專(zhuān)利名稱(chēng)：甲羥戊酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型的甲羥戊酸衍生物及它們作為抗腫瘤劑的用途。
背景技術(shù)：
含有具備1，5-二烯結(jié)構(gòu)的香葉基的化合物大量存在于生物體內(nèi)，作為顯示各種生理活性且具有多烯結(jié)構(gòu)的物質(zhì)在生物體內(nèi)的前體是已知的。這種具有1，5-二烯結(jié)構(gòu)的物質(zhì)以及由此衍生出的多烯類(lèi)均由甲羥戊酸開(kāi)始進(jìn)行生物合成。
本發(fā)明人著眼于作為含有具備1，5-二烯結(jié)構(gòu)的香葉基的化合物，成為香葉酸或香葉胺，甚至多烯類(lèi)的生物合成基礎(chǔ)的甲羥戊酸，合成了香葉酸或香葉胺以及甲羥戊酸的各種衍生物，研究了其生理活性，特別是抗腫瘤作用和毒性，結(jié)果完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
也就是說(shuō)，本發(fā)明提供下述式(I-1)、(I-2)或(I-3)表示的含香葉基的化合物。

式中，R1表示下述基團(tuán)， 或 R2表示由選自蘋(píng)果酸、枸櫞酸、琥珀酸、富馬酸、2-氧代戊二酸、丙酮酸、對(duì)丙酮酰氨基苯甲酸、視黃酸、酪氨酸、半胱氨酸、谷氨酸和絲氨酸的羧酸除去存在的所有羧基后的殘基，其中，該殘基上存在羥基或氨基時(shí)，這些基團(tuán)可以根據(jù)情況用?；?例如低級(jí)烷?；?或苯甲氧基羰基保護(hù)，m為1、2或3，n為0、1或2，m+n表示上述羧酸中存在的羧基數(shù)，R3表示對(duì)羥基苯基或巰基。
本發(fā)明還提供下述式(I-4)表示的甲羥戊酸衍生物。
式中，R4表示-CH2OH或-CH3。
上述式(I-1)的香葉基-糖衍生物中包含下述5個(gè)化合物。
N-香葉基葡糖醛酰胺 N-香葉基半乳糖醛酰胺 N-半乳糖基香葉酰胺(galactosylgeranamide) N-葡糖基香葉酰胺
N-巖藻糖香葉酰胺 作為上述式(I-2)的含香葉基的酰胺衍生物，例如包含下述化合物。
N，N-二香葉基蘋(píng)果酸二酰胺 O-乙?；?N-香葉基蘋(píng)果酸一酰胺
O-乙酰基-N，N-二香葉基蘋(píng)果酸二酰胺 N，N，N-三香葉基枸櫞酸三酰胺 N-香葉基琥珀酸一酰胺
N，N-二香葉基琥珀酸二酰胺 N，N-二香葉基富馬酸二酰胺 N-香葉基富馬酸一酰胺 N-香葉基-2-氧代戊二酰胺
N-香葉基丙酮酸酰胺 N-香葉基-對(duì)丙酮酰氨基苯甲酰胺 酪氨酸香葉酰胺 N-乙?；野彼嵯闳~酰胺
半胱氨酸香葉酰胺 谷氨酸二香葉基二酰胺 絲氨酸香葉酰胺 N-香葉基視黃酸酰胺
另外，作為上述式(I-3)的含香葉基的酰胺衍生物，包含下述2個(gè)化合物。
N-香葉酰基酪氨酸 N-香葉?；腚装彼?作為上述式(I-4)的甲羥戊酸衍生物，例如包含下述化合物。
N-葡糖基甲羥戊酸酰胺
N-半乳糖基甲羥戊酸酰胺 N-巖藻糖甲羥戊酸酰胺 式(I-1)的化合物中，上述式(1)和(2)的化合物例如可以通過(guò)使香葉胺與羥基被?；?例如乙?；?等保護(hù)的葡糖醛酸或半乳糖醛酸的反應(yīng)性衍生物(例如混合酸酐、活性酯、鹵化物等)進(jìn)行酰胺化反應(yīng)而制備。
另外，式(I-1)的化合物中，上述式(3)至(5)的化合物例如可以通過(guò)使香葉酸的反應(yīng)性衍生物(例如混合酸酐、活性酯、鹵化物等)與半乳糖胺、葡糖胺或巖藻糖胺進(jìn)行酰胺化反應(yīng)而制備。
上述酰胺化反應(yīng)可以按照肽化學(xué)領(lǐng)域的酰胺化反應(yīng)的常規(guī)方法進(jìn)行，通?？梢栽谶m當(dāng)?shù)亩栊杂袡C(jī)溶劑(例如四氫呋喃、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷等)中或水中，在冷卻到約0℃至加熱到約60℃的條件下，優(yōu)選在約0℃至室溫的條件下進(jìn)行。
香葉胺對(duì)羥基被保護(hù)的葡糖醛酸或半乳糖醛酸的反應(yīng)性衍生物的使用比例，沒(méi)有嚴(yán)格的限制，通常優(yōu)選每1摩爾該反應(yīng)性衍生物，在1～2摩爾的范圍內(nèi)使用香葉胺。
另外，半乳糖胺、葡糖胺或巖藻糖胺對(duì)香葉酸的反應(yīng)性衍生物的使用比例，沒(méi)有嚴(yán)格的限定，通常優(yōu)選每1摩爾該反應(yīng)性衍生物，也在1～2摩爾的范圍內(nèi)使用半乳糖胺、葡糖胺或巖藻糖胺。
酰胺化反應(yīng)后，存在羥基保護(hù)基的場(chǎng)合，通過(guò)使其保護(hù)基進(jìn)行例如水解等脫保護(hù)基反應(yīng)，可以得到上述式(I-1)的香葉基-糖衍生物。
通過(guò)上述反應(yīng)生成的式(I-1)的香葉基-糖衍生物可以采用常規(guī)的手段，例如提取、結(jié)晶、色譜法等，從反應(yīng)混合物分離、精制。
另外，上述式(I-2)的含香葉基的酰胺衍生物例如可以通過(guò)下述方法制備，即，使香葉胺與存在的羥基或氨基被酰基(例如乙?；鹊图?jí)烷酰基)或苯甲氧基羰基等保護(hù)的式(II)所示羧酸的反應(yīng)性衍生物(例如混合酸酐、活性酯、鹵化物等)進(jìn)行酰胺化反應(yīng)。
式中，R2、m和n與上述含義相同。
上述酰胺化反應(yīng)可以按照肽化學(xué)領(lǐng)域的酰胺化反應(yīng)的常規(guī)方法進(jìn)行，通?？梢栽谶m當(dāng)?shù)亩栊杂袡C(jī)溶劑(例如四氫呋喃、乙醚、二氨甲烷、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺等)中，在冷卻到約0℃至加熱到約60℃的條件下，優(yōu)選在約0℃至室溫的條件下進(jìn)行。
香葉胺對(duì)式(II)的羧酸的反應(yīng)性衍生物的使用比例可以根據(jù)要引入該羧酸中的香葉基數(shù)(m)變化，通常每1摩爾該反應(yīng)性衍生物，優(yōu)選在1摩爾至(m+2)摩爾的范圍內(nèi)使用。
酰胺化反應(yīng)后，存在羥基保護(hù)基或氨基保護(hù)基的場(chǎng)合，根據(jù)需要使其保護(hù)基進(jìn)行例如水解等脫保護(hù)基反應(yīng)，可以得到上述式(I-2)的含香葉基的酰胺衍生物。
另外，上述式(I-3)的含香葉基的酰胺衍生物例如可以通過(guò)使香葉酸的反應(yīng)性衍生物(例如混合酸酐、活性酯、鹵化物等)與酪氨酸或半胱氨酸進(jìn)行酰胺化反應(yīng)來(lái)制備。
該酰胺化反應(yīng)也可以按照肽化學(xué)領(lǐng)域的酰胺化反應(yīng)的常規(guī)方法進(jìn)行，通常可以在適當(dāng)?shù)亩栊杂袡C(jī)溶劑(例如四氫呋喃、乙醚、二氯甲烷、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺等)中或水中，在冷卻到約0℃至加熱到約60℃的條件下，優(yōu)選在約0℃至室溫的條件下進(jìn)行。
酪氨酸或半胱氨酸對(duì)香葉酸的反應(yīng)性衍生物的使用比例沒(méi)有嚴(yán)格的限制，通常每1摩爾該反應(yīng)性衍生物，優(yōu)選在1～2摩爾的范圍內(nèi)使用。
通過(guò)上述反應(yīng)生成的式(I-2)或(I-3)的含香葉基的酰胺衍生物，可以采用常規(guī)的手段，例如提取、結(jié)晶、色譜法等，從反應(yīng)混合物分離、精制。
上述式(I-4)的甲羥戊酸衍生物例如可以通過(guò)使式(III)表示的糖胺或其鹽與甲羥戊內(nèi)酯或甲羥戊酰鹵反應(yīng)進(jìn)行制備。
式中，R4與上述含義相同。
式(III)的糖胺或其鹽(例如鹽酸鹽)與甲羥戊內(nèi)酯或甲羥戊酰鹵(例如甲羥戊酰氯)的反應(yīng)，可以在水或適當(dāng)?shù)亩栊杂袡C(jī)溶劑(例如N，N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃、氯仿等)中，在室溫至溶劑的回流溫度之間，優(yōu)選約40～約70℃的溫度下進(jìn)行。
甲羥戊內(nèi)酯或甲羥戊酰鹵對(duì)式(III)的糖胺的使用比例沒(méi)有嚴(yán)格的限制，通常每1摩爾式(III)的糖胺，優(yōu)選在1～2摩爾的范圍內(nèi)使用甲羥戊內(nèi)酯或甲羥戊酰鹵。
使用式(III)的糖胺的鹽或甲羥戊酰鹵作為出發(fā)原料的場(chǎng)合，一般情況下，上述反應(yīng)希望添加堿，例如N-甲基哌啶等叔胺；氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鉀等無(wú)機(jī)堿等進(jìn)行。
通過(guò)上述反應(yīng)生成的式(I-4)的甲羥戊酸衍生物可以采用常規(guī)的手段，例如提取、結(jié)晶、色譜法等，從反應(yīng)混合物分離、精制。
本發(fā)明提供的上述式(I-1)至(I-4)的化合物如下述抗腫瘤效果的測(cè)定結(jié)果表明的那樣，具有優(yōu)良的抗腫瘤活性。
抗腫瘤效果的測(cè)定無(wú)菌地取出在5周齡的雌性裸小鼠(BALB/c，Ninox)的背部皮下移植、繼代移植的HuH-7細(xì)胞(人肝癌的樹(shù)立細(xì)胞株)的癌瘤，在磷酸鹽緩沖液(PBS)中破碎成5×5mm2的大小后，將其一塊移植到裸小鼠背部皮下。
將被測(cè)物質(zhì)溶解于玉米油中，移植后1周至3周將該溶液連續(xù)給予小鼠腹腔內(nèi)，1日1次，250μg/小鼠。給藥結(jié)束后，取出癌瘤，測(cè)定其重量，按照下式計(jì)算出抗腫瘤效果和體重減少。另外，實(shí)驗(yàn)中每組使用6只小鼠，以?xún)H給予溶劑(玉米油)的組作為對(duì)照組。
抗腫瘤效果及體重減少的評(píng)價(jià)，以對(duì)照組為100％，按照下述標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。
抗腫瘤效果-＞100％、+/-100～75％、+75～50％、++50～25％、+++25～0％體重減少-＞110％、+/-110～100％、+100～95％、++95～90％、+++＜90％死亡率(實(shí)驗(yàn)期間的死亡比例)-無(wú)死亡例+/-高濃度(500μg/小鼠)給藥時(shí)有死亡例+1～3只死亡++3～5只死亡
+++6只全部死亡綜合評(píng)價(jià)-抗腫瘤效果弱，對(duì)宿主小鼠的毒性非常強(qiáng)+/-確認(rèn)有弱的抗腫瘤效果，但也確認(rèn)對(duì)宿主小鼠有毒性+確認(rèn)有一定的抗腫瘤效果，但是對(duì)宿主小鼠的毒性也強(qiáng)++確認(rèn)有強(qiáng)的抗腫瘤效果，對(duì)宿主小鼠的毒性弱+++確認(rèn)有強(qiáng)的抗腫瘤效果，對(duì)宿主小鼠沒(méi)有毒性結(jié)果如下述表1～3所示。
表1

表2

表3

根據(jù)上述結(jié)果可知，本發(fā)明的上述式(I-1)～(I-4)的化合物對(duì)HuH-7細(xì)胞具有優(yōu)良的抗腫瘤效果，且?guī)缀鯖](méi)有毒性，期待作為用于以肝癌為首的各種實(shí)體瘤的處置、治療的抗腫瘤劑使用。
使用本發(fā)明的化合物作為抗腫瘤劑等藥物時(shí)，該化合物可以口服或非口服(例如靜脈注射、肌肉注射、皮下注射等)給藥，其有效給藥量可以根據(jù)需給藥的患者的癥狀、疾病的輕重、體重、年齡、醫(yī)師的判斷等，在寬范圍內(nèi)變化，例如注射的場(chǎng)合，通?？梢允羌s1～約50mg/kg/日，1日1次或分?jǐn)?shù)次給藥。
使用本發(fā)明的化合物作為藥物時(shí)，可以將該化合物的有效量與制劑學(xué)上允許的載體或稀釋劑(例如賦型劑、溶劑、其他助劑等)制劑成適于給藥的給藥單位形態(tài)，例如片劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、腸溶劑、糖錠、糖漿劑、酏劑、溶液劑、懸濁劑、乳劑等劑型。
作為上述制劑化時(shí)可以使用的載體或稀釋劑，例如淀粉、乳糖、砂糖、甘露醇、羧甲基纖維素等賦型劑；硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉、滑石等潤(rùn)滑劑；糊精、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、阿拉伯膠、玉米淀粉、明膠等粘合劑；馬鈴薯淀粉、羧甲基纖維素等崩解劑；注射用蒸餾水、生理鹽水、右旋糖水溶液、注射用植物油、丙二醇、聚乙二醇等稀釋溶劑等，而且根據(jù)需要也可以配合矯味矯臭劑、著色劑、等滲劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、止痛劑等。
另外，根據(jù)需要，本發(fā)明的藥物中也可以配合其他藥理學(xué)活性物質(zhì)。
以下，結(jié)合實(shí)施例更具體地說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例合成例1N-香葉基半乳糖醛酰胺的合成在O-四乙酰基半乳糖醛酸(3.62g，10mmol)的四氫呋喃(THF)(20ml)溶液中加入三乙胺(1.01g，10mmol)，冷卻至0℃。在0℃下向該溶液中滴加氯甲酸異丁酯(1.37g，10mmol)的THP(5ml)溶液，攪拌30分鐘。在該溶液中滴加香葉胺(1.53g，10mmol)的THF(5ml)溶液，在0℃下攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入150ml的氯仿，用50ml的水將氯仿層洗滌3次。用硫酸鎂將氯仿層干燥后，濃縮氯仿，用硅膠柱色譜法精制殘留物。結(jié)果，由己烷-丙酮(3∶1)餾出液得到N-香葉基-O-四乙?；肴樘侨０返恼吵碛蜖钗?.58g(73.5％)。
1H NMR(CDCl3)δ＝1.58(3H，s)、1.65(3H，s)、1.68(3H，s)、2.01(3H，s)、2.02(3H，s)、2.05(3H，s)、2.15(3H，s)、2.02-2.11(4H，m)、3.70-3.83(1H，m)、3.83-3.96(1H，m)、5.00-5.17(2H，m)、5.29(1H，d，J＝10.8Hz)、5.39(1H，d，J＝10.8Hz)、6.29-6.46(2H，m)。
將上述產(chǎn)物3.58g(7mmol)溶解于30ml的乙醇中，加入1N氫氧化鈉水溶液35ml，在室溫下攪拌2小時(shí)。然后，在反應(yīng)混合物中加入1N鹽酸35ml，在減壓條件下進(jìn)行濃縮。在殘留物中加入乙醇150ml，過(guò)濾析出的食鹽，再次濃縮濾液。采用硅膠柱色譜法對(duì)殘留物進(jìn)行分離，由己烷-乙醇(3∶1)餾出液得到N-香葉基半乳糖醛酰胺的粘稠化合物1.95g。在該產(chǎn)物中加入乙醚，進(jìn)行結(jié)晶，抽濾得到晶體狀標(biāo)題化合物1.03g。收率45％。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝1.50(3H，s)、1.55(3H，s)、1.56(3H，s)、1.86-2.04(4H，m)、3.48-3.76(2H，m)、3.80-3.94(2H，m)、4.07-4.84(3H，m)、4.99(1H，d，J＝9，6Hz)、5.06(1H，d，J＝9.6Hz)。
合成例2N-香葉基葡糖醛酰胺的合成除使用O-四乙?；咸侨┧岽鍻-四乙酰基半乳糖醛酸以外，與合成例1同樣，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝1.60(3H，s)、1.68(3H，s)、1.73(3H，s)、2.07-2.09(4H，m)、3.58-3.62(2H，m)、3.81-3.95(2H，m)、4.07-4.86(3H，m)、5.05-5.09(1H，m)、5.36-5.40(1H，m)。
合成例3N-半乳糖基香葉酰胺的合成在香葉酸(0.84g，5mmol)的THF(20ml)溶液中加入三乙胺(0.51g，5mmol)，冷卻至0℃。向其中滴加氯甲酸異丁酯(0.68g，5mmol)的THF(5ml)溶液，在0℃下攪拌30分鐘。接著，將半乳糖胺鹽酸鹽(1.08g，5mmol)溶解于10ml水中，再加入1N氫氧化鈉5ml，將得到的物質(zhì)一氣加入到反應(yīng)混合物中。0℃下攪拌1小時(shí)，室溫下攪拌4小時(shí)后，在減壓條件下濃縮反應(yīng)混合物。在得到的殘留物中加入丙酮150ml，過(guò)濾析出的食鹽。再次濃縮濾液，用硅膠柱色譜法分離殘留物。結(jié)果，由己烷-乙醇(2∶1)餾出液得到粘稠的油狀產(chǎn)物。向其中加入少量的乙醚，使之結(jié)晶，抽濾得到標(biāo)題化合物0.754g。收率46％。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝1.53(3H，s)、1.57(3H，s)、1.59(3H，s)、1.95-2.01(4H，m)、3.63-3.79(7H，m)、4.25-4.60(3H，m)、4.85-4.92(1H，m)、5.00-5.08(1H，m)、6.25-6.31(1H，m)。
合成例4N-葡糖基香葉酰胺的合成除用葡糖胺鹽酸鹽代替半乳糖胺鹽酸鹽以外，與合成例3同樣，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝1.54(3H，s)、1.60(3H，s)、2.03(3H，s)、1.96-2.20(4H，m)、3.38-3.61(4H，m)、4.38-4.66(3H，m)、5.75(1H，s)、6.34-6.39(1H，m)。
合成例5N-巖藻糖香葉酰胺的合成除使用巖藻糖胺鹽酸鹽代替半乳糖胺鹽酸鹽以外，與合成例3同樣，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝1.31(3H，d，J＝5.4Hz)、1.53(3H，s)、1.60(3H，s)、1.72(3H，s)、1.97-2.05(4H，m)、3.88-3.95(2H，m)、4.21-4.24(1H，m)、4.44-4.46(1H，m)、4.82-4.87(1H，m)、5.00-5.13(1H，m)。
合成例6N，N-二香葉基富馬酸二酰胺的合成在富馬酸(0.58g，5mmol)的四氫呋喃(THF)(20ml)溶液中加入三乙胺(1.01g，10mmol)，冷卻至0℃。向該溶液中滴加氯甲酸異丁酯(1.53g，10mmol)的THF(5ml)溶液。隨著滴加，產(chǎn)生白色沉淀。在0℃下攪拌30分鐘后，滴加香葉胺(1.53g，10mmol)的THF(5ml)溶液，在0℃下攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入50ml的水，進(jìn)行氯仿萃取。將氯仿層用水洗滌后，用硫酸鎂干燥。過(guò)濾硫酸鎂后，濃縮氯仿層，得到白色晶體。將其用乙醇重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物1.07g。收率55％。
1H NMR(CDCl3)δ＝1.60(6H，s)、1.62(6H，s)、1.68(6H，s)、2.01-2.10(8H，m)、3.95(4H，t，J＝9.6Hz)、5.04-5.09(2H，m)、5.20-5.25(2H，m)、5.94(2H，brs)、6.90(2H，s)、7.26(2H，s)。
合成例7除使用對(duì)應(yīng)的上述式(II)的羧酸代替富馬酸以外，與合成例6同樣，得到下述化合物。
N-香葉基丙酮酰胺
1H NMR(CDCl3)δ＝1.55(3H，s)、1.64(3H，s)、1.82(3H，s)、2.00(3H，s)、1.92-2.12(4H，m)、3.84(2H，d，J＝7.2Hz)、4.96-5.12(1H，m)、5.22-5.35(1H，m)。
N，N-二香葉基蘋(píng)果酸二酰胺1H NMR(CDCl3)δ＝1.58(6H，s)、1.64(6H，s)、1.67(6H，s)、1.94-2.14(8H，m)、2.54(1H，dd，J＝4.8，14.8Hz)、2.79(1H，dd，J＝3.2，14.4Hz)、3.75-3.93(4H，m)、4.32-4.40(1H，m)、5.00-5.10(2H，m)、5.10-5.22(2H，m)。
O-乙?；?N-香葉基蘋(píng)果酸一酰胺1H NMR(CDCl3)δ＝1.60(3H，s)、1.68(3H，s)、1.69(3H，s)、1.96-2.11(4H，m)、2.19(3H，s)、2.65(1H，dd，J＝9.6，22.8Hz)、3.00(1H，dd，J＝2.4，22.8Hz)3.79-3.89(2H，m)、4.51-4.56(1H，m)、5.08(1H，t，J＝7.2Hz)、5.18(1H，t，J＝6.0Hz)。
O-乙酰基-N，N-二香葉基蘋(píng)果酸二酰胺以O(shè)-乙?；?N-香葉基蘋(píng)果酸一酰胺作為出發(fā)原料，按照同樣的方法合成。
1H NMR(CDCl3)δ＝1.59(6H，s)、1.67(6H，s)、1.68(6H，s)、1.94-2.01(8H，m)、2.16(3H，s)、2.55(1H，dd，J＝13.2，22.8Hz)、2.97(1H，dd，J＝2.4，22.8Hz)、3.79-3.89(4H，m)、4.34-4.40(1H，m)、5.02-5.10(2H，m)、5.10-5.20(2H，m)。
N，N，N-三香葉基枸櫞酸三酰胺
1H NMR(CDCl3)δ＝1.60(9H，s)、1.66(9H，s)、1.68(9H，s)、1.98-2.08(12H，m)、3.76(6H，t，J＝6.3Hz)、4.26(4H，s)、5.07(6H，t，J＝6.0Hz)、5.20(6H，t，J＝7.2Hz)。
N-香葉基琥珀酸一酰胺1H NMR(CDCl3)δ＝1.60(3H，s)、1.70(3H，s)、1.72(3H，s)、1.92-2.15(4H，m)、2.52(2H，t，J＝9.6Hz)、2.70(2H，t，J＝9.6Hz)3.80-3.90(2H，m)、5.08(1H，t，J＝9.6Hz)、5.18(1H，t，J＝6.0Hz)、5.61(1H，brs)。
N，N-二香葉基琥珀酸二酰胺以N-香葉基琥珀酸一酰胺作為出發(fā)原料，按照同樣的方法合成。
1H NMR(CDCl3)δ＝1.60(6H，s)、1.66(6H，s)、1.69(6H，s)、1.97-2.11(4H，m)、2.53(4H，s)、3.84(4H，t，J＝5.5Hz)、5.07(2H，t，J＝4.9Hz)、5.17(2H，t，J＝5.5Hz)、5.90(2H，brs)。
N-香葉基富馬酸一酰胺1H NMR(CDCl3)δ＝1.59(3H，s)、1.67(3H，s)、1.70(3H，s)、1.94-2.16(4H，m)、3.88-4.04(2H，m)、5.06(1H，t，J＝7.2Hz)、5.21(1H，t，J＝4.8Hz)、6.30(1H，d，J＝12.0Hz)、6.46(1H，d，J＝12.0Hz)。
N，N-二香葉基-2-氧代戊二酸二酰胺
1H NMR(CDCl3)δ＝1.60(6H，s)、1.68(12H，s)、1.94-2.13(8H，m)、2.69(2H，t，J＝6.3Hz)、3.26(2H，t，J＝6.3Hz)、3.81-4.04(4H，m)、5.02-5.10(2H，m)、5.15-5.22(2H，m)。
N-香葉基-對(duì)丙酮酰氨基苯甲酰胺1H NMR(CDCl3)δ＝1.60(3H，s)、1.68(3H，s)、1.70(3H，s)、2.03-2.11(4H，m)、2.17(3H，s)、3.95-4.04(2H，m)、4.83(1H，brs)、5.09(1H，t，J＝6.6Hz)、5.28(1H，t，J＝6.9Hz)、5.94(1H，brs)、6.64(2H，d，J＝8.7Hz)、7.60(2H，d，J＝8.7Hz)。
N-香葉基視黃酸酰胺1H NMR(CDCl3)δ＝1.03(6H，s)、1.12-1.63(6H，m)、1.60(3H，s)、1.66(3H，s)、1.68(3H，s)、1.72(3H，s)、1.87-1.93(4H，m)、2.01(3H，s)、2.37(3H，s)、3.82-3.92(2H，m)、5.03-5.24(2H，m)、5.80(1H，s)、6.12-6.40(3H，m)、7.02(1H，d，J＝12.0Hz)、7.07(1H，d，J＝12.0Hz)。
合成例8N-香葉酰基半胱氨酸的合成在香葉酸(1.68g，10mmol)的THF(20ml)溶液中加入三乙胺(1.01g，10mmol)，冷卻至0℃。向其中滴加氯甲酸異丁酯(1.37g，10mmol)的THF(5ml)溶液，在0℃下攪拌30分鐘。將半胱氨酸(1.35g，10mmol)溶解于1N氫氧化鈉(10ml)中，將得到的溶液加入上述反應(yīng)混合物中，在0℃下攪拌1小時(shí)，再在室溫下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入1N鹽酸10ml，在室溫下攪拌10分鐘。接著，將反應(yīng)混合物用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，在殘留物中加入乙醇，過(guò)濾除去析出的氯化鈉。將乙醇溶液再次用蒸發(fā)器減壓濃縮，用硅膠柱色譜法分離殘留物。結(jié)果，由己烷-丙酮(2∶1)餾出液，得到標(biāo)題化合物0.556g。收率19.5％。
1H NMR(CDCl3)δ＝1.55(6H，s)、1.64(3H，s)、1.96-2.00(4H，m)、2.90-3.17(2H，m)、4.81-5.06(3H，m)、6.40-7.21(4H，m)、7.25(1H，s)。
合成例9N-香葉?；野彼岢褂美野彼岽姘腚装彼嵋酝?，與合成例8同樣，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ＝1.55(6H，s)、1.64(3H，s)、1.96-2.00(4H，m)、2.90-3.17(2H，m)、4.81-5.06(3H，m)、6.40-7.21(4H，m)、7.25(1H，s)。
合成例10谷氨酸二香葉基二酰胺的合成在N-苯甲氧基羰基谷氨酸(2.634g，9.4mmol)的THF(20ml)溶液中加入三乙胺(1.899g，18.8mmol)，冷卻至0℃。在該混合物中滴加氯甲酸異丁酯(2.566g，18.8mmol)的THF(10ml)溶液，在0℃下攪拌30分鐘。接著，滴加香葉胺(2.880g，18.8mmol)的THF(10ml)溶液，在0℃下攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入150ml的氯仿，用水洗滌氯仿溶液，用硫酸鎂干燥。用蒸發(fā)器除去有機(jī)溶劑，用硅膠柱色譜法分離殘留物，由己烷-丙酮(2∶1)餾出液得到N-苯甲氧基羰基谷氨酸二香葉基二酰胺3.034g。收率58.6％。
接著，在得到的N-苯甲氧基羰基谷氨酸二香葉基二酰胺(3.034g，5.5mmol)的甲醇(20ml)溶液中加入1N氫氧化鈉20ml，在室溫下攪拌5小時(shí)。用蒸發(fā)器濃縮反應(yīng)混合物，用硅膠柱色譜法分離殘留物，由己烷-乙醇(3∶1)餾出液得到目的化合物。由于在該狀態(tài)下是粘稠的非晶態(tài)，因此向其中加入乙醚，進(jìn)行結(jié)晶，抽濾得到目的化合物852mg。收率37.2％。
1H NMR(CDCl3)δ＝1.58(12H，s)、1.61(6H，s)、1.75-2.12(8H，m)、2.32-2.53(2H，m)、3.54-3.88(7H，m)、4.88-5.21(4H，m)。
合成例11除使用酪氨酸、N-乙?；野彼帷腚装彼峄蚪z氨酸代替N-苯甲氧基羰基谷氨酸以外，與合成例10同樣，得到下述化合物。另外，使用N-乙酰基酪氨酸的場(chǎng)合，不進(jìn)行后半部分的脫保護(hù)操作。
酪氨酸香葉酰胺1H NMR(CDCl3)δ＝1.59(3H，s)、1.67(6H，s)、1.82-2.18(4H，m)、2.99-3.09(2H，m)、3.74-3.78(2H，m)、4.99-5.26(3H，m)、7.17-7.43(5H，m)。
N-乙?；野彼嵯闳~酰胺1H NMR(CDCl3)δ＝1.60(3H，s)、1.68(3H，s)、1.98(3H，s)、2.00-2.11(4H，m)、2.18(3H，s)、2.90-3.00(2H，m)、3.69-3.79(2H，m)、4.59(1H，dd，J＝15.6，9.6Hz)、5.00-5.10(2H，m)、6.70(2H，d，J＝7.8Hz)、7.01(2H，d，J＝7.8Hz)、7.27(1H，s)。
半胱氨酸香葉酰胺1H NMR(CDCl3)δ＝1.58(3H，s)、1.66(3H，s)、1.67(3H，s)、1.93-2.10(4H，m)、2.83-3.16(2H，m)、3.83-4.08(3H，m)、5.03-5.19(2H，m)、7.33(1H，s)。
絲氨酸香葉酰胺1H NMR(CDCl3)δ＝1.59(3H，s)、1.68(6H，s)、1.95-2.14(4H，m)、3.80-3.95(2H，m)、4.34-4.47(2H，m)、4.67(1H，t，J＝10.8Hz)、5.06(1H，t，J＝6.0Hz)、5.17(1H，t，J＝6.0Hz)、6.77(2H，brs)。
合成例12N-葡糖基甲羥戊酰胺的合成將葡糖胺鹽酸鹽(2.16g，10mmol)溶解于20ml的水中，在該水溶液中加入1N氫氧化鈉10ml和甲羥戊內(nèi)酯(1.30g，10ml)，在55℃下加熱攪拌5小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，在減壓條件下濃縮反應(yīng)混合物，在殘留物中加入甲醇100ml，過(guò)濾析出的沉淀。再用蒸發(fā)器濃縮濾液，用硅膠柱色譜法分離殘留物，由乙醇餾出液得到產(chǎn)物1.45g。收率47％。由于在該狀態(tài)下是粘稠的油狀物，因此加入少量的二氯甲烷，進(jìn)行結(jié)晶，抽濾得到標(biāo)題化合物1.10g。該晶體吸濕性強(qiáng)，不能測(cè)定熔點(diǎn)。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝1.00(3H，s)、1.44-1.59(2H，m)、2.47(2H，s)、2.96-3.74(10H，m)、4.04-5.08(3H，m)。
合成例13N-半乳糖基甲羥戊酰胺的合成除使用半乳糖胺鹽酸鹽代替葡糖胺鹽酸鹽以外，與合成例12同樣，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝1.08(3H，s)、1.51-1.61(2H，m)、2.44(2H，s)、2.74-5.16(13H，m)。
合成例14N-巖藻糖甲羥戊酰胺的合成除使用巖藻糖胺鹽酸鹽代替葡糖胺鹽酸鹽以外，與合成例12同樣，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝1.06(3H，s)、1.20(3H，d，J＝24.0Hz)、1.54-1.62(2H，m)、2.44(2H，s)、2.74-5.15(12H，m)。
制劑例1在常溫下將N-半乳糖基香葉酰胺2g溶解于注射用蒸餾水11中，用氯化鈉等滲化后，封入安瓿中。該注射劑1ml含有有效成分2mg。
制劑例2在常溫下將N-二香葉基蘋(píng)果酸二酰胺2g溶解于注射用蒸餾水11中，用氯化鈉等滲化后，封入安瓿中。該注射劑1ml含有有效成分2mg。
制劑例3在常溫下將N-葡糖基甲羥戊酰胺2g溶解于注射用蒸餾水11中，用氯化鈉等滲化后，封入安瓿中。該注射劑1ml含有有效成分2mg。
權(quán)利要求
1.下述式(I-4)表示的甲羥戊酸衍生物， 式中，R4表示-CH2OH或-CH3。
2.一種抗腫瘤劑，含有權(quán)利要求1所述的式(I-4)的甲羥戊酸衍生物作為有效成分。
3.一種制藥學(xué)組合物，含有活性有效量的權(quán)利要求1所述的式(I-4)的甲羥戊酸衍生物以及制藥學(xué)上允許的載體或稀釋劑。
4.權(quán)利要求1所述的式(I-4)的甲羥戊酸衍生物在用于癌處置的藥物的制備中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供具有優(yōu)良的抗腫瘤活性的下式所示化合物。式中，R
文檔編號(hào)C07D309/00GK1781927SQ20051012725
公開(kāi)日2006年6月7日 申請(qǐng)日期2002年12月26日 優(yōu)先權(quán)日2002年1月11日
發(fā)明者秋山澄 申請(qǐng)人:有限會(huì)社尾源研究所