專利名稱：抗高膽固醇血癥化合物的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及取代的2-氮雜環(huán)丁酮及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯，和涉及它們單獨或與其它活性藥物一起聯(lián)合治療高膽固醇血癥以及預(yù)防、終止或延緩動脈粥樣硬化和相關(guān)病癥及疾病事件進程的用途。
高血膽固醇是冠心病的主要危險因素已明確了數(shù)十年，許多研究表明可通過降脂療法減少CHD事件危險。在1987年前，降脂醫(yī)療手段基本上局限于低飽和脂肪和低膽固醇飲食、膽汁酸螯合劑(考來烯胺和考來替泊)、煙酸、貝特類藥物(fibrates)和丙丁酚。遺憾的是，所有這些治療的效力或耐受性或兩者都有限?？赏ㄟ^降脂飲食和膽汁酸螯合劑聯(lián)合，加或不加煙酸實現(xiàn)基本上減少LDL(低密度脂蛋白)膽固醇同時增加HDL(高密度脂蛋白)膽固醇。但是，該療法不易使用或耐受，因而除專家脂類診所外，時常不奏效。貝特類藥物溫和減少LDL膽固醇，同時增加HDL膽固醇和基本上減少甘油三酸酯，因為它們耐受性良好，這些藥物已更廣泛使用。丙丁酚僅少量減少LDL膽固醇，也減少HDL膽固醇，因為HDL膽固醇水平與CHD危險的密切關(guān)系，通常認(rèn)為它不理想。隨著引入洛伐他汀，即首個HMG-CoA還原酶抑制劑于1987年可處方買到，醫(yī)師首次能夠得到使血漿膽固醇大幅下降，而副作用很少。
最近研究明確證實洛伐他汀、辛伐他汀和普伐他汀、HMG-CoA還原酶抑制劑類所有成員延緩冠狀動脈和頸動脈動脈粥樣硬化損害進程。辛伐他汀和普伐他汀還證實減少發(fā)生冠心病事件危險，而斯堪的納維亞人中辛伐他汀存活研究證實辛伐他汀高度顯著減少冠狀動脈性死亡危險和總死亡率。該研究還提供了減少腦血管事件的某些證據(jù)。盡管通過辛伐他汀實現(xiàn)基本上減少冠狀血管性疾病的發(fā)病率和死亡率，但在治療患者中危險仍很大。例如，在斯堪的納維亞人中辛伐他汀存活研究中，在該5年研究期間，冠狀血管性疾病死亡危險減少42％，仍有5％治療患者死于他們所患疾病。明顯需要進一步減少危險。
出現(xiàn)的更新一類抗高脂血癥藥物包括膽固醇吸收抑制劑。在該類藥物中獲得行政批準(zhǔn)的第一個化合物依澤替米貝，目前以ZETIA的商品名在美國上市。依澤替米貝具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)，在美國專利號Re.37721和5,846,966中描述 包括以下通用結(jié)構(gòu)葡糖苷酸化(glucuronidated)類似物的糖取代2-氮雜環(huán)丁酮 和制備它們的方法在美國專利號5,756,470中公開，其中Ar1和Ar2為未取代或取代的芳基。
其它膽固醇吸收抑制劑在WO 2002/066464 A1(KotobukiPharmaceutical Co.申請)和US 2002/0137689 A1(Glombik等)中描述。WO 2002/066464 A1公開了以下通式降血脂化合物
其中，除了其它定義外，A1、A3和A4可為 和其中R2為-CH2OH、-CH2OC(O)-R1或-CO2R1；R3為-OH或-OC(O)R1，和R4為-(CH2)kR5(CH2)i-，其中k和i為0，或1或1以上的整數(shù)，和k+i為10或10以下的整數(shù)；和R5為單鍵，-CH＝CH-、-OCH2-、羰基或-CH(OH)。
US 2002/0137689 A1公開了以下通式降血脂化合物 其中，除了其它定義外，R1、R2、R3、R4、R5、R6可彼此獨立為(C0-C30)-亞烷基-(LAG)，其中亞烷基上的一個或多個碳原子可被以下基團置換-O-、-(C＝O)-、-CH＝CH-、-C≡C-、-N((C1-C6)-烷基)-、-N((C1-C6)-烷基苯基)或-NH-；和(LAG)為糖殘基、二糖殘基、三糖殘基、四糖殘基；糖酸或氨基糖。
在正在努力發(fā)現(xiàn)新的高脂血癥和動脈粥樣硬化的治療方法中，本發(fā)明提供下述新的膽固醇吸收抑制劑。
發(fā)明概述本發(fā)明的一個目的為提供新的式I膽固醇吸收抑制劑及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯 本發(fā)明的第二個目的為提供抑制膽固醇吸收的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的式I化合物。另一個目的為提供降低血漿膽固醇、尤其LDL-膽固醇水平和治療高膽固醇血癥的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的式I化合物。
作為再一個目的，提供預(yù)防或減少發(fā)生動脈粥樣硬化的危險和一旦在臨床上明確為動脈粥樣硬化性疾病，終止或延緩該疾病進程的方法，該方法包括給予處于發(fā)生動脈粥樣硬化危險或已患有動脈粥樣硬化性疾病的患者適當(dāng)?shù)念A(yù)防或治療有效量的式I化合物。本發(fā)明的另一個目的為本發(fā)明化合物在制備用于治療、預(yù)防或減少發(fā)生這些病癥危險的藥物中的用途。本發(fā)明的其它目的為提供制備式I化合物的方法和提供包含這些化合物的新藥用組合物。
另外，本發(fā)明化合物，尤其為式I化合物的放射性同位素可用于篩選試驗，其中設(shè)計試驗用于鑒別作用機制與依澤替米貝相同的新膽固醇吸收抑制劑。根據(jù)以下詳述，另外的目的將是顯而易見的。
發(fā)明詳述本發(fā)明新的膽固醇吸收抑制劑為式I化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯， 其中Ar1選自芳基和R4-取代的芳基；X、Y和Z獨立選自-CH2-、-CH(C1-6烷基)-和-C(C1-6烷基)2-；R選自-OR6、-O(CO)R6、-O(CO)OR9、-O(CO)NR6R7、糖殘基、二糖殘基、三糖殘基和四糖殘基；R1選自-H、-C1-6烷基和芳基，或R和R1一起為氧代基；R2選自-OR6、-O(CO)R6、-O(CO)OR9和-O(CO)NR6R7；R3選自-H、-C1-6烷基和芳基，或R2和R3一起為氧代基；q、r和t各自獨立選自0和1；m、n和p各自獨立選自0、1、2、3和4；R4每次出現(xiàn)時為1-5個獨立選自以下的取代基-OR5、-O(CO)R5、-O(CO)OR8、-O-C1-5烷基-OR5、-O(CO)NR5R6、-NR5R6、-NR5(CO)R6、-NR5(CO)OR8、-NR5(CO)NR6R7、-NR5SO2R8、-COOR5、-CONR5R6、-COR5、-SO2NR5R6、-S(O)tR8、-O-C1-10烷基-COOR5、-O-C1-10烷基-CONR5R6和氟基；R5、R6和R7每次出現(xiàn)時獨立選自-H、C1-6烷基、芳基和芳基取代的C1-6烷基；R8獨立選自C1-6烷基、芳基和芳基取代的C1-6烷基；R9選自-C≡C-CH2-NR10R11、-C≡C-C(O)R13和-(CH2)3-NR10R14；R10每次出現(xiàn)時獨立選自-H和-C1-3烷基；
R11選自-H、-C1-3烷基、-C(O)-C1-3烷基、-C(O)-NR10R10、-SO2-C1-3烷基和-SO2-苯基；和R12選自-H、 (本文中稱為“葡糖苷酸”)(本文中稱為“葡糖苷酸甲酯”)；R13選自-OH和NR10R11；和R14選自-C(O)-C1-3烷基、-C(O)-NR10R10、-SO2-C1-3烷基和-SO2-苯基。
本發(fā)明的一個實施方案為式I化合物，其中q、r和t各自獨立選自0和1；m、n和p各自獨立選自0、1、2、3和4，條件是q和r中的至少一個為1，且m、n、p、q和r的和為1、2、3、4、5或6；和條件是當(dāng)p為0，r為1時，m、q和n的和為1、2、3、4或5。
本發(fā)明的第二個實施方案為具有式Ia的式I化合物， 這些實施方案的每一類為其中R9為-C≡C-CH2-NR10R11的化合物。
本文中使用的″烷基″將包括具有規(guī)定數(shù)目碳原子的支鏈和直鏈飽和單價脂族烴基。烷基的實例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、正丙基(Pr)、正丁基(Bu)、正戊基、正己基及其異構(gòu)體，例如異丙基(i-Pr)、異丁基(i-Bu)、仲丁基(s-Bu)、叔丁基(t-Bu)、異戊基、異己基等。如果指定烷基無明確的前綴(例如代表正的″正-″，代表二級的″仲-″，代表三級的″叔-″，代表異構(gòu)的″異-″)，則該指定烷基指正烷基(即“丙基”為“正丙基”)。
本文中使用的″芳基″將包括苯基(Ph)、萘基、茚基、四氫萘基或茚滿基。優(yōu)選苯基。
當(dāng)R12為葡糖苷酸或葡糖苷酸甲酯時，R12中羥基的合適保護基團(本文中稱為″PG″)包括但不限于已知用作糖保護基團的那些基團，例如芐基、乙?；?、苯甲?；?、叔丁基二苯基甲硅烷基、三甲基甲硅烷基、對-甲氧基芐基、亞芐基(benzylidine)和甲氧基甲基。選擇性加入和除去此類保護基團的必需條件可在標(biāo)準(zhǔn)教材，例如Greene，T和Wuts，P.G.M.，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley & Sons，Inc.，New York，NY，1999中查到。
式I化合物可含有一個或多個不對稱中心，因此可出現(xiàn)外消旋體和外消旋混合物、單一對映體、對映體混合物、非對映體混合物和單一非對映體。本發(fā)明將包括式I化合物的所有此類異構(gòu)形式。式I化合物的所有此類異構(gòu)形式包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。此外，本發(fā)明化合物的某些結(jié)晶形式可存在多晶型，并同樣將包括在本發(fā)明中。另外，本發(fā)明某些化合物可與水或有機溶劑形成溶劑合物。此類水合物和溶劑合物也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
由于它們具有膽固醇吸收抑制劑活性，本發(fā)明化合物可用于篩選試驗，其中設(shè)計試驗用于鑒別新的膽固醇吸收抑制劑。式I化合物的放射性同位素尤其可用于此類試驗，例如其中硫被″熱″-35S-置換，和尤其其中放射性硫同位素結(jié)合至R9部分內(nèi)的式I化合物。式I化合物的所有此類放射性同位素均包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本文中，術(shù)語″藥學(xué)上可接受的鹽″表示通常通過使游離酸與合適的有機或無機堿反應(yīng)制備的、本發(fā)明使用化合物的無毒鹽，尤其是由陽離子例如鈉、鉀、鋁、鈣、鋰、鎂、鋅和四甲基銨形成的那些鹽和由胺例如氨、乙二胺、N-甲基葡糖胺、賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸、膽堿、N，N′-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、N-芐基苯乙胺、1-對氯芐基-2-吡咯烷-1′-基-甲基苯并咪唑、二乙胺、哌嗪、嗎啉、2，4，4-三甲基-2-戊胺和三(羥甲基)氨基甲烷形成的那些鹽。
當(dāng)本發(fā)明化合物是堿性時，可由藥學(xué)上可接受的無毒酸包括無機和有機酸制備鹽。此類酸包括乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡萄糖酸、谷氨酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、雙羥萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、對甲苯磺酸等。尤其優(yōu)選檸檬酸、氫溴酸、鹽酸、馬來酸、磷酸、硫酸和酒石酸。
藥學(xué)上可接受的酯的實例包括但不限于-C1-4烷基和被苯基、二甲氨基和乙酰氨基取代的-C1-4烷基酯。本文中的“C1-4烷基”包括含1-4個碳原子的直鏈或支鏈脂族鏈，例如甲基、乙基、正丙基、正丁基、異丙基、仲丁基和叔丁基。
術(shù)語″患者″包括使用活性藥物預(yù)防或治療醫(yī)學(xué)病癥的哺乳動物，尤其人。給予患者藥物包括自己用藥和由另一個人給予患者藥物。患者可能需要通過抑制膽固醇吸收治療現(xiàn)有疾病或醫(yī)學(xué)病癥，或可能需要預(yù)防性治療，以預(yù)防或減少感染疾病和醫(yī)學(xué)病癥的危險。
術(shù)語″治療有效量″表示由研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)師或其它臨床醫(yī)師尋找的能引起組織、系統(tǒng)、動物或人生物或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的藥物量。術(shù)語″預(yù)防有效量″表示由研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)師或其它臨床醫(yī)師尋找的預(yù)防在組織、系統(tǒng)、動物或人中發(fā)生的、能預(yù)防或減少發(fā)生生物或醫(yī)學(xué)事件危險的藥物量。尤其是，可選擇患者接受的劑量以便達到需要的降LDL膽固醇的量；可隨時間滴定測定患者接受的劑量以便達到目標(biāo)LDL水平。根據(jù)多種因素包括患者的種類、物種、年齡、體重、性別和醫(yī)學(xué)病癥；所治療病癥的嚴(yán)重程度；待給藥的所選化合物的效力；給予途徑；和患者的腎和肝功能，選擇使用本發(fā)明化合物的劑量方案。這些因素完全在為確定預(yù)防、抵消或停止病癥進程所需的治療有效或預(yù)防有效劑量目的的普通熟練醫(yī)師的考慮范圍內(nèi)。
本發(fā)明化合物是膽固醇吸收抑制劑，當(dāng)單獨或與另一種活性藥物，例如抗動脈粥樣硬化的藥物，更尤其是膽固醇生物合成抑制劑，例如HMG-CoA還原酶抑制劑聯(lián)合使用時，可用于降低血漿膽固醇水平，尤其降低血漿LDL膽固醇水平。因此，本發(fā)明提供抑制膽固醇吸收和治療脂質(zhì)障礙包括高膽固醇血癥的方法，該方法包括給予需要這種治療的人治療有效量的式I化合物。還提供預(yù)防或減少發(fā)生動脈粥樣硬化的危險和終止或延緩臨床明確的動脈粥樣硬化性疾病發(fā)展的方法，該方法包括給予有發(fā)生動脈粥樣硬化危險或已患有動脈粥樣硬化性疾病的哺乳動物適當(dāng)?shù)念A(yù)防或治療有效量的式I化合物。
動脈粥樣硬化包括在相關(guān)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域從業(yè)的醫(yī)師公認(rèn)和理解的血管疾病和病癥。包括血管再形成術(shù)后再狹窄的動脈粥樣硬化性心血管疾病、冠心病(又稱為冠狀動脈疾病或缺血性心臟病)，包括多梗塞性癡呆的腦血管疾病和包括勃起功能障礙的周圍血管疾病是動脈粥樣硬化的所有臨床表現(xiàn)，因此包括術(shù)語″動脈粥樣硬化″和″動脈粥樣硬化性疾病″。
可給予式I化合物預(yù)防或減少潛在發(fā)生或復(fù)發(fā)冠心病事件、腦血管事件和/或間歇性跛行的危險。冠心病事件將包括CHD死亡、心肌梗塞(心臟病發(fā)作)和冠狀血管再生術(shù)。腦血管事件包括缺血性或出血性中風(fēng)(又稱為腦血管事件)和瞬時性局部缺血發(fā)作。間歇性跛行是周圍血管疾病的臨床表現(xiàn)。本文中使用的術(shù)語″動脈粥樣硬化性疾病事件″包括冠心病事件、腦血管事件和間歇性跛行。曾經(jīng)經(jīng)歷一種或多種非致命性動脈粥樣硬化性疾病事件的人應(yīng)是那些潛在復(fù)發(fā)這種事件的人。
因此，本發(fā)明還提供預(yù)防或減少首發(fā)或以后繼發(fā)動脈粥樣硬化性疾病事件危險的方法，該方法包括給予有這種事件危險的患者預(yù)防有效量的式I化合物。在給藥時，患者可能有或可能沒有動脈粥樣硬化性疾病或可能有發(fā)生該疾病的危險。
用本發(fā)明療法治療的人包括處于發(fā)生動脈粥樣硬化性疾病和具有動脈粥樣硬化性疾病事件危險的那些人。在相關(guān)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域從業(yè)的普通醫(yī)師已知標(biāo)準(zhǔn)的動脈粥樣硬化性疾病危險因素。此類已知危險因素包括但不限于高血壓、吸煙、糖尿病、低水平高密度脂蛋白(HDL)膽固醇和動脈粥樣硬化性心血管疾病家族史。公開的測定處于發(fā)生動脈粥樣硬化性疾病危險的那些人的指南可在以下文獻找到ExecutiVe Summary of the Third Report of the National CholesterolEducation Program(NCEP)Expert Panel on Detection，Evaluation，andTreatment of High Blood Cholesterol in Adults(Adult Treatment PanelIII)，JAMA，2001；285，第2486-2497頁。鑒定為具有一種或多種上述危險因素的人將包括在認(rèn)為處于發(fā)生動脈粥樣硬化性疾病危險的一類人中。鑒定為具有一種或多種上述危險因素的人和已患有動脈粥樣硬化的人將包括在認(rèn)為具有動脈粥樣硬化性疾病事件危險的一類人中。
式I化合物的口服劑量為約0.1至約30mg/kg體重/每日，優(yōu)選約0.1至約15mg/kg體重/每日。對于平均70kg體重，劑量水平因此為約5mg至約1000mg藥物/每日。但是，劑量要根據(jù)包括具體化合物效力的上述因素而改變。盡管本發(fā)明活性藥物可以分劑量給予，例如每日兩次-四次，但優(yōu)選每日單劑量的活性藥物。作為實例，每日劑量可選擇但不限于5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、40mg、50mg、75mg、80mg、100mg和200mg。
用于本發(fā)明療法的活性藥物可按口服形式例如片劑、膠囊劑、丸劑、散劑、顆粒劑、酏劑、酊劑、混懸劑、糖漿劑和乳劑給予。優(yōu)選口服制劑。
對于式I化合物，可通過任何藥學(xué)上可接受的途徑和以任何藥學(xué)上可接受的劑型給予活性藥物。這些包括使用口服常規(guī)速釋、時間控制釋放和緩釋(如此腸溶包衣的)藥物劑型。本發(fā)明中使用的其它合適的藥用組合物為藥學(xué)領(lǐng)域普通技術(shù)人員所已知例如參見Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，PA。
在本發(fā)明方法中，活性藥物通常與根據(jù)預(yù)定給藥形式和按常規(guī)藥學(xué)實踐適當(dāng)選擇的合適的藥用稀釋劑、賦形劑或載體(本文中統(tǒng)稱為″載體″物質(zhì))混合在一起給予，即口服片劑、膠囊劑、酏劑、糖漿劑等。
例如，在口服給藥的片劑或膠囊劑形式中，活性藥物成分可與無毒的藥學(xué)上可接受的惰性載體，例如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、改性糖、改性淀粉、甲基纖維素及其衍生物、磷酸二鈣、硫酸鈣、甘露醇、山梨醇和其它還原和非還原糖、硬脂酸鎂、硬脂酸、硬脂酰富馬酸鈉、甘油二十二烷酸酯、硬脂酸鈣等組合。對于口服液體形式，藥物成分可與無毒的藥學(xué)上可接受的惰性載體，例如乙醇、甘油、水等組合。此外，當(dāng)必需或必要時，也可將合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑和矯味劑摻入混合物中?？杉尤敕€(wěn)定劑，例如抗氧化劑，例如丁基化羥基苯甲醚(BHA)、2，6-二-叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、沒食子酸丙酯、抗壞血酸鈉、檸檬酸、偏亞硫酸氫鈣、氫醌和7-羥基香豆素，尤其是BHA、沒食子酸丙酯及其組合以穩(wěn)定劑型。當(dāng)式I化合物與HMG-CoA還原酶抑制劑，例如辛伐他汀一起配制時，優(yōu)選在組合物使用至少一種穩(wěn)定劑。其它合適的組分包括明膠、甜味劑、天然和合成膠，例如阿拉伯膠、黃芪膠或藻酸鹽、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等。
還可用脂質(zhì)體遞藥系統(tǒng)，例如小單層脂質(zhì)體、大單層脂質(zhì)體和多層脂質(zhì)體給予活性藥物?？捎啥喾N磷脂，例如膽固醇、硬脂胺或卵磷脂形成脂質(zhì)體。
還可通過用與化合物分子偶聯(lián)的單克隆抗體作為單獨載體釋放活性藥物?；钚运幬镞€可與作為靶向藥物載體的可溶性聚合物偶聯(lián)。此類聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、多羥基-丙基-甲基丙烯酰胺-苯酚、多羥基-乙基-天冬酰胺-苯酚或棕櫚酰基取代的聚環(huán)氧乙烷-聚賴氨酸。此外，活性藥物可與用于實現(xiàn)控釋藥物的可生物降解類聚合物，例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε-己內(nèi)酯、多羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝膠的交聯(lián)或兩性嵌段共聚物偶聯(lián)。
本發(fā)明還包括制備藥用組合物的方法，該方法包括使式I化合物與藥學(xué)上可接受的載體組合。還包括通過使式I化合物與藥學(xué)上可接受的載體組合制備的藥用組合物。
可聯(lián)合給予一種或多種其它活性藥物和式I化合物，因此，本發(fā)明的實施方案包括藥物聯(lián)合。藥物聯(lián)合包括式I化合物和一種或多種其它活性藥物的單劑量制劑，和以各自劑量制劑給予每一個式I化合物和一種或多種其它活性藥物，它允許同時或序貫給予活性藥物。一種或多種其它活性藥物可以是脂質(zhì)調(diào)節(jié)劑，尤其是膽固醇生物合成抑制劑或具有其它藥物活性的藥物，或具有脂質(zhì)調(diào)節(jié)作用和其它藥物活性兩者的藥物?？墒褂玫钠渌钚运幬锏膶嵗ǖ幌抻贖MG-CoA還原酶抑制劑，它包括內(nèi)酯化或二羥基開環(huán)酸形式的他汀類藥物(statins)及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯，包括但不限于洛伐他汀(參見美國專利號4,342,767)、辛伐他汀(參見美國專利號4,444,784)、二羥基開環(huán)酸辛伐他汀，尤其是其銨或鈣鹽；普伐他汀，尤其是其鈉鹽(參見美國專利號4,346,227)；氟伐他汀，尤其是其鈉鹽(參見美國專利號5,354,772)、阿托伐他汀，尤其是其鈣鹽(參見美國專利號5,273,995)；匹伐他汀又稱為NK-104(參見PCT國際公布號WO 97/23200)和羅蘇伐他??；(CRESTOR；參見美國專利號5,260,440和Drugs of the Future，1999，24(5)，第511-513頁)；HMG-CoA合成酶抑制劑；角鯊烯環(huán)氧酶抑制劑；角鯊烯合成酶抑制劑、包括ACAT-1或ACAT-2選擇性抑制劑和ACAT-1和ACAT-2雙重抑制劑的乙酰-輔酶A膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)抑制劑；微粒體甘油三酸酯轉(zhuǎn)移蛋白(MTP)抑制劑；丙丁酚；煙酸；膽固醇吸收抑制劑，例如SCH-58235，它在美國專利號5,767,115和5,846,966中有描述；膽汁酸螯合劑；LDL(低密度脂蛋白)受體誘導(dǎo)劑；血小板凝集抑制劑，例如糖蛋白IIb/IIIa纖維蛋白原受體拮抗劑和阿司匹林；人過氧化物酶體增殖物激活的γ受體(PPARγ)激動劑，包括通常稱為格列酮(glitazones)化合物，例如曲格列酮、吡格列酮和羅格列酮，和包括包括在稱為噻唑烷二酮類結(jié)構(gòu)內(nèi)的那些化合物，以及噻唑烷二酮類結(jié)構(gòu)以外的那些PPARγ激動劑；PPARα激動劑，例如氯貝特、包括微粉化非諾貝特的非諾貝特和吉非貝齊；雙重PPARα/γ激動劑；維生素B6(又稱為吡哆醇)及其藥學(xué)上可接受的鹽，例如HCl鹽；維生素B12(又稱為氰鈷胺)；葉酸或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯，例如鈉鹽和甲基葡糖胺鹽；抗氧化維生素，例如維生素C、E和β-胡蘿卜素；β-阻滯劑；血管緊張素II拮抗劑，例如氯沙坦；血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑，例如依那普利和卡托普利；鈣通道阻滯劑，例如硝苯地平和地爾硫；內(nèi)皮素拮抗劑；促使ABC1基因表達的藥物；包括抑制劑和激動劑的FXR配體；和包括該受體所有亞型例如LXRα和LXRβ的抑制劑和激動劑的LXR配體；二膦酸鹽化合物，例如阿侖膦酸鈉；和環(huán)氧合酶-2抑制劑，例如羅非考昔和塞來考昔。另外，本發(fā)明式Is化合物，例如在感染AIDS的患者中，化合物I可與抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法聯(lián)合，用于治療與這種治療有關(guān)的脂質(zhì)異常，例如但不限于它們與HIV蛋白酶抑制劑，例如茚地那韋、奈非那韋、利托那韋和沙奎那韋聯(lián)合使用。
可用適當(dāng)?shù)闹委熁蝾A(yù)防有效量的式I化合物制備用于抑制膽固醇吸收和通過抑制膽固醇吸收，治療和/或減少感染疾病和病癥危險的藥物，例如治療脂質(zhì)障礙、預(yù)防或減少發(fā)生動脈粥樣硬化性疾病危險、終止或延緩臨床上明確的動脈粥樣硬化性疾病的進展和預(yù)防或減少首發(fā)或以后繼發(fā)動脈粥樣硬化性疾病事件的危險。例如，藥物可包含5mg至約1000mg式I化合物。也可與一種或多種其它活性藥物，例如上述那些藥物一起制備含式I化合物的藥物。
本發(fā)明化合物如同以下舉例說明的那樣抑制膽固醇吸收。在小鼠中測試化合物7b(實施例7中所示)抑制膽固醇吸收，并將其活性與依澤替米貝進行對比。C57BL/6雄性小鼠(n＝6/組)，鼠齡7-8周，用含或不含測試化合物、依澤替米貝或7b(0.12-10mg/kg)的0.1ml0.25％甲基纖維素溶液經(jīng)口給藥。30分鐘后，經(jīng)口給予所有小鼠含1％膽固醇和2μCi[3H]-膽固醇的0.2ml 0.25％甲基纖維素溶液/每只小鼠。3小時后，將動物無痛處死，收集肝臟和血液。測定肝臟和血漿中的膽固醇計數(shù)，計算膽固醇吸收抑制百分率。依澤替米貝和7b在最小測試劑量下抑制膽固醇吸收＞90％。
另外，在大鼠中測試7b抑制膽固醇吸收，并將其活性與依澤替米貝-葡糖苷酸進行對比。用100mg/kg Inactin i.p.麻醉大鼠。通過使18G靜脈導(dǎo)管穿過胃底部將導(dǎo)管插入腸和插入十二指腸約1-2cm處。將導(dǎo)管在幽門瓣位置結(jié)扎。給予大鼠1ml大鼠膽汁或測試化合物、7b或依澤替米貝-葡糖苷酸(0.3-30μg/kg)的1ml大鼠膽汁溶液。釋藥后，用1ml鹽水將殘留在導(dǎo)管中的溶媒或藥物沖到腸中。在釋放化合物或溶媒30分鐘內(nèi)，通過導(dǎo)管將含1μCi14C-膽固醇脂質(zhì)乳液的3ml溶液釋放到腸中。1.5小時后，將大鼠麻醉下無痛處死，收集肝臟和血液。測定肝臟和血漿中的膽固醇計數(shù)，計算膽固醇吸收抑制百分率。兩種測試化合物在該模型中顯示的抑制膽固醇吸收的效力相似。
可按以下流程和實施例方法，用合適的原料制備本發(fā)明結(jié)構(gòu)式I化合物，并通過隨后的具體實施例進一步舉例說明。此外，通過利用本文中所述方法，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可容易地制備本文中要求保護的本發(fā)明其它化合物。但不能將在實施例中舉例說明的化合物視為形成本發(fā)明考慮化合物唯一的種類。這些實施例進一步描述制備本發(fā)明化合物的細節(jié)。本領(lǐng)域技術(shù)人員容易理解可使用以下制備方法的條件和方法的各種已知變化形式制備這些化合物。
在制備這些化合物中可使用多種色譜技術(shù)。這些技術(shù)包括但不限于高效液相色譜(包括正-、反-和手性相)；超臨界流體色譜；制備型薄層色譜；硅膠或反相硅膠快速層析；離子交換色譜；和徑向色譜。除另有說明外，所有溫度均為攝氏度。
本文中使用的某些縮寫包括Ac?；?CH3C(O)-)Bn芐基calc. 計算值硅藻土CeliteTM硅藻土Dess-Martin Periodinane 1，1，1-三(乙酰氧基)-1，1-二氫-1，2-benzodoxol-3-(1H)-酮DMF N，N-二甲基甲酰胺equiv.當(dāng)量ES-MS 電噴霧離子-質(zhì)譜EtOAc乙酸乙酯h 小時HPLC 高效液相色譜min 分鐘m.p. 熔點MS質(zhì)譜r.t.(或rt)室溫TFA 三氟乙酸THF 四氫呋喃Tlc 薄層層析以下通用流程舉例說明合成本發(fā)明結(jié)構(gòu)式I-4化合物的方法。除另有說明外，所有取代基定義同以上式I。在該方法中，在合適的靶催化劑，例如四(三苯膦)合鈀(0)或[1，1′-二(二苯膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)等和碘化亞銅(I)的存在下，用I-2型端基炔處理I-1。反應(yīng)通常在惰性有機溶劑，例如DMF中，在室溫至100℃下進行6-48h，產(chǎn)物是結(jié)構(gòu)式I-3的內(nèi)炔。I-2炔可含有放射性原子例如35S，以便與I-1反應(yīng)時提供相應(yīng)的放射性標(biāo)記加合物?？捎糜袡C合成領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種水解方法，實現(xiàn)將I-3轉(zhuǎn)化為I-4。例如，特別溫和的水解方案涉及在含甲醇和水的混合溶劑系統(tǒng)中，用叔胺堿，例如三乙胺或二異丙基乙胺等處理I-3。反應(yīng)產(chǎn)物是結(jié)構(gòu)式I-4化合物。
流程 提供以下實施例舉例說明本發(fā)明，無意以任何方式限定本發(fā)明范圍。以下指定結(jié)構(gòu)用于實施例中某些重復(fù)使用的中間體
按D.S.；Caplen，M.A.；Domalski，M.S.；Browne，M.E.；Davis，H.R.Jr.；Clader，J.W.Bioorg.Med.Chem.Lett.(2002)，12，311制備(3R，4S)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥丙基]-4-(4-羥基苯基)-1-(4-碘苯基)氮雜環(huán)丁-2-酮(i-6)和4-[(2S，3R)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-1-(4-碘苯基)-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基]苯基β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(i-7)化合物。i-8化合物是i-7的羥基保護的類似物，其中保護基團是?；?。
在實施例中也可使用以下定義 實施例1制備N-丙-2-炔-1-基乙酰胺(i-1)在0℃、攪拌下，將乙酰氯(0.52mL，7.3mmol)加入炔丙胺(0.5mL，7.3mmol)和二甲氨基吡啶(18mg，0.14mmol)的吡啶(2.5mL)溶液中，使得到的混合物升溫至環(huán)境溫度。約15h后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，依次用1N HCl和鹽水洗滌。有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮，得到標(biāo)題化合物(i-1)，它使用時無需進一步純化。
實施例2制備N-丙-2-炔-1-基苯磺酰胺(i-2)在室溫、攪拌下，將苯磺酰氯(1.16mL，9.1mmol)加入炔丙胺(0.62mL，9.1mmol)和二甲氨基吡啶(22mg，0.18mmol)的吡啶(5mL)溶液中。將得到的溶液在環(huán)境溫度下老化約15h。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，依次用1N HCl和鹽水洗滌。有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮，得到標(biāo)題化合物(i-2)，它使用時無需進一步純化。
實施例3制備N，N-二甲基-N’-丙-2-炔-1-基脲(i-3)在室溫、攪拌下，將二甲基氨基甲酰氯(0.84mL，9.1mmol)加入炔丙胺(0.62mL，9.1mmol)和二甲氨基吡啶(22mg，0.18mmol)的吡啶(5mL)溶液中。將得到的懸浮液在環(huán)境溫度下攪拌約15h。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，依次用1N HCl和鹽水洗滌。有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮，得到標(biāo)題化合物(i-3)，它使用時無需進一步純化。
實施例4制備N-甲基-N-丙-2-炔-1-基甲磺酰胺(i-4)在室溫、攪拌下，將甲磺酰氯(1.12mL，14.5mmol)加入N-甲基炔丙胺(1.22mL，14.5mmol)和二甲氨基吡啶(35mg，0.30mmol)的吡啶(10mL)溶液中。老化約15h，將反應(yīng)混合物傾入乙酸乙酯，依次用1N HCl和鹽水洗滌。有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮，得到標(biāo)題化合物(i-4)，它使用時無需進一步純化。
實施例5制備N-丙-2-炔-1-基甲磺酰胺(i-5)在0℃、攪拌下，將甲磺酰氯(1.40mL，18.1mmol)滴加到炔丙胺(1.00g，18.1mmol)和二甲氨基吡啶(44.0mg，0.36mmol)的吡啶(10mL)溶液中。老化約15h，將反應(yīng)混合物傾入1N HCL中，并用乙酸乙酯萃取兩次，合并的有機萃取液用飽和碳酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌，有機相經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮，得到標(biāo)題化合物i-5，將粗i-5靜置結(jié)晶，使用時無需進一步純化。
實施例6制備N-(3-{4-[(2S，3R)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-2-(4-羥基苯基)-4-氧代氮雜環(huán)己烷-1-基]苯基}丙-2-炔-1-基)甲磺酰胺(化合物6a) 在氮氣氛下，將三乙胺(7當(dāng)量)加入(3R，4S)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-4-(4-羥基苯基)-1-(4-碘苯基)氮雜環(huán)丁-2-酮(i-6)(1.00當(dāng)量)、N-丙-2-炔-1-基甲磺酰胺(i-5)(1.50當(dāng)量)、四(三苯膦)合鈀(0)(0.15當(dāng)量)和碘化亞銅(I)(0.30當(dāng)量)的DMF(相對于終產(chǎn)物0.1M濃度)溶液中，將得到的溶液在室溫下老化。反應(yīng)結(jié)束后，將揮發(fā)物真空蒸發(fā)，使粗殘渣通過快速硅膠層析純化，得到標(biāo)題化合物。
實施例7步驟A制備4-[(2S，3R)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-1-(4-{3-[(甲磺?；?氨基]丙-1-炔-1-基}苯基)-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基]苯基β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(化合物7a) 在氮氣氛、攪拌下，將三乙胺(0.07mL，0.502mmol)加入4-[(2S，3R)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-1-(4-碘苯基)-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基]苯基β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(i-7)(0.050g，0.071mmol)、N-丙-2-炔-1-基甲磺酰胺(i-5)(0.014g，0.105mmol)、四(三苯膦)合鈀(0)(0.012g，0.010mmol)和碘化亞銅(0.005g，0.026mmol)的DMF(0.5mL)溶液中，將得到的溶液在室溫下老化約18h。將揮發(fā)物真空蒸發(fā)，使粗殘渣通過快速硅膠層析(梯度洗脫；0-25％甲醇/二氯甲烷洗脫液)純化，得到標(biāo)題化合物；m/z(ES)713(MH+)，505。
步驟B制備4-[(2S，3R)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-1-(4-{3-[(甲磺?；?氨基]丙-1-炔-1-基}苯基)-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基]苯基β-D-吡喃葡糖苷酸(化合物7b) 在室溫下，將化合物7a的甲醇/水/三乙胺(1∶7∶2；1mL)溶液攪拌約1.5h。將揮發(fā)物真空蒸發(fā)，將粗殘渣在YMC Pack Pro C18相上通過制備型反相高效液相色譜(梯度洗脫；10-65％乙腈/水為洗脫液，0.1％TFA改性劑)純化，得到標(biāo)題化合物(7b)；m/z(ES)699(MH+)，505；HRMS(ES)m/z C34H36FN2O11S(MH+)理論值699.2024，實測值699.2016。
實施例6b-6g和7c-7n制備了以下式Ia化合物(如提供的MS數(shù)據(jù)所示)或可用實施例6(表1所示)或?qū)嵤├?(表2所示)中所述通用合成方法制備。
表1
表2
實施例8步驟A制備4-((2S，3R)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-4-氧代-1-{4-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}氮雜環(huán)丁烷-2-基)苯基β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(8a) 在氮氣氛、攪拌下，將三乙胺(69.0μl，0.495mmol)加入i-7(50.0mg，0.071mmol)、三甲基甲硅烷基乙炔(12.0μl，0.085mmol)、四(三苯膦)合鈀(0)(13.0mg，0.011mmol)和碘化亞銅(5.10mg，0.028mmol)的DMF(0.5mL)溶液中，將得到的溶液在室溫下老化18h。將揮發(fā)物真空蒸發(fā)，使粗殘渣通過快速硅膠層析(梯度洗脫；0-25％甲醇/二氯甲烷洗脫液)純化，得到標(biāo)題化合物(8a)；m/z(ES)660(M-OH)+，470。
步驟B制備4-{(2S，3R)-1-(4-乙炔基苯基)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基}苯基β-D-吡喃葡糖苷酸(8b) 在室溫下，將8a的甲醇/水/三乙胺(0.25mL∶1.10mL∶0.40mL)溶液攪拌約6h。將揮發(fā)物真空蒸發(fā)，將粗殘渣在YMC Pack Pro C18相上通過制備型反相高效液相色譜(梯度洗脫；10-65％乙腈/水洗脫液，0.1％TFA改性劑)純化，得到標(biāo)題化合物(8b)；m/z(ES)574(M-OH)+，398；HRMS(ES)m/z C32H31FNO9(MH+)理論值592.1983，實測值592.1985。
實施例9步驟A制備4-[(2S，3R)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-1-(4-{3-[(甲磺?；?氨基]丙基}苯基)-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基]苯基β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(9a) 在常壓下，將7a(40.0mg，0.056mmol)和鈀(～8mg 10％(重量)(干重計)吸附在活性碳上)在甲醇(2mL)中的混合物氫化約1h。使反應(yīng)混合物通過硅藻土短柱過濾，用甲醇充分洗脫，將濾液在真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物(9a)；m/z(ES)509(M-糖-OH)+。
步驟B制備4-[(2S，3R)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-1-(4-{3-[(甲磺?；?氨基]丙基}苯基)-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基]苯基β-D-吡喃葡糖苷酸(9b) 在室溫下，將9a的甲醇/水/三乙胺(1∶7∶2，1mL)溶液攪拌約1h。將揮發(fā)物真空蒸發(fā)，將粗殘渣在YMC Pack Pro C18相上通過制備型反相高效液相色譜(梯度洗脫；10-65％乙腈/水洗脫液，0.1％TFA改性劑)純化，得到標(biāo)題化合物(9b)；m/z(ES)735(M+Na)+，685(M-OH)+509(M-糖-OH)+；HRMS C34H39FN2O11S理論值(MH+)703.2337，實測值703.2337。
實施例10步驟A制備4-{(2S，3R)-3-[(3S)-3-乙酰氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-1-[4-(3-{[叔丁基(二甲基甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)苯基]-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基}苯基2，3，4-三-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(10a) 在氮氣氛下，將三乙胺(170μL，1.25mmol)加入i-8(156mg，0.178mmol)、叔丁基二甲基(2-丙炔基氧基)硅烷(43.0μL，0.214mmol)、二(三苯膦)二氯化鈀(II)(12.0mg，0.018mmol)和碘化亞銅(7.00mg，0.036mmol)的DMF(1.3mL)溶液中，將得到的溶液在室溫下老化約20h。將反應(yīng)混合物傾入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用乙醚萃取兩次。將合并的有機萃取液用水、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，將濾液真空濃縮。使粗殘渣通過快速硅膠層析(梯度洗脫；15-40％乙酸乙酯/己烷洗脫液)純化，得到標(biāo)題化合物(10a)。
步驟B制備4-{(2S，3R)-3-[(3S)-3-(乙酰氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-1-[4-(3-羥基丙-1-炔-1-基)苯基]-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基}苯基2，3，4-三-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(10b) 將氟化四丁基銨水合物(39.0mg，0.148mmol)加入10a(136mg，0.148mmol)的四氫呋喃(1.5mL)溶液中，將得到的溶液在室溫下老化1h。將反應(yīng)混合物傾入飽和氯化銨水溶液中，用乙醚萃取兩次。將合并的有機萃取液用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，將濾液真空濃縮。使粗殘渣通過快速硅膠層析(50％乙酸乙酯/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(10b)。
步驟C制備4-{(2S，3R)-3-[(3S)-3-(乙酰氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-4-氧代-1-[4-(3-氧代丙-1-炔-1-基)苯基]氮雜環(huán)丁烷-2-基}苯基2，3，4-三-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(10c) 在室溫下，將Dess-Martin periodinane(33.0mg，0.077mmol)加入10b(62.0mg，0.077mmol)和吡啶(31.0μL，0.386mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中。30min后，將反應(yīng)混合物傾入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用乙酸乙酯萃取兩次。將合并的有機萃取液用水、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，將濾液真空濃縮。使粗殘渣通過快速硅膠層析(梯度洗脫；20-40％乙酸乙酯/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(10c)。
步驟D制備4-{(2S，3R)-3-[(3S)-3-(乙酰氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-1-[4-(羧基乙炔基)苯基]-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基}苯基2，3，4-三-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(10d) 在室溫下，將磷酸二氫鈉(9.00mg，0.065mmol)和亞氯酸鈉(5.00mg，0.055mmol)水溶液(0.1mL)加入10c(37.0mg，0.046mmol)的叔丁醇(0.4mL)、二烷(0.2mL)和異丁烯(～0.1mL)溶液中。1.5h后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，將粗殘渣反復(fù)用乙酸乙酯研磨。有機洗滌液經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮，得到標(biāo)題化合物10d。
步驟E制備4-{(2S，3R)-1-[4-(羧基乙炔基)苯基]-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基}苯基-β-D-吡喃葡糖苷酸(10e) 將4-{(2S，3R)-3-[(3S)-3-(乙酰氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-1-[4-(羧基乙炔基)苯基]-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基}苯基2，3，4-三-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(10d)和氰化納(～1mg，0.020mmol)的甲醇(3mL)溶液加熱至45℃。22h后，將反應(yīng)混合物減壓濃縮，溶于甲醇/水/三乙胺(1∶7∶2，1mL)中。在室溫下攪拌約1h后，將揮發(fā)物真空蒸發(fā)，將粗殘渣在YMC Pack Pro C18相上通過制備型反相高效液相色譜(梯度洗脫；10-60％乙腈/水洗脫液，0.1％TFA改性劑)純化，得到標(biāo)題化合物(10e)；m/z(ES)442.0(M-糖-OH)+，618.0(M-OH)+；HRMS(ES)m/z C33H31FNO11(MH+)理論值636.1881，實測值636.1889。
實施例11步驟A制備4-((2S，3R)-3-[(3S)-3-(乙酰氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-1-{4-(3-(乙基氨基)-3-氧代丙-1-炔-1-基]苯基}-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基)苯基2，3，4-三-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(11a) 將1M鹽酸乙胺和二異丙基乙胺的DMF(40.0μl，0.40mmol)溶液加入4-{(2S，3R)-3-[(3S)-3-(乙酰氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-1-[4-(羧基乙炔基)苯基]-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基}苯基2，3，4-三-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(10d)(27.0mg，0.033mmol)、1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(19.0mg，0.099mmol)和1-羥基苯并三唑(8.00mg，0.059mmol)的DMF(0.25mL)溶液中。4.5h后，將反應(yīng)混合物傾入乙酸乙酯，依次用水和鹽水洗滌。將有機層干燥，過濾，減壓濃縮。使粗殘渣通過快速硅膠層析(梯度洗脫；50-60％乙酸乙酯/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物11a。
步驟B制備4-{(2S，3R)-1-{4-[3-(乙氨基)-3-氧代丙-1-炔-1-基]苯基}-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基}苯基β-D-吡喃葡糖苷酸(11b) 將4-((2S，3R)-3-[(3S)-3-(乙酰氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-1-{4-(3-(乙氨基)-3-氧代丙-1-炔-1-基]苯基}-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基)苯基2，3，4-三-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯(11a)(22.0mg，0.026mmol)和氰化納(～1mg，0.020mmol)的甲醇(3mL)溶液加熱至45℃。18h后，將反應(yīng)混合物減壓濃縮，溶于甲醇/水/三乙胺(1∶3∶1，2.5mL)。在室溫下攪拌約1h后，將揮發(fā)物真空蒸發(fā)，將粗殘渣通過制備型反相高效液相色譜在YMC Pack Pro C18相上純化(梯度洗脫；10-60％乙腈/水洗脫液，0.1％TFA改性劑)，得到標(biāo)題化合物(11b)；m/z(ES)663.0(M+H)+；HRMS(ES)m/z C35H36FN2O10(MH+)理論值663.2354，實測值663.2341。
實施例12步驟A制備[35S]N-丙-2-炔-1-基甲磺酰胺從二氯甲烷儲備液中取出總計3.5mCi的適當(dāng)體積[35S]甲磺酰氯(參見Dean，D.C.；等，J.Med.Chem.1996，39，1767)，放入5mL錐形瓶中。然后在常壓下蒸餾直至體積為約50μL。立即向該溶液中加入50μL炔丙胺。15min后，將反應(yīng)混合物用10mL乙酸乙酯稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液(3×2ml)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。過濾后，得到的溶液具有3.3mCi計數(shù)和HPLC(Zorbax XDB C8柱，4.6×150mm，5％乙腈∶H2O(0.1％TFA)-100％乙腈，15min線性梯度，1mL/min，tR＝4.4min)測得放射性化學(xué)純度99.9％。
步驟B制備[35S]4-[(2S，3R)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-1-(4-{3-[(甲磺?；?氨基]丙-1-炔-1-基}苯基)-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基]苯基β-D-吡喃葡糖苷酸甲酯([35S]7a){*表示35S} 在塑料微量離心管中，將3.0mCi[35S]N-丙-2-炔-1-基甲磺酰胺、1mg i-7化合物和1μl三乙胺溶于100μl二甲基甲酰胺。向該溶液中加入含8.1mg四(三苯膦)合鈀(O)和1.4mg碘化亞銅的1mL二甲基甲酰胺溶液的10μl儲備液。在室溫下攪拌60小時，此時HPLC表明55％轉(zhuǎn)化。經(jīng)HPLC(Zorbax XDB C8柱，4.6×150mm，5％乙腈∶H2O(0.1％TFA)-100％乙腈，15min線性梯度，1mL/min，tR＝9.3min)測定該反應(yīng)混合物放射性化學(xué)純度為44.4％，其直接進入下一步。
步驟C制備[35S]4-[(2S，3R)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羥基丙基]-1-(4-{3-[(甲磺?；?氨基]丙-1-炔-1-基}苯基)-4-氧代氮雜環(huán)丁烷-2-基]苯基β-D-吡喃葡糖苷酸([35S]7b) 將含化合物[35S]7b的粗反應(yīng)混合物用25μl甲醇、90μl水和30μl三乙胺處理，在室溫下攪拌1小時，此時在緩慢的氮氣流下，將它濃縮至近干。將殘渣溶于1∶1的乙腈∶H2O中，使其經(jīng)過半制備層析(Zorbax XDB C8250×9.4mm柱，70∶30的乙腈∶H2O(0.1％TFA)4mL/min，1×0.2mL進樣)。得到540μCi產(chǎn)物，經(jīng)用PLC(Zorbax XDBC8柱，4.6×150mm，70∶30的乙腈∶H2O(0.1％TFA)，1mL/min，tR＝10.4min)測定，它的放射性化學(xué)純度為99.9％，將它與純正7b化合物樣品一起洗脫。LC/MS m/z＝508(產(chǎn)物-葡糖苷酸-H2O)，SA＝769Ci/mmol。
制備[35S]7b的備選方法步驟A制備[35S]7a從二氯甲烷儲備液中取出總計1.3mCi的適當(dāng)體積[35S]甲磺酰氯(參見Dean，D.C.；等，J.Med.Chem.1996，39，1767)，放入5mL錐形瓶中。然后在常壓下蒸餾直至體積為約50μL。立即向該溶液中加入1mg 13a的5μl吡啶溶液(經(jīng)氫化鈣新蒸餾)。
將溶液在室溫下攪拌5分鐘，此時在緩慢的氮氣流下，將它濃縮至近干。經(jīng)HPLC(Zorbax XDB C8柱，4.6×150mm，5％乙腈∶H2O(0.1％TFA)-100％乙腈，15min線性梯度，1mL/min，tR＝9.3min)測定，該反應(yīng)混合物的放射性化學(xué)純度80.1％。將直接進入下一步。
步驟B制備[35S]7b將含化合物[35S]7a的粗反應(yīng)混合物用25μl甲醇、90μl水和30μl三乙胺處理，在室溫下攪拌1小時，此時在緩慢的氮氣流下，將它濃縮至近干。將殘渣溶于1∶1的乙腈∶H2O中，使其經(jīng)過半制備層析(Zorbax XDB C8250×9.4mm柱，70∶30的乙腈∶H2O(0.1％TFA)4mL/min，1×0.2mL進樣)。得到350μCi產(chǎn)物，經(jīng)HPLC(Zorbax XDBC8柱，4.6×150mm，70∶30的乙腈∶H2O(0.1％TFA)，1mL/min，tR＝10.4min)測定，它的放射性化學(xué)純度為98.4％，將它與純正7b化合物樣品一起洗脫。LC/MS m/z＝508(產(chǎn)物-葡糖苷酸-H2O)，SA＝911Ci/mmol。
雖然結(jié)合其某些具體的實施方案描述和說明了本發(fā)明，但本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到在不背離本發(fā)明宗旨和范圍的前提下，其中可進行各種變化、修改和替代。例如，可應(yīng)用上文描述的非特定劑量的有效劑量，作為接受治療的哺乳動物的任何適應(yīng)癥對如上所述本發(fā)明使用的活性藥物反應(yīng)的調(diào)整結(jié)果。同樣，觀測到的特定藥理反應(yīng)可根據(jù)和取決于選擇的具體活性化合物或是否有藥物載體存在和使用的制劑類型而變化，根據(jù)本發(fā)明的目的和實踐，期望在這些結(jié)果中的此類預(yù)期的變化或差異。因此，本發(fā)明由權(quán)利要求書的范圍定義，該權(quán)利要求書合理地廣義解釋。
權(quán)利要求
1.一種式I化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯， 其中Ar1選自芳基和R4-取代的芳基；X、Y和Z獨立選自-CH2-、-CH(C1-6烷基)-和-C(C1-6烷基)2-；R選自-OR6、-O(CO)R6、-O(CO)OR9、-O(CO)NR6R7、糖殘基、二糖殘基、三糖殘基和四糖殘基；R1選自-H、-C1-6烷基和芳基，或R和R1一起為氧代基；R2選自-OR6、-O(CO)R6、-O(CO)OR9和-O(CO)NR6R7；R3選自-H、-C1-6烷基和芳基，或R2和R3一起為氧代基；q、r和t各自獨立選自0和1；m、n和p各自獨立選自0、1、2、3和4；R4每次出現(xiàn)時為獨立選自以下的1-5個取代基-OR5、-O(CO)R5、-O(CO)OR8、-O-C1-5烷基-OR5、-O(CO)NR5R6、-NR5R6、-NR5(CO)R6、-NR5(CO)OR8、-NR5(CO)NR6R7、-NR5SO2R8、-COOR5、-CONR5R6、-COR5、-SO2NR5R6、-S(O)tR8、-O-C1-10烷基-COOR5、-O-C1-10烷基-CONR5R6和氟基；R5、R6和R7每次出現(xiàn)時獨立選自-H、C1-6烷基、芳基和芳基取代的C1-6烷基；R8獨立選自C1-6烷基、芳基和芳基取代的C1-6烷基；R9選自-C≡C-CH2-NR10R11、-C≡C-C(O)R13和-(CH2)3-NR10R14；R10每次出現(xiàn)時獨立選自-H和-C1-3烷基；R11選自-H、-C1-3烷基、-C(O)-C1-3烷基、-C(O)-NR10R10、-SO2-C1-3烷基和-SO2-苯基；和R12選自-H、 R13選自-OH和-NR10R11；和R14選自-C(O)-C1-3烷基、-C(O)-NR10R10、-SO2-C1-3烷基和-SO2-苯基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中q、r和t各自獨立選自0和1；且m、n和p各自獨立選自0、1、2、3和4；條件是q和r中的至少一個為1，且m、n、p、q和r的和為1、2、3、4、5或6；和條件是當(dāng)p為0和r為1時，m、q和n的和為1、2、3、4或5。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R9為-C≡C-CH2-NR10R11。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中R9為-C≡C-CH2-NR10R11。
5.權(quán)利要求1的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯，所述化合物為式Ia化合物
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R9為-C≡C-CH2-NR10R11。
7.權(quán)利要求5的化合物，所述化合物選自 及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯。
8.一種降低血漿膽固醇水平的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
9.權(quán)利要求8的方法，所述方法包括聯(lián)合給予需要這種治療的患者治療有效量的權(quán)利要求1的化合物和治療有效量的膽固醇生物合成抑制劑。
10.權(quán)利要求9的方法，其中所述膽固醇生物合成抑制劑為HMG-CoA還原酶抑制劑。
11.一種治療高膽固醇血癥的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
12.一種治療動脈粥樣硬化的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
13.一種減少動脈粥樣硬化危險的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者預(yù)防有效量的權(quán)利要求1的化合物。
14.一種減少發(fā)生動脈粥樣硬化性疾病事件危險的方法，所述方法包括給予處于這種事件危險的患者預(yù)防有效量的權(quán)利要求1的化合物。
15.一種藥用組合物，所述組合物包含權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
16.權(quán)利要求15的藥用組合物，所述組合物還包含膽固醇生物合成抑制劑。
17.權(quán)利要求16的藥用組合物，其中所述膽固醇生物合成抑制劑為HMG-CoA還原酶抑制劑。
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)膽固醇吸收抑制劑及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯。這些化合物用于降低血漿膽固醇，尤其LDL膽固醇水平，和用于治療和預(yù)防動脈粥樣硬化和動脈粥樣硬化性疾病事件。
文檔編號C07H15/26GK1898202SQ200480038291
公開日2007年1月17日 申請日期2004年12月17日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月23日
發(fā)明者M·T·古列特, F·烏亞因瓦拉, D·馮朗根, A·奧加瓦 申請人:默克公司