專利名稱：肽IL1β和TNFα以及應用其治療的方法
背景技術：
發(fā)明領域本發(fā)明涉及衍生于促炎細胞因子白細胞介素-1β(IL1β)和腫瘤壞死因子α(TNFα)的新肽以及它們在人或獸醫(yī)治療中的應用。這些治療應用的目標疾病可以具體為類風濕性關節(jié)炎、敗血癥性休克、自體免疫性糖尿病、宿主中的移植排斥、以及急性或慢性炎癥疾病，并且更普遍地，與IL1β或TNFα的生產過剩相關的疾病。
相關技術的描述活性抗細胞因子免疫是由Zagury等自1990年開發(fā)的一種活性免疫治療策略，其具體基于專利申請WO 92/22577。一些科學團隊接受了這一觀點，其已經在國際科學期刊上發(fā)表，抗用戊二醛處理而多聚化的完整TNFα蛋白的活性免疫(Gringeri等，JAIDS 1999；20358-70)，由與卵清蛋白的T表位偶聯(lián)的天然TNFα蛋白組成的嵌合TNFα蛋白(Dalum等，NatureBiotechnology，1999；17666-69)，抗與KLH偶聯(lián)的完全IL9(Richard等，PNAS，2000；97767-72)或還有帶有破傷風毒素的T表位的嵌合的完整IL5(Hertz等，J.Immunol，2001，1673792-99)。
這些方法已確定自體抗細胞因子免疫的可能性，然而這些為數(shù)不多的成功使得某些作者描述的不成功的測試變得難以理解某些細胞因子不允許獲得充分保護的并且臨床有效的抗體，并且以在一種方式下有效的形式制備的同一細胞因子在另一種方式下將不會有效(Richard等，PNAS，2000；97767-72)。
在設法解釋這一現(xiàn)象的過程中，本申請人已經觀察到迄今為止所有的作者都使用完整的細胞因子(任選地輕微地修飾)，其導致特別在下述層次的困難
-沖淡目的抗原決定簇的免疫原性效力-體內促進抗體的可能發(fā)生(B應答)-對存在于完整的細胞因子中的潛在的T表位的自體免疫反應的可能發(fā)生(自體免疫T反應)。
這是為什么本申請人早先已經要求大小限制在5個和10個氨基酸之間的起源于細胞因子的肽家族，其具有使其可能產生抗天然細胞因子的抗原效力(專利申請PCT/FR03/01120)。EP-A-021853還描述了用于制備抗體的IL1肽。
此處任何文件的引用不是有意承認所述文件是相關的現(xiàn)有技術，或是本申請的任何權利要求的可專利性的考慮材料。對于任一文件的內容或日期的陳述是基于在提交時申請者可獲得的信息，并不組成對于所述陳述的正確性的認可。
發(fā)明概述本申請人已經評估了IL1β和TNFα細胞因子的某些肽，其具有包含10-30個殘基的大小，并且已經證明這些肽不但是抗原性的，而且它們還作為免疫原有效用于體內預防與所述細胞因子的生產過剩相關的疾病。因此本申請要求包括5-30個氨基酸大小的肽，其起源于鼠或人IL1β和TNFα細胞因子或任何其它哺乳動物種屬的那些，以及它們在人或動物中(在這種情形中為獸醫(yī)應用)用于預防或治療與所述細胞因子的生產過剩相關的疾病的應用。本申請還要求從這些多肽生產單克隆或寡克隆抗體以及應用所述抗體用于對人或動物(獸醫(yī)應用)的治療或預防的施用。
附圖簡述

圖1是顯示抗肽免疫并經受敗血癥性休克的小鼠的存活的曲線圖。
圖2是顯示在膠原關節(jié)炎模型中抗肽免疫的各組小鼠平均臨床記分的曲線圖。
發(fā)明詳述按照本發(fā)明的細胞因子肽起源于或衍生于IL1β和TNFα細胞因子?！捌鹪?originate)”是指它們的氨基酸序列與細胞因子的相同?！把苌?arederived)”是指它們的氨基酸序列大部分與細胞因子的相同但是可以包括一些不同，其將在下文中看到。
上述細胞因子肽有利地包括多于5個，特別地多于7個，更特別地多于9和十分特別地多于11個氨基酸。
在實施本發(fā)明的其它優(yōu)選條件下，上述細胞因子肽包括少于30個，有利地少于25個，特別地少于20個，更加特別地少于18個氨基酸。
本申請人已經證明了肽分布區(qū)鼠TNFα細胞因子的80 VSRFAISYQEKVNLLS 95(SEQ ID NO1)使得通過活性免疫產生抗體成為可能，其能夠阻滯小鼠中的TNFα-依賴型敗血癥性休克(實驗1)。人細胞因子的對應序列為75％同源性80 ISRIAVSYQTKVNLLS 95(SEQ ID NO2)本申請人還已經證明肽分布區(qū)鼠IL1β細胞因子的121 YISTSQAEHKPVFLG 135(SEQ ID NO3)使得通過活性免疫產生抗體成為可能，其能夠阻滯小鼠中誘發(fā)的膠原關節(jié)炎(實驗2)。人的對應序列為85％同源性121 YISTSQAENMPVFLG 135(SEQ ID NO4)Loetascher等(J Biol Chem，1993，26826350-357)已經通過位點專一誘變實驗表明TNFα的143-147區(qū)在與TNFα的p55受體的相互作用中可能是重要的，并且本發(fā)明還要求抗這一區(qū)域的B表位的免疫，其通過具有顯著同源性的肽的方式，無論它們是涉及人或動物細胞因子序列的異基因或者是突變體。對應人的這一分布區(qū)的所述序列為140 DYLDFAESGQVY 150(SEQ ID NO5)和在小鼠中140 KYLDFAESGQVY 150(SEQ ID NO6)Evans等(J Biol Chem，1995，27011477-83)也已經通過位點專一誘變實驗解釋IL1β的其它區(qū)域在與受體的相互作用中可能是重要的，并且本發(fā)明還要求抗這些區(qū)域的B表位的免疫，其通過具有顯著同源性的肽的方式，無論它們是涉及目標的人或動物細胞因子序列的異基因或者是突變體。對應人的這一分布區(qū)的所述序列為3 VKSLNCTLRDSQQKSL 18(SEQ ID NO7)45 SFVQGEESNDKIP 57(SEQ ID NO8)89 NYPKKKMEKRFVFNKIEI 106(SEQ ID NO9)143 ITDFTMQFVSS 153(SEQ ID NO10)和在小鼠中3 IRQLHYRLRDEQQKSL 18(SEQ ID NO11)45 SFVQGEPSNDKIP 57(SEQ ID NO12)89 QYPKKKMEKRFVFNKIEV 106(SEQ ID NO13)142 IIDFTMESVSS 152(SEQ ID NO14)已經可能通過活性免疫產生抗小鼠的后述肽的自體抗體。
下文中的實驗1和2，其由本申請人實行，證明了使用少于30個殘基的大小的肽進行抗-肽活性免疫方法的體內治療能力。本申請人要求這些肽及其衍生物，還用于實行活性免疫，其允許產生靶向TNFa和IL1b細胞因子的這些表位的抗體，以阻滯細胞因子與其受體的相互作用。
正如免疫學領域的技術人員已知的那樣，天然肽鏈的修飾而并不修飾所述免疫原肽的免疫學特性的本質是可能的。因此還可以提及細胞因子肽的衍生物，其與這些天然序列高度同源，例如具有與對應的天然肽大于50％的同源性，特別地大于70％的同源性，并且優(yōu)選地大于80％的同源性或者甚至大于90％的同源性，同時保留天然肽的這一表位位點的免疫學特性。特別地，可以使用其它哺乳動物細胞因子的同源序列，以在動物或人中獲得異基因的而不僅是自體的保護反應。
所述細胞因子肽衍生物可以含有修飾的殘基，條件是修飾不能顯著地減少免疫原性，其通過附加化學自由基(甲基、乙?；?或通過立體化學修飾(應用D系列氨基酸)。所述細胞因子肽衍生物應該同細胞因子肽一樣誘導與細胞因子相互作用的抗體。
按照本發(fā)明的細胞因子肽衍生物可以包括在組成它們的氨基酸中的1種或多種修飾，諸如刪除、取代、加成、或一個或多個氨基酸的官能作用(諸如酰化)，達到的程度使這些修飾保留在上文指定的框架內(免疫學特征)。例如，一般地，用異亮氨酸殘基替代亮氨酸殘基不會修改所述特性；修飾通常應該涉及少于40％的氨基酸，特別地少于30％，優(yōu)選地少于20％以及十分特別地少于10％的天然肽的氨基酸。重要地是由修飾的肽誘導的抗體通過天然細胞因子起作用。
這些修飾在本領域的技術人員的見識內，他們可以通過簡單測試檢驗修飾的發(fā)生。所述修飾衍生物的免疫原性可以在免疫小鼠后通過ELISA進行評估，ELISA測試的抗原是完整的細胞因子或免疫的細胞因子肽，或者通過細胞因子-受體結合阻滯測試(cytokine-receptor bond blockingtests)。可能的修飾優(yōu)選地影響少于8個氨基酸，有利地少于6個氨基酸，特別地少于4個氨基酸，并且特別地3個氨基酸或更少，諸如2個或1個單一的氨基酸。
本發(fā)明的一個主題還是一種化合物，其特征在于其含有至少一種上文提及的細胞因子肽或細胞因子肽衍生物。所述化合物可以包括同樣的肽/衍生物重復，或不同的肽/衍生物組合，其以線性形式或者以疊生星狀結構(candelabra structure)或與載體蛋白混合的偶聯(lián)的形式。所述化合物還可以以環(huán)化形式存在。因此，按照本發(fā)明的細胞因子肽或細胞因子肽衍生物可以，例如，插入特別地提供更好的構造的更長的氨基酸序列中或與外源T表位結合(無論蛋白還是DNA免疫)。
有利地，它們可以以共價的方式與諸如例如KLH的載體蛋白締合。
按照本發(fā)明的細胞因子肽，由于其有限的大小，一般對少量的細胞因子表位產生應答。特別地當它們插入、組合或締合時，上述化合物不包括所述細胞因子的其它表位。
這些細胞因子肽或細胞因子衍生物可以包含在不包括與其它天然細胞因子表位同源性的任一蛋白序列中。例如，可以將半胱氨酸加成到末端，以賦予肽的環(huán)化結構。另一個實例是由破傷風毒素的T表位序列環(huán)繞的肽。還有一個實例可以包括這樣一種肽，其對應受體結合位點的序列，但是此處某些氨基酸被它們的D系列異構體替代，以避免它們的拮抗作用(agonist effect)。事實上，可以任選地有利地應用肽衍生物，其對受體沒有拮抗活性，以致免疫原不干擾免疫應答。
為了增加免疫應答，可以將這些細胞因子肽或細胞因子衍生物與載體蛋白偶聯(lián)?？煽紤]的偶聯(lián)方法和載體蛋白可以按照目標肽而不同例如，它們可以是共軛結合到肽上的匙孔血藍蛋白(Keyhole LimpetHemocyanin，KLH)蛋白和破傷風毒素(Tetanus Toxoid，TT)，其中所述共軛結合通過本領域的技術人員公知的化學方法實現(xiàn)，諸如碳二亞胺、戊二醛或二重氮化聯(lián)苯胺偶聯(lián)?？梢酝ㄟ^將氨基酸加成或結合到所述序列中而促進所述偶聯(lián)的實現(xiàn)，諸如例如賴氨酸、組氨酸、酪氨酸或半胱氨酸。不論化學還是遺傳學偶聯(lián)到外源T表位(起源于瘧原蟲(plasmodiumfalciparum)，KLH，等)的所述肽化合物也在本發(fā)明的范圍內。
還可以實施疊生星狀類型的或對諸如運鐵蛋白或鐵蛋白的分子的網狀偶聯(lián)，以有效地激發(fā)免疫應答。
按照本發(fā)明的肽可以特別地通過化學合成或基因工程或任何其它合適的方法生產。環(huán)狀肽的合成，其按照需要將在鏈末端的一個或多個氨基酸移植成為半胱氨酸，以產生二硫鍵橋，這使得可能恢復這些肽片段在蛋白的三維結構中具有的部分二級結構。
按照本發(fā)明的肽具有非常有用的藥理學特性。特別地它們具有顯著的抗細胞因子特性。下文在實驗部分舉例說明這些特性。它們證明上文所描述的肽可以用作藥物。
這是為什么本發(fā)明的主題還是藥物，其特征在于它們由上文所定義的IL1β或TNFα細胞因子的肽或衍生物或者化合物組成，即如上文所定義的細胞因子肽或細胞因子衍生物或免疫原性化合物對于它們在人或動物體的治療方法中的應用，以及所述細胞因子肽或細胞因子衍生物或免疫原性化合物對于制備治療或預防藥物的應用，所述治療或預防藥物意欲用于治療或預防與細胞因子的過?；虼嬖谙嚓P的疾病。
按照本發(fā)明的藥物用于，例如，對與細胞因子反常相關的疾病的治療性和預防性的治療，不論類風濕性關節(jié)炎、敗血癥性休克或任何其它疾病，在其中阻滯IL1β或TNFα是有療效的。這些只是不多的實例，并且本發(fā)明的一個主題還是基于活性免疫(DNA或肽)對人或動物體的任何治療，其包括上文提及的排除所述細胞因子的其它表位的肽序列。這些序列可以如本描述所指示的那樣進行修飾，并且使用DNA的免疫通過從基因密碼的簡單翻譯而進行。
可以通過ELISA測試評估體液免疫應答。
按照本發(fā)明的免疫原活性組分可以應用如下將按照本發(fā)明的細胞因子肽或細胞因子衍生物或免疫原性化合物施用給患者或動物，例如，通過皮下或肌內途徑，以在治療水平有效的充足的量，施用給需要所述治療的受試者。例如，施用的劑量可以在1-1000μg的范圍，特別地10-500μg，通過皮下途徑，每月1次持續(xù)3個月，然后周期性地作為誘導的血清抗體計數(shù)的函數(shù)，例如，每隔2-6個月。如果想要獲得更強的阻滯作用，可以同時施用2種細胞因子的2種免疫原性分子的制劑，。
本發(fā)明的一個主題還是藥用組合物，特別是疫苗，其含有至少1種上述提及的細胞因子肽或細胞因子衍生物或免疫原性化合物作為活性組分。
作為藥物，本發(fā)明的細胞因子肽或細胞因子衍生物或免疫原性化合物可以結合在意欲用于疫苗領域中應用的任何標準途徑的藥用組合物中，特別是通過皮下途徑，通過肌內途徑，通過靜脈途徑或通過口服途徑。施用可以以單劑量或在某段時間后重復1次或多次發(fā)生。
這是為什么本申請的主題還是一種治療或預防的藥用組合物，其特征在于其包括1種或多種上述定義的細胞因子肽或細胞因子衍生物或免疫原性化合物作為活性組分。
所述免疫原性藥劑可以單獨調制或與作為佐劑的賦形劑或藥用賦形劑的混合物混合。本申請的主題更具體地是含有免疫原、上述提及的細胞因子肽或細胞因子衍生物或免疫原性化合物的疫苗。
本發(fā)明的主題還是用于制備上文所描述的組合物的方法，其特征在于，按照已知的方法本身，將一種或多種活性組分與可接受的、特別是藥用的賦形劑混合。
給患者施用按照本發(fā)明的細胞因子肽或細胞因子衍生物或免疫原性化合物對應于活性免疫治療。
實行被動免疫治療也可以是有用的，即，給患者或生病的動物直接提供它們需要的抗體。為了這一目的，可以使用先前定義的肽、衍生物以及化合物，按照常規(guī)技術以產生人的、鼠的或人源化的單克隆抗體，例如通過轉化來自用EB病毒免疫的受試者的B淋巴細胞或通過抗體文庫的篩選。通過靶向上述肽的表位這些抗體阻滯細胞因子與其受體的相互作用，并且因此使得減少所述細胞因子在疾病中的致病作用成為可能。例如，寡克隆抗體還可以通過在諸如馬的動物中活性免疫進行制備、純化、并治療性地施用給人或動物。
可以將疫苗的制劑包裝成使用卡波普作賦形劑的凝膠、鼻滴劑或霧劑的形式用于鼻內途徑，以及以胃抗性膠囊、糖衣片劑或胃抗性粒劑的形式用于口服途徑。
在通過全身或粘膜途徑施用的DNA疫苗的情形下，所述質粒的蓋侖派醫(yī)學存在形式(galenic presentation)可以是在諸如生理PBS(磷酸緩沖液＝PBS)的生理液體中的混懸液。所述質粒可以包裹在生物可降解多聚體(PLG，PLA，PCL)微滴內并且以胃抗性膠囊施用以用來攝取(口服途徑)。所述DNA還可以表達在細菌的、沙門氏菌類型(salmonella-type)或病毒類型、腺病毒或痘病毒生長載體中。
最后，本申請的主題是用于患者活性免疫的方法，其特征在于，使用上文所定義的細胞因子肽或細胞因子衍生物或免疫原性化合物作為免疫原，其有利地與礦物、油性或合成的免疫性佐劑相締合。
所述免疫可以以標準方式進行，特別地通過肽或免疫原性化合物作為綴合物，優(yōu)選地在佐劑存在下，例如，ISA 51或明礬(Alum)。免疫可以是基于DNA的(與外源T表位結合的結合位點的同源序列)，其使用裸DNA或含有適應啟動子(adapted promoter)的表達載體，諸如例如pCR3.1?？梢酝ㄟ^應用適當?shù)淖杂苫?CpG等)保護施用的DNAs免受核酸酶的降解。特別地，初始DNA免疫可以緊隨著使用肽化合物進行標準強化。
本專利所描述的治療人或動物體的方法可以包括上述定義的細胞因子肽或細胞因子衍生物或免疫原性化合物，并且包括上述定義的單克隆或寡克隆抗體。
對于使用上文所描述的肽的優(yōu)選的條件還應用于上文提及的本發(fā)明的其它主題。
圖1和圖2顯示實驗1和2中所描述的對于TNFα肽在TNFα-依賴型敗血癥性休克中和IL1β肽在膠原關節(jié)炎中的免疫的體內保護的結果。
下述實驗舉例說明本發(fā)明。
實驗1將偶聯(lián)到KLH載體蛋白上的4個鼠TNFα肽，其包含叫作TNFα-6的環(huán)化的肽CVSRFAISYQEKVNLLSC(SEQ ID NO15)，在內毒素休克模型中進行測試。為了這一目的，將Balb/c小鼠在天數(shù)D0，D8，D16，和D40進行抗所述肽預免疫。在D50天，讓所述小鼠經受休克，即，給它們注射LPS和半乳糖胺。對照在只抗KLH免疫的小鼠上進行。
可以看出，2天后所有的小鼠都死亡了，除了抗TNFα-6肽免疫的組外，其中小鼠得到了保護。由所述免疫賦予的保護是非常顯著的(p＝0.008)。
實驗2將偶聯(lián)到KLH蛋白上的3個鼠IL1β肽，其包含環(huán)化的IL1β-6肽序列YCYISTSQAEHKPVFLGC(SEQ ID NO16)，在膠原關節(jié)炎模型中進行測試。為了這一目的，將DBA1小鼠在天數(shù)D0，D20，D40，D60進行抗所述肽預免疫。在D80天，將所述小鼠進行抗弗氏佐劑(Freund′sadjuvant)中的膠原的免疫，并且在D90天進行相似處理。在D100天和D160天之間監(jiān)測關節(jié)炎的發(fā)展每周2次，檢查小鼠并對它們進行記分，作為它們的關節(jié)的炎癥狀態(tài)的函數(shù)(0＝沒有炎癥，1＝輕微的炎癥，2＝一般的炎癥，3＝強炎癥)。
可以看出，只用KLH免疫的對照小鼠表現(xiàn)出強炎癥(帶有正方形的曲線)，而相對于對照，抗IL1β-6肽免疫的小鼠組(帶有菱形的曲線)表現(xiàn)出強保護水平(p＝0.0003，ANOVA測試)。
實驗3將6組小鼠，每組4只，進行抗20μg鼠IL1β肽IRQLHYRLRDEQQKSL(組1)(SEQ ID NO11)，SFVQGEPSNDKIP(組2)(SEQ ID NO12)，QYPKKKMEKRFVFNKIEV(組3)(SEQ ID NO13)，IIDFTMESVSS(組4)(SEQ ID NO14)，和20μg鼠TNFα肽KYLDFAESGQVY(組5)(SEQ ID NO6)免疫，所有的肽都偶聯(lián)到KLH上。組6對應只用KLH免疫的小鼠。在D20天和D40天實行加強接種。在D50天，將小鼠殺死，并且通過ELISA測試測量血清中定向抗天然mTNFα細胞因子以及天然mIL1β細胞因子的抗體。
對于每組獲得平均值在下表中顯示。
表1
因此，可以清楚地看出所述肽充分能夠誘導識別天然細胞因子的抗體。由于它們只識別用于免疫的細胞因子序列，這些抗體是非常特異性的。
序列表序列表<110>J.F.薩古里M.C.布瓦西耶N.貝西<120>肽IL1β和TNFα以及應用其治療的方法<130>ZAGURY8 PCT<150>US 60/547,848<151>2004-02-27<160>16<170>PatentIn version 3.3<210>1<211>16<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>1Val Ser Arg Phe Ala Ile Ser Tyr Gln Glu Lys Val Asn Leu Leu Ser1 5 10 15<210>2<211>16<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>2Ile Ser Arg Ile Ala Val Ser Tyr Gln Thr Lys Val Asn Leu Leu Ser1 5 10 15<210>3<211>15<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>3Tyr Ile Ser Thr Ser Gln Ala Glu His Lys Pro Val Phe Leu Gly1 5 10 15<210>4<211>15<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的
<400>4Tyr Ile Ser Thr Ser Gln Ala Glu Asn Met Pro Val Phe Leu Gly1 5 10 15<210>5<211>12<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>5Asp Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly Gln Val Tyr1 5 10<210>6<211>12<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>6Lys Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly Gln Val Tyr1 5 10<210>7<211>16<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>7Val Lys Ser Leu Asn Cys Thr Leu Arg Asp Ser Gln Gln Lys Ser Leu1 5 10 15<210>8<211>13<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>8Ser Phe Val Gln Gly Glu Glu Ser Asn Asp Lys Ile Pro1 5 10<210>9<211>18<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>9Asn Tyr Pro Lys Lys Lys Met Glu Lys Arg Phe Val Phe Asn Lys Ile1 5 10 15Glu Ile<210>10<211>11<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>10Ile Thr Asp Phe Thr Met Gln Phe Val Ser Ser1 5 10<210>11<211>16<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>11Ile Arg Gln Leu His Tyr Arg Leu Arg Asp Glu Gln Gln Lys Ser Leu1 5 10 15<210>12<211>13<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>12Ser Phe Val Gln Gly Glu Pro Ser Asn Asp Lys Ile Pro1 5 10<210>13<211>18<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>13Gln Tyr Pro Lys Lys Lys Met Glu Lys Arg Phe Val Phe Asn Lys Ile1 5 10 15
Glu Val<210>14<211>11<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>14Ile Ile Asp Phe Thr Met Glu Ser Val Ser Ser1 5 10<210>15<211>18<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>15Cys Val Ser Arg Phe Ala Ile Ser Tyr Gln Glu Lys Val Asn Leu Leu1 5 10 15Ser Cys<210>16<211>18<212>PRT<213>人工的<220>
<223>合成的<400>16Tyr Cys Tyr Ile Ser Thr Ser Gln Ala Glu His Lys Pro Val Phe Leu1 5 10 15Gly Cys
權利要求
1.一種肽，其起源于哺乳動物的IL1β或TNFα細胞因子，與下述人IL1β或TNFα細胞因子的1種同源80 ISRIAVSYQTKVNLLS 95(SEQ ID NO2)140 DYLDFAESGQVY 150(SEQ ID NO5)3 VKSLNCTLRDSQQKSL 18(SEQ ID NO7)45 SFVQGEESNDKIP 57(SEQ ID NO8)89NYPKKKMEKRFVFNKIEI 106(SEQ ID NO9)121 YISTSQAENMPVFLG 135(SEQ ID NO4)143 ITDFTMQFVSS 153(SEQ ID NO10)。
2.按照權利要求1的肽，其中所述人TNFα細胞因子肽序列為ISRIAVSYQTKVNLLS(SEQ ID NO2)。
3.按照權利要求1的肽，其中所述人TNFα細胞因子肽序列為DYLDFAESGQVY(SEQ ID NO5)。
4.按照權利要求1的肽，其中所述人IL1β細胞因子肽序列為VKSLNCTLRDSQQKSL(SEQ ID NO7)。
5.按照權利要求1的肽，其中所述人IL1β細胞因子肽序列為SFVQGEESNDKIP(SEQ ID NO8)。
6.按照權利要求1的肽，其中所述人IL1β細胞因子肽序列為NYPKKKMEKRFVFNKIEI(SEQ ID NO9)。
7.按照權利要求1的肽，其中所述人IL1β細胞因子肽序列為YISTSQAENMPVFLG(SEQ ID NO4)。
8.按照權利要求1的肽，其中所述人IL1β細胞因子肽序列為ITDFTMQFVSS(SEQ ID NO10)。
10.按照權利要求1-9任一項的肽的衍生物。
11.按照權利1-10的一項的肽，其特征在于其由少于30個氨基酸組成。
12.權利要求1-11的任一項中定義的肽的衍生物，其通過刪除、取代、加成、環(huán)化、立體化學修飾(應用D系列氨基酸)或官能化(諸如酰化)所述肽的一個或多個氨基酸。
13.一種免疫原性化合物，其特征在于其包括權利要求1-12任一項中定義的肽或肽衍生物，并且特征在于其能夠在受試者中產生識別天然細胞因子的抗體，應該理解所述的肽或肽衍生物不包括所述細胞因子的其它表位。
14.權利要求1-13任一項中定義的肽或肽衍生物或免疫原性化合物，其在用于人體的預防或治療性的治療方法中的應用。
15.權利要求1-13任一項中定義的肽或肽衍生物或免疫原性化合物，其在用于動物體(獸醫(yī))的預防或治療性的治療方法中的應用。
16.權利要求1-15任一項中定義的肽或肽衍生物或免疫原性化合物的應用，其用于制備治療或預防的藥物，所述藥物意欲用于治療或預防與細胞因子的存在或過剩相關的疾病。
17.一種藥用組合物，其含有至少1種權利要求1-15任一項中定義的肽或肽衍生物或免疫原性化合物作為活性組分。
18.單克隆或寡克隆抗體，其對權利要求1-15任一項中定義的肽特異。
19.權利要求18中定義的抗體的應用，其用于人或動物體的預防或治療性的治療。
20.一種用于治療與IL1β或TNFα的致病性生產過剩相關的疾病的方法，其包括給需要其的患者施用權利要求18中定義的抗體，以治療與IL1β或TNFα的致病性生產過剩相關的疾病。
21.一種用于治療或預防與IL1β或TNFα的致病性生產過剩相關的疾病的方法，其包括給需要其的患者施用權利要求1-15任一項中定義的肽或肽衍生物或免疫原性化合物，以治療或抑制與IL1β或TNFα的致病性生產過剩相關的疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及衍生于促炎細胞因子，白細胞介素－1β(IL1β)和腫瘤壞死因子α(TNFα)的肽，以及它們在人或獸醫(yī)治療中的應用，諸如通常治療與IL1β或TNFα的生產過剩相關的疾病以及急性或慢性炎癥疾病、類風濕性關節(jié)炎、敗血癥性休克、自體免疫性糖尿病、宿主內的移植排斥、等等。
文檔編號C07K14/00GK1960744SQ200580006216
公開日2007年5月9日 申請日期2005年2月25日 優(yōu)先權日2004年2月27日
發(fā)明者J·F·薩古里, M·C·布瓦西耶, N·貝西 申請人:瓦克斯咨詢公司