專利名稱：有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及2，2-二取代的2，5-二氫吡咯衍生物，其是有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑，特別是有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP的抑制劑，其可用于治療細(xì)胞增殖疾病，例如癌、增生、再狹窄、心臟肥大、免疫癥和炎癥。
在這些治療劑中，用于治療癌癥的有紫杉烷和長春花生物堿。紫杉烷與長春花生物堿作用于微管，所述微管存在于各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)中。微管是有絲分裂紡錘體的主要結(jié)構(gòu)元素。有絲分裂紡錘體負(fù)責(zé)將基因組的復(fù)制模板分配到由細(xì)胞分裂產(chǎn)生的兩個(gè)子細(xì)胞的每一個(gè)中。據(jù)推測(cè)，有絲分裂紡錘體被這些藥物破壞，從而抑制了癌細(xì)胞分裂并且誘導(dǎo)癌細(xì)胞死亡。然而，微管形成其他類型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，包括神經(jīng)進(jìn)程中用于胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)那?track)。因?yàn)檫@些藥物不能特異性地靶向于有絲分裂紡錘體，因此它們具有限制其應(yīng)用性的副作用。
改善癌癥治療用藥物的特異性具有重要意義，因?yàn)?，如果與這些藥物給藥有關(guān)的副作用能被減少，則將實(shí)現(xiàn)其治療學(xué)益處。常規(guī)性地，癌癥治療中的突出改善與識(shí)別通過新機(jī)制起作用的治療劑有關(guān)。其例子不僅包括紫杉烷，而且還包括拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑的喜樹堿類。從這兩個(gè)角度考慮，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是新型抗癌劑的更具前景的目標(biāo)。
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是有絲分裂紡錘體裝配和發(fā)揮作用中不可或缺的酶，但是通常不是其它微管結(jié)構(gòu)的一部分，如在神經(jīng)進(jìn)程中。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白在有絲分裂所有階段過程中都扮演重要角色。這些酶是“分子運(yùn)動(dòng)原”，它們將ATP水解釋放的能量轉(zhuǎn)變成機(jī)械力，驅(qū)動(dòng)細(xì)胞負(fù)荷沿著微管進(jìn)行定向運(yùn)動(dòng)。足以完成這一任務(wù)的催化區(qū)是約340個(gè)氨基酸的致密結(jié)構(gòu)。在有絲分裂期間，驅(qū)動(dòng)蛋白將微管組構(gòu)為作為有絲分裂紡錘體的雙極結(jié)構(gòu)。驅(qū)動(dòng)蛋白調(diào)解染色體沿紡錘體微管的移動(dòng)，以及與有絲分裂的特定相有關(guān)的有絲分裂紡錘體中的結(jié)構(gòu)變化。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白功能的試驗(yàn)性擾動(dòng)引起有絲分裂紡錘體的畸形或者機(jī)能障礙，通常導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯與細(xì)胞死亡。
在有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白中，已經(jīng)被識(shí)別的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白有KSP。KSP屬于正端導(dǎo)向(plus end-directed)的微管運(yùn)動(dòng)原的進(jìn)化學(xué)上保存下來的驅(qū)動(dòng)蛋白亞族，所述微管運(yùn)動(dòng)原裝配成由反向平行的均二聚體構(gòu)成的雙極均四聚體。在有絲分裂期間，KSP伴隨有絲分裂紡錘體的微管。將針對(duì)KSP的抗體顯微注射到人細(xì)胞中，防止在前中期期間紡錘體極分離，生成單極紡錘體并引起有絲分裂停滯和誘導(dǎo)細(xì)胞程序死亡。KSP與相關(guān)驅(qū)動(dòng)蛋白在其他非人的有機(jī)體中，使反向平行微管集束，并使它們彼此相對(duì)滑行，因此驅(qū)動(dòng)兩個(gè)紡錘體極分離。KSP也可在分裂后期調(diào)解B紡錘體伸長和微管在紡錘體極處的聚集。
已經(jīng)描述了人KSP(也稱為HsEg5)[Blangy等人，Cell，831159-69(1995)；Whitehead等人，Arthritis Rheum.，391635-42(1996)；Galgio等人，J.Cell Biol.，135339-414(1996)；Blangy等人，J Biol.Chem.，27219418-24(1997)；Blangy等人，Cell Motil Cytoskeleton，40174-82(1998)；Whitehead和Rattner，J.Cell Sci.，1112551-61(1998)；Kaiser等人，JBC 27418925-31(1999)；GenBank登記號(hào)X85137，NM004523和U37426]，并且已經(jīng)描述了KSP基因片段(TRIP5)[Lee等人，MolEndocrinol.，9243-54(1995)；GenBank登記號(hào)L40372]。已經(jīng)報(bào)導(dǎo)了非洲爪蟾屬KSP同系物(Eg5)，以及果蠅K-LP61F/KRP 130。
最近已經(jīng)描述了某些喹唑啉酮作為KSP抑制劑(PCT公開WO01/30768，2001年5月3日)。
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白對(duì)于發(fā)現(xiàn)和開發(fā)新型有絲分裂化學(xué)療法是具有前景的目標(biāo)。因此，本發(fā)明的目的是提供可用于抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP的方法與組合物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及二氫吡咯衍生物，其可用于治療細(xì)胞增殖疾病，用于治療與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性有關(guān)的病癥，并用于抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白。本發(fā)明的化合物可由下式I表示
發(fā)明詳述本發(fā)明的化合物可用于抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白并通過下式I所示化合物、或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體進(jìn)行說明 其中a為0或1；b為0或1；m為0、1或2；n為0、1、2或3；
r為0或1；s為0或1；t為0、1或2；R1和R2獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R3選自1)氫，2)C1-C10烷基，3)C1-C10烷基-O-Rd，4)C2-C10烯基-O-Rd，5)C2-C10炔基-O-Rd，6)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-O-Rd，7)C1-C10烷基-(C＝O)b-NRcRc′，8)C2-C10烯基-(C＝O)bNRcRc′，9)C2-C10炔基-(C＝O)bNRcRc′，10)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-(C＝O)bNRcRc′，11)C1-C10烷基-S(O)m-Rd，12)C2-C10烯基-S(O)m-Rd，13)C2-C10炔基-S(O)m-Rd，14)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-S(O)m-Rd，所述烷基、烯基、炔基和環(huán)烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R6的取代基取代；R4獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)CO2H，4)鹵代，5)CN，6)OH，7)ObC1-C6全氟烷基，8)Oa(C＝O)bNR8R9，9)S(O)mRa，
10)S(O)2NR8R9，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R5選自1)氫；2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)CO2H，5)鹵代，6)CN，7)OH，8)ObC1-C6全氟烷基，9)Oa(C＝O)bNR8R9，10)S(O)mRa，11)S(O)2NR8R9，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R6獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵代，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR8R9，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR8R9，14)氧代，
15)CHO，16)(N＝O)R8R9，或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R7選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代，4)OH，5)鹵代，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，和17)(C＝O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2N(Rb)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)選自以下的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代、NO2和N(Rb)2；R8和R9獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，
4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，或R8和R9可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，R10選自F和-CH2F；R11和R12獨(dú)立地選自H和-CH2F；Rox不存在或者是氧代；Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′或S(O)2Ra，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rc和Rc′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、NH2、OH、ORa、-(C1-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′、S(O)2Ra和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Rc和Rc′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rd選自H、(C1-C6)烷基、-(C2-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Re和Re′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Re和Re′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代。
本發(fā)明的化合物可用于抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白并通過下式II所示化合物、或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體進(jìn)行說明 其中a為0或1；b為0或1；m為0、1或2；n為0、1、2或3；r為0或1；s為0或1；
t為0或1；R1和R2獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R3選自1)氫，2)C1-C10烷基，3)C1-C10烷基-O-Rd，4)C2-C10烯基-O-Rd，5)C2-C10炔基-O-Rd，6)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-O-Rd，7)C1-C10烷基-(C＝O)b-NRcRc′，8)C2-C10烯基-(C＝O)bNRcRc′，9)C2-C10炔基-(C＝O)bNRcRc′，10)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-(C＝O)bNRcRc′，11)C1-C10烷基-S(O)m-Rd，12)C2-C10烯基-S(O)m-Rd，13)C2-C10炔基-S(O)m-Rd，14)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-S(O)m-Rd，所述烷基、烯基、炔基和環(huán)烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R6的取代基取代；R4獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)CO2H，4)鹵代，5)CN，6)OH，7)ObC1-C6全氟烷基，8)Oa(C＝O)bNR8R9，9)S(O)mRa，10)S(O)2NR8R9，
所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R5選自1)氫；2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)CO2H，5)鹵代，6)CN，7)OH，8)ObC1-C6全氟烷基，9)Oa(C＝O)bNR8R9，10)S(O)mRa，11)S(O)2NR8R9，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R6獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵代，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR8R9，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR8R9，14)氧代，15)CHO，
16)(N＝O)R8R9，或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R7選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代，4)OH，5)鹵代，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2N(Rb)2；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)選自以下的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代、NO2和N(Rb)2；R8和R9獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，
5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，或R8和R9可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，R10選自F和-CH2F；R12選自H和-CH2F，條件是當(dāng)t為1時(shí)，R12為H；Rox不存在或者是氧代；Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′或S(O)2Ra，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rc和Rc′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、NH2、OH、ORa、-(C1-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′、S(O)2Ra和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Rc和Rc′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rd選自H、(C1-C6)烷基、-(C2-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Re和Re′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Re和Re′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代。
在本發(fā)明的實(shí)施方案中，化合物通過下式III所示化合物、或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體進(jìn)行說明 其中a為0或1；b為0或1；m為0、1或2；n為0、1或2；r為0或1；s為0或1；
R1和R2獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R4獨(dú)立地選自1)鹵代，2)OH，3)ObC1-C6全氟烷基，R5選自1)氫；2)鹵代，3)OH，4)ObC1-C6全氟烷基，R7選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代，4)OH，5)鹵代，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，和17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2N(Rb)2
所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)選自以下的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代、NO2和N(Rb)2；R8和R9獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，或R8和R9可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′或S(O)2Ra，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rc和Rc′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、NH2、OH、ORa、-(C1-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′、S(O)2Ra和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Rc和Rc′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Re和Re′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Re和Re′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案通過下式IV所示化合物或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體進(jìn)行說明 其中a為0或1；b為0或1；m為0、1或2；r為0或1；s為0或1；R1和R2獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；
R4獨(dú)立地選自1)鹵代，2)OH，3)ObC1-C6全氟烷基，R7選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代，4)OH，5)鹵代，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，和17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2N(Rb)2；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)選自以下的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代、NO2和N(Rb)2；R8和R9獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，
5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，或R8和R9可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′或S(O)2Ra，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rc和Rc′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、NH2、OH、ORa、-(C1-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′、S(O)2Ra和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Rc和Rc′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Re和Re′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或
Re和Re′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代。
本發(fā)明化合物的具體例子包括(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-4-氟吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-4-氟吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-4-氟-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5S)-5-(氟甲基)-吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5S)-5-(氟甲基)-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5R)-5-(氟甲基)-吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5R)-5-(氟甲基)-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體。
本發(fā)明的化合物可具有不對(duì)稱中心、手性軸與手性平面(在E.I.Eliel和S.H.Wilen，Stereochemistry of Carbon Compounds，John Wiley &Sons，New York，1994，1119-1190頁中有述)并作為外消旋物、外消旋混合物、和作為單個(gè)的非對(duì)映體存在，具有其所有可能的異構(gòu)體及其混合物，包括光學(xué)異構(gòu)體，所有這些立體異構(gòu)體都被歸入本發(fā)明。另外，本文所述化合物可作為互變異構(gòu)體存在，兩種互變異構(gòu)形式都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，即使只描述了一個(gè)互變結(jié)構(gòu)。
當(dāng)任一變量(如R4、R7、R10等)在任何結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)超過一次時(shí)，在每種情況中的定義與其它情況中的定義相獨(dú)立。另外，只有當(dāng)這種組合產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物時(shí)才允許進(jìn)行取代基與變量的組合。從取代基到環(huán)系統(tǒng)中的線條表示所示鍵可與任一個(gè)可取代的環(huán)原子連接。如果環(huán)體系是多環(huán)的，則表示鍵僅在最接近的環(huán)上與適當(dāng)?shù)奶荚拥娜我粋€(gè)連接。
很清楚，本發(fā)明化合物上的取代基與取代形式可由本領(lǐng)域技術(shù)人員進(jìn)行選擇，以得到化學(xué)上穩(wěn)定的化合物，并且其可通過本領(lǐng)域已知的技術(shù)及下述方法容易地從可用起始原料合成。如果取代基自身被多于一個(gè)基團(tuán)取代，可以理解，這些多個(gè)基團(tuán)可在相同的碳或者不同的碳上，只要得到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)即可。術(shù)語“任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代”應(yīng)該等價(jià)于術(shù)語“任選被至少一個(gè)取代基取代”，并且在此情況下優(yōu)選方案具有0-3個(gè)取代基。
如同本文使用的，“烷基”是指包括具有特定碳原子數(shù)的支鏈與直鏈的飽和脂族烴基。例如，“C1-C10烷基”中的C1-C10定義為包括具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)碳的直鏈或者支鏈構(gòu)型的基團(tuán)。例如，“C1-C10烷基”具體包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等等。術(shù)語“環(huán)烷基”是指具有特定碳原子數(shù)的單環(huán)飽和脂族烴基。例如，“環(huán)烷基”包括環(huán)丙基、甲基-環(huán)丙基、2，2-二甲基-環(huán)丁基、2-乙基-環(huán)戊基、環(huán)己基等等。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，術(shù)語“環(huán)烷基”包括上面剛剛所述的基團(tuán)并且另外包括單環(huán)不飽和脂族烴基。例如，在該實(shí)施方案中所定義的“環(huán)烷基”包括環(huán)丙基、甲基-環(huán)丙基、2，2-二甲基-環(huán)丁基、2-乙基-環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)戊烯基、環(huán)丁烯基等。
術(shù)語“亞烷基”是指具有特定碳原子數(shù)的烴雙基基團(tuán)。例如，“亞烷基”包括-CH2-、-CH2CH2-等。
當(dāng)用在術(shù)語“C1-C6芳烷基”和“C1-C6雜芳烷基”中時(shí)，“C1-C6”是指該結(jié)構(gòu)部分中的烷基部分，并且未描述該結(jié)構(gòu)部分中芳基和雜芳基部分中的碳原子數(shù)。
“烷氧基”表示具有指示數(shù)目的碳原子的通過氧橋連接的環(huán)狀或者非環(huán)狀烷基。因此“烷氧基”包括上述烷基和環(huán)烷基的定義。
如果未指定碳原子數(shù)，則術(shù)語“烯基”是指直鏈、支鏈或環(huán)狀的包含2-10個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳-碳雙鍵的非芳香烴基。優(yōu)選存在一個(gè)碳-碳雙鍵，并且可存在最多四個(gè)非芳香碳-碳雙鏈。因此，“C2-C6烯基”是指具有2-6個(gè)碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和環(huán)己烯基。烯基的直鏈、支鏈或者環(huán)狀部分可含有雙鍵并且如果指明是取代烯基，則其可被取代。
術(shù)語“炔基”是指直鏈、支鏈或環(huán)狀的包含2-10個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳-碳三鍵的烴基?？纱嬖谧疃嗳齻€(gè)碳-碳三鍵。因此，“C2-C6炔基”是指具有2-6個(gè)碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直鏈、支鏈或者環(huán)狀部分可含有三鍵并且如果指明是取代炔基，則其可被取代。
在某些情況下，取代基可用包括0的碳原子范圍定義，如(C0-C6)亞烷基-芳基。如果芳基為苯基，則該定義包括苯基自身，以及-CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等等。
如本文使用的，“芳基”是指任何在各環(huán)中具有最多7個(gè)原子的穩(wěn)定的單環(huán)或者雙環(huán)碳環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳香性的。這些芳基單元的例子包括苯基、萘基、四氫萘基、2，3-二氫化茚基與聯(lián)苯基。在其中芳基取代基是雙環(huán)的并且一個(gè)環(huán)是非芳香的情況中，很清楚，通過芳環(huán)進(jìn)行連接。
本文使用的術(shù)語“雜芳基”表示在每個(gè)環(huán)中具有最多7個(gè)原子的穩(wěn)定的單環(huán)或者雙環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳香的并含有1-4個(gè)選自O(shè)、N與S構(gòu)成組中的雜原子。在該定義范圍內(nèi)的雜芳基包括但不限于吖啶基、咔唑基、1，2-二氮雜萘基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、異喹啉基、噁唑基、異噁唑基、吲哚基、吡嗪基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氫喹啉。正如以下雜環(huán)定義中的一樣，“雜芳基”可以理解為包括任何含氮雜芳基的N-氧化物衍生物。如果雜芳基取代基是雙環(huán)的并且一個(gè)環(huán)是非芳香的或者不包含雜原子，可以理解，分別通過芳環(huán)或者含雜原子的環(huán)進(jìn)行連接。
如本文使用的，術(shù)語“雜環(huán)”或者“雜環(huán)基”是指含1-4個(gè)選自O(shè)、N和S構(gòu)成組中的雜原子的5-10元芳香或者非芳香雜環(huán)，并且包括雙環(huán)基團(tuán)。因此“雜環(huán)基”包括上述的雜芳基，及其二氫與四氫類似物?！半s環(huán)基”另外的例子包括但不限于以下苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、咔唑基、咔啉基、1，2-二氮雜萘基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、indolazinyl、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異噁唑基、萘并吡啶基、噁二唑基、噁唑基、噁唑啉、異噁唑啉、氧雜環(huán)丁基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、四氫異喹啉基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮雜環(huán)丁基、1，4-二氧雜環(huán)己基、六氫氮雜基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并噁唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異噁唑基、二氫異噻唑基、二氫噁二唑基、二氫噁唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁基、亞甲基二氧苯甲?；⑺臍溥秽?、與四氫噻吩基、及其N-氧化物。可通過碳原子或者通過雜原子連接雜環(huán)基取代基。
優(yōu)選雜環(huán)選自2-氮雜酮、苯并咪唑基、2-diazapinone、咪唑基、2-咪唑烷酮、吲哚基、異喹啉基、嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、2-哌啶酮、2-嘧啶酮、2-吡咯烷酮、喹啉基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基、和噻吩基。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可理解，本文使用的“鹵代”或“鹵素”包括氯代、氟代、溴代與碘代。
除非另外明確說明，烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基取代基可為取代的或未取代的。例如，(C1-C6)烷基可被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自以下的取代基取代OH、氧代、鹵素、烷氧基、二烷基氨基或雜環(huán)基如嗎啉基、哌啶基等。在這種情況下，如果一個(gè)取代基是氧代并且另一個(gè)取代基是OH，則定義包括以下-(C＝O)CH2CH(OH)CH3、-(C＝O)OH、-CH2(OH)CH2CH(O)等等。
在某些情況，Rc與Rc′、Rf與Rf′定義為使得它們可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為5-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代?？扇绱诵纬傻碾s環(huán)的例子包括但不限于以下基團(tuán)，記住雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)(并且在一實(shí)施方案中，被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè))選自R7的取代基取代
在某些情況中，Rd與Rd′定義為使得它們可與它們所連接的磷一起形成環(huán)為5-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自NRe、O與S的雜原子的單環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代?？扇绱诵纬傻碾s環(huán)的例子包括但不限于以下基團(tuán)，記住雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)(并且在一實(shí)施方案中，被一個(gè)或兩個(gè))選自R7的取代基取代 在一實(shí)施方案中，R1選自H和C1-C6烷基。
在一實(shí)施方案中，R2選自H和C1-C6烷基。
在一實(shí)施方案中，R11和R12是H。
在一實(shí)施方案中，R3選自-C1-C10烷基-O-Rg和-C1-C10烷基-NRfRf′，其任選被一個(gè)或兩個(gè)選自R10的取代基取代。
在一實(shí)施方案中，R4獨(dú)立地選自鹵素和OH。在另一個(gè)實(shí)施方案中，n是2，R4獨(dú)立地選自鹵素。
在一實(shí)施方案中，R5獨(dú)立地選自H、鹵素和OH。
在一實(shí)施方案中，t是1，R10是氟代。
在一實(shí)施方案中，t是0，R11是氟甲基。
在一實(shí)施方案中，t是0，R12是氟甲基。
在一實(shí)施方案中，ROX不存在。
本發(fā)明包括式I所示化合物的游離形式、及其可藥用鹽和立體異構(gòu)體。本文中示例性的某些特定化合物是胺化合物的質(zhì)子化鹽。術(shù)語“游離形式”是指非鹽形式的所述胺化合物。包括在本文范圍內(nèi)的可藥用鹽不僅包括示例性地用于本文所述特定化合物的鹽，而且包括式I所示化合物游離形式的所有典型的可藥用鹽。所述特定鹽化合物的游離形式可使用本領(lǐng)域已知的技術(shù)進(jìn)行分離。例如，通過用適當(dāng)?shù)南A水溶液如稀NaOH、碳酸鉀、氨和碳酸氫鈉的水溶液處理鹽，得到游離形式。游離形式在某些物理性能，如在極性溶劑中的溶解度方面，可不同于其各自鹽的形式，但是用于本發(fā)明目的時(shí)，酸鹽和堿鹽在藥學(xué)意義上等價(jià)于它們各自的游離形式。
可從本發(fā)明的含有堿性或者酸性結(jié)構(gòu)部分的化合物通過常規(guī)化學(xué)方法合成得到本發(fā)明化合物的可藥用鹽。通常，通過離子交換色譜法或者使游離堿與化學(xué)計(jì)量的或過量的所需形成鹽所用的無機(jī)酸或有機(jī)酸在適當(dāng)?shù)娜軇┲谢蛟诟鞣N溶劑的組合中反應(yīng)，制備堿性化合物的鹽。同樣地，通過使酸性化合物與適當(dāng)?shù)臒o機(jī)堿或有機(jī)堿反應(yīng)，制備酸性化合物的鹽。
因此，本發(fā)明化合物的可藥用鹽包括通過使堿性的本發(fā)明化合物與無機(jī)酸或有機(jī)酸反應(yīng)制備的本發(fā)明化合物的常規(guī)的無毒鹽。例如，常規(guī)的無毒鹽包括那些得自無機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的鹽，以及從有機(jī)酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、雙羥萘酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯基乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對(duì)氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、反丁烯二酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羥乙基磺酸、三氟乙酸等制備的鹽。
當(dāng)本發(fā)明的化合物是酸性時(shí)，適當(dāng)?shù)摹翱伤幱名}”是指從可藥用無毒堿包括無機(jī)堿和有機(jī)堿制備的鹽。得自無機(jī)堿的鹽包括鋁、銨、鈣、銅、三價(jià)鐵、二價(jià)鐵、鋰、鎂、三價(jià)錳、二價(jià)錳、鉀、鈉、鋅等的鹽。特別優(yōu)選銨、鈣、鎂、鉀和鈉的鹽。得自可藥用有機(jī)無毒堿的鹽包括一級(jí)胺、二級(jí)胺和三級(jí)胺的鹽，取代胺(包括天然存在的取代胺)的鹽，環(huán)胺和堿性離子交換樹脂(如精氨酸、甜菜堿咖啡因、膽堿、N，N1-二苯甲基乙二胺)、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、組氨酸、哈胺、異丙胺、賴氨酸、甲基葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嘌呤類、可可堿、三乙胺、三甲胺三丙胺、氨基丁三醇等的鹽。
上述可藥用鹽和其它典型的可藥用鹽的制備的更全面描述參見Berg等人的“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.1977661-19。
還應(yīng)注意本發(fā)明的化合物是潛在的內(nèi)鹽或兩性離子，因?yàn)樵谏項(xiàng)l件下，化合物中的脫質(zhì)子化酸性結(jié)構(gòu)部分，如羧基，可為陰離子性的，該電荷可然后被內(nèi)部平衡掉以對(duì)抗質(zhì)子化或烷基化的堿性結(jié)構(gòu)部分的陽離子電荷，如四價(jià)氮原子。
在圖解和實(shí)施例中使用的以下縮寫的定義如下

表(續(xù))

除了文獻(xiàn)中已知的或在實(shí)驗(yàn)過程中示例的其它標(biāo)準(zhǔn)操作之外，本發(fā)明的化合物也可通過使用以下圖解中所示反應(yīng)制備。因此，以下說明性的圖解不限于所列化合物，或不限于任何用于說明性目的所用的特定取代基。在圖解中示出的取代基標(biāo)號(hào)不一定與權(quán)利要求中所用的標(biāo)號(hào)相互關(guān)聯(lián)，并且為了清楚起見，通常表示為單個(gè)取代基與化合物連接，在化合物中，允許在上文式I定義條件下存在多個(gè)取代基。
圖解如圖解A所示，關(guān)鍵的2，2-二取代的二氫吡咯中間體A-8可得自容易獲得的適當(dāng)取代的α-苯基甘氨酸。根據(jù)Van Betsbrugge等人所述過程(Tetrahedron，1997，53，9233-9240)制備(α-烯丙基-α(-苯基甘氨酸。酯還原以及與羰基二咪唑環(huán)化得到中間體A-4。烯丙基屬烯烴的釕氧化，然后通過形成酯以及氮的烷基化得到中間體A-5。環(huán)化和脫羧基得到中間體A-6。然后可使用環(huán)羰基以引入適當(dāng)取代的苯基部分。隨后皂化和氧保護(hù)得到被保護(hù)的中間體A-8。然后環(huán)氮可與三光氣反應(yīng)形成活化的中間體A-9。
圖解B說明從環(huán)氧化物B-1制備氟化的氨基吡咯烷B-4。中間體B-3在Li，Q等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.，8，1998，1953-1958中有述。然后氨基吡咯烷B-4可與中間體A-9如圖解C中所示反應(yīng)，得到雙保護(hù)的化合物C-1。如所示，非環(huán)氮可被烷基化。然后可將中間體C-2脫保護(hù)并將環(huán)氮烷基化以得到本發(fā)明的化合物C-3。
在圖解D中表示從共用的中間體B-2開始制備胺和氟為順式取向的氟化氨基吡咯烷D-2。圖解E和F中說明的是在5-位具有氟甲基部分的氨基吡咯烷中間體(E-5)或在2-位具有該氟甲基部分的中間體(F-5)的制備。如上圖解C中說明的，這些胺可與中間體A-9反應(yīng)。
圖解G說明2-氟甲基-3-氨基吡咯烷與中間體A-9的偶聯(lián)，隨后為二氫吡咯環(huán)上羥甲基部分的脫保護(hù)和烷基化。
圖解H說明羥甲基殘基的進(jìn)一步修飾以制備本發(fā)明化合物H-2和H-3。
如圖解I中所說明的，也可將羥甲基部分氧化為相應(yīng)的醛I-1，其可隨后通過還原氨化得到本發(fā)明的化合物I-2。
在圖解J中說明在氨基羰基部分上的選擇性的活化基團(tuán)。
圖解K說明環(huán)的羥甲基部分的進(jìn)一步同系化(homologation)。最初與膦酸乙酸三甲酯(trimethyl phosphonoacetate)反應(yīng)得到不飽和醇側(cè)鏈化合物K-1和同系的醛K-2的混合物?？蓪⑦@些化合物色譜分離并用于制備相應(yīng)的胺K-3和K-4。
如圖解L中所說明的，I-1也可與格氏試劑反應(yīng)得到本發(fā)明的化合物L(fēng)-1。
如圖解M中所說明的，也可將二氫吡咯2-位上的醛部分用膦酸乙酸三甲酯處理，在將共軛雙鍵還原之后，得到酯化合物M-2。M-2進(jìn)行氫化鋰鋁還原，隨后Dess-Martin氧化得到醛M-4，然后可將其如前所述地進(jìn)行還原胺化。
圖解N說明C-2側(cè)鏈的氟化，和隨后的通過用疊氮化鈉取代相應(yīng)的三氟甲磺酸酯由羥基部分到胺的轉(zhuǎn)化。
圖解O說明將二氟甲基部分結(jié)合到C-2側(cè)鏈中。
圖解A
圖解A(續(xù))
圖解B 圖解C
圖解D 圖解E
圖解F 圖解G
圖解H
圖解I
圖解J
圖解K
圖解K(續(xù)) 圖解L
圖解M
圖解N
圖解O 實(shí)用性本發(fā)明的化合物可用于多種應(yīng)用。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所預(yù)料的，有絲分裂可以多種方式被改變；也就是說，人們可通過增加或減少有絲分裂路徑中組分的活性來影響有絲分裂。換句話說，有絲分裂可通過干擾平衡(通過抑制或者激活某些組分)而受到影響(如破壞)。類似方法可用來改變減數(shù)分裂。
在優(yōu)選方案中，使用本發(fā)明的化合物調(diào)節(jié)有絲分裂紡錘體形成，因此，引起有絲分裂中細(xì)胞周期停滯的延長。本發(fā)明使用的“調(diào)節(jié)”是指改變有絲分裂紡錘體形成，包括增加和減少紡錘體形成。本文使用的“有絲分裂紡錘體形成”是指通過有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白將微管組構(gòu)成為雙極結(jié)構(gòu)。本文中的“有絲分裂紡錘體機(jī)能障礙”是指有絲分裂停滯和單極紡錘體形成。
本發(fā)明的化合物可用于與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合和/或調(diào)節(jié)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的活性。在優(yōu)選方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是如美國專利6,284,480第5欄中所述的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的bimC亞族成員。在另外的優(yōu)選方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是人KSP，盡管得自其他有機(jī)體的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的活性也可通過本發(fā)明的化合物進(jìn)行調(diào)節(jié)。關(guān)于這一點(diǎn)，調(diào)節(jié)是指增加或者減少紡錘體極的分離，引起有絲分裂紡錘體極的畸形，即，張開，或引起有絲分裂紡錘體的形態(tài)學(xué)擾動(dòng)。為了達(dá)到上述目的，在KSP定義中還包括各種KSP的變體和/或片段。另外，其他有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白可受到本發(fā)明化合物的抑制。
本發(fā)明的化合物可用于治療細(xì)胞增殖疾病?？赏ㄟ^本文提供的方法和組合物治療的疾病狀態(tài)包括但不限于癌癥(在下文中進(jìn)一步討論)、自身免疫病、關(guān)節(jié)炎、移植排斥、炎癥性腸病、醫(yī)療過程(包括但不限于手術(shù)、血管成形術(shù)等)后引發(fā)的增殖?？梢灶A(yù)料，有時(shí)候細(xì)胞不處在過度增殖或不足增殖狀態(tài)(異常狀態(tài))下并且仍然需要治療。例如，在傷口愈合期間，細(xì)胞可能“正常地”增殖，但是可能需要增強(qiáng)增殖。同樣地，正如以上討論的，在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中，細(xì)胞可能處在“正常的”狀態(tài)下，但是可能需要調(diào)節(jié)增殖以通過直接提高作物生長、或通過抑制不利地影響作物的植物或有機(jī)體的生長而強(qiáng)化作物。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括對(duì)經(jīng)受或即將經(jīng)受這些病癥或狀態(tài)中任一種折磨的細(xì)胞或個(gè)體進(jìn)行施用。
本文提供的化合物、組合物和方法特別可用于治療癌癥，所述癌癥包括實(shí)體瘤，如皮、乳腺、腦、宮頸癌、睪丸癌等等。更特別地，可通過本發(fā)明的化合物、組合物和方法治療的癌癥包括但不限于心臟肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肉瘤)，粘液瘤，橫紋肌瘤，纖維瘤，脂肪瘤和畸胎瘤；肺支氣管原性癌(鱗狀上皮細(xì)胞癌、未分化小細(xì)胞癌、未分化大細(xì)胞癌、腺癌)，肺泡(支氣管)癌，支氣管腺瘤，肉瘤，淋巴瘤，軟骨錯(cuò)構(gòu)瘤，間皮瘤；胃腸食管(鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)，胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)，胰腺(胰管腺癌、胰島瘤、胰升血糖素瘤、胃泌素瘤、類癌瘤、血管活性腸肽瘤)，小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌瘤、卡波西氏肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神經(jīng)纖維瘤、纖維瘤)，大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯(cuò)構(gòu)瘤、平滑肌瘤)；泌尿生殖道腎(腺癌、韋母氏瘤[胚胎性癌肉瘤]、淋巴瘤、白血病)，膀胱和尿道(鱗狀細(xì)胞癌、移行細(xì)胞癌、腺癌)，前列腺(腺癌、肉瘤)，睪丸(精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質(zhì)細(xì)胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣瘤、脂肪瘤)；肝臟肝癌(肝細(xì)胞癌)，肝膽管型肝癌，肝胚細(xì)胞瘤，血管肉瘤，肝細(xì)胞性腺瘤，血管瘤；骨骨原性肉瘤(骨肉瘤)，纖維肉瘤，惡性纖維組織細(xì)胞瘤，軟骨肉瘤，尤因氏肉瘤，惡性淋巴瘤(網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤)，多發(fā)性骨髓瘤，惡性巨細(xì)胞瘤脊索瘤，骨軟骨瘤(骨軟骨外生骨疣)，良性軟骨瘤，成軟骨細(xì)胞瘤，軟骨粘液纖維瘤，骨樣骨瘤和巨細(xì)胞瘤；神經(jīng)系統(tǒng)顱(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黃瘤、佩吉特氏病)，腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤病)，腦(星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤胚組織瘤[松果體瘤]、多形性惡性膠質(zhì)瘤、寡枝神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)鞘瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、先天性腫瘤)，脊髓纖維神經(jīng)瘤，腦膜瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，肉瘤)；婦科子宮(子宮內(nèi)膜癌)，子宮頸(宮頸癌、腫瘤前子宮頸非典型增生)，卵巢(卵巢癌[漿液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分類癌]，粒膜-鞘細(xì)胞瘤，塞-萊二氏細(xì)胞瘤，無性細(xì)胞瘤，惡性畸胎瘤)，外陰(鱗狀細(xì)胞癌、上皮內(nèi)癌、腺癌、纖維肉瘤、黑色素瘤)，陰道(明細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、葡萄樣肉瘤(胚橫紋肌肉瘤、輸卵管(癌)；血液學(xué)的血液(骨髓性白血病[急性和慢性的]，急性淋巴母細(xì)胞性白血病，慢性淋巴細(xì)胞性白血病，骨髓增生性疾病，多發(fā)性骨髓瘤，脊髓發(fā)育不良綜合征)，霍奇金病，非霍奇金氏淋巴瘤[惡性淋巴瘤]；皮膚惡性黑色素瘤、基底細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、卡波西氏肉瘤、胎塊發(fā)育不良痣、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕瘤、牛皮癬；和腎上腺成神經(jīng)細(xì)胞瘤。因此，本文所述術(shù)語“癌細(xì)胞”包括受到上述所認(rèn)定的條件中任一種折磨的細(xì)胞。
通過調(diào)節(jié)bimC驅(qū)動(dòng)蛋白亞族的真菌成員的活性，本發(fā)明的化合物也可用做抗真菌藥，如美國專利6,284,480中所述。
本發(fā)明的化合物還可用于制備用于治療上述細(xì)胞增殖疾病特別是癌癥的藥物。
可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐對(duì)哺乳動(dòng)物優(yōu)選人給用單獨(dú)的本發(fā)明的化合物，或優(yōu)選給用本發(fā)明的化合物與可藥用載體、賦形劑或者稀釋劑組合的藥物組合物形式。所述化合物可以口服或胃腸外給藥，包括靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、直腸和局部給藥途徑。
本文使用的術(shù)語“組合物”包括含特定量的特定成分的產(chǎn)品、以及直接地或者間接地得自特定量的特定成分的組合的任何產(chǎn)品。
含有活性成分的藥物組合物可為適合口服給藥的形式，例如，片劑、錠劑、菱形片、水性懸浮液或油性懸浮液、可分散性粉劑或者顆粒劑、乳液劑、硬膠囊或軟膠囊劑、或糖漿劑或酏劑。口服用組合物可根據(jù)本領(lǐng)域已知的用于制備藥物組合物的任何方法制備，并且該組合物可含有一種或多種選自甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑構(gòu)成組中的試劑，以提供藥學(xué)上形色味兼具的制劑。片劑含有與適于制造片劑的無毒可藥用賦形劑混合的活性成分。這些賦形劑可為例如，惰性稀釋劑，例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或者磷酸鈉；造粒劑和崩解劑，例如微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、玉米淀粉或者藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠、聚乙烯吡咯烷酮或者阿拉伯膠；和潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或者滑石。片劑可為未包衣的，或者它們可通過已知技術(shù)進(jìn)行包衣以掩蓋藥物的令人不快的味道或延遲藥物在胃腸道中的崩解和吸收，從而在較長時(shí)期內(nèi)提供持續(xù)作用。例如，可使用水溶性掩味物質(zhì)如羥丙基甲基纖維素或羥丙基纖維素，或可使用延時(shí)物質(zhì)如乙基纖維素、乙酸丁酸纖維素。
口服用制劑也可為硬明膠膠囊形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑如碳酸鈣、磷酸鈣或者高嶺土混合，或者口服用制劑也可為軟明膠膠囊形式，其中活性成分與水溶性載體如聚乙二醇或者油性介質(zhì)如花生油、液體石蠟或者橄欖油混合。
水性懸浮液含有與適合制造水性懸浮液的賦形劑混合的活性物質(zhì)。這些賦形劑是懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯樹膠；分散劑或潤濕劑可以為天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或者烯化氧類與脂肪酸的縮合產(chǎn)物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或者是環(huán)氧乙烷與長鏈脂族醇的縮合產(chǎn)物如十七亞乙氧基鯨蠟醇，或者是環(huán)氧乙烷與得自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯，或者是環(huán)氧乙烷與得自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產(chǎn)物例如聚乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。水性懸浮液也可含有一種或多種防腐劑，例如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸正丙酯，一種或多種著色劑，一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑例如蔗糖、糖精或者天冬甜素。
油性懸浮液可通過將活性成分懸浮在植物油例如花生油、橄欖油、芝麻油或者椰子油、或懸浮在礦物油例如液體石蠟中而制備。油性懸浮液可含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或者鯨蠟醇?？杉尤肜缟鲜瞿切┨鹞秳┖统C味劑以提供適口的口服制劑。這些組合物可通過加入抗氧化劑例如叔丁基化羥基茴香醚或者α-生育酚得以貯存。
通過加入水，適于制備水性懸浮液的可分散性粉劑和顆粒劑提供與分散劑或潤濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑混合的活性成分。適當(dāng)?shù)姆稚┗驖櫇駝┖蛻腋┤缟厦嬉呀?jīng)描述的那些?？纱嬖诹硗獾馁x形劑，例如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。這些組合物可通過加入抗氧化劑例如抗壞血酸得以保存。
本發(fā)明的藥物組合物也可為水包油型乳液劑形式。油相可能是植物油例如橄欖油或者花生油，或者可能是礦物油例如液體石蠟，或者是它們的混合物。適當(dāng)?shù)娜榛瘎┛赡苁翘烊淮嬖诘牧字绱蠖孤蚜字?，得自脂肪酸和己糖醇酐的酯或者偏酯例如脫水山梨糖醇單油酸酯，以及所述偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物例如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。乳劑也可能含有甜味劑、矯味劑、防腐劑和抗氧化劑。
糖漿劑和酏劑可用甜味劑例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或者蔗糖進(jìn)行配制。這些制劑也可含有緩和劑、防腐劑、矯味劑、著色劑和抗氧化劑。
藥物組合物可為無菌注射用水溶液形式。在可接受的介質(zhì)和溶劑中，可使用水、林格溶液和等滲氯化鈉溶液。
無菌可注射制劑也可是無菌可注射水包油型微乳液劑，其中活性成分溶于油相中。例如，活性成分可首先溶于大豆油和卵磷脂的混合物中，然后將油性溶液引入到水和甘油的混合物中，以加工形成微乳液劑。
可注射溶液或者微乳液劑可通過局部快速濃注被引入到患者的血流中?；蛘撸员３直景l(fā)明化合物的恒定循環(huán)濃度的方式給用溶液或者微乳液劑是有利的。為了維持這一恒定濃度，可使用連續(xù)靜脈內(nèi)輸送裝置。這種裝置的例子是Deltec CADD-PLUSTM5400型靜脈內(nèi)泵。
藥物組合物可為用于肌肉內(nèi)和皮下給藥用的無菌可注射水性懸浮液或油性懸浮液的形式。該懸浮液可根據(jù)本領(lǐng)域已知的技術(shù)配制，使用上述適當(dāng)?shù)姆稚┗蛘邼櫇駝┮约皯腋?。無菌可注射制劑也可為在無毒胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮液，如作為在1，3-丁二醇中的溶液。另外，無菌非揮發(fā)油類通常用作溶劑或者懸浮介質(zhì)。為了這一目的，可使用任何包括合成甘油一酯或甘油二酯的溫和的非揮發(fā)油。另外，脂肪酸例如油酸可用在可注射制劑中。
式I的化合物也可以直腸給藥栓劑的形式給藥。這些組合物可以通過將藥物與適當(dāng)?shù)臒o刺激性的賦形劑混合制備，所述賦形劑在通常溫度下為固體，在直腸溫度下為液體，從而在直腸中融化，釋放藥物。這些物質(zhì)包括可可脂、甘油膠、氫化植物油、各種分子量的聚乙二醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯。
對(duì)于局部施用，使用含有式I所示化合物的霜?jiǎng)?、膏劑、凝膠劑、溶液或者懸浮液等。(為了這一應(yīng)用，局部施用將包括漱口劑和含嗽液。)本發(fā)明的化合物可以通過局部使用適當(dāng)?shù)谋莾?nèi)介質(zhì)和輸送裝置的鼻腔內(nèi)形式給藥，或通過透皮路徑給藥，使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的皮膚貼片的那些形式。為了以透皮給藥系統(tǒng)的形式給藥，劑量給藥當(dāng)然會(huì)以連續(xù)而不是間歇的方式貫穿于給藥方案的全過程。本發(fā)明的化合物也可作為使用基質(zhì)例如可可脂、甘油膠、氫化植物油、各種分子量的聚乙二醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯的栓劑形式進(jìn)行遞送。
當(dāng)本發(fā)明的化合物給藥進(jìn)入受試人時(shí)，每日劑量通常根據(jù)開處方醫(yī)師進(jìn)行判斷，劑量通常隨著個(gè)體患者的年齡、體重、性別和應(yīng)答，以及隨著患者癥狀的嚴(yán)重程度的不同而不同。
在一個(gè)示例性應(yīng)用中，對(duì)經(jīng)歷癌癥治療的哺乳動(dòng)物給用適當(dāng)量的化合物。給藥量為每天約0.1毫克/公斤體重到約60毫克/公斤體重，優(yōu)選每天0.5毫克/公斤體重到約40毫克/公斤體重。
本發(fā)明化合物也用于與已知的治療劑和抗癌藥聯(lián)合使用。例如，本發(fā)明化合物與已知的抗癌藥聯(lián)合使用。目前公開的化合物與其它抗癌藥或化療藥的聯(lián)合使用在本發(fā)明的范圍內(nèi)。這些藥物的例子可見于Cancer Principles和Practice of Oncology，V.T.Devita和S.Hellman(編輯)，第6版(2001年2月15日)，Lippincott Williams &Wilkins Publishers.本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員根據(jù)藥物的特性和所涉及的癌癥，將能辨別哪種藥物聯(lián)合是有用的。這些抗癌藥包括但不限于以下雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視色素(retinoid)受體調(diào)節(jié)劑、胞毒/細(xì)胞生長抑制劑、抗增殖藥、異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑及其他血管生成抑制劑，細(xì)胞增殖和存活信號(hào)抑制劑、細(xì)胞程序死亡誘導(dǎo)劑以及干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物。當(dāng)與放射治療聯(lián)合給用時(shí)，本發(fā)明的化合物特別有用。
在一實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物也可用于與已知的抗癌藥聯(lián)合使用，所述抗癌藥包括以下雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視色素受體調(diào)節(jié)劑、胞毒劑、抗增殖藥、異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、及其他血管生成抑制劑。
“雌激素受體調(diào)節(jié)劑”是指干擾或者抑制雌激素與受體結(jié)合的化合物，無論機(jī)制如何。雌激素受體調(diào)節(jié)劑的例子包括但不限于他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟維司群、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基]-苯基-2，2-二甲基丙酸酯、4，4′-二羥基二苯甲酮-2，4-二硝基苯基-腙、和SH646。
“雄激素受體調(diào)節(jié)劑”是指干擾或者抑制雄激素與受體結(jié)合的化合物，無論機(jī)制如何。雄激素受體調(diào)節(jié)劑的例子包括非那甾胺及其他5α-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他米特、比卡魯胺、利阿唑和乙酸阿比特龍。
“類視色素受體調(diào)節(jié)劑”是指干擾或者抑制類視色素與受體結(jié)合的化合物，無論機(jī)制如何。這些類視色素受體調(diào)節(jié)劑的例子包括蓓薩羅丁、維甲酸、13-順式-視黃酸、9-順式-視黃酸、α-二氟甲基鳥氨酸、ILX23-7553、反式-N-[4′-羥苯基]維甲胺和N-4-羧基苯基維甲胺。
“胞毒/細(xì)胞生長抑制劑”是指主要通過直接干擾細(xì)胞發(fā)揮功能或者抑制或者干擾細(xì)胞分裂(mytosis)引起細(xì)胞死亡或者抑制細(xì)胞增殖的化合物，包括烷化劑、腫瘤壞死因子、嵌入劑、低氧可活化化合物、微管抑制劑/微管穩(wěn)定劑、有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑、有絲分裂進(jìn)程中所涉及的激酶的抑制劑、抗代謝藥；生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑；激素/抗激素治療劑、造血生長因子、單克隆抗體靶向治療劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和泛素連接酶抑制劑。
胞毒劑的例子包括但不限于sertenef、惡液質(zhì)素、異環(huán)磷酰胺、他索納明、氯尼達(dá)明、卡鉑、六甲蜜胺、松龍苯芥、二溴衛(wèi)矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、奈達(dá)鉑、奧沙利鉑、替莫唑胺、heptaplatin、雌氮芥、托西酸英丙舒凡、氯乙環(huán)磷酰胺、尼莫司汀、二溴螺氯銨、嘌嘧替派、洛鉑、沙鉑、泊非霉素、順鉑、伊羅夫文、右異環(huán)磷酰胺、順式胺二氯(2-甲基吡啶)鉑、芐基胍、葡磷酰胺、GPX100、(反式，反式，反式)-雙-mu-(己烷-1，6-二胺)-mu-[二胺-鉑(II)]雙[二胺(氯代)鉑(II)]四氯化物、diarizidinylspermine、三氧化二砷、1-(11-十二烷基氨基-10-羥基十一烷基)-3，7-二甲基黃嘌呤、佐柔比星、伊達(dá)比星、柔紅霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡萘非特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3′-脫氨基-3′-嗎啉代-13-脫氧-10-羥基洋紅霉素、蒽環(huán)霉素、加柔比星、依利奈法德、MEN10755、和4-脫甲氧基-3-脫氨基-3-氮雜環(huán)丙烯基-4-甲基磺?；?柔紅霉素(參見WO 00/50032)。
低氧可活化化合物的例子是替拉扎明。
蛋白酶體抑制劑的例子包括但不限于乳胞素和保特佐米。
微管抑制劑/微管穩(wěn)定劑的例子包括紫杉醇、硫酸長春地辛、3′，4′-二脫氫-4′-脫氧-8′-去甲長春堿、多西他賽(docetaxol)、根霉素、多拉司他汀、羥乙基磺酸米伏布林、auristatin、西馬多丁、RPR109881、BMS184476、長春氟寧、cryptophycin、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脫水長春堿、N，N-二甲基-L-纈氨酰-L-纈氨酰-N-甲基-L-纈氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸-叔丁基酰胺、TDX258、埃皮霉素(epothilones)(參見美國專利6,284,781和6,288,237)和BMS188797。
拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑的一些例子為拓樸替康、hycaptamine、依諾替康、魯比替康、6-乙氧基丙?；?3′，4′-O-外-亞苯甲基-教酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氫-9-羥基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3′，4′b，7]-吲嗪并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮、洛托替康、7-[2-(N-異丙基氨基)乙基]-(20S)喜樹堿、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐生、2′-二甲基氨基-2′-脫氧-依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲基氨基)乙基]-9-羥基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-甲酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羥基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-hexohydrofuro(3′，4′6，7)萘并(2，3-d)-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-6-酮、2，3-(亞甲基二氧)-5-甲基-7-羥基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶鎓、6，9-二[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]isoguinoline-5，10-二酮，5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羥基-2-(2-羥基乙基氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙基氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-硫雜蒽-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲基氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-3-羥基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮、和地美司鈉。
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑的例子，特別是人的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP的抑制劑的例子在PCT公開WO 01/30768和WO 01/98278、WO03/050,064(2003年6月19日)，WO 03/050,122(2003年6月19日)，WO03/049,527(2003年6月19日)，WO 03/049,679(2003年6月19日)，WO03/049,678(2003年6月19日)和WO 03/39460(2003年5月15日)和待審PCT申請(qǐng)US03/06403(提交日2003年3月4日)，US03/15861(提交日2003年5月19日)，US03/15810(提交日2003年5月19日)，US03/18482(提交日2003年6月12日)和US03/18694(提交日2003年6月12日)中有述。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑的實(shí)施方案中，包括但不限于KSP抑制劑、MKLP1抑制劑、CENP-E抑制劑、MCAK抑制劑、Kif14抑制劑、Mphosphl的抑制劑和Rab6-KIFL的抑制劑。
“在有絲分裂進(jìn)程中所涉及的激酶的抑制劑”包括但不限于aurora激酶的抑制劑、Polo樣激酶(PLK)抑制劑(特別是PLK-1的抑制劑)、bub-1的抑制劑和bub-R1的抑制劑。
“抗增殖藥物”包括反義RNA和DNA寡核苷酸如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，和抗代謝藥如依諾他濱、卡莫氟、替加氟、噴司他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟達(dá)拉賓、卡培他濱、加洛他濱、阿糖胞苷ocfosfate、fosteabine鈉水合物、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋啉、地西他濱、諾拉曲塞、培美曲塞、nelzarabine、2′-脫氧-2′-甲叉基胞苷、2′-氟亞甲基-2′-脫氧胞苷、N-[5-(2，3-二氫-苯并呋喃基)磺?；鵠-N′-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脫氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四碳二烯酰]甘氨酰氨基]-L-甘油基-B-L-甘露-庚吡喃糖基]腺嘌呤、aplidine、ecteinascidin、曲沙他濱、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氫-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩酰-L-谷氨酸、氨基喋呤、5-氟尿嘧啶、阿拉諾新、11-乙?；?8-(氨基甲酰氧基甲基)-4-甲?；?6-甲氧基-14-氧雜-1，11-二氮雜四環(huán)(7.4.1.0.0)-十四碳-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯、苦馬豆素、洛美曲索、右雷佐生、蛋氨酸酶、2′-氰基-2′-脫氧-N4-棕櫚?；?1-B-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛硫代半腙。
單克隆抗體靶向治療劑的例子包括具有與癌細(xì)胞特異性或靶細(xì)胞特異性單克隆抗體結(jié)合的胞毒劑或放射性同位素的那些治療劑。例子包括Bexxar。
“HMG-CoA還原酶抑制劑”是指3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑。具有HMG-CoA還原酶抑制活性的化合物可使用本領(lǐng)域熟知的試驗(yàn)進(jìn)行識(shí)別。例如，參見美國專利4,231,938第6欄中的所述試驗(yàn)，以及WO 84/02131第30-33頁所述試驗(yàn)。術(shù)語“HMG-CoA還原酶抑制劑”和“HMG-CoA還原酶的抑制劑”當(dāng)用在本文中具有相同含義。
HMG-CoA還原酶抑制劑的例子可使用并且不限于洛伐他汀(MEVACOR；參見美國專利4,231,938，4,294,926和4,319,039)，辛伐他汀(ZOCOR；參見美國專利4,444,784，4,820,850和4,916,239)，普伐他汀(PRAVACHOL；參見美國專利4,346,227，4,537,859，4,410,629，5,030,447和5,180,589)，氟伐他汀(LESCOL，參見美國專利5,354,772，4,911,165，4,929,437，5,189,164，5,118,853，5,290,946和5,356,896)，和阿托伐他汀(LIPITOR，參見美國專利5,273,995，4,681,893，5,489,691和5,342,952)?？稍诒景l(fā)明方法中使用的這些和其它另外的HMG-CoA還原酶抑制劑的結(jié)構(gòu)式在M.Yalpani，″Cholesterol LoweringDrugs″，Chemistry & Industry，第85-89頁(1996年2月5日)中的第87頁，和美國專利4,782,084和4,885,314中有述。本文使用的術(shù)語HMG-CoA還原酶包括所有的可藥用內(nèi)酯和開環(huán)酸的形式(即，其中內(nèi)酯環(huán)打開形成游離的酸)以及具有HMG-CoA還原酶抑制活性的化合物的鹽和酯的形式，因此，這些鹽、酯、開環(huán)酸和內(nèi)酯形式包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。內(nèi)酯部分和它對(duì)應(yīng)的開環(huán)酸的形式的示例在如下結(jié)構(gòu)式I和II中顯示如下。
內(nèi)酯 開環(huán)酸I II在存在開環(huán)酸形式的HMG-CoA還原酶抑制劑中，鹽和酯的形式可由開環(huán)的酸形成，并且所有這些形式包括在本文使用的術(shù)語“HMG-CoA還原酶抑制劑”的含義中。在一實(shí)施方案中，HMG-CoA還原酶抑制劑選自洛伐他汀和辛伐他汀，在另外的實(shí)施方案中，選自辛伐他汀。本文中，HMG-CoA還原酶抑制劑有關(guān)的術(shù)語“可藥用鹽”意思指本發(fā)明所用化合物的無毒鹽，其通常使游離酸與適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)堿或者無機(jī)堿反應(yīng)制備，特別是那些從陽離子例如鈉、鉀、鋁、鈣、鋰、鎂、鋅和四甲基銨形成的鹽，以及那些從胺例如氨、乙二胺、N-甲基葡糖胺、賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸、膽堿、N，N′-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、N-芐基苯乙基胺、1-對(duì)氯芐基-2-吡咯烷-1′-基-甲基苯并咪唑、二乙胺、哌嗪和三(羥基甲基)氨基甲烷形成的鹽。HMG-CoA還原酶抑制劑的鹽的另外的例子可包括但不限于乙酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、乙二胺四乙酸鈣鹽、右旋樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、氯化物、克拉維酸鹽、檸檬酸鹽、二氫氯化物、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽、丙酸酯十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇酰阿散酸鹽、hexylresorcinate、哈胺、氫溴化物、氫氯化物、羥基萘酸鹽、碘化物、isothionate、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、粘酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、pamaote、棕櫚酸鹽、panthothenate、磷酸鹽/二磷酸鹽、多聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式乙酸鹽、琥珀酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、teoclate鹽、甲苯磺酸鹽、三乙基碘化物(triethiodide)和戊酸鹽。
上述HMG-CoA還原酶抑制劑化合物的酯衍生物可作為潛藥，當(dāng)其吸收到溫血?jiǎng)游锏难髦袝r(shí)，可以釋放藥物形式的方式裂解，并使藥物提供改善的療效。
“異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑”是指抑制異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶包括法呢基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶(FPTase)，香葉基香葉基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶I型(GGPTase-I)和香葉基香葉基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶II型(GGPTase-II，也叫做Rab GGPTase)的任何一個(gè)或者任何組合的化合物。異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑化合物的例子包括(±)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮，(-)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮，(+)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮，5(S)-正丁基-1-(2，3-二甲基苯基)-4-[1-(4-氰基芐基)-5-咪唑基甲基]-2-哌嗪酮，(S)-1-(3-氯苯基)-4-[1-(4-氰基芐基)-5-咪唑基甲基]-5-[2-(乙磺?；?甲基)-2-哌嗪酮，5(S)-正丁基-1-(2-甲基苯基)-4-[1-(4-氰基芐基)-5-咪唑基甲基]-2-哌嗪酮，1-(3-氯苯基)-4-[1-(4-氰基芐基)-2-甲基-5-咪唑基甲基]-2-哌嗪酮，1-(2，2-二苯基乙基)-3-[N-(1-(4-氰基芐基)-1H-咪唑-5-基乙基)氨基甲酰基]哌啶，4-{5-[4-羥基甲基-4-(4-氯吡啶-2-基甲基)-哌啶-1-基甲基]-2-甲基咪唑-1-基甲基}芐腈，4-{5-[4-羥基甲基-4-(3-氯芐基)-哌啶-1-基甲基]-2-甲基咪唑-1-基甲基}芐腈，4-{3-[4-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)芐基]-3H-咪唑-4-基甲基}芐腈，4-{3-[4-(5-氯-2-氧代-2H-[1，2′]聯(lián)吡啶-5′-基甲基]-3H-咪唑-4-基甲基}芐腈，4-{3-[4-(2-氧代-2H-[1，2′]聯(lián)吡啶-5′-基甲基]-3H-咪唑-4-基甲基}芐腈，4-[3-(2-氧代-1-苯基-1，2-二氫吡啶-4-基甲基)-3H-咪唑-4-基甲基}芐腈，18，19-二氫-19-氧代-5H，17H-6，1012，16-二橋亞甲基(dimetheno)-1H-咪唑并[4，3-c][1，11，4]二氧雜氮雜環(huán)十九炔-9-腈、(±)-19，20-二氫-19-氧代-5H-18，21-橋亞乙基-12，14-亞乙烯基-6，10-橋亞甲基-22H-苯并[d]咪唑并[4，3-k][1，6，9，12]氧雜三氮雜-環(huán)十八炔-9-腈，19，20-二氫-19-氧代-5H，17H-18，21-橋亞乙基-6，1012，16-二橋亞甲基-22H-咪唑并[3，4-h][1，8，11，14]氧雜三氮雜環(huán)二十炔-9-腈，和(±)-19，20-二氫-3-甲基-19-氧代-5H-18，21-橋亞乙基-12，14-亞乙烯基-6，10-橋亞甲基-22H-苯并[d]咪唑并[4，3-k][1，6，9，12]氧雜三氮雜十八炔-9-腈。
異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑的其它例子可在下列公開和專利中找到WO 96/30343、WO 97/18813、WO 97/21701、WO 97/23478、WO 97/38665、WO 98/28980、WO 98/29119、WO 95/32987、美國專利5,420,245、美國專利5,523,430、美國專利5,532,359、美國專利5,510,510、美國專利5,589,485、美國專利5,602,098、歐洲專利公開0618221、歐洲專利公開0 675 112、歐洲專利公開0 604 181、歐洲專利公開0 696 593、WO 94/19357、WO 95/08542、WO 95/11917、WO 95/12612、WO 95/12572、WO 95/10514、美國專利5,661,152、WO 95/10515、WO95/10516、WO 95/24612、WO 95/34535、WO 95/25086、WO 96/05529、WO 96/06138、WO 96/06193、WO 96/16443、WO 96/21701、WO96/21456、WO 96/22278、WO 96/24611、WO 96/24612、WO 96/05168、WO 96/05169、WO 96/00736、美國專利5,571,792、WO 96/17861、WO96/33159、WO 96/34850、WO 96/34851、WO 96/30017、WO 96/30018、WO 96/30362、WO 96/30363、WO 96/31111、WO 96/31477、WO96/31478、WO 96/31501、WO 97/00252、WO 97/03047、WO 97/03050、WO 97/04785、WO 97/02920、WO 97/17070、WO 97/23478、WO97/26246、WO 97/30053、WO 97/44350、WO 98/02436、和美國專利5,532,359。
異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑對(duì)血管生成的作用的例子參見European J.of Cancer，Vol.35，No.9，pp.1394-1401(1999)。
“血管生成抑制劑”是指抑制新血管形成的化合物，無論機(jī)制如何。血管生成抑制劑的例子包括但不限于酪氨酸激酶抑制劑如酪氨酸激酶受體Flt-1抑制劑(VEGFR1)和Flk-1/KDR(VEGFR2)抑制劑，表皮衍生、成纖維細(xì)胞衍生或者血小板衍生生長因子的抑制劑、MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑、整聯(lián)蛋白阻斷劑、干擾素-α、白細(xì)胞介素-12、多硫酸戊聚糖(pentosan polysulfate)、環(huán)加氧酶抑制劑，包括非甾族抗炎藥(NSAIDs)如阿斯匹林和布洛芬以及選擇性環(huán)加氧酶-2抑制劑如塞來昔布和羅非昔布(PNAS，Vol.89，p.7384(1992)；JNCI，Vol.69，p.475(1982)；Arch.Opthalmol.，Vol.108，p.573(1990)；An at.Rec.，Vol.238，p.68(1994)；FEBS Letters，Vol.372，p.83(1995)；Clin，Orthop.Vol.313，p.76(1995)；J.Mol.Endocrinol.，Vol.16，p.107(1996)；Jpn.J.Pharmacol.，Vol.75，p.105(1997)；Cancer Res.，Vol.57，p.1625(1997)；Cell，Vol.93，p.705(1998)；Intl.J.Mol.Med.，Vol.2，p.715(1998)；J.Biol.Chem.，Vol.274，p.9116(1999))、甾族抗炎藥(如皮質(zhì)類固醇、鹽皮質(zhì)激素、地塞米松、強(qiáng)的松、氫化潑尼松、甲潑尼龍、倍他米松)、羧胺三唑(carboxyamidotriazole)、考布他汀A-4、角鯊胺、6-O-氯乙?；?羰基)-煙曲霉醇(fumagillol)、酞咪哌啶酮、血管抑素(angiostatin)、肌鈣蛋白-1、血管緊張素II拮抗劑(參見Fernandez et al.，J.Lab.Clin.Med.105141-145(1985))，和VEGF抗體(參見，Nature Biotechnology，Vol.17，pp.963-968(1999年10月)；Kim et al.，Nature，362，841-844(1993)；WO 00/44777；和WO 00/61186)。
其它調(diào)節(jié)或者抑制血管生成并可用于與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的治療劑包括調(diào)節(jié)或者抑制凝血和纖溶體系的藥物(參見Clin.Chem.La.Med.38679-692(2000)綜述)。這些調(diào)節(jié)或者抑制凝血和纖溶路徑的藥物的例子包括但不限于肝素(參見Thromb.Haemost.8010-23(1998))、低分子量肝素和羧基肽酶U抑制劑(又名活性凝血酶可活化纖溶抑制劑[TAFIa]的抑制劑)(參見Thrombosis Res.101329-354(2001))。TAFIa抑制劑已經(jīng)在PCT公開WO 03/013,526和美國申請(qǐng)60/349,925(提交日2002年1月18日)。
“干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物”是指抑制轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞周期關(guān)卡信號(hào)的蛋白激酶從而使癌細(xì)胞對(duì)DNA損害物質(zhì)增敏的化合物。這些藥物包括ATR、ATM、Chkl和Chk2激酶和cdk和cdc激酶的抑制劑，具體地通過7-羥基星形孢菌素、flavopiridol、CYC202(Cyclacel)和BMS-387032示例。
“細(xì)胞增殖和生存信號(hào)通道抑制劑”是指抑制細(xì)胞表面受體和那些表面受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)下游的藥物。這些藥物包括EGFR抑制劑(例如吉非替尼和erlotinib)、ERB-2抑制劑(例如曲妥珠單抗)、IGFR抑制劑、細(xì)胞因子受體抑制劑、MET抑制劑、PI3K抑制劑(例如LY294002)、絲氨酸/蘇氨酸激酶(包括然而并非限于Akt抑制劑如在WO 02/083064、WO 02/O83139、WO 02/083140和WO 02/083138中所述)、Raf激酶抑制劑(例如BAY-43-9006)、MEK抑制劑(例如CI-1040和PD-098059)和mTOR抑制劑(例如Wyeth CCI-779)。這些藥物包括小分子抑制劑化合物和抗體拮抗劑。
“細(xì)胞程序死亡誘導(dǎo)劑”包括TNF受體家族成員(包括TRAIL受體)的活化劑。
與非甾族抗炎藥的聯(lián)合使用是指使用作為有效的COX-2抑制劑的非甾族抗炎藥。為了這一目的，如果根據(jù)細(xì)胞或微粒體試驗(yàn)測(cè)量的非甾族抗炎藥用于抑制COX-2的IC50是1μM或更低，則非甾族抗炎藥是有效的。
本發(fā)明還包括與作為選擇性COX-2抑制劑的非甾族抗炎藥聯(lián)合使用。為了這一目的，作為選擇性COX-2抑制劑的非甾族抗炎藥規(guī)定為是那些通過細(xì)胞或者微粒體試驗(yàn)測(cè)定的、由COX-2的IC50與COX-1的IC50之比測(cè)出COX-2/COX-1抑制特異性為至少100倍的非甾族抗炎藥。這些化合物包括但不限于在以下文獻(xiàn)中公開的美國專利5,474,995，授權(quán)日1995年12月12日；美國專利5,861,419，授權(quán)日1999年1月19日；美國專利6,001,843，授權(quán)日1999年12月14日；美國專利6,020,343，授權(quán)日2000年2月1日；美國專利5,409,944，授權(quán)日1995年4月25日；美國專利5,436,265，授權(quán)日1995年7月25日；美國專利5,536,752，授權(quán)日1996年7月16日；美國專利5,550,142，授權(quán)日1996年8月27日；美國專利5,604,260，授權(quán)日1997年2月18日；美國專利5,698,584，授權(quán)日1997年12月16；美國專利5,710,140，授權(quán)日1998年1月20日；WO 94/15932，
公開日1994年7月21日；美國專利5,344,991，授權(quán)日1994年6月6日；美國專利5,134,142，授權(quán)日1992年7月28日；美國專利5,380,738，授權(quán)日1995年1月10日；美國專利5,393,790，授權(quán)日1995年2月20；美國專利5,466,823，授權(quán)日1995年11月14日；美國專利5,633,272，授權(quán)1997年5月27日；和美國專利5,932,598，授權(quán)日1999年8月3日，所有文獻(xiàn)作為參考被并入本文。
可用于本發(fā)明治療方法的COX-2抑制劑為3-苯基-4-(4-(甲基磺?；?苯基)-2-(5H)-呋喃酮；和 5-氯-3-(4-甲基磺?；?苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶；
或其可藥用鹽。
制備COX-2抑制劑化合物的一般和具體合成方法在以下文獻(xiàn)中有述美國專利5,474,995，授權(quán)日1995年12月12日；美國專利5,861,419，授權(quán)日1999年1月19日；和美國專利6,001,843，授權(quán)日1999年12月14日，所有文獻(xiàn)作為參考并入本文。
已描述作為COX-2特異性抑制劑并因此可用于本發(fā)明中的化合物包括但不限于以下化合物 或其可藥用鹽。
描述作為COX-2特異性抑制劑并因此可用于本發(fā)明中的化合物及其合成方法在以下的專利、待審申請(qǐng)和公開物中有述，所有文獻(xiàn)作為參考并入本文WO 94/15932，
公開日1994年7月21日；美國專利5,344,991，授權(quán)日1994年6月6日；美國專利5,134,142，授權(quán)日1992年7月28日；美國專利5,380,738，授權(quán)日1995年1月10日；美國專利5,393,790，授權(quán)日1995年2月20日；美國專利5,466,823，授權(quán)日1995年11月14日；美國專利5,633,272，授權(quán)日1997年5月27日，和美國專利5,932,598，授權(quán)日1999年8月3日。
作為COX-2特異性抑制劑并因此可用于本發(fā)明中的化合物及其合成方法在以下的專利、待審申請(qǐng)和公開物中有述，所有文獻(xiàn)作為參考并入本文美國專利5,474,995，授權(quán)日1995年12月12日；美國專利5,861,419，授權(quán)日1999年1月19日；美國專利6,001,843，授權(quán)日1999年12月14日；美國專利6,020,343，授權(quán)日2000年2月1日；美國專利5,409,944，授權(quán)日1995年4月25日；美國專利5,436,265，授權(quán)日1995年7月25日；美國專利5,536,752，授權(quán)日1996年7月16日；美國專利5,550,142，授權(quán)日1996年8月27日；美國專利5,604,260，授權(quán)日1997年2月18日，美國專利5,698,584，授權(quán)日1997年12月16日，和美國專利5,710,140，授權(quán)日1998年1月20日。
血管生成抑制劑的其它例子包括但不限于血管內(nèi)皮抑素(endostatin)、ukrain、ranpirnase、IM862、5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)氧雜環(huán)丙基]-1-氧雜螺[2，5]辛-6-基(氯乙?；?氨基甲酸酯、acetyldinanaline、5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲?；?苯基]甲基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺、CM101、角鯊胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸化磷酸甘露戊糖、7，7-(羰基-二[亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯并羰基亞氨基[N-甲基-4，2-吡咯]-羰基亞氨基]-二-(1，3-萘二磺酸酯)和3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亞甲基]-2-吲哚滿酮(SU5416)。
如上所述，“整聯(lián)蛋白阻斷劑”是指選擇性地拮抗、抑制或?qū)股砼潴w與αvβ3整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物，是指選擇性地拮抗、抑制或?qū)股砼潴w與αvβ5整聯(lián)蛋白的結(jié)合的化合物，是指拮抗、抑制或?qū)股砼潴w與αvβ3和αvβ5整聯(lián)蛋白二者的結(jié)合的化合物，是指拮抗、抑制或?qū)乖诿?xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)的特定整聯(lián)蛋白的活性的化合物。該術(shù)語還指αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的拮抗劑。該術(shù)語還指αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的任意組合的拮抗劑。
酪氨酸激酶抑制劑的特定例子包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基異噁唑-4-甲酰胺，3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)甲叉基(methylidenyl))吲哚滿-2-酮，17-(烯丙基氨基)-17-脫甲氧基geldanamycin，4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-[3-(4-嗎啉基)丙氧基]喹唑啉，N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺，BIBX1382、2，3，9，10，11，12-六氫-10-(羥基甲基)-10-羥基-9-甲基-9，12-環(huán)氧基-1H-二吲哚并[1，2，3-fg3′，2′，1′-kl]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二氮芳辛-1-酮，SH268，genistein，STI571，CEP2563，4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶甲磺酸酯，4-(3-溴-4-羥基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉，4-(4′-羥基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉，SU6668，STI571A，N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-phthalazinamine，和EMD121974。
與除了抗癌化合物之外的化合物的聯(lián)合還包括在本發(fā)明方法中。例如，本發(fā)明所要求保護(hù)的化合物與PPAR-γ(即PPAR-gamma)激動(dòng)劑和PPAR-δ(即PPAR-delta)激動(dòng)劑的聯(lián)合，可用在某些惡性病的治療中。PPAR-γ和PPAR-δ是核過氧化物酶體增生物激活受體γ和δ。PPAR-γ在內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)及其與血管生成的關(guān)系已經(jīng)在文獻(xiàn)(參見J.Cardiovasc.Pharmacol.1998；31909-913；J.Biol.Chem.1999；2749116-9121；Invest.Ophthalmol Vis.Sci.2000；412309-2317)中報(bào)導(dǎo)。新近，已顯示PPAR-γ激動(dòng)劑體外抑制對(duì)VEGF的生血管應(yīng)答；曲格列酮和馬來酸羅格列酮抑制小鼠中視網(wǎng)膜新血管生成的發(fā)展(Arch.Ophthamol.2001；119709-717)。PPAR-γ激動(dòng)劑和PPAR-γ/α激動(dòng)劑包括但不限于噻唑烷二酮(如DRF2725，CS-011，曲格列酮，羅格列酮，和吡格列酮)，非諾貝特，吉非羅齊，氯貝丁酯，GW2570，SB219994，AR-H039242，JTT-501，MCC-555，GW2331，GW409544，NN2344，KRP297，NP0110，DRF4158，NN622，GI262570，PNU182716，DRF552926，2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(在USSN 09/782,856中公開)，和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基色滿-2-羧酸(在USSN 60/235,708和60/944,697中公開)。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是本發(fā)明公開的化合物與基因治療的聯(lián)合在癌癥治療中的應(yīng)用。對(duì)于治療癌癥的基因策略的綜述參見Hall等人的(Am J Hum Genet 61785-789，1997)和Kufe等人的(Cancer Medicine，5th Ed，pp 876-889，BC Decker，Hamilton 2000)?；蛑委熆捎糜谶f送任何腫瘤抑制基因。這些基因的例子包括但不限于p53，其可通過重組病毒調(diào)解的基因轉(zhuǎn)移進(jìn)行遞送(參見例如美國專利6,069,134)，uPA/uPAR拮抗劑(″Adenovirus-Mediated Delivery of a uPA/uPARAntagonist Suppresses Angiogenesis-Dependent Tumor Growth和Dissemination in Mice，″Gene Therapy，1998年8月；5(8)1105-13)，和干擾素γ(J Immunol 2000；164217-222)。
本發(fā)明的化合物也可與固有多藥耐藥性(MDR)抑制劑聯(lián)合給藥，特別是與轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白高水平表達(dá)有關(guān)的MDR的抑制劑聯(lián)合。這些MDR抑制劑包括p-糖蛋白(P-gp)抑制劑，如LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、VX853和PSC833(valspodar)。
本發(fā)明的化合物可與抗吐劑聯(lián)合使用，用于治療惡心或嘔吐，包括急性的、遲發(fā)的、晚期的和預(yù)期的嘔吐，其可起因于本發(fā)明化合物的使用，其中本發(fā)明的化合物單獨(dú)使用或與放射治療聯(lián)合使用。為了預(yù)防或者治療嘔吐，本發(fā)明的化合物可與其它抗吐劑特別是神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑、5HT3受體拮抗劑如昂丹司瓊、格拉司瓊、托吡司瓊和扎替司瓊、GABAB受體激動(dòng)劑如氯苯氨丁酸、皮質(zhì)類固醇如Decadron(地塞米松)、康寧樂、Aristocort、鼻松、Preferid、Benecorten或者例如在以下文獻(xiàn)中公開的其它藥物美國專利2,789,118，2,990,401，3,048,581，3,126,375，3,929,768，3,996,359，3,928,326和3,749,712、抗多巴胺能藥如吩噻嗪(例如丙氯拉嗪、氟奮乃靜、硫利達(dá)嗪和甲砜達(dá)嗪)、甲氧氯普胺或者屈大麻酚聯(lián)合使用。為了治療或者預(yù)防給用本發(fā)明化合物時(shí)發(fā)生的嘔吐，與選自神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑、5HT3受體拮抗劑和皮質(zhì)類固醇的抗吐劑聯(lián)合的治療是優(yōu)選的。
與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑在例如以下文獻(xiàn)中充分地描述美國專利5,162,339，5,232,929，5,242,930，5,373,003，5,387,595，5,459,270，5,494,926，5,496,833，5,637,699，5,719,147；歐洲專利EP 0 360 390，0 394 989，0 428 434，0 429 366，0 430 771，0 436 334，0 443 132，0 482 539，0 498 069，0 499 313，0 512901，0 512 902，0 514 273，0 514 274，0 514 275，0 514 276，0 515 681，0 517 589，0 520 555，0 522 808，0 528 495，0 532 456，0 533 280，0 536817，0 545 478，0 558 156，0 577 394，0 585 913，0 590 152，0 599 538，0 610 793，0 634 402，0 686 629，0 693 489，0 694 535，0 699 655，0 699674，0 707 006，0 708 101，0 709 375，0 709 376，0 714 891，0 723 959，0 733 632和0 776 893；PCT國際專利公開WO 90/05525，90/05729，91/09844，91/18899，92/01688，92/06079，92/12151，92/15585，92/17449，92/20661，92/20676，92/21677，92/22569，93/00330，93/00331，93/01159，93/01165，93/01169，93/01170，93/06099，93/09116，93/10073，93/14084，93/14113，93/18023，93/19064，93/21155，93/21181，93/23380，93/24465，94/00440，94/01402，94/02461，94/02595，94/03429，94/03445，94/04494，94/04496，94/05625，94/07843，94/08997，94/10165，94/10167，94/10168，94/10170，94/11368，94/13639，94/13663，94/14767，94/15903，94/19320，94/19323，94/20500，94/26735，94/26740，94/29309，95/02595，95/04040，95/04042，95/06645，95/07886，95/07908，95/08549，95/11880，95/14017，95/15311，95/16679，95/17382，95/18124，95/18129，95/19344，95/20575，95/21819，95/22525，95/23798，95/26338，95/28418，95/30674，95/30687，95/33744，96/05181，96/05193，96/05203，96/06094，96/07649，96/10562，96/16939，96/18643，96/20197，96/21661，96/29304，96/29317，96/29326，96/29328，96/31214，96/32385，96/37489，97/01553，97/01554，97/03066，97/08144，97/14671，97/17362，97/18206，97/19084，97/19942和97/21702；和英國專利公開2 266 529，2 268 931，2269 170，2 269 590，2 271 774，2 292 144，2 293 168，2 293 169，和2302 689。這些化合物的制備在上述專利和公開中有充分描述，所述文獻(xiàn)作為參考并入本文。
在一實(shí)施方案中，用于與本發(fā)明化合物聯(lián)合使用的神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑選自2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑并)甲基)嗎啉或其可藥用鹽，其在美國專利5,719,147中有述。
本發(fā)明的化合物也可與用于治療貧血的藥物給用。這些貧血治療劑為例如連續(xù)紅細(xì)胞受體活化劑(如阿法依泊汀)。
本發(fā)明的化合物也可與用于治療嗜中性白細(xì)胞減少癥的藥物給用。這些嗜中性白細(xì)胞減少癥治療劑為例如調(diào)節(jié)嗜中性白細(xì)胞的產(chǎn)生和功能的造血生長因子如人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)。G-CSF的例子包括非格司亭。
本發(fā)明的化合物也可與免疫增強(qiáng)藥如左旋四咪唑、異丙肌苷和日達(dá)仙給用。
因此，本發(fā)明的范圍包括本發(fā)明所要求保護(hù)的化合物與選自以下的第二化合物的聯(lián)合使用1)雌激素受體調(diào)節(jié)劑，2)雄激素受體調(diào)節(jié)劑，3)類視色素受體調(diào)節(jié)劑，4)胞毒/細(xì)胞生長抑制劑，5)抗增殖藥，6)異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，10)血管生成抑制劑，11)PPAR-γ激動(dòng)劑，12)PPAR-δ激動(dòng)劑，13)固有多藥耐藥性抑制劑，14)抗吐劑，15)用于治療貧血的藥物，16)用于治療嗜中性白細(xì)胞減少癥的藥物，17)免疫增強(qiáng)藥，18)細(xì)胞增殖和生存信號(hào)抑制劑，19)干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物，和20)細(xì)胞程序死亡誘導(dǎo)劑。
關(guān)于本發(fā)明化合物的術(shù)語“給用”及其變體(如“給用”化合物)是指將化合物或者該化合物的潛藥引入到需要治療的動(dòng)物的系統(tǒng)內(nèi)。當(dāng)本發(fā)明的化合物或其潛藥與一種或多種其它活性劑(如胞毒劑等等)聯(lián)合提供時(shí)，“給用”及其變體各自可理解為包括所述化合物或其潛藥及其他藥物的同時(shí)的和連續(xù)的給予。
本文使用的術(shù)語“組合物”包括含特定量的特定成分的產(chǎn)品、以及直接地或者間接地得自特定量的特定成分的組合的任何產(chǎn)品。
本文使用的術(shù)語“治療有效量”是指在組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或者人中引起生物學(xué)或者醫(yī)學(xué)應(yīng)答的活性物質(zhì)或者藥物的量，該量通過研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)生或者其它臨床醫(yī)師確定。
術(shù)語“治療癌癥”或者“癌癥的治療”是指對(duì)遭受癌病況折磨的哺乳動(dòng)物給藥以及是指通過殺死癌細(xì)胞減輕癌病況的作用，還指導(dǎo)致癌癥生長和/或轉(zhuǎn)移抑制的作用。
在一實(shí)施方案中，用作第二化合物的血管生成抑制劑選自酪氨酸激酶抑制劑、表皮衍生生長因子抑制劑、成纖維細(xì)胞衍生生長因子的抑制劑、血小板衍生生長因子的抑制劑、MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑、整聯(lián)蛋白阻斷劑、干擾素-α、白細(xì)胞介素-12、多硫酸戊聚糖、環(huán)加氧酶抑制劑、羧胺三唑、考布他汀A-4、角鯊胺、6-O-(氯乙?；?羰基)-煙曲霉醇、酞咪哌啶酮、血管抑素、肌鈣蛋白-1或者VEGF抗體。在一實(shí)施方案中，雌激素受體調(diào)節(jié)劑是他莫昔芬或者雷洛昔芬。
權(quán)利要求的保護(hù)范圍還包括治療癌癥的方法，包括聯(lián)合給用治療有效量的式I的化合物與放射治療和/或與選自以下的化合物1)雌激素受體調(diào)節(jié)劑，2)雄激素受體調(diào)節(jié)劑，3)類視色素受體調(diào)節(jié)劑，4)胞毒/細(xì)胞生長抑制劑，5)抗增殖藥，6)異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，10)血管生成抑制劑，11)PPAR-α激動(dòng)劑，12)PPAR-δ激動(dòng)劑，13)固有多藥耐藥性抑制劑，14)抗吐劑，15)用于治療貧血的藥物，16)用于治療嗜中性白細(xì)胞減少癥的藥物，17)免疫增強(qiáng)藥，18)細(xì)胞增殖和生存信號(hào)抑制劑，19)干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物，和20)細(xì)胞程序死亡誘導(dǎo)劑。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是治療癌癥的方法，該方法包括聯(lián)合給藥治療有效量的式I的化合物與紫杉醇或者曲妥珠單抗。
本發(fā)明另外包括治療或者預(yù)防癌癥的方法，該方法包括聯(lián)合給用治療有效量的式I化合物與COX-2抑制劑。
本發(fā)明還包括可用于治療或者預(yù)防癌癥的藥物組合物，包括治療有效量的式I化合物和選自以下的化合物1)雌激素受體調(diào)節(jié)劑，2)雄激素受體調(diào)節(jié)劑，3)類視色素受體調(diào)節(jié)劑，4)胞毒/細(xì)胞生長抑制劑，5)抗增殖藥，6)異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，10)血管生成抑制劑，11)PPAR-γ激動(dòng)劑，12)PPAR-δ激動(dòng)劑，13)細(xì)胞增殖和生存信號(hào)抑制劑，14)干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物，和15)細(xì)胞程序死亡誘導(dǎo)劑。
本發(fā)明另外包括本發(fā)明的化合物在篩選與KSP結(jié)合的其它化合物的方法中的應(yīng)用。為了在篩選與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合的化合物的方法中使用本發(fā)明的化合物，使KSP與載體結(jié)合，并將本發(fā)明的化合物(其作為有絲分裂藥物)添加到試驗(yàn)中?；蛘?，使本發(fā)明的化合物與載體結(jié)合并加入KSP。在其中尋找新型結(jié)合劑的化合物類型包括特異性抗體、在化學(xué)庫篩選中被識(shí)別的非天然結(jié)合劑、肽類似物等等。特別感興趣的是候選藥物的篩選試驗(yàn)，所述候選藥物對(duì)人細(xì)胞具有低毒性。各式各樣的試驗(yàn)可用于此目的，包括標(biāo)記的體外蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)結(jié)合測(cè)定法、電泳遷移變動(dòng)分析、蛋白質(zhì)結(jié)合免疫測(cè)定、官能試驗(yàn)(磷酸化作用試驗(yàn)等等)等等。
有絲分裂藥物與KSP的結(jié)合的測(cè)定可以多種方式進(jìn)行。在優(yōu)選方案中，有絲分裂藥物(本發(fā)明的化合物)被標(biāo)記，例如，用熒光部分或者放射性部分標(biāo)記并直接測(cè)定結(jié)合。例如，這可通過將所有或者一部分KSP附著到固相載體上，加入被標(biāo)記的有絲分裂藥物(例如本發(fā)明的化合物，其中至少一個(gè)原子被可檢測(cè)的同位素替代)，洗去過量試劑，和測(cè)定存在在固體載體上的那些標(biāo)記物的量而完成?？墒褂帽绢I(lǐng)域已知的各種封閉和洗滌步驟。
本文中的“被標(biāo)記”是指化合物被直接地或者間接地用提供可檢測(cè)信號(hào)的標(biāo)記物進(jìn)行標(biāo)記，所述標(biāo)記物為例如放射性同位素、熒光標(biāo)記、酶、抗體、粒子如磁粒子、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、或者特異性結(jié)合分子等等。特異性結(jié)合分子包括配對(duì)體如生物素和抗生蛋白鏈菌素、地高辛和地高辛抗體等等。對(duì)于特異性結(jié)合成員，互補(bǔ)的成員將通常根據(jù)已知的過程如上述過程用為探測(cè)做準(zhǔn)備的分子進(jìn)行標(biāo)記。標(biāo)記物可以直接地或者間接地提供可檢測(cè)信號(hào)。
在一些實(shí)施方案中，只有一種組分被標(biāo)記。例如，驅(qū)動(dòng)蛋白可在酪氨酸位置使用125I進(jìn)行標(biāo)記，或用熒光團(tuán)進(jìn)行標(biāo)記?；蛘?，超過一種的組分可被不同的標(biāo)記物做標(biāo)記；例如使用125I用于所述蛋白，使用熒光團(tuán)用于有絲分裂藥物。
本發(fā)明的化合物還可用作競(jìng)爭(zhēng)劑用于篩選另外的候選藥物。“候選生物活性藥物”或者“候選藥物”或者本文所用語法上等價(jià)的詞是指任何要測(cè)試它們的生物活性的分子，如蛋白質(zhì)、低聚肽、有機(jī)小分子、聚糖、多核苷酸等等。它們能夠直接地或者間接地改變細(xì)胞增殖表型或者細(xì)胞增殖序列的表達(dá)，包括核酸序列和蛋白質(zhì)序列。在其它情況下，篩選細(xì)胞增殖蛋白質(zhì)結(jié)合和/或活性的改變。這類篩選可在微管存在或不存在的條件下進(jìn)行。在篩選蛋白質(zhì)結(jié)合或者活性的情況中，優(yōu)選方案排除了已知與特定蛋白例如聚合體結(jié)構(gòu)如微管和能量源如ATP結(jié)合的分子。本文試驗(yàn)的優(yōu)選方案包括在其內(nèi)源性未加修飾狀態(tài)下不與細(xì)胞增殖蛋白質(zhì)結(jié)合的候選藥物，本文中稱為“外源性”藥物。在另一個(gè)優(yōu)選方案中，外源性藥物另外排除了KSP的抗體。
候選藥物可以包括許多化學(xué)種類，盡管通常它們是有機(jī)分子，優(yōu)選是分子量超過100并小于約2,500道爾頓的小的有機(jī)化合物。候選藥物包含與蛋白進(jìn)行結(jié)構(gòu)相互作用時(shí)所需的官能團(tuán)，特別是氫鍵和親脂性結(jié)合時(shí)，并且通常至少包括胺、羰基、羥基、醚或者羧基，優(yōu)選包括至少兩個(gè)所述化學(xué)官能團(tuán)。候選藥物經(jīng)常包含環(huán)碳或者雜環(huán)結(jié)構(gòu)和/或芳香的或者多芳香結(jié)構(gòu)，其是被一個(gè)或多個(gè)上述官能團(tuán)取代的。候選藥物還可在生物分子中找到，所述生物分子包括肽、糖類、脂肪酸、甾族、嘌呤類、嘧啶類，其衍生物、結(jié)構(gòu)類似物或者組合。特別優(yōu)選肽。
候選藥物從各式各樣的包括合成或天然化合物庫的來源中獲得。例如，許多途徑可用于隨機(jī)和定向合成各式各樣的有機(jī)化合物和生物分子，包括隨機(jī)化寡核苷酸的表達(dá)?；蛘?，可獲得或容易地生產(chǎn)細(xì)菌、真菌、植物和動(dòng)物提取物形式的天然化合物庫。另外，天然的或者合成的庫和化合物容易地通過常規(guī)的化學(xué)、物理和生物化學(xué)方法進(jìn)行修飾?？墒挂阎幚韺W(xué)試劑經(jīng)歷定向或隨機(jī)的化學(xué)修飾，如?；⑼榛?、酯化、酰胺化，以制造結(jié)構(gòu)類似物。
競(jìng)爭(zhēng)性篩選試驗(yàn)可通過將KSP和第一試樣中的候選藥物結(jié)合進(jìn)行。第二試樣包括有絲分裂藥物、KSP和候選藥物。這可在微管存在或不存在的條件下進(jìn)行。候選藥物結(jié)合的確定根據(jù)兩種試樣進(jìn)行，兩種試樣之間的變化或者結(jié)合差異表明存在能夠與KSP結(jié)合并潛在地調(diào)節(jié)其活性的藥物。也就是說，如果候選藥物與第一試樣的結(jié)合不同于與第二試樣的結(jié)合，候選藥物能夠與KSP結(jié)合。
在優(yōu)選方案中，候選藥物的結(jié)合的確定通過使用競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合試驗(yàn)進(jìn)行。在該實(shí)施方案中，競(jìng)爭(zhēng)劑是已知與KSP結(jié)合的一結(jié)合部分，如抗體、肽、結(jié)合配偶體、配體等等。在某種情況下，可在候選藥物和結(jié)合部分之間存在競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，結(jié)合部分取代候選藥物。
在一實(shí)施方案中，候選藥物被標(biāo)記。候選藥物、或者競(jìng)爭(zhēng)劑、或者兩者首先被加入到KSP中，保持足夠進(jìn)行結(jié)合的時(shí)間，如果存在的話?？稍谌魏斡欣谧罴鸦钚缘臏囟认逻M(jìn)行培養(yǎng)，通常為約4到約40℃。
培養(yǎng)周期根據(jù)最優(yōu)活性選擇，但是還可被最優(yōu)化以促進(jìn)快速高通量篩選。通常0.1到1小時(shí)就足夠了。通常除去或者沖走過量試劑。然后加入第二組分，追蹤被標(biāo)記組分的存在或不存在，以表明結(jié)合。
在優(yōu)選方案中，首先加入競(jìng)爭(zhēng)劑，然后加入候選藥物。競(jìng)爭(zhēng)劑的替代表明候選藥物與KSP結(jié)合并且因此能夠與KSP結(jié)合并潛在地調(diào)節(jié)KSP的活性。在該實(shí)施方案中，任一組分可被標(biāo)記。因此，例如，如果競(jìng)爭(zhēng)劑被標(biāo)記，洗滌液中標(biāo)記物的存在表明藥物被替代?；蛘?，如果候選藥物被標(biāo)記，則載體上標(biāo)記物的存在表明替代。
在另一實(shí)施方案中，首先加入候選藥物，培養(yǎng)并洗滌，然后加入競(jìng)爭(zhēng)劑。競(jìng)爭(zhēng)劑結(jié)合的缺乏可表明候選藥物以較高的親合力與KSP結(jié)合。因此，如果候選藥物被標(biāo)記，則載體上標(biāo)記物的存在以及競(jìng)爭(zhēng)劑結(jié)合的缺乏一起表明候選藥物能夠與KSP結(jié)合。
識(shí)別KSP結(jié)合部位很有意義。這可通過各種方式進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方案中，一旦已經(jīng)確認(rèn)KSP與有絲分裂藥物結(jié)合，則將KSP打碎或?qū)ζ溥M(jìn)行修飾，并重復(fù)試驗(yàn)以識(shí)別結(jié)合必需的組件。
通過篩選能夠調(diào)節(jié)KSP活性的候選藥物的試驗(yàn)檢查調(diào)節(jié)，包括上述候選藥物與KSP結(jié)合的步驟，并確定KSP生物活性的改變。在該實(shí)施方案中，候選藥物將與KSP結(jié)合(雖然這不是必要的)，并如本文定義的那樣改變其生物學(xué)活性或者生化活性。該方法包括體外細(xì)胞篩選法和體內(nèi)細(xì)胞篩選法，針對(duì)細(xì)胞周期分布、細(xì)胞存活性的改變或者針對(duì)有絲分裂紡錘體的存在、形態(tài)學(xué)、活性、分布或者量，所述各變量通常如上所述。
或者，可使用示差篩選來識(shí)別與未加修飾的KSP結(jié)合但是不能與經(jīng)過修飾的KSP結(jié)合的候選藥物。
可在試驗(yàn)中使用陽性對(duì)照和陰性對(duì)照。優(yōu)選所有的對(duì)照和實(shí)驗(yàn)試樣至少重復(fù)三份，以獲得統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著意義的結(jié)果。對(duì)所有試樣培養(yǎng)足夠用于藥物與蛋白質(zhì)結(jié)合的時(shí)間。培養(yǎng)后，洗滌所有試樣，使其不含非特異性結(jié)合的材料，并測(cè)定結(jié)合的、通常被標(biāo)記的藥物的量。例如，當(dāng)使用放射性同位素示蹤時(shí)，可在閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)試樣，以確定結(jié)合的化合物的量。
可在篩選試驗(yàn)中引入各種其它試劑。這些試劑包括如鹽、中性蛋白如白蛋白、洗滌劑等等，其可用于促進(jìn)最佳的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)結(jié)合和/或減少非特異性的或背景的相互作用。另外，可使用另外改善試驗(yàn)效率的試劑，如蛋白酶抑制劑、核酸酶抑制劑、抗微生物藥物等。組分的混合物可以任何提供所需結(jié)合的順序加入。
本發(fā)明的這些及其它方面從本文中的教導(dǎo)是顯而易見的。
試驗(yàn)在實(shí)施例中描述的本發(fā)明的化合物通過如下所述的試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)并發(fā)現(xiàn)具有激酶抑制活性。其它試驗(yàn)在文獻(xiàn)中已知并且可由本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易地操作(參見，例如PCT公開WO 01/30768，2001年5月3日，18-22頁)。
I.驅(qū)動(dòng)蛋白ATP酶體外試驗(yàn)人多組氨酸標(biāo)記的KSP運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域(KSP(367H))的克隆和表達(dá)用于表達(dá)人KSP運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域構(gòu)建體的質(zhì)粒通過使用pBluescript全長人KSP構(gòu)建體(Blangy等人，Cell，83卷，pp1159-1169，1995)作為模板的PCR進(jìn)行克隆。N末端引物5′-GCAACGATTAATATGGCGTCGCAGCCAAATTCGTCTGCGAAG(SEQ.ID.NO.1)和C末端引物5′-GCAACGCTCGAGTCAGTGATGATGGTGGTGATGCTGATTCACTTCAGGCTTATTCAATAT(SEQ.ID.NO.2)用來擴(kuò)增運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域和頸連接體區(qū)。PCR產(chǎn)物用AseI和XhoI消化，連接到pRSETa(Invitrogen)的NdeI/XhoI消化產(chǎn)品中并轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)中。
細(xì)胞在37℃下生長到OD600為0.5。培養(yǎng)物冷卻到室溫后，用100μMIPTG誘導(dǎo)KSP表達(dá)，并繼續(xù)培養(yǎng)過夜。細(xì)胞通過離心作用成為小球并用冰冷卻的PBS洗滌一次。小球進(jìn)行快速冷凍并在-80℃下貯存。
蛋白純化將細(xì)胞小球在冰上解凍，并再懸浮在裂解緩沖液(50mM K-HEPES，pH 8.0，250mM KCl，0.1％Tween，10mM咪唑，0.5mM Mg-ATP，1mMPMSf，2mM benzimidine，1x全蛋白酶抑制劑混合物(Roche))中。細(xì)胞懸浮液在冰上用1mg/ml溶菌酶和5mMβ-巰基乙醇培養(yǎng)10分鐘，然后超聲處理(3×30秒)，隨后所有的過程在4℃下進(jìn)行。裂解產(chǎn)物以40,000xg離心40分鐘，上清液稀釋并裝載在處于緩沖液A(50mM K-HEPES，pH6.8，1mM MgCl2，1mM EGTA，10μM Mg-ATP，1mM DTT)中的SP瓊脂糖凝膠柱上(Phaumacia，5ml柱體)，用0到750mM在緩沖液A中的KCl梯度洗脫。收集含有KSP的級(jí)分并用Ni-NTA樹脂(Qiagen)培養(yǎng)1小時(shí)，樹脂用緩沖液B(裂解緩沖液減去PMSF和蛋白酶抑制劑混合物)洗滌三次，然后進(jìn)行3次的15分鐘培養(yǎng)，并用緩沖液B洗滌。最后，培養(yǎng)樹脂并用緩沖液C(和緩沖液B一樣，除了pH為6.0)洗滌3次15分鐘，并傾倒柱中。KSP用洗脫緩沖液(與緩沖液B相同，除了使用150mM KCl和250mM咪唑)洗脫。收集含有KSP的級(jí)分，制成10％的蔗糖中溶液，并在-80℃貯存。
從由牛腦中分離的微管蛋白制備微管。1mg/ml的純化的微管蛋白(＞97％不含MAP)在37℃在10μM紫杉醇、1mM DTT、1mM GTP在BRB8O緩沖液(80mM K-PIPES，1mM EGTA，1mM MgCl2，pH6.8)中的溶液的存在下聚合。通過超速離心法和除去上清液從未聚合的微管蛋白中分離得到微管。含有微管的小球逐漸地再懸浮在10μM紫杉醇、1mM DTT、50μg/ml氨芐青霉素、和5μg/ml的氯霉素在BRB8O中的溶液中。
驅(qū)動(dòng)蛋白運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域用微管、1mM ATP(1∶1MgCl2∶Na-ATP)、和化合物在23℃下，在含有80mM K-HEPES(pH7.0)、1mM EGTA、1mMDTT、1mM MgCl2和50mM KCl的緩沖液中培養(yǎng)。反應(yīng)通過用最終的緩沖液組合物2-10倍稀釋而終止，緩沖液組合物為80mM HEPES和50mM EDTA。通過甲基氮萘紅/鉬酸銨試驗(yàn)測(cè)量得自ATP水解反應(yīng)的游離磷酸鹽，所述試驗(yàn)加入150μl淬滅劑C緩沖液，其含有2∶1比率的淬滅劑A淬滅劑B。淬滅劑A含有0.1mg/ml的甲基氮萘紅和0.14％的聚乙烯醇；淬滅劑B含有12.3mM鉬酸銨四水合物在1.15M硫酸中的溶液。反應(yīng)在23℃培養(yǎng)10分鐘，在540nm測(cè)量磷酸根合-鉬酸鹽絡(luò)合物的吸光率。
可在以上試驗(yàn)中檢測(cè)本發(fā)明的化合物并測(cè)量其IC50。
II.細(xì)胞增殖試驗(yàn)將細(xì)胞裝板在96孔組織培養(yǎng)皿中，裝板密度使得在24、48和72小時(shí)期間可進(jìn)行對(duì)數(shù)生長，并使之過夜附著。隨后的一天，以10點(diǎn)二分之一對(duì)數(shù)滴定法將化合物加入到所有板中。各滴定系列進(jìn)行一式三份，在整個(gè)試驗(yàn)過程中保持0.1％的恒定的DMSO濃度。還包括了單獨(dú)的0.1％DMSO作為對(duì)照。各化合物稀釋系列在沒有血清的培養(yǎng)基中制備。本試驗(yàn)中血清的最后濃度為在200μL體積培養(yǎng)基中為5％。加入藥物后，在24、48或者72小時(shí)向滴定板上的各試樣和對(duì)照孔中加入二十微升Alamar藍(lán)染色劑，并返回到37℃進(jìn)行培養(yǎng)。在CytoFluor II讀板器上使用530-560毫微米激發(fā)波長、590毫微米發(fā)射波長分析6-12小時(shí)后的Alamar藍(lán)色熒光。
通過以X軸上的化合物濃度與Y軸上的各滴定點(diǎn)的細(xì)胞生長平均抑制百分?jǐn)?shù)繪圖，得到細(xì)胞毒性EC50。在該試驗(yàn)中，已經(jīng)用單獨(dú)介質(zhì)處理的對(duì)照孔中的細(xì)胞生長定義為100％生長，用化合物處理的細(xì)胞的生長與該值相對(duì)比。專有自設(shè)軟件使用對(duì)數(shù)4-參數(shù)曲線擬合用來計(jì)算細(xì)胞毒性百分?jǐn)?shù)的數(shù)值和拐點(diǎn)。細(xì)胞毒性百分?jǐn)?shù)定義為細(xì)胞毒性％(熒光對(duì)照)-(熒光試樣)×100×(熒光對(duì)照)-1拐點(diǎn)為細(xì)胞毒性EC50。
III.通過FACS評(píng)價(jià)有絲分裂停滯和細(xì)胞程序死亡FACS分析用來評(píng)價(jià)化合物抑制細(xì)胞的有絲分裂和誘導(dǎo)細(xì)胞程序死亡的能力，通過測(cè)量處理的細(xì)胞群中的DNA含量進(jìn)行。細(xì)胞以每6cm2組織培養(yǎng)皿1.4×106個(gè)細(xì)胞的密度接種，并使之過夜附著。然后細(xì)胞用介質(zhì)(0.1％DMSO)處理或者用化合物滴定系列處理8-16小時(shí)。處理后，細(xì)胞在給定時(shí)間通過胰蛋白酶消化收獲，通過離心作用形成小球。細(xì)胞小球在PBS中漂清并用70％乙醇固定，在4℃貯存過夜或更長時(shí)間。
對(duì)于FACS分析，使至少500,000個(gè)固定細(xì)胞形成小球并通過吸出除去70％乙醇，然后細(xì)胞在4℃用核糖核酸酶A(50Kunitz單位/ml)和碘化丙啶(50μg/ml)培養(yǎng)30分鐘，使用Becton Dickinson FACSCaliber分析。使用Modfit細(xì)胞周期分析模型軟件(Verity Inc.)分析(得自10,000個(gè)細(xì)胞的)數(shù)據(jù)。
以X軸上化合物濃度與Y軸上每個(gè)滴定點(diǎn)的細(xì)胞周期G2/M期中的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(通過碘化丙啶熒光測(cè)量)繪圖，得到有絲分裂停滯的EC50。使用SigmaPlot程序，使用對(duì)數(shù)4-參數(shù)曲線擬合進(jìn)行數(shù)據(jù)分析以計(jì)算拐點(diǎn)，進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。拐點(diǎn)作為有絲分裂停滯的EC50。類似的方法用來測(cè)定化合物的細(xì)胞程序死亡的EC50。這里，在各滴定點(diǎn)的細(xì)胞程序死亡細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(通過碘化物熒光測(cè)量)繪制在Y軸上，如上所述進(jìn)行類似的分析。
IV.檢測(cè)單極紡錘體的免疫熒光顯微術(shù)在Kapoor et al.的(2000)J.Cell Biol.150975-988中基本上描述了DNA、微管蛋白和中心粒周圍蛋白(pericentrin)的免疫熒光染色。對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)研究，將細(xì)胞裝板在組織培養(yǎng)處理的玻璃小室載玻片上，并使其過夜附著。然后細(xì)胞用感興趣的化合物培養(yǎng)4到16小時(shí)。培養(yǎng)完成后，吸出培養(yǎng)基和藥物，從玻璃載玻片上取出小室和墊圈。然后細(xì)胞進(jìn)行浸透、固定、洗滌、和封閉，用于根據(jù)所指方案進(jìn)行非特異性抗體結(jié)合。用二甲苯將石蠟包埋的腫瘤切片進(jìn)行脫石蠟化，然后在封閉之前通過乙醇系列再水合。載玻片在4℃下在初級(jí)抗體(小鼠單克隆抗α-微管蛋白抗體，得自Sigma的克隆DM1A，1∶500稀釋，兔的多克隆抗中心粒周圍蛋白抗體，得自Covance，1∶2000稀釋)中培養(yǎng)過夜。洗滌后，載玻片用稀釋到15μg/ml的偶聯(lián)二級(jí)抗體(FITC偶聯(lián)的針對(duì)微管蛋白的驢抗小鼠IgG；德克薩斯紅偶聯(lián)的針對(duì)中心粒周圍蛋白的驢抗兔IgG)在室溫下培養(yǎng)1小時(shí)。然后洗滌載玻片并用Hoechst 33342復(fù)染以顯現(xiàn)DNA。在Nikon落射熒光顯微鏡上使用Metamorph反褶積和成像軟件使免疫染色的試樣以100x油浸物鏡成像。
實(shí)施例提供以下實(shí)施例意在幫助進(jìn)一步了解本發(fā)明。使用的特定原料、物質(zhì)和條件用來說明本發(fā)明，而并不限制本發(fā)明的合理范圍。
圖解1
圖解1(續(xù)) 步驟14-烯丙基-4-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮(1-4)向15.8g(416mmol)LAH粉末在600mL乙醚的懸浮液中加入18.3g(90mmol)α-烯丙基-α-苯基甘氨酸乙酯(1-3)(根據(jù)Van Betsbruggeet.al.的Tetrahedron，1997，53，9233-9240制備)在75mL乙醚中的溶液，加入速率使得保持溫和的回流。室溫下攪拌過夜后，小心淬滅反應(yīng)，使用27mL水，然后加入27mL 15％NaOH，最后加入82mL水。加入適量Na2SO4，攪拌混合物1小時(shí)，濾去固體，濃縮溶液，將殘余物溶解在300mL的CH2Cl2中，Na2SO4干燥，濃縮得到氨基醇，為無色油狀物。氨基醇(4.5g，25mmol)溶解在50mL的CH2Cl2中并冷卻到0℃。在加入5.4mL(53mmol)三乙胺和4.5g(28mmol)1，1’-羰基二咪唑后，使混合物回溫到室溫，并攪拌4小時(shí)，然后將反應(yīng)物傾入分液漏斗中，用1M HCl、水洗滌兩次，Na2SO4干燥，濃縮得到噁唑烷酮1-4，為無色油狀物，1-4數(shù)據(jù)為1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.4-7.2(m，5H)，6.6(s，1H)，5.6-5.5(m，1H)，5.2(m，2H)，4.5(d，1H)，4.35(d，1H)，2.8(m，1H)，2.6(m，1H)ppm.
步驟2二酯(1-5)將68g(334.6mmol)1-4在500mL CH2Cl2中的溶液冷卻到-78℃，并將臭氧鼓入通過溶液，直到維持住淺藍(lán)色，然后將O2鼓入通過溶液，持續(xù)15分鐘。然后將N2鼓入通過溶液，持續(xù)30分鐘，此時(shí)，加入491mL(6.7摩爾)甲硫醚，攪拌溶液過夜的同時(shí)慢慢恢復(fù)到室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去揮發(fā)物質(zhì)，得到棕色油狀物。將該物質(zhì)懸浮在1L tBuOH中，加入200mL(1.9摩爾)2-甲基-2-丁烯。然后向該溶液中滴加160g(1.33摩爾)NaH2PO4和70g(774mmol)NaClO2在800mL H2O中的混合物。加入完成后，混合物另外攪拌4小時(shí)，分層后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮有機(jī)層，將殘余物溶解在EtOAc中，并與得自反應(yīng)的水相放置在分液漏斗中。分離后，水相用EtOAc提取3次，Na2SO4干燥，濃縮得到約90g黃色膠狀物。殘余物懸浮在500mL MeOH中，向溶液鼓入HCl氣直到溶液幾乎回流。將燒瓶塞住，并過夜攪拌同時(shí)冷卻到室溫。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去揮發(fā)物，殘余物裝載在處于CH2Cl2中的硅膠柱上，用EtOAc/己烷洗脫，得到甲酯，為淡橙色膠狀物。將殘余物溶解在500mL THF中，冷卻到0℃，加入32.6mL(220.5mmol)溴乙酸叔丁酯，然后加入10.6g NaH(264.6mmol 60％懸浮液)。使混合物回溫到室溫并且攪拌過夜，用飽和NH4Cl溶液淬滅，用EtOAc提取兩次。合并的有機(jī)層用鹽水洗、Na2SO4干燥、濃縮，殘余物用硅膠色譜法純化，EtOAc/己烷洗脫，得到1-5，為稠厚的淺黃色膠狀物。1-5數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.4-7.3(m，5H)，4.65(d，1H)，4.55(d，1H)，3.9(d，1H)，3.65(s，3H)，3.5(d，1H)，3.35(d，1H)，3.2(d，1H)，1.4(s，9H)ppm.HRMS(ES)C18H23NO6M+Na計(jì)算值372.1423.實(shí)測(cè)值372.1412.
步驟37a-苯基二氫-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]噁唑-3，6-(5H)-二酮(1-6)在-78℃下向18.6g(53mmol)的1-5在150mL THF中的溶液中滴加58.6mL(58.6mmol)的1M的LiHMDS在THF中的溶液。在該溫度下攪拌1小時(shí)后，除去冷卻浴，使反應(yīng)回溫到室溫并且攪拌過夜?；旌衔镉蔑柡蚇H4Cl溶液淬滅，用EtOAc提取兩次，用鹽水洗滌兩次，Na2SO4干燥并濃縮。將殘余物溶解在60mL甲酸中，并在100℃下加熱24小時(shí)，真空除去揮發(fā)物，將殘余物加以CH2Cl2/己烷/Et2O研磨，得到1-6，為米黃色固體。1-6數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.5-7.3(m，5H)，4.7(d，1H)，4.3(d，1H)，4.2(d，1H)，3.5(d，1H)，3.1(d，1H)，2.95(d，1H)，2.9(d，1H)ppm.
步驟46-(2，5-二氟苯基)-7a-苯基-5，7a-二氫-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]噁唑-3-酮(1-7)在-78℃下向2.2g(10mmol)的1-7在150mL THF中的懸浮液中滴加12.2mL(12.2mmol)1M NaHMDS在THF中的溶液。攪拌30分鐘后，使溶液回溫到0℃，并放置1小時(shí)。溶液冷卻到-78℃，加入4.35g(12.2mmol)N-苯基雙(三氟甲磺酰亞胺)在10mL THF中的溶液。除去冷卻浴，使混合物回溫到室溫并且過夜攪拌?；旌衔镉蔑柡蚇H4Cl溶液淬滅，用EtOAc提取兩次，用鹽水洗滌兩次，Na2SO4干燥并濃縮。將殘余物溶解在75mL DME和18mL水中，向該混合物中加入1.29g(30mmol)LiCl、3.2g(30mmol)Na2CO3和4.8g(30mmol)的2，5-二氟苯基硼酸。然后溶液用N2脫氣1分鐘，繼之加入630mg(0.5mmol)的四(三苯基膦)鈀(0)。反應(yīng)在90℃加熱3小時(shí)，冷卻到室溫，用飽和NaHCO3稀釋，用EtOAc提取兩次。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，Na2SO4干燥，濃縮，殘余物用硅膠色譜法純化，CH2Cl2/己烷洗脫，得到1-7，為白色固體。1-7數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.5-7.3(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.8(s，1H)，4.9(d，1H)，4.75(d，1H)，4.5(d，1H)，4.25(d，1H)ppm.HRMS(ES)C18H13F2NO2M+H計(jì)算值314.0987.實(shí)測(cè)值314.0993.
步驟52-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯(1-8)在60℃將1.75g(5.6mmol)1-7在15mL EtOH和10mL 3M NaOH中的懸浮液加熱3小時(shí)，冷卻到室溫，傾入具有EtOAc和鹽水的分液漏斗中。分層，水相用EtOAc提取兩次，合并的有機(jī)相用鹽水洗滌兩次，Na2SO4干燥，濃縮得到白色固體。向該燒瓶中加入30mL CH2Cl2，1.5g(22.3mmol)咪唑和1.76g(11.7mmol)TBSCl，得到的懸浮液攪拌過夜。反應(yīng)用CH2Cl2稀釋，用水洗滌兩次，Na2SO4干燥，濃縮，殘余物用硅膠色譜法純化，EtOAc/己烷洗脫，得到1-8，為白色固體。1-8的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.6-7.3(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.75(s，1H)，4.25(d，1H)，4.1(d，1H)，3.95(d，1H)，3.75(d，1H)，0.9(s，9H)，0.1(s，3H)，0.05(s，3H)ppm.
步驟6中間體1-8的對(duì)映體拆分使用Chiralpak AD10×50cm柱，用1％異丙醇的己烷溶液(含0.1％二乙胺)以150mL/分鐘經(jīng)色譜法進(jìn)行對(duì)映體拆分。對(duì)4×250mmChiralpak AD柱以1毫升/分鐘用1％異丙醇的己烷溶液(含0.1％二乙胺)的洗脫液進(jìn)行分析HPLC的分析，表明第一洗脫的活性對(duì)映體的Rt＝5.5分鐘，第二對(duì)映體的Rt＝6.9分鐘。
步驟7氨基甲酰氯1-9在0℃下，向1.95g(6.6mmol)的三光氣在25mL THF中的溶液中加入1.31g(3.3mmol)第一洗脫對(duì)映體1-8和915μL(6.6mmol)三乙胺在10mLTHF中的溶液。除去冰浴，使反應(yīng)回溫到室溫，攪拌3小時(shí)，然后在水和EtOAc之間分配反應(yīng)物，分層，Na2SO4干燥，濃縮，得到1-9，為棕色油狀物。1-9數(shù)據(jù)HRMS(ES)C24H28ClF2NO2Si M+H計(jì)算值464.1619.實(shí)測(cè)值464.1625.
圖解1A 二酯1-5的替代性合成方案向14.8g(73mmol)1-4和110mL CH2Cl2、110mL CH3CN、和320mL水的雙相混合物中加入約200mg氯化釕(III)水合物。然后在1小時(shí)內(nèi)在急速攪拌下分份加入高碘酸鈉(85.6g，400mmol)。加入完成后，反應(yīng)在室溫下攪拌4小時(shí)以上，混合物用500mL水和1.5L EtOAc稀釋，過濾除去固體。濾液放置在分液漏斗，分離各相，水相用EtOAc提取兩次，合并的有機(jī)相用鹽水洗滌兩次，Na2SO4干燥。濃縮后，將暗褐色固體溶解在250mL MeOH中，以不使溶液溫度增加到超過35℃的速率向溶液緩慢通入HCl(g)。5分鐘后，將反應(yīng)體系塞住，在室溫下攪拌過夜，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去揮發(fā)物，殘余物用硅膠色譜法純化，EtOAc/己烷洗脫，得到13.6g(58mmol)甲酯，為粘性油狀物。然后將殘余物溶于200mLTHF中，冷卻到0℃，加入10.3mL(70mmol)溴代乙酸叔丁酯，然后加入2.8g NaH(70mmol的60％懸浮液)。使混合物回溫到室溫并攪拌過夜，混合物用飽和NH4Cl溶液淬滅，用EtOAc提取兩次。合并的有機(jī)層用鹽水洗，Na2SO4干燥，濃縮，殘余物用硅膠色譜法純化，EtOAc/己烷洗脫，得到1-5，為無色油狀物。1-5數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.4-7.3(m，5H)，4.65(d，1H)，4.55(d，1H)，3.9(d，1H)，3.65(s，3H)，3.5(d，1H)，3.35(d，1H)，3.2(d，1H)，1.4(s，9H)ppm.HRMS(ES)C18H23NO6M+Na計(jì)算值372.1423.實(shí)測(cè)值372.1412.
圖解1B 步驟14-亞甲基-2-苯基脯氨酸甲酯(1B-2)將苯基甘氨酸甲酯-HCl(100g)的水溶液(300mL)用10N NaOH中和到pH8。水溶液用EtOAc提取(3×200mL)。合并的有機(jī)提取物用MgSO4干燥，過濾并濃縮。殘余物(56.7g，344mmol)溶解在原甲酸三甲酯(100mL)并用苯甲醛(34.9mL，36.4g，344mmol)處理。在攪拌2小時(shí)之后，反應(yīng)用Et2O(200mL)稀釋并用水(3×50mL)洗。有機(jī)溶液用MgSO4干燥，過濾并濃縮。將一部分亞胺殘余物(26.8g，100mmol)溶解在二氯甲烷(240mL)中并用160mL 10N NaOH、甲代烯丙基二氯化物(50.0g，400mmol)和Bu4NHSO4(3.59g)處理。在室溫下攪拌10小時(shí)之后，反應(yīng)物用二氯甲烷稀釋并分離有機(jī)溶液，MgSO4干燥，過濾并濃縮。將殘余物再溶解于Et2O/IN HCl(200mL/200mL)并攪拌2小時(shí)，分離水相并用10N NaOH中和(到pH8)。水性混合物用EtOAc(3×200mL)提取。合并的有機(jī)溶液用MgSO4干燥，過濾并濃縮，將殘余物溶解在水中并中和(到pH8)。該混合物用EtOAc提取(X 3)，然后MgSO4干燥，過濾，濃縮得到1B-2粗品。該殘余物經(jīng)過急驟層析法(SiO2；30％EtOAc/己烷)純化，得到純的1B-2。1B-2的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.51(m，2H)，7.42(m，3H)，5.03(s，1H)，4.95(s，1H)，3.71(m，5H)，3.41(m，1H)，2.80(m，1H)ppm.
步驟27a-苯基二氫-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]噁唑-3，6(5H)-二酮(1-6)將LiAlH4(7.14g，188mmol)在THF(500mL)中的懸浮液冷卻到0℃，并在20分鐘內(nèi)加入酯1B-2(10.2g，47mmol)在THF(50mL)中的溶液處理。在0℃攪拌30分鐘之后，反應(yīng)通過加入水(7.1mL)、15％NaOH水溶液(7.1mL)和H2O(21.3mL)小心淬滅。加入固體Na2SO4，攪拌混合物40分鐘?；旌衔镞^濾并濃縮。殘余物(8.2g，43.3mmol)溶解在二氯甲烷(300mL)中并用三乙胺(9.0mL，6.5g，65.0mmol)和羰基二咪唑(9.14g，56.4mmol)處理。室溫下攪拌48小時(shí)后，反應(yīng)物用二氯甲烷稀釋并用1N HCl和鹽水洗滌。有機(jī)溶液濃縮，不用進(jìn)一步純化。將殘余物1B-3(9.2g，42.8mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液冷卻到-78℃，使臭氧通過溶液直到維持藍(lán)色。吹掃溶液并用甲硫醚(35mL)處理。在過夜逐漸回溫到室溫后，將溶液濃縮到黃色固體，用Et2O研磨該固體得到純的1-6。1-6數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.5-7.3(m，5H)，4.7(d，1H)，4.3(d，1H)，4.2(d，1H)，3.5(d，1H)，3.1(d，1H)，2.95(d，1H)，2.9(d，1H)ppm.
通過如上述圖解C和G-O中所示將化合物1-9與試劑(如圖解B和D-F中所述制備)反應(yīng)制備本發(fā)明的化合物。
圖解2 步驟1(±)-N-BOC-反式-3-氟-4-(甲氨基)吡咯烷2-3將冷卻(-78℃)的N-BOC-3-吡咯烷酮(1.0g，5.41mmol)的THF(50mL)溶液用NaHMDS(7.03mL的1M THF溶液)處理。攪拌30分鐘之后，將溶液用三乙基氯硅烷(1.18mL，7.03mmol)處理。將反應(yīng)在-78℃攪拌1小時(shí)，回溫到0℃，用1∶1的鹽水/水和己烷稀釋。將混合物用EtOAc萃取。有機(jī)溶液用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。殘余物不經(jīng)進(jìn)一步純化。將3-氟-N-BOC-吡咯烷酮(0.31g，1.53mmol)的二氯乙烷(10mL)溶液用甲胺(1.53mL的2M THF溶液)的Na(OAc)3BH(0.49g，2.3mmol)處理。在室溫下攪拌12小時(shí)之后，將反應(yīng)物用EtOAc稀釋并用飽和的NaHCO3洗。將有機(jī)溶液用MgSO4干燥，過濾并濃縮。殘余物通過急驟層析(SiO2，80％CHCl3/10％甲醇/10％EtOAc)得到外消旋的2-3。2-3的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ5.11(br d，J＝55Hz，1H)，3.85-3.62(m，2H)，3.51(m，1H)，3.20(m，1H)，3.03(m，1H)，2.50(s，3H)，1.46(s，9H)ppm。
步驟2(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-4-氟吡咯烷-3-基]-2-(羥甲基)N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺2-5a和(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-4-氟吡咯烷-3-基]-2-(羥甲基)N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺2-5b將氨基甲酰氯1-9(0.24g，0.52mmol)、氟吡咯烷2-3(0.114g，0.52mmol)、和iPr2NEt(0.177mL，1.04mmol)的二氧雜環(huán)己烷(5mL)溶液在90℃加熱12小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻到室溫，用EtOAc稀釋并用飽和的NH4Cl水溶液和鹽水洗。將有機(jī)溶液用MgSO4干燥，過濾并濃縮。殘余物通過急驟層析(SiO2，10％EtOAc/己烷)得到非對(duì)映體2-4a和2-4b。將非對(duì)映體2-4a(0.1g)溶解于二氧雜環(huán)己烷(2mL)中并用HCl(2mL的4M二氧雜環(huán)己烷溶液)溶解。攪拌2小時(shí)之后，將反應(yīng)用飽和的NaHCO3水溶液中和并用EtOAc提取。將有機(jī)溶液用MgSO4干燥，過濾并濃縮。在SiO2上的急驟層析(95/2.5/2.5的二氯甲烷/NH4OH/甲醇)得到純的第一洗脫物2-5a。以類似的方法制備2-5b。
2-5a的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.40-7.35(m，5H)，7.07-6.96(m，3H)，6.30(s，1H)，5.34-5.23(br d，J＝55Hz，1H)，4.86(d，J＝14Hz，1H)，4.75(d，J＝14Hz，1H)，4.52(m，1H)，4.05(m，2H)，3.27(m，3H)，3.08(s，3H)ppm；2-5b的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.41-7.37(m，5H)，7.09-6.96(m，3H)，6.32(s，1H)，5.36-5.23(dt，J＝55，4Hz，1H)，4.90(d，J＝15Hz，1H)，4.67(d，J＝15Hz，1H)，4.45(d，J＝12H，1H)，4.03(m，2H)，3.29(m，3H)，3.18(s，3H)ppm。
步驟3(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥甲基)N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺2-6a和(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-4-氟-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥甲基)N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺2-6b將胺2-5a(0.050g，0.116mmol)、甲醛水溶液(0.030mL，0.348mmol)、NaCNBH3(0.024g，0.348mmol)、AcOH(10μL)的MeOH(4.0mL)溶液在室溫下攪拌12小時(shí)。將反應(yīng)物用飽和NaHCO3水溶液(30uL)處理并濃縮。將反應(yīng)物通過急驟層析(SiO2；95/2.5/2.5的二氯甲烷/NH4OH/MeOH)得到2-6a。以類似的方法制備2-6b。
2-6a的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.41-7.36(m，4H)，7.29-7.26(m，1H)，7.08-6.95(m，3H)，6.29(s，1H)，5.31-5.18(br d，J＝55Hz，1H)，4.89-4.86(d，J＝14Hz，1H)，4.78-4.75(d，J＝14Hz，1H)，4.52(d，J＝12Hz，1H)，4.37-4.28(m，1H)，4.05(d，J＝12Hz，1H)，3.10(s，3H)，2.99-2.81(m，4H)，2.43(s，3H)ppm。
2-6b的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.39-7.26(m，5H)，7.08-6.96(m，3H)，6.33(s，1H)，5.35-5.22(dt，J＝54，4.5Hz，1H)，4.94-4.91(d，J＝14Hz，1H)，4.65-4.62(d，J＝14Hz，1H)，4.43-4.32(m，2H)，4.02-3.99(d，J＝13Hz，1H)，3.22(s，3H)，3.16-3.02(m，2H)，2.71-2.61(m，2H)，2.44(s，3H)ppm。
圖解3 步驟1(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5S)-5-(氟甲基)-N-BOC-吡咯烷-3-基]-2-(羥甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺3-2將疊氮化物3-1
的THF(20mL)溶液用聚合物結(jié)合的Ph3P(0.58g，4.0mmol)處理并在50℃加熱3小時(shí)。將反應(yīng)冷卻到室溫并攪拌48小時(shí)。將反應(yīng)物用水(20mL)處理并升溫到50℃，維持1小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻到室溫，通過硅藻土過濾并濃縮。將一部分的殘余物(0.103g，0.474mmol)用氨基甲酰氯1-9(0.22g，0.474mmol)、三乙胺(0.129mL，0.948mmol)和催化量的DMAP處理。將反應(yīng)物在室溫下攪拌48小時(shí)。將反應(yīng)物用EtOAc稀釋并用10％的檸檬酸、飽和的NaHCO3水溶液和鹽水洗。將有機(jī)溶液用MgSO4干燥，過濾并濃縮。殘余物通過SiO2上的色譜法純化(在45分鐘內(nèi)為100％己烷到50％EtOAc/己烷梯度洗脫)，得到3-2，為白色固體。LRMSM+H＝646.4。
步驟2(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5S)-5-(氟甲基)-吡咯烷-3-基]-2-(羥甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺3-3將0℃的3-2(0.18g，0.279mmol)的DMF(3mL)溶液用NaH(0.009g，0.362mmol)和碘甲烷(0.023mL，0.362mol)處理。將反應(yīng)攪拌12小時(shí)，并逐漸升溫到室溫。加入第二部分(0.3當(dāng)量)的碘甲烷和NaH。再攪拌3小時(shí)之后，將反應(yīng)物用EtOAc稀釋，用水、10％檸檬酸、飽和NaHCO3水溶液、和鹽水洗。將有機(jī)溶液用MgSO4干燥，過濾并濃縮。殘余物通過色譜法純化(SiO2；在45分鐘內(nèi)從100％己烷到3/1己烷/EtOAc)。將該物質(zhì)(0.150g，0.227mmol)溶解于EtOAc(1.2mL)中并用HCl的二氧雜環(huán)己烷溶液(4M，1.2mL)處理。攪拌2小時(shí)之后，將反應(yīng)物用EtOAc稀釋并加入飽和NaHCO3水溶液(～3mL)。將混合物濃縮并用15％的Na2CO3再次稀釋。將混合物用2/1的CHCl3∶EtOH萃取(x3)并將合并的有機(jī)溶液濃縮。將殘余物用二氯甲烷稀釋，用鹽水洗，Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到3-3。3-3的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CD30D)δ7.38-7.31(m，4H)，7.25-7.22(m，2H)，7.19-7.14(m，1H)，7.10-7.06(m，1H)，6.31(s，1H)，4.95(d，J＝14Hz，1H)，4.77(d，J＝14Hz，1H)，4.61(d，J＝11.2Hz，1H)，4.51(m，1H)，4.43(m，1H)，4.34(m，1H)，4.20(d，J＝11Hz，1H)，4.11(m，1H)，3.08(m，1H)，2.90(m，4H)，2.02(m，1H)，1.56(m，1H)ppm。
步驟3(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5S)-5-(氟甲基)-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺3-4將3-3(0.90g，0.202mmol)的MeOH(2mL)溶液用AcOH(20uL)、甲醛水溶液(0.018g，0.606mmol)、和NaCNBH3(0.038g 0.606mmol)處理。在室溫下攪拌1小時(shí)之后，將反應(yīng)物用飽和的NaHCO3水溶液處理并用EtOAc萃取。將合并的有機(jī)溶液用鹽水洗，MgSO4干燥，過濾并濃縮。殘余物通過色譜法(SiO2，從100％EtOAc到10％MeOH-EtOAc)純化得到3-4。3-4的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.35(m，5H)，6.96(m，3H)，6.27(s，1H)，5.39(m，1H)，4.85(d，J＝15Hz，1H)，4.53(m，4H)，3.98(dd，J＝12，3.7Hz，1H)，3.14(dd，J＝11，2.2Hz，1H)，3.07(s，3H)，2.53(m，1H)，2.42(m，4H)，1.70(m，1H)ppm。
(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5R)-5-(氟甲基)-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺3-5通過類似于圖解3的順序，從(2R，4R)-4-羥基-D-脯氨酸甲酯開始制備化合物3-5。3-5的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.37(m，5H)，6.97(m，3H)，6.26(s，1H)，5.23(d，J＝5.5Hz，1H)，4.84(d，J＝14Hz，1H)，4.63(d，J＝14Hz，1H)，4.45(m，2H)，4.37(m，2H)，4.01(dd，J＝11，3Hz，1H)，3.24(m，1H)，2.93(s，3H)，2.76(m，1H)，2.51(m，1H)，2.44(s，3H)ppm。
序列表<110>默克公司P.J.科爾曼C.D.科克斯<120>有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑<130>21485Y<160>2<170>FastSEQ for Windows Version 4.0<210>1<211>42<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>全合成核苷酸序列<400>1gcaacgatta atatggcgtc gcagccaaat tcgtctgcga ag 42<210>2<211>60<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>全合成核苷酸序列<400>2gcaacgctcg agtcagtgat gatggtggtg atgctgattc acttcaggct tattcaatat 60
權(quán)利要求
1.下式I所示的化合物 或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體，其中a為0或1；b為0或1；m為0、1或2；n為0、1、2或3；r為0或1；s為0或1；t為0、1或2；R1和R2獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R3選自1)氫，2)C1-C10烷基，3)C1-C10烷基-O-Rd，4)C2-C10烯基-O-Rd，5)C2-C10炔基-O-Rd，6)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-O-Rd，7)C1-C10烷基-(C＝O)b-NRcRc＇，8)C2-C10烯基-(C＝O)bNRcRc′，9)C2-C10炔基-(C＝O)bNRcRc′，10)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-(C＝O)bNRcRc′，11)C1-C10烷基-S(O)m-Rd，12)C2-C10烯基-S(O)m-Rd，13)C2-C10炔基-S(O)m-Rd，14)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-S(O)m-Rd，所述烷基、烯基、炔基和環(huán)烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R6的取代基取代；R4獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)CO2H，4)鹵代，5)CN，6)OH，7)ObC1-C6全氟烷基，8)Oa(C＝O)bNR8R9，9)S(O)mRa，10)S(O)2NR8R9，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R5選自1)氫，2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)CO2H，5)鹵代，6)CN，7)OH，8)ObC1-C6全氟烷基，9)Oa(C＝O)bNR8R9，10)S(O)mRa，11)S(O)2NR8R9，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R6獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵代，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR8R9，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR8R9，14)氧代，15)CHO，16)(N＝O)R8R9，或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R7選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代，4)OH，5)鹵代，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，17)(C＝O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2N(Rb)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)選自以下的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代、NO2和N(Rb)2；R8和R9獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，或R8和R9可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，R10選自F和-CH2F；R11和R12獨(dú)立地選自H和-CH2F；Rox不存在或者是氧代；Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′或S(O)2Ra，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rc和Rc′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、NH2、OH、ORa、-(C1-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′、S(O)2Ra和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Rc和Re′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rd選自H、(C1-C6)烷基、-(C2-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Re和Re′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Re和Re′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代。
2.下式II所示的權(quán)利要求1的化合物， 或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體，其中a為0或1；b為0或1；m為0、1或2；n為0、1、2或3；r為0或1；s為0或1；t為0或1；R1和R2獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R3選自1)氫，2)C1-C10烷基，3)C1-C10烷基-O-Rd，4)C2-C10烯基-O-Rd，5)C2-C10炔基-O-Rd，6)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-O-Rd，7)C1-C10烷基-(C＝O)b-NRcRc′，8)C2-C10烯基-(C＝O)bNRcRc′，9)C2-C10炔基-(C＝O)bNRcRc′，10)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-(C＝O)bNRcRc′，11)C1-C10烷基-S(O)m-Rd，12)C2-C10烯基-S(O)m-Rd，13)C2-C10炔基-S(O)m-Rd，14)(C1-C6-亞烷基)nC3-C8環(huán)烷基-S(O)m-Rd，所述烷基、烯基、炔基和環(huán)烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R6的取代基取代；R4獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)CO2H，4)鹵代，5)CN，6)OH，7)ObC1-C6全氟烷基，8)Oa(C＝O)bNR8R9，9)S(O)mRa，10)S(O)2NR8R9，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R5選自1)氫；2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)CO2H，5)鹵代，6)CN，7)OH，8)ObC1-C6全氟烷基，9)Oa(C＝O)bNR8R9，10)S(O)mRa，11)S(O)2NR8R9，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R6獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵代，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR8R9，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR8R9，14)氧代，15)CHO，16)(N＝O)R8R9，或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R7選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代，4)OH，5)鹵代，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2N(Rb)2；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)選自以下的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代、NO2和N(Rb)2；R8和R9獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，或R8和R9可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，R10選自F和-CH2F；R12選自H和-CH2F，條件是當(dāng)t為1時(shí)，R12為H；Rox不存在或者是氧代；Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′或S(O)2Ra，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rc和Rc′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、NH2、OH、ORa、-(C1-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′、S(O)2Ra和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Rc和Rc′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rd選自H、(C1-C6)烷基、-(C2-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Re和Re′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Re和Re′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代。
3.下式III所示的權(quán)利要求2的化合物， 或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體，其中a為0或1；b為0或1；m為0、1或2；n為0、1或2；r為0或1；s為0或1；R1和R2獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R4獨(dú)立地選自1)鹵代，2)OH，3)ObC1-C6全氟烷基，R5選自1)氫；2)鹵代，3)OH，4)ObC1-C6全氟烷基，R7選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代，4)OH，5)鹵代，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2N(Rb)2；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)選自以下的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代、NO2和N(Rb)2；R8和R9獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，或R8和R9可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′或S(O)2Ra，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rc和Rc′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、NH2、OH、ORa、-(C1-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe′、S(O)2Ra和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Rc和Rc′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Re和Re′獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Re和Re′可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代。
4.下式IV所示權(quán)利要求3的化合物， 或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體，其中a為0或1；b為0或1；m為0、1或2；r為0或1；s為0或1；R1和R2獨(dú)立地選自H和(C1-C6)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R4獨(dú)立地選自1)鹵代，2)OH，3)ObC1-C6全氟烷基，R7選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代，4)OH，5)鹵代，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2N(Rb)2；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)選自以下的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代、NO2和N(Rb)2；R8和R9獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，或R8和R9可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代，Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe＇或S(O)2Ra，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Rc和Rc＇獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、NH2、OH、ORa、-(C1-C6)烷基-OH、-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)雜環(huán)基、(C＝O)NReRe＇、S(O)2Ra和-(C1-C6)烷基-N(Rb)2，其中烷基任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Rc和Rc＇可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；Re和Re＇獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，其任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；或Re和Re＇可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為3-7元環(huán)并且除了所述氮之外任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代。
5.選自以下的化合物(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-4-氟吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-4-氟吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，4S)-4-氟-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5S)-5-(氟甲基)-吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5S)-5-(氟甲基)-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5R)-5-(氟甲基)-吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3S，5R)-5-(氟甲基)-1-甲基吡咯烷-3-基]-2-(羥基甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體。
6.包括權(quán)利要求1的化合物和可藥用載體的藥物組合物。
7.使用權(quán)利要求1的化合物制備可用于治療或預(yù)防需要這種治療的哺乳動(dòng)物的癌癥的藥物的方法。
8.使用權(quán)利要求1的化合物制備可用于治療或預(yù)防需要這種治療的哺乳動(dòng)物的癌癥的藥物的方法，其中癌癥選自組織細(xì)胞淋巴瘤、肺腺癌、小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、惡性膠質(zhì)瘤(gioblastomas)和乳腺癌。
9.使用權(quán)利要求1的化合物制備可用于調(diào)節(jié)需要這種治療的哺乳動(dòng)物的有絲分裂紡錘體形成的藥物的方法。
全文摘要
本發(fā)明涉及二氫吡咯化合物，其可用于治療細(xì)胞增殖疾病、用于治療與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性有關(guān)的疾病、以及用于抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白。本發(fā)明還涉及包括這些化合物的組合物、以及使用這些化合物治療哺乳動(dòng)物的癌癥的方法。
文檔編號(hào)C07D403/00GK1835746SQ200480023308
公開日2006年9月20日 申請(qǐng)日期2004年8月11日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月15日
發(fā)明者P·J·科爾曼, C·D·科克斯 申請(qǐng)人:默克公司