專利名稱：制備(3－氧代－2,3－二氫－1h－異吲哚－1－基)乙?；已苌锏姆椒?br> 技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及采用3-羥基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-酮衍生物或3-(2-氨基甲?；交?丙烯酸酯衍生物作為中間體制備(3-氧代-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基)乙?；已苌锏姆椒?、旋光拆分方法及本發(fā)明方法中的中間體。
式I的(3-氧代-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基)乙?；已苌?是NHE1-抑制劑并且描述于PCT/EP03/05279。然而，文獻(xiàn)中描述的合成方法得到的是外消旋區(qū)域異構(gòu)體混合物，它需要昂貴的和不方便的分離方法并且降低了預(yù)期化合物的收率。迄今為止，僅僅可能通過在手性載體上進(jìn)行昂貴的和不方便的色譜分離來獲得異構(gòu)體。然而，物質(zhì)的產(chǎn)量受到色譜分離方法的限制。
因此，人們有巨大的興趣找到區(qū)域選擇性制備(3-氧代-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基)乙酰基胍衍生物的方法和獲得對(duì)映異構(gòu)體的方法。改進(jìn)的區(qū)域選擇性制備外消旋(3-氧代-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基)乙?；已苌锿ㄟ^方案1和方案3顯示的兩條獨(dú)立的途徑取得成功。拆分外消旋體通過方案5顯示的結(jié)晶2，3-O-乙?；疍-或L-酒石酸的鹽取得成功。如果不需要的對(duì)映異構(gòu)體在溫和堿催化下進(jìn)行外消旋化有可能使外消旋體基本上全部轉(zhuǎn)化為預(yù)期對(duì)映異構(gòu)體。所述方法使得能夠簡單地制備富含對(duì)映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體純的(3-氧代-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基)乙?；已苌铩Ｐ路椒ㄊ沟煤唵蔚刂苽浯罅渴絀化合物可以在工業(yè)規(guī)模上進(jìn)行。
因此，本發(fā)明涉及制備式I化合物及其鹽的方法
其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；如方案1所示，該方法包括 方案1a)將式IV酰胺甲?；缓蟓h(huán)化為式VI化合物，b)將式VI化合物與烷氧基羰基亞甲基三苯基正膦反應(yīng)，與1-烷氧基-1-三甲硅烷氧基乙烯或與膦酰乙酸三烷基酯反應(yīng)，得到式VII化合物，和c)式VII化合物與胍反應(yīng)，得到式I化合物及其鹽，其中，在式IV、VI和VII化合物中，R1-R3各自如式I定義，并且R5為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基。
本發(fā)明也提供制備式I化合物及其鹽的方法，其中
R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；如方案2所示，該方法包括 方案2a)將式II化合物與式III胺反應(yīng)，得到式IV酰胺，b)將式IV酰胺在酰胺官能團(tuán)的鄰位甲酰化，得到式V甲?；０?，c)將式V甲?；０翻h(huán)化，得到式VI化合物，d)將式VI化合物與烷氧基羰基亞甲基三苯基-正膦反應(yīng)，與1-烷氧基-1-三甲硅烷氧基乙烯反應(yīng)或與膦酰乙酸三烷基酯反應(yīng)，得到式VII化合物，和e)將式VII化合物與胍反應(yīng)，得到式I化合物及其鹽，其中，在式II、III、IV、V、VI和VII化合物中，R1-R3各自如式I定義，R5為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基，
X為Cl、Br、OH或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基。
典型地，將式II化合物在惰性溶劑如乙醚、烴或鹵代烴，例如二氯甲烷中，在-30℃至溶劑沸點(diǎn)的溫度下，優(yōu)選在室溫下，與式III胺反應(yīng)，如果適當(dāng)?shù)脑挘诨罨瘎┐嬖谙路磻?yīng)，得到式IV酰胺。
例如，可通過在惰性溶劑如乙醚或烴，例如THF中，在-100℃至0℃，優(yōu)選-80℃至-50℃的溫度下，開始加入烷基金屬化合物，例如烷基鋰化合物，優(yōu)選t-BuLi與復(fù)合物配體，優(yōu)選TMEDA進(jìn)行鄰位-甲?；?。然后，加入式IV的酰胺，在溫度-100℃至0℃、優(yōu)選-80℃至-50℃進(jìn)行脫質(zhì)子化反應(yīng)10分鐘至10小時(shí)。接下來加入甲?；瘎瑑?yōu)選DMF并且在-100℃至40℃，優(yōu)選-80℃至室溫的溫度下實(shí)現(xiàn)與陰離子的反應(yīng)。優(yōu)選在加入DMF后，使溶液在10分鐘至3小時(shí)內(nèi)，例如在30分鐘內(nèi)達(dá)到室溫。所形成的式V酰胺作為中間體通常直接環(huán)化為式VI異吲哚酮。
將式VI異吲哚酮與(C1-C4)烷氧基羰基亞甲基三苯基正膦在惰性溶劑如乙醚、烴或鹵代烴，例如甲苯中，在0℃至溶劑沸點(diǎn)，優(yōu)選在20℃至溶劑沸點(diǎn)的溫度下反應(yīng)，或與膦酰乙酸三(C1-C4)烷基酯在堿，例如氫化鈉存在下，在惰性溶劑如乙醚、烴或鹵代烴，例如1，2-二甲氧基乙烷中，在0℃至溶劑沸點(diǎn)，優(yōu)選在20℃至溶劑沸點(diǎn)的溫度下反應(yīng)?；蛘邔⑹絍I異吲哚酮與1-(C1-C4)烷氧基-1-三甲硅烷氧基乙烯在路易斯酸，例如氯化鈦(IV)或三氟甲磺酸三甲硅烷基酯存在下，在惰性溶劑如乙醚、烴或鹵代烴，例如二氯甲烷中，在-80℃至溶劑沸點(diǎn)，優(yōu)選在-80℃至20℃的溫度下反應(yīng)(Synth.Commun.1987，17，1)。
式VII酯可通過通常已知的方法與胍反應(yīng)，得到式I?；?。該反應(yīng)優(yōu)選以本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方式，在質(zhì)子或非質(zhì)子、極性但惰性有機(jī)溶劑中進(jìn)行。例如，在甲酯(式VII；R5＝OCH3)與胍的反應(yīng)中，已發(fā)現(xiàn)，在20℃至這些溶劑沸騰的溫度下，所使用的溶劑是甲醇、異丙醇或THF。例如，大多數(shù)式VII化合物與未成鹽胍的反應(yīng)在非質(zhì)子惰性溶劑，例如醚，如THF、二甲氧基乙烷或二烷中進(jìn)行。然而，當(dāng)VII化合物與胍的反應(yīng)使用堿如NaOH時(shí)，也可以用水作為溶劑。在式VII化合物與胍鹽，例如鹽酸胍的反應(yīng)中，該反應(yīng)典型地在堿，如叔丁醇鉀、甲醇鈉或乙醇鈉中，在惰性溶劑，如二甲基甲酰胺、NMP、2-丙醇中，在20℃至溶劑沸點(diǎn)的溫度下進(jìn)行。
在與胍的反應(yīng)中，除式VII的羧酸酯外，也可以使用其他活性酸衍生物，例如，碳酰氯、羧酸硫酯或羧酸酐。例如，也可以用DCC激活羧酸。活性羧酸衍生物可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方式直接由式VII的原始羧酸酯制備或由可通過常規(guī)水解方法由所述酯獲得的相應(yīng)的羧酸制備。一系列制備活性羧酸衍生物適宜的方法詳述于文獻(xiàn)J.March，高級(jí)有機(jī)化學(xué)，第三版(John Wiley & Sons，1985，p.350)。
方案1和2中描述的步驟可彼此獨(dú)立地連續(xù)或分步進(jìn)行。反應(yīng)混合物的處理可在任意步驟進(jìn)行。產(chǎn)物的處理和提純(需要時(shí))可通過常規(guī)方法如萃取、pH-分離、色譜法或結(jié)晶和常規(guī)干燥進(jìn)行。
式II和III的起始化合物是商購的或者可按照或以文獻(xiàn)中描述的或本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的類似的方法制備。
也要求保護(hù)的是制備式I化合物及其鹽的方法 其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；如方案3所示，該方法包括
方案3a)將式IX的胺通過重氮鹽與丙烯酸烷基酯反應(yīng)，得到式XI肉桂酸衍生物，b)將式XI化合物與式III胺和胍反應(yīng)，得到式I?；壹捌潲}，其中，在式III、IX和XI化合物中，R1-R3各自如式I定義，并且R6為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基。
本發(fā)明也涉及制備式I化合物及其鹽的方法 其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；如方案4所示，該方法包括
方案4a)將式VIII硝基化合物轉(zhuǎn)化為式IX胺，b)將式IX胺轉(zhuǎn)化為式X重氮鹽，c)將式X重氮鹽與丙烯酸烷基酯反應(yīng)，得到式XI肉桂酸衍生物，d)將式XI化合物轉(zhuǎn)化為式XII酰胺，和e)將式XII化合物轉(zhuǎn)化為式I?；?，其中通過在堿存在下，將式XII化合物轉(zhuǎn)化為式XIII異吲哚酮衍生物并隨后與激活的胍反應(yīng)，得到式I?；?A途徑)，或者在堿存在下，由式XII化合物形成式XIII異吲哚酮衍生物后，通過將式XIII化合物轉(zhuǎn)化為式XIV酯并隨后通過與胍反應(yīng)，得到式I酰基胍(B途徑)，或者通過在強(qiáng)堿存在下，將式XII化合物轉(zhuǎn)化為式XIV酯并隨后通過與胍反應(yīng)，得到式I酰基胍(C途徑)，或者通過在堿存在下，將式XII化合物直接與胍反應(yīng)，同時(shí)進(jìn)行脒基化(guanylation)和環(huán)化，得到式I異吲哚酮(D途徑)；及其鹽，其中，在式VIII、IX、X、XI、XII、XIII和XIV化合物中，R1-R3各自如式I定義，并且R6和R7彼此獨(dú)立地為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基。
式VIII硝基化合物可通過已知的方法(例如″Houben-Weyl，Methodender organischen Chemie″，第XI/1卷，氮化合物II，Georg Thieme VerlagStuttgart，1957，p.360ff中描述的方法)還原為式IX苯胺。例如，優(yōu)選使用Pd/C，例如使用5％ Pd/C或10％ Pd/C，在溶劑，例如醇，優(yōu)選乙醇中，在1bar至200bar，優(yōu)選1bar至10bar氫氣壓下催化氫化。
然后，在惰性溶劑，優(yōu)選乙醇中，在其陰離子不取代重氮離子本身的酸，例如HBF4或HPF6、優(yōu)選HBF4，或者，例如H2SO4存在下和在亞硝酸鹽，優(yōu)選NaNO2存在下，在-30℃至溶劑沸點(diǎn)，優(yōu)選在0℃至30℃的溫度下進(jìn)行式IX苯胺重氮化。
優(yōu)選在鈀催化劑，優(yōu)選Pd(OAc)2存在下，在0℃至溶劑沸點(diǎn)，優(yōu)選在45℃至55℃的溫度下，將式X重氮鹽直接與丙烯酸(C1-C4)烷基酯，優(yōu)選丙烯酸乙酯反應(yīng)，得到式XI肉桂酸衍生物。
式XI化合物的苯甲酸官能團(tuán)可通過本領(lǐng)域已知的方法，優(yōu)選通過?；然蛟贒CC的輔助下轉(zhuǎn)化為式XII酰胺。該反應(yīng)也可以以所述方式進(jìn)行，使得式XII酰胺在反應(yīng)混合物中直接轉(zhuǎn)化為式XIV酯，即由式XI化合物得到式XIV酯的反應(yīng)在一步進(jìn)行。該反應(yīng)也可以在酰胺形成的基本反應(yīng)條件下進(jìn)行或者可以通過加入堿，例如三乙胺、Hünig氏堿或叔丁醇鉀進(jìn)行環(huán)化。其他可供選擇的方法包括通過在相同的反應(yīng)容器中相繼進(jìn)行酰胺形成、環(huán)化和胍基化(guanidation)，將式XI化合物直接轉(zhuǎn)化為式I化合物，在該情況下，進(jìn)行該反應(yīng)可不必分離中間體。
關(guān)于式XII化合物向式I酰基胍的其他轉(zhuǎn)化，有4種途徑供選擇A途徑在溶劑如醇中，優(yōu)選甲醇或乙醇，在-30℃至溶劑沸點(diǎn)的溫度下，優(yōu)選在室溫下，用堿性水溶液，優(yōu)選NaOH水溶液進(jìn)行式XII酰胺的轉(zhuǎn)化。發(fā)生酯官能團(tuán)的水解和環(huán)化為式XIII異吲哚酮衍生物。將式XIII化合物活化以便通過通常已知的方法，例如利用酰氯或用DCC?；?如所述方案1所示)，并且得到式I?；?。
B途徑如A途徑所述，合成式XIII羧酸。接下來，利用酯制備的標(biāo)準(zhǔn)方法，優(yōu)選在醇如甲醇或乙醇中，利用SOCl2來制備，例如式XIV甲酯或乙酯。接下來如方案1所示，將式XIV酯轉(zhuǎn)化為式I?；摇?br> C途徑在強(qiáng)堿溶液，優(yōu)選甲醇化物或叔丁醇化物的醇如甲醇或乙醇溶液中進(jìn)行式XII酰胺的轉(zhuǎn)化，得到式XIV甲酯或乙酯。如方案1所示將式XIV酯轉(zhuǎn)化為式I?；摇?br> D途徑式XII酰胺在胍?；某Ｒ?guī)條件下轉(zhuǎn)化。所使用的溶劑為惰性溶劑，如醚、烴或鹵代烴，優(yōu)選DMF。通常而言，首先將胍鹽與強(qiáng)堿，優(yōu)選KOtBu反應(yīng)，得到游離的胍。將該混合物加到式XII化合物的溶劑如醇、醚、烴或鹵代烴，例如DMF、NMP或2-丙醇溶液中。在加入過程中，脒化和環(huán)化為式I異吲哚酮同時(shí)發(fā)生。在另一個(gè)變通方法中，在溶劑，例如DMF、NMP或2-丙醇中，利用催化量強(qiáng)堿，例如叔丁醇鉀或甲醇鈉或乙醇鈉將式XI化合物相繼環(huán)化為式XIV化合物并原地轉(zhuǎn)化為式I化合物。
優(yōu)選D途徑，其中，式XI苯甲酸衍生物的轉(zhuǎn)化利用一鍋方法進(jìn)行，得到式I?；摇?br> 方案2所描述的方法可連續(xù)或分步進(jìn)行。反應(yīng)混合物的處理可在任意步驟之后進(jìn)行。產(chǎn)物的處理和提純(需要時(shí))可通過常規(guī)方法如萃取、pH-分離、色譜法或結(jié)晶和常規(guī)干燥進(jìn)行。
式III和VIII的起始化合物是商購的或者可按照或以文獻(xiàn)中描述的或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的類似的方法制備。
本發(fā)明也提供式XII化合物及其鹽
其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；R6具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基。
也要求保護(hù)的是利用式XII化合物作為合成中間體。
富含對(duì)映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體純形式的式I化合物可優(yōu)選通過新的旋光拆分方法制備，該方法也構(gòu)成本發(fā)明主題的一部分。為此，式I化合的外消旋體結(jié)晶為2，3-O-乙酰化D-或L-酒石酸鹽，在該過程中，在結(jié)晶或母液中富含對(duì)映異構(gòu)體。接著，游離堿從鹽中再次釋放出來。
因此，本發(fā)明也涉及分離式Ia和Ib化合物及其鹽的方法 其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；
R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；如方案5所示，該方法包括 方案5a)將式I化合物轉(zhuǎn)化為2，3-O-乙?；疍-或L-酒石酸鹽并且通過結(jié)晶分別得到式XVa和XVb兩個(gè)鹽，和b)分別從式XVa和XVb兩個(gè)鹽中釋放出式Ia和Ib兩個(gè)游離堿，其中，在式I、XVa和XVb化合物中，R1-R3如式Ia和Ib定義，R*為 R8為具有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的烷基或未取代的或由1、2或3個(gè)選自F、Cl、Br、I、具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基的取代基取代的苯基。
也要求保護(hù)的是上述方法，其中不需要的式Ia或Ib對(duì)映異構(gòu)體再次外消旋化。
在適宜的溶劑中，例如在醚，例如乙醚、二異丙基醚、二甲氧基乙烷、四氫呋喃或二烷中，在鹵代烴，例如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、1，2-二氯甲烷或三氯乙烯中，在醇，例如甲醇、乙醇、正-丙醇、2-丙醇、丁醇中，在酯，例如乙酸乙酯或乙酸丁酯中，在水中或在溶劑混合物中，優(yōu)選在2-丙醇、二甲氧基乙烷或乙酸乙酯中，在-10℃至溶劑沸點(diǎn)，優(yōu)選在0℃-40℃的溫度下，利用酒石酸衍生物R*，例如O，O′-二苯甲?；?D-酒石酸、O，O′-二苯甲?；?L-酒石酸、O，O′-二(4-甲基苯甲酰基)-L-酒石酸、O，O′-二(4-甲基苯甲?；?-D-酒石酸、O，O′-二(4-甲氧基苯甲?；?-L-酒石酸或O，O′-二(4-甲氧基苯甲?；?-D-酒石酸，優(yōu)選利用O，O′-二苯甲?；?L-酒石酸或O，O′-二苯甲?；?D-酒石酸來結(jié)晶式I化合物的外消旋體。在另一個(gè)變通方法中，利用兩個(gè)或多個(gè)相同構(gòu)型但攜帶不同?；?，3-O-?；疍-或L-酒石酸混合物來分離。
式I化合物和酒石酸衍生物R*的鹽形成可按當(dāng)量進(jìn)行，即每mol式I化合物可使用0.5mol含有兩個(gè)羧酸基團(tuán)的酒石酸衍生物R*。然而。也可以使用少于0.5mol當(dāng)量的2，3-O-乙酰化D-或L-酒石酸，例如每mol式I化合物用0.25mol-0.5mol酒石酸衍生物R*，特別是每mol式I化合物用0.25mol-0.3mol酒石酸衍生物R*結(jié)晶式I化合物。所需的對(duì)映異構(gòu)體以式XVa或XVb鹽的形式結(jié)晶出來并且不需要的對(duì)映異構(gòu)體大部分以式Ib或Ia的對(duì)映異構(gòu)體形式而不是以XVa或XVb的鹽的形式存在于母液中?？赏ㄟ^重復(fù)結(jié)晶或通過在升高的溫度下用新鮮溶劑攪拌最初的結(jié)晶并隨后冷卻來增加式XVa和XVb鹽的對(duì)映異構(gòu)體純度。
分離式XVa和XVb兩鹽并從不需要的對(duì)映異構(gòu)體式Ia或Ib中分離式XVa或XVb的鹽后，接著，典型地通過加入輔助堿，例如胺，例如三乙胺，無機(jī)堿如NaHCO3、Na2CO3或其水溶液，由所述鹽中釋放出富含對(duì)映異構(gòu)體的式Ia或Ib化合物。通常習(xí)慣于在適宜的溶劑，例如在醚，例如乙醚、二異丙基醚、二甲氧基乙烷、四氫呋喃或二烷中，在鹵代烴，例如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1，2-二氯乙烷或三氯乙烷中，在醇，例如甲醇、乙醇、正丙醇、2-丙醇或丁醇中，在酯，例如乙酸乙酯或乙酸丁酯中，或在水或在溶劑混合物中，優(yōu)選在乙酸乙酯、2-丙醇、二氯甲烷或水或其混合物(在該情況下，反應(yīng)混合物可能有一相或多相)中，在-10℃至溶劑沸點(diǎn)，優(yōu)選在10℃-40℃的溫度下進(jìn)行。該過程也可以這樣進(jìn)行，例如，將所述鹽溶解在NaHCO3水溶液中，然后用有機(jī)溶劑，例如乙酸乙酯萃取式Ia或Ib的對(duì)映異構(gòu)體。
在各情況下都不需要的對(duì)映異構(gòu)體Ia或Ib可通過外消旋化方法轉(zhuǎn)化回式I的外消旋體，然后利用另一旋光拆分步驟。在該種情況下，優(yōu)選在溶劑如醇，例如2-丙醇中，在10℃至溶劑沸點(diǎn)、優(yōu)選在0℃-40℃溫度下，利用少量堿，例如KOH來處理不需要的對(duì)映異構(gòu)體，中和反應(yīng)混合物并在水相萃取處理后分離外消旋體。該過程可通過適當(dāng)?shù)剡x擇堿的量和反應(yīng)溫度，使得實(shí)際上除了外消旋化外，所述物質(zhì)不發(fā)生任何化學(xué)變化來進(jìn)行。
本發(fā)明也提供式XVa和XVb化合物 其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；R*為
R8為具有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的烷基或未取代的或由1、2或3個(gè)選自F、Cl、Br、I、具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基的取代基取代的苯基。
當(dāng)以上描述的化合物，例如式I、Ia、Ib、VII、XIII、XIV、XVa或XVb化合物含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心時(shí)，除非另外說明，它們可以各自彼此獨(dú)立地具有S或R構(gòu)型。除非更精確的定義，所述化合物可以以旋光異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、外消旋體或其混合物的形式存在。當(dāng)有雙鍵時(shí)，除非另外說明，可以存在E或Z構(gòu)型。本發(fā)明包含上述化合物，例如式I、Ia、Ib、XVa和XVb化合物的所有互變異構(gòu)體形式。
烷基可以是直鏈或支鏈的。這一點(diǎn)適用于當(dāng)它們攜帶取代基或作為其它基團(tuán)的取代基存在的情況，例如氟烷基或烷氧基。烷基的實(shí)例為甲基、乙基、正丙基、乙丙基(＝1-甲基乙基)、正丁基、異丁基(＝2-甲基丙基)、仲丁基(＝1-甲基丙基)、叔丁基(＝1，1-二甲基乙基)、正戊基、異戊基、叔-戊基、新戊基和己基。優(yōu)選烷基為甲基、乙基、正丙基和異丙基，更優(yōu)選甲基或乙基。在烷基中，一個(gè)或多個(gè)，例如1、2、3、4或5個(gè)氫原子可以被氟原子取代。該氟烷基的實(shí)例為三氟甲基、2，2，2-三氟乙基和五氟乙基，優(yōu)選三氟甲基或2，2，2-三氟乙基。取代的烷基可以在任何部位取代。
環(huán)烷基的實(shí)例為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基。
苯基可以是未取代的或由相同的或不同的基團(tuán)一取代或多取代的，例如一、二或三取代的。當(dāng)苯基被取代時(shí)，優(yōu)選它具有一個(gè)或兩個(gè)相同的或不同的取代基。在一取代苯基中，取代基可以在2-位、3-位或4-位。二取代苯基可以在2，3-位、2，4-位、2，5-位、2，6-位、3，4-位或3，5-位取代。在三取代苯基中，取代基可以在2，3，4-位、2，3，5-位、2，4，5-位、2，4，6-位、2，3，6-位或3，4，5-位。
在本發(fā)明方法中，上述化合物，例如式I、Ia和Ib化合物可以以其鹽的形式使用和/或以其鹽的形式分離。所述鹽可通過常規(guī)方法，例如通過在溶劑中與酸或堿反應(yīng)，或通過陰離子交換或陽離子交換，由其它鹽獲得。例如，可使用的如式I、Ia和Ib化合物酸加成鹽為鹵化物，特別是鹽酸鹽、氫溴酸鹽、乳酸鹽、硫酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乙酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、己二酸鹽、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、甘油磷酸鹽、馬來酸鹽、苯甲酸鹽、草酸鹽和雙羥萘酸鹽和三氟乙酸鹽。在制備活性組分的情況下，優(yōu)選制備生理上可耐受的鹽和可藥用鹽。其實(shí)例包括，式I、Ia和Ib化合物與富馬酸的鹽，特別是每mol式I、Ia和Ib化合物含有1mol富馬酸的鹽，因此可以為富馬酸氫鹽和半富馬酸鹽。有利的性質(zhì)如結(jié)晶性、穩(wěn)定性、特別是低吸濕性、低外消旋化趨勢和良好的溶解性是所述化合物，特別是，例如式XVI的(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍富馬酸氫鹽水合物的特征，所有互變異構(gòu)體形式也構(gòu)成本發(fā)明主題的一部分。
當(dāng)所述化合物含有酸基基團(tuán)時(shí)，它們可以與堿形成鹽，例如堿金屬鹽，優(yōu)選鈉鹽或鉀鹽或銨鹽，例如與氨或有機(jī)胺或氨基酸形成的鹽。含有堿基基團(tuán)和酸基基團(tuán)的化合物也可以以兩性離子的形式存在。
本發(fā)明一個(gè)具體實(shí)例涉及其中R1和R2不都為氫的化合物，特別涉及其中R1為氫并且R2為氟、氯或三氟甲基，特別是三氟甲基的化合物。在其中R1為氫的化合物中，R2取代基優(yōu)選在苯環(huán)相對(duì)異吲哚酮系統(tǒng)中C＝O-基的對(duì)位。
Alk基優(yōu)選具有1、2或3個(gè)碳原子的、特別是具有1或2個(gè)碳原子的、更特別是具有1個(gè)碳原子的烷基。R4優(yōu)選為三氟甲基或具有3、5或6個(gè)碳原子的、特別是3個(gè)碳原子的環(huán)烷基，更優(yōu)選三氟甲基。本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)例涉及其中R3為三氟甲基或2，2，2-三氟乙基、特別是2，2，2-三氟乙基的化合物。
本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)例涉及N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍及其對(duì)應(yīng)異構(gòu)體形式和其鹽的制備。
X優(yōu)選為氯或甲氧基，特別是氯。R5優(yōu)選為甲氧基或乙氧基，特別是乙氧基。R6優(yōu)選為甲氧基或乙氧基，特別是乙氧基。R7優(yōu)選為甲氧基或乙氧基，特別是乙氧基。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)例中，R8為未取代的或由1、2或3個(gè)選自F、Cl、具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基的取代基取代的苯基，特別是未取代的苯基。
式I、Ia、Ib、XVa和XVb化合物及其可藥用鹽是取代的?；?，可以抑制細(xì)胞鈉質(zhì)子逆向轉(zhuǎn)運(yùn)劑(Na+/H+-交換劑，NHE)，特別是NHE-1亞型。
由于對(duì)NHE抑制特性，式I、Ia、Ib、XVa和XVb化合物和/或其可藥用鹽適用于預(yù)防和治療由活性或激活的NHE引起的疾病和由NHE-相關(guān)性損傷繼發(fā)引起的疾病。
例如，式I、Ia、Ib、XVa和XVb化合物也可以通過使用低劑量用于治療和預(yù)防僅需要部分抑制NHE的疾病。
由于NHE抑制劑主要通過它們對(duì)細(xì)胞pH調(diào)節(jié)的影響而起作用，因此它們通常可優(yōu)選與其它調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)pH的化合物聯(lián)合，適宜的聯(lián)合物為碳酸脫水酶抑制劑，轉(zhuǎn)運(yùn)碳酸氫根離子的系統(tǒng)抑制劑，如碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)劑(NBC)抑制劑或鈉-依賴性氯化物-碳酸氫鹽交換劑(NCBE)抑制劑，和對(duì)其它NHE亞型具有抑制作用的NHE抑制劑，因?yàn)橛锌赡芡ㄟ^它們來提高或調(diào)整本文所描述的NHE抑制劑的藥理學(xué)相關(guān)性pH-調(diào)節(jié)作用。
本發(fā)明式I、Ia、Ib、XVa、XVb或XVI化合物的用途涉及預(yù)防和治療動(dòng)物和人類的急性和慢性疾病，例如本發(fā)明NHE抑制劑適用于治療由局部缺血和再灌注引起的疾病。
本文所描述的化合物由于其藥理學(xué)特性適用于作為抗心律失常藥物。由于其心臟保護(hù)成分的存在，使得NHE抑制劑特別適用于梗塞的預(yù)防和梗塞的治療并且適用于治療心絞痛，在所述情況下，它們也預(yù)防性抑制或當(dāng)局部缺血誘導(dǎo)的損傷出現(xiàn)時(shí)，特別是當(dāng)局部缺血誘導(dǎo)的心律失常發(fā)作時(shí)，大大縮小病理生理學(xué)過程。由于它們對(duì)病理性缺氧和局部缺血情形的保護(hù)作用，本發(fā)明所使用的式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽可因?yàn)橐种萍?xì)胞的Na+/H+交換機(jī)制用作治療所有急性或慢性局部缺血誘導(dǎo)的損傷或因此誘導(dǎo)的原發(fā)性或繼發(fā)性疾病的藥物。
本發(fā)明也涉及其作為外科介入治療藥物的用途。因此，化合物可在器官移植過程中使用，化合物既可在摘除前或摘除過程中用于保護(hù)供體的器官，又可以例如在用其治療或其在生理性浴液中貯存過程中和在移植給受體過程中保護(hù)摘除的器官。
本發(fā)明化合物同樣是在進(jìn)行血管成形術(shù)外科介入治療時(shí)對(duì)心臟和外周器官及脈管具有保護(hù)作用的有價(jià)值的藥物。
當(dāng)進(jìn)行搭橋手術(shù)時(shí)，例如，本發(fā)明化合物也可以用于冠脈血管搭橋手術(shù)中和冠狀動(dòng)脈搭橋移植物(CABG)中。
由于本發(fā)明式I化合物具有對(duì)抗局部缺血誘導(dǎo)的損傷的作用，它們甚至可用于心臟停止跳動(dòng)后的復(fù)蘇。
本發(fā)明化合物是對(duì)威脅生命的心律失常異常有效的藥物。使心室纖顫終止并且恢復(fù)生理性的竇性心律。
由于人體組織和器官、特別是心臟的NHE1抑制劑不僅有效對(duì)抗局部缺血和再灌注引起的損傷，也對(duì)抗癌癥治療和自身免疫疾病治療中因使用藥物而產(chǎn)生的細(xì)胞毒性作用，與NHE抑制劑聯(lián)合給藥來抑制所述化合物的細(xì)胞毒副作用，特別是心臟毒性副作用是合適的。與NHE1抑制劑的聯(lián)用藥物所產(chǎn)生的細(xì)胞毒性作用、特別是心臟毒性的降低使增加細(xì)胞毒治療劑的劑量和/或延長用這些藥物所進(jìn)行的治療成為可能。這種細(xì)胞毒治療的治療優(yōu)勢可通過與NHE抑制劑的聯(lián)用而得到顯著增加。
另外，當(dāng)心臟受損過度產(chǎn)生甲狀腺激素、甲狀腺毒癥或當(dāng)給予外源性甲狀腺激素時(shí)，可以使用NHE1抑制劑。因此，式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽適用于改善心臟毒性藥物的治療。
根據(jù)其對(duì)抗由局部缺血所引起的損傷而產(chǎn)生的保護(hù)作用，本發(fā)明的化合物也適于用作治療神經(jīng)系統(tǒng)、特別是中樞神經(jīng)系統(tǒng)局部缺血的藥物，適用于例如中風(fēng)或腦水腫的治療。
NHE抑制劑也適用于治療和預(yù)防中樞神經(jīng)系統(tǒng)過度興奮引起的疾病和病癥，特別是適用于治療癲癇疾病、中樞誘導(dǎo)的陣攣性和強(qiáng)直性痙攣、心理上的抑郁癥、焦慮癥和精神病。在這些情況下，單獨(dú)使用本文所述的NHE抑制劑或者與具有抗癲癇活性的或者抗精神病活性的其它物質(zhì)或者碳酸脫水酶抑制劑，如乙酰唑胺，以及與其它NHE抑制劑或鈉-依賴的氯化物-碳酸氫鹽交換劑(NCBE)聯(lián)合使用是可能的。
另外，NHE抑制劑同樣適用于治療休克類型的疾病，如過敏性、心原性、血容量減少性和細(xì)菌性休克。
式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽同樣可用于預(yù)防和治療血栓形成性疾病，因?yàn)樽鳛镹HE抑制劑，它們本身能夠抑制血小板的凝聚。另外，它們能夠抑制或者防止局部缺血或再灌注后炎癥和凝結(jié)介導(dǎo)因子，特別是von Willebrand因子和凝血酶原選擇蛋白的過量釋放。因此，可以減少和消除重要的凝血酶原因子的致病作用。所以，本發(fā)明的NHE抑制劑可與其它抗凝血?jiǎng)┖?或溶栓活性成分組合，例如，重組或天然組織的纖溶酶原激活劑、鏈激酶、尿激酶、乙酰水楊酸、凝血酶拮抗劑、Xa因子拮抗劑、具有纖維蛋白溶解活性的藥物、血栓烷受體拮抗劑、磷酸二酯酶抑制劑、VIIa因子拮抗劑、氯吡格雷、噻氯匹定等。本發(fā)明NHE抑制劑與NCBE抑制劑和/或與碳酸脫水酶抑制劑如，與乙酰唑胺組合使用是特別有益的。
另外，NHE抑制劑對(duì)細(xì)胞增殖，例如成纖維細(xì)胞增殖和血管平滑肌細(xì)胞增殖具有強(qiáng)的抑制作用。所以，式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽適于用作細(xì)胞增殖表現(xiàn)為主要或次要原因疾病的有價(jià)值的治療劑，并且可用作抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物、慢性腎衰或癌癥的治療劑。
NHE抑制劑對(duì)細(xì)胞遷移可能具有抑制作用。所以，式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽適于用作細(xì)胞遷移表現(xiàn)為主要或次要原因的疾病，例如，有顯著轉(zhuǎn)移趨勢的癌癥的有價(jià)值的治療劑。
NHE抑制劑還可緩解或防止纖維變性疾病。因此，它們適于作為治療心臟纖維化和肺纖維化、肝纖維化、腎纖維化和其它纖維變性疾病的極好的治療劑。它們可用于治療器官肥大和增生，例如治療心臟和前列腺肥大和增生。所以，它們適用于預(yù)防和治療心衰(充血性心衰＝CHF)和用于治療和預(yù)防前列腺增生和肥大。
由于原發(fā)性高血壓患者的NHE明顯升高，式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽適用于預(yù)防和治療高血壓和心血管疾病。在這些情況下，它們可被單獨(dú)使用或者與治療高血壓和心血管疾病的合適聯(lián)用產(chǎn)品和配制的組合產(chǎn)品進(jìn)行使用。因此，例如，它們可與一種或多種具有噻嗪樣作用的利尿劑、髓袢利尿劑、醛固酮和偽醛固酮拮抗劑如雙氫克尿噻、吲達(dá)帕胺、聚噻嗪(polythiazide)、速尿、吡咯他尼、托拉塞米、布美他尼、阿米洛利、氨苯蝶啶、螺內(nèi)酯或eplerone合用。本發(fā)明NHE抑制劑也可以與鈣通道拮抗劑如維拉帕米、地爾硫、氨氯地平或硝苯地平合用，與ACE抑制劑如雷米普利、依那普利、賴諾普利、福辛普利或卡托普利合用。其它有益的聯(lián)合使用的藥物也可以是β阻滯劑如美托洛爾、沙丁醇胺等，血管緊張素受體及其亞受體拮抗劑如氯沙坦、伊貝沙坦、纈沙坦、奧馬曲拉、gemopatrilat、內(nèi)皮素拮抗劑，腎素抑制劑，腺苷受體激動(dòng)劑，鉀通道抑制劑和激活劑如格列本脲、格列美脲、二氮嗪、色馬開倫(cromakalim)、米諾地爾及其衍生物，線粒體ATP-敏感性鉀通道(mitoK(ATP)通道)活化劑，Kv1.5抑制劑等。
已發(fā)現(xiàn)NHE1抑制劑具有明顯的抗炎作用，因此可用作抗炎藥。就此而言，對(duì)炎癥介質(zhì)釋放的抑制作用是非常顯著的。因此，化合物可單獨(dú)或與抗炎藥聯(lián)合用于預(yù)防或治療慢性和急性炎性疾病。有效的聯(lián)合用藥為甾體或非甾體抗炎藥。本發(fā)明化合物也可以用于治療原生動(dòng)物引起的疾病，如家禽的瘧疾和球蟲病。
還發(fā)現(xiàn)，NHE抑制劑顯示對(duì)血清脂蛋白具有有益的作用。通常認(rèn)為，血脂水平(太高時(shí)，稱作高脂蛋白血癥)是產(chǎn)生動(dòng)脈硬化性血管損害，特別是冠心病的主要危險(xiǎn)因素。因此，降低升高的血清脂蛋白對(duì)于預(yù)防和消退冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性損傷非常重要。除降低總血清膽固醇外，降低所述總膽固醇中特定導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣化脂質(zhì)部分，特別是低密度脂蛋白(LDL)和極低密度脂蛋白(VLDL)的比例是特別重要的，因?yàn)檫@些脂質(zhì)部分構(gòu)成導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣化的危險(xiǎn)因素。相比之下，高密度脂蛋白具有抗冠心病的保護(hù)功能。因此，降血脂藥應(yīng)該不僅能夠降低總膽固醇，而且特別能夠降低VLDL和LDL血清膽固醇部分?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，NHE1抑制劑顯示與影響血清脂質(zhì)水平相關(guān)的有價(jià)值的治療可用特性。因此，可觀察到，例如，由于增加富含膽固醇和脂質(zhì)飲食的攝入量引起的，或者在病態(tài)性代謝改變的情況下，例如遺傳性高脂血癥，它們可明顯降低升高的LDL和VLDL的血清濃度。所以，它們因消除病因性危險(xiǎn)因素可以用于預(yù)防和消退動(dòng)脈粥樣硬化的損害。本文不僅包括原發(fā)性高脂血癥，也包括發(fā)生的某些繼發(fā)性高脂血癥，例如，與糖尿病相關(guān)的高脂血癥。另外，NHE抑制劑使代謝異常引起的梗塞明顯減少，特別是，使誘導(dǎo)的梗塞大小及其嚴(yán)重程度顯著減小。
因此，式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物有利地用于生產(chǎn)治療高膽固醇血癥的藥物；用于生產(chǎn)預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化形成的藥物；用于生產(chǎn)預(yù)防和治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物；用于生產(chǎn)預(yù)防和治療高膽固醇水平所致疾病的藥物；用于生產(chǎn)預(yù)防和治療內(nèi)皮功能障礙所致疾病的藥物；用于生產(chǎn)預(yù)防和治療動(dòng)脈粥樣硬化引起的高血壓的藥物；用于生產(chǎn)預(yù)防和治療動(dòng)脈粥樣硬化引起的血栓形成的藥物；用于生產(chǎn)預(yù)防和治療高膽固醇血癥引起的和內(nèi)皮功能障礙引起的局部缺血損傷和局部缺血后再灌注損傷的藥物；用于生產(chǎn)預(yù)防和治療高膽固醇血癥引起的和內(nèi)皮功能障礙引起的心臟肥大和心肌病和充血性心力衰竭(CHF)的藥物；用于生產(chǎn)預(yù)防和治療高膽固醇血癥引起的和內(nèi)皮功能障礙引起的冠狀血管痙攣和心肌梗塞的藥物；用于與降壓藥物，優(yōu)選與血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑和血管緊張素受體拮抗劑組合生產(chǎn)治療所述疾病的藥物。NHE抑制劑與降低血脂水平的活性成分，優(yōu)選與HMG-CoA還原酶抑制劑(例如洛伐他汀或普伐他汀)的聯(lián)用表明在增強(qiáng)作用和減少活性成分的使用方面是有利的，后一組分產(chǎn)生降低血脂的作用并因此增加NHE抑制劑降脂的特性。
因此，NHE抑制劑產(chǎn)生有效的的保護(hù)作用避免各種原因的內(nèi)皮損傷。這種對(duì)血管的保護(hù)作用以避免內(nèi)皮功能障礙綜合征使得式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽成為預(yù)防和治療冠狀血管痙攣、外周血管疾病，特別是間歇性跛行、動(dòng)脈粥樣化形成和動(dòng)脈粥樣硬化、左心室肥大和擴(kuò)張型心肌病和血栓形成疾病的有價(jià)值的藥物。
另外，發(fā)現(xiàn)NHE抑制劑適于治療非胰島素依賴性糖尿病(NIDDM)，局限于對(duì)胰島素耐受的。就此而論，對(duì)于增強(qiáng)本發(fā)明化合物的抗糖尿病活性和質(zhì)量，對(duì)于與雙胍(如二甲雙胍)、抗糖尿病磺酰脲(如格列本脲、格列美脲、甲苯磺丁脲等)、葡糖苷酶抑制劑、PPAR激動(dòng)劑(如羅格列酮、吡格列酮等)、不同給藥形式的胰島素產(chǎn)品、DB4抑制劑、胰島素敏感化劑或美美格列奈的組合使用是有利的。
除了急性抗糖尿病作用之外，NHE抑制劑阻礙了糖尿病晚期并發(fā)癥的發(fā)展，所以可用作預(yù)防和治療糖尿病晚期損傷如糖尿病腎病、糖尿病視網(wǎng)膜病、糖尿病心肌病和糖尿病引起的其它疾病的藥物。在這種情況下，它們與上述在NIDDM治療中描述的抗糖尿病藥物進(jìn)行組合是有利的。就此而論，與有益劑量形式的胰島素聯(lián)用應(yīng)當(dāng)是特別重要的。
NHE抑制劑除了顯示對(duì)急性局部缺血事件和隨后同樣急性的應(yīng)急再灌注事件的保護(hù)作用外，也顯示對(duì)整體哺乳動(dòng)物生物體疾病和病癥的直接的治療作用，所述疾病和病癥與表現(xiàn)為慢性進(jìn)行性老化過程相關(guān)，也獨(dú)立地發(fā)生于急性灌注不足病癥和在正常情況下的非局部缺血疾病中。用NHE抑制劑治療可以獲得改善的、在長期的老化過程中引起的如疾病、勞動(dòng)力喪失和死亡的這些病理性的、與年齡相關(guān)的癥狀主要是由重要器官及其功能與年齡相關(guān)性改變引起的疾病和病癥，并且在老化生物體中變得越來越重要。
與年齡相關(guān)性功能損害或與年齡相關(guān)性器官損耗癥狀有關(guān)的疾病是，例如，血管對(duì)收縮和舒張作用的不適當(dāng)?shù)膽?yīng)答和反應(yīng)性。NHE抑制劑可以明顯消除或減慢血管對(duì)收縮和舒張刺激反應(yīng)性(是心血管系統(tǒng)的基本過程，也是生命和健康的基本過程)的這種年齡相關(guān)性衰退。血管反應(yīng)性保持的一個(gè)重要函數(shù)和衡量標(biāo)準(zhǔn)是阻止或延遲年齡相關(guān)性內(nèi)皮功能障礙的進(jìn)展，而NHE抑制劑可以極明顯地消除這種進(jìn)展。因此，NHE抑制劑非常適合于治療和預(yù)防年齡相關(guān)性內(nèi)皮功能障礙的進(jìn)展，特別是間歇性跛行。
另一個(gè)表現(xiàn)為老化過程的參數(shù)是心臟收縮力的衰退和心臟對(duì)所需心泵出量適應(yīng)性的衰退。因衰老而引起的這種心臟功能的減退在大多數(shù)情況下與心臟的功能障礙相關(guān)，特別是由結(jié)締組織在心肌組織中沉積所引起的功能障礙。結(jié)締組織的沉積表現(xiàn)為心臟重量增加、心臟擴(kuò)大和有限的心臟功能。令人驚奇的是幾乎可以完全抑制心臟器官的這種老化。因此，NHE抑制劑非常適合于治療和預(yù)防心衰、充血性心力衰竭(CHF)。
抑制增殖作用不僅可以治療已經(jīng)發(fā)生的癌癥，而且通過NHE抑制劑對(duì)年齡相關(guān)性癌癥發(fā)生率具有預(yù)防和非常明顯的延緩作用。特別值得注意的是發(fā)現(xiàn)老化導(dǎo)致的所有器官的疾病而不僅僅是某些類型的癌癥都被抑制或非常明顯地延遲。因此，NHE抑制劑非常適合于治療、特別是預(yù)防年齡相關(guān)型癌癥。
現(xiàn)發(fā)現(xiàn)NHE抑制劑不僅使被調(diào)查的所有器官包括心臟、血管、肝等年齡相關(guān)性疾病的發(fā)生率在時(shí)間上非常明顯地延遲并且超出了正常的統(tǒng)計(jì)范圍，而且在老年人的癌癥發(fā)生率上也非常明顯地延遲。而且，也令人驚奇地將生命延長到其它藥物或任何天然產(chǎn)物所達(dá)不到的程度。NHE抑制劑的這種獨(dú)特作用使得除了能將該活性成分單獨(dú)用于人和動(dòng)物之外，也可以將這些NHE抑制劑與其它老年醫(yī)學(xué)中使用并基于不同的作用機(jī)理的有效成分、方法、物質(zhì)和天然產(chǎn)物聯(lián)用。在老年醫(yī)學(xué)治療中使用的活性成分的類型是特別是維生素和具有抗氧化活性的物質(zhì)。因?yàn)樵跓崃控?fù)荷或食物攝入和老化過程之間具有相關(guān)性，可以與進(jìn)食方法配合，例如與食欲抑制劑配合。同樣可以考慮與降血壓藥物如與ACE抑制劑、血管緊張素受體拮抗劑、利尿劑、Ca2+拮抗劑等，或者與代謝正?；幬锶缃档湍懝檀嫉乃幬锫?lián)用。因此，NHE抑制劑特別適用于預(yù)防與年齡有關(guān)的組織改變和延長生命同時(shí)保持高生活質(zhì)量。
本發(fā)明化合物是細(xì)胞的鈉-質(zhì)子反向轉(zhuǎn)運(yùn)劑(Na/H交換劑)的有效抑制劑，在各種各樣的疾病(原發(fā)性高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病等)中，很容易測得細(xì)胞例如，紅血球、血小板或白血球中這種反向轉(zhuǎn)運(yùn)劑也增加。因此，本發(fā)明化合物適用于作為好而簡單的科學(xué)工具用作如確定和區(qū)別不同類型高血壓和動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病和糖尿病后期并發(fā)癥、增殖疾病等的診斷劑。
也要求保護(hù)的是人用、獸醫(yī)用或植物保護(hù)用藥物，它包含有效量的一種或多種單一的或與其它活性藥物組分或藥物聯(lián)合的式XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽與可藥用載體和添加劑。因此，例如，含有式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽的藥物可以通過口服、非胃腸道、靜脈內(nèi)、直腸給藥或通過吸入給藥，優(yōu)選的給藥方法依賴于所述疾病的特性。式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物可單獨(dú)或與藥用賦形劑一起聯(lián)合用于獸醫(yī)用藥或人類用藥中。所述藥物通常含有0.01mg-1g/劑量單位的式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽。
適用于預(yù)期藥物制劑的賦形劑是專業(yè)技術(shù)人員基于其專業(yè)知識(shí)熟知的。除溶劑、凝膠形成劑、栓劑基質(zhì)、片劑賦形劑和其它活性組分載體外，例如，可使用抗氧化劑、分散劑、乳化劑、防沫劑、香料、防腐劑、增溶劑或著色劑。
在口服給藥的藥物制劑中，活性化合物與適用于該目的的添加劑如載體、穩(wěn)定劑或惰性稀釋劑混合，并通過常規(guī)方法轉(zhuǎn)化為適宜的劑型如片劑、包衣片、硬明膠膠囊、水溶液、醇溶液或油溶液?？墒褂玫亩栊暂d體的實(shí)例為阿拉伯膠、氧化鎂、碳酸鎂、磷酸鉀、乳糖、葡萄糖或淀粉，特別是玉米淀粉。此外可利用干顆?；驖耦w粒來制備制劑。適宜的油性載體或溶劑的實(shí)例為植物油或動(dòng)物油，如向日葵油或魚肝油。
在皮下、肌肉內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥的制劑中，需要時(shí)，所使用的活性化合物用該目的常規(guī)使用的物質(zhì)如增溶劑、乳化劑或其它賦形劑配制成溶液、懸浮液或溶劑。適宜的溶劑的實(shí)例為水、生理鹽水或醇，例如乙醇、丙醇、甘油、及糖溶液如葡萄糖或甘露醇溶液，或所述各溶劑的混合物。
例如，適用于以氣霧劑或噴霧劑形式給藥的藥物制劑為式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI活性組分和/或其可藥用鹽在可藥用溶劑特別是乙醇或水，或所述溶劑混合物中的溶液劑、懸浮液或乳劑。需要時(shí)，所述制劑也可以含有其它藥用賦形劑如表面活性劑、乳化劑和穩(wěn)定劑以及推進(jìn)劑氣體。例如，所述制劑通常含有濃度大約為0.1-10％、特別是大約為0.3-3％重量比的活性組分。
式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI活性組分的給藥劑量和給藥頻率依賴于所使用化合物作用的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間；還依賴于所治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重性，依賴于所治療哺乳動(dòng)物的性別、年齡、體重和個(gè)體反應(yīng)性。
對(duì)于體重大約為75kg的病人來說，式I、Ia、Ib、XVa、XVb和XVI化合物和/或其可藥用鹽的平均每日劑量至少為0.001mg/kg，優(yōu)選0.01mg/kg，最大為10mg/kg，優(yōu)選1mg/kg體重。對(duì)于急性發(fā)作的疾病，例如在剛剛發(fā)生心肌梗塞后，也可能需要給予更高的劑量，特別是更頻繁地給藥，例如每天達(dá)到4個(gè)單劑量。特別是當(dāng)靜脈給藥時(shí)，例如對(duì)于監(jiān)護(hù)病房心肌梗塞的病人，可能需要給予最大為700mg/天，并且本發(fā)明化合物可通過輸注給藥。
縮寫表DCC 二環(huán)己基碳二亞胺DIP 二異丙基醚TLC 薄層色譜層析DMF N，N-二甲基甲酰胺EA 乙酸乙酯eq. 當(dāng)量Et3N 三乙胺Et2O 乙醚EtOH乙醇h小時(shí)HEP 正庚烷HOAc 乙酸KOtBu 2-甲基-2-丙醇鉀MeOH甲醇min 分鐘mp 熔點(diǎn)
MTB 叔丁基-甲基醚NMP 1-甲基吡咯烷-2-酮Pd(OAc)2乙酸鈀(II)RT 室溫rt 保留時(shí)間tBu 叔丁基THF 四氫呋喃TMEDA N，N，N′，N′-四甲基-乙烷-1，2-二胺下文給出的保留時(shí)間指具有下列參數(shù)的HPLC分析獲得的保留時(shí)間方法A固定相Waters Symmetry C8(5μ)3.9×150mm流動(dòng)相等度CH3CN/0.1％ CF3CO2H水溶液35∶65；λ＝220nm；1ml/min。
方法B固定相Waters Symmetry C8(5μ)3.9×150mm流動(dòng)相等度CH3CN/0.1％ CF3CO2H水溶液40∶60；λ＝230nm；1ml/min。
方法C固定相Waters Symmetry C8(5μ)3.9×150mm流動(dòng)相等度CH3CN/0.1％ CF3CO2H水溶液50∶50；λ＝220nm；1ml/min。
實(shí)施例1a)N-(2，2，2-三氟乙基)-4-三氟甲基苯甲酰胺 將5.0g(24mmol)4-三氟甲基-苯甲?；群?.0ml(36mmol)三乙胺溶解在50ml CH2Cl2中并在室溫下緩慢地滴加2.4g(24mmol)2，2，2-三氟乙胺。將該混合物在室溫下攪拌4h，然后在減壓下除去揮發(fā)性組分。殘?jiān)?00ml MTB溶解并先用30ml飽和Na2CO3水溶液洗滌，然后用30ml飽和NaHSO4水溶液洗滌。用MgSO4干燥，得到6.1g(94％)無色樹脂，該樹脂在放置時(shí)結(jié)晶；mp117℃)+Rf(DIP)＝0.50MS(EI)271(M+1)+b)(R，S)-3-羥基-2-(2，2，2-三氟乙基)-5-三氟甲基-2，3-二氫異吲哚-1-酮 將0.37ml(2.4mmol)TMEDA和1.4ml(2.3mmol)1.5M t-BuLi的正戊烷溶液在-75℃下溶解在2ml THF(無水)中并在-75℃下滴加0.30g(1.1mmol)N-(2，2，2-三氟乙基)-4-三氟甲基苯甲酰胺在2ml THF中的溶液。將該混合物-75℃下攪拌3h，然后滴加0.43ml(5.5mmol)DMF并將該混合物在30分鐘內(nèi)溫?zé)嶂潦覝?。將反?yīng)混合物傾入100ml飽和NaHCO3水溶液中并用乙酸乙酯萃取3次，每次30ml。用MgSO4干燥并減壓除去溶劑。利用DIP在硅膠上色譜層析。除110mg起始材料的混合物外，得到80mg(R，S)-3-羥基-2-(2，2，2-三氟乙基)-5-三氟甲基-2，3-二氫異吲哚-1-酮。通過反向HPLC(條件見下文)再次分離混合物，并進(jìn)一步得到40mg(R，S)-3-羥基-2-(2，2，2-三氟乙基)-5-三氟甲基-2，3-二氫異吲哚-1-酮；總收率30％。
HPLC梯度，運(yùn)行時(shí)間20min洗脫劑0.1％ CF3CO2H水溶液，乙腈(Chromasolv)；流速30ml/min柱Waters XterraTMMS C185μm，30×100mm梯度0-2.5min10％乙腈3.0min25％乙腈14.0min 75％乙腈15.0min 95％乙腈17.5min 10％乙腈
Rf(DIP)＝0.50 MS(EI)299(M+1)+c)(RS)-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]-乙酸乙酯 在氬環(huán)境下，將(二乙氧基磷?；?乙酸乙酯(135mg，0.6mmol)溶解在無水二甲氧基乙烷(10ml)中。在室溫下，向該溶液中加入17.6mg NaH(60％油溶液)并在室溫下攪拌10min。然后，加入(RS)-3-羥基-2-(2，2，2-三氟乙基)-5-三氟甲基-2，3-二氫異吲哚-1-酮120mg(0.04mmol)的無水二甲氧基乙烷(5ml)溶液，接著將該混合物在回流下攪拌2h，放冷反應(yīng)溶液；然后將反應(yīng)溶液傾入50ml 5％碳酸氫鈉溶液中并用乙酸乙酯萃取兩次，每次20ml；有機(jī)相用MgSO4干燥并減壓濃縮，殘?jiān)ㄟ^用DIP作為洗脫劑在硅膠上色譜層析純化。得到90mg(61％)(RS)-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]-乙酸乙酯的無色油狀物，從庚烷中結(jié)晶得到米色固體。
Rf(DIP)＝0.31NMR光譜與實(shí)施例4制備的物質(zhì)的相同。
d)(R，S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍 如實(shí)施例2g)所述，(RS)-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙酸乙酯可以與胍反應(yīng)。
實(shí)施例2a)2-硝基-4-三氟甲基苯甲酸 在室溫下，將11.97g 4-三氟甲基苯甲酸(63mmol)緩慢地分次加入48ml HNO3(100％)中。接著將該混合物加熱回流1h，然后冷卻至室溫并傾入大約600g冰上。將該混合物攪拌1h，然后過濾出沉淀物并用1l水洗滌。濾液用300ml CH2Cl2萃取，將有機(jī)相與沉淀物合并并用Na2SO4干燥。減壓除去溶劑，殘?jiān)ㄟ^在68℃下溶解在1 l DIP中，在該溫度下加入2l正庚烷并最終將該溶液緩慢地冷卻至室溫進(jìn)行重結(jié)晶。結(jié)晶產(chǎn)物用1l正庚烷洗滌并減壓干燥，得到7.1g產(chǎn)物(48％)，mp136℃-138℃。
b)2-氨基-4-三氟甲基苯甲酸 將250g 2-硝基-4-三氟甲基苯甲酸(1.06mol)溶解在1l EtOH中并加入7.5g Pd/C(5％)，將該混合物在1-2.5bar氫氣壓下氫化。在氫氣吸收過程中，溫度暫時(shí)從10℃升至104℃。2h后，氫氣吸收結(jié)束。隨后，過濾出催化劑并減壓除去溶劑，得到215g(99％)淡黃色固體，mp 174-176℃。
c)2-((E)-2-乙氧基羰基乙烯基)-4-三氟甲基苯甲酸
將520mg NaNO2(7.6mmol)溶解在2ml水中并在0℃下滴加到1.3g 2-氨基-4-三氟甲基苯甲酸(6.5mmol)在2.6ml 48％ HBF4水溶液和30ml乙醇的溶液中。然后，將該混合物在0℃下攪拌10分鐘，然后溫?zé)嶂潦覝?。然后再加?.3ml 48％ HBF4水溶液、30ml乙醇、0.9g丙烯酸乙酯(9.0mmol)和26.9mg Pd(OAc)2(0.12mmol)。接著將該混合物在50-60℃下攪拌1h。然后減壓除去溶劑，殘?jiān)?5ml乙酸乙酯溶解并先用25ml 1N HCl水溶液洗滌，再用25ml NaCl水溶液洗滌。有機(jī)相用Na2SO4干燥并減壓除去溶劑。將殘?jiān)鼞腋≡?5ml庚烷中并過濾出沉淀產(chǎn)物。收率1.3g(69％)淡棕色固體。通過從庚烷/乙酸乙酯中結(jié)晶純化分析樣品。
NMR光譜與實(shí)施例3a制備的物質(zhì)相同。
d)(E)-3-[2-(2，2，2-三氟乙基氨基甲?；?-5-三氟甲基-苯基]丙烯酸乙酯 1.3g 2-(2-乙氧基羰基乙烯基)-4-三氟甲基苯甲酸(4.5mmol)和453mg2，2，2-三氟乙胺(4.5mmol)溶解在5ml DMF中并加入0.93g DCC。將該混合物在室溫下攪拌4h。通過過濾除去尿素副產(chǎn)物，然后減壓除去溶劑。殘?jiān)鼜腄IP中重結(jié)晶得到1.6g(96％)白色結(jié)晶。
NMR光譜與實(shí)施例3b制備的物質(zhì)相同。
e)(RS)-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]-乙酸 將2.2g(E)-3-[2-(2，2，2-三氟乙基氨基甲酰基)-5-三氟甲基-苯基]丙烯酸乙酯(5.9mmol)溶解在10ml甲醇中并加入1.5ml 5M NaOH水溶液(7.5mmol)。將該混合物在室溫下攪拌18h，然后利用HCl水溶液調(diào)至pH＝7。減壓除去溶劑并將殘?jiān)鼞腋≡?0ml水中。該懸浮液用2N HCl水溶液調(diào)至pH＝2并用乙酸乙酯萃取3次，每次10ml。用Na2SO4干燥并減壓除去溶劑。殘?jiān)靡颐?DIP結(jié)晶，mp202-204℃。
產(chǎn)量1.8g(89％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝3.07(dd，J1＝17Hz，J2＝6Hz，1H)，3.23(dd，J1＝17Hz，J2＝5Hz，1H)，4.27(m，1H)，4.58(m，1H)，5.08(t，J＝5Hz，1H)，7.91(d，J＝8Hz，1H)，7.96(d，J＝8Hz，1H)，8.12(s，1H)，12.50(bs，1H)ppm。
燃燒分析C13H9F6NO3(341.2)計(jì)算值C 45.76，H 2.66，N 4.10；實(shí)測值C 45.71，H 2.43，N 4.11。
f)(RS)-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]-乙酸乙酯 將2.6ml SOCl2(35mmol)溶解在20ml乙醇中并在-10℃下加入3.4g(R，S)-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]-乙酸(10mmol)。將該混合物在室溫下攪拌18h并隨后減壓除去揮發(fā)性組分。殘?jiān)?∶1 HEP/EA在硅膠上色譜層析。產(chǎn)量3.0g(81％)無色油狀物，在庚烷中結(jié)晶得到米色固體。
NMR光譜與實(shí)施例4制備的物質(zhì)相同。
g)(RS)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍 鹽酸胍(11.5g，120mmol)溶解在NMP(45ml)中并在攪拌下加入KOtBu(11.2g，100mmol)，將該混合物在室溫下攪拌1.5h并過濾。濾液在室溫?cái)嚢柘碌渭拥?RS)-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙酸乙酯(7.38g，20mmol)的NMP(12ml)溶液中并在室溫下再攪拌60min。隨后加入冰水(270ml)，將該混合物利用2N HCl調(diào)至pH7，加入乙酸乙酯(60ml)并隨后通過加入NaHCO3水溶液將pH調(diào)至8-8.5。將該混合物在室溫下充分?jǐn)嚢?h，吸濾所形成的沉淀并用水洗滌。得到7.06g(83％)(R，S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍，含有0.5當(dāng)量乙酸乙酯，為淡黃色結(jié)晶，mp.160-161℃，逐漸加熱，乙酸乙酯在大約90℃逸出。
Rf(乙酸乙酯/甲醇)＝0.451H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝2.54(dd，J1＝8Hz，J2＝16Hz，1H)，3.09(dd，J1＝4Hz，J2＝16Hz，1H)，4.25(m，1H)，4.64(m，1H)，5.18(m，1H)，6.65(bs，2H)，7.75(bs，2H)，7.88(d，J＝8Hz，1H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.02(s，1H)ppm。
C14H12F6N4O21/2C4H8O2(426.33)計(jì)算值C 45.08，H 3.78，N 13.14；實(shí)測值C 45.07，H 3.79，N 13.01。
實(shí)施例3
a)2-((E)-2-乙氧基羰基乙烯基)-4-三氟甲基苯甲酸(實(shí)施例2c的變體) 在室溫下，向339g 2-氨基-4-三氟甲基苯甲酸(1.65mol)的6.8 l EtOH(無水)溶液中加入658ml 48-50％ HBF4水溶液。溫度從21℃升至26℃。然后將該混合物冷卻至0℃并在17分鐘內(nèi)，在0℃至5℃滴加125g NaNO2的500ml水溶液。最初淡黃色的溶液首先變成橙紅色懸浮液并最終變成淡黃色懸浮液。通過HPLC監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程(方法B；2-氨基-4-三氟甲基苯甲酸，保留時(shí)間＝6.4min；2-羧基-5-三氟甲基苯重氮鹽中間體＝1.1min)。在30分鐘內(nèi)，向2-羧基-5-三氟甲基苯重氮鹽的轉(zhuǎn)化＞99％完成。然后，將該混合物加到231g丙烯酸乙酯(2.31mol)、11.1g Pd(OAc)2(49mmol)和6.8l乙醇(無水)中并將該混合物加熱至49-51℃。觀察到，隨著溫度的增加，氮的均勻釋放增加。該反應(yīng)通過HPLC監(jiān)測(方法B；2-((E)-2-乙氧基羰基乙烯基)-4-三氟甲基苯甲酸保留時(shí)間＝16.4min)。45分鐘后，轉(zhuǎn)化程度超過99％。然后，將混合物冷卻至室溫并減壓除去溶劑。殘?jiān)芙庠?l乙酸乙酯中并過濾。然后將濾液先用HCl水溶液洗滌3次，每次2.1l，然后用1l飽和NaCl水溶液洗滌。用Na2SO4干燥并減壓除去溶劑，得到449g淡棕色固體。當(dāng)考慮雜質(zhì)(4-三氟甲基苯甲酸；6.3％)和溶劑殘?jiān)?EA；4％)時(shí)，收率83％。分析樣品通過在庚烷/乙酸乙酯中結(jié)晶純化。Mp132-133℃1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝1.36(t，J＝7Hz，3H)，4.31(q，J＝7Hz，2H)，6.41(d，J＝16Hz，1H)，7.72(d，J＝8Hz，1H)，7.86(s，1H)，8.21(d，J＝8Hz，1H)，8.51(d，J＝16Hz，1H)，8.5-9.5(bs，1H)ppm。
燃燒分析C13H11F3O4(288.23)計(jì)算值C 54.17，H 3.85；實(shí)測值C54.24，H 3.74。
b)(E)-3-[2-(2，2，2-三氟乙基氨基甲酰基)-5-三氟甲基-苯基]丙烯酸乙酯
在15-18℃的溫度下，在24分鐘內(nèi)，將315g草酰氯(2.48mol)加到650g2-((E)-2-乙氧基羰基乙烯基)-4-三氟甲基苯甲酸(2.25mol)、33ml DMF和7.81 CH2Cl2的混合物中。將該混合物在室溫下攪拌1h，然后冷卻至5℃，在5℃至10℃的溫度下，在27分鐘內(nèi)加入285g Et3N((2.81mol)。將該混合物在5℃下攪拌10min，然后在9℃至20℃的溫度下，在27min內(nèi)加入279g 2，2，2-三氟乙胺(2，81mol)。將該混合物在室溫下攪拌10min，在此過程中沉淀出濃沉淀，并且為了改變該混合物的可攪拌性，再加入1lCH2Cl2。該反應(yīng)通過HPLC監(jiān)測(方法C；2-((E)-2-乙氧基羰基乙烯基)-4-三氟甲基苯甲酸，保留時(shí)間＝5.9min；(E)-3-[2-(2，2，2-三氟乙基氨基甲?；?-5-三氟甲基苯基]丙烯酸乙酯rt＝13.2min)。在室溫下再攪拌50min后，該反應(yīng)結(jié)束。然后減壓除去反應(yīng)混合物中的揮發(fā)性組分，將殘?jiān)?2l乙酸乙酯溶解并用水洗滌3次，每次2.5l，然后用飽和NaHCO3水溶液洗滌兩次，每次2.51，最后用1.51飽和NaCl水溶液洗滌。用MgSO4干燥，減壓除去溶劑，得到802g(E)-3-[2-(2，2，2-三氟乙基氨基甲酰基)-5-三氟甲基苯基]丙烯酸乙酯的棕色固體。將該粗品物質(zhì)與另一批粗品(177g)合并并在60-70℃下溶解在3l乙酸乙酯中，在該溫度下以1l為一部分，分次加入14l正庚烷，然后，將該混合物加熱至80℃并在該溫度下攪拌1.5h。然后將該混合物在70℃下加到5.6l正庚烷中，然后將該混合物在攪拌下，在5h內(nèi)冷卻至室溫。然后將該產(chǎn)物過濾，用3l正庚烷洗滌并風(fēng)干，得到689g(E)-3-[2-(2，2，2-三氟乙基氨基甲酰基)-5-三氟甲基-苯基]丙烯酸乙酯(67％)，得到淡棕色固體。Mp161.5-162℃。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝1.33(t，J＝7Hz，3H)，4.05(m，2H)，4.26(q，J＝7Hz，2H)，6.19(bs，1H)，6.46(d，J＝16Hz，1H)，7.63(d，J＝8Hz，1H)，7.68(d，J＝8Hz，1H)，7.87(s，1H)，7.90(d，J＝16Hz，1H)ppm。
燃燒分析C15H13F6NO3(369.27)計(jì)算值C 48.79，H 3.55，N 3.79；實(shí)測值C 48.93，H 3.51，N 3.92。
c)(R，S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-H-異吲哚-1-基]乙酰基}胍 將386g(E)-3-[2-(2，2，2-三氟乙基氨基甲酰基)-5-三氟甲基-苯基]丙烯酸乙酯(1.05mol)懸浮在600ml DMF中并在5℃至15℃的溫度下緩慢地分次加到4.7g KOtBu(42mmol)中。通過TLC(HEP/EA＝2∶1；丙烯酸乙酯Rf＝0.32；異吲哚酮Rf＝0.41)監(jiān)測異吲哚酮的環(huán)化。1小時(shí)后，反應(yīng)結(jié)束。同時(shí)將587g KOtBu懸浮在2.2 l DMF中并在20℃至25℃的溫度下加入600g鹽酸胍。將該混合物在25℃下攪拌1h，然后濾出KCl。然后將含有被釋放胍的濾液加到含有異吲哚酮的反應(yīng)混合物中并在室溫下攪拌2h。通過HPLC(方法B；波長230nm和254nm；異吲哚酮保留時(shí)間＝15.1min；酰基胍保留時(shí)間＝2.9min)監(jiān)測向?；业霓D(zhuǎn)化。接著將該反應(yīng)混合物傾入14l冰水中，用HCl水溶液調(diào)至pH＝8.5-9.0，用乙酸乙酯萃取4次，每次3l。然后將該混合物用飽和NaCl水溶液洗滌3次，每次3l，并用Na2SO4干燥，減壓除去溶劑。得到329g(82％)棕色固體。將該產(chǎn)物與其他3批相同制備方法制備的產(chǎn)物合并；總量842g。將該842g(2.2mol)產(chǎn)物在30℃下，在2l乙酸乙酯和5l Et2O中浸煮2h。然后過濾出固體，用Et2O洗滌兩次，每次2l并減壓干燥。得到693g(82％回收率)幾乎為白色的固體。從2-丙醇中結(jié)晶的化合物是含有0.5當(dāng)量2-丙醇的包合物。
NMR光譜與實(shí)施例5b制備的S-對(duì)映異構(gòu)體相同。
實(shí)施例4通過一鍋反應(yīng)，由2-((E)-2-乙氧基羰基乙烯基)-4-三氟甲基苯甲酸制備(RS)-(2-(2，2，2-三氟乙基)-3-氧代-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基)乙酸乙酯 在室溫下，將SOCl2(1.98g，27.2mmol)加到2-((E)-2-乙氧基羰基乙烯基)-4-三氟甲基苯甲酸(2.9g，10.1mmol)的甲苯(30ml)懸浮液中。將該混合物在室溫下攪拌5min，然后30min內(nèi)加熱至105℃(浴溫)。在大約70℃開始排出氣體。將該混合物在105℃下攪拌3h，然后冷卻至室溫，通過Kieselgur層(2.5×0.5cm)吸濾并用甲苯洗滌，通過減壓蒸發(fā)濃縮濾液。得到紅棕色油狀物的酰氯(3.34g)。將2，2，2-三氟乙胺(1.2g，12.1mmol)和三乙胺(2.58g，25.3mmol)在5℃下溶解在二氯甲烷(15ml)中，在冰冷卻下，以溫度保持在5℃至10℃的速度滴加溶解在二氯甲烷(20ml)中的酰氯。然后撤除冰浴并在一般真空下蒸餾過量的三氟乙胺和部分二氯甲烷。接著將該混合物在回流下加熱至沸騰10h。冷卻后，將該混合物用二氯甲烷(50ml)稀釋并用2N HCl水溶液(每次50ml)萃取2次，合并的有機(jī)相用水(100ml)洗滌，用Na2SO4干燥并減壓濃縮。得到(RS)-(2-(2，2，2-三氟乙基)-3-氧代-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基)乙酸乙酯(3.51g，94％)的暗棕色油狀物，通過在正庚烷中結(jié)晶純化。Mp54.5-55.5℃。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝1.15(t，J＝7Hz，3H)，2.85(dd，J1＝6Hz，J2＝16Hz，1H)，3.01(dd，J1＝5Hz，J2＝16Hz)，1H)，3.83(m，1H)，4.12(q，J＝7Hz，2H)，4.73(m，1H)，5.17(t，J＝6Hz，1H)，7.80(m，2H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)ppm。
燃燒分析C15H13F6NO3(369.27)計(jì)算值C 48.79，H 3.55，N 3.79；實(shí)測值C 48.54，H 3.49，N 3.79。
實(shí)施例5
a)(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙酰基}胍，O，O′-二苯甲?；?L-酒石酸鹽 首先加入(RS)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍(與乙酸乙酯的包合物，通過NMR測定含量為87.06％，44g，100mmol)和O，O′-二苯甲?；?L-酒石酸(11.2g，31mmol)的固體并在攪拌下滴加2-丙醇(500ml)。固體開始時(shí)充分溶解，有白色固體沉淀出來。30min后，將混合物加熱至70℃。再次得到幾乎澄清的溶液。將其在4h內(nèi)放置冷卻至室溫并隨后在該溫度下攪拌過夜。然后，將該混合物在10℃下攪拌4h并隨后吸濾。將殘?jiān)?-丙醇洗滌兩次(每次100ml)并晾干。得到通過HPLC(Chiracel OD/21，250×4.6mm，50∶5∶2正庚烷/乙醇/甲醇，1ml/min，30℃)測定對(duì)映異構(gòu)體純度為82％ ee的28.05g(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍，O，O′-二苯甲酰基-L-酒石酸鹽(基于(S)-對(duì)映異構(gòu)體，收率為74％)的無色結(jié)晶。首先加入20g(14.6mmol)這些結(jié)晶，并滴加2-丙醇(400ml)。將該混合物在攪拌下加熱至80℃，然后放置逐漸冷卻至室溫。將該混合物在該溫度下再攪拌2h，然后吸濾，殘?jiān)?-丙醇洗滌兩次(每次50ml)并晾干。得到通過HPLC(條件如上)測定，對(duì)映異構(gòu)體純度＞97％ ee的16.3g(基于(S)-對(duì)映異構(gòu)體，收率為100％)(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙酰基}胍，O，O′-二苯甲酰基-L-酒石酸鹽的無色結(jié)晶，mp192-193℃。
燃燒分析C14H12F6N4O2·1/2 C18H14O8(561.43)計(jì)算值C 49.21，H3.41，N 9.98；實(shí)測值C 49.17，H 3.30，N 9.97。
b)(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍 將(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙酰基}胍，O，O′-二苯甲酰基-L-酒石酸鹽(113mg，0.20mmol)溶解在水(1ml)和乙酸乙酯(5ml)的混合物中，并加入NaHCO3(50mg)的水(7.5ml)溶液。將該混合物在室溫下攪拌16h，然后用乙酸乙酯萃取3次(每次5ml)。合并的有機(jī)相用NaHCO3(50mg)的水(20ml)溶液振搖一次，然后用純水(20ml)振搖，用Na2SO4干燥并通過減壓蒸發(fā)濃縮。得到75mg(97％)(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙酰基}胍。將產(chǎn)物從2-丙醇中結(jié)晶得到含有0.5當(dāng)量2-丙醇的包合物，mp80-82℃。該物質(zhì)可以從乙酸乙酯中重結(jié)晶并且與0.5當(dāng)量乙酸乙酯一起結(jié)晶，mp.121.5-122℃。
通過HPLC(Chiracel OD/21，250×4.6mm，正庚烷/2-丙醇4∶1.1ml/min，30℃)測定，對(duì)映異構(gòu)體純度＞97％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝2.54(dd，J1＝8Hz，J2＝16Hz，1H)，3.09(dd，J1＝4Hz，J2＝16Hz，1H)，4.25(m，1H)，4.64(m，1H)，5.18(m，1H)，6.65(bs，2H)，7.75(bs，2H)，7.88(d，J＝8Hz，1H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.02(s，1H)ppm。
燃燒分析(含有0.5當(dāng)量2-丙醇的包合物)C14H12F6N4O2·1/2C3H8O(412.32)計(jì)算值C 45.15，H 3.91，N 13.59；實(shí)測值C 45.23，H 4.27，N13.10。
實(shí)施例6通過將(R)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍外消旋化制備(RS)-N-2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍 將(R)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍(含有0.5當(dāng)量2-丙醇的包合物(M＝412.3)，43g，104mmol；通過濃縮實(shí)施例5a)中的(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍，O，O′-二苯甲酰基-L-酒石酸鹽獲得的母液獲得，并如實(shí)施例5b)所述用NaHCO3處理)溶解在2-丙醇(1.8)中并在室溫?cái)嚢柘录尤隟OH(85％，660mg，10mmol)的2-丙醇(400ml)溶液。將該混合物在室溫下攪拌24h，然后用冰乙酸酸化(720mg，1.5ml)并通過在大約40℃的浴溫下減壓蒸發(fā)濃縮，將殘?jiān)谒?500ml)和乙酸乙酯(400ml)之間分配。水相用乙酸乙酯萃取兩次(每次300ml)，將合并的有機(jī)相與NaHCO3(10g)的水(500ml)溶液一起振搖，然后再與純水一起振搖。有機(jī)相用Na2SO4干燥并通過在大約40℃的浴溫下減壓蒸發(fā)濃縮。得到通過NMR測定含量為87％的39.8g(RS)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙酰基}胍，含有0.5當(dāng)量乙酸乙酯的包合物，為淡黃色結(jié)晶，收率87％。Mp164-166℃，當(dāng)逐漸加熱時(shí)，乙酸乙酯在大約100℃下逸出。
通過HPLC(Chiracel OD/21，250×4.6mm，正庚烷/2-丙醇4∶1.1ml/min，30℃)測定，對(duì)映異構(gòu)體比例為49∶51。
實(shí)施例7(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙酰基}胍富馬酸氫鹽水合物
將(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍[含有0.5當(dāng)量2-丙醇的包合物，(M＝412.3)，110g，266mmol]溶解在二甲氧基乙烷(2l)中并與富馬酸溶液(0.5M的二甲氧基乙烷/水9∶1，512ml)混合，然后通過減壓蒸發(fā)濃縮所形成的澄清的溶液。將殘?jiān)枚燃淄?2l)溶解，混合物通過減壓蒸發(fā)再次濃縮。殘?jiān)鼞腋≡谒?1.5 l)中，在室溫下吸濾并在室溫下晾干過夜。得到125.9g(95％)(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙酰基}胍富馬酸氫鹽水合物的無色結(jié)晶，Mp.210℃。
NHE抑制作用的測定如下測定NHE-1抑制作用的抑制濃度IC50。
在FLIPR試驗(yàn)中，通過測定表達(dá)人類NHE-1的轉(zhuǎn)染細(xì)胞系中pHi的回收率來測定NHE抑制活性IC50。
該試驗(yàn)在備有底部透亮、四周壁面為黑色的96孔微量滴定板的FLIPR(熒光成象板讀數(shù)儀)上進(jìn)行。前一天，以～25 000個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種表達(dá)各種亞型NHE的轉(zhuǎn)染細(xì)胞系(母細(xì)胞系LAP-1顯示沒有作為誘變和后來進(jìn)行選擇結(jié)果的內(nèi)源性NHE活性)。轉(zhuǎn)染細(xì)胞的生長培養(yǎng)基(Iscove+10％胎牛血清)中也含有G418作為選擇抗生素來確保轉(zhuǎn)染序列的存在。
通過除去生長培養(yǎng)基并在每孔中加入100μl加樣緩沖液(5μM的BCECF-AM[2′，7′-二(羧基乙基)-5-(和6-)-羧基熒光素乙酰氧基甲基酯]在20mM的NH4Cl、115mM氯化膽堿、1mM的MgCl2、1mM的CaCl2、5mM的KCl、20mM的HEPES和5mM葡萄糖中；pH7.4[用KOH調(diào)節(jié)])開始試驗(yàn)。然后，細(xì)胞在37℃下培養(yǎng)20分鐘。該培養(yǎng)使熒光染料(其熒光強(qiáng)度取決于pHi)和使細(xì)胞略微堿化的NH4Cl負(fù)載于細(xì)胞中。
非熒光染料前體BCECF-AM是一種能夠穿過細(xì)胞膜的酯。在細(xì)胞中，酯酶釋放不能穿過細(xì)胞膜的真正的BCECF染料。
培養(yǎng)20分鐘后，在細(xì)胞洗滌裝置(Tecan Columbus)中洗滌3次以除去加樣緩沖液，其中包含NH4Cl和游離的BCECF-AM，每次洗滌使用400μl的洗滌緩沖液(133.8mM的氯化膽堿、4.7mM的KCl、1.25mM的MgCl2、1.25mM的CaCl2、0.97mM的K2HPO4、0.23mM的KH2PO4、5mM的HEPES和5mM的葡萄糖；pH7.4[用KOH調(diào)節(jié)])。保留在孔中的殘余體積是90μl(可能在50和125μl之間)。該洗滌步驟除去游離的BCECF-AM并導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)酸化(pHi為6.3-6.4)，這是由于除去了外部的NH4+離子所致。
由于除去細(xì)胞外的NH4+并且NH3隨后立即橫過細(xì)胞膜而使細(xì)胞內(nèi)NH4+與NH3和H+之間的平衡受到破壞，洗滌過程導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)H+保留，這是細(xì)胞內(nèi)酸化的原因。這種酸化如果持續(xù)足夠長時(shí)間，可最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。洗滌緩沖液不含鈉(＜1mM)這一點(diǎn)是重要的，否則，細(xì)胞外鈉離子會(huì)由于克隆的NHE同種型的活性導(dǎo)致pHi立即增加。
所使用的所有緩沖液(加樣緩沖液、洗滌緩沖液和再生緩沖液)不含有任何HCO3-離子也是重要的，否則存在的碳酸氫根會(huì)導(dǎo)致干擾依賴碳酸氫根的pHi調(diào)節(jié)系統(tǒng)激活，該系統(tǒng)包含在LAP-1親本細(xì)胞系中。
然后，將含有酸化細(xì)胞的微滴定板(酸化后20分鐘)轉(zhuǎn)移到FLIPR中。在FLIPR中，用488nm波長的光激活細(xì)胞內(nèi)熒光染料，此波長的光是由氬激光產(chǎn)生的，并選擇測量參數(shù)(激光功率、光照時(shí)間和安裝在FLIPR上的CDD照相機(jī)的光圈)使得每孔熒光信號(hào)的平均值在30000和35000的相對(duì)熒光單位之間。
用CCD照相機(jī)在軟件控制下每2秒鐘拍照一次來進(jìn)行測量。10秒鐘后，使用安裝在FLIPR中的96孔吸液管裝置加入90μl再生緩沖液(133.8mM的NaCl、4.7mM的KCl、1.25mM的MgCl2、1.25mM的CaCl2、0.97mM的K2HPO4、0.23mM的KH2PO4、10mM的HEPES和5mM的葡萄糖；pH7.4[用NaOH調(diào)節(jié)])使細(xì)胞內(nèi)pH開始增加。加入純再生緩沖液的某些孔作為陽性對(duì)照(100％ NHE活性)。陰性對(duì)照(0％ NHE活性)含有洗滌緩沖液。將具有兩個(gè)試驗(yàn)物質(zhì)濃度的再生緩沖液加到所有其它孔中。測量60次之后，終止FLIPR中的測量(2分鐘)。
將原始數(shù)據(jù)輸入ActivityBase程序。該程序首先計(jì)算各試驗(yàn)物質(zhì)濃度下的NHE活性，得到各物質(zhì)的IC50值。由于在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中pHi再生的過程不是線性的，而且在終點(diǎn)時(shí)有點(diǎn)下降，這是由于在高pHi下NHE活性降低，所以選擇陽性對(duì)照熒光增加為線性的部分來評(píng)估測定是重要的。
權(quán)利要求
1.一種制備式I化合物及其鹽的方法 其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；該方法包括 a)將式IV酰胺甲?；?，然后環(huán)化為式VI化合物，b)將式VI化合物與烷氧基羰基亞甲基三苯基-正膦反應(yīng)，與1-烷氧基-1-三甲硅烷氧基乙烯或與膦酰乙酸三烷基酯反應(yīng)，得到式VII化合物，和c)式VII化合物與胍反應(yīng)，得到式I化合物及其鹽，其中，在式IV、VI和VII化合物中，R1-R3各自如式I定義，并且R5為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基。
2.權(quán)利要求1的制備式I化合物及其鹽的方法，其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；其中 a)將式II化合物與式III胺反應(yīng)，得到式IV酰胺，b)將式IV酰胺在酰胺官能團(tuán)的鄰位甲?；?，得到式V甲?；０?，c)將式V甲酰基酰胺環(huán)化，得到式VI化合物，d)將式VI化合物與烷氧基羰基亞甲基三苯基正膦反應(yīng)，與1-烷氧基-1-三甲硅烷氧基乙烯反應(yīng)或與膦酰乙酸三烷基酯反應(yīng)，得到式VII化合物，和e)將式VII化合物與胍反應(yīng)，得到式I化合物及其鹽，其中，在式II、III、IV、V、VI和VII化合物中，R1-R3各自如式I定義化合物，R5為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基，X為Cl、Br、OH或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基。
3.權(quán)利要求1和/或2的方法，其中所述步驟彼此獨(dú)立地連續(xù)進(jìn)行或分批進(jìn)行。
4.權(quán)利要求1、2或3中一項(xiàng)或多項(xiàng)的方法，其中式I化合物定義為N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙酰基}胍及其可藥用鹽。
5.一種制備式I化合物及其可藥用鹽的方法 其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；該方法包括 a)將式IX胺通過重氮鹽與丙烯酸烷基酯反應(yīng)，得到式XI肉桂酸衍生物，b)將式XI化合物與式III胺和胍反應(yīng)，得到式I?；壹捌潲}，其中，在式III、IX和XI化合物中，R1-R3各自如式I定義，并且R6為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基。
6.權(quán)利要求5的制備式I化合物及其鹽的方法，其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；其中 a)將式VIII硝基化合物轉(zhuǎn)化為式IX胺，b)將式IX胺轉(zhuǎn)化為式X重氮鹽，c)將式X重氮鹽與丙烯酸烷基酯反應(yīng)，得到式XI肉桂酸衍生物，d)將式XI化合物轉(zhuǎn)化為式XII酰胺，和e)將式XII化合物轉(zhuǎn)化為式I?；遥渲型ㄟ^在堿存在下，將式XII化合物轉(zhuǎn)化為式XIII異吲哚酮衍生物并隨后與激活的胍反應(yīng)，得到式I?；?A途徑)，或者在堿存在下，由式XII化合物形成式XIII異吲哚酮衍生物后，通過將式XIII化合物轉(zhuǎn)化為式XIV酯并隨后通過與胍反應(yīng)，得到式I?；?B途徑)，或者通過在強(qiáng)堿存在下，將式XII化合物轉(zhuǎn)化為式XIV酯并隨后通過與胍反應(yīng)，得到式I?；?C途徑)，或者通過在堿存在下，將式XII化合物直接與胍反應(yīng)，同時(shí)進(jìn)行脒基化和環(huán)化，得到式I異吲哚酮(D途徑)；及其鹽，其中，在式VIII、IX、X、XI、XIl、XIII和XIV化合物中，R1-R3各自如式I定義，并且R6和R7彼此獨(dú)立地為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基。
7.權(quán)利要求6的方法，其中，在步驟e)中，使用D途徑。
8.權(quán)利要求6和/或7的方法，其中步驟d)和e)通過一鍋方法進(jìn)行。
9.權(quán)利要求5和/或6的方法，其中所述步驟彼此獨(dú)立地連續(xù)或分批進(jìn)行。
10.權(quán)利要求5-9中一項(xiàng)或多項(xiàng)的方法，其中式I化合物被定義為N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-氫-1H-異吲哚-1-基]乙酰基}胍及其可藥用鹽。
11.式XII化合物及其鹽 其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；R6為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基。
12.權(quán)利要求11中定義的式XII化合物，用作合成中間體。
13.一種分離式Ia和Ib化合物及其鹽的方法 其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；該方法包括 a)將式I化合物轉(zhuǎn)化為2，3-O-乙?；疍-或L-酒石酸鹽并且通過結(jié)晶分別得到式XVa和XVb兩個(gè)鹽，和b)分別從式XVa和XVb兩個(gè)鹽中釋放出式Ia和Ib兩個(gè)游離堿，其中，在式I、XVa和XVb化合物中，R1-R3如式Ia和Ib定義，R*為 R8為具有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的烷基或未取代的或由1、2或3個(gè)選自F、Cl、Br、I、具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基的取代基取代的苯基。
14.權(quán)利要求13的方法，其中將不需要的式Ia或Ib對(duì)映異構(gòu)體再消旋化。
15.一種權(quán)利要求13和/或14的方法，其中式Ia和Ib化合物為(R)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍和(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍。
16.式XVa和/或XVb化合物 其中R1和R2彼此獨(dú)立地為氫、F、Cl、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R3為Alk-R4或三氟甲基；Alk為具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基；R4為氫、三氟甲基或具有3、4、5、6或7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；R*為 R8為具有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的烷基或未取代的或由1、2或3個(gè)選自F、Cl、Br、I、具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷基或具有1、2、3或4個(gè)碳原子的烷氧基的取代基取代的苯基。
17.式XVI的(S)-N-{2-[3-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-6-三氟甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]乙?；鶀胍富馬酸氫鹽水合物
18.權(quán)利要求16的式XVa或XVb或權(quán)利要求17的式XVI化合物，用作藥物。
19.權(quán)利要求16的式XVa或XVb或權(quán)利要求17的式XVI化合物單獨(dú)或與其他藥物或活性組分聯(lián)合用于制備治療或預(yù)防急性或慢性損傷、局部缺血或再灌注事件引起的器官和組織的疾病或間接后遺癥；治療或預(yù)防心律失常、威脅生命的心臟心室纖顫、心肌梗塞、心絞痛；治療或預(yù)防心臟局部缺血癥、外周和中樞神經(jīng)系統(tǒng)局部缺血癥或中風(fēng)或外周器官和組織的局部缺血癥；治療或預(yù)防休克癥，細(xì)胞增殖表示為原發(fā)或繼發(fā)原因的疾病，癌癥，轉(zhuǎn)移癌，前列腺肥大和前列腺增生，動(dòng)脈粥樣硬化或脂質(zhì)代謝紊亂，高血壓，原發(fā)性高血壓，中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，CNS過度興奮導(dǎo)致的疾病，癲癇或中樞神經(jīng)引起的抽搐，中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，特別是焦慮癥、抑郁癥或精神?。恢委熁蝾A(yù)防非胰島素依賴性糖尿病(NIDDM)或糖尿病的后期損傷、血栓形成、內(nèi)皮功能障礙導(dǎo)致的疾病、間歇性跛行；治療或預(yù)防內(nèi)臟器官的纖維變性疾病、肝纖維變性疾病、腎纖維變性疾病、血管纖維變性疾病和心臟纖維變性疾病；治療或預(yù)防心力衰竭或充血性心力衰竭，急性或慢性炎性疾病，原蟲引起的疾病，家禽瘧疾和球蟲病的藥物；和用于外科手術(shù)和器官移植，手術(shù)過程中保存移植物，用于搭橋手術(shù)，心臟停止跳動(dòng)后的復(fù)蘇，預(yù)防年齡相關(guān)性組織變化；用于制備直接對(duì)抗老化或延長生命，治療和減少甲狀腺毒癥中的心臟毒性作用的藥物或制備診斷劑。
20.一種人用、獸醫(yī)用和/或植物保護(hù)用藥物，它包含有效量的權(quán)利要求16的式XVa或XVb化合物與可藥用載體和添加劑。
21.一種人用、獸醫(yī)用或植物保護(hù)用藥物，它包含有效量的與其它活性藥物組分或藥物聯(lián)合的權(quán)利要求16的式XVa或XVb化合物與可藥用載體和添加劑。
22.一種人用、獸醫(yī)用和/或植物保護(hù)用藥物，它包含有效量的權(quán)利要求17的式XVI化合物與可藥用載體和添加劑。
23.一種人用、獸醫(yī)用或植物保護(hù)用藥物，它包含有效量的與其它活性藥物組分或藥物聯(lián)合的權(quán)利要求17的式XVI化合物與可藥用載體和添加劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及采用3－羥基－2，3－二氫－1H－異吲哚－1－酮衍生物或3－(2－氨基甲?；交?丙烯酸酯衍生物作為中間體制備(3－氧代－2，3－二氫－1H－異吲哚－1－基)乙?；已苌锏姆椒?、外消旋體拆分方法及本發(fā)明方法中的中間體。
文檔編號(hào)C07C233/66GK1886374SQ200480034812
公開日2006年12月27日 申請(qǐng)日期2004年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月2日
發(fā)明者G·舒貝特, J·里克-察普, J·凱爾, H-W·克勒曼, R·漢娜, 黃寶國, 吳小東, Y·古羅 申請(qǐng)人:塞諾菲-安萬特德國有限公司