專利名稱：膽甾－3β，5α，6β，19－四羥基－24－酮及衍生物的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮(結(jié)構(gòu)如I)及衍生物的合成方法。
背景技術(shù)：
24-亞甲基-膽甾-3β，5α，6β，19-四醇(結(jié)構(gòu)如式II)是從南海軟珊瑚Nephthea albida及N.tiexieralv erseveldt中分離得到的一種多羥基甾體化合物(王貴陽，李鳳英，曾隴梅等，高等學?；瘜W學報，1992，13，623-627)。該化合物對人體直腸癌細胞、人體肺癌細胞、鼠類淋巴癌細胞均具有較強的殺傷能力(Chang-Yih Duh，Shang-Kwei，Mei-Jen Chu et al.，J.Nat.Prod.，1998，61，1022-1024)，對多種炎癥有顯著的抗炎作用(王正濂，許實波，劉清等，熱帶海洋，1999，18，27-32)，該化合物對低鉀誘導的神經(jīng)元凋亡細胞有顯著的保護作用。
該化合物在海洋生物中的含量極低，直接用海洋生物原料提取目前尚存在很多問題，研究合成該化合物具有很高的藥用價值。合成該化合物的中間體膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮及含氮衍生物對低鉀誘導的神經(jīng)元凋亡細胞有顯著的保護作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮及衍生物的合成方法。
本發(fā)明的合成方法以豬去氧膽酸為原料，制備3β-乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酸通過和氯化亞砜反應制備成膽甾酰氯，超聲波輻射下和異丙基鎘試劑反應得3β-乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酮，再與N-溴代丁二酰亞胺/高氯酸水溶液體系中反應得到3β-乙酰氧基-膽甾-5α-溴-6β-羥基-24-酮，二乙酰氧基碘代苯氧化關(guān)環(huán)生成3β-乙酰氧基-膽甾-5α-溴-6，19-環(huán)氧-24-酮，接著用鋅粉/冰醋酸體系或鋅粉/醇體系還原生成3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酮，再通過堿解得膽甾-5-烯-3β，19-羥基-24-酮；用氧化劑氧化、水解反應得膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮；和甲基三苯基溴化膦反應合成24-亞甲基-膽甾-3β，5α，6β，19-四醇；和肼反應合成膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-雙腙。反應路線如下圖所示 I.膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮；
II.24-亞甲基-膽甾-3β，5α，6β，19-四醇；III.膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-雙腙；IV.3β-乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酸；V.3β-乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酮；VI.3β-乙酰氧基-膽甾-5α-溴-6β-羥基-24-酮；VII.3β-乙酰氧基-膽甾-5α-溴-6β，19-環(huán)氧-24-酮；VIII.3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酮；IXa.3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5，6β-環(huán)氧-24-酮；IXb.3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5，6α-環(huán)氧-24-酮；X.3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5，6-二羥基-24-酮。
本發(fā)明的合成方法的具體步驟是(1)IV參照文獻(Bharucha KR，Buckley GC，Cross CK，et al.Can J Chem.，1955，34982-990.)合成；(2)將IV溶于無水苯加入氯化亞砜，加入催化量的吡啶，在室溫下攪拌2～4小時，減壓濃縮至干，再補加苯繼續(xù)濃縮，帶出殘留的氯化亞砜，得黃色粘稠的液體；(3)稱取干燥鎂粉，加入無水乙醚，滴加異溴丙烷/無水乙醚溶液，加完后超聲輻射15～30分鐘，冷卻后分批加入氯化鎘，在25～40℃下在超聲波輻射下攪拌，冰浴冷卻下，將上步產(chǎn)物的30～40％無水苯溶液慢慢滴加到反應體系中，滴完后繼續(xù)超聲波輻射回流1～2小時，冰浴冷卻后，滴加1∶1鹽酸水溶液，用苯萃取，苯層用蒸餾水洗至中性，干燥，減壓濃縮，硅膠柱層析，得白色固體V；(4)取白色固體V，加入有機溶劑溶解，再加入HClO4及水，然后在避光條件下分批加入N-丁二酰亞胺，控制溫度低于10℃，之后在15～20℃下反應1～2小時，向反應液中加入10％Na2S2O8水溶液，分層后，上層濃縮，下層用CH2Cl2萃取，合并有機層，用飽和NaHCO3溶液洗滌，再用蒸餾水洗滌至中性，干燥，減壓濃縮，硅膠柱層析，得白色固體VI；(5)取化合物VI，溶入環(huán)己烷/苯混合液，加入氧化劑，20～40℃攪拌下，紫外燈照射7～8小時，反應液依次用10％硫代硫酸鈉水溶液，飽和NaHCO3溶液及蒸餾水洗滌至中性，干燥，減壓濃縮得淺黃色化合物VII；
(6)取化合物VIII加入冰醋酸溶解，加入鋅粉，攪拌回流20～24小時；趁熱抽濾，濾液用二氯甲烷萃取，萃取液分別用飽和碳酸氫鈉溶液及蒸餾水洗至中性，干燥，減壓濃縮，硅膠柱層析，得淺黃色粘稠液體VIII；(7)取化合物VIII加入二氯甲烷溶解，加入氧化劑，室溫下攪拌，減壓除去二氯甲烷，渣塊用乙酸乙酯溶解，然后加10％亞硫酸鈉溶液洗滌至無色，水洗至中性，干燥，減壓濃縮，得白色固體IXa，將其加入丙酮溶解，加入高氯酸，室溫下攪拌，調(diào)pH至中性，減壓蒸去丙酮，用二氯甲烷萃取，干燥，減壓濃縮，得白色固體X；(8)取化合物VIII加入88％甲酸溶解，沸水浴加熱5分鐘，冷卻至室溫，加入氧化劑，室溫放置24小時，用水稀釋后，用乙酸乙酯萃取，然后加10％亞硫酸鈉溶液洗滌至無色，水洗至中性，干燥，減壓濃縮，得白色固體IXb；(9)將上步產(chǎn)物IXb或X溶解在甲醇中，加入濃度為3％的氫氧化鉀醇溶液，加熱回流15～30分鐘，調(diào)pH為中性，減壓蒸餾除去甲醇，乙酸乙酯萃取，有機層干燥，減壓蒸去溶劑，得淺黃色固體，硅膠柱層析，得白色固體I；(10)將甲基三苯基溴化膦加入無水四氫呋喃溶液中，注入正丁基鋰，注入量以甲基三苯基溴化膦剛好溶解為宜，室溫下攪拌反應4～6小時，將上步中的I加入反應體系，繼續(xù)反應2～3小時，將反應液迅速倒入飽和的氯化銨溶液中，用乙醚萃取，醚層干燥，減壓蒸去溶劑，得淺黃色固體，硅膠柱層析，得白色固體II；(11)將I加入乙醇溶解，加入肼的水溶液中，解熱回流，減壓蒸去溶劑，加入水，調(diào)pH為中性，乙酸乙酯萃取，得白色固體，硅膠柱層析，得白色固體III。
上述反應步驟中，步驟(2)中II的苯溶液的濃度是25～45％，氯化亞砜的量是II的摩爾數(shù)的1.0～2.0倍；步驟(3)中鎂粉的量是II的摩爾數(shù)的1.2～3.0倍；步驟(4)中的有機溶劑為四氫呋喃或二氧六環(huán)；步驟(5)中的氧化劑為二乙酰氧基碘代苯或四醋酸鉛；步驟(7)中的氧化劑為高錳酸鉀/硫酸銅或間氯過苯甲酸；步驟(8)中的氧化劑為30％雙氧水。
本發(fā)明的合成方法的反應路線科學合理、合成物的產(chǎn)率高，合成的中間體膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮，24-亞甲基-膽甾-3β，5α，6β，19-四醇；及膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-雙腙對低鉀誘導的神經(jīng)元調(diào)亡細胞具有顯著的保護作用。
具體實施例方式
以下實施例用以說明本發(fā)明，但本發(fā)明的保護范圍并不僅限以下實施例。除非有特別說明，以下實施例中I代表膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮；II代表24-亞甲基-膽甾-3β，5α，6β，19-四醇；III代表膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-雙腙；IV代表3β-乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酸；V代表3β-乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酮；VI代表3β-乙酰氧基-膽甾-5α-溴-6β-羥基-24-酮；VII代表3β-乙酰氧基-膽甾-5α-溴-6β，19-環(huán)氧-24-酮；VIII代表3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酮；IXa代表3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5，6β-環(huán)氧-24-酮；IXb代表3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5，6α-環(huán)氧-24-酮；X代表3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5，6-二羥基-24-酮。
實施例1膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮的合成(1)取化合物(V)100克，加入300ml苯，20ml氯化亞砜，1ml吡啶，在室溫下攪拌2小時，減壓濃縮至干，除去殘留的氯化亞砜，得酰氯化合物用200ml苯溶解，備用。取20克干燥的鎂粉，加入60ml無水乙醚，在60％超聲波輻射下滴注73ml異溴丙烷的無水乙醚溶液，加完繼續(xù)超聲15～30分鐘，冷卻后分四批加入78克氯化鎘，在25～40℃下開60％超聲波振蕩半小時。冰水冷卻下，慢慢滴加酰氯的苯溶液，滴畢繼續(xù)超聲回流2小時。加冰水冷凍30分鐘后，滴加150ml(1∶1)鹽酸水溶液，用苯萃取三次，苯層用蒸餾水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，硅膠柱層析，得白色固體(VI)。
(2)取白色固體(VI)20克，加入20mL四氫呋喃溶解，加入適量HClO4及水，然后在避光條件下降20克N-丁二酰亞胺分批加入到反應液中，控制溫度低于10℃，之后在15～20℃下反應2小時。向反應液中加入10％Na2S2O8水溶液，分層后，用CH2Cl2萃取，合并有機層，用飽和NaHCO3溶液洗滌，再用蒸餾水洗滌至中性，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，硅膠柱層析，得白色固體(VII)。
(3)取化合物(VII)5克，溶入1000mL環(huán)己烷/苯混合液，加入4克二乙酰氧基碘代苯，2.8克碘，攪拌下，40℃下紫外燈照射2小時，反應液依次用10％硫代硫酸鈉水溶液，飽和NaHCO3溶液及蒸餾水洗滌至中性，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮得淺黃色粘稠狀化合物(VIII)。
(4)取化2克合物(VIII)加入40冰醋酸溶解，加入6鋅粉，攪拌回流20～24小時。趁熱抽濾，濾液到入5倍量水中，用二氯甲烷萃取，萃取液分別用飽和碳酸氫鈉溶液及蒸餾水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，硅膠柱層析，得淺黃色粘稠液體(III)。
(5)取化合物(VIII)加入二氯甲烷溶解(濃度約為2.5～10％)，加入結(jié)晶硫酸銅及高錳酸鉀混合物粉末，再加入適量叔丁醇及水，室溫下攪拌2小時。減壓除去二氯甲烷，渣塊用乙酸乙酯溶解，然后加10％亞硫酸鈉溶液洗滌至無色，水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得白色固體(IXa)。將其加入丙酮溶解，加入適量高氯酸，室溫下攪拌24小時，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，減壓蒸去丙酮，用二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得白色固體(X)。
(6)將上步產(chǎn)物(X)1g加到500mL3％的氫氧化鉀甲醇溶液，加熱回流30分鐘，用5％鹽酸調(diào)整溶液的pH為中性，減壓蒸餾除去甲醇，乙酸乙酯萃取三次，有機層合并用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸去溶劑，得淺黃色固體，硅膠柱層析，得白色固體(I)。
實施例2膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮的合成(1)～(4)與實施例1的步驟(1)～(4)相同。
(5)取化合物(VIII)加入二氯甲烷溶解(濃度約為2.5～10％)，加入間氯過氧苯甲酸，室溫下攪拌2小時。減壓除去二氯甲烷，渣塊用乙酸乙酯溶解，然后加10％亞硫酸鈉溶液洗滌至無色，水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得白色固體(IXa)。將其加入丙酮溶解，加入適量高氯酸，室溫下攪拌24小時，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，減壓蒸去丙酮，用二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得白色固體(X)。
(6)與實施1的步驟(6)相同。
實施例3膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮的合成
(1)～(4)與實施例1的步驟(1)～(4)相同。
(5)取化合物(VIII)加入88％甲酸溶解(濃度約為5％)，沸水浴加熱5分鐘，冷卻至室溫，加入30％過氧化氫溶液，室溫放置24小時，用水稀釋后，用乙酸乙酯萃取，然后加10％亞硫酸鈉溶液洗滌至無色，水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得白色固體(IXb)。
(6)將上步產(chǎn)物(IXb)1g加到500L3％的氫氧化鉀甲醇溶液，加熱回流30分鐘，用5％鹽酸調(diào)整溶液的pH為中性，減壓蒸餾除去甲醇，乙酸乙酯萃取三次，有機層合并用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸去溶劑，得淺黃色固體，硅膠柱層析，得白色固體(I)。
實施例424-亞甲基-膽甾-3β，5α，6β，19-四醇的合成(1)～(6)與實施例1的步驟(1)～(6)相同。
(7)在50mL無水四氫呋喃溶液中加入2克甲基三苯基溴化膦，通氮氣，注入適量的正丁基鋰，室溫下攪拌反應6小時，將1克(I)的四氫呋喃溶液注入反應體系，繼續(xù)反應2小時，將反應液迅速倒入飽和的氯化銨溶液中，用乙醚萃取，醚層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸去溶劑，得淺黃色固體，硅膠柱層析，得白色固體(II)。
實施例5膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-雙腙的合成(1)～(6)與實施例1的步驟(1)～(6)相同。
(7)將1克(I)用10mL乙醇溶解，加入1mL50％肼的水溶液，加熱回流4小時，減壓蒸去溶劑，加入適量水，調(diào)pH為中性，乙酸乙酯萃取，得白色固體，硅膠柱層析，得白色固體(III)。
實施例6膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-雙腙的合成(1)～(6)與實施例1的步驟(1)～(6)相同。
(7)將1克(I)用20mL乙醇溶解，加入1mL80％肼的水溶液，加熱回流2小時，減壓蒸去溶劑，加入適量水，調(diào)pH為中性，乙酸乙酯萃取，得白色固體，硅膠柱層析，得白色固體(III)。
目的產(chǎn)物1膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮的結(jié)構(gòu)確證熔點213-214℃元素分析C27H46O5測定值C，71.60；H，20.50；理論值C，71.92；H，10.29，MS[M+Na]+＝473IR3324，2941，2889，1708，1464，1380，1342，1048，975.
1HNMR(DMSO)3.99(1H，d，19-CH)，3.86(m，1H，3β-CH)，3.52(1H，m，19-CH)，3.23(m，1H，6β-CH)，2.59(1H，m，25-CH)，1.18(3H，d，26-CH3，27-CH3)，1.01(3H，s，19-CH3)，0.87(3H，d，21-CH3)，0.65(3H，s，18-CH3).
13CNMR(DMSO)214.2(C)，74.5(C)，73.8(CH)，65.8(CH)，62.0(CH2)，56.5(CH)，55.5(CH)，44.9(CH)，42.53(C)，42.47(CH)，41.0(C)，40.3(CH2)，39.8(CH)，36.4(CH)，34.9(CH2)，33.9(CH2)，31.1(CH2)，30.8(CH2)，29.3(CH2)，27.7(CH2)，26.8(CH2)，23.8(CH2)，21.7(CH3)，18.3(CH3)，18.1(CH3)，18.0(CH3)，13.1(CH3).
目的產(chǎn)物224-亞甲基-膽甾-3β，5α，6β，19-四醇的結(jié)構(gòu)確證熔點223-225℃元素分析C28H48O4測定值C，75.20；H，10.36理論值C，74.95；H，10.78，MS[M-H2O]+＝432，IR3416，3028，2936，2868，1642，1464，1377，10571HNMR(DMSO)5.25(1H，d，6β-OH)，4.71(1H，d，J＝1.5Hz，28-CH)，4.65(1H，d，J＝1.5Hz，28-CH)，4.51(1H，d，19-OH)，4.16(1H，d，3-CH)，4.01(1H，d，19-CH)，3.84(1H，m，3-CH)，3.64(1H，s，5-OH)，3.23(1H，m，6-CH)，2.25(1H，m，25-CH)，1.13(6H，d，26-CH3，27-CH3)，1.01(3H，s，19-CH3)，0.87(3H，d，21-CH3)，0.67(3H，s，18-CH3).
13CNMR(DMSO)156.6(C)，107.3(CH2)，75.4(C)，74.7(CH)，66.7(CH)，63.0(CH2)，57.4(CH)，56.7(CH)，45.9(CH)，43.5(C)，43.3(CH)，42.8(C)，41.3(CH2)，40.9(CH)，37.4(CH2)，36.1(CH)，33.9(CH2)，31.8(CH2)，31.4(CH2)，30.5(CH2)，28.7(CH2)，27.9(CH2)，24.70(CH2)，22.64(CH3)，22.57(CH3)，19.4(CH3)，13.1(CH3).
目的產(chǎn)物3膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-雙腙的結(jié)構(gòu)確證熔點270-272℃元素分析C54H92O4N2測定值C，70.92；H，10.44；N，2.98 理論值C，72.27；H，10.33；N，3.12MS[M+1]+＝897IR3318，2943，2870，1628，1464，1379，1344，1060，976。
1HNMR(DMSO)5.38(1H，t，6β-H)，4.71(1H，d，J＝1.5Hz，28-CH)，4.65(1H，d，J＝1.5Hz，28-CH)，3.52(1H，m，3-CH)，2.28(1H，m，25-CH)，1.13(6H，d，26-CH3，27-CH3)，1.01(3H，s，19-CH3)，0.91(3H，d，21-CH3)，0.69(3H，s，18-CH3).
13CNMR(DMSO)169.3(C)，75.4(C)，74.7(CH)，66.8(CH)，63.6(CH2)，57.5(CH)，56.4(CH)，45.9(CH)，43.5(C)，42.8(C)，41.3(CH2)，40.8(CH)，37.4(CH2)，35.8(CH)，35.6(CH2)，33.9(CH2)，31.8(CH2)，31.4(CH2)，30.5(CH2)，28.7(CH2)，27.9(CH2)，24.70(CH2)，22.5(CH3)，21.4(CH3)，19.2(CH3)，18.9(CH3)，13.1(CH3).
權(quán)利要求
1.一種膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮及衍生物的合成方法，其特征是以豬去氧膽酸為原料，制備3β-乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酸，通過和氯化亞砜反應制備成膽甾酰氯，超聲波輻射下和異丙基鎘試劑反應得3β-乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酮，再與N-溴代丁二酰亞胺/高氯酸水溶液體系反應得到3β-乙酰氧基-膽甾-5α-溴-6β-羥基-24-酮，之后用二乙酰氧基碘代苯生成3β-乙酰氧基-膽甾-5α-溴-6β，19-環(huán)氧-24-酮，用鋅粉/冰醋酸體系還原生成3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酮；再用氧化劑氧化5，6位雙鍵，水解反應得膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮；最后和甲基三苯基溴化膦反應合成24-亞甲基-膽甾-3β，5α，6β，19-四醇；和肼反應合成膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-雙腙。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征是具體的反應步驟為(1)將IV溶于無水苯加入氯化亞砜，加入催化量的吡啶，在室溫下攪拌2～4小時，減壓濃縮至干，再補加苯繼續(xù)濃縮，帶出殘留的氯化亞砜，得黃色粘稠的液體；(2)稱取干燥鎂粉，加入無水乙醚，滴加異溴丙烷/無水乙醚溶液，加完后超聲輻射15～30分鐘，冷卻后分批加入氯化鎘，在25～40℃下在超聲波輻射下攪拌，冰浴冷卻下，將上步產(chǎn)物的30～40％無水苯溶液慢慢滴加到反應體系中，滴完后繼續(xù)超聲波輻射回流1～2小時，冰浴冷卻后，滴加1∶1鹽酸水溶液，用苯萃取，苯層用蒸餾水洗至中性，干燥，減壓濃縮，硅膠柱層析，得白色固體V；(3)取白色固體V，加入有機溶劑溶解，再加入HClO4及水，然后在避光條件下分批加入N-丁二酰亞胺，控制溫度低于10℃，之后在15～20℃下反應1～2小時，向反應液中加入10％Na2S2O8水溶液，分層后，上層濃縮，下層用CH2Cl2萃取，合并有機層，用飽和NaHCO3溶液洗滌，再用蒸餾水洗滌至中性，干燥，減壓濃縮，硅膠柱層析，得白色固體VI；(4)取化合物VI，溶入環(huán)己烷/苯混合液，加入氧化劑，20～40℃攪拌下，紫外燈照射7～8小時，反應液依次用10％硫代硫酸鈉水溶液，飽和NaHCO3溶液及蒸餾水洗滌至中性，干燥，減壓濃縮得淺黃色化合物VII；(5)取化合物VIII加入冰醋酸溶解，加入鋅粉，攪拌回流20～24小時；趁熱抽濾，濾液用二氯甲烷萃取，萃取液分別用飽和碳酸氫鈉溶液及蒸餾水洗至中性，干燥，減壓濃縮，硅膠柱層析，得淺黃色粘稠液體VIII；(6)取化合物VIII加入二氯甲烷溶解，加入氧化劑，室溫下攪拌，減壓除去二氯甲烷，渣塊用乙酸乙酯溶解，然后加10％亞硫酸鈉溶液洗滌至無色，水洗至中性，干燥，減壓濃縮，得白色固體IXa，將其加入丙酮溶解，加入高氯酸，室溫下攪拌，調(diào)pH至中性，減壓蒸去丙酮，用二氯甲烷萃取，干燥，減壓濃縮，得白色固體X；(7)取化合物VIII加入88％甲酸溶解，沸水浴加熱5分鐘，冷卻至室溫，加入氧化劑，室溫放置24小時，用水稀釋后，用乙酸乙酯萃取，然后加10％亞硫酸鈉溶液洗滌至無色，水洗至中性，干燥，減壓濃縮，得白色固體IXb；(8)將上步產(chǎn)物IXb或X溶解在甲醇中，加入濃度為3％的氫氧化鉀醇溶液，加熱回流15～30分鐘，調(diào)pH為中性，減壓蒸餾除去甲醇，乙酸乙酯萃取，有機層干燥，減壓蒸去溶劑，得淺黃色固體，硅膠柱層析，得白色固體I；(9)將甲基三苯基溴化膦加入無水四氫呋喃溶液中，注入正丁基鋰，注入量以甲基三苯基溴化膦剛好溶解為宜，室溫下攪拌反應4～6小時，將上步中的I加入反應體系，繼續(xù)反應2～3小時，將反應液迅速倒入飽和的氯化銨溶液中，用乙醚萃取，醚層干燥，減壓蒸去溶劑，得淺黃色固體，硅膠柱層析，得白色固體II；(10)將I加入乙醇溶解，加入肼的水溶液中，解熱回流，減壓蒸去溶劑，加入水，調(diào)pH為中性，乙酸乙酯萃取，得白色固體，硅膠柱層析，得白色固體III；上述步驟中，I代表膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-酮；II代表24-亞甲基-膽甾-3β，5α，6β，19-四醇；III代表膽甾-3β，5α，6β，19-四羥基-24-雙腙；IV代表3β-乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酸；V代表3β-乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酮；VI代表3β-乙酰氧基-膽甾-5α-溴-6β-羥基-24-酮；VII代表3β-乙酰氧基-膽甾-5α-溴-6β，19-環(huán)氧-24-酮；VIII代表3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5-烯-24-酮；IXa代表3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5，6β-環(huán)氧-24-酮；IXb代表3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5，6α-環(huán)氧-24-酮；X代表3β，19-二乙酰氧基-膽甾-5，6-二羥基-24-酮。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的合成方法，其特征是步驟(1)中II的苯溶液的濃度是25～45％，氯化亞砜的量是II的摩爾數(shù)的1.0～2.0倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的合成方法，其特征是步驟(2)中鎂粉的量是II的摩爾數(shù)的1.2～3.0倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的合成方法，其特征是步驟(3)中的有機溶劑為四氫呋喃或二氧六環(huán)。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的合成方法，其特征是步驟(4)中的氧化劑為二乙酰氧基碘代苯或四醋酸鉛。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的合成方法，其特征是步驟(6)中的氧化劑為高錳酸鉀/硫酸銅或間氯過苯甲酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的合成方法，其特征是步驟(7)中的氧化劑為30％雙氧水。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種膽甾－3β，5α，6β，19－四羥基－24－酮及衍生物的合成方法，該方法以豬去氧膽酸為原料，制備3β－乙酰氧基－膽甾－5－烯－24－酸，通過和氯化亞砜反應制備成膽甾酰氯，超聲波輻射下和異丙基鎘試劑反應得3β－乙酰氧基－膽甾－5－烯－24－酮，再與N－溴代丁二酰亞胺/高氯酸水溶液體系反應得到3β－乙酰氧基－膽甾－5α－溴－6β－羥基－24－酮，之后用二乙酰氧基碘代苯生成3β－乙酰氧基－膽甾－5α－溴－6β，19－環(huán)氧－24－酮，用鋅粉/冰醋酸體系還原生成3β，19－二乙酰氧基－膽甾－5－烯－24－酮；再用氧化劑氧化5，6位雙鍵，水解反應得膽甾－3β，5α，6β，19－四羥基－24－酮；最后和甲基三苯基溴化膦反應合成24－亞甲基－膽甾－3β，5α，6β，19－四醇；和肼反應合成膽甾－3β，5α，6β，19－四羥基－24－雙腙。本發(fā)明的合成方法具有原料廉價易得、合成路線科學合理、各步合成產(chǎn)率高等特點，目標化合物對低鉀誘導的神經(jīng)元調(diào)亡細胞有顯著的保護作用。
文檔編號C07J75/00GK1793159SQ20051012137
公開日2006年6月28日 申請日期2005年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月31日
發(fā)明者顏光美, 張靜夏, 丘鵬新, 黃亦俊 申請人:中山大學