專利名稱：3－苯基異噁唑－5－甲酰胺基取代β－內(nèi)酰胺類衍生物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬抗生素藥物領(lǐng)域，更具體的說是涉及新型β-內(nèi)酰胺類抗生素衍生物的結(jié)構(gòu)、制備方法和用途。
背景技術(shù)：
人類一直面臨的最嚴(yán)重的問題之一就是與感染疾病的長期斗爭。人們從40年代初開始使用青霉素，繼而又有半合成青霉素、頭孢菌素、新型β-內(nèi)酰胺、喹諾酮類抗菌藥等問世，抗感染藥物成為臨床應(yīng)用最廣泛的一大類藥品。這些藥物有效地治療各種細(xì)菌感染，為保障人類健康、延長壽命作出了卓越貢獻(xiàn)。
隨著抗生素廣泛應(yīng)用，在臨床上出現(xiàn)兩個(gè)問題一是由于抗生素的不當(dāng)使用和濫用，細(xì)菌耐藥性逐年增加，致使一些抗生素療效降低，甚至無效，如耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐青霉素的肺炎鏈球菌(PRSP)、耐萬古霉素腸球菌(VRE)和多耐性結(jié)核桿菌等。二是一些非致病菌成為條件致病菌，如變形桿菌、銅綠假單胞菌等。過去已控制的一些傳染性疾病如結(jié)核病等出現(xiàn)了再流行的趨勢。這就迫切需要加強(qiáng)抗生素的合理用藥以減少耐藥菌的產(chǎn)生，同時(shí)還應(yīng)該加快新型結(jié)構(gòu)抗生素的開發(fā)。當(dāng)前人們依然重視篩選開發(fā)新型抗生素。
苯唑青霉素是第一類耐酶、耐酸可口服的青霉素藥物，其結(jié)構(gòu)上的共同的特點(diǎn)是側(cè)鏈包含有(3-芳基-5-甲基)異噁唑-4-甲?；鶊F(tuán)。此類藥物對產(chǎn)酶金黃色葡萄球菌菌株有效，臨床上主要用于耐青霉素葡萄球菌所致的各種感染。目前依然應(yīng)用于臨床，并且基于此類結(jié)構(gòu)的化合物改造一直在進(jìn)行。
M.Kohl等(Bioconjugate Chem.1997，8，772-779)報(bào)道了含有雌烯醇取代的芳基異噁唑-4-基甲?；鶊F(tuán)的青霉素的合成，由此獲得了同時(shí)具有類固醇免疫活性和對β-內(nèi)酰胺酶高穩(wěn)定性的分子。
專利US3891628中公開了側(cè)鏈包含有(3，5-二取代異噁唑-4-基)甲?；鶊F(tuán)或(3，4-二取代異噁唑-5-基)甲?；鶊F(tuán)的青霉素或者頭孢霉素的合成，專利中是通過一個(gè)反應(yīng)生成了以上兩種化合物，其重點(diǎn)是前一種化合物；并且其反應(yīng)操作復(fù)雜且收率不高。在其他相應(yīng)的專利中，也提及了具有異噁唑環(huán)的結(jié)構(gòu)類似的β-內(nèi)酰胺衍生素。
專利US3891643和US4010264中公開了側(cè)鏈包含2-取代-2-(3，4-二取代異噁唑-5-基)-乙?；鶊F(tuán)的青霉素或者頭孢霉素化合物，其中US4010264中報(bào)道在化學(xué)上可以利用1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)通過三種合成路線制備了這類側(cè)鏈基團(tuán)，再與母環(huán)連接；經(jīng)過抗菌活性試驗(yàn)，這些化合物具有相當(dāng)?shù)囊志钚浴?br> 專利US4430499中公開的頭孢霉素化合物，其7-位側(cè)鏈?zhǔn)菍⒔?jīng)典的氨噻肟酸結(jié)構(gòu)中的噻唑環(huán)換作噁唑環(huán)，而3-位側(cè)鏈中所包含的雜環(huán)中包括異噁唑環(huán)等，所得化合物具有一定的抑菌活性。
目前為止，對側(cè)鏈包含(3-芳基-4-取代)異噁唑-5-甲?；鶊F(tuán)的青霉素和頭孢霉素衍生物并未有系統(tǒng)的研究，且尚未見任何文獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供了具有通式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供了包含系列化合物A和B類衍生物或其藥理上可接受的鹽作為有效成分的抗微生物劑在制備治療感染性疾病藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供了包含作為活性成分的權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑組成的藥物制劑。
本發(fā)明的第四個(gè)目的是提供了權(quán)利要求1所述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法。
現(xiàn)結(jié)合本發(fā)明的目的對本發(fā)明逐一加以描述一、本專利所涉及的化合物在苯唑青霉素結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，本發(fā)明人設(shè)計(jì)了如下所示的兩個(gè)系列的化合物，這些結(jié)構(gòu)中大部分是新型化合物。設(shè)計(jì)過程中，充分利用芳基異噁唑環(huán)的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和特殊的生物認(rèn)知性。在新型頭孢霉素結(jié)構(gòu)中，以穩(wěn)定的芳基異噁唑環(huán)結(jié)構(gòu)取代了經(jīng)典的在化學(xué)上并不是很穩(wěn)定的氨噻肟酸結(jié)構(gòu)，以期得到更加穩(wěn)定的分子。
本發(fā)明所設(shè)計(jì)的兩個(gè)系列β-內(nèi)酰胺抗生素類化合物的分子結(jié)構(gòu)特征在于在β-內(nèi)酰胺四元環(huán)與另一個(gè)五元或六元雜環(huán)并合的母體結(jié)構(gòu)的氨基側(cè)鏈上，包含一個(gè)(3-芳基-4-取代)異噁唑-5-甲?；鶊F(tuán)，其結(jié)構(gòu)式及連接方式如下圖所示 其中R1為-H、-OR、-SR、-Cl、-Br、-F、-CN、-N(CH3)2、-COOR、-NO2等(其中R是含C1-C5的直鏈或支鏈烷基)；R1可以是單個(gè)或多個(gè)取代基，并分別處在苯環(huán)上的對位或鄰位或間位；R2為-H或1-3碳烷基；R3為β-內(nèi)酰胺母體A、B結(jié)構(gòu)式如下 所述的A為青霉素類結(jié)構(gòu)，B為頭孢類結(jié)構(gòu)。
其中
X為O或S；R1’為H、C1-C5的直鏈或支鏈烷基、-CH(CH3)OCOCH3、-CH2OCO(CH3)2；R2’為AcOCH2-、Cl-、CH3-、烯丙基、Z型或E型帶有取代基的雙鍵取代基、通過硫原子連接的取代基、含N、S、O的五元或六元雜環(huán)取代基、以及含有帶正電荷的季銨鹽取代基；R3’為H、-OCH3；R2’為經(jīng)典頭孢C-3位取代基，包括AcOCH2-、Cl-、CH3-、烯丙基、Z型或E型帶有取代基的雙鍵取代基、通過硫原子連接的取代基、含N、S、O的五元或六元雜環(huán)取代基、以及含有帶正電荷的季銨鹽取代基等；二、新型β-內(nèi)酰胺抗生素衍生物的合成本發(fā)明合成了所設(shè)計(jì)的β-內(nèi)酰胺抗生素類化合物，所采用的合成制備方法是新穎的、簡易的。首先是應(yīng)用1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)很方便的制備了含有異噁唑環(huán)狀結(jié)構(gòu)的側(cè)鏈分子，再應(yīng)用經(jīng)典的β-內(nèi)酰胺化合物的側(cè)鏈和母環(huán)連接方法合成了最終產(chǎn)物。
本發(fā)明所述化合物(I)或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，具體包括如下步驟1.將化合物II與鹽酸羥氨反應(yīng)生成化合物III；2.在堿性環(huán)境下經(jīng)N-氯代丁二酰亞胺處理，發(fā)生分子內(nèi)1，3-偶極環(huán)加成生成化合物IV；3.再經(jīng)Jones試劑氧化制得化合物V；4采用酰氯法或活性酯法直接與權(quán)利要求1中的A或B對接制得青霉素化合物VI或頭孢類化合物VII。
本發(fā)明設(shè)計(jì)的合成路線非常經(jīng)濟(jì)、合理，資源利用度高，并且合成方法簡便易行，可以適合大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。具體的工藝路線如下(一)系列側(cè)鏈的合成系列1側(cè)鏈的合成路線如下
以有取代的苯甲醛為起始原料，在甲醇/水溶液中與鹽酸羥氨反應(yīng)，在碳酸鈉的存在下生成苯甲肟。取代的苯甲肟經(jīng)N-氯代丁二酰亞胺處理后，與炔丙醇在堿性環(huán)境里發(fā)生1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)，得到3-芳基-5-羥甲基-異噁唑。再用Jones試劑氧化得到相應(yīng)的酸。系列2側(cè)鏈與母環(huán)的對接使用經(jīng)典的酰氯法或活性酯法進(jìn)行對接，具體合成路線如下所示 上述連接方法是應(yīng)用較廣泛的酰氯法，本發(fā)明還嘗試了DCC偶聯(lián)法、活性酯法。由于所合成的側(cè)鏈上的羧基，可以很方便的做成酰氯，由此優(yōu)先選擇了酰氯法。
具有代表性的化合物有


本發(fā)明包括I化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的化合物可與堿性物質(zhì)(如堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽和碳酸氫鹽)結(jié)合，它們包括，但不限于氫氧化鈉，氫氧化鉀，氫氧化鈣，碳酸鈉等)發(fā)生反應(yīng)，形成藥學(xué)上可接受的鹽，如相應(yīng)的鈉鹽，鉀鹽或鈣鹽等等。也可采用無毒的有機(jī)堿如甲胺，三乙胺等。
三.、新型β-內(nèi)酰胺抗生素衍生物抗菌活性的藥理實(shí)驗(yàn)測定本發(fā)明還公開了如權(quán)利要求1所述包含系列化合物A和B類衍生物或其藥理上可接受的鹽作為有效成分的抗微生物劑在制備治療感染性疾病藥物中的應(yīng)用，例如短小芽孢桿菌，表皮葡萄球菌，綠膿假單孢菌，肺炎克雷伯桿菌，大腸埃希氏茵等等，引起的上呼吸道感染，皮膚軟組織感染，急性支氣管炎，肺炎等等。
具體藥理實(shí)驗(yàn)如下1、實(shí)驗(yàn)材料(1)培養(yǎng)基微生物鑒定培養(yǎng)基PH7.9±0.1北京三藥科技開發(fā)公司批號020425(2)菌種短小芽孢桿菌CMCC 63202，表皮葡萄球菌CMCC 26069，綠膿假單孢菌CMCC10211，肺炎克雷伯桿菌CMCC 46117，大腸埃希氏菌CMCC 44113，以上菌種均購于中國藥品生物制品檢定所2、實(shí)驗(yàn)方法(1)樣品及代碼樣品PA1、PA2、PA3、PA4、PA5、PA6、PA7、PA8、PA9、CA1、CA2、CA3、CA4、CA5、CA6、CA7、CA8、CA9、CA10、CA11、CA12、CA13、CA14配制方法分別稱取約2mg上述各樣品，于50ml容量瓶中，用少量的DMF溶解后，用蒸餾水加至刻度，濃度為10μmol/L，過濾除菌，用2ml的離心管分裝。
(2)培養(yǎng)平皿的制備一定量滅菌后的微生物鑒定培養(yǎng)基I(使培養(yǎng)基厚度為3mm)，冷至48-50℃，分別加入適量的菌液(菌濃度為0.1％)，倒入調(diào)好水平的培養(yǎng)平皿中，小心趕走氣泡，培養(yǎng)基凝固后，在需要放牛津杯的位置做好標(biāo)記，備用。
(3)樣品的測定在培養(yǎng)平皿上間隔2.5-3cm放置牛津杯，注意與標(biāo)記位置對應(yīng)，用微量加樣器取各樣品50μl加樣，做2-3個(gè)復(fù)管，做好加樣記錄，放置在37℃CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16-18h后，用游標(biāo)卡尺測量抑菌圈直徑。
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果表明，化合物對短小芽孢桿菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯桿菌有很強(qiáng)的抑菌作用，對大腸桿菌、綠膿桿菌有較強(qiáng)抑菌作用，提示本類結(jié)構(gòu)具有抗G+菌與G-菌的抑制作用。

+有抑菌作用四、新型β-內(nèi)酰胺抗生素衍生物的藥用組合物
本發(fā)明還公開了用于治療感染性疾病的藥物制劑，它包含作為活性成分的權(quán)利要求1化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑組成的藥用組合物。
本發(fā)明的系列化合物通常是以藥物組合物的形式服用的，可口服或非口服給藥，或者以和藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑及其它添加劑形成的化合物(如片劑、緩釋制劑、膠囊劑、注射劑、溶液劑)安全的口服或非口服給藥。當(dāng)口服給藥時(shí)，組合物可配制成片劑、糖衣劑或膠囊。為制備口服藥物組合物可采用乳糖或淀粉做載體，明膠，羧甲基纖維素鈉，甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等是合適的結(jié)合劑或成顆劑。作為崩解劑可選用淀粉或微晶纖維素，常以滑石粉，膠體硅膠，硬脂酸甘油酯，硬脂酸鈣或鎂等作為合適的抗粘合劑和潤滑劑。例如，可通過壓制濕顆粒來制備片劑?；钚猿煞峙c載體以及選擇性的與一份崩解添加劑組成混合物，該混合物與粘合劑的含水溶液，醇性或含水醇性溶液在合適的設(shè)備中進(jìn)行顆?；?，干燥顆粒隨后加入其它的崩解劑，潤滑劑和抗粘劑將此混合物壓片。本發(fā)明的系列化合物可以注射劑形式給藥，雖然劑量依治療對象、給藥方式、癥狀及其它因素而改變。當(dāng)非腸道給藥時(shí)，本發(fā)明的組合物被制成注射制劑。
本發(fā)明的化合物在相當(dāng)寬的劑量范圍內(nèi)是有效的。例如每天服用的劑量可在每公斤體重大約0.5mg-1200mg的范圍內(nèi)。在成人的治療中，劑量范圍最好是在1mg/kg--50mg/kg，一次或幾次服用。實(shí)際服用的化合物的劑量應(yīng)該由醫(yī)生根據(jù)有關(guān)的情況來決定，這些情況包括被治療者的身體狀態(tài)，選者的給藥途徑、年齡、體重、患者對藥物的個(gè)體反應(yīng)，患者癥狀的嚴(yán)重程度等等，因此上述劑量范圍并不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。


圖1為3-苯基異噁唑-5-甲酰胺基取代β-內(nèi)酰胺類衍生物結(jié)構(gòu)式。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。
儀器與試劑BRUKER AV400核磁共振儀(CDCl3或DMSO-d6，TMS為內(nèi)標(biāo))、VarioEL III 0元素分析儀；MAT-212型質(zhì)譜儀；化學(xué)試劑從上?；瘜W(xué)試劑公司或濟(jì)南光芒化學(xué)試劑公司購得。
合成步驟一、系列1側(cè)鏈的合成(1).芳基醛肟的合成(II)實(shí)施例1對氯苯甲醛肟的制備在裝有磁力攪拌的三角瓶中，將3.5g(25mmol)對氯苯甲醛溶于30mL30％甲醇/水混合溶液中，加入1.74g鹽酸羥胺(25mmol)溶解，攪拌下加入1.33g(12.5mmol)碳酸鈉，待體系中停止冒氣泡后，室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)完畢，加入50mL水，用100mL二氯甲烷分三次萃取，合并有機(jī)層，無水硫酸鈉干燥，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)脫溶劑至干，得產(chǎn)品(白色固體)3.3g，收率85％。
實(shí)施例2參照例1制備對氟苯甲醛肟以1.24g(10mmol)對甲氧苯甲醛為原料，最后得產(chǎn)品(白色固體)1.14g，收率85％。
實(shí)施例3參照例1制備鄰氯苯甲醛肟以1.36g(10mmol)對甲氧苯甲醛為原料，最后得產(chǎn)品(白色固體)1.24g，收率82％。
實(shí)施例4參照例1制備對甲基苯甲醛肟以1.20g(10mmol)對甲基苯甲醛為原料，最后得產(chǎn)品(白色固體)1.21g，收率90％。
實(shí)施例5參照例1制備苯甲醛肟以1.06g(10mmol)苯甲醛為原料，最后得產(chǎn)品(白色固體)1.05g，收率87％。
實(shí)施例6參照例1制備鄰甲氧苯甲醛肟以1.36g(10mmol)鄰甲氧苯甲醛為原料，最后得產(chǎn)品(白色固體)1.21g，收率80％。
實(shí)施例7參照例1制備鄰硝基苯甲醛肟以1.61g(10mmol)對甲氧苯甲醛為原料，最后得產(chǎn)品(白色固體)1.60g，收率88％。
實(shí)施例8參照例1制備對硝基苯甲醛肟以1.61g(10mmol)對甲氧苯甲醛為原料，最后得產(chǎn)品(白色固體)1.64g，收率89％。
(2).3-芳基-5-羥甲基-異噁唑的制備(III)實(shí)施例9. 3-對氯苯基-5-羥甲基-異噁唑的制備在裝有磁力攪拌的三角瓶中，將1.56g(10m mol)對氯苯甲醛肟溶于40mL干燥的二氯甲烷中，加入1.7g(12mmol)N-氯代丁二酰亞胺，攪拌，全部溶解后，稍微加熱20min，加入0.56g(10mmol)炔丙醇，滴加1.2g(12mmol)三乙胺，有大量白色煙霧產(chǎn)生，安裝回流冷凝管，加熱回流2h。硅膠柱層析分離，洗脫劑為石油醚(b.p.60-90℃)-乙酸乙酯(v∶v＝4∶1)，得產(chǎn)品(黃色固體)2.3g，收率62％。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.8(s)，1H；4.8(s)，2H；6.5(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H實(shí)施例10參照例9制備3-對氟苯基-5-羥甲基-異噁唑。m.p.146.0-148℃。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.2(s)，1H；4.8(s)，2H；6.5(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例11參照例9制備3-苯基-5-羥甲基-異噁唑，m.p.145.0℃。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.2(s)，1H；4.7(s)，2H；6.4(s)，1H；7.2-7.8(m)，5H.
實(shí)施例12參照例9制備3-鄰氯苯基-5-羥甲基-異噁唑，m.p.155.0℃。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.8(s)，1H；4.8(s)，2H；6.5(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例13參照例9制備3-鄰甲氧基苯基-5-羥甲基-異噁唑，m.p.154.0℃。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.2(s)，1H；3.8(s)，3H；4.8(s)，2H；6.5(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例14參照例9制備3-對甲氧基苯基-5-羥甲基-異噁唑，m.p.151.0℃。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.2(s)，1H；3.8(s)，3H；4.8(s)，2H；6.5(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例15參照例9制備3-對硝基苯基-5-羥甲基-異噁唑，m.p.145.0℃。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.2(s)，1H；4.8(s)，2H；6.5(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例16參照例9制備3-鄰硝基苯基-5-羥甲基-異噁唑，m.p.143.0℃。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.2(s)，1H；4.8(s)，2H；6.5(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
(3).醇的Jones氧化(IV)實(shí)施例17 3-對氯苯基-5-羧基-異噁唑的制備取3-對氯苯基-5-羥甲基-異噁唑2g于30mL丙酮中溶解，水浴保持溫度30℃。加入新配制的Jones試劑(11.7g CrO3溶于80mL水中，在加入12mL濃硫酸配制而成)15mL。同溫?cái)嚢?h后，停止反應(yīng)。加入100mL水后析出固體，50mL乙醚萃取3次。合并有機(jī)相，無水硫酸鎂干燥。旋蒸去溶劑后，得到白色固體2.1g(產(chǎn)率99％)。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)7.55(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例18參照例17制備3-對氟苯基-5-羧基-異噁唑(產(chǎn)率99％)。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)7.56(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例19參照例17制備3-苯基-5-羧基-異噁唑(產(chǎn)率97％)。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)7.50(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例20參照例17制備3-鄰氯苯基-5-羧基-異噁唑(產(chǎn)率98％)。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)7.60(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例21參照例17制備3-對甲氧基苯基-5-羧基-異噁唑(產(chǎn)率99％)。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)7.46(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例22參照例17制備3-鄰甲氧基苯基-5-羧基-異噁唑(產(chǎn)率98％)。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)7.48(s)，1H；7.2-7.8(m)，4H.
實(shí)施例23參照例17制備3-對硝基苯基-5-羧基-異噁唑(產(chǎn)率99％)。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)7.64(s)，1H；8.1-8.4(m)，4H.
實(shí)施例24參照例17制備3-對硝基苯基-5-羧基-異噁唑(產(chǎn)率97％)。1H NMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)7.65(s)，1H；8.1-8.4(m)，4H.
(4).系列1和系列2側(cè)鏈與母環(huán)的連接青霉素衍生物的制備
實(shí)施例31(2S，5R，6R)-6-[3-(4-氯苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3，3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚烷基-2-羧酸(1).(3-對氯苯基)異噁唑-5-酰氯的制備取3-對氯苯基-5-羧基-異噁唑與反應(yīng)瓶中，加入過量的二氯亞砜。安裝回流裝置，加熱至沸騰回流，回流4h。反應(yīng)結(jié)束，減壓除去二氯亞砜，并用大量石油醚洗滌。過濾后，濾出物用丙酮溶解待用。
(2).50mL反應(yīng)瓶中加入6-APA 0.5g，H2O 20ml，Na2HPO40.11g，滴加10％NaOH溶液至澄清。冰浴下，滴加上述丙酮溶液，滴完保溫反應(yīng)60min，同時(shí)保持溶液pH在中性。再于室溫下反應(yīng)30分鐘。調(diào)pH值至8.5，用30mL乙酸乙酯洗滌。分出水相，隨后在加入30mL乙酸乙酯，攪拌下控制溫度(10℃，用10％鹽酸調(diào)pH值至2.0-2.5。分出水相后，用100mL乙酸乙酯分三次萃取，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌三次。有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮至乙酸乙酯少于10mL，加入過量石油醚后析出大量白色固體。過濾，用乙酸乙酯溶解所得固體后，在加入過量石油醚。如此純化兩次得到純品0.7克(產(chǎn)率60％)。m.p.144.0℃(dep)。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.6-1.7(d)，6H；4.5(s)，1H；5.6(d)，1H；5.8(q)，1H；7.2(s)，1H；7.3(s)，1H；7.4-7.8(m)，4H；13CNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)24.0，59.1，64.1，67.2，72..6，100.5，128.9，129.4，131.4，134.2，158.9，161.4，162.0，168.2，174.9實(shí)施例32參照例31制備(2S，5R，6R)-6-[3-(4-氟苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3，3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚烷基-2-羧酸。m.p.145.0℃(dep)。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.6-1.7(d)，6H；4.5(s)，1H；5.6(d)，1H；5.8(q)，1H；7.2(s)，1H；7.3(s)，1H；7.4-7.8(m)，4H；13CNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)24.0，59.1，64.1，67.2，72..6，100.5，128.9，129.4，131.4，134.2，158.9，161.4，162.0，168.2，174.9實(shí)施例33參照例31制備(2S，5R，6R)-6-[3-(2-氯苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3，3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚烷基-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.6-1.7(d)，6H；4.5(s)，1H；5.6(d)，1H；5.8(q)，1H；7.2(s)，1H；7.3(s)，1H；7.4-7.8(m)，4H；13CNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)24.0，59.1，64.1，67.2，72..6，100.5，128.9，129.4，131.4，134.2，158.9，161.4，162.0，168.2，174.9實(shí)施例34參照例31制備(2S，5R，6R)-6-[3-(2-甲氧基苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3，3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚烷基-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.6-1.7(d)，6H；3.7(s)，3H；4.5(s)，1H；5.6(d)，1H；5.8(q)，1H；7.2(s)，1H；7.3(s)，1H；6.9-7.4(m)，4H；13CNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)24.0，58.9，59.1，64.1，67.2，72..6，100.5，114.8，128.5，125.4，158.9，160.7，161.4，162.0，168.2，174.9實(shí)施例35參照例31制備(2S，5R，6R)-6-[3-(4-甲氧基苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3，3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚烷基-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.6-1.7(d)，6H；3.7(s)，3H；4.5(s)，1H；5.6(d)，1H；5.8(q)，1H；7.2(s)，1H；7.3(s)，1H；6.9-7.4(m)，4H；13CNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)24.0，58.9，59.1，64.1，67.2，72..6，100.5，114.8，128.5，125.4，158.9，160.7，161.4，162.0，168.2，174.9實(shí)施例36參照例31制備(2S，5R，6R)-6-(3-苯基異噁唑-5-酰胺基)-3，3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚烷基-2-羧酸。1HNMR(CDC13，TMS)，δ(ppm)1.6-1.7(d)，6H；4.5(s)，1H；5.6(d)，1H；5.8(q)，1H；7.2(s)，1H；7.3(s)，1H；7.2-7.6(m)，5H；13CNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)24.0，59.1，64.1，67.2，72..6，100.5，127.5，128.8，129.3，131.1，158.9，161.4，162.0，168.2，174.9實(shí)施例37參照例31制備(2S，5R，6R)-6-[3-(4-硝基苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3，3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚烷基-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.6-1.7(d)，6H；4.5(s)，1H；5.6(d)，1H；5.8(q)，1H；7.2(s)，1H；7.3(s)，1H；7.4-7.8(m)，4H；13CNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)24.0，59.1，64.1，67.2，72..6，100.5，128.9，129.4，131.4，134.2，158.9，161.4，162.0，168.2，174.8實(shí)施例38參照例31制備(2S，5R，6R)-6-[3-(2-硝基苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3，3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚烷基-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.6-1.7(d)，6H；4.5(s)，1H；5.6(d)，1H；5.8(q)，1H；7.2(s)，1H；7.3(s)，1H；7.4-7.8(m)，4H；13CNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)24.0，59.1，64.1，67.2，72..6，100.5，128.9，129.4，131.4，134.2，158.9，161.4，162.0，168.2，174.9
頭孢霉素衍生物的制備
實(shí)施例39參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(4-氯苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-乙酰氧基甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。m.p.176.0℃(dep)。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.1(s)，3H；3.7(q)，2H；4.8-5.0(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；7.6-7.9(m)，4H；10.1(d)，1H；13.8(s)，1H；13CNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)20.8，24.1，56.9，57.3，58.9，100.5，12.09，128.9，129.4，130.9，131.2，158.9，161.4，162.0，164.2，168.8，170.3實(shí)施例40參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(4-氟苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-乙酰氧基甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.1(s)，3H；3.7(q)，2H；4.8-5.0(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；7.6-7.9(m)，4H；10.1(d)，1H；13.8(s)，1H；實(shí)施例41參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(2-氯苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-乙酰氧基甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.1(s)，3H；3.7(q)，2H；4.8-5.0(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；7.6-7.9(m)，4H；10.1(d)，1H；13.8(s)，1H；實(shí)施例42參照例31制備(6R，7R)-7-[3-苯基異噁唑-5-酰胺基]-3-乙酰氧基甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.1(s)，3H；3.7(q)，2H；4.8-5.0(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；7.2-7.7(m)，5H；10.1(d)，1H；13.8(s)，1H；實(shí)施例43參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(4-甲氧基苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-乙酰氧基甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.1(s)，3H；3.7(q)，2H；4.8-5.0(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；6.8-7.4(m)，4H；10.1(d)，1H；13.8(s)，1H；實(shí)施例44參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(2-甲氧基苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-乙酰氧基甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.1(s)，3H；3.7(q)，2H；4.8-5.0(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H7.8(s)，1H；6.8-7.4(m)，4H；10.1(d)，1H；13.8(s)，1H；實(shí)施例45參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(4-氯苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。m.p.170℃(dep)。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.7(s)，3H；3.7(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；7.6-7.9(m)，4H；10.1(d)，1H；13.8(s)，1H實(shí)施例46參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(2-氯苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-甲基-8-氧代-5硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.7(s)，3H；3.7(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；7.6-7.9(m)，4H；10.1(d)，1H；13.8(s)，1H實(shí)施例47參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(4-氟苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.7(s)，3H；3.7(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；7.6-7.9(m)，4H；10.1(d)，1H；13.9(s)，1H；實(shí)施例48參照例31制備(6R，7R)-7-[3-苯基異噁唑-5-酰胺基]-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.7(s)，3H；3.7(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；7.3-7.7(m)，5H；10.1(d)，1H；13.6(s)，1H實(shí)施例49
參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(4-甲氧基苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.7(s)，3H；3.7(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；6.8-7.3(m)，4H；10.1(d)，1H；13.5(s)，1H；實(shí)施例50參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(2-甲氧基苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸。1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.7(s)，3H；3.7(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；6.8-7.2(m)，4H；10.1(d)，1H；13.5(s)，1H實(shí)施例51參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(4-甲氧基苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-氯甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)2.8(s)，2H；3.7(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；6.8-7.2(m)，4H；10.1(d)，1H；13.5(s)，1H實(shí)施例52參照例31制備(6R，7R)-7-[3-(4-甲氧基苯基)異噁唑-5-酰胺基]-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜二環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-(2，2-二甲基丙酰氧羰基)羧酸酯1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)1.7(s)，3H；1.9(s)，9H；3.7(q)，2H；5.2(d)，1H；5.9(q)，1H；7.8(s)，1H；6.8-7.2(m)，4H；10.1(d)，1H；13.5(s)，1H實(shí)施例53為了更充分的解釋本發(fā)明的實(shí)施，提供下述制劑實(shí)施例。這些實(shí)施例僅僅是解釋、而不是限制本發(fā)明的范圍。制劑可以采用本發(fā)明中的任意一個(gè)化合物的活性成分。
制劑1每片含10mg活性成分的片劑制備如下用量/片 重量濃度(％)實(shí)驗(yàn)樣品PA1 100mg10.0微晶纖維素35mg 35.0淀粉 45mg 45.0
聚乙烯吡咯烷酮4mg 4.0羧甲基淀粉鈉鹽4.5mg 4.5硬脂酸鎂 0.5mg 0.5滑石粉1mg 1.0總計(jì) 100 100.0將活性成分，淀粉和纖維素過篩，并充分混合，將聚乙烯吡咯烷酮溶液與上述的粉混合，過篩，制得濕顆粒于50-60℃干燥，將羧甲基淀粉鈉鹽，硬脂酸鎂和滑石粉預(yù)先過篩，然后加入到上述的顆粒中壓片。制劑2注射劑的制備實(shí)驗(yàn)樣品CA1200mg甘露醇 700mgPEG300010mg蒸餾水 100ml使pH值為7.0-7.5過濾濾液濃度為3毫克/毫升，按每安瓶2毫升分裝，冷凍干燥后即得注射劑。
制劑3每囊含100mg活性成分的膠囊的制備如下用量/囊 重量濃度(％)實(shí)驗(yàn)樣品 100mg30.0聚氧乙烯脫水山梨 0.05mg 0.02糖醇單油酸酯淀粉 250mg69.98總計(jì) 350.05mg 100.00
權(quán)利要求
1.具有通式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為-H、-OR、-SR、-Cl、-Br、-F、-CN、-N(CH3)2、-COOR、-NO2；R1可以是單個(gè)或多個(gè)取代基，并分別處在苯環(huán)上的對位或鄰位或間位；R2為-H或C1-C3烷基、羥甲基、氨甲基；R3為β-內(nèi)酰胺母體A、B結(jié)構(gòu)式如下 其中X為O或S；R1’為H、C1-C5的直鏈或支鏈烷基、-CH(CH3)OCOCH3、-CH2OCO(CH3)2；R2’為AcOCH2-、Cl-、CH3-、烯丙基、Z型或E型帶有取代基的雙鍵取代基、通過硫原子連接的取代基、含N、S、O的五元或六元雜環(huán)取代基、以及含有帶正電荷的季銨鹽取代基；R3’為H或-OCH3。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其特征在于，所述的A為青霉素類結(jié)構(gòu)，B為頭孢類結(jié)構(gòu)。
3.權(quán)利要求1所述包含系列化合物A和B類衍生物或其藥理上可接受的鹽作為有效成分的抗微生物劑在制備治療感染性疾病藥物中的應(yīng)用。
4.一種用于治療感染性疾病的藥物制劑，它包含作為活性成分的權(quán)利要求1化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
5.一種權(quán)利要求1所述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，包括如下步驟將化合物II與鹽酸羥氨反應(yīng)生成化合物III；在堿性環(huán)境下經(jīng)N-氯代丁二酰亞胺處理，生成化合物IV；再經(jīng)Jones試劑氧化制得化合物V；采用酰氯法或活性酯法直接與權(quán)利要求1中的A或B對接制得青霉素化合物VI或頭孢類化合物VII。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有防止和治療感染性疾病的高度抗微生物活性的藥物化合物(I)及其制備方法和用途。其中R
文檔編號C07D499/00GK1687075SQ20051001323
公開日2005年10月26日 申請日期2005年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月24日
發(fā)明者王建武, 徐為人, 王西照, 張士俊, 吳楠, 湯立達(dá) 申請人:天津藥物研究院