專利名稱：川芎嗪的協(xié)同增效藥用酸鹽及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種藥物及其制備方法，具體地說是川芎嗪與一種藥用酸的復(fù)鹽化合物及其制備方法，而且這種藥用酸與川芎嗪具有協(xié)同增效的藥理作用。
背景技術(shù)：
川芎嗪(Ligustrazine)化學(xué)名為2，3，5，6-四甲基吡嗪，分子式C8H12N2，結(jié)構(gòu)式如下 川芎嗪是中藥植物川芎的有效成份，現(xiàn)由人工合成，具有抗血小板聚集、擴(kuò)張小動(dòng)脈、改善微循環(huán)、腦循環(huán)及活血化淤等藥理作用，臨床主要用于缺血性心、腦血管疾病的治療，川芎嗪是一種生物堿，藥物應(yīng)用中常用其磷酸鹽或鹽酸鹽，如磷酸川芎嗪膠囊，鹽酸川芎嗪注射液。
缺血性心、腦血管疾病的發(fā)病機(jī)理復(fù)雜多樣，絕大部份缺血性心、腦血管疾病是由于血管栓塞而引起的，研究發(fā)現(xiàn)心腦血管缺血、缺氧造成的一系列缺血性連鎖反應(yīng)，是導(dǎo)致心、腦損害的中心環(huán)節(jié)，稱之為缺血瀑布。因此，迅速溶栓復(fù)流是心、腦組織梗死急性期治療成功的前提和基礎(chǔ)，而抵抗缺血造成的多種代謝紊亂和再灌流所造成的自由基損傷，則是治療成功的基本保證，兩個(gè)治療環(huán)節(jié)相輔相成，缺一不可。沒有溶栓復(fù)流，即使用最有效的腦保護(hù)方法和藥物，最終也不能挽救持續(xù)缺血的心、腦組織；而單靠溶栓復(fù)流，沒有針對(duì)缺血期的可靠心、腦保護(hù)，則無法擴(kuò)大復(fù)流治療時(shí)間窗，也不可能抵抗缺血造成的多種代謝紊亂和再灌流損傷。因此，缺血性心、腦血管疾病的治療不僅需要快速改善其缺血狀態(tài)，還應(yīng)當(dāng)及時(shí)保護(hù)心腦組織，以恢復(fù)心腦功能、提高預(yù)后效果、降低致殘致死率。
鑒于川芎嗪是堿性化合物，以及其對(duì)缺血性心、腦血管疾病良好的復(fù)流作用，本發(fā)明的目的是提供川芎嗪與藥用酸的復(fù)鹽化合物及其制備方法，而且這種藥用酸與川芎嗪具有協(xié)同增效的藥理作用，尤其具有保護(hù)心腦組織的藥理作用。

發(fā)明內(nèi)容
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明所選用的酸性化合物是沒食子酸和丹參酸甲，分別與呈堿性的川芎嗪形成復(fù)鹽，本發(fā)明的川芎嗪的復(fù)鹽化合物有兩種，分別是沒食子酸川芎嗪鹽和丹參酸甲川芎嗪鹽。
沒食子酸(Gallic acid)又名倍酸、五倍子酸，其化學(xué)名稱為3，4，5-三羥基苯甲酸，分子式C7H6O5，沒食子酸是一種酸性化合物，廣泛存在于葡萄、茶葉等植物中，是自然界存在的一種多酚類化合物，對(duì)人體的毒性極小，安全性高，大鼠皮下注射致死劑量為4000mg/kg，沒食子酸具有較強(qiáng)的抗氧化、抗自由基損傷、抗血小板聚集等藥理作用。本發(fā)明沒食子酸川芎嗪復(fù)鹽的分子結(jié)構(gòu)式如下
分子式為C8H12N2.aC7H6O5，其中a是與川芎嗪成鹽的沒食子酸的分子數(shù)，亦即沒食子酸川芎嗪復(fù)鹽中兩個(gè)活性中心沒食子酸與川芎嗪的摩爾數(shù)之比，a的取值范圍為0.1～10，a的值可以是小數(shù)，也可以是整數(shù)，在制備時(shí)，控制沒食子酸和川芎嗪的投料反應(yīng)量，可控制a的值不同，制得不同成鹽比例的沒食子酸川芎嗪鹽。
特別的，優(yōu)選沒食子酸與川芎嗪以1∶1或2∶1的分子數(shù)配比成鹽，即a＝1或2時(shí)的成鹽形式，這時(shí)其分子結(jié)構(gòu)式如下 或 丹參酸甲(Salvianic acid A)又名丹參酸A、丹參素，其化學(xué)名稱為β-(3，4-二羥基苯基)乳酸，分子式C9H10O5，丹參酸甲是一種酸性化合物，是中藥植物丹參的主要成份，副作用極小，其藥物制劑已在臨床上廣泛應(yīng)用，丹參酸甲具有抑制血小板聚集及抗凝作用、抗動(dòng)脈粥樣硬化作用、抗氧化及自由基損傷作用、延長(zhǎng)心腦組織耐缺氧時(shí)間等藥理作用。本發(fā)明丹參酸甲川芎嗪復(fù)鹽的分子結(jié)構(gòu)式如下 分子式為C8H12N2.aC9H10O5，其中a是與川芎嗪成鹽的丹參酸甲的分子數(shù)，亦即丹參酸甲川芎嗪復(fù)鹽中兩個(gè)活性中心丹參酸甲與川芎嗪的摩爾數(shù)之比，a的取值范圍為0.1～10，a的值可以是小數(shù)，也可以是整數(shù)，在制備時(shí)，控制丹參酸甲和川芎嗪的投料反應(yīng)量，可控制a的值不同，制得不同成鹽比例的丹參酸甲川芎嗪鹽。
特別的，優(yōu)選丹參酸甲與川芎嗪以1∶1或2∶1的分子數(shù)配比成鹽，即a＝1或2時(shí)的成鹽形式，這時(shí)其分子結(jié)構(gòu)式如下 或 本發(fā)明提供了兩種川芎嗪的復(fù)鹽化合物，是利用川芎嗪的堿性基團(tuán)與沒食子酸或丹參酸甲的酸性基團(tuán)之間進(jìn)行酸堿成鹽反應(yīng)而形成的復(fù)鹽化合物，其制備方法是將川芎嗪與沒食子酸或丹參酸甲在合適的溶劑中充分混合，使川芎嗪與沒食子酸或丹參酸甲在液體環(huán)境中接觸而形成復(fù)鹽，再將溶劑通過蒸發(fā)、過濾、烘干或冷凍干燥等方法而除去，即會(huì)得到固體形態(tài)的沒食子酸川芎嗪鹽或丹參酸甲川芎嗪鹽。制備時(shí)，調(diào)控川芎嗪與沒食子酸或丹參酸甲的投料反應(yīng)量，可制得不同成鹽比例的復(fù)鹽。
另外，本發(fā)明領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員可以理解到的是，沒食子酸川芎嗪鹽或丹參酸甲川芎嗪鹽在成鹽制備過程中，為了保持特有的晶體結(jié)構(gòu)，會(huì)含有結(jié)晶水，因此，本發(fā)明川芎嗪的復(fù)鹽還包括其結(jié)晶水合物。
本發(fā)明沒食子酸川芎嗪鹽或丹參酸甲川芎嗪鹽，采用恰當(dāng)?shù)乃幱幂o料和制備方法，可以制成任何藥物上可以接受的藥物劑型，例如注射使用的粉針劑、注射液；口服用的片劑、口服液、顆粒劑，緩釋或速釋制劑，等等。
本發(fā)明沒食子酸川芎嗪鹽或丹參酸甲川芎嗪鹽化合物具有川芎嗪的抗血小板聚集、擴(kuò)張小動(dòng)脈、改善微循環(huán)、腦循環(huán)及活血化淤等藥理作用，也具有沒食子酸或丹參酸甲的抗氧化、抗自由基損傷、抗血小板聚集、延長(zhǎng)心腦組織耐缺氧時(shí)間等藥理作用，兩種不同的藥理作用對(duì)于缺血性心、腦血管疾病的治療不僅能快速改善其缺血狀態(tài)，還能及時(shí)保護(hù)心腦組織，以恢復(fù)心腦功能、提高預(yù)后效果、降低致殘致死率，具有良好的協(xié)同增效的藥理作用。
具體實(shí)施例方式
通過下面的實(shí)施例來對(duì)本發(fā)明沒食子酸川芎嗪鹽或丹參酸甲川芎嗪鹽做進(jìn)一步具體說明，但并不表示實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1.沒食子酸川芎嗪鹽(1∶1)的制備取川芎嗪4.00g(0.0233mol)用20ml無水乙醇加熱至完全溶解呈澄明溶液，另取沒食子酸3.96g(0.023mol)同樣用20ml無水乙醇加熱至完全溶解呈澄明溶液，趁熱將兩種溶液混合，保溫使混合液呈澄明狀態(tài)，緩慢攪拌并逐漸降至室溫，當(dāng)有大量稠厚的固體析出后停止攪拌并置于冰箱冷凍2～3小時(shí)，將析出的固體過濾后干燥，再用無水乙醇重結(jié)晶即得到成鹽比例為1∶1的沒食子酸川芎嗪復(fù)鹽，分子式C8H12N2.C7H6O5，呈白色結(jié)晶粉末，收率約94.1％。
實(shí)施例2.丹參酸甲川芎嗪鹽(1∶1)的制備取川芎嗪4.00g(0.0233mol)用20ml無水乙醇加熱至完全溶解呈澄明溶液，另取丹參酸甲4.6g(0.0232mol)用25ml無水乙醇加熱至完全溶解呈澄明溶液，趁熱將兩種溶液混合，保溫使混合液呈澄明狀態(tài)，緩慢攪拌并逐漸降至室溫，并置于冰箱冷凍過液，過濾，將濾餅干燥后，再用無水乙醇重結(jié)晶即得到成鹽比例為1∶1的丹參酸甲川芎嗪復(fù)鹽，分子式C8H12N2.C9H10O5，呈白色結(jié)晶粉末，收率約92.7％。
實(shí)施例3注射用沒食子酸川芎嗪凍干粉針劑處方?jīng)]食子酸川芎嗪 100g吐溫-80 4g甘露醇 150g磷酸鹽緩沖劑適量注射用水2000ml取以上處方量的沒食子酸川芎嗪和吐溫-80用適量注射用水溶解，再加入處方量的甘露醇，充分溶解后用磷酸鹽緩沖劑調(diào)節(jié)pH＝6～8，再加入針用活性炭吸附熱原，濾除針用活性炭后，精濾，檢測(cè)含量合格后，將濾液分裝入1000支西林瓶中，按凍干粉針劑制備工藝進(jìn)行冷凍干燥，即可制備成1000瓶注射用沒食子酸川芎嗪凍干粉針劑，每瓶含沒食子酸川芎嗪100mg。
實(shí)施例4丹參酸甲川芎嗪注射液處方丹參酸甲川芎嗪50g吐溫-80 1g乙醇 300ml羧甲基纖維素鈉0.5g注射用水 加至2000ml取以上處方量的丹參酸甲川芎嗪、吐溫-80、乙醇和羧甲基纖維素鈉用適量注射用水混合后充分溶解，再加入針用活性炭吸附熱原，濾除針用活性炭后，加注射用水至2000ml，精濾，檢測(cè)含量合格后，將濾液分裝入1000支安瓿瓶，熔封瓶口即可制備成1000瓶丹參酸甲川芎嗪注射液，每瓶注射液2ml，含丹參酸甲川芎嗪50mg。
實(shí)施例5.沒食子酸川芎嗪膠囊處方?jīng)]食子酸川芎嗪100g，微晶纖維素100g，羧甲基纖維素鈉5g，5％聚維酮(K30)水溶液適量。
將上述處方量的固體物料粉碎后過80目篩，混合均勻后用聚維酮溶液制成軟材，用20目篩制粒后烘干，整粒，分裝至1000?？招哪z囊中，即得每粒含100mg沒食子酸川芎嗪的膠囊制劑。
實(shí)施例6.丹參酸甲川芎嗪片處方丹參酸甲川芎嗪100g，乳糖150g，微晶纖維素40g，羧甲基纖維素鈉5g，5％聚維酮(K30)水溶液適量，硬脂酸鎂5g。
將丹參酸甲川芎嗪、乳糖、微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉粉碎后過80目篩，混合均勻后用聚維酮溶液制成軟材，用20目篩制粒后烘干，整粒，后加入硬脂酸鎂混勻，壓制成1000片，即得丹參酸甲川芎嗪片，每片含丹參酸甲川芎嗪100mg。
實(shí)施例7.沒食子酸川芎嗪緩釋膠囊處方?jīng)]食子酸川芎嗪100g，羥丙基甲基纖維素(K4M)210g，乳糖60g，5％聚維酮(K30)水溶液適量。
將沒食子酸川芎嗪、羥丙基甲基纖維素(K4M)、乳糖充分混合均勻，加入適量聚維酮制成軟材，用20目篩制粒后烘干，整粒，分裝至1000?？招哪z囊中，即得每粒含100mg沒食子酸川芎嗪的緩釋膠囊制劑。
實(shí)施例8.丹參酸甲川芎嗪腸溶片將實(shí)施例6制備的丹參酸甲川芎嗪片劑用包腸溶衣溶液包裹，即得丹參酸甲川芎嗪腸溶片。其中，包腸溶衣溶液可選用如下處方的包衣溶液鄰苯二甲酸醋酸纖維素10g，十八醇4.0g，苯二甲酸二乙酯1.0ml，異丙醇40ml，丙酮45ml。
實(shí)施例9.沒食子酸川芎嗪和丹參酸甲川芎嗪對(duì)心肌缺血大鼠的藥物作用實(shí)驗(yàn)以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證本發(fā)明沒食子酸川芎嗪和丹參酸甲川芎嗪藥物的療效優(yōu)勢(shì)。
運(yùn)用結(jié)扎大鼠冠脈左束支造成心肌缺血模型，將模型成功大鼠隨機(jī)分為四組(每組8只)(1).模型對(duì)照組按大鼠體重給予注射等體積生理鹽水；(2).鹽酸川芎嗪組按大鼠體重給予0.1mmol/kg體重；(3).丹參酸甲川芎嗪組按大鼠體重給予注射丹參酸甲川芎嗪(成鹽比例為1∶1)藥物0.1mmol/kg體重；(4).沒食子酸川芎嗪組按大鼠體重給予注射沒食子酸川芎嗪(成鹽比例為1∶1)藥物0.1mmol/kg體重。
以上各組于模型成功后5min通過股靜脈分別給予相應(yīng)藥物。
數(shù)據(jù)測(cè)定(1).心肌梗死范圍的測(cè)定結(jié)扎冠脈4小時(shí)后，放血處死大鼠，立即取出其心臟，對(duì)心肌進(jìn)行TTC染色，分離心肌片中梗死區(qū)，計(jì)算梗死心肌濕重量占全心室濕重的百分比；(2).超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的測(cè)定結(jié)扎冠脈4小時(shí)后，放血處死大鼠，取心室肌，制成冰生理鹽水組織勻漿，測(cè)定SOD酶活性和MDA的含量；測(cè)得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如下(n＝8，x±s)表1

由以上數(shù)據(jù)可以看出，本發(fā)明沒食子酸川芎嗪和丹參酸甲川芎嗪對(duì)結(jié)扎冠脈左束支造成心肌缺血的模型大鼠具有良好的保護(hù)和治療作用，與對(duì)照組和鹽酸川芎嗪組相比，無論是減小心肌梗死范圍、提高心肌組織的SOD活性、降低自由基脂質(zhì)過氧化物的含量，均具有顯著的藥物作用。
實(shí)施例10.沒食子酸川芎嗪和丹參酸甲川芎嗪對(duì)缺血缺氧腦損傷大鼠的藥物作用實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組SD大鼠，體重230±20g，將大鼠隨機(jī)分為四組，每組8只，分為模型對(duì)照組、鹽酸川芎嗪組、丹參酸甲川芎嗪組、沒食子酸川芎嗪組。
大鼠缺血缺氧腦損傷模型的建立實(shí)驗(yàn)大鼠用適度乙醚麻醉后，室溫縱向切開頸部皮膚，暴露實(shí)驗(yàn)側(cè)頸總動(dòng)脈，以0號(hào)雙線結(jié)扎，3h后恢復(fù)，再將大鼠置于密閉塑料容器中，通入含量為8％氧氣和92％氮?dú)獾幕旌蠚怏w，灌流2.5h，即獲得缺血缺氧的腦損傷大鼠模型。
藥物施用方案動(dòng)物模型建立后30分鐘內(nèi)從大鼠腹腔注射相應(yīng)藥物(1).模型對(duì)照組給予動(dòng)物注射生理鹽水；(2).鹽酸川芎嗪組給予動(dòng)物注射0.1mmol/kg體重的鹽酸川芎嗪；(3).丹參酸甲川芎嗪組給予動(dòng)物注射0.1mmo1/kg體重的丹參酸甲川芎嗪；(4).沒食子酸川芎嗪組給予動(dòng)物注射0.1mmol/kg體重的沒食子酸川芎嗪。
數(shù)據(jù)測(cè)定以上各組每天一次，連續(xù)給藥3天后處死大鼠，取實(shí)驗(yàn)大腦半球，稱重后制成勻漿測(cè)定(1).蛋白定量，采用雙縮脲法；(2).MDA含量，采用硫代巴比妥酸法；(3).SOD活性，采用黃嘌呤氧化酶法；(4).腦組織含水量，取與之相似的實(shí)驗(yàn)側(cè)前大腦約80～100mg，稱其濕重及96℃烘干48h后干重，按下式計(jì)算腦組織含水量腦組織含水量(％)＝(1-干重/濕重)×100％，表2各組大鼠的腦組織含水量(％)(n＝8，x+s)

*與模型對(duì)照組相比，p＜0.05；**與鹽酸川芎嗪組相比，p＜0.01表3.各組大鼠的腦組織MDA含量、SOD活性檢測(cè)(n＝8，x±s)


由表2、表3數(shù)據(jù)可以看出，本發(fā)明沒食子酸川芎嗪和丹參酸甲川芎嗪對(duì)缺血缺氧腦損傷大鼠具有良好的保護(hù)和治療作用，與對(duì)照組和鹽酸川芎嗪組相比，無論是減小腦水腫程度(腦組織含水量)、降低自由基脂質(zhì)過氧化物的含量、提高腦組織的SOD活性，/均具有顯著的藥物作用。
權(quán)利要求
1.川芎嗪的復(fù)鹽化合物，分別是沒食子酸川芎嗪鹽和丹參酸甲川芎嗪鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的沒食子酸川芎嗪鹽，其特征是具有以下分子結(jié)構(gòu)式 其中a是與川芎嗪成鹽的沒食子酸的分子數(shù)，a的取值范圍為0.1～10，優(yōu)選a＝1或2。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參酸甲川芎嗪鹽，其特征是具有以下分子結(jié)構(gòu)式 其中a是與川芎嗪成鹽的丹參酸甲的分子數(shù)，a的取值范圍為0.1～10，優(yōu)選a＝1或2。
4.根據(jù)權(quán)利要求2和3中任何一項(xiàng)所述的川芎嗪的復(fù)鹽，其制備方法是將川芎嗪與沒食子酸或丹參酸甲在合適的溶劑中充分混合，使川芎嗪與沒食子酸或丹參酸甲在液體環(huán)境中接觸而形成復(fù)鹽，再將溶劑除去。
5.根據(jù)權(quán)利要求2和3中任何一項(xiàng)所述，沒食子酸川芎嗪鹽和丹參酸甲川芎嗪鹽還包括其結(jié)晶水合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求2和3中任何一項(xiàng)所述的川芎嗪的復(fù)鹽，其特征是采用恰當(dāng)?shù)乃幱幂o料和制備方法，可制成任何藥物上可以接受的藥物劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及川芎嗪的協(xié)同增效藥用酸鹽，包括沒食子酸川芎嗪鹽和丹參酸甲川芎嗪鹽及其制備方法。其制備方法是將川芎嗪與沒食子酸或丹參酸甲在合適的溶劑中充分混合，使川芎嗪與沒食子酸或丹參酸甲在液體環(huán)境中接觸而形成復(fù)鹽，再將溶劑除去，調(diào)控川芎嗪與沒食子酸或丹參酸甲的投料反應(yīng)量，可制得不同成鹽比例的復(fù)鹽。本發(fā)明沒食子酸川芎嗪鹽或丹參酸甲川芎嗪鹽化合物具有川芎嗪的藥理作用，也具有沒食子酸或丹參酸甲的藥理作用，兩種不同的藥理作用對(duì)于缺血性心、腦血管疾病的治療不僅能快速改善其缺血狀態(tài)，還能及時(shí)保護(hù)心、腦組織，具有良好的協(xié)同增效的藥理作用。
文檔編號(hào)C07D241/00GK1683345SQ20051005401
公開日2005年10月19日 申請(qǐng)日期2005年2月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月28日
發(fā)明者楊喜鴻 申請(qǐng)人:楊喜鴻