專利名稱：用作抗病毒劑的嗎啉基苯胺基喹唑啉衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一系列用于治療或預(yù)防黃病毒科(flaviviridae)感染的喹唑啉衍生物。
黃病毒科的病毒為含有有義RNA基因組的小二十面體包膜病毒。該科由三個(gè)屬組成，分別為黃病毒屬(flavivirus)、瘟病毒屬(pestivirus)和丙型肝炎病毒屬(hepacivirus)。
許多黃熱病科病毒是人類重要的病原體。事實(shí)上，丙型肝炎病毒屬包括C型肝炎病毒。然而，至今對(duì)黃病毒科感染仍不存在即有效又安全的治療。
WO 98/02434公開(kāi)了喹唑啉作代表蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的抑制劑。在該文獻(xiàn)中沒(méi)有具體公開(kāi)在6-位上具有嗎啉代-苯胺基團(tuán)的化合物。
現(xiàn)令人驚訝地發(fā)現(xiàn)式(Ia)的喹唑啉衍生物具有抑制黃病毒科病毒復(fù)制的活性，因此可有效治療或預(yù)防黃病毒感染。本發(fā)明因此提供了式(Ia)的喹唑啉衍生物或其藥物上可接受的鹽， 其中R1代表氫、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-CO2R/、-CONR/R//、-A、-A-L-A/、-Z-L-A或-A-L-Z-L-A，其中R/和R//相同或不同，各自代表氫或C1-C4烷基；R2代表氫、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4鹵代烷氧基；
R3代表氫、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4鹵代烷氧基；以及R4代表氫、C1-C6烷基或C1-C6鹵代烷基，其中-A代表C6-C10芳基、5-至10-元雜芳基或5-至10-元雜環(huán)基基團(tuán)；-每一L相同或不同，且為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)；-A/為5-至10-元雜芳基或5-至10-元雜環(huán)基團(tuán)；以及-Z為-S-、-O-、-NR/-、-CO2-、-C(O)NR/-、-OC(O)-、-NR/C(O)-、-OCO2-、-NR/CO2-、-OC(O)NR/-或-NR/C(O)NR//-，其中R/和R//相同或不同，且代表氫或C1-C4烷基，R1中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、羥基、硫羥、-NH2、C1-C4羥烷基、C1-C4硫烷基、C1-C4氨基烷基、氰基、硝基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/、-CONR/R//和-L/-X-L//-Y的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且選自氫和C1-C4烷基，L/為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)，X為-S-、-O-或-NR/-，其中R/定義如上，L//為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)，以及Y為氫、-COR/、-CO2R/、-S(O)2R/或-S(O)R/，其中R/為氫或C1-C4烷基。
為避免疑義，Z部分的取向是這樣的，即所描述基團(tuán)的左手側(cè)連接喹唑啉基團(tuán)或-A-L-部分。因此，例如當(dāng)Z為-C(O)NR/-且R1為-Z-L-A時(shí)，R1為-C(O)NR/-L-A。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式(Ia)的喹唑啉衍生物是式(I)的喹唑啉衍生物，
其中R1代表氫、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-A或-A-L-A/，以及R2代表氫、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4鹵代烷氧基，其中-A代表C6至C10芳基、5-至10-元雜芳基或5-至10-元雜環(huán)基基團(tuán)；-L為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)；以及-A/為5-至10-元雜芳基或雜環(huán)基基團(tuán)；R1中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、羥基、硫羥基、-NH2、C1-C4羥烷基、C1-C4硫烷基、C1-C4氨基烷基、氰基、硝基、-COR/、-CO2R/、-CONR/R//、-SOR/、-S(O)2R/和-L/-X-L//-Y的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且選自氫和C1-C4烷基，L/為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)，X為-S-、-O-或-NR/-，其中R/定義如上，L//為C1-C4亞烷基基團(tuán)，以及Y為氫、-COR/、-CO2R/、-S(O)2R/或-S(O)R/，其中R/為氫或C1-C4烷基。
一般地，式(I)的R1中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分為未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、羥基、硫醇、-NH2、C1-C4羥烷基、C1-C4硫烷基、C1-C4氨基烷基、氰基、硝基、-COR/、-CO2R/、-CONR/R//和-L/-X-L//-Y的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且選自氫和C1-C4烷基，L/為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)，X為-S-、-O-或-NR/-，其中R/定義如上，L//為C1-C4亞烷基基團(tuán)，以及Y為氫、-COR/、-CO2R/、-S(O)2R/或-S(O)R/，其中R/為氫或C1-C4烷基。
這里使用的C1-C6烷基基團(tuán)或部分為含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基基團(tuán)或部分。一般地，C1-C6烷基基團(tuán)或部分為C1-C4烷基基團(tuán)或部分。C1-C4烷基基團(tuán)或部分為含有1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基基團(tuán)或部分。C1-C6烷基基團(tuán)或部分的例子包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基和3-甲基丁基。C1-C4烷基基團(tuán)和部分的例子包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和叔丁基。為避免疑義，當(dāng)兩個(gè)烷基部分出現(xiàn)在基團(tuán)中時(shí)，烷基部分可以相同或不同。
這里使用的C1-C4亞烷基基團(tuán)或部分為直鏈或支鏈的亞烷基基團(tuán)或部分。例子包括亞甲基、亞乙基和亞正丙基基團(tuán)或部分。
這里使用的C6-C10芳基一般為苯基或萘基，優(yōu)選苯基。
這里使用的鹵素一般為氯、氟、溴或碘，優(yōu)選氯、溴或氟。
這里使用的C1-C4烷氧基一般為連接到氧原子的所述C1-C4烷基。鹵代烷基或鹵代烷氧基一般為被一個(gè)或多個(gè)所述鹵原子取代的所述烷基或烷氧基。一般被1、2或3個(gè)所述鹵原子取代。優(yōu)選的鹵代烷基和鹵代烷氧基包括全鹵代烷基和全鹵代烷氧基，如-CX3和-OCX3，其中X為所述鹵原子，例如氯和氟。特別優(yōu)選的鹵代烷基為-CF3和-CCl3。特別優(yōu)選的鹵代烷氧基為-OCF3和-OCCl3。
這里使用的C1-C4羥烷基為被一個(gè)或多個(gè)羥基取代的C1-C4烷基。一般被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)羥基取代。優(yōu)選被單個(gè)羥基取代。優(yōu)選的羥烷基為-CH2-OH。
這里使用的C1-C4硫烷基為被一個(gè)或多個(gè)巰基(-SH)取代的C1-C4烷基。一般被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)巰基取代。優(yōu)選被單個(gè)巰基取代。
這里使用的C1-C4氨基烷基為被一個(gè)或多個(gè)-NH2基團(tuán)取代的C1-C4烷基。一般被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)-NH2取代。優(yōu)選被單個(gè)-NH2取代。
這里使用的5-至10-元雜芳基基團(tuán)或部分為單環(huán)5-至10-元芳香環(huán)，如5-或6-元環(huán)，含有至少一個(gè)雜原子，例如1、2或3個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子。例子包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、呋喃基、噻吩基、吡唑烷基、吡咯基、噁二唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、咪唑基、pyridazolyl和吡唑基基團(tuán)。優(yōu)選的實(shí)例包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、呋喃基、噻吩基、吡唑烷基、吡咯基、噁二唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、咪唑基和吡唑基基團(tuán)。優(yōu)選呋喃基、噻吩基、pyridazolyl、吡唑基、嘧啶基和噻唑基基團(tuán)。更優(yōu)選呋喃基、噻吩基、嘧啶基和噻唑基基團(tuán)。進(jìn)一步優(yōu)選噻吩基和噻唑基基團(tuán)。
這里使用的5-至10-元雜環(huán)基基團(tuán)或部分為單環(huán)的非芳香性、飽和或不飽和的C5-C10碳環(huán)，其中一個(gè)或多個(gè)，例如1、2或3個(gè)碳原子被選自N、O、S、S(O)和S(O)2的雜原子所取代。一般為5-至6-元環(huán)。
適合的雜環(huán)基基團(tuán)和部分包括吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、硫代嗎啉基、S-氧-硫代嗎啉基、S，S-二氧-硫代嗎啉基、嗎啉基、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、1，3-二氧戊環(huán)基、dioxolyl以及吡唑啉基基團(tuán)和部分。優(yōu)選哌嗪基、硫代嗎啉基、S，S-二氧硫代嗎啉基、嗎啉基以及1，3-二氧戊環(huán)基基團(tuán)和部分。
一般地，R1中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分為未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4羥烷基、氰基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/和-L/-X-L//-Y的取代基所取代，這里R/、L/、X、L//和Y定義如上。
一般地，L/為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)。一般地，X為-O-或-NR/-，其中R/定義如上。一般地，L//為直接鍵或C1-C2亞烷基基團(tuán)，優(yōu)選C1-C2亞烷基基團(tuán)。一般地，Y為氫、-COR/、-CO2R/、-S(O)2R/或-S(O)R/，其中R/為C1-C4烷基。優(yōu)選地，Y為氫、-COR/、-C(O)2R/或-S(O)R/，其中R/為C1-C4烷基。
R1取代基中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分優(yōu)選為未被取代或被1或2個(gè)選自鹵素、C1-C2烷基、C1-C2鹵代烷基、C1-C2羥烷基、氰基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/、-(C1-C2烷基)-NR/R//、C1-C2烷氧基、-NR/-COR/、NR/-CO2R/、-(C1-C2烷基)-NR/-CO2R/、-NR/-S(O)2-R/和-(C1-C2烷基)-NR/-(C1-C2烷基)-S(O)2-R//的取代基所取代，其中每一R/、R//和R/相同或不同，且代表氫或C1-C2烷基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式(Ia)的喹唑啉衍生物是式(I)的喹唑啉衍生物，一般地，R1取代基中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分為未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4羥烷基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/和-L/-X-L//-Y的取代基所取代，其中R/、L/、X、L//和Y定義如上。R1取代基中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分優(yōu)選為未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4羥烷基、-COR/和-L/-X-L//-Y取代基所取代，其中R/、L/、X、L//和Y定義如前。更優(yōu)選地，R1取代基中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分為未被取代或被1或2個(gè)選自鹵素、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷基、C1-C2羥烷基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/、-(C1-C2烷基)-NR/R//和-(C1-C2烷基)-NR/-(C1-C2烷基)-S(O)2-R//的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且代表氫或C1-C2烷基。還更優(yōu)選R1取代基中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分為未被取代或被1或2個(gè)選自鹵素、C1-C2烷基、C1-C2鹵代烷基、C1-C2羥烷基、-COR/、-(C1-C2烷基)-NR/R//和-(C1-C2烷基)-NR/-(C1-C2烷基)-S(O)2-R//的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且代表氫或C1-C2烷基。
一般地，A為苯基、5-至6-元雜芳基或5-至6-元雜環(huán)基。A優(yōu)選為苯基或5-至6-元雜芳基。A更優(yōu)選為苯基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、噻唑基或pyridazolyl基團(tuán)。A還更優(yōu)選為苯基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基或噻唑基基團(tuán)。A最優(yōu)選苯基、呋喃基、噻吩基或噻唑基基團(tuán)。
一般地，L為直接鍵或C1-C2亞烷基基團(tuán)。
一般，A/為5-至6-元雜芳基或5-至6-元雜環(huán)基。當(dāng)A/為5-至6-元雜芳基時(shí)，優(yōu)選吡唑基。
A/更優(yōu)選為5-至6-元雜環(huán)基或雜芳基，其未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基和C1-C4鹵代烷氧基的取代基所取代。A/最優(yōu)選為嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、1，3-二氧戊環(huán)基、S，S-二氧硫代嗎啉基或吡唑基基團(tuán)，其未被取代或被1或2個(gè)選自C1-C2烷基、鹵素和C1-C2鹵代烷基的取代基所取代。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式(Ia)的喹唑啉衍生物是式(I)的喹唑啉衍生物，且A/優(yōu)選為5-至6-元雜環(huán)基。A/更優(yōu)選為未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基和C1-C4鹵代烷氧基的取代基所取代的5-至6-元雜環(huán)基。A/最優(yōu)選為嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、1，3-二氧戊環(huán)基或S，S-二氧硫代嗎啉基，其未被取代或被1或2個(gè)選自C1-C2烷基、鹵素和C1-C2鹵代烷基的取代基所取代。
一般地，Z為-O-、-CONR/-、-NR/C(O)-或-NR/CO2-，其中R/定義如前。Z優(yōu)選為-O-、-CONH-、-CON(C1-C2烷基)-、-NHC(O)-或-NHCO2-。
一般地，R1為鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-CO2R/、-CONR/R//、-A、-A-L-A/、-Z-L-A或-A-L-Z-L-A，其中R/、R//、A、L、A/和Z定義如前。R1優(yōu)選為鹵素、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷氧基、-CONR/R//、-A、-Ar-L-A/、-Z-L-A或-Ar-Z-L-Ar，其中R/和R//相同或不同，且代表氫或C1-C2烷基，A和A/定義如前，Ar為未取代的呋喃基或未取代的苯基，L為直接鍵或亞甲基，以及Z為-O-、-C(O)NR/-、-NR/C(O)-或-NR/CO2-，其中R/定義如前。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式(Ia)的喹唑啉衍生物是式(I)的喹唑啉衍生物，并且一般地，R1為鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-A或-A-L-A/，其中A、L和A/定義如前。R1優(yōu)選為鹵素、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷氧基、-A或-Ar-L-A/，其中A和A/定義如前，Ar為未取代的呋喃基，L為直接鍵或亞烷基。
一般地，R2為氫、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基。R2優(yōu)選為氫或C1-C2烷氧基。
一般地，R3為氫、C1-C2烷基、C1-C2鹵代烷基或C1-C2烷氧基。R3優(yōu)選為氫、甲基、三氟甲基或甲氧基。
一般地，R4為氫或C1-C6烷基。
在本發(fā)明優(yōu)選的化合物中-R1為鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-CO2R/、-CONR/R//、-A、-A-L-A/、-Z-L-A或-A-L-Z-L-A；-R2為氫、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基；-R3為氫、C1-C2烷基、C1-C2鹵代烷基或C1-C2烷氧基；-R4為氫或C1-C6烷基；-A為苯基、5-至6-元雜芳基或5-至6-元雜環(huán)基；-L為直接鍵或C1-C2亞烷基基團(tuán)；-A/為5-至6-元雜芳基或雜環(huán)基；以及-Z為-O-、-CONR/-、-NR/C(O)-或-NR/CO2-，其中R/為氫或C1-C4烷基，R1取代基中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4羥烷基、氰基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/和-L/-X-L//-Y的取代基所取代，其中R/、L/、X、L//和Y定義如前。
在本發(fā)明更優(yōu)選的化合物中，式(Ia)的喹唑啉衍生物是式(I)的喹唑啉衍生物，其中-R1為鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-A或-A-L-A/；-R2為氫、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基；-A為苯基、5-至6-元雜芳基或5-至6-元雜環(huán)基；-L為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)；以及-A/為5-至6-元雜芳基或雜環(huán)基，R1取代基中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4羥烷基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/和-L/-X-L//-Y的取代基所取代，其中R/、L/、X、L//和Y定義如前。
在本發(fā)明更優(yōu)選的化合物中，式(Ia)的喹唑啉衍生物是式(I)的喹唑啉衍生物，其中-R1為鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-A或-A-L-A/；-R2為氫、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基；-A為苯基、5-至6-元雜芳基或5-至6-元雜環(huán)基；-L為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)；以及-A/為5-至6-元雜芳基或雜環(huán)基，R1取代基中芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4羥烷基、-COR/和-L/-X-L//-Y的取代基所取代，其中R/、L/、X、L//和Y定義如前。
在本發(fā)明更優(yōu)選的化合物中-R1為鹵素、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷氧基、-CONR/R//、-A、-Ar-L-A/、-Z-L-A或-Ar-Z-L-Ar，其中R/和R//為相同或不同，各自代表氫或C1-C2烷基；-R2為氫或C1-C2烷氧基；
-A為苯基或5-至6-元雜芳基，例如呋喃基、噻吩基、嘧啶基和噻唑基，其未被取代或被1或2個(gè)選自鹵素、C1-C2烷基、C1-C2鹵代烷基、C1-C2羥烷基、氰基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/、-(C1-C2烷基)-NR/R//、C1-C2烷氧基、-NR/-COR/、NR/-CO2R/、-(C1-C2烷基)-NR/-CO2R/、-NR/-S(O)2-R/和-(C1-C2烷基)-NR/-(C1-C2烷基)-S(O)2-R//的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且代表氫或C1-C2烷基；-Ar為未取代的呋喃基或未取代的苯基；-L為直接鍵或亞甲基；-A/為5-至6-元雜環(huán)基或雜芳基，例如嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、1，3-二氧戊環(huán)基、S，S-二氧硫代嗎啉基和吡唑基，其未被取代或被1或2個(gè)選自C1-C2烷基、鹵素和C1-C2鹵代烷基的取代基所取代；以及-Z為-O-、-CONH-、-CON(C1-C2烷基)-或-NHC(O)-。
在本發(fā)明更優(yōu)選的化合物中，式(Ia)的喹唑啉衍生物是式(I)的喹唑啉衍生物，其中-R1為鹵素、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷氧基、-A或-Ar-L-A/；-R2為氫或C1-C2烷氧基；-A為苯基或5-至6-元雜芳基，例如呋喃基、噻吩基、嘧啶基和噻唑基，其未被取代或被1或2個(gè)選自鹵素、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷基、C1-C2羥烷基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/、-(C1-C2烷基)-NR/R//和-(C1-C2烷基)-NR/-(C1-C2烷基)-S(O)2-R//的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且代表氫或C1-C2烷基；-Ar為未取代呋喃基；-L為直接鍵或亞甲基；以及-A/為5-至6-元雜環(huán)基，例如嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、1，3-二氧戊環(huán)基和S，S-二氧硫代嗎啉基，其未被取代或被1或2個(gè)選自C1-C2烷基、鹵素和C1-C2鹵代烷基的取代基所取代。
在本發(fā)明更優(yōu)選的化合物中，式(Ia)的喹唑啉衍生物是式(I)的喹唑啉衍生物，其中
-R1為鹵素、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷氧基、-A或-Ar-L-A/；-R2為氫或C1-C2烷氧基；-A為苯基或5-至6-元雜芳基，例如呋喃基、噻吩基和噻唑基，其未被取代或被1或2個(gè)選自鹵素、C1-C2烷基、C1-C2鹵代烷基、C1-C2羥烷基、-COR/、-(C1-C2烷基)-NR/R//以及-(C1-C2烷基)-NR/-(C1-C2烷基)-S(O)2-R//的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且代表氫或C1-C2烷基；-Ar為未取代的呋喃基；-L為直接鍵或亞甲基；以及-A/為5-至6-元雜環(huán)基，例如嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、1，3-二氧戊環(huán)基和S，S-二氧硫代嗎啉基，其未被取代或被1或2個(gè)選自C1-C2烷基、鹵素和C1-C2鹵代烷基的取代基所取代。
式(Ia)的特別優(yōu)選的化合物包括(6-溴-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；(6-碘-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；(6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；(6-三氟甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；(6-呋喃-2-基-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；[6-(5-[1，3]二氧戊環(huán)-2-基-呋喃-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；5-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-呋喃-2-甲醛；{5-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-呋喃-2-基}-甲醇；(6-{5-[(2-甲磺?；?乙基氨基)-甲基]-呋喃-2-基}-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；{6-[5-(1，1-二氧-1-λ-6-硫代嗎啉-4-基甲基)-呋喃-2-基]-喹唑啉-4-基}-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；{6-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-基]-喹唑啉-4-基}-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；[6-(5-嗎啉-4-基甲基-呋喃-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；[6-(5-甲基氨基甲基-呋喃-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺；(6-氯-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-鄰甲苯基-喹唑啉-4-基)-胺；(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻唑基-2-基-喹唑啉-4-基)-胺；(4-嗎啉-4-基-苯基)-[6-(3-吡唑-1-基-苯基)-喹唑啉-4-基]-胺；4-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-芐腈；[6-(2-甲氧基-嘧啶-5-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；[6-(4-甲基-噻吩-2-基)喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；5-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-噻吩-2-羧酸；[6-(4-甲磺?；?苯基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；呋喃-2-羧酸[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-酰胺；4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸4-甲氧基-芐酰胺；3-{[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羰基]氨基}-苯甲酸乙酯；4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸3-甲氧基-芐酰胺；4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸4-甲基-芐酰胺；4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸甲基酰胺；4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸二甲基酰胺；4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸乙基酰胺；N-{3-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-苯基}-乙酰胺；{4-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-苯基}-氨基甲酸苯甲酯；N-{4-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-苯基}乙酰胺；{4-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-苯基}-氨基甲酸叔丁酯；{3-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]芐基}-氨基甲酸叔丁酯；
N-{3-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基-喹唑啉-6-基]-苯基}-甲磺酰胺；(6-碘-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-2-三氟甲基-苯基)-胺；(4-嗎啉-4-基-2-三氟甲基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺；(6-碘-喹唑啉-4-基)-(3-甲氧基-4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；(3-甲氧基-4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺；(2-甲基-4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺；(3-甲基-4-嗎啉-4-基-苯基-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺；乙基-(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺；(6-碘-喹唑啉-4-基)-甲基-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；(6-碘-喹唑啉-4-基)-(3-甲基-丁基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；異丙基-(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺；(3-甲基-丁基-(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺；[6-(2-芐氧基-苯基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；[6-(4-芐氧基-苯基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；及其藥物上可接受的鹽。
含有一個(gè)或多個(gè)手性中心的式(Ia)的化合物，可以以對(duì)映體或非對(duì)映異構(gòu)體上的純形式使用，或者以異構(gòu)體混合物的形式使用。為避免疑義，如果需要的話，式(Ia)的化合物可以溶劑化物的形式使用。進(jìn)一步，為避免疑義，本發(fā)明的化合物可以任何互變異構(gòu)體的形式使用。
這里使用的，藥物上可接受的鹽為藥物上可接受的酸或堿的鹽。藥物上可接受的酸既包括無(wú)機(jī)酸，如鹽酸、硫酸、磷酸、二磷酸、氫溴酸或硝酸，也包括有機(jī)酸，如檸檬酸、富馬酸、馬來(lái)酸、蘋果酸、抗壞血酸、琥珀酸、酒石酸、安息香酸、醋酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸或?qū)妆交撬?。藥物上可接受的堿包括堿金屬(例如鈉或鉀)和堿土金屬(例如鈣或鎂)氫氧化物和有機(jī)堿如烷基胺、芳烷基胺和雜環(huán)胺。
R1不為氫或鹵素的本發(fā)明化合物例如可根據(jù)下列反應(yīng)方案制備。
方案1a
在一個(gè)實(shí)施方案中，方案1a由方案1表示。
方案1 上述反應(yīng)中X為合適的離去基團(tuán)，例如鹵素，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的。
參考方案1a和1，以有機(jī)金屬試劑(V)分別處理式(IIa)和(II)的化合物可方便地在合適的溶劑(如四氫呋喃、二甲基甲酰胺或甲苯)中和在升溫下(例如從50℃至回流)進(jìn)行。方便地，在有機(jī)堿(例如三乙基胺)或無(wú)機(jī)堿(例如碳酸鈉或磷酸鉀)的存在下、在鈀催化作用(例如20mol％三(二亞芐基丙酮)二鈀(II)或20mol％二氯雙(三苯基膦)鈀(0))下進(jìn)行反應(yīng)。當(dāng)試劑(V)為有機(jī)錫烷(例如M＝SnBu3)時(shí)，本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)意識(shí)到該反應(yīng)為Stille耦合的實(shí)例，其中額外的添加劑可能是有益的，例如氯化鋰、氧化銀，該反應(yīng)在甲苯中和在回流溫度下方便地進(jìn)行。當(dāng)試劑(V)是硼酸衍生物時(shí)，本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)意識(shí)到該反應(yīng)為Suzuki-Miyaura耦合的實(shí)例，其可在60℃下在四氫呋喃中方便地進(jìn)行。
參考方案1a和1，通過(guò)使用諸如亞硫酰二氯的試劑作為溶劑、外加催化活化劑如二甲基甲酰胺，使式(III)化合物的4-羥基轉(zhuǎn)化為合適的離去基團(tuán)，例如氯，隨后在合適的溶劑例如乙腈中與4-嗎啉基苯胺反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)式(III)的化合物分別轉(zhuǎn)化為式(IIa)和(II)的化合物。
參考方案1a和1，式(IV)化合物轉(zhuǎn)化為式(III)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，可方便地在甲酰胺作為溶劑和在升溫如回流下進(jìn)行反應(yīng)。
顯然，可使用X為氫或鹵素的式(IV)的化合物，將式(IV)的化合物轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)于如上所述的式(III)的化合物，并分別與如上所述的式(VIa)或(VI)的化合物反應(yīng)，來(lái)制備R1為氫或鹵素的式(Ia)或(I)的化合物。R1為烷基、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷氧基的式(Ia)或(I)的化合物，當(dāng)然也可用類似的方法來(lái)制備。
以上反應(yīng)方案的起始原料是已知化合物或可從已知方法類推來(lái)制備。特別是，式(VIa)的化合物可以用已知的方法制備，如在方案2中描述的方法。
方案2 本發(fā)明的化合物為治療上有效的。因此，本發(fā)明提供了治療人或動(dòng)物體的如前所定義的式(Ia)的喹唑啉衍生物或其藥物上可接受的鹽。本發(fā)明還提供了包括如前所定義的式(Ia)的喹唑啉衍生物或其藥物上可接受的鹽以及藥物上可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物。
所述藥物組合物一般含有高達(dá)85wt％的本發(fā)明化合物。更一般地，其含有高達(dá)50wt％的本發(fā)明化合物。優(yōu)選的藥物組合物為無(wú)菌和無(wú)熱原的。進(jìn)一步地，本發(fā)明提供的藥物組合物通常含有實(shí)質(zhì)上為純旋光異構(gòu)體的本發(fā)明化合物。
如上所述，本發(fā)明化合物具有抗黃病毒科感染的活性。因此，本發(fā)明提供了如前所定義的式(Ia)的喹唑啉衍生物或其藥物上可接受鹽在制備治療或預(yù)防黃病毒科感染的藥物中的用途。本發(fā)明同時(shí)提供了治療受黃病毒科感染或易為黃病毒科感染的患者的方法，該方法包括以有效量的式(Ia)的喹唑啉衍生物或其藥物上可接受鹽對(duì)所述患者給藥。
黃病毒科包括三個(gè)屬。它們是丙型肝炎病毒屬、黃病毒屬和瘟病毒屬。本發(fā)明的化合物在治療或預(yù)防丙型肝炎病毒屬感染、黃病毒屬感染或瘟病毒感染上有活性。
能以本發(fā)明化合物治療的典型瘟病毒屬感染包括牛病毒性腹瀉病毒、豬瘟病毒(classical swine fever virus)和邊界病病毒(border diseasevirus)。
能以本發(fā)明化合物治療的典型黃病毒屬感染包括黃熱病毒、登革熱病毒、日本腦炎病毒和蜱傳播的腦炎病毒。
能以本發(fā)明化合物治療的丙型肝炎病毒屬感染包括C型肝炎病毒。
本發(fā)明的化合物對(duì)丙型肝炎特別有效。因此所述黃病毒屬一般為C型肝炎病毒。
本發(fā)明化合物可以以多種劑形給藥。因此，它們可以例如作為片劑、錠劑、糖錠、水性或油性懸浮劑、可分散性粉劑或顆粒劑通過(guò)口服給藥。本發(fā)明化合物也可以不經(jīng)腸道給藥，而通過(guò)皮下給藥、靜脈內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥、胸骨內(nèi)給藥、經(jīng)皮給藥，或者通過(guò)輸注技術(shù)給藥。本發(fā)明化合物也可以作為栓劑來(lái)給藥。
為了給藥，本發(fā)明化合物一般以藥物上可接受的載體或稀釋劑配制。例如，固體口服制劑除了活性物質(zhì)之外，還可以包含稀釋劑，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、纖維素、玉米淀粉或馬鈴薯淀粉；滑潤(rùn)劑，例如硅石、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂或鈣和/或聚乙二醇；粘合劑；例如淀粉、阿拉伯樹(shù)膠、明膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素或聚乙烯基吡咯烷酮；分解劑，例如淀粉、藻朊酸、藻朊酸鹽或淀粉羥基乙酸鈉；泡騰混合劑；著色劑；甜味劑；潤(rùn)濕劑，如卵磷脂、聚山梨酸酯、十二烷基硫酸鹽(laurylsulphate)；以及一般而言用于藥物制劑上的無(wú)毒和藥理學(xué)上的無(wú)活性物質(zhì)。這些藥物制劑可以用已知的方法制備，例如通過(guò)混合、造粒、制片、包糖衣或薄膜包衣工藝。
用于口服給藥的液體分散體可以是糖漿劑、乳劑和懸浮劑。糖漿劑可以例如含有蔗糖或含有甘油的蔗糖和/或甘露醇和/或山梨醇作為載體。
懸浮劑和乳劑可例如含有天然樹(shù)膠、瓊脂、藻朊酸鈉、果膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素或聚乙烯醇作為載體。用于肌肉內(nèi)注射的懸浮劑或溶液除了活性化合物之外，還可以含有藥物上可接受的載體，例如無(wú)菌水、橄欖油、油酸乙酯、二醇例如丙二醇，以及如果需要的話連同適量的鹽酸利多卡因。
用于注射或輸注的溶液可例如含有無(wú)菌水作為載體，或優(yōu)選它們可以是無(wú)菌的等滲鹽水溶液的形式。
本發(fā)明的化合物可以與已知的抗病毒劑聯(lián)合使用。在這方面，優(yōu)選的已知抗病毒藥劑為干擾素和三氮唑核苷及其衍生物，它們?cè)谥委煴透窝咨鲜且阎?Clinical Microbiology Reviews，Jan.2000，67-82)。因此所述藥物一般進(jìn)一步包括干擾素或其衍生物和/或三氮唑核苷或其衍生物。進(jìn)一步地，本發(fā)明提供藥物組合物，其包括(a)如前所定義的式(Ia)的喹唑啉衍生物或其藥物上可接受的鹽；(b)干擾素或其衍生物和/或三氮唑核苷或其衍生物；以及(c)藥物上可接受的載體或稀釋劑。
同時(shí)提供了產(chǎn)品，其包括(a)如前所定義的式(Ia)喹唑啉衍生物或其藥物上可接受的鹽；以及(b)干擾素或其衍生物和/或三氮唑核苷或其衍生物，用于在人或動(dòng)物體的治療中獨(dú)立、同時(shí)或順序地使用。
干擾素衍生物優(yōu)選為PEG-干擾素。三氮唑核苷衍生物優(yōu)選為維拉米定(viramidine)。
對(duì)病人以治療有效量的本發(fā)明化合物給藥。根據(jù)特定的化合物的活性，待治療個(gè)體的年齡、體重和狀況，疾病的類型和嚴(yán)重程度，以及給藥的頻率和途徑，一般的劑量為每千克體重約0.01至100毫克。日劑量水平優(yōu)選為每千克體重約0.05至16毫克，更優(yōu)選為每千克體重約0.05至1.25毫克。
下列實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明。然而它們不以任何方式限制本發(fā)明。在這一點(diǎn)上，重要的是理解用在實(shí)施例部分的特定測(cè)定法僅僅旨在提供抗病毒活性的指示。許多試驗(yàn)法可以用來(lái)確定這種活性，因此在任何一個(gè)的特定測(cè)定中的陰性結(jié)果并非決定性的。
實(shí)施例所有的溫度以℃表示。在Si 60G涂覆的塑料板上以u(píng)v254指示器(Polygram)進(jìn)行薄層層析(TLC)。除非另有說(shuō)明，所有NMR光譜在250MHz下、在d6-DMSO中獲得。
LC-MS條件使用電噴射并同時(shí)檢測(cè)陽(yáng)離子-陰離子，在MicroMass ZMD上測(cè)定樣品。
柱子Synergi Hydro-RP，30×4.6mm I.D，4μm。
梯度在4.0min 95∶5至5∶95v/v H2O/CH3CN+0.05％甲酸，保持3min，在0.2min回到95∶5v/v H2O/CH3CN+0.05％甲酸并保持95∶5v/v H2O/CH3CN+0.05％甲酸3min。
檢測(cè)PDA 250-340nm。
流速1.5ml/min實(shí)施例1(6-溴-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺將5-溴-2-氨基苯甲酸(5g，23.1mmol)懸浮在甲酰胺(5eq)中，在N2下加熱至155℃16小時(shí)。讓混合物冷卻并加至水中。獲得的沉淀物通過(guò)過(guò)濾分離并干燥，得到6-溴喹唑啉-4-醇中間體。該物質(zhì)的一部分(1g)溶于亞硫酰二氯(10ml)，加入DMF(0.3ml)，隨后回流5小時(shí)。除去溶劑，殘余物與甲苯(3×10ml)形成共沸混合物以除去微量的亞硫酰二氯。獲得的物質(zhì)溶于MeCN(10ml)，加入4-嗎啉基苯胺(1.1eq，Lancaster)，并加熱回流反應(yīng)混合物24小時(shí)。冷卻后通過(guò)過(guò)濾分離沉淀物，得到米黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物(867mg)。
δ(DMSO)11.5(1H，br s)；9.17(1H，d，J2.5Hz)；8.9(1H，s)；8.22(1H，dd，J 8.8，1.9Hz)；7.88(1H，d，J 8.8Hz)；7.61(2H，d，J 8.8Hz)；7.06(2H，d，J 8.8Hz)；3.78(4H，m)；3.18(4H，m)LC-MS ES+＝385，rt 3.89實(shí)施例2(6-碘-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺采用與實(shí)施例1類似的方法，使用5-碘-2-氨基苯甲酸作為起始物料，得到橙色固態(tài)的目標(biāo)化合物(568mg)。
δ(DMSO)11.5(1H，br s)；9.17(1H，d，J2.5Hz)；8.89(1H，s)；8.22(1H，dd，J 8.8，1.9Hz)；7.88(1H，d，J 8.8Hz)；7.62(2H，d，J 8.8Hz)；7.07(2H，d，J 8.8Hz)；3.78(4H，m)；3.18 4H，m)LC-MS ES+＝433，rt 3.97實(shí)施例3(6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺采用與實(shí)施例1類似的方法，使用4，5-二甲氧基-2-氨基苯甲酸作為起始物料，得到目標(biāo)化合物。
LC-MS ES+＝367rt 3.76實(shí)施例4(6-三氟甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺采用與實(shí)施例1類似的方法，使用5-三氟甲氧基-2-氨基苯甲酸作為起始物料，得到目標(biāo)化合物(110mg)。
δ(DMSO)10.0(1H，s)；8.66(1H，s)；8.62(1H，s)；7.91(2H，s)；7.68(2H，d，J 8.85Hz)；7.0(2H，d，J 8.85Hz)；3.80(2H，m)；3.10(2H，m)LC-MS 391rt.4.89實(shí)施例5(6-呋喃-2-基-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺將(6-碘-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺(實(shí)施例2，0.23mmol)溶于甲苯(5ml)，用三丁基甲錫烷基呋喃(Aldrich，1.1eq)、氯化鋰(5eq)和雙(三苯膦)二氯化鈀(5mol％)處理，并在氮?dú)庀录訜峄亓?4小時(shí)。水處理后經(jīng)柱層析得到目標(biāo)化合物(22mg)。
δ(DMSO)9.92(1H，s)；8.89(1H，s)；8.55(1H，s)；8.23(1H，dd，J8.85，1.89Hz)；7.95(1H，d，1.26Hz)；7.84(1H，d，8.85Hz)；7.72(2H，d，J8.85Hz)；7.19(1H，d，J 1.89Hz)；7.07(2H，d，9.48Hz)；6.77(1h，dd，J3.16Hz，1.89Hz)；3.83(4H，m)；3.18(4H，m)LC-MS ES+＝373rt 4.31實(shí)施例6[6-(5-[1，3]二氧戊環(huán)-2-基-呋喃-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉4-基-苯基)-胺實(shí)施例5的方法，使用5-[1，3]二氧戊環(huán)-2-基-2-三丁基甲錫烷基呋喃得到目標(biāo)化合物(30mg)。
δ(DMSO)9.92(1H，s)；8.89(1H，s)；8.55(1H，s)；8.23(1H，dd，J8.85，1.89Hz)；7.95(1H，d，1.26Hz)；7.84(1H，d，8.85Hz)；7.72(2H，d，J8.85Hz)；7.19(1H，d，J 1.89Hz)；7.07(2H，d，9.48Hz)；6.77(1h，dd，J3.16Hz，1.89Hz)；3.83(4H，m)；3.18(4H，m)LC-MS ES+＝373 Rt 4.31實(shí)施例75-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]呋喃-2-甲醛加熱下將[6-(5-[1，3]二氧戊環(huán)-2-基-呋喃-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺(100mg)溶于THF(10ml)，加入2M HCl(2ml)然后加入水(10ml)，并在75℃下加熱直到TLC(SiO2，CH2Cl2/iPrOH 20％)顯示完成去保護(hù)。冷卻的反應(yīng)混合物以2M NaOH堿化至pH 8，通過(guò)過(guò)濾分離到黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物(45mg)。
δ(DMSO)10.07(1H，br s)；9.72(1H，s)；9.04(1H，s)；8.56(1H，s)，8.32(1H，d，J 8.21Hz)；7.87(1H，d，J 8.84Hz)；7.79(1H，d，J 3.79Hz)；7.67(2H，d 8.84Hz)，7.46(1H，d J 3.16Hz)；7.05(2H，d J 8.84Hz)；3.81(4H，m)；3.17(4H，m)LC-MS ES+＝401 rt 4.16實(shí)施例8{5-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-呋喃-2-基}-甲醇在CH2Cl2(15ml)和乙酸(1ml)中以三乙酰氧基硼氫化鈉(0.477g，2eq)還原5-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-呋喃-2-甲醛(450mg)2小時(shí)，隨后經(jīng)水處理得到目標(biāo)化合物。
δ(DMSO)9.86(1H，br)；8.77(1H，d，J 1.26Hz)；8.47(1H，s)；8.13(1H，dd J 8.85，1.89Hz)；7.76(1H，d，8.85Hz)；7.65(2H，d，J 8.85Hz)；7.05(1H，d J 3.16Hz)；7.0(2H，d J 8.85Hz)；6.50(1H，d，3.16Hz)，5.76(1H，s)；5.34(1H，br)；4.53(2H，s)；3.70(4H，m)；3.10(4H，m)LC-MS ES+＝403 rt 4.66實(shí)施例9(6-{5-[(2-甲磺?；?乙基氨基)-甲基]-呋喃-2-基}-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺40℃下在CH2Cl2(15ml)中以2-甲磺?；野?46mg，通過(guò)Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 14，1，，p111-114 Yue-Mei Zhang等的方法制備)和5A分子篩(300mg)處理實(shí)施例7的甲醛(150mg)5小時(shí)。加入乙酸(2ml)和三乙酰氧基硼氫化鈉(139mg，2eq)，在室溫下攪拌過(guò)夜。濃縮混合物至干燥，用吸收層析法純化得到目標(biāo)化合物(70mg)。
δ(CDCl3)8.60(1H，br)；8.29(1H，d，1.42Hz)；7.88 91H，dd，J 8.68，1.74Hz)；7.78(1H，d，8.86Hz)；7.60(2H，d，9.0Hz)；6.91(2H，d，9.10Hz)；6.62(1H，d，3.32Hz)；6.25(1H，d，3.30Hz)；3.86(2H，s)；3.81(4H，m)；3.22(4H，s)，3.10(4H，m)；2.83(3H，s)LC-MS ES+＝508 rt 4.95實(shí)施例10{6-[5-(1，1-二氧-1-λ-6-硫代嗎啉-4-基甲基)-呋喃-2-基]-喹唑啉-4-基}-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺根據(jù)實(shí)施例9的方法，得到黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物(25mg)。
δ(DMSO)9.82(1H，s)；8.76(1H，s)；8.48(1H，s)；8.14(1H，dd，J8.85，1.89Hz)；7.79(1H，d，J 8.85Hz)；7.64(2H，d，J 8.85Hz)；7.08(1H，d，J 3.16Hz)；7.01(2H，d，J 8.85Hz)；6.59(1H，d，J 3.16Hz)；3.85(2H，s)；3.8(4H，m)；3.15(8H，m)；3.0(4H，m)LC-MS ES+＝520 rt 4.85
實(shí)施例11{6-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-基]-喹唑啉-4-基}-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺根據(jù)實(shí)施例9的方法，得到黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物(30mg)。
δ(DMS)9.75(1H，s)；8.64(1H，d，J 1.26Hz)；8.37(1H，s)；8.03(1H，dd，J 8.85，1.26Hz)；7.86(1H，s)；7.67(1H，d，J 8.21Hz)；7.54(2H，d，8.85Hz)；6.96(1H，d，J 3.16Hz)；6.91(2H，d，J 9.48Hz)；6.40(1H，d，J3.16Hz)；3.67(4H，m)；3.50(2H，s)；3.27(8H，b)；3.02(4H，m)；2.03(3H，s)LC-MS m/z 485 rt 4.48實(shí)施例12[6-(5-嗎啉-4-基甲基-呋喃-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺根據(jù)實(shí)施例9的方法，得到淺黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物(20mg)。
δ(DMSO)9.92(1H，s)；8.80(1H，s)；8.49(1H，s)；8.15(1H，d，J8.21Hz)；7.79(1H，d，J 8.85Hz)；7.65(2H，d，J 8.85Hz)；7.09(1H，d，J3.16Hz)；7.01(2H，d，J 8.85Hz)；6.57(1H，d，J 3.16Hz)；6.53(1H，s)；3.80(10H，m)；；3.33(4H，m)；3.20(4H，m)LC-MS m/z 472 rt 4.12實(shí)施例13[6-(5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺根據(jù)實(shí)施例9的方法，得到淺黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物(20mg)。
δ(DMSO)9.93(1H，s)；8.85(1H，s)；8.56(1H，s)；8.22(1H，dd，J8.85，1.26Hz)；7.86(1H，d，J 8.85Hz)；7.73(2H，d，J 9.48Hz)；7.16(1H，d，J 3.16Hz)；7.09(2H，d，J 8.85Hz)；6.63(1H，d，J 3.16Hz)；3.86(4H，m)；3.73(2H，s)；3.21(4H，m)；2.37(6H，s)LC-MS 430 rt 4.51實(shí)施例14[6-(5-甲基氨基甲基-呋喃-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉4-基-苯基)-胺根據(jù)實(shí)施例9的方法，得到淺黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物(8mg)。
δ(DMSO)9.69(1H，s)；8.63(1H，s)；8.35(1H，s)；8.02(1H，d，J8.85Hz)；7.64(1H，d，J 8.85Hz)；7.53(2H，d，J 8.21Hz)；6.90(3H，m)；6.35(1H，m)；3.65(6H，m)；3.10(4H，m)；2.23(3H，s)LC-MS m/z 4.16實(shí)施例15(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺以三乙胺(2.6ml，3eq.)處理(6-碘-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺(實(shí)施例2，2.66g)和噻吩-2-硼酸(Lancaster，1.18g，1.5eq)在THF(26ml)中的懸浮液，在加入三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(282mg)之前加熱至60℃，然后繼續(xù)加熱18小時(shí)。獲得的沉淀物通過(guò)過(guò)濾從冷卻的反應(yīng)混合物中分離，并以THF(10ml)洗滌。在用水稀釋之前將該固體溶于DMSO(40ml)并通過(guò)硅藻土片，沉淀物通過(guò)過(guò)濾分離，并在真空中干燥，得到黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物(1.2g，50％)。
δ(DMSO)10.75(1H，br s)；8.9(1H，s)；8.61(1H，s)；8.20(1H，dd，J8.85，1.89Hz)；7.8(2H，d，8.85Hz)；7.76(1H，s)；7.66(1H，d，J 4.42Hz)；7.58(2H，d，J 8.85Hz)，7.21(1H，t，3.79Hz)；7.0(2H，d，J 8.85Hz)；3.70(4H，m)；3.10(4H，m)LC-MS ES+＝389 rt 4.32實(shí)施例16(6-氯-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺根據(jù)與實(shí)施例15類似的方法，得到目標(biāo)化合物(42mg)。
δ(DMSO)11.86(1H，s)；9.26(1H，s)；8.97(1H，s)；8.5(1H，dd，J8.85，1.9Hz)；8.06(2H，d 8.85Hz)；7.73(2H，d，J 8.85Hz)；7.67(2H，d，J8.85Hz)；7.28(1H，d，J 8.85Hz)；7.16(1H，d，J 9.48Hz)；7.11(1H，d，J9.48Hz)；3.81(4H，m)；3.2(4H，m)LC-MS ES+＝417.5 rt 4.4實(shí)施例17(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-鄰甲苯基-喹唑啉-4-基)-胺根據(jù)與實(shí)施例15類似的方法，得到目標(biāo)化合物(25mg)。
δ(MeOD)8.58(1H，s)；8.44(1H，d，J 1.26Hz)；7.93(1H，d，J1.89Hz)；7.91(1H，s)；7.65(2H，d，J 8.85Hz)；7.39(4H，m)；7.10(2H，d，J8.85Hz)；6.96(2H，s)；3.92(2H，m)；3.24(4H，m)；2.39(3H，s)LC-MS ES+＝397 rt 4.26實(shí)施例18(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻唑-2-基-喹唑啉-4-基)-胺根據(jù)與實(shí)施例5類似的方法，得到目標(biāo)化合物(5.3mg)。
δ(DMSO)10.16(1H，s)，9.17(1H，s)，8.61(1H，s)，8.5(1H，d)，8.48(1H，d，J 8.8Hz)，8.10(1H，d，J 3Hz)，7.98(1H，d，J 3Hz)，7.91(1H，d，8.8Hz)，7.72(2H，d，J 8.8Hz)，7.09(2H，d，J 8.8Hz)，3.85(4H，m)，3.2(4H，m)LC-MS m/z 390 rt 3.31實(shí)施例19[6-(2-甲氧基-嘧啶-5-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺根據(jù)與實(shí)施例15類似的方法，得到黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物(120mg)。
δ(DMSO)9.75(1H，s)，9.15(2H，s)，8.86(1H，s)，8.53(1H，s)，8.23(1H，d，J 8.85Hz)，7.83(1H，d，J 8.85Hz)，7.64(2H，d，J 8.85Hz)，6.996(2H，d，J 8.85Hz)，4.0(3H，s)，3.76(4H，m)，3.11(4H，m)LC-MS m/z 415實(shí)施例20[6-(4-甲基-噻吩-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺根據(jù)與實(shí)施例15類似的方法，得到紅色固態(tài)的目標(biāo)化合物。
δ(DMSO)11.8(1H，br s)，9.18(1H，s)，8.83(1H，s)，8.31(1H，d，J8.85Hz)，7.97(1H，d，J 8.2Hz)，7.77(1H，s)，7.61(2H，d，J 8.85Hz)，7.32(1H，s)，7.08(1H，s)，3.78(4H，m)，3.19(4H，m)，2.3(3H，s)LC-MS m/z 403實(shí)施例215-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-噻吩-2-羧酸根據(jù)與實(shí)施例15類似的方法，得到紅棕色固態(tài)的目標(biāo)化合物。
δ(DMSO)11.97(1H，br s)，9.36(1H，s)，8.86(1H，s)，8.43(1H，d，J8.2Hz)，7.99(2H，m)，7.82(1H，d，J 3.8Hz)，7.61(2H，d，J 8.85Hz)，7.08(2H，d，J 9.5Hz)，3.77(4H，m)，3.18(4H，m)LC-MS m/z 433實(shí)施例22[6-(4-甲磺?；?苯基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺根據(jù)與實(shí)施例15類似的方法，得到黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物。
δ(DMSO)9.91(1H，br s)，8.91(1H，s)，8.53(1H，s)，8.15(4H，m)，7.86(1H，d，J 8.85Hz)，7.64(2H，d，J 8.85Hz)，6.99(2H，d，J 8.85Hz)，3.76(4H，m)，3.29(3H，s)，3.11(4H，m)LC-MS M/z 461實(shí)施例23(4-嗎啉-4-基-苯基)-[6-(3-吡唑-1-基-苯基)-喹唑啉-4-基]-胺根據(jù)與實(shí)施例15類似的方法，使用制備LC-MS分離到棕色固態(tài)的目標(biāo)化合物(5mg)，δ(DMSO)3.12(s，4H)3.75(s，4H)6.25(s，1H)7.01(d，2H)7.54(m，4H)7.65(d，2H)7.89(d，1H)8.11(m，2H)8.55(s，1H)8.72(s，1H)9.99(s，1H)，LC/MS RT＝3.62min Found ES+＝449.4實(shí)施例244-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-芐腈根據(jù)與實(shí)施例15類似的方法，使用制備LC-MS分離到棕色固態(tài)的目標(biāo)化合物(5mg)。δ(DMSO)3.12(s，4H)3.77(s，4H)7.01(d，2H)7.62(d，2H)7.82(d，2H)8.03-8.24(m，5H)8.50(s，1H)8.90(s，1H)9.91(bs，1H)，LC/MS RT＝2.50min Found ES+＝408.5實(shí)施例25呋喃-2-羧酸[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-酰胺步驟1將(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-硝基-喹唑啉-4-基)-胺(根據(jù)實(shí)施例1的方法制備，3.60LC-MS ES+ 352ES- 350，0.5g)加入到攪拌的THF∶MeOH溶液(1∶1，25ml)中，然后加入蘭尼鎳(2平勺，過(guò)量)。加熱混合物至50℃，在此階段加入肼(1ml)，并在此溫度下攪拌5小時(shí)。讓混合物冷卻，硅藻土過(guò)濾。真空下除去溶劑得到固體，使用2.5-5％MeOH∶DCM在硅膠柱上通過(guò)層析法純化。產(chǎn)量0.16g(35％)。
LCMSRT 2.01，ES+322，ES-320δ(DMSO)9.28(1H，s)；8.25(1H，s)；7.67(2H，d，J8.85Hz)；7.50(1H，d，J8.85Hz)；7.34(1H，d，1.90Hz)，7.22(1H，dd，J8.85Hz，1.90Hz)；6.96(2H，d，J8.85Hz)；5.53(2H，s)；3.77(4H，m)，3.09(4H，m).
步驟2將2-糠酰氯(0.033g，1.2eq)加入到一部分胺(50mg)的吡啶(4ml)溶液中，攪拌4小時(shí)。真空中除去吡啶，通過(guò)層析法純化殘余物得到目標(biāo)化合物。
δ(DMSO)8.77(1H，s)；8.43(1H，s)；8.01(1H，d，J8.5Hz)；7.97(1H，s)；7.72(1H，d，J8.85Hz)；7.64(2H，d，J8.85Hz)；7.42(1H，d，J3.16Hz)；6.96(2H，d，J8.85Hz)；6.73(1H，m)；3.75(4H，m)；3.08(4H，m)，LC-MSm/z 416Rt 2.22實(shí)施例264-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸4-甲氧基-芐酰胺步驟14-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸將實(shí)施例2(2.0g，4.6mMol)、碳酸鉀(1.4g，11.6mMol)、四(三苯膦)-鈀(O)(0.27g，0.23mMol)和二氯雙-(三苯膦)-鈀(II)(0.16g，0.23mMol)在4∶1二甲基甲酰胺∶水(75ml)的溶液置于一氧化碳?xì)夥罩?，并加熱?00℃6小時(shí)。冷卻后，真空下除去反應(yīng)溶劑，殘余物置于水中。用1M鹽酸酸化至pH2，形成橙色沉淀物。濾出并在甲醇中形成漿狀。過(guò)濾獲得的懸浮液并在空氣中干燥，得到黃色固態(tài)的4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸。產(chǎn)量＝0.56g(1.6mMol，35％)。
LC/MSRT-2.05，MH+@351，δ(DMSO)10.37(1H，s)；9.46(1H，s)；8.79(1H，s)；8.49(1H，dd，J 8.4Hz，1.2Hz)；8.01(1H，d，J 8.2Hz)；7.87(2H，d，J 8.8Hz)；7.21(2H，d，J 8.8Hz)；3.98(4H，t，J 4.4Hz)；3.33(4H，t，J 4.4Hz)步驟2以4-甲氧基芐胺處理4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸(50mg，0.14mMol)、O-(7-氮雜苯并三氮唑-1-基)-N-N’-N’-四甲基脲六氟磷酸酯(55mg，0.14mMol)和三乙胺(45μl，0.32mMol)在二甲基甲酰胺(2ml)中的溶液，并攪拌過(guò)夜。在加入水至反應(yīng)混合物后形成沉淀物。通過(guò)過(guò)濾收集并在空氣中干燥，得到目標(biāo)化合物。
δ(DMSO)10.06(1H，s)；9.20(1H，s)；9.16(1H，s)；8.36(1H，d，J8.2Hz)；7.92(1H，d，J 8.8Hz)；7.78(2H，d，J 8.8Hz)；7.45(2H，d，J 8.8Hz)；7.12(2H，d，J 8.8Hz)；7.05(2H，d，J 8.2Hz)；4.62(2H，d，J 5.1Hz)；3.85-3.94(7H，m)；3.24(4H，t，J 3.6Hz)，LC-MS m/z 470Rt 2.46在步驟2使用合適的胺(1.2eq)，或者純的或者作為在四氫呋喃中的溶液(如果可行)，用與實(shí)施例26類似的方式制備實(shí)施例273-{[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羰基]-胺基}-苯甲酸乙酯δ(DMSO)10.68(1H，s)；10.00(1H，s)；9.13(1H，s)；8.57(1H，s)；8.47(1H，s)；8.30(1H，dd，J 8.8Hz，1.3Hz)；8.13(1H，d，J 8.2Hz)；7.84(1H，d，J 8.8Hz)；7.72(1H，d，J 8.2Hz)；7.67(2H，d，J 8.8Hz)；7.50-7.59(1H，m)；6.99(2H，d，J 8.8Hz)；4.33(2H，q，J 7.2Hz)；3.75(4H，t，J 4.4Hz)；3.10(4H，t，J 4.4Hz)，1.33(3H，t，J 6.9Hz)，LC-MS m/z 498Rt 2.70實(shí)施例284-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸3-甲氧基-芐酰胺δ(DMSO)9.75(1H，s)；8.93(1H，t，J 5.7Hz)；8.85(1H，s)；8.35(1H，s)；8.05(1H，d，J 8.2Hz)；7.76(1H，s)；7.60(1H，d，J 8.2Hz)；7.46(2H，d，J 8.2Hz)；7.07(1H，t，J 7.6Hz)；6.72-6.82(3H，m)；6.63(1H，d，J 8.8Hz)；4.34(2H，d，J 5.1Hz)；3.11-3.17(7H，m)；2.87-2.94(3H，m)，LC-MS m/z470Rt 2.48實(shí)施例294-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸4-甲基-芐酰胺δ(DMSO)10.14(1H，s)；9.30(1H，t，J 6.1Hz)；9.24(1H，s)；8.76(1H，s)；8.44(1H，dd，J 8.8Hz，1.3Hz)；8.00(1H，d，J 8.8Hz)；7.87(2H，d，J8.8Hz)；7.47(2H，d，J 8.2Hz)；7.36(2H，d，J 7.6Hz)；7.20(2H，d，8.8Hz)；4.73(2H，d，J 5.7Hz)；3.94-4.00(4H，m)；3.29-3.35(4H，m)；2.49(3H，s)LC-MS m/z 454 rt 2.58實(shí)施例304-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸甲酰胺δ(DMSO)9.81(1H，s)；8.86(1H，s)；8.39-8.45(2H，m)；8.04(1H，dd，J 8.8Hz，1.9Hz)；7.65(1H，d，J 8.2Hz)；7.53(2H，d，J 8.8Hz)；6.86(2H，d，J 8.8Hz)；3.59-3.67(4H，m)；2.95-3.01(4H，m)；2.73(3H，d，J 4.4Hz)，LC-MS rt 2.08，m/z 364實(shí)施例314-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸二甲酰胺δ(DMSO)9.60(1H，s)；8.43(1H，s)；8.35(1H，s)；7.63(1H，dd，J8.2Hz，1.3Hz)；7.57(2H，d，J 8.8Hz)；6.79(2H，d，J 8.8Hz)；3.53-3.59(4H，m)；2.89-2.94(4H，m)；2.86(3H，s)；2.79(3H，s)，LC-MS rt 2.09，m/z 378實(shí)施例324-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-羧酸乙酰胺δ(DMSO)9.96(1H，s)；9.01(1H，s)；8.63(1H，t，J 5.4Hz)；8.57(1H，s)；8.21(1H，dd，J 8.8Hz，1.9Hz)；7.80(1H，d，J 8.8Hz)；7.69(2H，d，J9.5Hz)；7.02(2H，d，J 8.8Hz)；3.75-3.82(4H，m)；3.38(2H，q，J 6.9Hz)；3.11-3.17(4H，m)；1.21(3H，t，J 6.9Hz)，LC-MS rt 2.15，m/z 378實(shí)施例33N-{3-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-苯基}-乙酰胺根據(jù)與實(shí)施例15類似的方法，通過(guò)制備LC-MS分離到棕色固態(tài)的目標(biāo)化合物(5mg)。
δ(DMSO)2.10(s，3H)3.13(s，4H)3.77(s，4H)7.01(d，2H)7.54(m，2H)7.67(d，2H)7.85(d，1H)8.03(m，2H)8.53(s，1H)8.79(s，1H)9.89(s，1H)10.15(s，1H)LC/MS RT＝3.62min Found ES+＝449.4
實(shí)施例34{4-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-苯基}-氨基甲酸苯甲酯根據(jù)實(shí)施例15的方法，δ(DMSO)3.10-3.14(t，2H)，3.75-3.93(t，2H)，5.19(s，2H)，6.99-7.03(d，2H，J＝9Hz)，7.36-7.48(m，5H)，7.64-7.68(t，3H)，7.78-7.87(m，3H)，8.13-8.16(dd，1H)，8.33-8.35(d，1H)，8.50(s，1H)，8.77(s，1H)，9.82(s，1H)，9.97(s，1H)；LC-MS m/z 533，rt 2.81實(shí)施例35N-{4-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-苯基}-乙酰胺根據(jù)實(shí)施例15的方法，δ(DMSO)2.17-2.19(s，3H)，3.21-3.24(t，4H)，3.85-3.89(t，4H)，7.10-7.13(d，2H)，7.75-7.79(d，2H)，7.84-7.98(m，5H)，8.24-8.27(d，1H)，8.60(s，1H)，8.88(s，1H)，9.92(s，1H)，10.23(s，1H)，LC-MS m/z 440，rt 2.44實(shí)施例36{4-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-苯基}-氨基甲酸叔丁酯根據(jù)實(shí)施例15的方法，δ1.47(s，9H)，3.06-3.10(t，4H)，3.71-3.74(t，4H)，6.95-6.99(d，2H)，7.57-7.64(m，4H)，7.76-7.79(t，3H)，8.10-8.12(d，1H)，8.45(s，1H)，8.75(s，1H)，9.50(s，1H)，9.75(s，1H)；LC-MS m/z 498，rt 2.86實(shí)施例37{3-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-芐基}-氨基甲酸叔丁酯根據(jù)實(shí)施例15的方法，δ1.17(s，3H)，2.87-2.90(t，4H)，3.51-3.55(t，4H)，4.01-4.03(d，2H)，6.75-6.79(d，2H)，7.27-7.31(d，2H)，7.41-7.44(t，2H)，7.49-7.51(d，1H)，7.58-7.62(d，1H)，7.87(d，1H)，7.9(d，1H)，8.2(s，1H)，8.28(s，1H)，8.56(s，1H)，9.65(s，1H)，LC-MS m/z 514，rt 2.18
實(shí)施例38N-{3-[4-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-喹唑啉-6-基]-苯基}-甲基磺酰胺根據(jù)實(shí)施例15的方法δ(DMSO，)2.86-2.89(s，3H)，2.95-2.98(t，4H)，3.53-3.57(t，4H)，6.86-6.89(d，2H)，7.07-7.10(d，1H)，7.31-7.45(m，5H)，7.88(d，1H)，8.07-8.10(d，1H)，8.65(s，1H)，9.05(s，1H)，9.35(s(broad)，1H)，9.78(s，1H)，11.79(s，1H)，LC-MS m/z 476 tt 2.54實(shí)施例39(6-碘-喹唑啉-4-基)-(4-嗎啉-4-基-2-三氟甲基-苯基)-胺步驟1以嗎啉(1.74ml，20mMol)處理5-氟-2-硝基三氟甲苯(2.1g，10mM)和三乙胺(2.50ml，24mMol)在乙腈(35ml)中的溶液。加熱得到的溶液，回流過(guò)夜。冷卻后，在真空下除去反應(yīng)溶劑，并在二氯甲烷和10％(w/v)檸檬酸溶液之間分配粗殘余物。分離有機(jī)物，用硫酸鎂干燥，真空下減壓濃縮得到4-(4-硝基-3-三氟甲基-苯基)-嗎啉(2.63g，95％)，LC/MSRT-3.69，無(wú)離子化δ(CDCl3)8.04(1H，d，J 8.8Hz)；7.17(1H，d，J 3.2Hz)；6.96(1H，dd，J 8.8Hz，2.5Hz)；3.89(4H，t，J 4.5Hz)；3.40(4H，t，J 4.5Hz)步驟2使用標(biāo)準(zhǔn)方法，將4-(4-硝基-3-三氟甲基-苯基)-嗎啉(2.63g，0.95mMol)和10％鈀碳催化劑(263mg)在2∶1甲苯∶乙醇(75ml)中的懸浮液置于氫氣氣氛下，直到完成反應(yīng)。通過(guò)硅藻土片過(guò)濾反應(yīng)混合物，然后用乙醇洗滌。真空下減壓濃縮濾液得到米黃色固態(tài)的4-嗎啉-4-基-2-三氟甲基-苯胺。(1.25g，53％)，LC/MSRT-2.40，無(wú)離子化，δ(CDCl3)7.05-7.12(2H，m)；6.83(1H，d，J 8.8Hz)；3.96(4H，t，J 4.4Hz)；3.14(4H，t，4.4Hz)步驟3在乙腈(4ml)中用4-氯-6-碘-喹唑啉(300mg，1.1 mMol)處理步驟2的產(chǎn)物(280mg)，回流過(guò)夜，得到沉淀物。冷卻反應(yīng)，濾出沉淀物。沉淀物用1M氫氧化鈉溶液和水洗滌，然后在空氣中干燥，得到目標(biāo)化合物。δ(DMSO)9.79(1H，s)；8.85(1H，s)；8.27(1H，d，J12.0Hz)；8.03(1H，d，J 7.0Hz)；7.17-7.43(4H，m)；3.72-3.78(4H，m)；3.16-3.23(4H，m)，LC/MSRT-2.80，MH+@501，
實(shí)施例40(4-嗎啉-4-基-2-三氟甲基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺加熱實(shí)施例39(170mg，0.4mMol)、2-噻吩硼酸(50mg，0.4mMol)、三乙胺(120μl，1.0mMol)和三(二亞芐基丙酮)-二鈀(0)(50mg，15Mol％)在無(wú)水四氫呋喃(3ml)中的溶液，回流過(guò)夜。冷卻后，反應(yīng)混合物在硅土上濃縮，經(jīng)快速層析(用二氯甲烷-含2.5％甲醇的二氯甲烷梯度下洗脫)得到黃色固態(tài)的目標(biāo)化合物。
δ(DMSO)9.84(1H，s)；8.71(1H，s)；8.31(1H，s)；8.09(1H，d，J8.2Hz)；7.73(1H，d，J 8.8Hz)；7.65(1H，d，J 3.2Hz)；7.60(1H，d，J 5.1Hz)；7.14-7.36(4H，m)；3.67-3.77(4H，m)；3.13-3.19(4H，m).LC/MSRT-2.80，MH+@457實(shí)施例41(6-碘-喹唑啉-4-基)-(3-甲氧基-4-嗎啉-4-基-苯基)-胺步驟1將2-溴-5-硝基-苯甲醚(0.5g)和嗎啉(1.92g)一起加熱，在130℃下過(guò)夜。將冷卻的反應(yīng)混合物加到冰中，獲得的沉淀以水洗滌并干燥，得到所需的4-(2-甲氧基-4-硝基-苯基)-嗎啉(91％，m/z 239)步驟2室溫下在乙醇中使用鈀碳催化劑氫化硝基得到褐色固態(tài)的3-甲氧基-4-嗎啉-4-基-苯胺(76％，0.159g)，其可以使用而無(wú)需進(jìn)一步純化。
步驟3在乙腈(10ml)中加熱3-甲氧基-4-嗎啉-4-基-苯胺(136mg)和4-氯-6-碘喹唑啉(186mg)，回流過(guò)夜，冷卻后，通過(guò)過(guò)濾分離出沉淀物，用水洗滌，然后用1N NaOH制漿，進(jìn)一步用水洗滌并干燥。得到目標(biāo)化合物(263mg，88％)δ(DMSO)11.01(1H，br s)；9.20(1H，s)；8.83(1H，s)；8.29(1H，d，J8.85Hz)；7.67(1H，d，J8.85Hz)；7.40(2H，m)；6.98(1H，d，J8.85Hz)；8.83(3H，s)；3.76(4H，m)；3.01(4H，m).，LC-MS rt 2.74，m/z E+463實(shí)施例42(3-甲氧基-4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺與實(shí)施例15類似的方法，使用實(shí)施例41作為起始原料得到目標(biāo)化合物(14mg，11％)δ(DMSO)9.96(1H，s)；8.86(1H，s)；8.61(1H，s)；8.22(1H，d，J8.85Hz)；7.87(1H，d，J8.85Hz)；7.83(1H，d，J3.79Hz)；7.76(1H，d，J5.06Hz)；7.48(2H，m)；7.33(1H，t J5.05，3.79Hz)；7.03(1H，d，J8.85Hz)；3.92(3H，s)；3.84(4H，m)；3.07(4H，m)，LC-MS rt 3.63，m/z E+419實(shí)施例43(2-甲基-4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺步驟1用嗎啉(1.74ml，20mMol)處理5-氟-2-硝基甲苯(1.22ml，10mM)和三乙胺(2.10ml，20mMol)在乙腈(30ml)中的溶液。加熱獲得的溶液，回流過(guò)夜。冷卻后，真空下除去反應(yīng)溶劑，在二氯甲烷和10％(w/v)檸檬酸溶液之間分配粗殘余物。分離出有機(jī)物，用硫酸鎂干燥，真空下減壓濃縮得到4-(3-甲基-4-硝基苯基)-嗎啉(1.96g，88％)LC/MSRT-2.76，無(wú)離子化。
步驟2使用標(biāo)準(zhǔn)方法，將4-(3-甲基-4-硝基苯基)-嗎啉1.96g(8.9mMol)和10％鈀碳(100mg)在甲苯(30ml)中的懸浮液置于氫氣氣氛下，直到完成反應(yīng)。通過(guò)硅藻土過(guò)濾反應(yīng)混合物，液體在真空下減壓濃縮得到暗褐色固態(tài)的2-甲基-4-嗎啉-4-基-苯胺。(1.07g，63％)，LC/MSRT-0.71，MH+@193；δ(CDCl3)6.74(1H，s)；6.64-6.70(2H，m)；3.88(4H，t，J 4.5Hz)；3.06(4H，t，J 4.5Hz)；1.99(3H，s)步驟3加熱4-氯-6-碘-喹唑啉(500mg，1.8mMol)和2-甲基-4-嗎啉-4-基-苯胺(360mg，1.9mMol)在乙腈(10ml)中的懸浮液，回流過(guò)夜，其間產(chǎn)生沉淀物。冷卻反應(yīng)，過(guò)濾沉淀物。在空氣中干燥之前用1M NaOH溶液和水洗滌，得到(6-碘-喹唑啉-4-基)-(2-甲基-4-嗎啉-4-基-苯基)-胺(738mg，95％)。LC/MSRT-3.55，MH+@447δ(DMSO)10.35(1H，br s)；9.04(1H，d，1.3Hz)；8.55(1H，s)；8.20(1H，dd，J 8.8Hz，1.3Hz)；7.60(1H，d，J 8.8Hz)；7.14(1H，d，J 8.8Hz)；6.92(1H，d，J 2.5)；6.87(1H，dd，J 8.2Hz，1.9Hz)；3.77(4H，t，4.4Hz)；3.15(4H，t，4.4Hz)；2.15(3H，s)步驟4加熱(6-碘-喹唑啉-4-基)-(2-甲基-4-嗎啉-4-基-苯基)-胺(250mg，0.6mMol)、2-噻吩硼酸(75mg，0.6mMol)、三乙胺(150μl，1.2mMol)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(50mg，10Mol％)在無(wú)水四氫呋喃(10ml)中的溶液，回流過(guò)夜。冷卻后，反應(yīng)混合物在硅膠上濃縮，經(jīng)快速層析(用200∶8∶1的二氯甲烷∶乙醇∶氨水混合物洗脫)，得到黃色固態(tài)的(2-甲基-4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺。LC/MSRT-3.54，MH+@403；δ(DMSO)9.89(1H，s)；8.89(1H，d，J 1.9Hz)；8.46(1H，s)；8.25(1H，dd，J 8.8Hz，1.9Hz)；7.89(1H，d，J 8.8Hz)；7.84(1H，3.8Hz)，7.78(1H，d，J 5.0Hz)；7.36(1H，dd，J 5.0Hz，3.8Hz)；7.30(1H，d，8.2Hz)；7.05(1H，d，1.9Hz)；6.98(1H，dd，J 8.8Hz，3.2Hz)；3.90(4H，t，J4.4Hz)；3.28(4H，t，J 4.4Hz)；2.29(3H，s)實(shí)施例44(3-甲基-4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺步驟1加熱2-氟-5-硝基甲苯(1.65g，10.6mMol)、三乙胺(2.96ml，21.2mMol)和嗎啉(1.86ml，21.2mMol)在乙腈(30ml)中的溶液，回流過(guò)夜。冷卻后，真空下減壓濃縮反應(yīng)溶劑，殘余物加入嗎啉中。在100℃下加熱該溶液，直到通過(guò)TLC檢測(cè)完成反應(yīng)。反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋并用1M檸檬酸溶液洗滌。用硫酸鎂干燥有機(jī)物，真空下減壓濃縮得到油狀物。進(jìn)一步通過(guò)快速層析(用汽油-9∶1汽油∶乙酸乙酯梯度洗脫)純化得到橙色固態(tài)的4-(2-甲基-4-硝基-苯基)-嗎啉。(0.53g，22％)，LC/MSRT-3.76，沒(méi)有離子化；δ(CDCl3)7.99-8.02(2H，m)；6.94(1H，d，J 9.5Hz)；3.81(4H，t，J 4.5Hz)；2.95(4H，t，J 4.5Hz)；2.31(3H，s)步驟2使用標(biāo)準(zhǔn)方法，將4-(2-甲基-4-硝基-苯基)-嗎啉(0.53g，2.4mMol)和10％鈀碳(55mg)在1∶1甲苯∶乙醇(25ml)中的懸浮液置于氫氣氣氛下，直到完成反應(yīng)。通過(guò)硅藻土片過(guò)濾反應(yīng)混合物，然后用乙醇洗滌。真空下減壓濃縮濾液得到黃褐色固態(tài)的3-甲基-4-嗎啉-4-基-苯胺。(0.47g，100％)，LC/MSRT-2.66，MH+@193；δ(CDCl3)6.82(1H，d，J 8.2Hz)；6.48-6.54(2H，m)；3.76(4H，t，J 4.4Hz)；2.76(4H，t，J 4.4Hz)；2.18(3H，s)步驟3加熱4-氯-6-碘-喹唑啉(300mg)和3-甲基-4-嗎啉-4-基-苯胺(240mg)在乙腈(4ml)中的懸浮液，回流過(guò)夜，其間產(chǎn)生沉淀物。冷卻反應(yīng)，過(guò)濾沉淀物。在空氣中干燥之前用1M NaOH溶液和水洗滌，得到(6-碘-喹唑啉-4-基)-(3-甲基-4-嗎啉-4-基-苯基)-胺。LC/MSRT-2.81，MH+@447；δ(DMSO)9.82(1H，s)；9.03(1H，d，J 1.9Hz)；8.59(1H，s)；8.12(1H，dd，J 8.8Hz，1.9Hz)；7.60-7.70(2H，m)；7.58(1H，d，J8.8Hz)；7.09(1H，d，J 8.8Hz)；3.78(4H，t，J 4.1Hz)；2.87(4H，t，J 4.1Hz)；2.32(3H，s)步驟4加熱(6-碘-喹唑啉-4-基)-(3-甲基-4-嗎啉-4-基-苯基)-胺(170mg，0.4mMol)、2-噻吩硼酸(50mg，0.4mMol)、三乙胺(120μl，1.0mMol)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(50mg，10Mol％)在無(wú)水四氫呋喃(3ml)中的溶液，回流過(guò)夜。冷卻時(shí)，反應(yīng)混合物在硅土上濃縮，經(jīng)快速層析(用二氯甲烷-含2.5％甲醇的二氯甲烷梯度下洗脫)得到黃色固態(tài)的(3-甲基-4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺。
LC/MSRT-2.76，MH+@403；δ(DMSO)10.05(1H，s)；8.97(1H，d，J 1.9Hz)；8.71(1H，s)；8.32(1H，dd，J 8.8Hz，1.9Hz)；7.99(1H，d，J8.8Hz)；7.93(1H，dd，J 3.8Hz，1.3Hz)；7.87(1H，dd，J 5.1Hz，1.3Hz)；7.75-7.85(3H，m，)；7.44(1H，dd，J 5.1Hz，3.2Hz)；7.29(1H，d，J 8.8Hz)；3.96(4H，t，J 4.4Hz)；3.06(4H，t，J 4.4Hz)；2.51(3H，s)實(shí)施例45乙基-(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺步驟1向干燥DMF(10ml)的攪拌溶液中加入N-(4-氨基苯)嗎啉(0.5g，2.80mmol)，然后加入Et3N(0.70g，7.0mmol)。慢慢加入乙酰氯(0.24g，3.10mmol)，在室溫下攪拌混合物過(guò)夜。加入水(50ml)，用乙酸乙酯(2×20ml)萃取混合物。合并有機(jī)洗液并干燥(Na2SO4)，真空下除去溶劑得到固態(tài)的N-(4-嗎啉-4-基-苯基)-4-乙酰胺。產(chǎn)量0.29g(47％)。δ(DMSO)9.71(1H，bs)；7.42(2H，d，J8.85Hz)；6.87(2H，d，J9.48Hz)；3.72(4H，m)；3.01(4H，m)；1.98(3H，s)，LCMSRT 1.97，ES+221步驟2以與實(shí)施例46步驟2類似的方式處理N-(4-嗎啉-4-基-苯基)-4-乙酰胺(1g)，得到半粗品乙基-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺(0.92g，)，按照實(shí)施例46步驟3使其與4-氯-6-碘喹唑啉反應(yīng)，然后按照實(shí)施例44步驟4反應(yīng)得到目標(biāo)化合物(104mg，61％)δ(DMSO)8.61(1H，s)；8.18(1H，s)；7.93(1H，d，J8.85Hz)；7.70(2H，d，J8.85Hz)；7.50(1H，d，J4.42Hz)；7.14(5H，m)；4.11(2H，m)；3.76(4H，m)；3.19(4H，m)；1.22(3H，t，J6.31Hz)，LC-MS rt 2.67，m/z E+417實(shí)施例46(6-碘-喹唑啉-4-基)-甲基-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺步驟1在0℃攪拌下向乙酸酐(0.75g)中加入甲酸(0.41g)，然后加熱至50℃2小時(shí)。用干燥THF(5ml)稀釋冷卻的混合物，加入4-嗎啉基苯胺(0.5g)，混合物恢復(fù)3小時(shí)。真空下除去溶劑得到黃色固態(tài)的N-(4-嗎啉-4-基-苯基)4-甲酰胺(450mg，77％)，δ(DMSO)8.72(1H，s)，7.90(1H，d，J8.85Hz)；7.51(1H，d，J8.85Hz)；7.15(5H，m)；3.81(4H，m)；3.56(3H，s)；3.21(4H，m)，LC-MS rt 2.62，m/z E+447.
步驟2在0℃下用硼氫化鈉(160mg)處理N-(4-嗎啉-4-基-苯基)4-甲酰胺(0.29g)在干燥THF(2ml)中的溶液，并攪拌30分鐘。在10分鐘內(nèi)加入BF3/Et2O(0.67ml)的溶液，并在0℃下再攪拌1小時(shí)。然后加熱回流混合物5小時(shí)。冷卻混合物并滴加水(3ml)以水解過(guò)量的硼氫化鈉。用二乙醚(2×10ml)萃取混合物。有機(jī)洗滌物合并干燥(Na2SO4)，真空下除去溶劑得到白色固態(tài)的甲基-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺。產(chǎn)量43mg(16％)δ(DMSO)6.76(2H，d，J8.85Hz)；6.47(2H，d，J8.85Hz)；5.17(1H，bs)；3.69(4H，m)；2.87(4H，m)；2.60(3H，s)，LCMSRT 2.35，ES+193步驟3加熱甲基-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺(37mg)和4-氯-6-碘喹唑啉(52mg)在乙腈(6ml)中的溶液，回流過(guò)夜，冷卻后，通過(guò)過(guò)濾分離得到沉淀物，用水洗滌，用1N NaOH制漿，進(jìn)一步用水洗滌并干燥。得到目標(biāo)化合物(22mg，28％)δ(DMSO)8.72(1H，s)，7.90(1H，d，J8.85Hz)；7.51(1H，d，J8.85Hz)；7.15(5H，m)；3.81(4H，m)；3.56(3H，s)；3.21(4H，m)，LC-MS rt 2.62，m/z E+447實(shí)施例47(6-碘-喹唑啉-4-基)-(3-甲基-丁基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺步驟1向旋轉(zhuǎn)管(carousel tube)中加入N-(4-氨基苯基)嗎啉(0.25g，1.40mmol)、DCM(干燥的，15ml)、分子篩3A(過(guò)量，0.2g)和3-甲基-丁醛(0.14g，1.4mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時(shí)，然后在45℃下攪拌2小時(shí)。冷卻混合物，加入乙酸(1ml)，然后加入三乙酰氧基硼氫鈉(0.60g，2.80mmol)，讓混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。真空下除去溶劑，通過(guò)使用2.5％MeOH∶DCM在硅膠柱上經(jīng)柱層析純化粗品得到(3-甲基-丁基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺，產(chǎn)量0.20g(57％)。δ(DMSO)6.75(2H，d，J8.85Hz)；6.50(2H，d，J8.85Hz)；3.71(4H，m)；3.17(2H，m)；2.89(4H，m)；1.66(1H，m)；1.39(2H，m)；0.91(6H，d，J6.32Hz)，LCMSRT 2.22，ES+249步驟2按照實(shí)施例47步驟3處理(3-甲基-丁基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺(210mg)，得到目標(biāo)化合物(294mg，71％)，δ(DMSO)8.69(1H，s)；7.89(1H，dd，J8.85Hz，1.9Hz)；7.50(1H，d，J8.85Hz)；7.16(4H，AB，J8.85Hz)；7.06(1H，d，J1.90Hz)；4.12(2H，t，J7.58Hz)；3.80(4H，m)；3.23(4H，m)；1.62(2H，m)；1.37(1H，m)；0.94(6H，d，6.32Hz)，LC-MS rt 3.11，m/z E+503實(shí)施例48異丙基-(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺根據(jù)與實(shí)施例47相似的方法，然后根據(jù)與實(shí)施例45步驟4相似的方法得到目標(biāo)化合物(4.5mg)δ(DMSO)8.61(1H，s)；7.90(1H，d，J7.58Hz)；7.67(1H，d，J8.85Hz)；7.51(1H，d，J4.42Hz)；7.09(7H，m)；5.51(1H，m)；3.77(4H，m)；3.23(4H，m)；1.18(6H，d，J6.32Hz)，LC-MSrt 2.74，m/z E+431實(shí)施例49(3-甲基-丁基)-(4-嗎啉-4-基-苯基)-(6-噻吩-2-基-喹唑啉-4-基)-胺根據(jù)與實(shí)施例44步驟4相似的方法得到目標(biāo)化合物(12.5mg)δ(DMSO)8.63(1H，)；8.21(1H，s)；7.94(1H d，J8.85Hz)；7.72(2H，m)；7.52(1H，d，J5.06Hz)；7.12(5H，m)；4.13(2H，m)；3.78(4H，m)；3.20(4H，m)；3.0(3H，m)；1.15(6H，t，J7.58Hz)，LC-MS rt 2.98，m/z E+459
實(shí)施例50[6-(2-芐氧基-苯基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺根據(jù)與實(shí)施例15相似的方法得到目標(biāo)化合物L(fēng)C-MS m/z 489.4rt 2.82實(shí)施例51[6-(4-芐氧基-苯基)-喹唑啉-4-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺根據(jù)與實(shí)施例15相似的方法得到目標(biāo)化合物(DMSO，δ)3.07-3.10(t，4H)，3.71-3.75(t，4H)，5.18(s，2H)，6.95-6.99(d，2H)，7.14-7.18(d，2H)，7.28-7.48(m，5H)，7.60-7.64(d，2H)，7.74-7.83(m，3H)，8.08-8.12(d，1H)，8.45(s，1H)，8.71(s，1H)，LC-MS m/z 490 rt 2.89活性實(shí)施例使用的細(xì)胞HCV復(fù)制子細(xì)胞Huh 9B(ReBlikon)，含有熒光蟲熒光素酶-泛素-新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶融合蛋白質(zhì)和EMCV-IRES驅(qū)動(dòng)的HCV多聚蛋白，帶有細(xì)胞培養(yǎng)適應(yīng)性突變。
細(xì)胞培養(yǎng)條件細(xì)胞在37℃下、在5％二氧化碳環(huán)境下培養(yǎng)，第一天以2×10E6細(xì)胞/燒瓶接種，3天后以1×10E6接種，每周分兩次。向培養(yǎng)基中加入大約0.25mg/ml的G418(125ul每25ml)，而測(cè)定介質(zhì)中不加。
培養(yǎng)基由含4500g/l葡萄糖的DMEM和補(bǔ)加有1×非必需氨基酸的glutamax(Gibco 61965-026)、青霉素(100IU/ml)/鏈霉素(100μg/ml)、FCS(10％，50ml)以及1mg/ml G418(Invitrogen cat no 10131-027)&10％胎牛血清組成。
測(cè)定過(guò)程以胰蛋白酶處理燒瓶中的細(xì)胞并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞稀釋至100,000細(xì)胞/ml，并對(duì)每7個(gè)用于測(cè)試IC50的化合物取100μl來(lái)接種一個(gè)不透明的白色96孔板(用于復(fù)制子測(cè)定)和一個(gè)平底透明板(用于毒性測(cè)定)上。透明板的孔G12和H12空置作為空白。然后將板在37℃下、在5％二氧化碳環(huán)境下孵育24小時(shí)。
第二天，在透明圓底板中以它們的目標(biāo)終濃度兩倍的濃度在介質(zhì)中配制化合物稀釋液。全部稀釋液具有1％的最終DMSO濃度。
一旦稀釋板制成，將對(duì)照和化合物以100μl/孔轉(zhuǎn)移至測(cè)定板(含有細(xì)胞)，板雙份。
其它事項(xiàng)在白色(復(fù)制子)板中，孔A1和A2不加任何化合物，作為替代加入100μl的1％DMSO。在透明(毒性)板中，孔E12和F12僅含有DMSO對(duì)照。然后將板在37℃下、在5％二氧化碳下孵育72小時(shí)。
在孵育期結(jié)束時(shí)，白色平板中的細(xì)胞通過(guò)以200μl/孔的溫(37℃)PBS洗滌而收集，并以20μl細(xì)胞培養(yǎng)物裂解緩沖液(Promega)裂解。在室溫下孵育5分鐘后，向熒光素酶測(cè)定緩沖液(LARB)中以200μl每10ml LARB加入熒光素溶液。微孔板光度計(jì)(Lmax，Molecular Devices)的M注射器以4×300l的注射液初始化。將板插入光度計(jì)中，并通過(guò)光度計(jì)上的注射器加入100μl的熒光素酶測(cè)定試劑。使用1秒延遲然后4秒測(cè)量的程序來(lái)測(cè)量信號(hào)。將復(fù)制子水平相對(duì)于未經(jīng)處理的細(xì)胞對(duì)照值減少50％所需的藥物濃度，即IC50，可從以熒光素酶活性減少百分比對(duì)藥物濃度作圖計(jì)算出。
室溫下以100μl 0.5％溶于50％乙醇的亞甲基藍(lán)對(duì)透明板染色1小時(shí)，然后在每孔100μl 1％月桂酰肌氨酸中溶劑化吸收的亞甲基藍(lán)。在微孔板分光光度計(jì)(Molecular Devices)上測(cè)量板的吸收，并且化合物各個(gè)濃度的吸收以相對(duì)DMSO對(duì)照的比例來(lái)表示。將總細(xì)胞面積相對(duì)于DMSO對(duì)照減少50％所需的藥物濃度，即TD50，可通過(guò)以620nm處的吸收對(duì)藥物濃度作圖計(jì)算出。
表權(quán)利要求
1.化合物，所述化合物為式(Ia)的喹唑啉衍生物或其藥物上可接受的鹽， 其中R1代表氫、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-CO2R/、-CONR/R//、-A、-A-L-A/、-Z-L-A或-A-L-Z-L-A，其中R/和R//相同或不同，且各自代表氫或C1-C4烷基；R2代表氫、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4鹵代烷氧基；R3代表氫、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4鹵代烷氧基；以及R4代表氫、C1-C6烷基或C1-C6鹵代烷基，其中-A代表C6-C10芳基、5-至10-元雜芳基或5-至10-元雜環(huán)基基團(tuán)；-每一L相同或不同，且為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)；-A/為5-至10-元雜芳基或5-至10-元雜環(huán)基基團(tuán)；以及-Z為-S-、-O-、-NR/-、-CO2-、-C(O)NR/-、-OC(O)-、-NR/C(O)-、-OCO2-、-NR/CO2-、-OC(O)NR/-或-NR/C(O)NR//-，其中R/和R//相同或不同，且代表氫或C1-C4烷基，R1中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、羥基、硫醇、-NH2、C1-C4羥烷基、C1-C4硫烷基、C1-C4氨基烷基、氰基、硝基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/、-CONR/R//和-L/-X-L//-Y的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且選自氫和C1-C4烷基，L/為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)，X為-S-、-O-或-NR/-，其中R/定義如上，L//為直接鍵或C1-C4亞烷基基團(tuán)，以及Y為氫、-COR/、-CO2R/、-S(O)2R/或-S(O)R/，其中R/為氫或C1-C4烷基。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中L/為直接鍵或C1-C2亞烷基基團(tuán)。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中X為-O-或-NR/-，其中R/如權(quán)利要求1中所定義。
4.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中L//為直接鍵或C1-C2亞烷基基團(tuán)。
5.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Y為氫、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/或-S(O)2R/，其中R/為氫或C1-C4烷基基團(tuán)。
6.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述R1取代基中的芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4羥烷基、氰基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R和-L/-X-L//-Y的取代基所取代，其中R/、L/、X、L//和Y如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所定義。
7.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述R1取代基中的芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分未被取代或被1或2個(gè)選自鹵素、C1-C2烷基、C1-C2鹵代烷基、C1-C2羥烷基、氰基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/、-(C1-C2烷基)-NR/R//、C1-C2烷氧基、-NR/-COR/、NR/-CO2R/、-(C1-C2烷基)-NR/-CO2R/、-NR/-S(O)2-R/和-(C1-C2烷基)-NR/-(C1-C2烷基)-S(O)2-R//的取代基所取代，其中每一R/、R//和R/相同或不同，且代表氫或C1-C2烷基。
8.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中A為苯基、5-至6-元雜芳基或5-至6-元雜環(huán)基基團(tuán)。
9.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中A為苯基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、噻唑基或pyridazolyl基團(tuán)。
10.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中L為直接鍵或C1-C2亞烷基基團(tuán)。
11.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中A/為5-至6-元雜環(huán)基或雜芳基基團(tuán)，其未被取代或被1、2或3個(gè)選自鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基和C1-C4鹵代烷氧基的取代基所取代。
12.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中A/為嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、1，3-二氧戊環(huán)基、S，S-二氧硫代嗎啉基或吡唑基基團(tuán)，其未被取代或被1或2個(gè)選自C1-C2烷基、鹵素和C1-C2鹵代烷基的取代基所取代。
13.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Z為-O-、-CONR/-、-NR/C(O)-或-NR/CO2-，其中R/如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所定義。
14.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Z為-O-、-CONH-、-CON(C1-C2烷基)-、-NHC(O)-或-NHCO2-。
15.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R1為鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、-CO2R/、-CONR/R//、-A、-A-L-A/、-Z-L-A或-A-L-Z-L-A，其中R/、R//、A、L、A/和Z如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所定義。
16.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R1為鹵素、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷氧基、-CONR/R//、-A、-Ar-L-A/、-Z-L-A或-Ar-Z-L-Ar，其中R/和R//相同或不同，且各自代表氫或C1-C2烷基基團(tuán)，A和A/如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所定義，Ar為未取代的呋喃基或未取代的苯基基團(tuán)，L為直接鍵或亞甲基基團(tuán)，以及Z為-O-、-C(O)NR/-、-NR/C(O)-或-NR/CO2-，其中R/為氫或C1-C4烷基基團(tuán)。
17.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R2為氫、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基。
18.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R3為氫、C1-C2烷基、C1-C2鹵代烷基或C1-C2烷氧基。
19.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R4為氫或C1-C6烷基。
20.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中式(Ia)的所述喹唑啉衍生物是式(I)的喹唑啉衍生物， 其中-R1為鹵素、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷氧基、-A或-Ar-L-A/；-R2為氫或C1-C2烷氧基；-A為苯基或5-至6-元雜芳基基團(tuán)，例如呋喃基、噻吩基、嘧啶基和噻唑基，其未被取代或被1或2個(gè)選自鹵素、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷基、C1-C2羥烷基、-COR/、-CO2R/、-S(O)R/、-S(O)2R/、-(C1-C2烷基)-NR/R//和-(C1-C2烷基)-NR/-(C1-C2烷基)-S(O)2-R//的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且代表氫或C1-C2烷基；-Ar為未取代的呋喃基；-L為直接鍵或亞甲基基團(tuán)；以及-A/為5-至6-元雜環(huán)基基團(tuán)，例如嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、1，3-二氧戊環(huán)基和S，S-二氧硫代嗎啉基，其未被取代或被1或2個(gè)選自C1-C2烷基、鹵素和C1-C2鹵代烷基基團(tuán)的取代基所取代。
21.如權(quán)利要求20所述的化合物，其中-R1為鹵素、C1-C2烷氧基、C1-C2鹵代烷氧基、-A或-Ar-L-A/；-R2為氫或C1-C2烷氧基；-A為苯基或5-至6-元雜芳基基團(tuán)，例如呋喃基、噻吩基和噻唑基，其為未被取代或被1或2個(gè)選自鹵素、C1-C2烷基、C1-C2鹵代烷基、C1-C2羥烷基、-COR/、-(C1-C2烷基)-NR/R//和-(C1-C2烷基)-NR/-(C1-C2烷基)-S(O)2-R//的取代基所取代，其中每一R/和R//相同或不同，且代表氫或C1-C2烷基；-Ar為未取代的呋喃基基團(tuán)；-L為直接鍵或亞甲基基團(tuán)；以及-A/為5-至6-元雜環(huán)基基團(tuán)，例如嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、1，3-二氧戊環(huán)基和S，S-二氧硫代嗎啉基，其未被取代或被1或2個(gè)選自C1-C2烷基、鹵素和C1-C2鹵代烷基的取代基所取代。
22.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的式(Ia)的喹唑啉衍生物在治療人或動(dòng)物體中的用途。
23.藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的式(Ia)的喹唑啉衍生物，或其藥物上可接受的鹽，以及藥物上可接受的載體或稀釋劑。
24.權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的式(Ia)的喹唑啉衍生物或其藥物上可接受的鹽在制備治療或預(yù)防黃病毒科感染的藥物中的用途。
25.如權(quán)利要求24所述的用途，其中所述黃病毒科感染為瘟病毒屬感染。
26.如權(quán)利要求25所述的用途，其中所述瘟病毒屬感染為牛病毒性腹瀉病毒、豬瘟病毒或邊界病病毒引起的感染。
27.如權(quán)利要求24所述的用途，其中所述黃病毒科感染為黃病毒屬感染。
28.如權(quán)利要求27所述的用途，其中所述黃病毒屬感染為黃熱病毒、登革熱病毒、日本腦炎病毒或蜱傳播的腦炎病毒引起的感染。
29.如權(quán)利要求24所述的用途，其中所述黃病毒科感染是丙型肝炎病毒屬感染。
30.如權(quán)利要求29所述的用途，其中所述丙型肝炎病毒屬感染為C型肝炎病毒引起的感染。
31.如權(quán)利要求30所述的用途，其中所述藥物進(jìn)一步包括(a)干擾素或其衍生物和/或(b)三氮唑核苷或其衍生物。
32.如權(quán)利要求31所述的用途，其中所述干擾素衍生物為PEG-干擾素和/或所述三氮唑核苷衍生物為維拉米定。
33.產(chǎn)品，包含(a)權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的式(Ia)的喹唑啉衍生物，或其藥物上可接受的鹽；以及(b)權(quán)利要求31或32所述的干擾素或干擾素衍生物和/或權(quán)利要求31或32所述的三氮唑核苷或三氮唑核苷衍生物；其中所述(a)和(b)組分在人或動(dòng)物體的治療中同時(shí)、獨(dú)立或順序使用。
34.治療受或易于受權(quán)利要求24-30中任一項(xiàng)所述的黃病毒科感染的患者的方法，所述方法包括對(duì)所述患者以有效量的權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的式(I)的喹唑啉衍生物或其藥物上可接受的鹽給藥。
全文摘要
式(Ia)的化合物被發(fā)現(xiàn)具有抑制黃病毒科病毒復(fù)制的活性，其中R
文檔編號(hào)C07D403/00GK1950345SQ200580013829
公開(kāi)日2007年4月18日 申請(qǐng)日期2005年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月28日
發(fā)明者基思·斯賓塞, 海倫娜·丹尼森, 尼爾·馬修, 米歇爾·巴恩斯, 蘇恩德?tīng)枴ど臣{ 申請(qǐng)人:阿羅治療有限公司