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；28)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-6-甲基苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；29)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；30)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；31)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二氧戊環(huán)-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；和32)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃。
本發(fā)明<式1>化合物可以以藥用鹽形式獲得，并且由藥用游離酸制備的酸加成鹽或金屬鹽是可用的。
可以按照習慣方式制備本發(fā)明的化合物的酸鹽，例如，將<式1>化合物溶解在過量游離酸的水溶液中，并用與水混溶的有機溶劑，如甲醇、乙醇、丙酮或乙腈，將鹽沉淀出來。還可以將等當量的<式1>化合物和游離酸在水或諸如乙二醇一甲基醚的醇中加熱，然后蒸發(fā)混合物至干燥，或者抽吸濾出沉淀的鹽，從而制備其酸鹽。無論游離酸是無機酸還是有機酸，只要是可藥用的酸，就可以使用。無機游離酸的實例包括鹽酸、氫溴酸、硫酸和磷酸?？捎玫挠袡C游離酸示例有檸檬酸、乙酸、乳酸、酒石酸、馬來酸、富馬酸、甲酸、丙酸、草酸、三氟乙酸、苯甲酸、葡糖酸、甲磺酸、羥基乙酸(glycolic acid)、琥珀酸、4-甲苯磺酸、半乳糖醛酸、撲酸、谷氨酸和天冬氨酸。
同樣，<式1>化合物可以是藥用堿金屬或堿土金屬鹽形式?？梢赃@樣獲得<式1>化合物的堿金屬或堿土金屬鹽，例如，將<式1>化合物溶解在過量堿金屬或堿土金屬氫氧化物溶液中，濾出不溶物，并將濾液蒸發(fā)至干燥。鈉、鉀或鈣鹽是藥學上適宜的鹽。
本發(fā)明還提供制備<式1>的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物的方法。
具體而言，本發(fā)明提供如<方案1>所示的用于制備式(I)化合物的方法?；衔?III)和二胺化合物(IV)在適當?shù)慕饘冫}存在下反應，得到式(V)化合物。然后，使用用于引入X基團的合適試劑將化合物(IV)環(huán)化，得到化合物(I’)。最后，通過改變?nèi)〈鵕1、R2、R3、R4、R5和R6，制備苯并咪唑取代的苯并吡喃化合物(I)。以下將該方法定義為“制備方法1”。
<方案1>
(其中X、R1、R2、R3、R4、R5、R6和*如<式1>中所定義)。
本發(fā)明還提供如<方案2>所示的用于制備式(I)化合物的另一方法。使用合適的試劑將二胺化合物(IV)環(huán)化，得到式(VI)化合物。然后，在合適的堿存在下通過和化合物(VI)反應完成化合物(III)的環(huán)氧環(huán)開環(huán)，得到式(I’)化合物。最后，通過引入取代基R1、R2、R3、R4、R5和R6，制備苯并咪唑取代的苯并吡喃化合物(I)。以下將該方法定義為“制備方法2”。
<方案2>
(其中X、R1、R2、R3、R4、R5、R6和*如<式1>中所定義)。
本發(fā)明中，可以從相應的原料的非對映異構(gòu)體制備單獨的非對映異構(gòu)體形式的<式1>化合物。還可以通過分離由原料的非對映異構(gòu)體混合物制備的化合物(I)的非對映異構(gòu)體混合物，獲得每種非對映異構(gòu)體。非對映異構(gòu)體的分離可以通過柱色譜或重結(jié)晶進行。
以下更加詳細地說明本發(fā)明<式1>表示的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物的制備方法。
I.原料的制備(1)環(huán)氧化合物(III)的制備<方案1>中用作原料的環(huán)氧化合物(III)可以用韓國專利2000-60647和美國專利6,323,238中所述的方法制備。
如<方案3>所示，通過采用上述專利中所述的Mn(III)沙侖環(huán)氧化催化劑，可以從烯烴化合物(VII1)和(VII2)制備化合物(III)的每個非對映異構(gòu)體(III1)、(III2)、(III3)和(III4)。
<方案3>
(其中R1和R2如<式1>所定義)。
II.制備方法1<方案1>中顯示的<式1>化合物的制備方法包括如下步驟1)通過環(huán)氧化合物(III)和二胺化合物(IV)在適當?shù)慕饘冫}存在下、在適當?shù)娜軇┲械姆磻苽浠衔?V)；2)使用用于引入X基團的合適試劑將二胺化合物(V)環(huán)化，制備化合物(I’)；和3)通過改變化合物(I’)的取代基制備化合物(I)。
步驟1)是在適當?shù)娜軇┲校谶m當?shù)慕饘冫}存在下，環(huán)氧化合物(III)和二胺化合物(IV)的反應。
至于金屬鹽，可以使用Mg(ClO4)2、CoCl2、LiClO4、NaClO4、CaCl2、ZnCl2、LiBF4或Zn(Tf)2。至于溶劑，可以使用乙腈、四氫呋喃或二甲基甲酰胺，并且優(yōu)選乙腈。反應溫度在從室溫到溶劑沸點的溫度范圍內(nèi)。
在使用單獨的環(huán)氧化合物(III)立體異構(gòu)體作為原料的情況下，獲得的是具有對應于用作原料的立體異構(gòu)體的立體化學的立體異構(gòu)體。如下面<方案4>所示，可以從各個環(huán)氧化合物(III1)、(III2)、(III3)和(III4)制備化合物(V1)、(V2)、(V3)和(V4)。
<方案4>

如<方案5>所示，在上述步驟2)中，其中X是O、S或NCN的<式1>化合物可以從化合物(V)通過使用適當?shù)脑噭┻M行環(huán)化而制備。
<方案5>
(其中R1、R2、R5、R6和*如<式1>中所定義)。
可以通過使用衍生自光氣的羰基轉(zhuǎn)移試劑，如光氣、脲、碳酸二甲酯、羰基二咪唑、三光氣、1，1’-羰基-二-1，2，4-三唑、1-二琥珀酰亞胺基碳酸酯、二-2-吡啶基碳酸酯等，制備其中X是O的式(I1’)化合物。
可以通過使用衍生自硫光氣的硫代羰基轉(zhuǎn)移試劑，如硫光氣、硫脲、1，1-硫代羰基二咪唑、1，1’-硫代羰基二-1，2，4-三唑，二-2-吡啶基硫代碳酸酯、1，1’-硫代羰基-2，2’-吡啶酮等，制備其中X是S的式(I2’)化合物。
其中X是NCN的式(I3’)化合物可以用二苯基氰基亞氨碳酸酯(cyanocarbonimidate)或N-氰基二硫代亞氨基碳酸酯來制備。
在上述步驟3)中，通過烷基化、?；?、還原或取代等，改變?nèi)〈鵕1、R2、R3、R4、R5和R6來制備<式1>化合物(I)。
例如，如在<方案6>中所示，如果化合物(I)的R1是氨基，可以通過還原硝基來制備該化合物，其氫化反應可以使用諸如鉑、碳載鈀(Pd/C)或阮內(nèi)鎳的金屬催化劑，在適當?shù)娜軇┲羞M行。備選地，在CuSO4、Cu(OAc)2、CoCl2、SnCl2或NiCl2存在下，可以使用類似NaBH4的還原劑還原硝基。在該反應中，優(yōu)選的溶劑是水和甲醇的混合液，并且反應溫度在從室溫到溶劑的沸點的范圍內(nèi)。
<方案6>
(其中R2、R3、R4、R5、R6和*如<式1>中所定義)。
III.制備方法2制備<式1>的化合物(I)的另一方法圖示于<方案2>中。如<方案7>所示，在<方案2>的步驟1)中，使用如制備方法1步驟2)中的試劑，將二胺化合物(IV)環(huán)化，得到化合物(VI1、VI2和VI3)。
<方案7>
在步驟2)中，通過環(huán)氧環(huán)開環(huán)反應制備化合物(I’)，其中將化合物(VI)和環(huán)氧化合物(III)在堿存在下反應。諸如氫化鈉、叔丁醇鉀、甲醇鈉等的無機堿和諸如1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)等的有機堿均可使用。
在步驟3)中，化合物(I)是如制備方法1所述的通過改變?nèi)〈苽涞摹?br> 本發(fā)明還提供用于心臟保護的藥物組合物，該組合物含有<式1>表示的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽作為有效成分。
在使用分離出的大鼠心臟的Langendorff缺血心臟模型的測試時，本發(fā)明的化合物明顯延長了至攣縮的時間(TTC)，TTC是一種心臟保護指數(shù)，并且在再灌注后改善了心臟功能(左心室膨脹壓(developed pressure)×心率，LVDP×HR)的恢復，但是減少了細胞損傷指數(shù)－乳酸脫氫酶(LDH)的釋放，其效果類似于或優(yōu)于對照BMS-180448的心臟保護活性。在使用麻醉大鼠的缺血心肌模型中，本發(fā)明的化合物也顯示出與BMS-180448類似的抗缺血活性。在用從大白鼠離體的血管的測試中，本發(fā)明的化合物由于它們具有較小的促血管舒張活性而顯示出比BMS-180448更好的心臟選擇性抗缺血活性。
總之，本發(fā)明的化合物由于它們具有較小的促血管舒張活性而不降低血壓，但是具有優(yōu)異的抗缺血活性。因此，本發(fā)明的化合物不僅可以有效地用于保護心臟，而且還可以有效地用于預防或治療諸如心肌梗死、不穩(wěn)定心絞痛的缺血性心臟病，以及由溶解血栓或類似PTCA(經(jīng)皮經(jīng)管冠狀動脈成形術(shù))和CABG(冠狀動脈旁路移植術(shù))的再灌注療法造成的缺血-再灌相關(guān)疾病，心肌收縮性減小，心肌損傷，能量代謝的改變和認知能力的下降。此外，本發(fā)明的化合物還可以用作抗腦損傷的保護劑，用于視網(wǎng)膜細胞或長期儲藏器官如心、腎、肝和組織的保護劑，或者用于缺血-再灌相關(guān)疾病的治療藥。
實施例下面將參考實施例更加詳細地描述本發(fā)明。這些實施例僅用于說明，不應理解為任何限制。
本發(fā)明中，紅外光譜、核磁共振譜、質(zhì)譜、液相色譜、x-射線結(jié)晶衍射圖、偏振測定法是和各個化合物元素分析估計結(jié)果的比較一起使用的，它們的分析結(jié)果用以證實它們的分子結(jié)構(gòu)。
實施例1(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備<步驟1>(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-[(2-氨基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃的制備將950mg(3.38mmol)環(huán)氧化合物(2S，3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-二甲氧基甲基-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和370mg(3.38mmol)1，2-苯二胺溶解在3ml乙腈(CH3CN)中，然后向其中加入754mg(3.38mmol)商氯酸鎂[Mg(ClO4)2]。將反應物在室溫下攪拌2小時，加入10ml飽和NaHCO3溶液，將水層用30ml乙酸乙酯萃取。將合并的有機層用無水MgSO4干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物用柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)純化，得到670mg目標化合物(產(chǎn)率51％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.48(s，3H)，3.53(s，3H)，3.55(s，3H)，4.08(d，1H)，4.47(s，1H)，4.62(d，1H)，6.79(m，5H)，8.06(dd，1H)，8.32(d，1H)<步驟2>(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備將590mg(1.52mmol)上述步驟1獲得的化合物溶解在6ml異丙醇中，然后向其中加入360mg(1.52mmol)二苯基氰基亞氨碳酸酯和424μl(3.04mmol)三乙胺。將反應物攪拌并回流12小時，加入30ml飽和NaHCO3溶液，水層用40ml乙酸乙酯萃取。將合并的有機層用鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，并且減壓濃縮。殘余物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)純化，得到420mg目標化合物(產(chǎn)率64％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.66(s，3H)，3.50(s，3H)，3.55(s，3H)，4.21(d，1H)，4.56(s，1H)，6.11(d，1H)，6.25(d，1H)，6.90(m，1H)，7.11(m，2H)，7.28(m，1H)，7.76(d，1H)，8.11(dd，1H)實施例2(2R，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備<步驟1>(2R，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-[(2-氨基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃的制備用類似實施例1步驟1的方法，將540mg(1.92mmol)環(huán)氧化合物(2R，3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-二甲氧基甲基-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和208mg(1.92mmol)1，2-苯二胺反應，得到404mg目標化合物(產(chǎn)率54％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.43(s，3H)，3.50(s，3H)，3.55(s，3H)，4.14(d，1H)，4.45(s，1H)，4.49(d，1H)，6.75(m，5H)，8.09(dd，1H)，8.32(d，1H)<步驟2>(2R，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備將404mg(1.04mmol)上述步驟1制備的化合物用類似實施例1步驟2中所述的方法進行反應，得到306mg目標化合物(產(chǎn)率67％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.49(s，3H)，3.62(s，3H)，3.64(s，3H)，4.51(s，1H)，4.78(d，1H)，5.90(d，1H)，6.40(d，1H)，6.9-7.4(m，4H)，7.79(d，1H)，8.14(dd，1H)實施例3(2S，3S，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備<步驟1>(2S，3S，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-[(2-氨基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃的制備將2g(7.11mmol)環(huán)氧化合物(2S，3S，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-二甲氧基甲基-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和1.15g(10.7mmol)1，2-苯二胺用類似于實施例1步驟1中所述的方法進行反應，得到2.08g目標化合物(產(chǎn)率75％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.36(s，3H)，3.58(s，3H)，3.59(s，3H)，4.23(d，1H)，4.41(s，1H)，4.51(d，1H)，6.72-6.78(m，4H)，6.90(d，1H)，8.03(dd，1H)，8.34(d，1H)質(zhì)譜389，296，119，108，75<步驟2>(2S，3S，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備將1.51g(3.88mmol)上述步驟1制備的化合物用類似于實施例1步驟2中所述的方法進行反應，得到506mg目標化合物(產(chǎn)率30％)。
1uH NMR(200MHz，CDCl3)δ1.49(s，3H)，3.62(s，3H)，3.64(s，3H)，4.50(s，1H)，4.77(d，1H)，5.90(d，1H)，6.37(d，1H)，6.92(t，1H)，7.06-7.14(m，2H)，7.29(d，1H)，7.76(d，1H)，8.12(dd，1H)質(zhì)譜439，250，190，158，75實施例4(2R，3S，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備<步驟1>(2R，3S，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-[(2-氨基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃的制備將1.50g(5.33mmol)環(huán)氧化合物(2R，3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-二甲氧基甲基-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和692mg(6.40mmol)1，2-苯二胺用類似于實施例1步驟1中所述的方法進行反應，得到1.74g目標化合物(產(chǎn)率84％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.48(s，3H)，3.53(s，3H)，3.55(s，3H)，3.88(br-s，OH)，4.09(d，1H)，4.48(s，1H)，4.64(br-s，1H)，6.71-6.97(m，5H)，8.06(dd，1H)，8.32(d，1H)質(zhì)譜388，295，119，108，75<步驟2>(2R，3S，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備將1.74g(4.47mmol)上述步驟1制備的化合物用類似于實施例1步驟2中所述的方法進行反應，得到1.12g目標化合物(產(chǎn)率57％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.66(s，3H)，3.50(s，3H)，3.56(s，3H)，4.24(d，1H)，4.57(s，1H)，6.14(d，1H)，6.27(d，1H)，6.90(t，1H)，7.05-7.13(m，2H)，7.31(d，1H)，7.76(d，1H)，8.14(dd，1H)質(zhì)譜439，250，190，75實施例5(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備150mg(0.34mmol)實施例1中獲得的化合物溶解在3ml甲醇中，向其中加入20mg 10％Pd/C。將反應物在3atm氫氣下，于室溫攪拌5小時。用C鹽墊過濾反應溶液以除去固體物質(zhì)，減壓濃縮濾液。用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)純化殘余物，得到120mg(產(chǎn)率80％)目標化合物。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.55(s，3H)，3.49(br-s，2H，NH2)，3.53(s，3H)，3.57(s，3H)，4.23(d，1H)，4.59(s，1H)，5.81(d，1H)，6.18(d，1H)，6.48(d，1H)，6.60(dd，1H)，6.78(d，1H)，6.91(dd，1H)，7.07(dd，1H)，7.24(d，1H)實施例6(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-3-甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備將400mg(0.91mmol)實施例1獲得的化合物溶解在5ml DMF中，然后向其中加入250mg(1.82mmol)K2CO3和170mg(1.18mmol)CH3I。將反應物在室溫下攪拌12小時，加入30ml飽和NaHCO3溶液，并且將水層用50ml乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，無水MgSO4干燥并減壓濃縮。殘余物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)純化，得到390mg目標化合物(產(chǎn)率95％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.65(s，3H)，3.50(s，3H)，3.55(s，3H)，4.56(s，1H)，6.23(d，1H)，6.52(d，1H)，6.92(m，2H)，6.96(d，2H)，7.06(d，2H)，7.82(d，1H)，8.15(dd，1H)實施例7(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-5，6-二甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備<步驟1>(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-[(2-氨基-4，5-二甲基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃的制備將480mg(1.71mmol)環(huán)氧化合物(2S，3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-二甲氧基甲基-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和232mg(1.71mmol)4，5-二甲基-1，2-苯二胺用類似于實施例1步驟1中所述的方法進行反應，得到307mg目標化合物(產(chǎn)率43％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.47(s，3H)，2.16(s，3H)，2.19(s，3H)，3.53(s，3H)，3.55(s，3H)，4.08(d，1H)，4.47(s，1H)，4.56(d，1H)，6.61(s，1H)，6.65(s，1H)，6.93(d，1H)，8.07(dd，1H)，8.34(d，1H)<步驟2>(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-5，6-二甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃的制備將110mg(0.26mmol)上述步驟1制備的化合物用類似于實施例1步驟2中所述的方法進行反應，得到74mg目標化合物(產(chǎn)率58％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.67(s，3H)，2.07(s，3H)，2.20(s，3H)，3.51(s，3H)，3.55(s，3H)，4.20(d，1H)，4.55(s，1H)，6.01(s，1H)，6.06(d，1H)，7.04(d，1H)，7.07(s，1H)，7.74(d，1H)，8.13(dd，1H)實施例8制備(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-5，6-二甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將210mg(0.43mmol)實施例7制備的硝基化合物用類似實施例5所述的方法進行反應，得到177mg目標化合物(產(chǎn)率91％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.54(s，3H)，2.15(s，3H)，2.17(s，3H)，3.52(s，3H)，3.54(s，3H)，4.25(d，1H)，4.66(s，1H)，6.14(d，1H)，6.17(d，1H)，6.39(s，1H)，6.56(dd，1H)，6.74(d，1H)，7.32(s，1H)實施例9制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-3，5，6-三甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將180mg(0.37mmol)實施例7制備的化合物用類似實施例6所述的方法進行反應，得到144mg目標化合物(產(chǎn)率81％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.65(s，3H)，2.07(s，3H)，2.26(s，3H)，3.51(s，3H)，3.54(s，3H)，3.87(s，3H)，4.55(s，1H)，5.98(s，1H)，6.44(d，1H)，6.94(s，1H)，7.05(d，1H)，7.80(d，1H)，8.17(dd，1H)實施例10制備(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-3，5，6-三甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將70mg(0.15mmol)實施例9制備的硝基化合物用類似實施例5所述的方法進行反應，得到58mg目標化合物(產(chǎn)率89％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.56(s，3H)，2.12(s，3H)，2.28(s，3H)，3.53(s，3H)，3.59(s，3H)，3.80(s，3H)，4.17(t，1H)，4.62(s，1H)，6.24(s，1H)，6.26(d，1H)，6.64(dd，1H)，6.78(d，1H)，6.91(s，1H)
實施例11制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-乙酰氧基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將388mg(0.88mmol)實施例1中獲得的化合物溶解在4ml二氯甲烷中，然后向其中加入83μl(0.88mmol)乙酸酐、0.18ml(1.32mmol)三乙胺和32mg(0.26mmol)4-二甲基氨基吡啶。將反應物在室溫下攪拌2小時，加入30ml飽和NaHCO3溶液，將水層用60ml二氯甲烷萃取。有機層用鹽水洗滌，無水MgSO4干燥并減壓濃縮。殘余物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)純化，得到376mg目標化合物(產(chǎn)率89％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.49(s，3H)，2.10(s，3H)，3.52(s，3H)，3.55(s，3H)，4.63(s，1H)，5.62(d，1H)，6.24(d，1H)，6.31(d，1H)，6.91-7.24(m，3H)，7.33(d，1H)，7.70(d，1H)，8.13(dd，1H)質(zhì)譜481(M+)實施例12制備(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-乙酰氧基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將196mg(0.41mmol)實施例11中獲得的硝基化合物溶解在10ml甲醇中，向其中加入98mg阮內(nèi)鎳。將反應物在3大氣壓氫氣下于室溫攪拌15小時。過濾反應溶液以除去Ni，隨后減壓濃縮。殘余物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)純化，得到70mg目標化合物(產(chǎn)率38％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.40(s，3H)，2.06(s，3H)，3.35(br-s，2H，-NH2)，3.47(s，3H)3.55(s，3H)，4.56(s，1H)，5.63(d，1H)，6.05(d，1H)，6.12(d，1H)，6.53(d，1H)，6.59(dd，1H)，6.81(d，1H)，6.96(dd，1H)，7.11(dd，1H)，7.29(d，1H)實施例13制備(2S，3R，4S)-6-乙酰氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將100mg(0.24mmol)實施例5制備的化合物用類似實施例11所述的方法進行反應，得到62mg目標化合物(產(chǎn)率57％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.49(s，3H)，1.93(s，3H)，3.44(s，3H)，3.46(s，3H)，4.13(dd，1H)，4.52(s，1H)，5.81(d，1H)，6.34(d，1H)，6.71(d，1H)，6.80-6.87(m，2H)，7.01(dd，1H)，7.20(d，1H)，7.68(dd，1H)，8.59(s，1H，-NH)，12.26(s，1H，-NH)實施例14制備(2S，3R，4S)-6-乙酰氨基-3，4-二氫-3-乙酰氧基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將88mg(0.21mmol)實施例5獲得的化合物溶解在二氯甲烷中，然后向其中加入61μl(0.64mmol)乙酸酐、120μl(0.86mmol)三乙胺和8mg(0.06mmol)4-二甲基氨基吡啶。將反應物在室溫下攪拌12小時，加入飽和NaHCO3溶液，水層用二氯甲烷萃取。有機層用鹽水洗滌并用無水MgSO4干燥，減壓濃縮。殘余物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)純化，得到35mg目標化合物(產(chǎn)率34％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.43(s，3H)，2.02(s，3H)，2.07(s，3H)，3.48(s，3H)，3.54(s，3H)，4.59(s，1H)，5.63(d，1H)，6.14(d，1H)，6.57(d，1H)，6.67(d，1H)，6.94-6.98(m，2H)，7.08-7.15(m，2H)，7.62(dd，1H)，11.85(br-s，1H)實施例15制備(2S，3R，4S)-6-苯甲酰氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將100mg(0.24mmol)實施例5獲得的化合物溶解在1ml THF中，然后向其中加入28μl(0.24mmol)苯甲酰氯和51μl(0.37mmol)三乙胺。將反應物在室溫下攪拌2小時，加入10ml飽和NaHCO3溶液，并將水層用20ml乙酸乙酯萃取。有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。殘余物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)純化，得到68mg目標化合物(產(chǎn)率54％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.60(s，3H)，3.55(s，6H)，4.25(dd，1H)，4.61(s，1H)，5.95(d，1H)，6.44(d，1H)，6.87-6.94(m，2H)，7.00(d，1H)，7.08(dd，1H)，7.37-7.48(m，3H)，7.77(m，3H)，7.85(dd，1H)實施例16制備(2S，3R，4S)-6-(三氟乙?；?氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將120mg(0.29mmol)實施例5制備的化合物和41μl(0.29mmol)三氟乙酸酐用類似實施例11所述的方法進行反應，得到30mg目標化合物(產(chǎn)率21％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.61(s，3H)，3.53(s，3H)，3.55(s，3H)，4.23(m，1H)，4.57(s，1H)，5.98(d，1H)，6.39(d，1H)，6.86-7.14(m，4H)，7.73(dd，1H)，8.06(s，1H)實施例17制備(2S，3R，4S)-6-甲磺酰氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將120mg(0.29mmol)實施例5獲得的化合物溶解在2ml二氯甲烷中，然后向其中加入23μl(0.29mmol)甲磺酰氯和76μl(0.44mmol)二異丙基乙胺。將反應物在室溫下攪拌14小時，加入飽和NaHCO3溶液，并將水層用30ml二氯甲烷萃取。有機層用無水MgSO4干燥，減壓濃縮。殘余物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)純化，得到35mg目標化合物(產(chǎn)率26％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.60(s，3H)，2.62(s，3H)，3.55(s，6H)，4.20(dd，1H)，4.59(s，1H)，5.96(d，1H)，6.33(d，1H)，6.67(d，1H)，6.81-6.98(m，3H)，7.08(dd，1H)，7.31(m，1H)實施例18制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將391mg(1.0mmol)實施例1步驟1中獲得的化合物溶解在4ml二氯甲烷中，然后向其中加入262mg(1.21mmol)二-2-吡啶基碳酸酯和12mg(0.10mmol)4-二甲基氨基吡啶。將反應物在室溫下攪拌1小時，減壓蒸發(fā)溶劑。殘余物用硅膠柱色譜純化，得到193mg目標化合物(產(chǎn)率47％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.26(s，3H)，3.47(s，3H)，3.53(s，3H)，4.23(br，2H)，4.57(s，1H)，5.96(d，1H)，6.01(d，1H)，6.80(t，1H)，6.99-7.26(m，4H)，7.89(s，1H)，8.10(dd，1H)，8.91(s，1H)質(zhì)譜415，324，206，190
實施例19制備(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將100mg(0.24mmol)實施例18制備的化合物用類似實施例5所述的方法進行反應，得到58mg目標化合物(產(chǎn)率63％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.54(s，3H)，3.36(br，NH2)，3.52(s，6H)，4.19(t，1H)，4.61(s，1H)，5.67(d，1H)，6.33(m，2H)，6.57(m，1H)，6.77(m，2H)，6.95(m，2H)，9.73(s，NH)質(zhì)譜385(M+)，292，176，160實施例20制備(3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃<步驟1>制備(3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-[(2-氨基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃將1.0g(4.53mmol)環(huán)氧化合物(3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2，2-二甲基-2H-1-苯并吡喃和0.49g(4.53mmol)1，2-苯二胺用類似實施例1步驟1中所述的方法進行反應，得到0.51g目標化合物(產(chǎn)率32％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.34(s，3H)，1.53(s，3H)，3.75(d，1H)，4.51(d，1H)，6.70(m，5H)，8.01(dd，1H)，8.28(s，1H)<步驟2>制備(3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將504mg(1.80mmol)上述步驟1制備的化合物用類似實施例18中所述的方法進行反應，得到410mg目標化合物(產(chǎn)率65％)。
1uH NMR(200MHz，CDCl3)δ1.42(s，3H)，1.62(s，3H)，3.59(br-s，1H-OH)，4.18(m，1H)，5.67(d，1H)，6.15(d，1H)，6.77(t，1H)，6.93(m，3H)，7.82(s，1H)，8.10(dd，1H)，(br-s，1H)實施例21制備(3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將130mg(0.37mmol)實施例20制備的化合物用類似實施例5所述的方法進行反應，得到110mg目標化合物(產(chǎn)率92％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(s，3H)，1.50(s，3H)，3.37(br-s，2H，-NH2)，4.07(br-s，1H，-OH)，5.39(d，1H)，6.31(dd，1H)，6.62(dd，1H)，6.74(d，1H)，6.91(m，2H)，7.20(d，2H)實施例22制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-硫代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將300mg(0.77mmol)實施例1步驟1中制備的化合物和197mg(0.85mmol)二-2-吡啶基硫代碳酸酯以及9mg(0.08mmol)4-二甲基氨基吡啶用類似實施例18中所述的方法進行反應，得到240mg目標化合物(產(chǎn)率77％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3+1滴DMSO)δ1.65(s，3H)，3.57(s，3H)，3.60(s，3H)，4.34(t，1H)，4.69(s，1H)，6.35(d，1H)，6.90-7.15(m，4H)，7.27(m，2H)，7.71(s，1H)，8.13(dd，1H)，11.7(br，1H)質(zhì)譜431(M+)，353，338，206，190實施例23制備(3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-硫代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將400mg(1.21mmol)實施例20步驟1中制備的化合物和280mg(1.21mmol)二-2-吡啶基硫代碳酸酯用類似于實施例22中所述的方法進行反應，得到250mg目標化合物(產(chǎn)率56％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.48(s，3H)，1.60(s，3H)，3.17(br-s，1H，OH)，4.26(m，1H)，6.28(d，1H)，6.80(d，1H)，6.96(m，4H)，7.71(s，1H)，8.11(dd，1H)，10.32(s，1H，NH)實施例24制備(3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-硫代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將145mg(0.39mmol)實施例23制備的化合物用類似實施例5所述的方法進行反應，得到115mg目標化合物(產(chǎn)率86％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.24(s，3H)，1.39(s，3H)，3.98(m，2H)，4.48(br-s，1H)，5.26(d，1H)，5.50(d，1H)，5.71(s，2H)，6.02(s，1H)，6.32(m，2H)，6.77(m，2H)，10.90(s，1H)質(zhì)譜341，320，204，106實施例25制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二乙氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃<步驟1>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二乙氧基甲基-2-甲基-4-[(2-氨基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃將708mg(2.29mmol)環(huán)氧化合物(2S，3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-二乙氧基-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和495mg(4.58mmol)1，2-苯二胺用類似于實施例1所述的方法進行反應，得到791mg目標化合物(產(chǎn)率83％)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.12(t，3H)，1.20(t，3H)，1.51(s，3H)，3.62(m，2H)，3.65(br-s，2H，NH2)，3.81(m，2H)，3.92(d，1H)，4.08(m，2H，NH，OH)，4.62(s，1H)，4.69(dd，1H)，6.74-6.90(m，4H)，6.93(d，1H)，8.08(dd，1H)，8.34(d，1H)<步驟2>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二乙氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將200mg(0.48mmol)上述步驟1制備的化合物用類似實施例1步驟2中所述的方法進行反應，得到51mg目標化合物(產(chǎn)率23％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.12(t，3H)，1.29(t，3H)，1.63(s，3H)，3.59(m，2H)，3.67(d，1H)，3.83(m，2H)，4.22(dd，1H)，4.72(s，1H)，6.18(d，1H)，6.28(d，1H)，6.92(dd，1H)，7.04(d，1H)，7.13(dd，1H)，7.36(d，1H)，7.78(d，1H)，8.15(dd，1H)實施例26制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃<步驟1>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-[(2-氨基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃將300mg(1.19mmol)環(huán)氧化合物(2S，3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-甲氧基甲基-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和258mg(2.39mmol)1，2-苯二胺用類似實施例1步驟1中所述的方法進行反應，得到364mg目標化合物(產(chǎn)率85％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.48(s，3H)，3.38(s，3H)，3.69(dd，2H)，3.95(d，1H)，4.72(d，1H)，6.71-6.88(m，4H)，6.95(d，1H)，8.07(dd，1H)，8.29(d，1H)質(zhì)譜359，296，256，119，107，80<步驟2>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將279mg(0.78mmol)上述步驟1制備的化合物用類似實施例1步驟2中所述的方法進行反應，得到183mg目標化合物(產(chǎn)率58％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.65(s，3H)，3.41(s，3H)，3.76(dd，2H)，4.26(d，1H)，6.10(d，1H)，6.30(d，1H)，6.89(d，1H)，7.03(d，1H)，7.27(m，2H)，7.73(d，1H)，8.14(dd，1H)，11.88(br-s，1H)質(zhì)譜409，346，206，158，132，57實施例27制備(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將141mg(0.35mmol)實施例26制備的化合物用類似實施例5所述的方法進行反應，得到38mg目標化合物(產(chǎn)率29％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.65(s，3H)，3.34(br-s，1H)，3.44(s，3H)，3.56(d，1H)，3.89(d，1H)，4.23(d，1H)，5.84(d，1H)，6.19(d，1H)，6.49(d，1H)，6.60(dd，1H)，6.77(d，1H)，6.93(t，1H)，7.09(t，1H)，7.30(d，1H)質(zhì)譜379，319，287，133，121實施例28制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-6-甲基苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃<步驟1>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-[(2-氨基-5-甲基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃將300mg(1.19mmol)環(huán)氧化合物(2S，3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-甲氧基甲基-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和146mg(1.19mmol)3，4-二氨基甲苯用類似方法進行反應，得到目標化合物(44％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.46(s，3H)，2.26(s，3H)，3.36(s，3H)，3.66(m，3H)，3.37(d，1H)，4.66(t，1H)，6.52-6.73(m，3H)，6.95(dd，1H)，8.04(dd，1H)，8.30(dd，1H)質(zhì)譜373，310，146，133，121，83<步驟2>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-6-甲基苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將144mg(0.39mmol)上述步驟1制備的化合物用類似實施例1步驟2中所述的方法進行反應，得到54mg目標化合物(產(chǎn)率33％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.65(s，3H)，3.27(s，3H)，3.41(s，3H)，3.77(dd，2H)，4.26(dd，1H)，6.60(dd，1H)，6.16(d，1H)，7.06(m，2H)，7.16(d，1H)，7.73(d，1H)，8.13(dd，1H)質(zhì)譜423，380，335，289，172，147，57實施例29制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃<步驟1>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2-甲基-4-[(2-氨基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃將400mg(1.36mmol)環(huán)氧化合物(2S，3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和295mg(2.73mmol)1，2-苯二胺用類似實施例1步驟1中所述的方法進行反應，得到500mg目標化合物(產(chǎn)率92％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.41(d，1H)，1.50(s，3H)，2.14(m，1H)，3.35(br-s，2H)，3.81(m，2H)，3.87(br-s，1H)，4.11(m，1H)，4.19(m，2H)，4.69(d，1H)，4.85(s，1H)，6.71-6.88(m，4H)，7.00(d，1H)，8.07(dd，1H)，8.32(d，1H)<步驟2>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將400mg(1.0mmol)上述步驟1制備的化合物用類似實施例1步驟2中所述的方法進行反應，得到269mg目標化合物(產(chǎn)率60％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.46(d，1H)，1.70(s，3H)，2.22(m，1H)，3.81(m，2H)，4.25(m，3H)，4.94(s，1H)，6.27(d，1H)，6.31(d，1H)，6.91(dd，1H)，7.06(d，1H)，7.11(dd，1H)，7.28(d，1H)，7.75(d，1H)，8.13(dd，1H)實施例30制備(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將173mg(0.38mmol)實施例29制備的化合物用類似于實施例12所述的方法進行反應，得到25mg目標化合物(產(chǎn)率15％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.42(d，1H)，1.71(s，3H)，2.18(m，1H)，3.50(d，2H)，3.75(dd，1H)，3.92)dd，1H)，4.18-4.31(m，3H)，5.00(s，1H)，5.90(d，1H)，6.18(d，1H)，6.47(d，1H)，6.60(dd，1H)，6.83(d，1H)，6.92(dd，1H)，7.08(dd，1H)，7.23(d，1H)，11.86(br-s，1H)質(zhì)譜421(M+)實施例31制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二氧戊環(huán)-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃<步驟1>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二氧戊環(huán)-2-基)-2-甲基-4-[(2-氨基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃將417mg(1.49mmol)環(huán)氧化合物(2S，3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-([1，3]二氧戊環(huán)-2-基)-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和323mg(3.00mmol)1，2-苯二胺用類似實施例1步驟1中所述的方法進行反應，得到596mg目標化合物(產(chǎn)率g7％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.54(s，3H)，3.40(br-s，3H)，3.80-4.08(m，6H)，4.11(m，1H)，4.86(d，1H)，5.26(s，1H)，6.75-6.87(m，4H)，6.95(d，1H)，8.06(dd，1H)，8.27(d，1H)
<步驟2>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二氧戊環(huán)-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將200mg(0.52mmol)上述步驟1制備的化合物用類似實施例1步驟2中所述的方法進行反應，得到140mg目標化合物(產(chǎn)率62％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.59(s，3H)，3.53(m，1H)，3.80(m，1H)，3.88(m，1H)，3.98(m，1H)，4.40(d，1H)，5.39(s，1H)，6.24(d，1H)，6.53(d，1H)，7.00(dd，1H)，7.08(d，1H)，7.18(dd，1H)，7.33(dd，1H)，7.55(d，1H)，8.10(dd，1H)質(zhì)譜437(M+)實施例32制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃<步驟1>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2-甲基-4-[(2-氨基苯基)氨基]-2H-1-苯并吡喃將400mg(1.24mmol)環(huán)氧化合物(2S，3R，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3，4-環(huán)氧-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2-甲基-2H-1-苯并吡喃和269mg(2.49mmol)1，2-苯二胺用類似實施例1步驟1中所述的方法進行反應，得到474mg目標化合物(產(chǎn)率89％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.75(s，3H)，1.19(s，3H)，1.54(s，3H)，3.36(br-s，2H)，3.48(m，2H)，3.71(m，2H)，3.78(br-s，1H)，3.91(br-s，1H)，4.14(d，1H)，4.70(br-s，1H)，4.75(s，1H)，6.71-6.88(m，4H)，7.00(d，1H)，8.08(dd，1H)，8.33(d，1H)<步驟2>制備(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃將200mg(0.47mmol)上述步驟1制備的化合物用類似實施例1步驟2中所述的方法進行反應，得到178mg目標化合物(產(chǎn)率79％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.77(s，3H)，1.33(s，3H)，1.72(s，3H)，3.46(d，1H)，3.52(d，1H)，3.64(br-s，1H)，3.76(d，2H)，4.26(d，1H)，4.83(s，1H)，6.28(d，1H)，6.31(d，1H)，6.91(dd，1H)，7.10(m，2H)，7.34(d，1H)，7.76(d，1H)，8.13(dd，1H)質(zhì)譜479(M+)進行以下實驗是為了研究<式1>表示的本發(fā)明化合物的藥理學活性。
實驗1對從大白鼠離體的血管的血管舒張效果為了研究<式1>表示的化合物對血管的血管舒張效果，進行如下實驗。
通過打擊枕部將大白鼠(350～450g；Korea Research Institute ofChemical Technology實驗動物組)擊昏，斷頸處死，并且進行胸廓切開術(shù)。在快速取出后，將胸主動脈剝?nèi)ブ窘M織并切成3mm寬的主動脈環(huán)。將主動脈用在改進的Krebs Henseleit緩沖液(生理鹽溶液)中浸濕的棉棒輕柔摩擦，以除去內(nèi)上皮層。在懸掛在含有生理緩沖液的器官浴中的同時，讓血管平滑肌在2g靜止張力下平衡，在37℃下堅持1小時進行穩(wěn)定，供應由95％O2/5％CO2組成的碳合氣(carbogen)。此后，將血管平滑肌用10-5M脫羥腎上腺素收縮，并用生理鹽水溶液洗滌幾次。重復該程序以確保血管平滑肌的穩(wěn)定的反應性，以重復收縮/松弛。
此后，供應3×10-6M甲氧明以引起血管平滑肌強烈收縮。當甲氧明誘導的血管收縮達到并保持在最大值時，將測試化合物和對照物分別以1、3、10和30μM的濃度漸增地加入到器官浴中，以檢查血管舒張效果。使用已知的具有強血管舒張效果的第一代KATP開啟劑，色滿卡林和BMS-180448(<式2>化合物)，作為對照物。
計算藥物加入產(chǎn)生的收縮和甲氧明引起的最大收縮相比較的變化比率，作出濃度-松弛響應曲線。通過最小線性回歸分析，獲得每種藥物的IC50，即血管組織松弛到最大收縮50％程度時的藥物濃度。結(jié)果顯示在下面表1中。
<表1>
<式1>化合物的血管舒張效果

如上面表1所示，表示強血管舒張效果的色滿卡林對用甲氧明(3μM)收縮的離體大鼠主動脈顯示出的IC50為0.067μM，而BMS-180448的IC50為1.38μM，其血管舒張效果比色滿卡林弱20倍。另一方面，實施例1化合物的IC50為50.1μM，顯示出比用作對照物的常規(guī)KATP開啟劑，BMS-180448弱36倍的血管舒張效果。實施例20的化合物也顯示出比BMS-180448弱10倍的血管舒張效果。
色滿卡林或BMS-180448通過作用于心臟中的KATP而保護心臟，并且通過作用于冠狀和外周血管中的KATP擴張血管而降低血壓。降壓作用由于在冠狀動脈灌注壓下減小，可能掩蓋任何心臟保護效果，因而限制用于治療心肌缺血。因此，本發(fā)明的化合物由于它們的弱血管舒張活性而更加適宜用作心臟保護試劑。
此外，本發(fā)明的化合物在具有弱血管舒張效果下，還具有增強的心臟保護功能。
實驗2對大白鼠的離體缺血心臟模型的心臟保護效果確認<式1>化合物對缺血心臟具有保護效果(抗缺血作用)的實驗是以如下方式完成的。
將100mg/kg戊巴比妥鈉注射到雄性大白鼠(300～450g；KoreaResearch Institute of Chemical Technology實驗動物組)的腹腔中將它們麻醉。然后，在取出心臟前靜脈注射1000U/kg肝素。具體而言，將套管(PE240)插入氣管中，并使用嚙齒動物呼吸器對大鼠進行人工呼吸。在這樣的條件下，將主動脈套管插入主動脈，并在逆向灌注下取出心臟。將取出的心臟迅速懸掛在Langendorff裝置上，并除去心臟上不必要的組織。用37℃的95％ O2/5％ CO2飽和的改進Krebs-Henseleit碳酸氫鹽緩沖液(組成<mM/L>116 NaCl，4.7 KCl，1.1 MgSO4，1.17 KH2PO4，24.9 NaHCO3，2.52 CaCl2，8.32葡萄糖，2.0丙酮酸鹽)，在靜壓(85mmHg)下引起灌注。將金屬套管通過肺靜脈插入左心室，該金屬套管上連接有裝有乙醇-蒸餾水混合物(1∶1體積/體積)的乳膠氣球。然后，使用壓力轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)換通過氣球傳遞的左心室壓，并使用等容放大器(Plugsys橋式放大器)將其放大。然后，用記錄儀(Linearcorder mark 8 WR 3500)記錄壓力。其后，將心臟穩(wěn)定15分鐘。然后，給出5mmHg的左心室舒張末壓(LVEDP)，并且在整個實驗中保持這樣的氣球體積。
測量基準心臟收縮功能、心率(HR)和冠狀血流量(CF)。心臟收縮功能是通過從LVEDP(左心室舒張末壓)中減去LVSP(左心室收縮峰壓)，得到LVDP(左心室膨脹壓)而計算的。通過將HR乘以LVDP計算二重積RPP(心率-壓力乘積)(DP)，該參數(shù)是用于間接評估Langendorff心臟中心臟性能的另一重要參數(shù)，Langendorff心臟的心輸出量不能用普通方法測量。在整個實驗中，使用安裝在主動脈套管中的具有電磁流量計的冠狀動脈血流探測器(直徑1.0mm)，測量總的冠狀動脈血流量。將心臟浸泡在37℃的生理鹽水溶液中，向其中持續(xù)供應95％O2/5％CO2，從而穩(wěn)定地維持心臟的溫度。在穩(wěn)定15分鐘后，將心臟用單獨的賦形劑(0.04％DMSO)或者本發(fā)明的化合物或者置于賦形劑中的對照物預處理10分鐘。其后，重復測量心臟收縮功能、HR和CF。通過完全切斷灌輸液30分鐘造成全缺血(Globalischemia)。以在全缺血過程中至攣縮的時間(TTC，分鐘)確定缺血的嚴重性，其中觀察EDP中第一個5mmHg增加。然后，心臟被再灌注，并在30分鐘后，重復測量收縮功能(LVDP、HR和CF)。在再灌注完成30分鐘后，用試劑盒測量LDH(乳酸脫氫酶)，作為細胞成活力喪失的一個靈敏指數(shù)。結(jié)果顯示于表2中。
<表2>
大鼠缺血心臟模型中的心臟保護效果

在賦形劑處理組中，如上所示，收縮功能指數(shù)—再灌注DP(LVDP×HR)降低到處理前DP的15.8％，EDP從5mmHg增加到45.1mmHg，而TTC為19.8分鐘，再灌注LDH釋放為31.3單位/g。
在BMS-180448處理組中，再灌注收縮功能(DP，LVDP×HR)為處理前DP的67.6％，與賦形劑處理組相比有明顯改善。EDP為16.5mmHg，明顯低于對照，TTC為27.8分鐘，比對照延長，再灌注LDH釋放為17.2單位/g，比對照減少。因而，在BMS-180448處理組中，所有參數(shù)都顯示對缺血心臟有明顯的保護作用。
當只是在基于這些參數(shù)的抗缺血效果、心臟收縮功能、EDP、TTC和LDH釋放方面進行對比時，本發(fā)明的化合物類似或優(yōu)于BMS-180448。但是，由于本發(fā)明化合物具有明顯低于BMS-180448劑量的促血管舒張作用，因此它們在心臟選擇性抗缺血活性方面更優(yōu)于傳統(tǒng)藥物。特別是，實施例1的化合物顯示了良好的心臟保護效果，其收縮功能(LVDP×HR)被改善到處理前指數(shù)的68.8％，并且在非常低的血管舒張活性(IC50＝50.1μM)下，EDP為20.3mmHg，TTC為23.2分鐘，再灌注LDH釋放為8.1單位/g。故該化合物顯示出遠好于BMS-180448的血管舒張的心臟選擇性。因此，本發(fā)明的化合物由于它們優(yōu)異的選擇性和對缺血心血管疾病的保護作用，能夠用于治療缺血性心臟病。此外，這些化合物還可用作缺血大腦和由缺血-再灌引起的視網(wǎng)膜細胞損傷或者儲藏器官的保護劑。
實驗3大鼠急性口服毒性試驗進行以下實驗以驗證<式1>化合物在大鼠中是否具有急性毒性。
在急性毒性試驗中使用6-周齡SPF SD系大鼠。將實施例1制備的化合物懸浮在0.5％甲基纖維素溶液中，并且對每組中的2只大鼠以1g/kg/15ml的劑量一次口服給藥。觀察大鼠的死亡、臨床癥狀和體重變化，并且進行血液學測試和血液生化測試，在尸體解剖中用眼檢查胸腔和腹腔的腸胃器官的任何異常征兆。
結(jié)果顯示測試化合物沒有引起大鼠的任何特殊的臨床癥狀、體重變化或者死亡。在血液學測試、血液生化測試和尸體解剖中沒有觀察到變化。由于用于該實驗的化合物直至2g/kg的劑量也沒有造成大鼠的任何毒性變化，其對大鼠的LD50的估計值遠大于2g/kg，因此這些化合物被評估為安全物質(zhì)。
工業(yè)適用性如此前所解釋，<式1>表示的本發(fā)明化合物在由于其弱血管舒張活性而不降低血壓的情況下，對缺血/再灌損傷具有優(yōu)異的心臟保護作用。因此，含有<式1>表示的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽的藥物組合物能夠用作缺血-再灌相關(guān)損傷或疾病的保護或治療藥，即這些化合物不僅可用于治療缺血性心臟病，如心肌梗死、不穩(wěn)定心絞痛等，還可以保護心臟免受血栓溶解療法或再灌注療法引起的損傷，所述的再灌注療法如PTCA(經(jīng)皮經(jīng)管冠狀動脈成形術(shù))和CABG(冠狀動脈旁路移植術(shù))，以及保護缺血-再灌相關(guān)的組織，如神經(jīng)細胞、腦、視網(wǎng)膜細胞、儲藏器官等。
本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解，上面說明書中公開的概念和具體實施方案可易于用作改進或設(shè)計其它實施方案以達到本發(fā)明相同目的的基礎(chǔ)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員還將理解這樣的等價實施方案并沒有偏離如后附權(quán)利要求所述的本發(fā)明的精神和范圍。
權(quán)利要求
1.一種<式1>表示的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物<式1> 其中，X是O、S或NCN；R1是NO2、NH2、H、CN、NHCOCH3、NHCOCF3或NHSO2CH3；R2是 CH2ORa或CH3，其中，Ra是C1～C4直鏈或支鏈烷基；Z是C2～C6直鏈或支鏈烷基；R3是OH或OCOCH3；R4是C1～C4直鏈或支鏈烷基；R5和R6獨立地為H、C1～C4直鏈或支鏈烷基、烷氧基或鹵素；且*表示手性碳，或其藥用鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物，其選自1)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；2)(2R，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；3)(2S，3S，4R)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；4)(2R，3S，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；5)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；6)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-3-甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；7)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-5，6-二甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；8)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-5，6-二甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；9)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-3，5，6-三甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；10)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-3，5，6-三甲基-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；11)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-乙酰氧基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；12)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-乙酰氧基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；13)(2S，3R，4S)-6-乙酰氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；14)(2S，3R，4S)-6-乙酰氨基-3，4-二氫-3-乙酰氧基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；15)(2S，3R，4S)-6-苯甲酰氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；16)(2S，3R，4S)-6-(三氟乙酰基)氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；17)(2S，3R，4S)-6-甲磺酰氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；18)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；19)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；20)(3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；21)(3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；22)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-硫代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；23)(3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-硫代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；24)(3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2，2-二甲基-4-(2，3-二氫-2-硫代-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；25)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-二乙氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；26)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；27)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；28)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-甲氧基甲基-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-6-甲基苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；29)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；30)(2S，3R，4S)-6-氨基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；31)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]二氧戊環(huán)-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃；和32)(2S，3R，4S)-6-硝基-3，4-二氫-3-羥基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2-甲基-4-(2，3-二氫-2-氰基亞氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-2H-1-苯并吡喃，或它們的藥用鹽。
3.一種用于預防或治療心肌梗死、不穩(wěn)定心絞痛或心力衰竭的心臟保護劑，其含有根據(jù)權(quán)利要求1的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽作為有效成分。
4.一種預防或治療藥，其含有根據(jù)權(quán)利要求1的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽作為有效成分，用于由溶解血栓或類似PTCA(經(jīng)皮經(jīng)管冠狀動脈成形術(shù))和CABG(冠狀動脈旁路移植術(shù))的再灌注療法造成的缺血/再灌相關(guān)疾病，心肌收縮性的降低，心肌損傷，能量代謝的變化和認知能力下降。
5.一種藥物組合物，其含有根據(jù)權(quán)利要求1的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽作為有效成分，用于保護缺血/再灌相關(guān)的腦損傷、視網(wǎng)膜細胞或儲藏器官。
6.一種藥物組合物，其含有根據(jù)權(quán)利要求1的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽作為有效成分，用于保護諸如心、腎、肝的儲藏器官和組織。
全文摘要
本發(fā)明涉及苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽，它們的制備方法以及含有它們的藥物組合物。(式1)表示的苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物具有在不產(chǎn)生類似血管舒張的副作用的情況下保護心臟免受缺血－再灌傷害的功能，因此含有本發(fā)明苯并咪唑衍生物取代的苯并吡喃衍生物或其藥用鹽作為有效成分的藥物組合物能夠有效地用于保護受缺血－再灌影響的組織，例如用于保護心、神經(jīng)細胞、腦、視網(wǎng)膜細胞、儲藏器官等，并且用于治療由缺血－再灌引起的疾病。
文檔編號C07D405/14GK1795189SQ200480014727
公開日2006年6月28日 申請日期2004年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月28日
發(fā)明者林弘, 李東廈, 金善玉, 柳圣殷, 李圭亮, 李仙卿, 徐知希, 金洛貞, 黃仙庚, 金泰美, 李柄皓, 徐浩源 申請人:東部韓農(nóng)化學株式會社