專利名稱：Pna寡聚體nh的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種PNA寡聚體NH2TTTOH的合成方法。
背景技術(shù)：
肽核酸(PNA，peptide nucleic acid)是90年代初丹麥科學(xué)家發(fā)明的一種全新的DNA類似物。從化學(xué)角度來看，PNA的結(jié)構(gòu)是“寡聚核苷酸”和“蛋白質(zhì)”的雜交體，因此其顯示了獨(dú)特的性質(zhì)。PNA不僅具有對酶的穩(wěn)定性和對DNA(RNA)結(jié)合的序列特異性，而且還可以方便地進(jìn)行化學(xué)合成，這些優(yōu)點(diǎn)使PNA作為反義核酸藥物十分引人注目。因此，自1991年P(guān)NA問世以來，科學(xué)家們對其進(jìn)行了大量的研究，并針對其缺點(diǎn)和各種不同研究的需要設(shè)計(jì)出了許多修飾或改造了的PNA。PNA很有希望成為有效的抗腫瘤藥物和有力的分子生物學(xué)工具。PNA是由含有不同的堿基的單體通過酰胺鍵(肽鍵)連接而得到的。比較適用于用化學(xué)方法進(jìn)行合成。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于根據(jù)多肽固相合成產(chǎn)物易分離，操作過程簡單等特點(diǎn)，提供了一種PNA寡聚體的合成方法。
本發(fā)明通過如下措施來實(shí)現(xiàn)NH2TTTOH的結(jié)構(gòu)式如式(I)化合物
本發(fā)明以單體BocTOH為起始物，與樹脂反應(yīng)進(jìn)行固相合成，得到目標(biāo)產(chǎn)物式(I)化合物。
一種PNA寡聚體(NH2TTTOH)的合成方法，其特征在于該方法依次包括以下步驟A.使用式(II)的PNA單體BocTOH與式(III)的Merrifield樹脂在三乙胺催化下反應(yīng)生成式(IV)BocTO-Resin B.使用式(V)三氟乙酸與式(IV)BocTO-Resin反應(yīng)生成式(VI)(H2N)TO-Resin C.使用式(II)的BocTOH和式(VI)的(H2N)TO-Resin在復(fù)合縮合劑HOOBt和DCC的作用下反應(yīng)生成式(VII)的BocTTO-Resin
D.依次重復(fù)B、C、B步驟，得到式(VIII)的(H2N)TTTO-Resin E.TFA和間甲酚混合溶液與式(VIII)的(H2N)TTTO-Resin反應(yīng)，將式(I)的目標(biāo)產(chǎn)物從樹脂上切下。
在上述的合成方法中，本發(fā)明的A步驟以乙酸乙酯為反應(yīng)介質(zhì)，65～90℃反應(yīng)36～72小時(shí)的條件下進(jìn)行。
本發(fā)明的A步驟中式(II)的與式(III)的Merrifield樹脂反應(yīng)得摩爾比為1∶0.25～0.5。
本發(fā)明的A步驟中，式(II)的BocTOH與三乙胺的摩爾比為1∶0.25～0.5。
在上述的合成方法中，本發(fā)明B步驟以二氯甲烷溶液作為反應(yīng)介質(zhì)，10℃～室溫反應(yīng)5～45分鐘的條件下進(jìn)行反應(yīng)。
本發(fā)明的B步驟中，式(V)的三氟乙酸與二氯甲烷的摩爾比為1∶0.8～1.6。
本發(fā)明的B步驟中，式(V)的三氟乙酸與式(IV)BocTO-Resin的摩爾比為1∶1.7～3。
在上述的合成方法中，本發(fā)明C步驟以乙酸乙酯為反應(yīng)介質(zhì)，10℃～室溫反應(yīng)3～6小時(shí)的條件下進(jìn)行反應(yīng)。
本發(fā)明的C步驟中，式(II)的BocTOH與式(VI)的(H2N)TO-Resin摩爾比為1∶0.25～0.5。
本發(fā)明的C步驟中，式(VI)的(H2N)TO-Resin與復(fù)合縮合劑HOOBt和DCC的摩爾比為1∶2.5～5。
在上述的合成方法中，本發(fā)明D步驟是B、C、B步驟的重復(fù)，各反應(yīng)物用量參考B、C步驟。
在上述的合成方法中，本發(fā)明E步驟以三氟乙酸和間甲苯酚為反應(yīng)介質(zhì)，10℃～室溫反應(yīng)1～3小時(shí)的條件下進(jìn)行反應(yīng)。
本發(fā)明所涉及到的縮合反應(yīng)可以用下面的示意圖表示
具體實(shí)施例方式為了更好地理解本發(fā)明，通過實(shí)例進(jìn)行說明。
實(shí)施例11.接樹脂反應(yīng)稱取一定量的PNA單體BocTOH和Cl-C6H4-Resin，以乙酸乙酯為介質(zhì)，三乙胺催化，回流48小時(shí)后，過濾，二氯甲烷洗滌(2×5ml)。
2.去保護(hù)反應(yīng)在上述體系中，以二氯甲烷為溶劑，加入等體積的CF3COOH，反應(yīng)將Boc基團(tuán)脫除。三乙胺中和，二氯甲烷洗滌。
3.偶合反應(yīng)在上述體系中，以二氯甲烷/DMF(1∶1)為溶劑，四倍量的PNA單體BocTOH及等摩爾的縮合劑HOOBt和DCC進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的固相合成。
4.重復(fù)步驟3，直到所需產(chǎn)物。
5.切樹脂反應(yīng)在上述體系中，以三氟乙酸和間甲苯酚為反應(yīng)介質(zhì)，室溫反應(yīng)1小時(shí)后，過濾，收集濾液。將乙醚加入，冷凍可析出固體，即為產(chǎn)物。
MS-表征
權(quán)利要求
1.一種PNA寡聚體NH2TTTOH的合成方法，其特征在于該方法依次包括以下步驟A.使用式(II)的PNA單體BocTOH與式(III)的Merrifield樹脂在三乙胺催化下反應(yīng)生成式(IV)BocTO-Resin B.使用式(V)三氟乙酸與式(IV)BocTO-Resin反應(yīng)生成式(VI)(H2N)TO-Resin C.使用式(II)的BocTOH和式(VI)的(H2N)TO-Resin在復(fù)合縮合劑HOOBt和DCC的作用下反應(yīng)生成式(VII)的BocTTO-Resin D.依次重復(fù)B、C、B步驟，得到式(VIII)的(H2N)TTTO-Resin E.TFA和間甲酚混合溶液與式(VIII)的(H2N)TTTO-Resin反應(yīng)，將式(I)的目標(biāo)產(chǎn)物從樹脂上切下。
2.如權(quán)利要求1所說的方法，其特征在于A步驟以乙酸乙酯為反應(yīng)介質(zhì)，65～90℃反應(yīng)36～72小時(shí)的條件下進(jìn)行。
3.如權(quán)利要求1所說的方法，其特征在于A步驟中式(II)的與式(III)的Merrifield樹脂反應(yīng)的摩爾比為1∶0.25～0.5。
4.如權(quán)利要求1或2所說的方法，其特征在于A步驟中式(II)的BocTOH與三乙胺的摩爾比為1∶0.25～0.5。
5.如權(quán)利要求1所說的方法，其特征在于B步驟以二氯甲烷溶液作為反應(yīng)介質(zhì)，10℃～室溫反應(yīng)5～45分鐘的條件下進(jìn)行反應(yīng)。
6.如權(quán)利要求1或5所說的方法，其特征在于B步驟中式(V)的三氟乙酸與二氯甲烷的摩爾比為1∶0.8～1.6。
7.如權(quán)利要求1或5所說的方法，其特征在于B步驟中式(V)的三氟乙酸與式(IV)BocTO-Resin的摩爾比為1∶1.7～3。
8.如權(quán)利要求1所說的方法，其特征在于C步驟以乙酸乙酯為反應(yīng)介質(zhì)，10℃～室溫反應(yīng)3～6小時(shí)的條件下進(jìn)行反應(yīng)。
9.如權(quán)利要求1或8所說的方法，其特征在于C步驟中式(II)的BocTOH與式(VI)的(H2N)TO-Resin摩爾比為1∶0.25～0.5。
10.如權(quán)利要求1或8所說的方法，其特征在于C步驟中式(VI)的(H2N)TO-Resin與復(fù)合縮合劑HOOBt和DCC的摩爾比為1∶2.5～5。
11.如權(quán)利要求1所說的方法，其特征在于E步驟以三氟乙酸和間甲苯酚為反應(yīng)介質(zhì)，10℃～室溫反應(yīng)1～3小時(shí)的條件下進(jìn)行反應(yīng)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種PNA寡聚體NH
文檔編號C07H1/00GK1978460SQ20051012658
公開日2007年6月13日 申請日期2005年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月30日
發(fā)明者劉相, 陳淼 申請人:中國科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所