專利名稱：用于治療焦慮、抑郁和癲癇的作為gaba受體配體的4－(硫基－嘧啶－4－基甲基)－嗎啉 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及式I的化合物和其可藥用的酸加成鹽， 其中X是-S-或-NH-；R1是烷基、鏈烯基、芳基烷基、芳基鏈烯基或芳基-O-烷基，其中芳基任選地被一個或多個選自低級烷基、低級烷氧基、鹵素或低級鹵代烷基的取代基取代；R2是氫、低級烷基或環(huán)烷基；R3/R4可以與它們所連接的N-原子一起形成一個非芳族5、6或7元環(huán)，該環(huán)除了所述的N-原子外還可以含有一個另外的選自O(shè)、S或N的雜原子，并且其中該環(huán)任選地被羥基、低級烷基、低級烷氧基、-NR2、-CONR2、-CO-低級烷基或芐基取代；或者可以與它們所連接的N-原子一起形成一個含有至少兩個環(huán)并且可以含有一個或兩個另外的選自N或O的雜原子的雜環(huán)環(huán)系；R5是氫或低級烷基；R是氫或低級烷基。
式I的化合物和它們的鹽具有有價值的治療性質(zhì)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這些化合物對GABAB受體有活性。
γ-氨基丁酸(GABA)—最豐富的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)—既活化親離子GABAA/C受體又活化促代謝GABAB受體(Hill和Bowery，Nature，290，149-152，1981)。在哺乳動物腦的大多數(shù)區(qū)域中存在于突觸前末梢和突觸后神經(jīng)元上的GABAB受體參與抑制性突觸傳遞的微調(diào)。突觸前GABAB受體通過調(diào)節(jié)高電壓活化的Ca2+通道(P/Q-和N-型)抑制許多神經(jīng)遞質(zhì)的釋放。突觸后GABAB受體活化G-蛋白偶聯(lián)的內(nèi)向整流型K+(GIRK)通道并調(diào)節(jié)腺苷酸環(huán)化酶(Billinton等人，Trends Neurosci.，24，277-282，2001；Bowery等人，Pharmacol.Rev..54，274-264，2002)。因為GABAB受體在戰(zhàn)略上被定位于調(diào)控各種神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)、GABAB受體配體的活性，因此其具有作為治療劑用于治療焦慮、抑郁、癲癇、精神分裂癥和認(rèn)知障礙的潛能(Vacher和Bettler，Curr.Drug Target，CNS Neurol.Disord.2，248-259，2003；Bettler等人，Physiol Rev.84，835-867，2004)。
天然GABAB受體是由兩類亞基-GABABR1和GABABR2亞基—組成的異聚(heteromeric)結(jié)構(gòu)(Kaupmann等人，Nature，386，239-246，1997和Nature，396，683-686，1998)。GABABR1和R2的結(jié)構(gòu)表明它們屬于被稱為第3族的G-蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)族。第3族GPCR的其它成員包括代謝型谷氨酸(mGlu1-8)受體、鈣敏感受體(calcium-sensing receptor)、犁鼻(vomeronasal)受體、信息素受體和推定的味覺感受器(Pin等人，Pharmaco..Ther.98，325-354，2003)。第3族受體(包括GABAB受體)的特征在于兩個清楚分開的局部解剖學(xué)區(qū)域特別長的細(xì)胞外氨基-末端區(qū)域(ATD，500-600個氨基酸)(其含有用于激動劑結(jié)合的venus flytrap模塊(orthosteric部位)(Galvez等人，J.Biol.Chem.，275，41166-4114， 2000)和受體活化和G-蛋白偶聯(lián)中涉及的7TM螺旋片段加細(xì)胞內(nèi)羧基-末端區(qū)域。GABABR1R2異二聚體中激動劑的受體活化機(jī)理在GPCR中是獨(dú)特的。在該異聚體中，僅GABABR1亞基與GABA結(jié)合，而GABABR2負(fù)責(zé)G-蛋白的偶聯(lián)和活化(Havlickova等人，Mol.Pharmacol.62，343-350，2002；Kniazeff等人，J.Neurosci.，22，7352-7361，2002)。
Schuler等人，Neuron，31，47-58，2001已經(jīng)證明GABABR1剔除(KO)小鼠表現(xiàn)出自發(fā)性癲癇發(fā)作和痛覺過敏。這些KO小鼠喪失了所有的生物化學(xué)和電生理學(xué)GABAB響應(yīng)。有趣的是，GABABR1KO小鼠在兩種焦慮范例中更焦慮，所述的焦慮范例即明-暗穿箱試驗(在明室的時間減少)和爬梯試驗(站立數(shù)和爬梯數(shù)減少)。它們在被動回避行為模型中表現(xiàn)出明顯受損，這表明其記憶過程受損。GABABR1KO也表現(xiàn)出在新環(huán)境中快速移動(hyperlocomotion)增加和活動過度(hyperactivity)。GABABR1基因被定位于染色體6p21.3，其在HLA class I內(nèi)，是一個與精神分裂癥、癲癇和誦讀困難有關(guān)的區(qū)域(Peters等人，Neurogenetics，2，47-54，1998)。Mondabon等人，Am.J.Med.Genet 122B/1，134，2003已經(jīng)報道了GABABR1基因的Ala20Val多態(tài)性與精神分裂癥的弱聯(lián)系。此外，Gassmann等人，J Neurosci.24，6086-6097，2004已經(jīng)表明與GABABR1KO小鼠相比，GABABR2KO小鼠患有自發(fā)性癲癇發(fā)作、痛覺過敏、自發(fā)活動過高(hyperlocomotor activity)和嚴(yán)重的記憶受損。因此，異聚GABABR1R2受體負(fù)責(zé)這些表型。
巴氯芬(力奧來素θ，β-氯苯基GABA)是一種選擇性GABAB受體激動劑，其對天然受體的EC50＝210nM，其是唯一的配體，從1972年開始，其已經(jīng)在臨床研究中被用于治療脊髓損傷后患者的痙攣狀態(tài)和骨骼肌強(qiáng)直、多發(fā)性硬化、肌萎縮性側(cè)索硬化、腦性癱瘓。用巴氯芬和GABAB受體激動劑進(jìn)行的大部分臨床前和臨床研究均是用于治療神經(jīng)性疼痛和與可卡因和尼古丁有關(guān)的成癮(Misgeld等人，Prog.Neurobiol.46，423-462，1995；Enna等人，Life Sci，62，1525-1530，1998；McCarson和Enna，Neuropharmacology，38，1767-1773，1999；Brebner等人，Neuropharmacology，38，1797-1804，1999；Paterson等人，Psychopharmacology，172，179-186，2004)。如用Hamilton焦慮量表、Zung焦慮量表和Katz-R神經(jīng)質(zhì)亞量表(nervousness subscale)所評估的那樣，在驚恐癥患者中，巴氯芬在降低驚恐發(fā)作次數(shù)和焦慮癥狀方面十分有效(Breslow等人，Am.J.Psychiatry，146，353-356，1989)。在用患有與戰(zhàn)爭有關(guān)的慢性創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(PTSD)的退伍軍人小組進(jìn)行的研究中，發(fā)現(xiàn)巴氯芬是一種有效的且耐受性良好的治療。其顯著改善PTSD的整體癥狀，最明顯的是回避、感情麻木和過度覺醒癥狀，并且還降低相伴的焦慮和抑郁(Drake等人，Ann.Pharmacother.37，1177-1181，2003)。在臨床前研究中，巴氯芬能逆轉(zhuǎn)精神病大鼠PPT模型中由地佐環(huán)平、而非阿樸嗎啡誘導(dǎo)的聽覺驚嚇反應(yīng)的前脈沖抑制(PPT)降低(Bortolato等人，Psychopharmacology，171，322-330，2004)。因此，GABAB受體激動劑在精神障礙的藥理學(xué)治療中具有潛能。不幸的是，巴氯芬具有許多限制其應(yīng)用的不利副作用，包括血腦屏障滲透性差、作用持續(xù)時間非常短以及治療窗窄(肌肉松弛、鎮(zhèn)靜和耐受性)。
Urwyler等人，Mol.Pharmacol.，60，963-971，2001報道了一類被稱為正性(positive)變構(gòu)調(diào)節(jié)劑的新GABAB受體配體，CGP7930[2，6-二-叔丁基-4-(3-羥基-2，2-二甲基-丙基)-苯酚]以及其醛類似物CGP13501。這些配體自身對GABAB受體沒有作用，但是與內(nèi)源性GABA配合，它們增加GABA在GABABR1R2上的效力和最大效能(Pin等人，Mol.Pharmacol.，60，881-884，2001)。有趣的是，最近用CGP7930進(jìn)行的研究(Binet等人，J BiolChem.，279，29085-29091，2004)表明這種正性調(diào)節(jié)劑直接活化GABABR2亞基的七個跨膜結(jié)構(gòu)域(7TMD)。Mombereau等人，Neuropsychopharmacology，1-13，2004最近報道了在明-暗穿箱和零升高迷宮試驗(elevated zero maze test)焦慮模型中GABAB受體正性調(diào)節(jié)劑，GS39783(N，N-二環(huán)戊基-2-甲硫基-5-硝基-嘧啶-4，6-二胺)急性和長期治療的抗焦慮作用(Urwyler等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.，307，322-330，2003)。因為GABAB增強(qiáng)劑在不存在GABA的情況下對受體活性沒有影響，但是變構(gòu)增強(qiáng)GABAB受體對內(nèi)源性GABA的親和力，所以預(yù)期與巴氯芬相比，這些配體的副作用應(yīng)得到改善。實際上，GS39783在以0.1-200mg/kg口服施用時與巴氯芬相比對自發(fā)活動、旋轉(zhuǎn)桿(rotarod)、體溫和牽引試驗沒有影響，其表明在用小鼠和大鼠進(jìn)行的被動回避行為試驗進(jìn)行評估時，在2.5-15mg/kg口服施用GS39783下這些副作用對認(rèn)識行為沒有任何影響。此外，GS39783在高架十字迷宮(大鼠)、零升高迷宮(小鼠和大鼠)以及應(yīng)激誘導(dǎo)的高熱(小鼠)試驗?zāi)Ｐ椭羞€表現(xiàn)出抗焦慮樣作用。因此，GS39783代表了一種沒有與巴氯芬或苯并二氮雜類有關(guān)的副作用的新的抗焦慮藥(Cryan等人，J Pharmacol Exp Ther.，310，952-963，2004)。用CGP7930和GS39783進(jìn)行的臨床前研究表明這兩種化合物在降低大鼠可卡因自我給藥方面均是有效的(Smith等人，J.Psychopharmacology，173，105-111，2004)。也已經(jīng)對正性調(diào)節(jié)劑CGP7930治療胃食管反流病(GERD)進(jìn)行了臨床前研究，發(fā)現(xiàn)其是有效的(WO 03/090731，GABAB受體正性調(diào)節(jié)劑在胃腸障礙中的應(yīng)用(Use of GABABreceptor positive modulators in gastro-intestinaldisorders))。
已經(jīng)報道了一些其它第3族GPCR的正性變構(gòu)調(diào)節(jié)劑，包括mGlu1受體(Knoflach等人，Proc.Natl.Acad.Sci.，USA，98，13402-13407，2001；Wichmann等人，F(xiàn)armaco，57，989-992，2002)、鈣敏感受體(NPS R-467和NPS R-568)(Hammerland等人，Mol.Pharmacol.，53，1083-1088，1998)(US6,313,146)、mGlu2受體[LY487379，N-(4-(2-甲氧基苯氧基)-苯基-N-(2，2，2-三氟乙基磺?；?-吡啶-3-基甲基胺及其類似物)(WO 01/56990，谷氨酸受體增效劑(Potentiators of glutamate receptors))和mGlu5受體(CPPHA，N-{4-氯-2-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]苯基}-2-羥基苯甲酰胺)(O′Brien等人，J.Pharmaco.Exp.Ther.，27，2004年1月27)。有趣的是，已經(jīng)證明了這些正性調(diào)節(jié)劑與位于七個跨膜結(jié)構(gòu)域(7TMD)中的一個新變構(gòu)部位結(jié)合，從而通過穩(wěn)定7TMD區(qū)域的活性狀態(tài)而增強(qiáng)激動劑親和性(Knoflach等人，Proc.Natl.Acad.Sci.，USA 98，13402-13407，2001；Schaffhauser等人，Mol.Pharmacol.，64，798-810，2003)。此外，NPS R-467、NPS R-568(Tecalcet)和相關(guān)的化合物代表了由于其變構(gòu)作用方式而進(jìn)入臨床試驗的第一類正性變構(gòu)調(diào)節(jié)劑。
本發(fā)明的目的是式I化合物和其可藥用的酸加成鹽、式I化合物和其鹽的制備、含有式I化合物或其可藥用的酸加成鹽的藥物、該類藥物的制備和式I化合物及其可藥用鹽在控制或預(yù)防疾病、尤其是上文提及的那些種類的疾患和障礙、如焦慮、抑郁、癲癇、精神分裂癥、認(rèn)知障礙、痙攣狀態(tài)和骨骼肌強(qiáng)直、脊髓損傷、多發(fā)性硬化、肌萎縮性側(cè)索硬化、腦性癱瘓、神經(jīng)性疼痛和與可卡因和尼古丁有關(guān)的成癮、精神病、驚恐癥、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙或胃腸障礙中的用途以及分別在制備相應(yīng)藥物中的用途。
無論所討論的術(shù)語單獨(dú)出現(xiàn)還是組合出現(xiàn)，在本說明書中所用的一般術(shù)語適用下列定義。
本文所用的術(shù)語“烷基”表示含有1至12個碳原子的直鏈或支鏈的碳鏈基團(tuán)，例如，甲基、乙基、戊基、己基、辛基、壬基等。
術(shù)語“低級烷基”表示含有1至7個碳原子的直鏈或支鏈的烷基。優(yōu)選的低級烷基含有1至4個碳原子。
本文所用的術(shù)語“鏈烯基”表示含有2至12個碳原子和至少一個雙鍵的直鏈或支鏈的碳鏈基團(tuán)，例如，乙烯基、丙烯基、異丙烯基、丁烯基等。
本文所用的術(shù)語“芳基烷基”或“芳基鏈烯基”表示與上文所定義的烷基或鏈烯基碳鏈結(jié)合的不飽和的芳族環(huán)例如苯基或萘基。
術(shù)語“鹵素”表示氯、碘、氟和溴。
術(shù)語“鹵代烷基”表示被一個或多個鹵素原子取代的上文所定義的烷基。
術(shù)語“低級烷氧基”表示其中烷基殘基如上文所定義并且該烷基通過一個氧原子被連接的基團(tuán)。
術(shù)語“環(huán)烷基”表示具有3至6個碳原子的碳環(huán)，優(yōu)選的是環(huán)丙基。
術(shù)語“5、6或7元環(huán)，該環(huán)除了所述的N-原子外還可以含有一個另外的選自O(shè)、S或N的雜原子”表示非芳族環(huán)，例如吡咯烷、哌啶、嗎啉、硫代嗎啉、1-氧代-硫代嗎啉、1，1-二氧代-硫代嗎啉、哌嗪、1，4-二氮雜環(huán)庚烷、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷等。
術(shù)語“其中R3和R4與N-原子一起形成一個含有至少兩個環(huán)并且可以含有一個或兩個另外的選自N或O的雜原子的雜環(huán)環(huán)系”表示例如以下的基團(tuán) 術(shù)語“可藥用的酸加成鹽”包括與無機(jī)酸和有機(jī)酸如鹽酸、硝酸、硫酸、磷酸、檸檬酸、甲酸、富馬酸、馬來酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、對甲苯磺酸等形成的鹽。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物是其中X是-S-的那些化合物。其中尤其優(yōu)選的化合物是其中R1是烷基且R3和R4與N-原子一起形成一個可以包含另外的O-雜原子并且可以是未取代的或者被低級烷基取代的五或六元環(huán)的那些化合物。
其中優(yōu)選的化合物是其中R3和R4與N-原子一起形成嗎啉環(huán)的那些化合物，例如以下的化合物4-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉，4-(6-甲基-2-戊硫基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉，4-(2-己硫基-6-三氟甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉，4-(2-己硫基-6-乙基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉和4-[1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-嗎啉。
其中優(yōu)選的化合物還有其中R3和R4與N-原子一起形成任選地被低級烷基取代的吡咯烷或哌啶環(huán)的那些化合物，例如以下的化合物2-己硫基-4-甲基-6-吡咯烷-1-基甲基-嘧啶，2-己硫基-4-甲基-6-(2-甲基-哌啶-1-基甲基)-嘧啶，4-(2，6-二甲基-哌啶-1-基甲基)-2-己硫基-6-甲基-嘧啶和4-(順式-2，6-二甲基-哌啶-1-基甲基)-2-己硫基-6-甲基-嘧啶。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物還有其中R1是任選地被低級烷基取代的芳基烷基且R3和R4與N-原子一起形成一個可以含有另外的O-雜原子的五或六元環(huán)的那些化合物，例如以下的化合物4-[2-(4-叔丁基-芐硫基)-6-甲基-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉。
還優(yōu)選的是其中R3和R4與N-原子一起形成一個含有至少兩個環(huán)并且可以含有一個或兩個另外的選自N或O的雜原子的雜環(huán)環(huán)系的化合物，例如以下的化合物(1S，5S)-3-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-1，2，3，4，5，6-六氫-1，5-亞甲基-吡啶并[1，2-a][1，5]二氮雜環(huán)辛間四烯-8-酮。
最優(yōu)選其中R5是氫的式I化合物。
本發(fā)明的另一個目的是其中R5是甲基或X是-NH-的另外的化合物。
根據(jù)本發(fā)明，上述的式I化合物可以用以下方法變體來制備a)使式V的化合物 與式VI-a的化合物反應(yīng)， 得到式Ia的化合物， 其中R1至R4如上文所定義，或者b)使下式的化合物 與式R1NH2的胺反應(yīng)，得到式Ib的化合物，
其中R1至R4如上文所定義，或者c)使式XI的化合物 與式II的胺反應(yīng)，HNR3R4II得到式Ia的化合物， 其中R1至R4如上文所定義，或者d)使下式的化合物 與式II的胺反應(yīng)，HNR3R4II得到式Ic的化合物， 其中R1至R4如上文所定義，和如果需要，將所得的式I化合物轉(zhuǎn)化成可藥用的鹽。
在下文更詳細(xì)地描述了式I化合物的制備在流程

圖1-4中描述了制備式I化合物的方法，這些方法以已知化合物、市售產(chǎn)品或可以用常規(guī)方式制備的化合物為原料。
在實施例1-43中對式I化合物的制備進(jìn)一步進(jìn)行了詳細(xì)描述。
在方法描述中，使用了下列縮寫TEA＝三乙胺THF＝四氫呋喃OXONE＝單過硫酸氫鉀三合鹽(potassium monopersulfate triple salt)DCM＝4-(二氰基亞甲基)-2-甲基-6-(4-二甲基氨基苯乙烯基)-4H-吡喃DMF＝N，N-二甲基甲酰胺流程圖1 a)硫脲，EtOH，回流，24小時，b)NH2OH HCl，TEA，EtOH，回流，24小時，c)MsOH，RaNi，EtOH，H2，3小時。
按照流程圖1，可以如下制備式VI-a和VI-b的中間體步驟a將硫脲和相應(yīng)的式R1Br的化合物、例如1-溴己烷在氮?dú)庀略诖祭缫掖贾性诨亓飨录訜峒s20小時。將醇蒸發(fā)，在常規(guī)的分離和純化后，得到相應(yīng)的式VI-a的異硫脲氫溴酸鹽。
步驟b將式R1CN的氰化物和鹽酸羥胺溶解于醇例如乙醇中，用三乙胺處理。在分離和純化后，得到相應(yīng)的N-羥基-脒。
步驟c向得自步驟b的N-羥基-脒和醇例如乙醇的溶液中加入新鮮的阮內(nèi)鎳和甲磺酸(MsOH)。將反應(yīng)混合物在室溫下在氫氣氛下攪拌約3小時。在分離和純化后，得到相應(yīng)的脒甲磺酸鹽。
流程圖2 A1)K2CO3，MeOH，0-20℃，A2)iPrMgCl，THF，-20℃或BuLi，THF-70℃，A3)TEA，THF，20℃或NaOMe，MeOH，A4)OXONE(單過硫酸氫鉀三合鹽)，MeOH，A5)THF，20℃。
根據(jù)流程圖2，可以如下制備式VI-a和VI-b的中間體式IV的中間體化合物將N，O-二甲基-羥胺HCl在氮?dú)庀禄鞈矣贒CM中并在冰中進(jìn)行冷卻。緩慢加入三乙胺，然后緩慢加入乙酰氯，盡管用冰進(jìn)行冷卻并緩慢加入，溫度還是達(dá)到約20℃。在不冷卻的情況下繼續(xù)攪拌約30分鐘。在萃取和純化后，得到N-甲氧基-N-甲基-乙酰胺。
或者將N，O-二甲基-羥胺HCl在氮?dú)庀禄鞈矣贒CM中并在冰中進(jìn)行冷卻。緩慢加入三乙胺，然后緩慢加入環(huán)丙烷碳酰氯。在不冷卻的情況下繼續(xù)攪拌1小時。萃取2×DCM，1×1N HCl，1×NaCl。蒸餾75℃/20mbar。得到環(huán)丙烷甲酸甲氧基-甲基-酰胺。
步驟A1將式HNR3R4(II)的化合物例如嗎啉溶解于醇例如MeOH中并在冰中在氮?dú)庀逻M(jìn)行冷卻，然后在冰中進(jìn)行攪拌的同時加入碳酸鉀和炔丙基溴。在不進(jìn)行冷卻的情況下繼續(xù)攪拌約4h。將所得的混懸液用常規(guī)方式進(jìn)行后處理。得到式III的化合物，例如4-丙-2-炔基-嗎啉。
步驟A2將步驟A1中獲得的化合物在氮?dú)庀氯芙庥赥HF中并冷卻至約-40℃。然后，加入異丙基氯化鎂在THF中的溶液，同時保持溫度低于-20℃。在-40℃至-30℃下繼續(xù)攪拌約30分鐘。在一個獨(dú)立的燒瓶中，將式IV的化合物例如N-甲氧基-N-甲基乙酰胺在氮?dú)庀氯芙庥赥HF中并在冰/MeOH中冷卻至-10℃。將以上制備的格氏試劑溶液通過聚四氟乙烯管轉(zhuǎn)移到在容器1中的、在略微正氮?dú)鈮合?、?10℃下的Weinreb酰胺溶液中。在-10℃至0℃下繼續(xù)攪拌約2小時。將所得的混懸液用常規(guī)方式進(jìn)行后處理。得到式V的化合物，例如5-嗎啉-4-基-戊-3-炔-2-酮。
步驟A3將步驟A2中所得的化合物例如5-嗎啉-4-基-戊-3-炔-2-酮和式VI-a的化合物例如2-己基-異硫脲氫溴酸鹽在氮?dú)庀氯芙庥贒MF中，然后加入N，N-二異丙基乙基胺并在室溫下繼續(xù)攪拌約18小時。將所得的混懸液用常規(guī)方式進(jìn)行后處理。得到式Ia的化合物，例如4-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉。
步驟A4將步驟A3中獲得的式Ia的化合物例如4-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉溶解于MeOH中并用單過硫酸氫鉀三合鹽(OXONE)處理約2小時。得到式VII的化合物，例如4-(2-己基磺?；?6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉。
步驟A5將被溶解于THF中的步驟A4中獲得的式VII的化合物和式R1NH2的胺在20℃下攪拌過夜。得到式Ib的化合物。
流程圖3 B1)BuLi，THF-70℃至-30℃，B2)TEA，THF，20℃，B3)4N HCl或TFA/H2O，B4)NaBH3CN或pyBH3，EtOH/AcOH 10∶1，20℃或Ti(OiPr)4，純凈的，NaBH3CN，iPrOH根據(jù)流程圖3，可以如下制備式Ia的化合物步驟B1在氬氣下將炔丙醛二乙縮醛溶解于THF中并冷卻至-70℃。然后，加入丁基鋰在己烷中的溶液并在-30℃下繼續(xù)攪拌約30分鐘。然后，加入位于THF中的相應(yīng)的式IV化合物，例如N-甲氧基-N-甲基乙酰胺。在-30℃下30分鐘后，通過加入飽和NH4Cl溶液將反應(yīng)淬滅。在常規(guī)后處理后，得到相應(yīng)的式IX的化合物，例如5，5-二乙氧基-戊-3-炔-2-酮。
步驟B2將步驟B1中獲得的化合物例如5，5-二乙氧基-戊-3-炔-2-酮和相應(yīng)的式VI-a的化合物例如2-己基-異硫脲氫溴酸鹽在氮?dú)庀氯芙庥赥HF中。然后，緩慢加入三乙胺，同時在冰浴中進(jìn)行冷卻以將溫度保持在20℃。將該混懸液在不冷卻的情況下攪拌約5小時。將所獲得的產(chǎn)物例如4-二乙氧基甲基-2-己硫基-6-甲基-嘧啶用常規(guī)方法進(jìn)行后處理。
步驟B3將步驟B2中獲得的化合物例如4-二乙氧基甲基-2-己硫基-6-甲基-嘧啶溶解于THF和H2SO4水溶液中并在50℃下加熱約33小時。然后，將該溶液傾倒在冷的Na2CO3溶液中并用常規(guī)方式進(jìn)行后處理。得到式XI的化合物，例如2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-甲醛。
步驟B4將步驟B3中獲得的式XI的化合物例如2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-甲醛溶解于乙醇和乙酸中。然后，在20℃下緩慢加入式II的化合物，例如吡咯烷和氰基硼氫化鈉并繼續(xù)攪拌約24小時。將反應(yīng)混合物用常規(guī)方式進(jìn)行后處理。得到式Ia的化合物，例如2-己硫基-4-甲基-6-吡咯烷-1-基甲基-嘧啶。
流程圖4 C1)在4N H2SO4中的CrO3，丙酮，0-20℃，C2)TEA，THF，20℃，C3)在4N H2SO4中的CrO3，丙酮，0-20℃C4)Ti(OiPr)4，NaBH3CN，iPrOH。
根據(jù)流程圖4，可以如下制備式Ic的化合物步驟C1將3-己炔-2，5-二醇在丙酮中的溶液在氮?dú)庀略诒羞M(jìn)行冷卻。在5℃下歷經(jīng)2小時緩慢加入瓊斯試劑(45mmol，2M的在4M H2SO4中的CrO3)。將所得的綠色溶液從鉻鹽上傾出并用AcOEt和飽和NaCl溶液進(jìn)行萃取。
對粗產(chǎn)物進(jìn)行純化。得到式XII的5-羥基-己-3-炔-2-酮。
步驟C2將5-羥基-己-3-炔-2-酮和式VI-a的化合物例如2-己基-異硫脲氫溴酸鹽溶解于THF中。然后，加入三乙胺并繼續(xù)攪拌約3小時。將所得的產(chǎn)物分離并進(jìn)行純化。得到式XIII的化合物，例如1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙醇。
步驟C3將步驟C2中獲得的化合物例如1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙醇在氮?dú)庀氯芙庥诒?。然后，滴加?0g在100mL 4M H2SO4中的CrO3制得的瓊斯試劑。在20℃下攪拌約2小時后，將所得的溶液分離并用常規(guī)方式進(jìn)行純化。得到式XIV的化合物，例如1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酮。
步驟C4將式XIV的化合物例如1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酮和式II的化合物例如嗎啉溶解于原鈦酸四異丙酯中并在約80℃下加熱16小時。將該溶液用2-丙醇稀釋并用氰基硼氫化鈉在約20℃下處理6小時。將所得的式Ic的產(chǎn)物例如4-[1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-嗎啉分離并用常規(guī)方式進(jìn)行純化。
如前文所提及的那樣，式I化合物和它們可藥用的加成鹽具有有價值的藥理學(xué)性質(zhì)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物對GABAB受體具有親和力。
根據(jù)下文所給出的試驗對所述化合物進(jìn)行了研究。細(xì)胞內(nèi)Ca2+動員(mobilization)試驗將穩(wěn)定表達(dá)人GABABR1aR2a和Gα16的中國蒼鼠卵巢(CHO)細(xì)胞以5×104個細(xì)胞/孔接種到聚-D-賴氨酸處理的黑色/透明-底的96-孔板(BDBiosciences，Palo Alto，CA)中。24小時后，將細(xì)胞在37℃下用4μM的在加樣緩沖液(1×HBSS，20mM HEPES，2.5mM丙磺舒)中的Flou-4乙酰氧基甲酯(目錄號F-14202，Molecular Probes，Eugene，OR)荷載90分鐘。Hanks平衡鹽溶液(HBSS)(10×)(目錄號14065-049)和HEPES(1M)(目錄號15630-056)購自Invitrogen，Carlsbad，CA。丙磺舒(250mM)(目錄號P8761)購自Sigma，Buchs，瑞士。將細(xì)胞用加樣緩沖液洗滌5次以除去過量的染料并如之前所述的那樣(Porter等人，Br.J.Pharmacol.，118，13-20，1999)用熒光成像讀板儀(FLIPR，Molecular Devices，Menlo Park，CA)來測量細(xì)胞內(nèi)鈣動員，[Ca2+]i。在應(yīng)用GABA前15分鐘應(yīng)用增強(qiáng)劑。對于GABA遷移試驗，在不存在和存在10μM增強(qiáng)劑的情況下測定GABA的濃度-響應(yīng)曲線(0.0003-30μM)。將GABA-遷移定義為Log[EC50(GABA+10μM增強(qiáng)劑)/EC50(僅GABA)]。由存在10nM GABA(EC10)情況下增強(qiáng)劑的濃度-響應(yīng)曲線(0.001-30μM)來確定各增強(qiáng)劑的最大增強(qiáng)作用百分比(％Emax)和效力(EC50值)。以熒光的峰值增加減去基底來測量響應(yīng)，用僅用10μMGABA(被認(rèn)為是100％)和僅用10nM GABA(被認(rèn)為是0％)誘導(dǎo)的最大刺激作用進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。將數(shù)據(jù)用方程Y＝100+(Max-100)/(1+(EC50/[藥物])n)擬合，其中Max是最大作用，EC50是引起半數(shù)最大作用的濃度，n是Hill斜率。
式I的化合物以及它們可藥用的酸加成鹽可用作藥物，例如以藥物制劑的形式用作藥物。所述藥物制劑可以被口服施用，例如以片劑、包衣片劑、糖衣丸(dragée)、硬明膠膠囊和軟明膠膠囊、溶液劑、乳劑或混懸劑的形式口服施用。但是，也可以進(jìn)行直腸施用，例如以栓劑形式進(jìn)行直腸施用，或者胃腸外施用，例如以注射溶液的形式胃腸外施用。
可以用用于制備片劑、包衣片劑、糖衣丸和硬明膠膠囊的藥學(xué)上惰性的無機(jī)或有機(jī)賦形劑對式I化合物荷它們可藥用的酸加成鹽進(jìn)行加工?？梢允褂萌樘?、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其鹽等作為賦形劑，例如用于片劑、糖衣丸和硬明膠膠囊劑。
用于軟明膠膠囊的適宜的賦形劑有例如植物油、蠟類、脂類、半固體和液體多元醇等。
用于制造溶液劑和糖漿劑的適宜賦形劑有例如水、多元醇、蔗糖、轉(zhuǎn)化糖、葡萄糖等。
用于注射溶液的適宜賦形劑有例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。
用于栓劑的適宜賦形劑有例如天然或硬化油、蠟類、脂類、半液體或液體多元醇等。
此外，所述藥物制劑可以含有防腐劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、改變滲透壓的鹽、緩沖劑、掩味劑或抗氧化劑。他們還可以含有其它治療上有價值的物質(zhì)。
劑量可以在寬限度內(nèi)變化，并且當(dāng)然將符合各特定情況中個體的需求。一般而言，在口服施用的情況下，每人約10至1000mg通式I的化合物的日劑量應(yīng)當(dāng)是適宜的，但是必要時也可以超出以上的上限。
片劑制劑(濕法制粒)項目成分mg/片5mg25mg 100mg 500mg1. 式IA或IB的化合物5 25 1005002. 無水乳糖DTG 12510530 1503. Sta-Rx 1500 6 6 6 30
4.微晶纖維素30 30 30 1505.硬脂酸鎂 1 1 1 1共計 167167167831制造方法1.將第1、2、3和4項混合并用純化水制粒。
2.將顆粒在50℃下干燥。
3.使顆粒通過適宜的研磨裝置。
4.加入第5項并混合3分鐘；在適宜的壓片機(jī)上進(jìn)行壓制。
膠囊制劑項目成分mg/膠囊5mg25mg 100mg 500mg1. 式IA或IB的化合物5 25 1005002. 無水乳糖159123148---3. 玉米淀粉25 35 40 704. 滑石粉 10 15 10 255. 硬脂酸鎂1 2 2 5共計200200300600制造方法1.將第1、2和3項在適宜的混合器中混合30分鐘。
2.加入第4和5項并混合3分鐘。
3.填充到適宜的膠囊中。
用以下實施例對本發(fā)明進(jìn)行非限制性說明。所有溫度均以攝氏度為單位給出。
中間體IVN-甲氧基-N-甲基-乙酰胺將N，O-二甲基-羥胺HCl(100g，1025mmol)在氮?dú)庀禄鞈矣贒CM(1000mL)中并在冰中進(jìn)行冷卻。緩慢加入三乙胺(300mL，2152mmol)，然后緩慢加入乙酰氯(76.5mL，1076mmol)，盡管用冰進(jìn)行冷卻并緩慢加入，但是溫度仍然達(dá)到20℃。在不進(jìn)行冷卻的情況下繼續(xù)攪拌30分鐘。萃取1×DCM，1×1N HCl，2×飽和NaCl溶液。在42℃/20mbar下蒸餾，得到69g(65％)無色油狀物。
環(huán)丙烷甲酸甲氧基-甲基-酰胺將N，O-二甲基-羥胺HCl(40g，410mmol)在氮?dú)庀禄鞈矣贒CM(400mL)中并在冰中進(jìn)行冷卻。緩慢加入三乙胺(63mL，451mmol)，然后緩慢加入環(huán)丙烷碳酰氯(41mL，45lmmol)。在不進(jìn)行冷卻的情況下繼續(xù)攪拌1h。萃取2×DCM，1×1N HCl，1×NaCl。蒸餾75℃/20mbar。得到32.5g(61％)無色油狀物。
中間體VI2-己基-異硫脲氫溴酸鹽將硫脲(50g，657mmol)和1-溴己烷(119mL，723mmol)在回流下于氮?dú)庀略谝掖?500mL)中加熱20小時。蒸發(fā)掉乙醇，將濃稠的油狀物在乙醚(500mL)中進(jìn)行攪拌。產(chǎn)物自動沉淀出來。過濾后，得到144.5g(91％)白色晶體，m.p.75℃。
2-硫代-2-(3，7，9-三甲基-2，6-癸二烯基)假脲氫溴酸鹽以類似的方式，用(2E，6E)-1-溴-3，7，9-三甲基-癸-2，6-二烯制備。
2-(4-甲基-芐基)-異硫脲氫溴酸鹽以類似的方式，用4-甲基-芐基溴制備。
2-((E)-3-間-甲苯基-烯丙基)-異硫脲氫溴酸鹽以類似的方式，用1-((E)-3-溴-丙烯基)-3-甲基-苯制備。
2-(4-叔丁基-芐基)-異硫脲氫溴酸鹽以類似的方式，用4-叔丁基-芐基溴制備。
2-(3-苯基-丙基)-異硫脲氫溴酸鹽以類似的方式，用1-溴-3-苯基丙烷制備。得到25.9g(72％)白色固體，m.p.96℃。
2-(1，3-二甲基-丁基)-異硫脲氫溴酸鹽以類似的方式，用2-溴-4-甲基-戊烷制備。
2-丁基-異硫脲氫碘酸鹽以類似的方式，用1-碘丁烷制備。
2-(4-苯氧基-丁基)-異硫脲氫溴酸鹽以類似的方式，用4-苯氧基丁基溴制備。
N-羥基-壬脒將辛基氰(octyl cyanide)(2g，14mmol)和鹽酸羥胺(2.495g，36mmol)溶解于EtOH(10mL)中并用三乙胺(5mL，36mmol)在回流下處理過夜。萃取AcOEt/水。硅膠色譜庚烷/AcOEt 1∶2，得到白色固體(0.65g，26％)。MSm/z＝173(M+H)。
壬脒甲磺酸鹽向N-羥基-壬脒(0.6g，3.48mmol)在乙醇(5mL)中的溶液中加入新鮮的阮內(nèi)鎳(0.05g)和甲磺酸(0.08ml，1.26mmol)。將反應(yīng)混合物在20℃下在氫氣氛下攪拌2小時。用硅藻土過濾并蒸發(fā)，得到淡綠色的油狀物(0.5g，56％)。MSm/z＝157(M+H)。
步驟A14-丙-2-炔基-嗎啉將嗎啉(100ml，1.148mol)溶解于MeOH(1L)中并在氮?dú)庀略诒羞M(jìn)行冷卻，然后在冰中進(jìn)行攪拌的同時加入碳酸鉀(120g，0.63mol)和炔丙基溴(124mL，1.148mol)。在不進(jìn)行冷卻的情況下繼續(xù)攪拌4h。將白色混懸液用濾紙過濾，將固體用MeOH(100ml)洗滌并小心地蒸發(fā)MeOH。將白色沉淀混懸于DCM(400ml)中，用濾液過濾，小心地進(jìn)行蒸發(fā)。最后，將油狀物在60℃/16mbar下進(jìn)行蒸餾。得到100g(70％)無色油狀物。
步驟A25-嗎啉-4-基-戊-3-炔-2-酮將4-丙-2-炔基-嗎啉(22g，176mmol)在氮?dú)庀氯芙庥赥HF(40mL)中并冷卻至-40℃。然后，加入2M異丙基氯化鎂在THF中的溶液(97mL，193mmol)，同時將溫度保持在低于-20℃。在-40℃至-30℃下繼續(xù)攪拌30分鐘。在一個獨(dú)立的燒瓶中，將N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(20g，193mmol)在氮?dú)庀氯芙庥赥HF(40mL)中并在冰/MeOH中冷卻至-10℃。將以上制備的格氏試劑溶液通過聚四氟乙烯管轉(zhuǎn)移到在容器1中的、在略微正氮?dú)鈮合?、?10℃下的Weinreb酰胺溶液中。不發(fā)生放熱。在-10℃至0℃下繼續(xù)攪拌2小時。將所得的白色混懸液傾倒在1∶1的冰和飽和NH4Cl溶液的混合物(400mL)上。萃取2×AcOEt，1×飽和NaCl溶液。得到黃色油狀物(26.1g，89％)。用硅膠色譜處理，用庚烷/乙酸乙酯1∶2洗脫，得到19.4g(66％)棕色油狀物，將其在Kugelrohr中在130℃/0.2mbar下進(jìn)行蒸餾。得到15.8g(53％)黃色油狀物。
步驟A3實施例14-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉將5-嗎啉-4-基-戊-3-炔-2-酮(1g，6mmol)和2-己基-異硫脲氫溴酸鹽(1.06g，7mmol)在氮?dú)庀氯芙庥贒MF(10mL)中，然后加入N，N-二異丙基乙基胺(4.1mL，24mmol)并在室溫下繼續(xù)攪拌18小時。蒸發(fā)掉DMF。用AcOEt(2×50mL)、飽和NH4Cl溶液(2×50mL)萃取產(chǎn)物，干燥并濃縮。將殘余物在氨基化硅膠柱上用快速色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/乙酸乙酯梯度洗脫，得到440mg(24％)黃色液體。MSm/z＝310(M+H)。
實施例24-(6-甲基-2-戊硫基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉以類似的方式，用N-戊基異硫脲鹽酸鹽制備。得到260mg(29％)棕色油狀物。MSm/z＝296(M+H)。
實施例34-[6-甲基-2-((2E，6E)-3，7，9-三甲基-癸-2，6-二烯基硫基)-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉以類似的方式，用2-硫代-2-(3，7，9-三甲基-2，6-癸二烯基)假脲氫溴酸鹽制備。得到300mg(35％)無色油狀物。MSm/z＝404(M+H)。
實施例44-[6-甲基-2-((E)-3-苯基-烯丙基硫基)-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉以類似的方式，用2-((E)-3-苯基-烯丙基)-異硫脲制備。得到300mg(34％)無色油狀物。MSm/z＝342(M+H)。
實施例54-[2-(4-甲氧基-芐硫基)-6-甲基-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉以類似的方式，用2-(對-甲氧基芐基)-2-硫代假脲制備。得到414mg(40％)無色油狀物。MSm/z＝346(M+H)。
實施例64-[6-甲基-2-(4-甲基-芐硫基)-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉以類似的方式，用2-(4-甲基-芐基)-異硫脲氫溴酸鹽制備。得到427mg(48％)無色油狀物。MSm/z＝330(M+H)。
實施例74-[6-甲基-2-((E)-3-間甲苯基-烯丙基硫基)-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉以類似的方式，用2-((E)-3-間甲苯基-烯丙基)-異硫脲制備。得到100mg(20％)黃色油狀物。MSm/z＝356(M+H)。
實施例84-[6-甲基-2-(4-苯氧基-丁硫基)-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉以類似的方式，用2-(4-苯氧基-丁基)-異硫脲氫溴酸鹽制備。得到100mg(18％)黃色油狀物。MSm/z＝374(M+H)。
實施例94-(2-丁硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉以類似的方式，用2-丁基-異硫脲氫碘酸鹽制備。得到100mg(23％)黃色油狀物。MSm/z＝282(M+H)。
實施例104-[2-(1，3-二甲基-丁硫基)-6-甲基-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉以類似的方式，用2-(1，3-二甲基-丁基)-異硫脲氫溴酸鹽制備。得到100mg(20％)黃色油狀物。MSm/z＝310(M+H)。
實施例114-[2-(4-叔丁基-芐硫基)-6-甲基-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉以類似的方式，用2-(4-叔丁基-芐基)-異硫脲氫溴酸鹽制備。得到200mg(32％)黃色油狀物。MSm/z＝372(M+H)。
實施例124-[6-甲基-2-(3-苯基-丙硫基)-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉以類似的方式，用2-(3-苯基-丙基)-異硫脲氫溴酸鹽制備。得到300mg(48％)黃色油狀物。MSm/z＝344(M+H)。
實施例134-(2-乙硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉以類似的方式，用2-乙基-2-硫代假脲氫溴酸鹽制備。得到1.5g(55％)黃色油狀物。MSm/z＝254(M+H)。
實施例144-(6-甲基-2-辛基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉將5-嗎啉-4-基-戊-3-炔-2-酮(0.2g，1.2mmol)和壬脒甲磺酸鹽(0.5g，3mmol)溶解于MeOH(5ml)中并用5.4M甲醇鈉在MeOH中的溶液(1.33mL，7mmol)在回流下處理15小時。蒸發(fā)掉MeOH，將混合物用AcOEt和水進(jìn)行萃取。將粗產(chǎn)物在Si-胺上用色譜法進(jìn)行純化，用100∶0至80∶20的庚烷/AcOEt梯度洗脫，得到淡黃色油狀物(0.2g，54％)。MSm/z＝306.4(M+H)。
步驟A44-(2-乙磺酰基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉將4-(2-乙硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉(2g，6.4mmol)溶解于MeOH(20mL)中并用單過硫酸氫鉀三合鹽(5.57g，9mmol)處理2小時。過濾，將濾液與10％NaHSO3水溶液(10mL)一起攪拌5分鐘，然后用AcOEt/H2O萃取。在硅膠上進(jìn)行色譜處理，用3∶2至2∶3庚烷/AcOEt梯度洗脫，得到無色油狀物(0.6g，36％)。MSm/z＝286(M+H)。
步驟A5實施例15(3，5-雙-三氟甲基-芐基)-(4-甲基-6-嗎啉-4-基甲基-嘧啶-2-基)-胺將溶解于THF(2mL)中的4-(2-乙磺?；?6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉(0.2g，0.55mmol)和3，5-雙(三氟甲基)芐胺(0.51g，2.1mmol)在20℃下攪拌過夜。蒸發(fā)并用AcOEt(40mL)和NaHCO3(40mL)萃取。在硅膠上進(jìn)行色譜處理，用2∶1的AcOEt/庚烷洗脫，得到淡黃色油狀物(60mg，20％)。MSm/z＝435(M+H)。
步驟B15，5-二乙氧基-戊-3-炔-2-酮將炔丙醛二乙縮醛(40g，312mmol)在氮?dú)庀氯芙庥赥HF(200mL)中并冷卻至-70℃。然后，加入1.6M正丁基鋰在己烷中的溶液(234mL，374mmol)并在-30℃下攪拌30分鐘。然后，加入在THF(10mL)中的N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(38.6g，374mmol)。在-30℃下30分鐘后，通過加入飽和NH4Cl溶液(20mL)將反應(yīng)淬滅。用AcOEt(2×200mL)、飽和NH4Cl溶液(2×200mL)萃取產(chǎn)物，干燥并濃縮。在硅膠上進(jìn)行色譜處理，用100∶0至95∶5的庚烷/乙酸乙酯梯度洗脫，得到38.5g(72％)無色油狀物。GC/MSm/z＝232(M)。
5，5-二乙氧基-1，1，1-三氟-戊-3-炔-2-酮將3，3-二乙氧基-1-丙炔(10mL，70mmol)在氬氣下溶解于THF(200mL)中并冷卻至-70℃。然后，在-70℃下緩慢加入1.6M正丁基鋰在己烷中的溶液(48mL，77mmol)，然后使之溫?zé)嶂?30℃并在-30℃下攪拌30分鐘，然后再次冷卻至-70℃。在-70℃下一次性加入三氟乙酸乙酯(9.2mL，77mmol)(溫度升至-50℃)，然后在不冷卻的情況下進(jìn)行攪拌直至溫度達(dá)到-30℃，然后用飽和NH4Cl溶液(20mL)淬滅。萃取2×AcOEt，1×飽和NH4Cl，1×飽和NaCl。在硅膠上進(jìn)行色譜處理，用庚烷/乙酸乙酯5∶1洗脫，得到4.94g(31％)橙色油狀物。GC/MSm/z＝223(M-H)。
1-環(huán)丙基-4，4-二乙氧基-丁-2-炔-1-酮將3，3-二乙氧基-1-丙炔(10mL，70mmol)在氬氣下溶解于THF(150mL)中并冷卻至-70℃。然后，在-70℃下緩慢加入1.6M正丁基鋰在己烷中的溶液(48mL，77mmol)，使之溫?zé)嶂?30℃并在-30℃下攪拌30分鐘，然后再次冷卻至-70℃。在-70℃下立即加入環(huán)丙烷甲酸甲氧基-甲基-酰胺(10g，77mmol)(溫度升至-50℃)，然后，在不進(jìn)行冷卻的情況下進(jìn)行攪拌直至溫度達(dá)到0℃，然后用飽和NH4Cl溶液(20mL)淬滅。萃取2×AcOEt，1×飽和NH4Cl，1×飽和NaCl。將棕色油狀物粗品(15g)在硅膠上通過色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/乙酸乙酯10∶1洗脫。得到6g(43％)微黃色油狀物。MSm/z＝151(M)。
4，4-二乙氧基-丁-2-炔醛將3，3-二乙氧基-1-丙炔(10mL，70mmol)在氬氣下溶解于THF(50mL)中并冷卻至-70℃。然后，在-70℃下緩慢加入1.6M正丁基鋰在己烷中的溶液(48mL，77mmol)，使之溫?zé)嶂?40℃并在-40℃下攪拌15分鐘，然后再次冷卻至-70℃。在-70℃下加入DMF(6mL，77mmol)，然后在不進(jìn)行冷卻的情況下進(jìn)行攪拌直至溫度達(dá)到-10℃，然后用飽和NH4Cl溶液(10mL)淬滅。萃取AcOEt，飽和NH4Cl溶液。色譜法庚烷/乙酸乙酯95∶5。得到300mg(2.7％)揮發(fā)性的無色油狀物，將其直接用于下一步。
步驟B24-二乙氧基甲基-2-己硫基-6-甲基-嘧啶將5，5-二乙氧基-戊-3-炔-2-酮(15g，88mmol)和2-己基-異硫脲氫溴酸鹽(23g，97mmol)在氮?dú)庀氯芙庥赥HF(150mL)中。然后緩慢加入三乙胺(27mL，194mmol)，同時用冰浴進(jìn)行冷卻以將溫度保持在20℃。將該混懸液在不進(jìn)行冷卻的情況下攪拌5小時。將產(chǎn)物用AcOEt、飽和NH4Cl溶液進(jìn)行萃取，干燥并濃縮。將殘余物用硅膠色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/AcOEt20∶1洗脫。得到22.3g(80％)無色油狀物和2.8g黃色副產(chǎn)物。
4-二乙氧基甲基-2-己硫基-6-三氟甲基-嘧啶將5，5-二乙氧基-1，1，1-三氟-戊-3-炔-2-酮(2g，8.9mmol)和2-己基-異硫脲氫溴酸鹽(2.4g，9.8mmol)在氮?dú)庀氯芙庥赥HF(20mL)中。然后緩慢加入三乙胺(2.7mL，19.6mmol)。該反應(yīng)放熱性(40℃)。將該混懸液在20℃下攪拌4小時。用AcOEt、飽和NH4Cl溶液萃取產(chǎn)物，干燥并濃縮。將殘余物用硅膠色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/AcOEt 20∶1洗脫。得到2.5g(76％)無色油狀物。MSm/z＝367(M+H)。
4-環(huán)丙基-6-二乙氧基甲基-2-己硫基-嘧啶將1-環(huán)丙基-4，4-二乙氧基-丁-2-炔-1-酮(2g，10mmol)和2-己基-異硫脲氫溴酸鹽(2.7g，11.2mmol)在氮?dú)庀氯芙庥赥HF(20mL)中。然后緩慢加入三乙胺(3.1mL，22.4mmol)。該反應(yīng)輕微放熱(28℃)。將該混懸液在20℃下攪拌5小時。用AcOEt、飽和NH4Cl溶液萃取產(chǎn)物，干燥并濃縮。將殘余物用硅膠色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/乙酸乙酯95∶5洗脫。得到2.86g(83％)無色油狀物。MSm/z＝339(M+H)。
4-二乙氧基甲基-2-己硫基-嘧啶將(4，4-二乙氧基-丁-2-炔醛和2-己基-異硫脲氫溴酸鹽(300mg，1.9mmol)(509g，2.1mmol)在氮?dú)庀氯芙庥赥HF(3mL)中。然后加入三乙胺(0.6mL，4.2mmol)。然后，將該混懸液在20℃下攪拌過夜。用AcOEt、飽和NH4Cl溶液萃取產(chǎn)物，干燥并濃縮。將殘余物用硅膠色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/乙酸乙酯95∶5洗脫。得到260mg(45％)無色油狀物。MSm/z＝299(M+H)。
步驟B32-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-甲醛將4-二乙氧基甲基-2-己硫基-6-甲基-嘧啶(19g，60.8mmol)溶解于THF(100mL)和4N H2SO4水溶液(100mL)中并在50℃下攪拌33小時。傾倒到冷10％Na2CO3溶液(400mL)中，用乙酸乙酯和飽和NaCl溶液進(jìn)行萃取。將油狀物粗品用硅膠色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/DCM 100∶0至67∶33梯度洗脫。得到10.7g(74％)黃色油狀物。
2-己硫基-6-三氟甲基-嘧啶-4-甲醛將4-二乙氧基甲基-2-己硫基-6-三氟甲基-嘧啶(1.6g，4.4mmol)在三氟乙酸(15mL)和水(1.5mL)中于20℃下攪拌10小時。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，用乙酸乙酯、飽和Na2CO3溶液和飽和NaCl溶液萃取殘余物。得到1.18g(92％)黃色油狀物。MSm/z＝311(M+H+H2O，水合物)。
6-環(huán)丙基-2-己硫基-嘧啶-4-甲醛將4-環(huán)丙基-6-二乙氧基甲基-2-己硫基-嘧啶(2.7g，8mmol)溶解于THF(13mL)和4N HCl(13mL)中并在20℃下攪拌19小時。將反應(yīng)混合物傾倒到冷10％Na2CO3(100mL)中，用AcOEt萃取兩次并用飽和NaCl溶液萃取一次。將粗產(chǎn)物用硅膠色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/DCM 100∶0至67∶33梯度洗脫。得到2g(94％)黃色油狀物，在冰箱中放置厚其固化。MSm/z＝264(M)。
2-己硫基-嘧啶-4-甲醛將4-二乙氧基甲基-2-己硫基-嘧啶(250mg，0.8mmol)在THF(5mL)和4N HCl(5mL)中于20℃下攪拌64小時。將反應(yīng)混合物傾倒到冷的10％Na2CO3中，用AcOEt萃取兩次并用飽和NaCl溶液萃取一次。將粗產(chǎn)物在硅膠上用色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/AcOEt 10∶1洗脫。得到138mg(73％)黃色油狀物。MSm/z＝224(M)。
步驟B4實施例162-己硫基-4-甲基-6-吡咯烷-1-基甲基-嘧啶將2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-甲醛(0.1g，0.42mmol)溶解于乙醇(1mL)和乙酸(0.1mL)中。然后在20℃下緩慢加入吡咯烷(0.07mL，1mmol)和氰基硼氫化鈉(26mg，0.4mmol)并繼續(xù)攪拌24小時。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，溶解于最少量的DMF(0.8mL)中并直接在YMC combiprep ODS-AQ柱(75×20mm iD，S-5μM，12nm)上用制備型HPLC色譜法進(jìn)行純化，用乙腈-水梯度洗脫。得到34.7mg(28％)黃色液體。MSm/z＝294(M+H)。
實施例171-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-吡咯烷-3-醇以類似的方式，用3-吡咯烷醇制備。MSm/z＝310(M+H)。
實施例18[1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-吡咯烷-3-基]-二甲基-胺以類似的方式，用3-(二甲基氨基)吡咯烷制備。MSm/z＝337(M+H)。
實施例192-己硫基-4-甲基-6-哌啶-1-基甲基-嘧啶以類似的方式，用哌啶制備。MSm/z＝308(M+H)。
實施例208-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸烷以類似的方式，用1，4-二氧雜-8-氮雜螺(4.5)癸烷制備。MSm/z＝366(M+H)。
實施例211-2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-哌啶-3-甲酰胺以類似的方式，用哌啶-3-甲酰胺(nipecotamide)制備。MSm/z＝351(M+H)。
實施例224-(3，5-二甲基-哌啶-1-基甲基)-2-己硫基-6-甲基-嘧啶以類似的方式，用3，5-二甲基-哌啶制備。MSm/z＝336(M+H)。
實施例231-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-哌啶-4-醇以類似的方式，用4-羥基哌啶制備。MSm/z＝324(M+H)。
實施例242-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-十氫-異喹啉以類似的方式，用十氫異喹啉制備。MSm/z＝362(M+H)。
實施例251-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-4-甲基-[1，4]二氮雜環(huán)庚烷以類似的方式，用N-甲基高哌嗪(homopiperazine)制備。MSm/z＝337(M+H)。
實施例262-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-1，2，3，4-四氫-異喹啉以類似的方式，用1，2，3，4-四氫異喹啉制備。MSm/z＝356(M+H)。
實施例271-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-氮雜環(huán)庚烷以類似的方式，用六亞甲基亞胺制備。MSm/z＝322(M+H)。
實施例28(2S，6R)-4-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-2，6-二甲基-嗎啉以類似的方式，用順式-2，6--二甲基嗎啉制備。MSm/z＝338(M+H)。
實施例291-2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-哌啶-3-醇以類似的方式，用3-羥基哌啶制備。MSm/z＝324(M+H)。
實施例304-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-2-己硫基-6-甲基-嘧啶以類似的方式，用N-乙基哌嗪制備。MSm/z＝337(M+H)。
實施例312-己硫基-4-甲基-6-(2-甲基-哌啶-1-基甲基)-嘧啶以類似的方式，用2-甲基哌啶制備。MSm/z＝322(M+H)。
實施例321-[4-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-[1，4]二氮雜環(huán)庚烷-1-基]-乙酮以類似的方式，用N-乙?；哌哙褐苽?。MSm/z＝365(M+H)。
實施例334-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-[1，4]氧氮雜環(huán)庚烷以類似的方式，用高嗎啉(homomorpholine)鹽酸鹽制備。MSm/z＝323(M+H)。
實施例344-(3，5-二甲基-哌嗪-1-基甲基)-2-己硫基-6-甲基-嘧啶以類似的方式，用2，6-二甲基哌嗪制備。MSm/z＝337(M+H)。
實施例35(1S，5S)-3-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-1，2，3，4，5，6-六氫-1，5-亞甲基-吡啶并[1，2-a][1，5]二氮雜環(huán)辛間四烯-8-酮以類似的方式，用(-)-野靛堿制備。MSm/z＝413(M+H)。
實施例361-芐基-4-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-[1，4]二氮雜環(huán)庚烷以類似的方式，用1-芐基-六氫-1，4-二氮雜(diazepine)制備。MSm/z＝413(M+H)。
實施例374-(2，6-二甲基-哌啶-1-基甲基)-2-己硫基-6-甲基-嘧啶將2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-甲醛(0.2g，1mmol)和2，6-二甲基哌啶(0.23mL，2mmol)溶解于原鈦酸四異丙酯(0.5mL)中并在20℃下攪拌1小時。將該溶液用2-丙醇(5mL)稀釋并用氰基硼氫化鈉(105mg，2mmol)在20℃下處理20小時。加入水(1mL)，將所得的沉淀濾出并蒸發(fā)。用AcOEt、飽和NH4Cl溶液萃取產(chǎn)物，干燥并濃縮。將殘余物在YMC combiprepODS-AQ柱(75×20mm iD，S-5μM，12nm)上用制備型HPLC色譜法進(jìn)行純化，用乙腈-水梯度洗脫。得到37mg(36％)無色固體。MSm/z＝336(M+H)。
實施例384-(順式-2，6-二甲基-哌啶-1-基甲基)-2-己硫基-6-甲基-嘧啶以類似的方式，用順式-2，6-二甲基哌啶來制備。MSm/z＝336(M+H)。
實施例394-(2-己硫基-6-三氟甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉將2-己硫基-6-三氟甲基-嘧啶-4-甲醛(0.5g，1.7mmol)和嗎啉(0.16mL，1.9mmol)溶解于乙醇(5mL)和乙酸(0.5mL)中并用硼烷-吡啶復(fù)合物(0.19mL，1.9mmol)在20℃下處理4小時。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干。萃取2×AcOEt，1×10％Na2CO3水溶液。得到預(yù)期產(chǎn)物和極性更高的被還原的醛的混合物。將該混合物在得自Silicycle的Si-胺上用色譜法進(jìn)行分離，用10∶1到高至1∶1的庚烷/乙酸乙酯梯度洗脫。得到220mg(35％)無色油狀物。MSm/z＝364(M+H)。
實施例404-(6-環(huán)丙基-2-己硫基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉以類似的方式，用6-環(huán)丙基-2-己硫基-嘧啶-4-甲醛制備。得到342mg(54％)無色油狀物。MSm/z＝336(M+H)。
實施例414-(2-己硫基-6-乙基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉以類似的方式，用6-乙基-2-己硫基-嘧啶-4-甲醛制備。得到無色油狀物。MSm/z＝324(M+H)。
實施例424-(2-己硫基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉以類似的方式，用2-己硫基-嘧啶-4-甲醛制備。得到62mg(36％)無色油狀物。MSm/z＝296(M+H)。
步驟C15-羥基-己-3-炔-2-酮將3-己炔-2，5-二醇(5mL，45mmol)在丙酮(50mL)中的溶液在冰中于氮?dú)庀逻M(jìn)行冷卻。在5℃下歷經(jīng)2小時緩慢加入瓊斯試劑(22mL，45mmol，2M在4M H2SO4中的CrO3)。將所得的綠色溶液從鉻鹽上傾出，用AcOEt和飽和NaCl溶液進(jìn)行萃取。將粗產(chǎn)物在硅膠上用色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/AcOEt梯度洗脫。得到2.2g(45％)無色油狀物。
步驟C21-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙醇將5-羥基-己-3-炔-2-酮(2g，18mmol)和2-己基-異硫脲氫溴酸鹽(5.2g，21mmol)溶解于THF(10mL)中。然后加入三乙胺(5.5mL，40mmol)并繼續(xù)攪拌3小時。該反應(yīng)輕微放熱。將該混合物用AcOEt和飽和NH4Cl溶液萃取。將粗產(chǎn)物在硅膠上用色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/AcOEt梯度洗脫。得到2.8g(61％)淡黃色油狀物。MSm/z＝254(M)步驟C31-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酮將1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙醇(2.2g，8.65mmol)在氮?dú)庀氯芙庥诒?20mL)中。然后滴加2M由20g在100mL 4M H2SO4中的CrO3制得的瓊斯試劑(6.5mL，13mmol)。在20℃下攪拌2小時后，將所得的綠色溶液從鉻鹽上傾出，用AcOEt和飽和NaCl溶液萃取。將粗產(chǎn)物在硅膠上用色譜法進(jìn)行純化，用庚烷/AcOEt梯度洗脫。得到960mg(44％)白色晶體。MSm/z＝252(M)。
步驟C4實施例434-[1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-嗎啉將1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酮(200mg，0.79mmol)和嗎啉(138μL，1.58mol)溶解于原鈦酸四異丙酯(0.5mL)中并在80℃下加熱16小時。將棕色溶液用2-丙醇(5mL)稀釋并用氰基硼氫化鈉(32mg，0.5mmol)在20℃下處理6小時。萃取2×AcOEt，2×飽和NH4Cl溶液。色譜法Si-胺，庚烷/乙酸乙酯85∶15。得到86mg(34％)黃色油狀物。MSm/z＝324(M+H)。
權(quán)利要求
1.通式I的化合物和其可藥用的酸加成鹽， 其中X是-S-或-NH-；R1是烷基、鏈烯基、芳基烷基、芳基鏈烯基或芳基-O-烷基，其中芳基任選地被一個或多個選自低級烷基、低級烷氧基、鹵素或低級鹵代烷基的取代基取代；R2是氫、低級烷基或環(huán)烷基；R3/R4可以與它們所連接的N-原子一起形成一個非芳族5、6或7元環(huán)，該環(huán)除了所述的N-原子外還可以含有一個另外的選自O(shè)、S或N的雜原子，并且其中該環(huán)任選地被羥基、低級烷基、低級烷氧基、-NR2、-CONR2、-CO-低級烷基或芐基取代；或者可以與它們所連接的N-原子一起形成一個含有至少兩個環(huán)并且可以含有一個或兩個另外的選自N或O的雜原子的雜環(huán)環(huán)系；R是氫或低級烷基；R5是氫或低級烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中X是-S-。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R1是烷基，R3和R4與N-原子一起形成一個五或六元環(huán)，該環(huán)可以含有一個另外的O-雜原子，并且其是未取代的或者被低級烷基取代。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R3和R4與N-原子一起形成嗎啉環(huán)。
5.權(quán)利要求4的化合物，所述化合物是4-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉，4-(6-甲基-2-戊硫基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉，4-(2-己硫基-6-三氟甲基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉，4-(2-己硫基-6-乙基-嘧啶-4-基甲基)-嗎啉和4-[1-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-嗎啉。
6.權(quán)利要求3的化合物，其中R3和R4與N-原子一起形成吡咯烷或哌啶環(huán)，其任選地被低級烷基取代。
7.權(quán)利要求6的化合物，所述化合物是2-己硫基-4-甲基-6-吡咯烷-1-基甲基-嘧啶，2-己硫基-4-甲基-6-(2-甲基-哌啶-1-基甲基)-嘧啶，4-(2，6-二甲基-哌啶-1-基甲基)-2-己硫基-6-甲基-嘧啶和4-(順式-2，6-二甲基-哌啶-1-基甲基)-2-己硫基-6-甲基-嘧啶。
8.權(quán)利要求2的化合物，其中R1是任選地被低級烷基取代的芳基烷基，R3和R4與N-原子一起形成一個五或六元環(huán)，該環(huán)可以含有一個另外的O-雜原子。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中所述化合物是4-[2-(4-叔丁基-芐硫基)-6-甲基-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉。
10.權(quán)利要求2的化合物，其中R3和R4與N-原子一起形成一個含有至少兩個環(huán)并且可以含有一個或兩個選自N或O的雜原子的雜環(huán)環(huán)系。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中所述化合物是(1S，5S)-3-(2-己硫基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-1，2，3，4，5，6-六氫-1，5-亞甲基-吡啶并[1，2-a][1，5]二氮雜環(huán)辛間四烯-8-酮。
12.權(quán)利要求1的式I化合物，其中R5是氫。
13.權(quán)利要求1的式I化合物，其中R5是甲基。
14.權(quán)利要求1的式I化合物，其中X是-NH-。
15.用于治療與GABAB受體有關(guān)的疾病的藥物，其含有一種或多種權(quán)利要求1-14中任意一項所述的式I化合物或其可藥用的鹽以及惰性載體。
16.權(quán)利要求15的藥物，其用于治療焦慮、抑郁、癲癇、精神分裂癥、認(rèn)知障礙、痙攣狀態(tài)和骨骼肌強(qiáng)直、脊髓損傷、多發(fā)性硬化、肌萎縮性側(cè)索硬化、腦性癱瘓、神經(jīng)性疼痛和與可卡因和尼古丁有關(guān)的成癮、精神病、驚恐癥、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙或胃腸障礙。
17.制備權(quán)利要求1所定義的式I化合物的方法，該方法包括a)使式V的化合物 與式VI-a的化合物反應(yīng)， 得到式Ia的化合物， 其中R1至R4如權(quán)利要求1中所述，或b)使下式的化合物 與下式的胺反應(yīng)，R1NH2得到式Ib的化合物， 其中R1至R4如權(quán)利要求1中所述，或c)使式XI的化合物 與式II的胺反應(yīng)，HNR3R4II得到式Ia的化合物， 其中R1至R4如權(quán)利要求1中所述，或d)使下式的化合物 與式II的胺反應(yīng)，HNR3R4II得到式Ic的化合物， 其中R1至R4如權(quán)利要求1中所述，和如果需要，將獲得的式I化合物轉(zhuǎn)化成可藥用的鹽。
18.用權(quán)利要求17所述的方法或者等同的方法制備的權(quán)利要求1的式I化合物。
19.權(quán)利要求1-14中任意一項的式I化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療焦慮、抑郁、癲癇、精神分裂癥、認(rèn)知障礙、痙攣狀態(tài)和骨骼肌強(qiáng)直、脊髓損傷、多發(fā)性硬化、肌萎縮性側(cè)索硬化、腦性癱瘓、神經(jīng)性疼痛和與可卡因和尼古丁有關(guān)的成癮、精神病、驚恐癥、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙或胃腸障礙。
20.上文所述的本發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的化合物和其可藥用的酸加成鹽，其中X是－S－或－NH－；R
文檔編號C07D239/38GK1925859SQ200580006619
公開日2007年3月7日 申請日期2005年2月22日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月2日
發(fā)明者P·馬勒布, R·馬夏德里, E·普林森, W·斯布倫, A·W·托馬斯 申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司