專利名稱：從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制備白藜蘆醇的方法，具體是一種從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法。屬于中藥制備領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
虎杖(Polygonum Cuspidatum Sieb.et Zucc)為我國(guó)的傳統(tǒng)中藥，主要分布于華東、中南及遼寧、陜西、甘肅、四川、貴州、云南等地。具有活血定痛、清熱利濕、止渴化痰的作用。虎杖中含有白藜蘆醇(resveratrol)，白藜蘆醇化學(xué)名3，4’，5-三羥基-反-均二苯代乙烯(3，4’，5-trihydroxystilbene)，分子式C14H1203，分子量228。1940年首次發(fā)現(xiàn)該成分以來，一直受到醫(yī)藥界的重視，迄今為止的研究表明，白藜蘆醇具有抗腫瘤，抗氧化，抗心血管疾病，抗細(xì)菌，抗炎，抑制血小板聚集，調(diào)節(jié)免疫，化學(xué)預(yù)防等作用。已成為科學(xué)家們高度重視的天然活性成分，具有很大的藥用價(jià)值和市場(chǎng)前景。
經(jīng)對(duì)現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)的檢索發(fā)現(xiàn)，中國(guó)專利公開號(hào)為1341587，名稱為“一種從虎杖中制備白藜蘆醇的方法”，該發(fā)明是將新鮮的虎杖打漿，并攪拌，然后用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，再經(jīng)進(jìn)一步純化處理，制得白藜蘆醇。上述專利中未明確純化的具體方法。目前，植物中白藜蘆醇的提取主要采用多步的硅膠柱層析與高效液相色譜相結(jié)合的方法，操作往往較繁瑣，而且造成產(chǎn)品的回收率比較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷，提供一種從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法。使其具有工藝簡(jiǎn)單、成本低、收率較高的特點(diǎn)。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，方法步驟如下(1)虎杖的收集、干燥和保存；(2)用乙醇-水混合溶劑作為提取溶劑，混合溶劑中乙醇的濃度為50％-95％；(3)在25～80℃下加熱回流提取三次，每次120分鐘，用真空旋轉(zhuǎn)濃縮的方法，將混合溶劑提取物濃縮成膏狀物，得虎杖粗提物；(4)用50-100mL蒸餾水溶解膏狀物，為了加速溶解，將其放入超聲波發(fā)生器進(jìn)行溶解，再將該溶液用等體積乙酸乙酯萃取6次；(5)將乙酸乙酯萃取物真空旋轉(zhuǎn)濃縮至干后，用50％甲醇溶解，然后用柱層析進(jìn)行分離和純化；(6)柱層析以纖維素作為固定相，以甲醇濃度從低到高的順序依次進(jìn)行柱層析洗脫；(7)將洗脫液進(jìn)行收集，將收集到的白藜蘆醇進(jìn)行濃縮，冷凍干燥，得到白藜蘆醇。
白藜蘆醇是二苯乙烯類化合物，屬?gòu)?qiáng)極性化合物，因此在提取、萃取過程中采用乙醇、乙酸乙酯兩種極性較大的溶劑，從而能將白藜蘆醇從虎杖中充分提取出來。
本發(fā)明在溶解浸膏時(shí)，采用超聲波溶解，其原理是利用超聲波分散作用時(shí)的空化現(xiàn)象，使液體中的微氣泡周圍產(chǎn)生上千個(gè)大氣壓，使膏狀物解聚，從而獲得微粒徑粒子。將提純得到的白藜蘆醇進(jìn)行氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)，其保留時(shí)間、分子量和白藜蘆醇標(biāo)樣一致；通過計(jì)算，白藜蘆醇的得率約為0.4％。
本發(fā)明對(duì)虎杖采用乙醇-水加熱回流提取，經(jīng)過乙酸乙酯萃取后，以纖維素為固定相，水-甲醇為流動(dòng)相進(jìn)行柱層析，最后得到白藜蘆醇。和目前常用的純化方法相比，不僅節(jié)約了成本，而且白藜蘆醇的得率也比較高。
本發(fā)明首次將纖維素應(yīng)用于白藜蘆醇的分離和純化，具有以下積極效果1.虎杖是具有悠久歷史的中藥材，在我國(guó)已被廣泛應(yīng)用。目前人工栽培技術(shù)已經(jīng)成熟，這為從虎杖中提純活性物質(zhì)白藜蘆醇提供了豐富的植物資源；2.首次將纖維素層析技術(shù)應(yīng)用于白藜蘆醇的分離和純化，步驟簡(jiǎn)單，成本低廉；3.對(duì)白藜蘆醇的提純得率較高，為0.4％。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合發(fā)明內(nèi)容提供具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
實(shí)施例1取干燥虎杖500g，搗碎，用95％乙醇在80℃下加熱回流三次，每次2小時(shí)，將混合溶劑過濾，真空濃縮至膏狀物，利用超聲波將膏狀物用100mL蒸餾水溶解下來，用等體積乙酸乙酯萃取6次，回收溶劑，濃縮至干后，50％甲醇溶解，以纖維素為固定相，以水、10％、30％、50％和70％的甲醇溶液為流動(dòng)相依次進(jìn)行柱層析洗脫，將檢測(cè)到的白藜蘆醇收集，真空冷凍干燥，得到白藜蘆醇2.7544g，對(duì)提純的樣品進(jìn)行氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其保留時(shí)間、分子量和白藜蘆醇標(biāo)樣一致。
實(shí)施效果通過此方法，不僅降低了成本，同時(shí)提高了白藜蘆醇的得率，為0.55％實(shí)施例2取干燥虎杖500g，搗碎，用70％乙醇在60℃加熱回流三次，每次2小時(shí)，將混合溶劑過濾，真空濃縮至膏狀物，利用超聲波將膏狀物用75mL蒸餾水溶解下來，用等體積乙酸乙酯萃取6次，回收溶劑，濃縮至干后，50％甲醇溶解，以纖維素為固定相，以水、10％、30％、50％和70％的甲醇溶液為流動(dòng)相依次進(jìn)行柱層析洗脫，將檢測(cè)到的白藜蘆醇收集，真空冷凍干燥，得到白藜蘆醇2.1217g，對(duì)提純的樣品進(jìn)行氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其保留時(shí)間、分子量和白藜蘆醇標(biāo)樣一致。
實(shí)施效果通過此方法，不僅降低了成本，同時(shí)提高了白藜蘆醇的得率，為0.42％。
實(shí)施例3取干燥虎杖500g，搗碎，用50％乙醇在25℃加熱回流三次，每次2小時(shí)，將混合溶劑過濾，真空濃縮至膏狀物，利用超聲波將膏狀物用50mL蒸餾水溶解，用等體積乙酸乙酯萃取6次，回收溶劑，濃縮至干后，50％甲醇溶解，以纖維素為固定相，以水、10％、30％、50％和70％的甲醇溶液為流動(dòng)相依次進(jìn)行柱層析洗脫，將檢測(cè)到的白藜蘆醇收集，真空冷凍干燥，得到白藜蘆醇1.9102g，對(duì)提純的樣品進(jìn)行氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其保留時(shí)間、分子量和白藜蘆醇標(biāo)樣一致。
實(shí)施效果通過此方法，不僅降低了成本，同時(shí)提高了白藜蘆醇的得率，為0.38％。
權(quán)利要求
1.一種從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法，其特征在于，步驟如下(1)將虎杖進(jìn)行收集、干燥和保存；(2)用乙醇-水混合溶劑作為提取溶劑；(3)加熱回流提取后，用真空旋轉(zhuǎn)濃縮的方法，將混合溶劑提取物濃縮成膏狀物，得虎杖粗提物；(4)用蒸餾水溶解膏狀物，將該溶液用等體積乙酸乙酯萃??；(5)將乙酸乙酯萃取物真空旋轉(zhuǎn)濃縮至干后，用甲醇溶解，然后用柱層析進(jìn)行分離和純化；(6)柱層析以纖維素作為固定相，以甲醇為流動(dòng)相進(jìn)行柱層析洗脫；(7)將洗脫液進(jìn)行收集，將收集到的白藜蘆醇進(jìn)行濃縮，冷凍干燥，得到白藜蘆醇。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法，其特征是，所述的步驟(2)中，乙醇-水混合溶劑中，乙醇的濃度為50％-95％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法，其特征是，所述的步驟(3)中，加熱回流提取，是指在25～80℃下加熱回流提取三次，每次120分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法，其特征是，所述的步驟(4)中，蒸餾水用量50-100mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法，其特征是，所述的步驟(4)中，為了加速溶解，將膏狀物放入超聲波發(fā)生器進(jìn)行溶解，再將該溶液用等體積乙酸乙酯萃取6次。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法，其特征是，所述的步驟(5)中，甲醇濃度為50％。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法，其特征是，所述的步驟(6)中，以甲醇按照濃度從低到高的順序依次進(jìn)行柱層析洗脫。
全文摘要
一種中藥制備領(lǐng)域的從中草藥植物虎杖中制備白藜蘆醇的方法，具體為將虎杖進(jìn)行收集、干燥和保存；用乙醇－水混合溶劑作為提取溶劑；加熱回流提取后，用真空旋轉(zhuǎn)濃縮的方法，將混合溶劑提取物濃縮成膏狀物，得虎杖粗提物；用蒸餾水溶解膏狀物，將該溶液用等體積乙酸乙酯萃??；將乙酸乙酯萃取物真空旋轉(zhuǎn)濃縮至干后，用甲醇溶解，然后用柱層析進(jìn)行分離和純化；柱層析以纖維素作為固定相，以甲醇進(jìn)行柱層析洗脫；將洗脫液進(jìn)行收集，將收集到的白藜蘆醇進(jìn)行濃縮，冷凍干燥，得到白藜蘆醇。本發(fā)明白藜蘆醇得率為0.4％，與現(xiàn)有技術(shù)相比，首次將纖維素應(yīng)用于白藜蘆醇的分離和純化，步驟簡(jiǎn)單，成本低廉，得率較高。
文檔編號(hào)C07C37/70GK1724495SQ20051002757
公開日2006年1月25日 申請(qǐng)日期2005年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月7日
發(fā)明者代光輝, 姚柳利 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué)