專利名稱：紫杉醇－脂肪酸結(jié)合物及其藥物組合物的制作方法
描述于本申請中的發(fā)明是在國家健康協(xié)會的基金(the NationalInstitutes of Health)支持下做出的，批準(zhǔn)號為R01 GM427980和R01CA103314。美國政府享有本發(fā)明的某些權(quán)利。
本申請要求于2003年10月30日提交的系列號為60/515,783的美國臨時申請的優(yōu)先權(quán)，將其全部內(nèi)容通過引證結(jié)合于此作為參考。
背景技術(shù)：
帕利他西(紫素或紫杉醇，paclitaxel)(Taxol)和多西他賽(docetaxel)(Taxotere)是準(zhǔn)許臨床用于對人的腫瘤進(jìn)行化療的兩種最重要的抗腫瘤藥。帕利他西是天然產(chǎn)生的紫杉烷(taxane)，其最初是從太平洋紫杉樹(短葉紅豆杉樹，Taxus brevifolia)的樹皮中分離出來的。
多西他賽是帕利他西的半合成同源物。多西他賽是由FDA批準(zhǔn)用于臨床使用的第一個“紫杉醇”，即類紫杉醇化合物。
這兩種第一代紫杉烷抗癌劑已在臨床上用來治療各種腫瘤，包括轉(zhuǎn)移性乳癌、晚期卵巢癌、頭頸癌、非小細(xì)胞肺癌、以及卡波西肉瘤。盡管帕利他西和多西他賽都對部分腫瘤具有有效的抗腫瘤活性，但是它們對其他的如結(jié)腸癌、胰腺癌、黑素瘤癌、以及腎癌沒有表現(xiàn)出效力。
另外，第一代紫杉烷在治療上存在不希望的副作用以及多藥物抗性(MDR)。MDR通常歸因于過度表達(dá)P-糖蛋白(Pgp)的細(xì)胞。Pgp是一種有效的ATP結(jié)合盒(ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(轉(zhuǎn)運(yùn)子)，其外流(effux)疏水的抗癌劑，包括帕利他西和多西他賽。
目前的癌癥化療是基于這樣一個前提快速增殖的腫瘤細(xì)胞比健康細(xì)胞更可能被細(xì)胞毒性藥物殺死。然而，事實(shí)上，目前的藥物對腫瘤組織的活性與健康組織相比差別相對很小。
例如，眾所周知，代表性的細(xì)胞毒性化療藥劑像帕利他西、順鉑、阿霉素、以及其它廣泛使用的抗癌藥物不能從正常分裂的細(xì)胞中辨別癌細(xì)胞。因此，在癌癥化療中產(chǎn)生與這些藥物有關(guān)的各種不希望的副作用。
因此，在癌癥化療中的長期挑戰(zhàn)是開發(fā)對腫瘤細(xì)胞比對健康細(xì)胞具有更大選擇性的新的細(xì)胞毒性劑。
已經(jīng)顯示出，用作生化前體和能量源的特殊天然脂肪酸被腫瘤大量地吸收。這些脂肪酸包括ω-3脂肪酸，如二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)、以及α-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸(LNA)。
DHA是細(xì)胞膜的構(gòu)成成分，并用作代謝途徑和生化通道的前體。其也是在人乳中發(fā)現(xiàn)的脂肪酸，并由美國食品及藥品管理局歸類為一種營養(yǎng)添加劑。
美國專利第5,795,909、5,919,815以及6,080,877披露了結(jié)合于第一代紫杉烷抗癌劑如帕利他西和多西他賽的DHA。DHA-帕利他西結(jié)合物(軛合物)在動物研究中已經(jīng)顯示出抗腫瘤活性。DHA-帕利他西結(jié)合物在降低不希望的副作用方面的能力歸因于該結(jié)合物選擇性瞄準(zhǔn)腫瘤細(xì)胞以及與未結(jié)合的帕利他西相比使用較低的劑量。
例如，據(jù)報道(Bradley et al.Clinical Cancer Research(2000)7，3229-3238)，DHA-帕利他西導(dǎo)致麥迪遜109個皮下肺腫瘤模型中的肺腫瘤異種移植完全消退的最佳劑量為120mg/kg。該消退在所有小鼠體內(nèi)持續(xù)六十天。在小鼠體內(nèi)，DHA-帕利他西表現(xiàn)出比帕利他西低74倍的分布體積和低94倍的清除率。DHA-帕利他西在血漿中是穩(wěn)定的，并且在小鼠血漿中長時間地保持高濃度。相反，以最佳劑量20mg/kg的帕利他西，對任何小鼠體內(nèi)的腫瘤既不引起完全消退也不引起部分消退。該結(jié)合物藥物作為細(xì)胞毒性藥劑似乎是無活性的，直到通過腫瘤細(xì)胞代謝釋放出帕利他西。
因此，DHA-帕利他西比單獨(dú)的帕利他西的毒性低。從而，可以給予更高摩爾劑量的該結(jié)合物?；谠趧游锬Ｐ椭凶C實(shí)的效能，DHA-帕利他西進(jìn)入了人類臨床試驗(yàn)，并且目前處于第III期。
根據(jù)所提出的藥物遞送機(jī)理，DHA-帕利他西由腫瘤細(xì)胞吸收、內(nèi)在化、并由癌細(xì)胞中的酯酶慢慢水解而釋放活性細(xì)胞毒性劑(例如，帕利他西)。但是，如果癌細(xì)胞過度表達(dá)活性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(即，“流出泵(efflux pump)”)，那么即使當(dāng)從DHA中慢慢被釋放時，帕利他西分子也會被流出泵捕獲并從癌細(xì)胞中除去。因此，DHA-帕利他西的效能可能致使不足以活性地對抗抗藥性癌癥。
在本發(fā)明人的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系(SAR)研究已經(jīng)表明帕利他西在C-2、C-3’、以及C-3’N位置的苯基部分對它的有效細(xì)胞毒性和微管蛋白結(jié)合能力是不必要的(Ojima et al.J.Med.Chem.(1996)39，3889-3896)。本發(fā)明人和他的同事發(fā)現(xiàn)在C-3’添加較簡單的烷基或烯基取代基顯著增加對藥物敏感性以及抗藥性癌細(xì)胞系的活性。更重要地，在C-10和C-3’位置的適當(dāng)修飾已經(jīng)導(dǎo)致“第二代”紫杉醇抗癌劑的開發(fā)。這一系列紫杉醇的最重要的結(jié)果是其對藥物敏感的人癌細(xì)胞系實(shí)質(zhì)增加的效能以及對于抗藥性的、表達(dá)MDR表型的細(xì)胞系的顯著活性(例如，對人的乳癌細(xì)胞系MCF7-MDR的IC50＝2.1-9.1nM；帕利他西IC50＝300-800nM)。第二代紫杉醇還包括一系列具有來源于14-羥基漿果赤霉素III的五環(huán)二萜烯骨架的紫杉醇。
因此，與帕利他西和多西他賽明顯不同，包括ortataxel(在包括Bay59-8862，IDN5109以及SB-T-101131的出版物中的代碼名稱)、SB-T-1213以及SB-T-121303的第二代紫杉醇對表達(dá)MDR表型的抗藥性癌細(xì)胞表現(xiàn)出優(yōu)異的活性。例如，ortataxel對小鼠體內(nèi)的人結(jié)腸癌SW-620異種移植表現(xiàn)出顯著的活性(Vredenburg et al.J.Nat’l Cancer Inst.(2001)93，1234-1245)。
但是，這些高度有效的第二代紫杉醇不是腫瘤特效藥。因此，在臨床使用期間會產(chǎn)生各種不希望的副作用。
因此，需要改進(jìn)的抗癌藥物，用于有效地治療所有類型的癌癥，包括多藥物抗性腫瘤，同時減少副作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明通過提供改進(jìn)的結(jié)合物(軛合物)而滿足了上述需要。改進(jìn)的結(jié)合物包括第二代紫杉醇和ω-3脂肪酸。該改進(jìn)涉及第二代紫杉醇的使用。
在另一實(shí)施例中，本發(fā)明提供了改進(jìn)的包括一種結(jié)合物的藥物組合物。該結(jié)合物包括第二代紫杉醇和ω-3脂肪酸。該改進(jìn)涉及第二代紫杉醇的使用。
在又一實(shí)施例中，本發(fā)明提供了改進(jìn)的用于在對其有需要的人類體內(nèi)治療癌癥的方法。該方法包括給予有效量的結(jié)合物。該結(jié)合物包括第二代紫杉醇和ω-3脂肪酸。該改進(jìn)涉及第二代紫杉醇的使用。


圖1DHA-紫杉醇結(jié)合物(軛合物)對人結(jié)腸腫瘤異種移植(pgp+)DLD-1的效應(yīng)。
圖2DHA-紫杉醇結(jié)合物對人卵巢腫瘤外源移植(exograft)(pgp-)A121的效應(yīng)。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明涉及改進(jìn)的紫杉醇和ω-3脂肪酸的結(jié)合物。本發(fā)明中有用的紫杉醇是通式I的第二代紫杉醇， 化學(xué)式I其中FA是一ω-3脂肪酸殘基；R1表示C1-C6烷基或鏈烯基、二烷基氨基或烷基氨基、或烷氧基；R2表示C3-C5烷基、或鏈烯基、或三氟甲基；
R3表示H、甲基、甲氧基、氯、氟、或疊氮基；R4表示C3-C6環(huán)烷基、或環(huán)烯基、或烷氧基；R5和R6都表示氫、或R5和R6一起表示氧羰基，由此形成環(huán)碳酸酯(參見化學(xué)式II)。
第二代紫杉醇的實(shí)例包括ortataxel、SB-T-1103、SB-T-11033、SB-T-1104、SB-T-11043、SB-T-1107、SB-T-11073、SB-T-1213、SB-T-121303、SB-T-1214、SB-T-121403、SB-T-1216、SB-T-121603、SB-T-1217、SB-T-121703、SB-T-12821、以及SB-T-128221-3，其結(jié)構(gòu)在下面示出(參見化學(xué)式II和III) 化學(xué)式IIOrtataxel(Bay59-8862；IDN5109；SB-T-101131) 化學(xué)式IIISB-T-1103R1＝C2H5，R2＝2-甲基丙基；R3＝HSB-T-11033R1＝C2H5，R2＝2-甲基丙基；R3＝CH3OSB-T-1104R1＝環(huán)丙基，R2＝2-甲基丙基；R3＝HSB-T-11043R1＝環(huán)丙基，R2＝2-甲基丙基；R3＝CH3O
SB-T-1107R1＝CH3O，R2＝2-甲基丙基；R3＝HSB-T-11073R1＝CH3O，R2＝2-甲基丙基；R3＝CH3OSB-T-1213R1＝C2H5，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝HSB-T-121303R1＝C2H5，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝CH3OSB-T-1214R1＝環(huán)丙基，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝HSB-T-121403R1＝環(huán)丙基，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝CH3OSB-T-1216R1＝(CH3)2N，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝HSB-T-121603R1＝(CH3)2N，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝CH3OSB-T-1217R1＝CH3O，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝HSB-T-121703R1＝CH3O，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝CH3OSB-T-12821R1＝(CH3)2N，R2＝三氟甲基；R3＝HSB-T-128221-3R1＝C2H5，R2＝三氟甲基；R3＝CH3O本發(fā)明中有用的第二代紫杉醇的合成和結(jié)構(gòu)由Ojima等人披露于其出版物(Bioorg.Med.Chem.Lett.(1999)9，3423-3428；J.Med.Chem.(1996)39，3889-3896；J.Med.Chem.(1997)40，267-278；Bioorg.Med.Chem.Lett.，(1997)7，133-138)和美國專利第6,096,909、6,100,411、6,458,976以及6,500,858號中。將在上述這些論文和專利中披露的合成和結(jié)構(gòu)通過引證結(jié)合于此作為參考。例如，在Ojima等人的出版物(Bioorg.Med.Chem.Lett.(1999)9，3423-3428)中的表1列出的化合物7a-7q；表2列出的化合物1a-1s、3a-3s以及4a-4s；在Ojima等人的出版物(J.Med.Chem.(1996)39，3889-3896)中的表3列出的化合物5a-5e及5s；在Ojima等人的出版物(Bioorg.Med.Chem.Lett.，(1997)7，133-138)中的表2列出的化合物7a-7i；以及在Ojima等人的出版物(J.Med.Chem.(1997)40，267-278)中的表6列出的化合物17b-17g、22b、22d、以及22e的合成和結(jié)構(gòu)通過引證結(jié)合于此作為參考。
將第二代紫杉醇結(jié)合于(共軛于)ω-3脂肪酸。任何ω-3脂肪酸都可以根據(jù)本發(fā)明來使用。ω-3脂肪酸的實(shí)例包括二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)、以及α-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸(α-十八碳三烯酸，LNA)。這些脂肪酸的結(jié)構(gòu)表示如下(參見化學(xué)式IV、V以及VI) 化學(xué)式IV二十二碳六烯酸(DHA) 化學(xué)式V二十碳五烯酸(EPA) 化學(xué)式VIα-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸(LNA)DHA可以從例如魚油中分離，或者可以化學(xué)合成。優(yōu)選地，DHA由生物合成產(chǎn)生，如利用在美國專利第5,374,657、5,492,938、5,407,957以及5,397,591號中披露的方法，將其說明書通過引證結(jié)合于此作為參考。DHA也可以例如從馬里蘭州哥倫比亞的瑪爾特克生物科學(xué)公司(Martek Biosciences Corporation，Columbia，MD)購買。
EPA可以從例如海生動物油(marine oil，即，魚和貝類)中分離。海生動物油由多脂魚的軀體、少脂肪魚的肝、以及由海生哺乳動物如鯨和海豹產(chǎn)生。工業(yè)魚油包括尤其是鳳尾魚(Engraulis spp.)、鱗魚(Mallotus spp.)、鱈魚和鱈魚的肝(Gadus spp.)、鯡魚(青魚，Cupea spp.)、金槍魚(horse mackerel，Scomber spp.)、鮪魚(Euthynnusspp.)、鯡魚(Brevoortia spp.)、鮭魚(Salmo salar，syn.Oncorhynchusspp.)、虹鱒魚(Oncorhynchus mykiss)、以及沙丁魚(Sardina spp.)的油。海生動物油構(gòu)成了世界范圍的食用油生產(chǎn)的重要部分。
可選替換地，EPA可以用任何本領(lǐng)域已有的方法進(jìn)行合成。例如，EPA可以通過食物L(fēng)NA的去飽和及延長來合成(A.Kamal-Eldinand N.V.Yanishlieva，Eur.J.Lipid Sci.Technol.(2002)，104，825-836)。EPA也可以從例如Sigma-Aldrich化學(xué)品公司(St.Louis，MO)商購得到。
LNA的主要來源包括亞麻子(Linum usitatissimum)、紫蘇(Perilla frutescens)、大豆(Glycine max)、油菜籽/菜籽油(canola，Brassica spp.)、以及胡桃(Juglans regia)的種子和油(R.A.Riemersma，Eur.J.Lipid Sci.Technol.(2001)103，372-373；A.Kamal-Eldin and R.Andersson，J.Am.Oil Chem.Soc.(1997)74，375-380；G.P.Savage，P.C.Dutta，and D.L.McNeil，J.Am.Oil Chem.Soc.(1999)76，1059-1063)。其他的堅果、豆類、莢果、以及綠葉蔬菜也提供了大量的食用LNA(M.A.Allman，F(xiàn)ood Australia(1995)47，S14-S17；P.J.Ghafoorunissa，J.Agric.Food Chem.(1993)47，121-124)。LNA可以從例如Sigma-Aldrich化學(xué)品公司商購得到。
第二代紫杉醇-ω-3脂肪酸結(jié)合物可以通過利用任何本領(lǐng)域已有的方法將ω-3脂肪酸偶聯(lián)到第二代紫杉醇上來制備。例如，ω-3脂肪酸可以被偶聯(lián)到第二代紫杉醇的C-2’羥基或者C-7羥基上。優(yōu)選地，將ω-3脂肪酸偶聯(lián)到第二代紫杉醇的C-2’位置上。
偶聯(lián)反應(yīng)可以在一步或多步中發(fā)生。例如，ω-3脂肪酸選擇性偶聯(lián)到第二代紫杉醇的C-2’羥基上可以通過利用本領(lǐng)域已有的任何脫水劑以單一步驟就可以實(shí)現(xiàn)。合適的脫水劑的實(shí)例包括二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)和二異丙基碳化二亞胺(DIC)。脫水劑可以在有或沒有胺類堿(如，例如4-N，N-二甲基氨基吡啶(DMAP))的情況下使用。
用于制備ω-3脂肪酸-紫杉醇結(jié)合物的一般方案表示如下。在該方案中，DHA用作ω-3脂肪酸。其他的ω-3脂肪酸，如上述的那些，可以以相同的方式偶聯(lián)到紫杉醇的C-2’羥基上。
ω-3脂肪酸在氧存在的情況下會不穩(wěn)定?？梢圆扇〈胧┮苑€(wěn)定第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物。例如，可以在合成后將抗氧劑加入到結(jié)合物中。合適的抗氧劑的實(shí)例包括但不限于抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸二月桂酯、對苯二酚、丁基化羥基苯甲醚、焦亞硫酸鈉、t-β-胡羅卜素以及α-生育酚。也可以使用重金屬鰲合劑，如乙二胺四乙酸(EDTA)。
本發(fā)明的第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物對于在對其有需要的人類體內(nèi)治療癌癥是很有用的。癌癥可以是任何類型的對第二代紫杉醇敏感的癌癥。癌癥的實(shí)例包括乳癌、卵巢癌、肺癌、頭頸癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、黑素瘤癌、腦癌、前列腺癌以及腎癌。
本發(fā)明的方法包括給予有效量的第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物。第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物的有效量為有效治療癌癥的任何量。
第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物對于特定情形的實(shí)際量將根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的各種因素而變化，如癌癥的類型、使用的具體第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物、給藥方式、以及治療的具體患者。可以在用醫(yī)師和臨床醫(yī)生熟悉的方法進(jìn)行臨床前試驗(yàn)和臨床試驗(yàn)期間確定有效量。
給予人的第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物的最小量為能夠治療癌癥的最低量。最大量為不會引起不希望的副作用的最高有效量。通常，第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物的每天口服劑量可以為從約0.01mg/kg/天到1000mg/kg/天。通?？山o予的全身性劑量在約1到1000mg/m2/天的范圍內(nèi)?？梢圆捎没颊吣褪苄栽试S的更高劑量來治療癌癥。
第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物可以通過任何本領(lǐng)域已有的合適方法給予。給藥方式的部分實(shí)例包括口服和全身性給藥。通常，本發(fā)明的結(jié)合物為全身性給藥。全身性給藥可以經(jīng)腸道或腸道外給予。
第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物的腸道外給藥包括，例如靜脈內(nèi)注射、肌肉注射、以及皮下注射或輸注。例如，第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物可以通過本領(lǐng)域熟知的持續(xù)釋放給予患者。持續(xù)釋放給藥是一種藥物遞送的方法，用以在一特定時間段內(nèi)達(dá)到一定的藥物水平。
給藥的其他途徑包括口服、局部、支氣管內(nèi)、或鼻內(nèi)給藥。對于口服給藥，可以使用液體或固體制劑。適用于口服給藥的制劑的部分實(shí)例包括片劑、明膠膠囊、丸劑、錠劑、酏劑、混懸劑、糖漿劑、以及糯米紙囊劑。支氣管內(nèi)給藥可以包括吸入器噴霧。對于鼻內(nèi)給藥，第二代脂肪酸結(jié)合物的給予可以通過噴霧器或液體霧劑(liquid mist)的方式來實(shí)施。
本發(fā)明進(jìn)一步包括在合適的藥物載體中的第二代脂肪酸結(jié)合物。在本說明書中，認(rèn)為藥物載體與本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員理解的賦形劑具有相同的含義。載體的實(shí)例包括硬脂酸鎂或硬脂酸鈣、滑石、植物油脂或植物油、樹膠以及乙二醇。
第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物還可以包括一種或多種穩(wěn)定劑、表面活性劑(優(yōu)選為非離子表面活性劑)、以及可選的鹽和/或緩沖劑。
穩(wěn)定劑可以例如為氨基酸，如，例如甘氨酸；或寡糖，如，例如蔗糖、tetralose、乳糖或葡聚糖?？蛇x替換地，穩(wěn)定劑可以為糖醇，如，例如甘露醇；或其組合。優(yōu)選地，穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑的組合構(gòu)成第二代脂肪酸結(jié)合物重量的約0.1％到約10％。
表面活性劑優(yōu)選為非離子表面活性劑，如聚山梨醇酯。合適的表面活性劑的部分實(shí)例包括吐溫20、吐溫80；聚乙二醇或聚氧乙烯聚氧丙烯二醇(醚)，如從約0.001％(w/v)到約10％(w/v)的Pluronic F-68(一種聚丙二醇與環(huán)氧乙烷的加聚物)。
鹽或緩沖劑可以為任何鹽或緩沖劑，如，例如分別為氯化鈉、或磷酸鈉和/或鉀。優(yōu)選地，緩沖劑將第二代脂肪酸結(jié)合物的pH維持在約5到約8的范圍內(nèi)。鹽和/或緩沖劑還對將摩爾滲透壓濃度維持在適于對人給藥的水平很有用。優(yōu)選地，鹽或緩沖劑以大致約150mM到約300mM的等滲壓濃度存在。
第二代脂肪酸結(jié)合物可以另外含有一種或多種常規(guī)添加劑。如上面所述的，這樣的添加劑的部分實(shí)例包括增溶劑，如，例如甘油；抗氧劑，如，例如苯扎氯銨(一種季銨化合物的混合物，稱為“quart”)、苯甲醇、氯惹酮或氯代丁醇；麻醉劑，如，例如嗎啡衍生物；或等滲劑等。作為進(jìn)一步對氧化或其他酸敗的預(yù)防，第二代脂肪酸結(jié)合物可以用氣密性塞子密封的小瓶在氮?dú)庀聝Υ妗?br> 下面的非限制性實(shí)施例用于描述說明本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)注意到在不脫離本發(fā)明范圍的情況下，對下述實(shí)施例及其中的方法可以作出各種變化。為此，本申請的描述說明性具體實(shí)施方式
應(yīng)解釋為是描述說明性的而不是在任何意義上的限制。
實(shí)施例12’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-2-丙基)-10-(甲氧羰基)多西他賽(DHA-SB-T-1107)在氬氣下向二氯甲烷(3.5mL)中的3’-脫苯基-10-(甲氧基羰基)-3’-(2-甲基-2-丙基)-2’-二十二碳六烯?；?多西他賽(SB-T-1107)(63.9mg；75μmol)的溶液中加入4-二甲氨基吡啶(9mg；75μmol)、1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(19mg，150μmol)、以及DHA(27mg；83μmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1h。在用二氯甲烷稀釋后，將反應(yīng)混合物用5％的鹽酸、水、以及鹽水洗滌。有機(jī)層用無水硫酸鎂進(jìn)行干燥，并在真空下濃縮。將粗產(chǎn)物通過在硅膠上的層析法(乙酸乙酯/己烷＝1/3到1/1)進(jìn)行提純，得到呈白色固體的78.5mg(產(chǎn)率為90％)的DHA-SB-T-1107熔點(diǎn)m.p.102-105℃，[α]D22-45.0(c1.0，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.96(m，9H)，1.14(s，3H)，1.22(s，3H)，1.30(s，9H)，1.67(m，3H)，1.69(s，3H)，1.88(m，1H)，1.96(s，3H)，2.07(m，2H)，2.37(s，3H)，2.47(m，6H)，2.55(m，1H)，2.85(m，10H)，3.78(d，J＝6.8Hz，1H)，3.86(s，3H)，4.19(d，J＝8.2Hz，1H)，4.29(d，J＝8.2Hz，1H)，4.37(m，1H)，4.43(m，1H)，4.60(d，J＝9.3Hz，2H)，4.91(s，1H)，4.97(d，J＝8.0Hz，1H)，5.25-5.50(m，12H)，5.66(d，J＝7.0Hz，1H)，6.12(s，1H)，6.20(t，J＝8.8Hz，1H)，7.47(t，J＝8.0Hz，2H)，7.59(t，J＝8.0Hz，1H)，8.11(d，J＝8.0Hz，2H)；13C NMR(CDCl3，400MHz)δ9.6，14.3，20.6，21.9，22.1，22.5，22.6，23.2，24.7，25.6，25.7，25.7，25.8，26.6，28.2，33.7，35.5，35.6，41.4，43.1，45.6，48.9，55.5，58.5，71.5，72.0，74.4，75.1，76.4，76.9，78.3，79.2，79.7，80.9，84.4，126.9，127.4，127.7，127.8，127.9，128.3，128.3，128.4，128.5，128.7，129.2，129.5，130.1，130.2，130.2，131.9，133.4，144.2，155.1，155.6，166.8，168.1，169.4，172.1，203.9。
實(shí)施例2-9其他的DHA-紫杉醇以如在實(shí)施例1中所述的用于合成DHA-SB-T-1107的同樣方式進(jìn)行合成。用于這些DHA-紫杉醇的表征數(shù)據(jù)如下所示。
實(shí)施例22’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基丙基)-10-丙酰基多西他賽(DHA-SB-T-1103)75％的產(chǎn)率；白色固體；熔點(diǎn)m.p.94-98℃，[α]D22-37.9(c 1.08，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.97(m，9H)，1.13(s，3H)，1.22-1.27(m，6H)，1.31(s，9H)，1.56(s，3H)，1.67(s，3H)，1.90(m，1H)，1.94(s，3H)，2.08(m，2H)，2.39(s，3H)，2.40(m，2H)，2.46-2.60(m，7H)，2.85(m，10H)，3.82(d，J＝7.0Hz，1H)，4.20(d，J＝8.4Hz，1H)，4.30(d，J＝8.4Hz，1H)，4.35(m，1H)，4.46(dd，J＝10.2，6.7Hz，1H)，4.60(d，J＝10.4Hz，1H)，4.92(d，J＝2.4Hz，1H)，4.98(d，J＝7.6Hz，1H)，5.40(m，12H)，5.67(d，J＝7.6Hz，1H)，6.23(m，1H)，6.31(s，1H)，7.48(t，J＝7.6Hz，2H)，7.60(t，J＝7.6Hz，1H)，8.12(d，J＝7.6Hz，2H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)δ9.0，9.6，14.1，14.3，14.8，20.5，21.9，22.2，22.4，22.5，22.6，23.2，24.5，25.5，25.6，26.6，27.5，28.1，28.3，33.7，35.5，41.3，43.2，45.6，48.9，58.8，71.5，72.2，74.4，75.2，75.5，76.4，77.3，79.3，79.8，81.0，84.4，127.0，127.5，127.8，127.9，128.0，128.3，128.4，128.5，128.6，129.3，129.6，130.2，130.0，132.4，133.5，143.4，155.3，167.0，168.4，169.6，172.3，174.6，204.0。
實(shí)施例32’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-1-丙烯基)-10-環(huán)丙羰基多西他賽(DHA-SB-T-1214)69％的產(chǎn)率；白色固體；熔點(diǎn)m.p.64-67℃，[α]D22-52.2(c 1.8，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)δ0.99(t，J＝7.5Hz，3H)，1.15(m，4H)，1.28(s，3H)，1.36(s，9H)，1.68(s，3H)，1.75(m，1H)，1.78(s，6H)，1.93(m，1H)，1.95(s，3H)，2.09(q，J＝7.5，15.0Hz，2H)，2.39(s，3H)，2.48(m，2H)，2.56(m，2H)，2.65(d，J＝3.9Hz，1H)，2.87(m，10H)，3.83(d，J＝6.9Hz，1H)，4.20(d，J＝8.7Hz，1H)，4.33(d，J＝8.1Hz，1H)，4.46(m，1H)，4.82(d，J＝8.8Hz，1H)，4.95(s，1H)，4.99(d，J＝9.3Hz，1H)，5.21(d，J＝7.8Hz，1H)，5.41(m，12H)，5.69(d，J＝7.2Hz，1H)，6.21(t，J＝8.8Hz，1H)，6.32(s，1H)，7.50(t，J＝8.1Hz，2H)，7.63(t，J＝7.5Hz，1H)，8.13(d，J＝7.2Hz，2H)；13CNMR(CDCl3)δ9.14，9.36，9.47，9.53，12.98，14.25，14.76，14.81，18.48，18.54，20.52，22.22，22.39，22.47，25.59，25.74，26.67，28.13，28.18，29.67，33.62，35.42，43.12，45.52，45.58，48.86，58.42，71.70，72.17，74.45，74.57，75.19，75.38，75.44，76.35，79.25，79.86，80.92，84.40，84.52，119.95，127.50，127.84，128.02，128.26，128.60，129.21，129.58，130.14，132.40，133.59，137.94，143.48，154.85，166.96，168.30，169.61，172.29，175.12，204.10。
實(shí)施例42’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-1-丙基)-10-環(huán)丙羰基多西他賽(DHA-SB-T-1104)
73％的產(chǎn)率；白色固體；熔點(diǎn)m.p.65-68℃，[α]D-53.4(c 2.5，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)δ0.99(m，9H)，1.15(m，6H)，1.27(s，3H)，1.33(s，9H)，1.69(s，6H)，1.78(m，1H)，1.95(s，3H)，2.09(q，J＝7.2，14.7Hz，2H)，2.43(s，3H)，2.48(m，2H)，2.56(m，2H)，2.65(d，J＝3.6Hz，2H)，2.87(m，10H)，3.83(d，J＝7.2Hz，1H)，4.21(d，J＝8.1Hz，1H)，4.32(d，J＝8.1Hz，1H)，4.46(m，1H)，4.63(d，J＝10.2Hz，1H)，4.93(d，J＝2.1Hz，1H)，4.99(d，J＝8.1Hz，1H)，5.41(m，12H)，5.68(d，J＝6.9Hz，1H)，6.23(t，J＝8.7Hz，1H)，6.31(s，1H)，7.50(t，J＝8.1Hz，2H)，7.63(t，J＝7.5Hz，1H)，8.13(d，J＝7.2Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ3.9，4.1，4.3，7.8，9.0，9.6，15.3，16.6，17.0，17.1，17.3，17.5，18.0，19.4，20.2，20.3，20.4，21.4，22.8，22.9，28.4，36.0，36.1，37.9，40.4，43.6，53.2，67.0，69.2，70.0，70.2，70.9，70.95，71.1，71.15，71.2，71.7，72.2，74.1，74.6，75.7，79.2，92.8，121.8，122.3，122.6，122.7，122.8，123.1，123.15，123.2，123.4，123.45，124.1，124.4，125.0，126.8，127.2，127.25，128.3，138.3，150.1，161.8，163.2，164.4，167.1，169.9，198.9。
實(shí)施例52’-二十二碳六烯酰基-3’-脫苯基-3’-(2-甲基-1-丙烯基)-10-丙酰基多西他賽(DHA-SB-T-1213)72％的產(chǎn)率；白色固體；熔點(diǎn)m.p.67-69℃，[α]D22-72.7(c 0.73，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)δ0.99(t，J＝7.5，3H)，1.16(s，3H)，1.27(m，8H)，1.28(s，3H)，1.36(s，9H)，1.68(s，3H)，1.75(m，1H)，1.78(s，9H)，1.93(m，1H)，1.95(s，3H)，2.09(q，J＝7.5，15.0Hz，2H)，2.40(s，3H)，2.46(m，3H)，2.53(m，2H)，2.56(m，2H)，2.65(d，J＝3.9Hz，2H)，2.87(m，10H)，3.84(d，J＝6.9Hz，1H)，4.20(d，J＝8.4Hz，1H)，4.33(d，J＝8.4Hz，1H)，4.48(m，1H)，4.82(d，J＝8.8Hz，1H)，4.93(s，1H)，4.99(d，J＝9.6Hz，1H)，5.21(d，J＝7.8Hz，1H)，5.41(m，12H)，5.69(d，J＝6.9Hz，1H)，6.21(t，J＝8.8Hz，1H)，6.33(s，1H)，7.50(t，J＝8.1Hz，2H)，7.63(t，J＝7.5Hz，1H)，8.13(d，J＝7.2Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ9.28，9.79，9.86，14.53，15.00，15.06，18.76，18.83，20.81，22.35，22.68，22.76，25.87，26.83，27.80，28.41，28.47，29.94，33.91，35.72，43.42，45.90，49.15，58.70，71.98，72.37，74.74，75.42，75.68，75.75，76.64，79.50，80.16，81.19，84.67，84.80，127.78，128.11，128.30，128.59，128.90，129.50，129.86，130.42，132.71，133.89，138.24，143.56，155.17，167.24，168.60，169.92，172.60，174.90，204.28。
實(shí)施例62’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基丙基)-10-乙?；辔魉?1，14-碳酸酯(DHA-Ortataxel)68％的產(chǎn)率；白色固體；熔點(diǎn)m.p.72-75℃，[α]D22-40(c 0.6，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)δ0.99(t，3H)，1.00(m，3H)，1.25(s，3H)，1.28(s，3H)，1.36(s，9H)，1.36-1.47(m，2H)，1.63-1.70(m，2H)，1.72(s，3H)，1.90(d，3H)，2.07(m，2H)，2.25(s，3H)，2.35(s，1H)，2.47(m，4H)，2.49(s，3H)，2.50-2.62(m，2H)，2.83(m，10H)，3.71(d，1H)，4.20-4.30(m，2H)，4.38-4.44(m，2H)，4.57-4.62(d，2H)，4.850(d，1H)，4.951(d，1H)，5.09(d，1H)，5.40(m，12H)，6.11(d，1H)，6.27(s，1H)，6.44(d，1H)，7.49(t，2H)，7.61(t，1H)，8.03(d，2H)；13C NMR(CDCl3)δ9.68，14.10，14.20，15.0，20.5，20.6，22.0，22.5，22.6，23.1，23.4，23.4，24.7，25.5，25.6，25.9，28.2，28.2，29.7，33.9，35.4，41.7，45.0，58.7，69.5，71.7，74.3，74.4，74.8，75.9，79.5，80.1，80.5，84.2，88.1，127.0，127.4，127.8，128.0，128.3，128.4，128.6，128.9，129.7，129.9，132.0，133.3，134.0，140.5，151.8，155.1，164.8，167.8，170.2，170.8，172.3，202.3。
實(shí)施例72’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-2-丙基)-2-脫苯甲?；?2-(3-甲氧基苯甲酰基)-10-(甲氧基羰基)多西他賽(SB-T-110703-DHA)
62％的產(chǎn)率；白色固體；1H-NMR(CDCl3，300Hz)δ7.74(d，1H，J＝7.5Hz)，7.67(d，1H，J＝1.2Hz)，7.39(dd，1H，J＝8.1Hz)，7.16(dd，1H，J＝2.7Hz，J＝8.1Hz)，6.24(dd，1H，J＝8.7Hz)，6.14(s，1H)，5.686(d，1H，J＝7.2Hz)，5.62-5.24(m，12H)，5.03-4.98(m，1H)，4.93(d，1H，J＝2.4Hz)，4.63(d，1H，J＝10.5)，4.48-4.29(m，3H)，4.21(d，1H，J＝8.1Hz)，3.9(s，3H)，3.88(s，3H)，3.81(d，1H，J＝6.9Hz)，2.91-2.78(m，10H)，2.65-2.22(m，11H)，2.19-2.06(m，2H)，1.98(s，3H)，1.97-1.82(m，1H)，1.4-1.1(m，15H)，1.02-0.94(m，9H)；13C-NMR(CDCl3，75.5MHz)δ9.8，14.5，15.1，20.8，21.9，22.3，22.8，23.5，23.7，24.9，25.8，25.9，26.8，28.3，33.9，35.6，35.8，41.5，43.3，45.8，49.0，55.8，58.7，71.7，72.3，74.8，75.4，76.6，78.6，79.5，80.1，81.2，84.7，114.2，120.9，123.3，127.3，127.8，128.1，128.2，128.3，128.6，128.7，128.8，129.9，130.7，132.3，144.6，155.5，156.1，159.9，167.1，168.6，169.9，172.6，204.5。
實(shí)施例82’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-2-丙烯基)-2-脫苯甲酰基-2-(3-甲氧基苯甲?；?-10-丙酰基多西他賽(DHA-SB-T-121303)67％的產(chǎn)率；白色固體；1H NMR(CDCl3)δ0.99(t，J＝7.5Hz，3H)，1.14(s，3H)，1.28(m，8H)，1.33(s，9H)，1.66(m，3H)，1.73(s，3H)，1.75(s，3H)，1.89(m，5H)，2.10(m，2H)，2.37(m，6H)，2.53(m，7H)，2.87(m，10H)，3.80(d，J＝6.9Hz，1H)，3.86(s，3H)，4.12(d，J＝8.5Hz，1H)，4.31(d，J＝8.5Hz，1H)，4.40(dd，J＝10.6，6.8Hz，1H)，4.72(m，2H)，4.95(m，2H)，5.30(d，J＝7.6Hz，1H)，5.41(m，12H)，5.65(d，J＝7.0Hz，1H)，6.16(t，J＝8.6Hz，1H)，6.30(s，1H)，7.13(d，J＝7.9Hz，1H)，7.33(t，J＝8.0Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.69(d，J＝7.6Hz，1H)。
實(shí)施例92’-二十二碳六烯酰基-3’-脫苯基-3’-(2-甲基-2-丙基)-2-脫苯甲?；?2-(3-甲氧基苯甲?；?-10-丙?；辔魉?DHA-SB-T-11033)81％的產(chǎn)率；熔點(diǎn)m.p.68-70℃；1H NMR(CDCl3)δ1.00(m，9H)，1.28(m，9H)，1.36(s，9H)，1.73(s，3H)，1.91(m，1H)，1.99(s，3H)，2.15(m，2H)，2.40-2.70(m，12H)，2.91(m，10H)，3.89(d，J＝7Hz，1H)，3.95(s，3H)，4.24(d，J＝8Hz，1H)，4.40(m，2H)，4.52(m，1H)，4.66(d，J＝10Hz，1H)，4.97(bd，J＝1.8Hz，1H)，5.00(bd，J＝8Hz，1H)，5.45(m，12H)，5.73(d，J＝7Hz，1H)，6.28(m，1H)，6.37(s，1H)，7.20(m，1H)，7.40(m，1H)，7.70(m，1H)，7，80(m，1H)；13C NMR(CDCl3)δ9.3，9.9，14.6，15.0，20.8，22.0，22.5，22.8，23.5，24.9，25.8，25.9，26.9，27.8，28.4，33.9，35.7，41.6，43.4，45.8，49.1，55.6，58.7，71.7，72.5，74.8，75.5，75.7，76.7，79.5，80.1，81.4，84.7，127.3，127.8，128.1，128.2，128.3，128.6，128.7，128.9，129.9，130.7，132.3，132.7，143.6，155.6，167.1，168.7，169.9，172.6，174.9，204.3。
實(shí)施例10-12α-順式-9，12，15-十八碳三烯酸-紫杉醇以如實(shí)例1中所述的用于合成DHA-SB-T-1107的同樣方式進(jìn)行合成。用于這些α-順式-9，12，15-十八碳三烯酸-紫杉醇的表征數(shù)據(jù)如下所示。
實(shí)施例102’-順式-9，12，15-十八碳三烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-1-丙烯基)-10-丙酰基多西他賽(LNA-SB-T-1213)42％的產(chǎn)率；白色固體；1H NMR(400Hz，CDCl3)δ0.99(t，J＝7.65Hz，3H)，1.15(s，3H)，1.23(s，3H)，1.25(s，3H)，1.25-1.35(m，12H)，1.34(s，9H)，1.67(s，3H)，1.76(s，6H)，1.85(m，1H)(H6a)，1.93(s，3H)，2.04(q，J＝6.4Hz，4H)，2.36(s，3H)(OAc)，2.45(m，8H)，2.53(m，3H)(H6b)，2.77(t，J＝6.4Hz，2H)，3.82(m，3H)，4.17(d，J＝8.4Hz，1H)(H20a)，4.31(d，J＝8.4Hz，1H)(H20b)，4.46(dd，J＝10.6，6.6Hz，1H)，4.77(d，J＝8.8Hz 1H)，4.98(m，3H)(H5)，5.18(d，J＝8.0Hz，1H)，5.36(m，6H)，5.68(d，J＝6.8Hz，1H)(H2)，6.19(t，J＝8.5Hz，1H)，6.31(s，1H)(H10)，7.48(t，J＝7.6Hz，2H)，7.60(t，J＝7.6Hz，1H)，8.12(d，J＝7.6Hz，2H)。
實(shí)施例112’-順-9，12，15-十八碳三烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-2-丙烯基)-2-脫苯甲?；?2-(3-甲氧基苯甲?；?-10-丙?；辔魉?LNA-SB-T-121303)67％的產(chǎn)率；白色固體；1H NMR(400Hz，CDCl3)δ0.99(t，J＝7.65Hz，3H)，1.13(s，3H)，1.16(s，3H)，1.25(s，3H)，1.25-1.35(m，8H)，1.33(s，9H)，1.66(m，3H)，1.73(s，3H)，1.75(s，3H)，1.89(m，5H)，2.10(m，4H)，2.37(m，6H)，2.52(m，4H)，2.81(m，4H)，3.80(m，3H)，3.86(s，3H)，4.19(d，J＝8.8Hz，1H)，4.35(d，J＝8.8Hz，1H)，4.40(dd，J＝10.6，6.8Hz，1H)，4.75(d，J＝8.8Hz，1H)，4.96(d，J＝8.3Hz，3H)，5.19(d，J＝8.4Hz，1H)，5.36(m，6H)，5.67(d，J＝6.8Hz，1H)，6.19(t，J＝8.8Hz，1H)，6.31(s，1H)，7.14(d，J＝6.0Hz，1H)，7.38(t，J＝7.6Hz，1H)，7.67(s，1H)，7.71(d，J＝7.6Hz，1H)。
實(shí)施例122’-順-9，12，15-十八碳三烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-1-丙基)-10-丙酰基多西他賽(LNA-SB-T-1103)70％的產(chǎn)率；熔點(diǎn)m.p.67-70℃；1H NMR，(CDCl3)δ1.00(m，9H)，1.20-1.40(m，24H)，1.74(m，9H)，1.99(s，4H)，2.15(m，4H)，2.40-2.70(m，11H)，2.91(m，4H)，3.89(d，J＝7Hz，1H)，4.24(d，J＝8.0Hz，1H)，4.40(m，2H)，4.52(m，1H)，4.67(d，1H，J＝10，Hz)，4.97(bd，J＝1.8Hz，1H)，5.00(bd，J＝8Hz，1H)，5.45(m，6H)，5.73(d，J＝7.0Hz，1H)，6.28(m，1H)，6.37(s，1H)，7.54(m，2H)，7.66(m，1H)，8.19(d，J＝7.0Hz，2H)；13CNMR(CDCl3)δ9.3，9.9，14.6，15.0，20.8，22.0，22.5，22.8，23.5，24.9，25.0，25.8，25.9，26.9，27.4，27.8，28.4，29.3，29.4，29.5，29.9，33.9，35.7，41.6，43.4，45.8，49.1，58.7，71.8，72.5，74.6，75.5，75.7，76.7，79.5，80.1，81.2，84.7，127.3，128.1，128.5，128.6，128.9，129.5，130.5，132.3，132.6，133.8，143.7，155.6，167.3，168.8，169.9，173.2，174.9，204.3。
實(shí)施例13第二代紫杉醇-ω-3脂肪酸結(jié)合物效能的體內(nèi)評價結(jié)合物的合成具有不同C-2、C-10、C-3’部分的第二代紫杉醇是以良好至優(yōu)異的產(chǎn)率由10-脫乙?；鶟{果赤霉素III開始進(jìn)行合成的。紫杉醇與DHA的偶聯(lián)反應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)條件下(DIC，DMAP)進(jìn)行，并以良好的產(chǎn)率獲得相應(yīng)的結(jié)合物。在C-2’OH基團(tuán)處發(fā)生發(fā)應(yīng)(參見反應(yīng)A和表A)。
反應(yīng)A
表A

動物和腫瘤異種移植從羅斯韋爾公園癌癥研究所(Roswell Park Cancer Institute)或者塔康(Taconic)(Germantown，NY)的內(nèi)部繁殖設(shè)施獲得6到8周齡的雌性嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)的小鼠。動物照管的各個方面都符合研究所動物照管與使用委員會(Institutional Animal Careand Use Committee)的指南。使用或者不表達(dá)MDR蛋白pgp的人卵巢腫瘤A121，或者表達(dá)pgp的人結(jié)腸腫瘤DLD-1。通過利用12-號套管針將約50mg的非壞死腫瘤片斷移植到右側(cè)腹肉上而引發(fā)腫瘤。當(dāng)腫瘤被評估為可觸知的團(tuán)塊(約50-100mm3大小)時開始進(jìn)行化療。治療由間隔3天實(shí)施4次通過尾部靜脈的體內(nèi)注射構(gòu)成。每個藥物處理(治療)組或每個無藥物的賦形劑組包括4-5只小鼠、未處理的對照組每組有10只小鼠。
用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的藥物制備將帕利他西和DHA-帕利他西制成Cremophor ELP(BASF，Ludwigshafen，Germany)和無水乙醇的7.5mg/mL的等份儲備溶液。將這些溶液用于對照目的。將DHA-紫杉醇和其他的ω-3脂肪酸-紫杉醇制成吐溫80(Tween 80，聚氧乙烯-失水山梨醇單油酸酯；購自Sigma化學(xué)公司)和無水乙醇的30mg/mL的等份儲備溶液。為了使DHA-紫杉醇和其他的ω-3脂肪酸-紫杉醇的制劑穩(wěn)定，加入抗氧劑L-抗壞血酸(3.9mM)和α-生育酚(2.0mM)。將每種儲備溶液在使用之前在0.9％的NaCl(鹽水)中進(jìn)一步稀釋，以便對20g的小鼠以約0.4mL的體積通過尾部靜脈將適當(dāng)濃度的每種藥物注射到體內(nèi)。每種藥物在第5、8、11天每天給藥一次。
體內(nèi)腫瘤生長試驗(yàn)對于每個動物，利用電子卡鉗測量以mm計的腫瘤長度(l)和寬度(w)，并且每3-4天進(jìn)行記錄。利用公式v＝0.4(l×w2)計算以mm3計的腫瘤體積(v)。將對于600mm3的預(yù)定目標(biāo)腫瘤體積的以天計的時間線性插入到log(體積)對時間的曲線圖中。在對照與藥物處理的小鼠之間的腫瘤體積的統(tǒng)計顯著性差異通過Cox-Mantel檢驗(yàn)來確定。對于Cox-Mantel檢驗(yàn)，將或者因?yàn)殚L期治愈(定義為在實(shí)驗(yàn)結(jié)論中那些仍然活著的動物，其腫瘤或者完全消退或者未達(dá)到預(yù)設(shè)的目標(biāo)體積)或者由于藥物毒性早死而未達(dá)到目標(biāo)腫瘤體積的動物的時間過程數(shù)據(jù)(time-to-event data)作為經(jīng)過檢驗(yàn)的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。所有統(tǒng)計檢驗(yàn)都為雙邊的。
結(jié)果評估了第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物對于在SCID小鼠體內(nèi)針對抗藥性人結(jié)腸腫瘤異種移植(pgp+)DLD-1和藥物敏感性人卵巢腫瘤異種移植(pgp-)A121的抗腫瘤活性(表1)。中間值(中值)的腫瘤大小表示在圖1中。
表1.體內(nèi)遞送到具有pgp+人結(jié)腸腫瘤異種移植DLD-1的SCID小鼠的DHA-紫杉醇結(jié)合物的抗腫瘤效應(yīng)

1將在DLD-1人結(jié)腸腫瘤移植后的第5、8、11天體內(nèi)給予SCID小鼠的處理。帕利他西和DHA-帕利他西在CremophorEtOH中制成；IND5109和DHA-紫杉醇結(jié)合物在吐溫EtOH中制成。
2基于利用Cox-Mantle檢驗(yàn)的每組與對照的比較。
3或者死亡或者體重?fù)p失大于20％的動物的數(shù)量。
4在第201天具有的腫瘤小于600mm3的SCID鼠。
如表1清楚表明的，第二代紫杉醇-DHA結(jié)合物、DHA-SB-T-1214對SCID鼠體內(nèi)的抗藥性人結(jié)腸腫瘤異種移植表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤效應(yīng)。對于DHA-SB-T-1214，所有的小鼠在第201天都活著，并且在用DHA-SB-T-1214處理的小鼠體內(nèi)沒有檢測到腫瘤痕跡。DHA-SB-T-1213引起了在54天后的腫瘤生長延遲。這些結(jié)果清楚地證實(shí)了DHA-第二代紫杉醇不同尋常的效能。
DHA-SB-T-1213對于人卵巢腫瘤異種移植(pgp-)A121也表現(xiàn)出優(yōu)異的結(jié)果(參見圖2和表2)。當(dāng)施加90mg/kg的總劑量時，結(jié)合物對4只存活的小鼠(5只中的4只)體內(nèi)的腫瘤生長顯示出大于186天的延遲。另外，DHA-SB-T-1216和DHA-SB-T-1104也表現(xiàn)出了有效的腫瘤生長延遲。
表2.體內(nèi)遞送到具有人卵巢腫瘤異種移植A121的SCID小鼠的DHA-紫杉醇結(jié)合物的抗腫瘤效應(yīng)

1在A121人卵巢腫瘤移植后第5天體內(nèi)給予SCID小鼠的處理。帕利他西和DHA-帕利他西在CremophorEtOH中制成；DHA-紫杉醇結(jié)合物在吐溫EtOH中制成。
2基于利用Cox-Mantle檢驗(yàn)的每組與對照的比較。
3或者死亡或者體重?fù)p失大于20％的動物的數(shù)量。
4在第197天沒有可觸知的腫瘤的SCID小鼠。
權(quán)利要求
1.一種包括紫杉醇和ω-3脂肪酸的結(jié)合物，其改進(jìn)在于所述紫杉醇為一種第二代紫杉醇。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1214。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1213。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1216。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1103。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為ortataxel。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11033。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1104。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11043。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1107。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11073。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121303。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121403。
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121603。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121703。
16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-12821。
17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-128221-3。
18.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述ω-3脂肪酸為二十二碳六烯酸。
19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述ω-3脂肪酸為二十碳五烯酸。
20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述ω-3脂肪酸為α-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸。
21.一種含有包括紫杉醇和ω-3脂肪酸的結(jié)合物的藥物組合物，其改進(jìn)在于所述紫杉醇為第二代紫杉醇。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為ortataxel。
23.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121303。
24.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1103。
25.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1214。
26.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1216。
27.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11033。
28.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1104。
29.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11043。
30.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1107。
31.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11073。
32.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1213。
33.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121403。
34.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121603。
35.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121703。
36.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-12821。
37.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-128221-3。
38.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述ω-3脂肪酸為二十二碳六烯酸。
39.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述ω-3脂肪酸為二十碳五烯酸。
40.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述ω-3脂肪酸為α-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸。
41.一種用于在對其有需要的人類體內(nèi)治療癌癥的方法，所述方法包括給予有效量的包括紫杉醇和ω-3脂肪酸的結(jié)合物，其改進(jìn)在于所述紫杉醇為第二代紫杉醇。
42.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為ortataxel。
43.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121303。
44.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1103。
45.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1214。
46.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1216。
47.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11033。
48.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1104。
49.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11043。
50.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1107。
51.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11073。
52.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1213。
53.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121403。
54.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121603。
55.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121703。
56.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-12821。
57.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-128221-3。
58.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述ω-3脂肪酸為二十二碳六烯酸。
59.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述ω-3脂肪酸為二十碳五烯酸。
60.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述ω-3脂肪酸為α-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸。
61.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為乳癌。
62.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為卵巢癌。
63.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為肺癌。
64.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為頭癌。
65.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為頸癌。
66.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為結(jié)腸癌。
67.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為胰腺癌。
68.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為黑素瘤癌。
69.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為腦癌。
70.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為腎癌。
71.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為前列腺癌。
全文摘要
本發(fā)明涉及第二代脂肪酸結(jié)合物及其藥物組合物。所述第二代脂肪酸結(jié)合物在對其有需要的人類體內(nèi)治療癌癥中很有用。
文檔編號C07D305/14GK1901901SQ200480039307
公開日2007年1月24日 申請日期2004年10月28日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月30日
發(fā)明者伊瓦奧·奧吉馬 申請人:紐約州州立大學(xué)研究基金會