專利名稱：苯并咪唑酮羧酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及苯并咪唑酮羧酸衍生物。這些化合物具有選擇性5-HT4受體激動活性。本發(fā)明還涉及包含上述衍生物的藥物組合物、用于治療由5-HT4受體活性，尤其是5-HT4受體激動活性介導(dǎo)的疾病的治療方法和用途。
背景技術(shù)：
總的說來，已發(fā)現(xiàn)5-HT4受體激動劑可用于治療多種多樣的疾病，如胃食管反流病疾病、胃腸疾病、胃動力障礙、非潰瘍性消化不良、功能性消化不良、腸易激綜合征(IBS)、便秘、消化不良、食管炎、胃食管疾病、惡心、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、阿爾茲海默氏病、認知障礙、嘔吐、偏頭痛、神經(jīng)學(xué)疾病、疼痛、心血管疾病、心力衰竭、心律失常、糖尿病及呼吸暫停綜合征(見TiPs，1992，13，141；Ford A.P.D.W.等人，Med.Res.Rev.，1993，13，633；Gullikson G.W.等人，Drug Dev.Res.，1992，26，405；Richard M.Eglen等人，TiPS，1995，16，391；Bockaert J.等人，CNS Drugs，1，6；Romanelli M.N.等人，ArzheimForsch./Drug Res.，1993，43，913；Kaumann A.等人，Naunyn-Schmiedeberg′s.1991，344，150；以及Romanelli M.N.等人，Arzheim Forsch./Drug Res.，1993，43，913)。
WO 94/00449公開了作為5-HT4激動劑或拮抗劑及/或5-HT3拮抗劑的苯并咪唑酮化合物。尤其，公開了以下式表示的化合物作為實例10
化合物A目前需要提供為良好藥物候選物的新穎5-HT4激動劑。尤其是，優(yōu)選的化合物應(yīng)與5-HT4受體強效結(jié)合，同時對其他受體幾乎不顯示親和性，并且顯示作為激動劑的功能性活性。它們應(yīng)從胃腸道充分的吸收、在代謝上穩(wěn)定且具有有利的藥物動力學(xué)性質(zhì)。當靶向中樞神經(jīng)系統(tǒng)的受體時，則它們應(yīng)可自由地穿過血腦屏障，并且當選擇性地靶向外周神經(jīng)系統(tǒng)中的受體時，則它們不應(yīng)穿過血腦屏障。它們應(yīng)無毒且證明幾乎沒有副作用。再者，理想的藥物候選物應(yīng)以穩(wěn)定、非-吸水性及容易配制的物理形式存在。

發(fā)明內(nèi)容
在本發(fā)明中，已發(fā)現(xiàn)(1)以哌啶/吡咯烷環(huán)置換喹寧環(huán)提高了對5-HT4受體的親和性，和/或(2)導(dǎo)入羧基部分降低了對多非利特的親和性，使得防止QT延長。
因此，現(xiàn)在令人意外地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物相比較于現(xiàn)有技術(shù)，具有更強的選擇性5-HT4激動活性和/或提高的多非利特親和性，并且因此可用于治療由5-HT4活性介導(dǎo)的疾病狀況，如胃食管反流病、胃腸疾病、胃動力障礙、非潰瘍性消化不良、功能性消化不良、腸易激綜合征(IBS)、便秘、消化不良、食管炎、胃食管疾病、惡心、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、阿爾茲海默氏病、認知障礙、嘔吐、偏頭痛、神經(jīng)學(xué)疾病、疼痛、心血管疾病、心力衰竭、心律失常、糖尿病及呼吸暫停綜合征(尤其是因阿片類物質(zhì)給藥引起)。
本發(fā)明提供下式(I)的化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中A為具有1至4個碳原子的亞烷基，該亞烷基未被取代或被1至4個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3-、4-、5-或6-元環(huán)；R1為異丙基或環(huán)戊基；R2為氫原子、鹵素原子或羥基；R3為羧基、四唑基、5-氧代-1，2，4-二唑-3-基或5-氧代-1，2，4-噻二唑-3-基；并且m為整數(shù)1或2。
本發(fā)明的一個實施方案提供如上所述的式(I)化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中A為具有1至4個碳原子的亞烷基，該亞烷基未被取代或被1至4個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的6-元環(huán)；R1為異丙基或環(huán)戊基；R2為氫原子、鹵素原子或羥基；R3為羧基、四唑基、5-氧代-1，2，4-二唑-3-基或5-氧代-1，2，4-噻二唑-3-基；并且
m為整數(shù)1或2。
本發(fā)明的一個實施方案提供如上所述的式(I)化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中A為具有1至4個碳原子的亞烷基，該亞烷基被1至4個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的5-元環(huán)；R1為異丙基或環(huán)戊基；R2為氫原子、鹵素原子或羥基；R3為羧基、四唑基、5-氧代-1，2，4-二唑-3-基或5-氧代-1，2，4-噻二唑-3-基；并且m為整數(shù)1或2。
在本發(fā)明的一個實施方案提供如上所述的式(I)化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中A為具有1至4個碳原子的亞烷基，該亞烷基被1至4個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3至4-元環(huán)；R1為異丙基或環(huán)戊基；R2為氫原子、鹵素原子或羥基；R3為羧基、四唑基、5-氧代-1，2，4-二唑-3-基或5-氧代-1，2，4-噻二唑-3-基；并且m為整數(shù)1或2。
而且，本發(fā)明提供式(I)化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物(各如本文所述)在制造用于治療由5-HT4受體活性，尤其是5-HT4激動活性介導(dǎo)的疾病狀況的藥物中的用途。
優(yōu)選地，本發(fā)明亦提供式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物(各如本文所述)在制造用于治療選自胃食管反流病、胃腸疾病、胃動力障礙、非潰瘍性消化不良、功能性消化不良、腸易激綜合征(IBS)、便秘、消化不良、食管炎、胃食管疾病、惡心、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、阿爾茲海默氏病、認知障礙、嘔吐、偏頭痛、神經(jīng)學(xué)疾病、疼痛、心血管疾病、心力衰竭、心律失常、糖尿病及呼吸暫停綜合征的疾病的藥物中的用途。
而且，本發(fā)明提供藥物組合物，它包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物(各如本文所述)，以及用于該化合物的藥學(xué)上可接受的載體。
再者，本發(fā)明提供一種治療哺乳動物受治療者中由5-HT4受體活性介導(dǎo)的疾病狀況的方法，該方法包括對需要該治療的哺乳動物給予治療有效量的各如本文所述的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物。
由5-HT4受體活性介導(dǎo)的疾病狀況的實例包括(但不限于)胃食管反流病、胃腸疾病、胃動力障礙、非潰瘍性消化不良、功能性消化不良、腸易激綜合征(IBS)、便秘、消化不良、食管炎、胃食管疾病、惡心、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、阿爾茲海默氏病、認知障礙、嘔吐、偏頭痛、神經(jīng)學(xué)疾病、疼痛、心血管疾病、心力衰竭、心律失常、糖尿病及呼吸暫停綜合征。
而且，本發(fā)明提供式(XI)的化合物 或其鹽，其中R2為氫原子、羥基或鹵素原子；R6為氫原子或氨基-保護基；Y為具有1至4個碳原子的烷氧基、具有2至8個碳原子的二烷基氨基、咪唑基、鄰苯二甲酰亞氨基、琥珀酰亞氨基或磺?；?；并且m為1或2。
而且，本發(fā)明提供式(IXa)的化合物 或其鹽，其中A為具有1至4個碳原子的亞烷基，該亞烷基未被取代或被1至4個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3至6-元環(huán)；R2為氫原子、羥基或鹵素原子；R3為羥基或羧基-保護基；R6為氫原子或氨基-保護基；并且m為1或2。
本發(fā)明的化合物可顯示較低的毒性、良好的吸收、分布、良好的溶解性、較低的蛋白質(zhì)結(jié)合親和性、較低的藥物-藥物相互作用及良好的代謝穩(wěn)定性。
具體實施例方式
在本發(fā)明的化合物中當A為具有1至4個碳原子的亞烷基時，其可為直鏈基，并且實例包括(但不限于)亞甲基、亞乙基、三亞甲基及四亞甲基。這些中優(yōu)選亞甲基及亞乙基，并且最優(yōu)選者為亞乙基。
當A的取代基為具有1至4個碳原子的烷基時，其可為直鏈或支鏈基，并且實例包括(但不限于)甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基及叔丁基。這些中優(yōu)選者為具有1至3個碳原子的烷基；更優(yōu)選者為甲基、乙基、丙基及異丙基；并且最優(yōu)選者為甲基及乙基。
當Y的取代基為具有1至4個碳原子的烷氧基時，此代表被所述烷基取代的氧原子，并且實例包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基及叔丁氧基。這些中，優(yōu)選者為具有1至2個碳原子的烷基；并且更優(yōu)選者為甲氧基。
當Y的取代基為具有2至8個碳原子的二烷基氨基時，此代表被兩個所述烷基取代的氨基，并且實例包括(但不限于)二甲氨基、N-甲基-N-乙基氨基、二乙氨基、二丙氨基、二異丙氨基、二丁氨基、二異丁氨基及N，N-二(1-甲基丙基)氨基。這些中，優(yōu)選者為具有2至4個碳原子的二烷基氨基；更優(yōu)選者為二甲氨基、N-甲基-N-乙基氨基及二乙氨基。
當A的取代基為具有1至4個碳原子的羥基-烷基時，其可為直鏈或支鏈基，并且實例包括(但不限于)羥甲基、2-羥乙基、1-羥乙基、3-羥丙基、2-羥丙基、2-羥基-1-甲基乙基、4-羥丁基、3-羥丁基、2-羥丁基、3-羥基-2-甲基丙基及3-羥基-1-甲基丙基。這些中，優(yōu)選者為具有1至3個碳原子的羥基-烷基；更優(yōu)選者為羥甲基、2-羥乙基及2-羥丙基，并且最優(yōu)選者為羥甲基及2-羥乙基。
當A的取代基為具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基時，其可為直鏈或支鏈基，并且實例包括(但不限于)甲氧基甲基、乙氧基甲基、2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基、1-甲氧基乙基、3-甲氧基丙基、3-乙氧基丙基、2-甲氧基丙基、2-甲氧基-1-甲基乙基、4-甲氧基丁基、4-乙氧基丁基、3-甲氧基丁基、2-甲氧基丁基、3-甲氧基-2-甲基丙基及3-甲氧基-1-甲基丙基。這些中，優(yōu)選者為具有2至4個碳原子的烷基氧基-烷基；更優(yōu)選者為甲氧基甲基、2-甲氧基乙基及3-甲氧基丙基；并且最優(yōu)選者為2-甲氧基乙基及3-甲氧基丙基。
當任意2個非-鹵素取代基可與它們所連接的碳原子一起形成任選含有至少一選自N、O及S的雜原子的3、4、5或6-元環(huán)時，該環(huán)可為環(huán)烷基或雜環(huán)基，并且實例包含環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)丁基、環(huán)己基、甲基環(huán)丙基、乙基環(huán)丙基、甲基環(huán)丁基、甲基環(huán)戊基、甲基環(huán)己基、乙基環(huán)己基、羥基環(huán)丙基、羥基環(huán)丁基、羥基環(huán)戊基、羥基環(huán)己基、甲氧基環(huán)丙基、甲氧基環(huán)丁基、甲氧基環(huán)戊基、甲氧基環(huán)己基、四氫呋喃基及四氫吡喃基，優(yōu)選為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、甲氧基環(huán)己基及四氫吡喃基，并且最優(yōu)選為環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基及四氫吡喃基。
當R6為氨基-保護基時，其代表能夠被用化學(xué)方法如氫解、水解、電解或光解而裂解的保護基，并且該氨基-保護基被描述在由T.W.Greene等人(John Wiley & Sons，1999)編輯的有機合成保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)中，并且實例包括(但不限于)芐基、C2H5O(C＝O)-、CH3(C＝O)-、叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、芐基氧基羰基及叔丁氧基羰基。這些基團中，優(yōu)選者為叔丁氧基羰基。
當R4為羧基-保護基時，其代表能夠被用化學(xué)方法如氫解、水解、電解或光解而裂解的保護基，并且該羧基-保護基描述在由T.W.Greene等人(John Wiley & Sons，1999)編輯的有機合成保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)中，并且實例包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、叔丁氧基、甲氧基甲氧基、2，2，2-三氯乙氧基、芐基氧基、二苯基甲氧基、三甲基硅烷基氧基、叔丁基二甲基硅烷基氧基及烯丙氧基，這些基團中，優(yōu)選者為叔丁氧基、甲氧基或乙氧基。
當R1及A的取代基代表鹵素原子時，這些可為氟、氯、溴或碘原子，這些中，優(yōu)選者為氟或氯原子。
本文中所用的術(shù)語“治療”是指治愈、減輕及預(yù)防性治療，包括逆轉(zhuǎn)、減輕、預(yù)防該術(shù)語適用的障礙或疾病狀況或者障礙或疾病狀況的一種或多種癥狀，或抑制其進展。
本文中所用的冠詞″一″是指所指對象的單數(shù)和復(fù)數(shù)形式二者，除非另有說明。
優(yōu)選類別的本發(fā)明化合物為各如本文所述的式(I)的那些化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中(A)R1為異丙基；
(B)R2為氫原子、氟原子或羥基；(C)R2為氫原子；(D)R3為羧基或四唑基；(E)R3為羧基；(F)A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基未被取代或被1至2個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的6-元環(huán)；(G)A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的偕取代基(即取代在同一碳原子上的取代基)取代，其中非鹵素偕取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的6-元環(huán)；(H)A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個該取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的5-元環(huán)；(I)A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的偕取代基取代，其中該偕取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的5-元環(huán)；(J)A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中該取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3至4-元環(huán)；(K)A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的偕取代基取代，其中該偕取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3至4-元環(huán)；(L)A為 (M)A為 (N)A為
(O)A為 (P)A為 (Q)m為整數(shù)2。
本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物為式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中(R)R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基或四唑基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基未被取代或被1至2個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的6-元環(huán)；并且m為整數(shù)2；(S)R1為異丙基；R2為氫原子；R3為羧基或四唑基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的偕取代基取代，其中該偕取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的6-元環(huán)；并且m為整數(shù)2；(T)R1為異丙基；R2為氫原子；R3為羧基或四唑基；A為 并且m為整數(shù)2；(U)R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基未被取代或被1至2個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素偕取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的6-元環(huán)；并且m為整數(shù)2；(V)R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基；A為 并且m為整數(shù)2；(W)R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基或四唑基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個該取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的5-元環(huán)；并且m為整數(shù)2；(X)R1為異丙基；R2為氫原子；R3為羧基或四唑基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的偕取代基取代，其中該偕取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的5-元環(huán)；并且m為整數(shù)2；(Y)R1為異丙基；R3為氫原子；R3為羧基或四唑基；A為 并且m為整數(shù)2；(Z)R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個該取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的5-元環(huán)；并且m為整數(shù)2；(AA)R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基；A為 并且m為整數(shù)2；(AB)R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基或四唑基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中該取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3至4-元環(huán)；并且m為整數(shù)2；(AC)R1為異丙基；R2為氫原子；R3為羧基或四唑基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的偕取代基取代，其中該偕取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3至4-元環(huán)；并且m為整數(shù)2；(AD)R1為異丙基；R2為氫原子；R3為羧基或四唑基；A為 并且m為整數(shù)2；(AE)R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非-鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3至4-元環(huán)；并且m為整數(shù)2；(AF)R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基；A為 并且m為整數(shù)2；(AG)R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基；A為 ；且m為整數(shù)2；(AH)R1為異丙基；R2為氫原子；R3為羧基或四唑基；A為 ；且m為整數(shù)2。
本發(fā)明的一個實施方案提供選自由以下化合物組成的組的化合物4-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸；1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸；1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸；1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丙烷羧酸；
1-{[4-羥基-4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸；1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸；以及其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物。
本發(fā)明的一個實施方案提供由選自由以下化合物組成的組的化合物4-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸；1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸；及其藥學(xué)上可接受的鹽及溶劑合物。
本發(fā)明的一個實施方案提供選自由以下化合物組成的組的化合物1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸；及其藥學(xué)上可接受的鹽及溶劑合物。
本發(fā)明的一個實施方案提供選自由以下化合物組成的組的化合物1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丙烷羧酸；1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸；及其藥學(xué)上可接受的鹽及溶劑合物。
式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包含其酸加成鹽及堿鹽(包含二鹽)。
適用的酸加成鹽由形成無毒鹽的酸形成。實例包含乙酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、六氟磷酸鹽、海苯酸鹽、鹽酸鹽/氯化物、氫溴酸鹽/溴化物、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘酸鹽(naphthylate)、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、葡萄糖二酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽及三氟乙酸鹽。
適用的堿鹽由形成無毒鹽的堿形成。實例包含鋁鹽、精氨酸鹽、二芐基乙二胺鹽、鈣鹽、膽堿鹽、二乙胺鹽、二醇胺鹽、甘氨酸鹽、賴氨酸鹽、鎂鹽、葡甲胺鹽、乙醇胺鹽、鉀鹽、鈉鹽、氨基丁三醇鹽及鋅鹽。
關(guān)于適用鹽的評論，見Stahl及Wermuth的“藥物用鹽手冊性質(zhì)、選擇及用途(Handbook of Pharmaceutical SaltsProperties，Selection，and Use)”(Wiley-VCH，Weinheim，德國，2002)。式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽可通過將式(I)化合物根據(jù)需要與所需的適用酸或堿的溶液混合在一起而輕易地制備。鹽可從溶液中沉淀且通過過濾收集，或可通過蒸發(fā)溶劑而回收。鹽中的離子化程度可從完全離子化變化至幾乎未離子化。
本發(fā)明的化合物可以非溶劑合的形式和溶劑合的形式存在。在本文中使用術(shù)語“溶劑合物”描述包含本發(fā)明的化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受的溶劑分子(例如，乙醇)的分子絡(luò)合物。當該溶劑為水時，使用術(shù)語“水合物”。
本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的溶劑合物包含水合物及其中的結(jié)晶溶劑可同位素取代，例如D2O、d6-丙酮、d6-DMSO的溶劑合物。
包含在本發(fā)明范圍中的是絡(luò)合物例如包合物，藥物-主體包合配合物，其中，對照于上述的溶劑合物，藥物和主體以化學(xué)計量或非化學(xué)計量的量存在。也被包括的是包含二種或更多種以化學(xué)計量或非化學(xué)計量的量存在的有機和/或無機成分的藥物的配合物。所得絡(luò)合物可是離子化的、部分離子化的或非離子化的。關(guān)于這類絡(luò)合物的綜述，參見J Pharm Sci，64(8)，1269-1288(1975年8月)。
以下所有提到式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物包括提到其鹽、溶劑合物和絡(luò)合物及其鹽的溶劑合物和絡(luò)合物。
術(shù)語“本發(fā)明的化合物”除非另有說明，否則是指前文定義的式(I)化合物、下文定義的多晶型物、前藥及其異構(gòu)體(包含旋光、幾何及互變體異構(gòu)體)，以及同位素標示的式(I)化合物。
所謂的式(I)化合物的“前藥”也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。因此某些本身具有很小的或沒有藥理活性的式(I)化合物的衍生物當給予至身體內(nèi)或身體上時，可轉(zhuǎn)化成具有所要活性的式(I)的化合物，例如，通過水解裂解。該衍生物稱為“前藥”。關(guān)于前藥使用的進一步信息可在“Pro-drugs as Novel Delivery Systems，第14冊，ACS SymposiumSeries(T.Higuchi和W Stella)和“Bioreversible Carriers in DrugDesign”，Pergamon Press，1987(E B Roche編輯，AmericanPharmaceutical Association)中找到。
根據(jù)本發(fā)明的前藥可以(例如)通過用本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的如例如H Bundgaard描述在“Design of Prodrugs”(Elsevier，1985)中描述的被稱為“前藥部分”的某些部分，取代存在于式(I)化合物中的適當官能度來生產(chǎn)。
根據(jù)本發(fā)明的一些前藥的例子包括(i)在式(I)的化合物包含羧酸官能度(-COOH)的情形下，其酯，例如，以C1-C8烷基置換氫；(ii)在式(I)的化合物包含醇官能度(-OH)的情形下，其醚，例如，以C1-C6烷酰氧基甲基置換氫；和(iii)在式(I)的化合物包含伯或仲氨基官能度(-NH2或-NHR，其中R≠H)的情形下，其酰胺，例如，以C1-C10烷酰基置換一個或兩個氫。
根據(jù)前述例子和其它前藥類型的例子的置換基團的進一步例子可在上述參考文獻中找到。
最后，式(I)的某些化合物本身可用作式(I)其它化合物的前藥。
包含一個或多個不對稱碳原子的式(I)化合物可存在二種或更多種立體異構(gòu)體。在式(I)化合物包含烯基或亞烯基的情形下，幾何順式/反式(或Z/E)異構(gòu)體是可能的。在化合物包含例如酮或肟基或芳族部分的情況下，可發(fā)生互變異構(gòu)現(xiàn)象(‘互變異構(gòu)現(xiàn)象’)。依此單一化合物可顯現(xiàn)超過一個類型的異構(gòu)現(xiàn)象。
包含在本發(fā)明范圍中的是式(I)化合物的所有立體異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體和互變異構(gòu)形式，包括顯示超過一個類型的異構(gòu)現(xiàn)象的化合物和其一個或多個的混合物。也被包括的是酸加成鹽或堿鹽，其中抗衡離子為旋光活性的，例如，D-乳酸鹽或L-賴氨酸，或外消旋的，例如，DL-酒石酸鹽或DL-精氨酸。
順式/反式異構(gòu)體可通過本領(lǐng)域的技術(shù)人員己知的常規(guī)技術(shù)，例如，色譜法和分級結(jié)晶法分離。
用于單個對映異構(gòu)體的制備/分離的常規(guī)技術(shù)包括從適當?shù)男饧兦绑w的手性合成或使用(例如)手性高效液相色譜法(HPLC)拆分外消旋物(或鹽或衍生物的外消旋物)。
或者，外消旋物(或外消旋前體)可與適當旋光活性化合物(例如，醇)或，在式(I)化合物包含酸性或堿部分的情形中，與酸或堿例如酒石酸或1-苯基乙胺反應(yīng)。所得非對映混合物可通過色譜法和/或分級結(jié)晶法分離并且非對映體的一個或兩個通過本領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的方法可轉(zhuǎn)化成對應(yīng)的純對映異構(gòu)體。
本發(fā)明的手性化合物(和其手性前體)可使用色譜法，典型地HPLC，在不對稱樹脂上用由烴(典型地庚烷或己烷)組成的流動相，包含從0到50％的異丙醇，典型地從2％到20％，以及從0到5％的烷基胺，典型地是0.1％二乙胺，以富集對映體形式獲得。濃縮洗出液提供富集的混合物。
立體異構(gòu)聚集物可通過本領(lǐng)域的技術(shù)人員己知的常規(guī)技術(shù)分離-參見，例如，E L Eliel的“有機化合物的立體化學(xué)(Stereochemistry ofOrganic Compounds)”(維斯，紐約，1994)。
本發(fā)明包括所有藥學(xué)上可接受的式(I)化合物的同位素標記的化合物，其中一個或多個原子被具有相同原子序數(shù)，但原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)與自然界中通常發(fā)現(xiàn)的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同的原子置換。
適合包含在本發(fā)明化合物中的同位素的例子包括氫的同位素，例如2H和3H；碳的同位素，例如11C、13C和14C；氯的同位素，例如36Cl；氟的同位素，例如18F；碘的同位素，例如123I和125I；氮的同位素，例如13N和15N；氧的同位素，例如15O，17O和18O；磷的同位素，例如32P；以及硫的同位素，例如35S。
某些同位素標記的式(I)化合物，例如結(jié)合了放射性同位素的那些，可用于藥物和/或底物組織分布研究。放射性同位素氚，也就是，3H，和碳-14，也就是，14C，鑒于他們?nèi)菀捉Y(jié)合和檢測的現(xiàn)成方法而特別適用于此目的。
被更重的同位素例如氘，也就是，2H取代，可提供由更大代謝穩(wěn)定性導(dǎo)致的某些治療優(yōu)點，例如在活體內(nèi)半衰期增加或減少劑量需求和因此，在某些情況中可以是優(yōu)選的。
用發(fā)射正電子的同位素，例如11C、18F、15O和13N取代，可適用于檢查底物受體占有度的正電子發(fā)射斷層掃描術(shù)(PET)研究。
同位素標記的式(I)化合物通?？赏ㄟ^本領(lǐng)域的技術(shù)人員己知的常規(guī)技術(shù)或類似于在所附實施例及制備中所述的方法類似的方法，使用適合的同位素標記的試劑取代前面所采用的非同位素標記的試劑而制得。
所有式(I)的化合物均可通過以下所示的通用方法中所述的程序或通過實施例部分及制備部分中所述的特定方法，或通過其常規(guī)改進方法來制備。除其中所用的任何新穎中間體外，本發(fā)明亦涵蓋用于制備式(I)化合物的這些方法的任一種或多種。
一般合成本發(fā)明化合物可通過制備該類化合物熟知的各種方法，如按照如下方法A至G中所示的方法進行制備。
以下方法A及B說明了式(I)化合物的制備。方法C至G說明了各種中間體的制備。
除非另外說明，以下方法中的R1、R2、R3、m及A均如上所定義。下文中所用的術(shù)語“保護基”意指羥基、羧基或氨基-保護基，其選自由T.W.Greene等人編輯的有機合成中的保護基(ProtectiveGroups in Organic Synthesis)(John Wiley & Sons，1999)中所述的典型羥基、羧基或氨基-保護基。以下一般合成中所有原料均為市售或通過本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的慣用方法獲得，如European Journal ofMedicinal Chemistry，12(1)，87-91；1977，并且將其公開內(nèi)容并入本文供參考。
方法A該方法說明式(I)化合物的制備。
在反應(yīng)方案A中，R3a為如上所定義的R3或式-C(＝O)-R4基，其中R4為羧基保護基。
本文中所用的術(shù)語″羧基-保護基″意指能通過化學(xué)方法裂解的保護基，如氫解、水解、電解或光解，并且該羧基保護基方法敘述于T.W.Greene等人(John Wiley & Sons，1999)出版的有機合成中的保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)中。慣用的羧基-保護基包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、叔丁氧基、甲氧基甲氧基、2，2，2-三氯乙氧基、芐基氧基、二苯基甲氧基、三甲基硅烷基氧基、叔丁基二甲基硅烷基氧基及烯丙氧基。這些基團中，優(yōu)選叔丁氧基、甲氧基或乙氧基。
步驟A1在該步驟中，期望的本發(fā)明式(I)化合物通過以式(III)的化合物使式(II)的化合物羰基化來制備。式(II)的化合物為商購。式(III)的化合物可依據(jù)以下所列的方法C制備。
反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度上)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)鹵化的烴，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷，芳族烴如苯、甲苯及硝基苯；醚類如二乙醚、二異丙基醚、四氫呋喃及二烷；及酰胺如N，N-二甲基甲酰胺及N，N-二甲基乙酰胺。這些溶劑中優(yōu)選二氯甲烷。
對所用羰基化劑的性質(zhì)同樣沒有特別限制，并且該類反應(yīng)中通常使用的任何羰基化劑可相等地用于本文中。該羰基化劑的實例包括(但不限于)咪唑衍生物如N，N′-羰基二咪唑(CDI)；氯甲酸酯如氯鉀酸三氯甲酯及氯甲酸4-硝基苯酯；尿素及三光氣。這些中優(yōu)選者為氯甲酸4-硝基苯酯。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不重要。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，方便地是在約-78℃至約120℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料及溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時的時間一般將足夠。
若R3a為式-C(＝O)-R4基，進行去保護反應(yīng)將獲得羧基。該反應(yīng)詳述于T.W.Greene等人的有機合成的保護基(Protective Groups inOrganic Synthesis)，369-453，(1999)中，該公開并入本文供參考。以下列舉涉及保護叔丁基的一般反應(yīng)。
去保護反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度上)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)鹵化的烴，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷，以及芳族烴如苯、甲苯及硝基苯。這些溶劑中優(yōu)選者為鹵化的烴。
去保護反應(yīng)在酸存在下進行。對所用酸的性質(zhì)同樣沒有特別的限制，并且該類反應(yīng)中通常使用的任何酸可相等地用于本文中。該酸的實例包括(但不限于)酸如鹽酸、乙酸、對-甲苯磺酸或三氟乙酸。這些中優(yōu)選者為三氟乙酸。
去保護反應(yīng)可在自由基去除劑存在下進行，對所用自由基去除劑的性質(zhì)同樣沒有特別限制，并且該類反應(yīng)中慣用的自由基去除劑可等同地用于本文中。該自由基去除劑的實例包括(但不限于)HBr、二甲基亞砜或(CH3CH2)3SiH。這些中優(yōu)選者為(CH3CH2)3SiH。
去保護反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不重要。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約100℃，更優(yōu)選在約0℃至約50℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料及溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時，更優(yōu)選約1小時至約24小時的時間一般將足夠。
方法R本方法說明所需式(I)化合物的另一種制備方法。
反應(yīng)方案R 在反應(yīng)方案B中，R3a如以上定義，R5為氨基-保護基，Aa如上面定義的A或具有1至3個碳原子的亞烷基，該亞烷基未被取代或被1至4個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中該取代基的2個可任選與碳原子一起形成3至6元環(huán)，并且X為鹵素原子如碘原子、氯原子或溴原子。
本文中所用的術(shù)語″氨基-保護基″意指能通過化學(xué)方法裂解的保護基，如氫解、水解、電解或光解，并且該氨基保護基被敘述于T.W.Greene等人(John Wiley & Sons，1999)出版的有機合成中的保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)中。慣用的氨基-保護基包括(但不限于)芐基、C2H5O(C＝O)-、CH3(C＝O)-、叔丁基二甲基硅烷基、叔丁基二苯基硅烷基、芐基氧基羰基及叔丁氧基羰基。這些基中優(yōu)選者為叔丁氧基羰基。
步驟B1在該步驟中，式(V)的化合物通過使式(IV)的化合物(其可通過例如與方法A中所述自式(II)化合物制備式(I)化合物類似的方法制備)去保護制備。該去保護方法被敘述于T.W.Greene等人[有機合成中的保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)，494-653，(1999)]中，該公開并入本文供參考。以下列舉涉及保護叔丁氧基羰基的典型方法。
該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度上)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)鹵化的烴，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷，以及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。這些溶劑中優(yōu)選者為醇。
該反應(yīng)在過量的酸存在下進行。對所用酸的性質(zhì)同樣沒有特別的限制，并且該類反應(yīng)中慣用的任何酸可相等地用于本文中。該酸的實例包括(但不限于)酸如鹽酸或三氟乙酸。這些中優(yōu)選者為鹽酸。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不重要。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約100℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料及溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時的時間通常將足夠。
步驟B2在該步驟中，期望的式(I)化合物通過使如步驟B1中所述而制備的式(V)化合物與式(VI)化合物偶合(B2-a)，或通過使式(V)的化合物與式(VII)的化合物還原性氨基化(B2-b)來制備。
(B2-a)與式(V)化合物的偶合該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度上)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)鹵化的烴，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醚類如乙醚、二異丙基醚、四氫呋喃及二烷；胺如N-甲基嗎啉、三乙胺、三丙基胺、三丁基胺、二異丙基乙胺、二環(huán)己基胺、N-甲基哌啶、N-甲基吡咯烷、吡啶、4-吡咯烷基吡啶、N，N-二甲基苯胺及N，N-二乙基苯胺；及酰胺如N，N-二甲基甲酰胺及N，N-二甲基乙酰胺。這些中優(yōu)選者為N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷。
反應(yīng)在堿存在下進行。對所用堿的性質(zhì)同樣沒有特別限制，并且該類反應(yīng)中慣用的任何堿可相等地用于本文中。該堿的實例包括(但不限于)胺如N-甲基嗎啉、三乙胺、三丙胺、三丁基胺、二異丙基乙胺、二環(huán)己基胺、N-甲基哌啶、吡啶、4-吡咯烷基吡啶、甲基吡啶、4-(N，N-二甲基氨基)吡啶、2，6-二(叔丁基)-4-甲基吡啶、喹啉、N，N-二甲基苯胺、N，N-二乙基苯胺、1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷(DABCO)及1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)；堿金屬氫化物如氫化鋰、氫化鈉及氫化鉀；及堿金屬烷氧化物如甲醇鈉、乙醇鈉、叔丁醇鉀。這些中優(yōu)選者為二異丙基乙胺。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不重要。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約120℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料及溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約48小時的時間通常將足夠。
(B2-b)還原性氨基化該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度上)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)鹵化的烴，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醚類如二乙醚、二異丙基醚、二甲氧基乙烷、四氫呋喃及二烷；醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇；乙酸及水。這些溶劑中優(yōu)選者為鹵化的烴。
反應(yīng)在還原試劑存在下進行。對所用還原試劑的性質(zhì)同樣沒有特別限制，并且該類反應(yīng)中慣用的任何還原試劑可相等地用于本文中。該還原試劑的實例包括(但不限于)硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉及三乙酰氧基硼氫化鈉。這些中優(yōu)選者為三乙酰氧基硼氫化鈉。反應(yīng)所需還原試劑的量亦可依許多因素廣泛的改變，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在優(yōu)選的條件下進行，還原試劑與原料1比3的化學(xué)當量比通常將足夠。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不重要。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約-20℃至約60℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時的時間通常將足夠。
若R3a為式-C(＝O)-R4基，則進行去保護反應(yīng)將獲得羧基。該反應(yīng)可在如方法A的步驟A1中所述的相同條件下進行。
方法C該方法說明式(III)化合物的制備。
反應(yīng)方案C 在反應(yīng)方案C中，X、A、Aa、R3a及R6均如以上定義。因此，當R3a為-C(＝O)-R4時，上述式(IX)化合物如下。
步驟C1在該步驟中，式(IX)的化合物通過使式(VIII)的化合物與式(VI)的化合物偶合或通過以式(VII)的化合物使式(VIII)的化合物還原性氨基化來制備。式(VIII)的化合物可依據(jù)以下所列方法F及G制備或商購。
步驟C2在該步驟中，式(III)的化合物通過使如步驟C1中所述而制備的式(IX)化合物去保護來制備。該反應(yīng)可在如方法B的步驟B1中所述相同的條件下進行。
方法D該方法說明式(IIIa)化合物的制備。
反應(yīng)方案D 在反應(yīng)方案D中，R3a、R4、R6及Y各如上所述的定義，并且R7為硅烷基如叔丁基二甲基硅烷基、叔丁基二苯基硅烷基、三乙基硅烷基或三甲基硅烷基，優(yōu)選為三甲基硅烷基；R8及R9獨立代表鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基，其中R8及R9可任選與其連接的碳原子一起形成3至6-元環(huán)；Ab為如上述定義的A，條件為不包含亞甲基及經(jīng)取代的亞甲基。
步驟D1在該步驟中，式(XI)的化合物通過使式(VIII)的化合物與式(X)的化合物在低聚甲醛存在下縮合來制備。式(VIII)的化合物可依據(jù)方法F和G制備或商購。
若Y不為烷氧基，則反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度上)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)鹵化的烴，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。這些中優(yōu)選者為二氯甲烷或乙醇。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不關(guān)鍵。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約120℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料及溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約48小時的時間一般將足夠。
步驟D2在該步驟中，式(IIIa)的化合物通過使式(XI)的化合物與式(XII)的化合物經(jīng)曼尼希反應(yīng)來制備。
該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)鹵化的烴，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醚如二乙醚、二異丙基醚、四氫呋喃及二烷；腈類如乙腈及芐腈；及酰胺如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺及六甲基磷酸三酰胺。這些溶劑中，優(yōu)選者為二氯甲烷。
該反應(yīng)在路易斯酸存在下進行。對所用路易斯酸的性質(zhì)同樣沒有特別限制，并且該類型反應(yīng)中通常使用的任何路易斯酸可相等地用于本文中。該路易斯酸的實例包括(但不限于)BF3、AlCl3、FeCl3、MgCl2、AgCl、Fe(NO3)3、CF3SO3Si(CH3)3、Yb(CF3SO3)3及SnCl4。這些中，優(yōu)選者為Yb(CF3SO3)3、MgCl2或CF3SO3Si(CH3)3。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不關(guān)鍵。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約100℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時的時間一般將足夠。
方法E該方法說明式(III)化合物(其中R2為氫原子且A為Ab)的制備。
反應(yīng)方案E 在反應(yīng)方案E中，Aa、Ab及R3a各如以上的定義，各R及R′均為具有1至4個碳原子的烷基，優(yōu)選為甲基，或芳烷基如芐基或苯乙基，優(yōu)選為芐基。
步驟E1在該步驟中，式(XIV)的化合物通過使式(XIII)化合物(商購)的氰基還原來制備。
該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)醚類如二乙醚、二異丙基醚、四氫呋喃及二烷；芳族烴如苯、甲苯及硝基苯；及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。這些中優(yōu)選者為甲醇。
該反應(yīng)在還原試劑存在下進行。對所用還原試劑的性質(zhì)同樣沒有特別限制，并且該類反應(yīng)中慣用的任何還原試劑可相等地用于本文中。該還原試劑的實例包括(但不限于)金屬硼氫化物如硼氫化鈉及氰基硼氫化鈉；氫氣與催化劑如鈀-炭、鉑及阮內(nèi)鎳的組合；及氫化物化合物如氫化鋰鋁及氫化二異丁基鋁。這些中，優(yōu)選者為阮內(nèi)鎳。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不重要。優(yōu)選的是的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約100℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時的時間通常將足夠。
步驟E2在該步驟中，式(XVI)的化合物通過使可商外購的式(XV)化合物與式(XIV)化合物反應(yīng)來制備。
該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)水及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。這些中優(yōu)選者為水及乙醇的混合物。
該反應(yīng)在堿存在下進行。對所用堿的性質(zhì)同樣沒有特別限制，并且該類反應(yīng)中慣用的任何堿可相等地用于本文中。該堿的實例包括(但不限于)堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰、氫氧化鈉及氫氧化鉀；堿金屬烷氧化物如甲醇鈉、乙醇鈉、叔丁醇鉀及堿金屬碳酸鹽，如碳酸鋰、碳酸鈉及碳酸鉀。這些中優(yōu)選者為碳酸鉀。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不關(guān)鍵。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約120℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時的時間通常將足夠。
步驟E3在該步驟中，式(XVII)的化合物通過使式(XVI)化合物的羰基在對-甲苯磺酰基甲基異氰化物存在下轉(zhuǎn)化成氰基而制備。
該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)醚類如二乙醚、二異丙基醚、乙二醇二甲基醚、四氫呋喃及二烷；及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。這些中優(yōu)選者為乙二醇二甲基醚與乙醇的混合物。
該反應(yīng)在堿存在下進行。同樣對所用堿的性質(zhì)并沒有特別限制，并且該類反應(yīng)中慣用的任何堿可相等地用于本文中。該堿的實例包括(但不限于)堿金屬烷氧化物如甲醇鈉、乙醇鈉及叔丁醇鉀。這些中優(yōu)選者為叔丁醇鉀。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不關(guān)鍵。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約100℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時的時間通常將足夠。
步驟E4在該步驟中，式(IIIb)的化合物通過使式(XVII)化合物的氰基還原來制備。該反應(yīng)可在如方法E的步驟E1中所述相同條件下進行。
方法F該方法說明式(VIII)化合物(其中R2為鹵素原子)的制備。
反應(yīng)方案F 在反應(yīng)方案F中，R2a為鹵素原子；R6定義如上，并且R10為氨基保護基，優(yōu)選為苯甲酰基。
步驟F1
在該步驟中，式(XIX)的化合物通過使式(XVIII)化合物的羰基轉(zhuǎn)化成環(huán)氧基來制備。
該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)酰胺如甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺及六甲基磷三酰胺；亞砜如二甲基亞砜或環(huán)丁砜。這些溶劑中優(yōu)選者為二甲基亞砜。
該反應(yīng)在堿存在下進行。對所用堿的性質(zhì)同樣沒有特別限制，并且該類反應(yīng)中慣用的任何堿可相等地用于本文中。該堿的實例包括(但不限于)堿金屬烷氧化物如甲醇鈉、乙醇鈉及叔丁醇鉀；及堿金屬碳酸鹽，如碳酸鋰、碳酸鈉及碳酸鉀。這些中優(yōu)選者為叔丁醇鉀。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不關(guān)鍵。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約100℃，更優(yōu)選在約10℃至約50℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時，更優(yōu)選約60分鐘至約12小時的時間通常將足夠。
步驟F2在該步驟中，式(XX)的化合物通過使鹵化氫與式(XIX)的化合物反應(yīng)來制備。
該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)醚類如二乙醚、二異丙基醚、四氫呋喃及二烷；酰胺如甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺及六甲基磷三酰胺。這些溶劑中優(yōu)選者為四氫呋喃。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不關(guān)鍵。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約100℃，更優(yōu)選約10℃至約50℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時，更優(yōu)選約60分鐘至約12小時的時間通常將足夠。
步驟F3在該步驟中，式(XXI)通過使式(XX)的化合物與疊氮化鈉(F3-a)反應(yīng)，接著使疊氮基(F3-b)還原來制備。
(F3-a)與疊氮化鈉反應(yīng)該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)鹵化的烴，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醚類如二乙醚、二異丙基醚、四氫呋喃及二烷；酰胺如甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺及六甲基磷三酰胺；及亞砜如二甲基亞砜及環(huán)丁砜。這些溶劑中優(yōu)選者為N，N-二甲基甲酰胺。
添加疊氮化鈉之前，通過添加試劑如三氟甲烷磺酰氯、甲烷磺酰氯及甲苯磺酰氯，將羥基轉(zhuǎn)化成離去基團，如甲基磺?；?、三氟甲基磺酰基及4-甲基苯基磺?；?。這些試劑中，優(yōu)選者為甲烷磺酰氯。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不關(guān)鍵。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約120℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料及溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時的時間一般將足夠。
(F3-h)還原該反應(yīng)可在如方法E的步驟E1中所述的相同的條件下進行。
步驟F4在該步驟中，式(VIIIa)的化合物通過將氨基保護基R6導(dǎo)入伯氨基中(F4-a)，并且使仲氨基的氨基保護基R10選擇性的去保護(F4-b)來制備。
(F4-a)氨基保護基的導(dǎo)入該反應(yīng)由T.W.Greene等人，[有機合成的保護基(ProtectiveGroups in Organic Synthesis)，494-653，(1999)]詳述，該公開并入本文供參考。以下列舉涉及保護基團叔丁氧基羰基的典型反應(yīng)。
該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)水、醚類如二乙醚、二異丙基醚、四氫呋喃及二烷；及亞砜如二甲基亞砜及環(huán)丁砜。這些溶劑中優(yōu)選者為四氫呋喃。
該反應(yīng)一般在試劑存在下進行。對所用試劑的性質(zhì)同樣沒有特別限制，并且該類反應(yīng)中慣用的任何試劑可相等地用于本文中。該試劑的實例包括(但不限于)碳酸二叔丁酯及1-(叔丁氧基羰基)苯并三唑。這些中，優(yōu)選者為碳酸二叔丁酯。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不重要。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約120℃，更優(yōu)選約20℃至約80℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時，更優(yōu)選約60分鐘至約12小時的時間通常將足夠。
(F4-b)去保護該方法由T.W.Greene等人，有機合成的保護基(ProtectiveGroups in Organic Synthesis，494-653，(1999)詳述，該公開并入本文供參考。以下列舉在氫氣及催化劑如鈀-炭或鉑的組合存在下，涉及苯甲酰基保護基的典型方法。
該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)鹵化的烴，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇；及醚類如二乙醚、二異丙基醚、四氫呋喃及二烷。這些溶劑中優(yōu)選者為甲醇。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不重要。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約120℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時的時間通常將足夠。
方法G該方法說明其中R2為羥基的式(VIII)化合物的制備。
反應(yīng)方案G 在反應(yīng)圖G中，R6及R10各如以上定義。
步驟G1在該步驟中，式(XXII)化合物通過使式(XVIII)化合物(商購)的羰基與三甲基硅烷基氰化物反應(yīng)來制備。
該反應(yīng)通常且優(yōu)選在溶劑存在下進行。對使用的溶劑的性質(zhì)并沒有特別的限制，只要對涉及的反應(yīng)或試劑沒有負面作用且它可溶解試劑(至少某種程度)即可。適用溶劑的實例包括(但不限于)芳族烴如苯、甲苯及硝基苯；鹵化的烴如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醚類如二乙醚、二異丙基醚、乙二醇二甲基醚、四氫呋喃及二烷；腈類如乙腈及芐腈；及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。這些中優(yōu)選者為甲苯。
該反應(yīng)在試劑存在下進行。對所用試劑的性質(zhì)同樣沒有特別限制，并且該類反應(yīng)中慣用的任何試劑可相等地用于本文中。該試劑的實例包括(但不限于)路易斯酸如BF3、AlCl3、FeCl3、AgCl、ZnI2、Fe(NO3)3、CF3SO3Si(CH3)3、Yb(CF3SO3)3及SnCl4；堿如CaO；醚如18-冠狀醚-6；酸如Amberlite XAD-4樹脂。這些中優(yōu)選者為ZnI2。
該反應(yīng)可在廣溫度范圍中進行，并且精確的反應(yīng)溫度對本發(fā)明并不關(guān)鍵。優(yōu)選的反應(yīng)溫度會隨著溶劑的性質(zhì)及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在約0℃至約100℃的溫度下進行該反應(yīng)。反應(yīng)所需時間亦隨著許多因素廣泛的變化，尤其是反應(yīng)溫度及所用原料與溶劑的性質(zhì)。然而，只要反應(yīng)在上面所列優(yōu)選條件下進行，約5分鐘至約24小時的時間通常將足夠。
步驟G2在該步驟中，式(XXIII)的化合物通過將式(XXII)化合物的氰基轉(zhuǎn)化成氨基，接著使氨基-保護基R10去保護來制備。該反應(yīng)可在如方法E步驟E1及方法F步驟F4中所述相同條件下進行。
步驟G3在該步驟中，式(VIIIb)的化合物通過式(XXIII)化合物的氨基的保護及去保護來制備。該反應(yīng)可在如方法F步驟F4中所述相同條件下進行。
式(I)化合物及上述的制備方法中的中間體可經(jīng)慣用的程序，如蒸餾、再結(jié)晶或色譜法純化來分離和純化。
打算用于藥物用途的本發(fā)明化合物可以結(jié)晶或無定形產(chǎn)品給予。他們可通過該方法例如沉淀、結(jié)晶、冷凍干燥、噴霧干燥或蒸發(fā)干燥以例如，如固體塞、粉末或薄膜形式獲得。微波或輻射頻率干燥可用于此目的。
他們可單獨地或與一種或多種本發(fā)明的其它化合物組合或與一種或多種其它藥物(或其任何組合)組合給予。通常，他們將以與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑結(jié)合的制劑的形式給予。術(shù)語“載體”或“賦形劑”使用在本文中用以描述本發(fā)明化合物以外的任何成分。賦形劑的選擇很大程度上將取決于多種因素例如特殊的給藥模式、賦形劑對溶解度和穩(wěn)定性的影響和劑型的性質(zhì)。
適合于本發(fā)明化合物的遞送的藥物組合物和他們的制備方法對本領(lǐng)域的技術(shù)人員是顯而可知的。該組合物和他們的制備方法可發(fā)現(xiàn)于(例如)Remington′s Pharmaceutical Sciences，第19版本(Mack出版公司，1995)。
口服給藥本發(fā)明的化合物可口服地給予?？诜亟o予可包括吞咽，使得化合物進入胃腸道，或可采用經(jīng)頰或舌下給予，通過該途徑化合物可直接地從嘴進入血流內(nèi)。
適合于口服給予的制劑包括固體制劑例如片劑，包含粒子、液體、或粉末的膠囊、糖錠(包括液體-充填的)、咀嚼錠，多-和納-粒子、凝膠劑、固溶液、脂質(zhì)體、薄膜劑(包括粘膜粘附的)、卵形劑(ovule)、噴霧劑和液體制劑。
液體制劑包括例如懸浮液、溶液、糖漿和酏劑。該制劑可以作為軟或硬膠囊中的填充劑使用和典型地包含載體，例如，水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纖維素或適當?shù)挠秃鸵环N或多種乳化劑和/或懸浮劑。液體制劑也可以通過固體的重構(gòu)(例如，從小藥包)制備。
本發(fā)明的化合物也可以快速溶解、快速崩解劑型例如由Liang和Chen描述于Expert Opinion in Therapeutic Patents，11(6)，981-986(2001)中的那些被使用。
對于片劑劑型，視劑量而定，藥物可占劑型的約1重量％至約80重量％，更典型地占劑型的約5重量％至約60重量％。除藥物以外，片劑通常包含崩解劑。崩解劑的例子包括淀粉羥乙酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聚維酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、微晶纖維素、低級烷基取代的羥丙基纖維素、淀粉、預(yù)膠化淀粉和藻酸鈉。通常，崩解劑將占劑型的約1重量％至約25重量％，優(yōu)選占約5重量％至約20重量％。
粘合劑通常用來賦予片劑制劑的粘著品質(zhì)。適當粘合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然和合成膠、聚乙烯吡咯烷酮、預(yù)膠化淀粉、羥丙基纖維素和羥丙基甲基纖維素。片劑也可包含稀釋劑，例如乳糖(單水合物、噴霧干燥單水合物、無水等等)、甘露醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、微晶纖維素、淀粉和磷酸氫鈣二水合物。
片劑也可任選地包含表面活性劑，例如硫酸月桂基酯鈉和聚山梨酯80，和助流劑例如二氧化硅和滑石。當存在時，表面活性劑可占片劑的約0.2重量％至約5重量％，助流劑可占片劑的約0.2重量％至約1重量％。
片劑通常也包含潤滑劑例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、反丁烯二酸硬脂酯鈉，及硬脂酸鎂與硫酸月桂基酯鈉的混合物。潤滑劑通常占片劑的約0.25重量％到約10重量％，優(yōu)選從約0.5重量％到約3重量％。
其它可能的成分包括抗氧化劑、著色劑、調(diào)味劑、防腐劑和味道-掩蔽劑。
典型片劑包含至多約80％藥物，約10重量％到約90重量％粘合劑，約0重量％到約85重量％稀釋劑，約2重量％到約10重量％崩解劑，和約0.25重量％到約10重量％潤滑劑。
片劑摻合物可直接地壓縮或通過滾筒壓縮形成片劑。片劑摻合物或摻合物的部分或者可在制片之前被濕式-、干式-、或熔化-制粒、熔化凝結(jié)、或擠出。最后制劑可包含一層或多層且可經(jīng)包衣或未經(jīng)包衣；其甚至可裝入膠囊。
片劑的配制由H.Lieberman和L.Lachman討論于“Pharmaceutical Dosage FormsTablets.第1冊”，Marcel Dekker，紐約，1980(SIBN 0-8247-6918-X)
口服給予的固體制劑可配制成即釋的和/或調(diào)釋的。調(diào)釋制劑包括延遲-、持續(xù)-、脈沖-、控制-、靶向和程序化釋放。
為了本發(fā)明目的的適當調(diào)釋的制劑描述在美國專利第6,106,864號中。其它適當?shù)尼尫偶夹g(shù)例如高能量分散體和滲透及涂布粒子的細節(jié)發(fā)現(xiàn)于Verma等人的Pharmaceutical Technology On-line，25(2)，1-14(2001)。使用口香糖以實現(xiàn)控制釋放描述在WO 00/35298中。
腸胃外給藥本發(fā)明的化合物也可直接地給予至血流內(nèi)、至肌肉內(nèi)，或至內(nèi)部器官中。用于胃腸外給予的適當方法包括靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、鞘內(nèi)、心室內(nèi)、尿道內(nèi)、胸骨內(nèi)、顱內(nèi)、肌肉內(nèi)和皮下。胃腸外給予的適當裝置包括針(包括微針)注射器、無針注射器和輸注技術(shù)。
胃腸外制劑典型地為水溶液，其可包含賦形劑例如鹽，碳水化合物和緩沖劑(優(yōu)選約3到約9的pH)，但是，對于一些應(yīng)用，他們可更合適地配制成無菌非水溶液或與適當媒介物例如無菌無熱原水合并使用的干燥形式。
胃腸外制劑在無菌條件下的制備，例如，通過冷凍干燥，可使用本領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的標準藥物技術(shù)輕易地完成。
使用于胃腸外溶液的制劑中的式(I)化合物的溶解度可通過使用適當配制技術(shù)，例如并入溶解度-提高劑來增加。
用于胃腸外給予的制劑可配制成即釋的和/或調(diào)釋的。調(diào)釋制劑包括延遲-、持續(xù)-、脈沖-、控制-、靶向和程序化釋放。因此本發(fā)明的化合物可配制成用于以提供活性化合物的調(diào)釋的植入儲庫形式給藥的固體、半固體、或觸變液體。該制劑的例子包括藥物涂布的斯騰特固定模和PGLA微球。
局部給藥本發(fā)明的化合物也可局部地給予到皮膚或粘膜，也就是，通過皮膚或透皮給藥。用于此目的的典型制劑包括凝膠劑、水凝膠劑、洗液、溶液、霜劑、軟膏、撲粉、敷料、泡沫、薄膜劑、皮膚貼片、糯米紙囊劑、植入物、海綿、纖維、繃帶和微乳液。也可使用脂質(zhì)體。典型的載體包括醇、水、礦物油、液體石蠟、白凡士林、甘油、聚乙二醇和丙二醇。可摻入滲透增強劑-參見，例如，F(xiàn)innin和Morgan的JPharm Sci，88(10)，955-958(1999年10月)。
其它局部給予的裝置包括通過電穿孔法、離子電滲療法、超聲導(dǎo)入法(phonophoresis)、超聲導(dǎo)入(sonophoresis)和微針或無針(例如PowderjectTM、BiojectTM等)注射遞送。
局部給予的制劑可配制成即釋的和/或調(diào)釋的。調(diào)釋制劑包括延遲-、持續(xù)-、脈沖-、控制-、靶向和程序化釋放。
吸入/鼻內(nèi)給藥本發(fā)明的化合物也可鼻內(nèi)給予或通過吸入給予，典型地以干粉的形式(或單獨，以混合物，例如，與乳糖的干摻合物形式，或以混合的成分粒子，例如，與磷脂，例如磷脂酰膽堿混合)從干粉吸入器或以氣溶膠噴霧從加壓容器、泵、噴霧器、霧化器(優(yōu)選使用電液氣動式(electrohydrodynamics)產(chǎn)生細霧的霧化器)，或噴霧器給藥，使用或不使用適當?shù)耐七M劑，例如1，1，1，2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷。為了鼻內(nèi)使用，粉末可包含生物粘著劑，例如，去乙酰殼多糖或環(huán)糊精。
加壓容器、泵、噴霧器、霧化器、或噴霧器包含本發(fā)明化合物的溶液或懸浮液，其包含例如乙醇、乙醇水溶液、或適合于活性成分的分散、溶解化、或延長釋放的替代劑，作為溶劑的推進劑和任選表面活性劑，例如山梨糖醇酐三油酸酯、油酸，或寡聚乳酸。
在使用于干粉或懸浮液制劑之前，將藥物產(chǎn)物微粉化成適合于通過吸入遞送的大小(典型地少于5微米)。這可通過任何適當粉碎方法，例如螺旋噴射碾磨、流化床噴射碾磨、形成納粒子的超臨界流體處理、高壓均化、或噴霧干燥而實現(xiàn)。
用于吸入器或吹入器中的膠囊(利用(例如)明膠或羥丙基甲基纖維素做成)、泡眼和藥筒可配制成包含本發(fā)明的化合物、適當粉基質(zhì)例如乳糖或淀粉和效能修正劑例如l-亮氨酸、甘露醇或硬脂酸鎂的粉末混合物。乳糖可為無水或單水合物的形式，優(yōu)選為后者。其它適當?shù)馁x形劑包括葡聚糖、葡萄糖、麥芽糖、山梨糖醇、木糖醇、果糖、蔗糖和海藻糖。
適合使用于使用電流體動力學(xué)裝置產(chǎn)生細霧的霧化器中的溶液制劑每次驅(qū)動可包含約1微克到約20毫克的本發(fā)明化合物且驅(qū)動體積可從約1微升變化到約100微升。典型的制劑可包含式(I)的化合物、丙二醇、滅菌水、乙醇和氯化鈉。可用以代替丙二醇的替代溶劑包括甘油和聚乙二醇。
適當?shù)某C味劑，例如薄荷醇和左薄荷醇或甜味劑，例如糖精或糖精鈉，可加至該打算用于吸入/鼻內(nèi)給予的本發(fā)明的制劑中。用于吸入/鼻內(nèi)給藥的制劑可使用例如(DL-乳酸-共乙醇酸)(PGLA)配制成即釋的和/或調(diào)釋的。調(diào)釋制劑包括延遲-、持續(xù)-、脈沖-、控制-、靶向和程序化釋放。
若為干粉吸入劑及氣溶膠，則計量單位由輸送計量量的閥決定。本發(fā)明的單位通常經(jīng)安排給予含約1至約100微克式(I)化合物的計量劑量或″吹氣劑量(puff)″?？偟拿咳談┝恳话阍诩s50微克至約20毫克之間，其可以單一劑量或以全天多次(經(jīng)常)分開的劑量給藥。
直腸/陰道內(nèi)給藥本發(fā)明的化合物可通過直腸或陰道給予，例如，以栓劑、陰道栓、或灌腸劑的形式。可可脂為傳統(tǒng)的栓劑基質(zhì)，但是如適當可使用各種替代品。
用于直腸/陰道給藥的制劑可配制成即釋的和/或調(diào)釋的。調(diào)釋制劑包括延遲-、持續(xù)-、脈沖-、控制-、靶向和程序化釋放。
眼睛/耳朵給藥本發(fā)明的化合物也可直接地給予到眼睛或耳朵，典型地于以等張、pH-調(diào)節(jié)、滅菌鹽水中的微粉化懸浮液或溶液的滴液形式。適合眼和耳給予的其它制劑包括軟膏、生物可分解(例如可吸收性凝膠海綿、膠原)和非生物可分解(例如硅氧烷)植入物、糯米紙囊劑、鏡片和粒子或小囊系統(tǒng)，例如囊泡劑(niosomes)或脂質(zhì)體。聚合物例如交聯(lián)聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明質(zhì)酸、纖維聚合物，例如，羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素或甲基纖維素，或雜多醣聚合物，例如，gelan膠，可與防腐劑，例如苯扎氯銨摻合在一起。該制劑也可通過離子電滲療法遞送。
用于眼/耳給藥的制劑可配制成即釋的和/或調(diào)釋的。調(diào)釋制劑包括延遲-、持續(xù)-、脈沖-、控制-、靶向和程序化釋放。
其它技術(shù)本發(fā)明的化合物可與可溶性大分子實體，例如環(huán)糊精和其適當?shù)难苌锘蚝垡叶嫉木酆衔锝M合，以便在以任何上述給藥模式中使用時改良他們的溶解度、溶出速率、蔽掩味道、生物利用度和/或穩(wěn)定性。
藥物-環(huán)糊精絡(luò)合物，例如，被發(fā)現(xiàn)通?？墒褂糜诖蟛糠值膭┬秃徒o藥路徑。包合絡(luò)合物和非包合絡(luò)合物兩者都可使用。作為與藥物的直接絡(luò)合的替代，可使用環(huán)糊精作為輔助添加劑，也就是作為載體、稀釋劑、或增溶劑。最常使用于這些目的是α-，β-和γ-環(huán)糊精，其例子可發(fā)現(xiàn)于國際專利申請?zhí)朩O 91/11172、WO 94/02518和WO 98/55148中。
部件的藥劑盒(kit)只要可能想要給予活性化合物的組合，例如，為了治療特定疾病或病況的目的，在本發(fā)明的范圍內(nèi)的是，二種或更多種藥物組合物，至少其中的一種包含根據(jù)本發(fā)明的化合物，可方便地組合成適合于組合物共給予的藥劑盒的形式。
因此本發(fā)明的藥劑盒包含二種或更多種分開的藥物組合物，至少其中的一種包含根據(jù)本發(fā)明的式(I)化合物，和用于分開地保留該組合物的裝置，例如容器、分開的瓶，或分開箔袋。該類藥劑盒的例子為用于包裝片劑、膠囊等等的熟悉的泡眼包裝。
本發(fā)明的藥劑盒特別地適合于給予不同劑型，例如口服和胃腸外，用于以不同的劑量間隔給予該分開的組合物，或用于逐步增加(titrating)彼此分開的組合物。為有助于順應(yīng)性，藥劑盒典型地包含給藥的說明和可提供有所謂的記憶輔助裝置。
劑量對于向人類患者的給藥，本發(fā)明化合物的每日總劑量一般在約0.05毫克至約100毫克之間，當然依給藥模式而定，優(yōu)選在約0.1毫克至約50毫克之間，并且更優(yōu)選在約0.5毫克至約20毫克之間。例如，口服給藥可能需要的每日總劑量為約1毫克至約20毫克之間，但靜脈內(nèi)劑量可能僅須要約0.5毫克至約10毫克。每日總劑量可以單一劑量或分開的劑量給藥。
這些劑量是以體重約65公斤至約70公斤的平均人類為基礎(chǔ)。醫(yī)師可輕易的決定體重落在該范圍外的受治療者如嬰兒及年長者的劑量。
聯(lián)合療法如上所述，本發(fā)明化合物呈現(xiàn)出5-HT4激動劑活性。本發(fā)明的5-HT4激動劑可適用與至少一種其它藥理學(xué)活性劑或化合物聯(lián)用，尤其是在治療胃食管反流病中。例如，5-HT4激動劑，尤其是上述定義的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物可與一種或多種選自以下的藥理學(xué)活性劑聯(lián)合，同時、依序或分開地給藥(i)組織胺H2受體拮抗劑，例如雷尼替丁、拉呋替丁、尼扎替丁、西米替丁、法莫替丁及羅沙替??；(ii)質(zhì)子泵抑制劑，例如奧美拉唑、艾美拉唑、泮托拉唑、雷貝拉唑、替那拉唑、伊那拉唑(ilaprazole)及蘭索拉唑；(iii)酸泵拮抗劑，例如縮拉雷占(soraprazan)、類凡雷占(revaprazan)(YH-1885)、AZD-0865、CS-526、AU-2064及YJA-20379-8；(iv)口服抗酸混合物，例如Maalox、Aludrox及Gaviscon；(v)粘膜保護基，例如聚普瑞鋅、依卡貝特鈉、瑞巴派特、替普瑞酮、西曲酸酯、硫糖鋁、氯匹林(chloropylline)-銅及普勞諾托；(vi)GABAB激動劑，例如巴氯芬及AZD-3355；(vii)α2激動劑例如可樂定、美托美定、洛非西定、莫索尼定、替扎尼定、胍法辛、胍那芐、他利克索及右美托咪定；(viii)花黃素衍生物例如茶堿、氨茶堿及多索茶堿；(ix)鈣通道阻斷劑，例如阿雷地平、拉西地平、法羅地平(falodipine)、阿折地平、克林地平、洛美利嗪、地爾硫、戈洛帕米、依福地平、尼索地平、安氯地平、樂卡地平、貝凡洛爾、尼卡地平、伊拉地平、貝尼地平、維拉帕米、尼群地平、巴尼地平、普羅帕酮、馬尼地平、芐普地爾、硝苯地平、尼伐地平、尼莫地平及法舒地爾；(x)苯并二氮雜激動劑，例如地西泮、扎來普隆、唑吡旦、鹵沙唑侖、氯硝西泮、普拉西泮、夸西泮、氟他唑侖、三唑侖、氯甲西泮、咪達唑侖、托非索泮、氯巴占、氟硝西泮及氟托西泮；(xi)前列腺素類似物例如前列腺素、米索前列醇、天普替尼(treprostinil)、依索普天醇(esoprostenol)、拉坦前列素、依洛前列素、貝前列素、恩前列素、異丁司特及奧扎格雷；(xii)組織胺H3激動劑例如R-α-甲基組織胺及BP-294；(xiii)抗胃劑例如抗-促胃液素疫苗、伊曲谷胺及Z-360；(xiv)5-HT3拮抗劑例如多拉司瓊、帕洛諾司瓊、阿洛司瓊、阿扎司瓊、雷莫司瓊、米氮平、格拉司瓊、托烷司瓊、E-3620、昂丹司瓊及吲地司瓊；(xv)三環(huán)類抗抑郁劑例如丙米嗪、阿米替林、氯米帕明、阿莫沙平及洛非帕明；(xvi)GABA激動劑例如嘉巴噴丁、托吡酯、西洛西泮、氯硝西泮、普羅加胺、溴替唑侖、佐匹克隆、普加巴林和依佐匹克隆(eszopiclone)；(xvii)阿片類物質(zhì)鎮(zhèn)痛劑例如嗎啡、海洛因、氫嗎啡酮、羥嗎啡酮、左啡諾、左諾啡烷、美沙酮、哌替啶、芬太尼、可卡因、可待因、二氫可待因、羥考酮、氫可酮、右丙氧芬、納美芬、烯丙嗎啡、納洛酮、納曲酮、丁丙諾啡、布托啡諾、納布啡及噴他佐辛；(xviii)生長抑素類似物例如奧曲肽、AN-238及PTR-3173；(xix)Cl通道活化劑例如盧必普斯酮(lubiprostone)；(xx)選擇性5-羥色胺重攝取抑制劑例如舍曲林、依他普侖、氟西汀、奈法唑酮、氟伏沙明、西酞普蘭、米那普侖、帕羅西汀、文拉法辛、曲馬多、西布曲明、度洛西汀、降文拉法辛(desvenlafaxine)及達泊西汀；(xxi)抗膽堿能藥例如雙環(huán)胺及莨菪堿；(xxii)瀉藥例如Trifyba、Fybogel、Konsyl、Isogel、Regulan、Celevac及Normacol；(xxiii)纖維產(chǎn)品例如Metamucil；(xxiv)解痙藥例如美貝維林；(xxv)多巴胺拮抗劑例如甲氧氯普胺、多潘立酮及左舒必利；(xxvi)膽堿能藥例如新斯的明；(xxvii)AChE抑制劑例如加蘭他敏、美曲膦酯、利凡斯的明、依托必利及多奈哌齊；(xxviii)速激肽(NK)拮抗劑，尤其是NK-3、NK-2和NK-1拮抗劑，例如奈帕坦特、沙雷度坦、他奈坦；(αR，9R)-7-[3，5-雙(三氟甲基)芐基]-8，9，10，11-四氫-9-甲基-5-(4-甲基苯基)-7H-[1，4]二氮芳辛并[2，1-g][1，7]萘啶-6-13-二酮(TAK-637)，5-[[(2R，3S)-2-[(1R)-1-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙氧基-3-(4-氟苯基)-4-嗎啉基]甲基]-1，2-二氫-3H-1，2，4-三唑-3-酮(MK-869)，拉奈匹坦、達匹坦以及3-[[2-甲氧基-5-(三氟甲氧基)苯基]甲基氨基]-2-苯基-哌啶(2S，3S)。
評價生物活性的方法通過以下程序測定本發(fā)明化合物的5-HT4受體結(jié)合親和性。
人類5-HT4結(jié)合(1)制備人類5-HT4(d)轉(zhuǎn)染的HEK293細胞且使其于內(nèi)部(in-house)生長。將收集的細胞懸浮于補充了蛋白酶抑制劑混合液(Boehringer，1∶1000稀釋)的50mM HEPES(pH 7.4，4℃)，并且使用設(shè)置在全動力下的手持式Polytron PT 1200破裂儀在冰上均化30秒。勻漿在40,000xg及4℃下離心30分鐘。接著將粒狀沉淀物再懸浮在50mMHEPES(pH 7.4，4℃)中且以相同方式再離心一次。將最終粒狀沉淀物再懸浮于適當體積的50mM HEPES(pH 7.4在25℃)中、均化、等分樣且儲存在-80℃下直到使用。使用BCA蛋白質(zhì)分析試劑盒(PIERCE)及ARVOsx板讀取機(Wallac)使等分樣的膜級分進行蛋白質(zhì)濃度測定。
對于結(jié)合實驗而言，在室溫下以25微升的[3H]-GR113808(Amersham)，最終0.2nM)及150微升的膜勻漿及WGA-SPA珠(Amersham)懸浮溶液(10微克蛋白質(zhì)及1毫克SPA珠/孔)培養(yǎng)25微升的試驗化合物60分鐘。由1μM GR113808(Tocris)在最終濃度下測定非特異性結(jié)合。通過在1000rpm下離心來終止培養(yǎng)。
受體結(jié)合的放射性通過以MicroBeta板計數(shù)器(Wallac)計數(shù)進行量化。
實施例的所有化合物均顯示出5HT4受體親和性。
人類5-HT4結(jié)合(2)制備人類5-HT4(d)轉(zhuǎn)染的HEK293細胞且使其于內(nèi)部生長。將收集的細胞懸浮于補充了蛋白酶抑制劑混合液(Boehringer，1∶1000稀釋)的50mM Tris緩沖液(pH 7.4，4℃)中，并且使用設(shè)置在全動力下的手持式Polytron PT 1200破裂儀在冰上均化30秒。勻漿在40,000×g及4℃下離心10分鐘。接著將粒狀沉淀物再懸浮在50mM Tris緩沖液(pH 7.4，4℃)中且以相同方式再離心一次。將最終粒狀沉淀物再懸浮于含10mM MgCl2的適當體積的50mM Tris緩沖液(pH 7.4，25℃)中、均化、等分樣且儲存在-80℃下直到使用。使用BCA蛋白質(zhì)分析試劑盒(PIERCE)及ARVOsx板讀取機(Wallac)對等分樣的膜級分進行蛋白質(zhì)濃度測定。
對于結(jié)合實驗而言，在室溫下以50微升的[3H]5-HT(Amersham，最終8.0nM)及400微升膜勻漿(300微升蛋白質(zhì)/管)培養(yǎng)50微升的試驗化合物60分鐘。通過50μM GR113808(Tocris)在最終濃度下測定非特異性結(jié)合。使用BRANDEL收集器，通過以0.2％PEI浸泡的玻璃纖濾紙上快速真空過濾來終止所有培養(yǎng)，接著以50mM Tris緩沖液(pH 7.4，25℃)洗滌三次。用液體閃爍計數(shù)法，利用Packard LS計數(shù)器量化受體結(jié)合的放射性。
實施例的所有化合物均顯示出5HT4受體親和性。
人類5-HT4(d)轉(zhuǎn)染的HEK293細胞中激動劑-誘發(fā)的cAMP升高在內(nèi)部建立人類5-HT4(d)轉(zhuǎn)染的HEK293細胞。該細胞在37℃及5％CO2下于補充有10％FCS、20mM HEPES(pH 7.4)、200微克/毫升潮霉素B(Gibco)、100單位/毫升青霉素及100微克/毫升鏈霉素的DMEM中生長。細胞成長至60-80％匯合。在以化合物處理之前一天，透析的FCS(Gibco)正常替換，并且使細胞培養(yǎng)過夜?；衔镌?6-孔板(12.5微升/孔)中制備。以PBS/1mM EDTA收集細胞、離心且以PBS洗滌。分析開始時，將細胞粒狀沉淀物以1.6×105細胞/毫升的濃度，再懸浮于補充有20mM HEPES、10μM帕吉林(Sigma)及1mM3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(Sigma)的DMEM中，并且在室溫下靜置15分鐘。反應(yīng)通過將細胞添加到板(12.5微升/孔)中而起始。在室溫下培養(yǎng)15分鐘后，添加1％Triton X-100終止反應(yīng)(25微升/孔)，并且使板在室溫下靜置30分鐘。依據(jù)廠商的操作說明進行均勻時間解析的基于熒光的cAMP(Schering)檢測。使用ARVOSX多重標識計數(shù)器(Wallac)測量HTRF(激發(fā)320nm，發(fā)射665nm/620nm，延遲時間50μs，窗口時間400μs)?；诟骺自?20nm及665nm下的熒光強度的比例分析數(shù)據(jù)，接著使用cAMP標準曲線進行cAMP定量。將由各化合物誘出的cAMP產(chǎn)生的增強標準化成由1000nM 5-羥色胺(Sigma)產(chǎn)生的cAMP量。
實施例的所有化合物均顯示5HT4受體激動活性。
人類多非利特結(jié)合制備人類HERG轉(zhuǎn)染的HEK293S細胞且使之于內(nèi)部生長。將收集的細胞懸浮于50mM Tris-HCl(pH 7.4，4℃)中，并且使用設(shè)置在全動力下的手持式Polytron PT 1200破裂儀在冰上均化20秒。勻漿在48,000×g及4℃下離心20分鐘。接著使粒狀沉淀物再懸浮、均化且以相同方式再離心一次。將最終粒狀沉淀物再懸浮于適當體積的50mMTris-HCl、10mM KCl、1mM MgCl2(pH 7.4，4℃)中、均化、等分樣且儲存在-80℃下直到使用。使用BCA蛋白質(zhì)分析試劑盒(PIERCE)及ARVOsx板讀取機(Wallac)使等分樣的膜級分進行蛋白質(zhì)濃度測定。
在總體積200微升的96-孔板中進行結(jié)合分析。在室溫下以20微升的[3H]-多非利特(Amersham，最終5nM)及160微升膜勻漿(25微克蛋白質(zhì))培養(yǎng)20微升的試驗化合物60分鐘。用10μM多非利特在最終濃度下測定非特異性結(jié)合。使用Skatron細胞收集器以50mMTris-HCl、10mM KCl、1mM MgCl2(pH 7.4在4℃)，通過用0.5％預(yù)浸泡的GF/B Betaplate過濾器上快速真空過濾來終止培養(yǎng)。過濾器經(jīng)干燥，置于樣品袋中且填充閃爍液Betaplate Scint。以WallacBetaplate計數(shù)器計數(shù)與過濾器結(jié)合的放射性。
Caco-2滲透性依據(jù)Shiyin Yee，Pharmaceutical Research，763(1997)中所述的方法測量Caco-2滲透性。
使Caco-2細胞在過濾器支撐器(Falcon HTS多孔插入系統(tǒng))上生長14天。從頂端及基底外側(cè)隔室二者中除去培養(yǎng)基，并且在37℃下于搖床水浴中，以50循環(huán)/分鐘，以預(yù)加溫的0.3毫升頂端緩沖液及1.0毫升基底外側(cè)緩沖液預(yù)培養(yǎng)單層。頂端緩沖液由漢克氏平衡的鹽溶液(Hanks Balanced Salt Solution)、25mM D-葡萄糖一水合物、20mMMES生物緩沖液、1.25mM CaCl2及0.5mM MgCl2(pH 6.5)組成。基底外側(cè)緩沖液由漢克氏平衡的鹽溶液、25mM D-葡萄糖一水合物、20mM HEPES生物緩沖液、1.25mM CaCl2及0.5mM MgCl2(pH 7.4)組成。預(yù)培養(yǎng)結(jié)束時，除去培養(yǎng)基且將含試驗化合物溶液(10μM)的緩沖液添加于頂端隔室中。在1小時時將插入物移到含新鮮基底外側(cè)緩沖液的孔中。緩沖液中的藥物濃度以LC/MS分析進行測量。
流動速率(F，質(zhì)量/時間)由接收器側(cè)上基質(zhì)的累積表現(xiàn)的斜率計算，并且表觀滲透性系數(shù)(Papp)系由以下方程式計算。
Papp(cm/sec)＝(F*VD)/(SA*MD)其中SA為傳送的表面積(0.3cm2)，VD為供體體積(0.3毫升)，MD為在t＝0時在供體側(cè)上的藥物總量。所有數(shù)據(jù)代表2次插入的平均值。單層整合度由Lucifer Yellow傳送進行測定。
人類肝臟微粒體(HLM)的半衰期在37℃下于96-深孔板上，以含3.3mM MgCl2及0.78毫克/毫升HLM(HL101)的100mM磷酸鉀緩沖液(Ph 7.4)培養(yǎng)試驗化合物(1μM)。將反應(yīng)混合物分成二組，非-P450及P450組。NADPH僅添加于P450組的反應(yīng)混合物中。在0、10、30及60分鐘的時間點收集P450組樣品的等分樣，其中0分鐘時點是指NADPH添加于P450組反應(yīng)混合物中的時間。在-10及65分鐘時間點時收集非-P450組的等分樣。收集的等分樣以含內(nèi)標的乙腈溶液萃取。沉淀的蛋白質(zhì)以離心(2000rpm，15分鐘)旋轉(zhuǎn)沉降。以LC/MS/MS系統(tǒng)測量上清液中的化合物濃度。
通過將化合物/內(nèi)標的峰面積比的自然對數(shù)對時間作圖，獲得半衰期值。通過點的最佳擬合線的斜率產(chǎn)生代謝的速率(k)。此可使用以下方程式轉(zhuǎn)化成半衰期值。
半衰期＝ln 2/k實施例在以下非限制性實施例中舉例說明本發(fā)明，其中除非另有說明，否則所有試劑均可商購，所有操作均在室溫下或環(huán)境溫度下進行，也就是說，在約18-25℃之間，溶劑的蒸發(fā)使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，在減壓條件下以至多約60℃的浴溫進行；通過薄層色譜法(tlc)監(jiān)控反應(yīng)，并且僅為舉例說明而給出反應(yīng)時間；提供的熔點(m.p.)未經(jīng)校正(多晶型可能得到不同的熔點)；通過以下技術(shù)的至少一種確認所有分離化合物的結(jié)構(gòu)及純度tlc(Merck硅膠60 F254預(yù)涂覆的TLC板或Merck NH2F254S預(yù)涂覆的HPTLC板)，質(zhì)譜法、核磁共振(NMR)、紅外線吸收光譜(IR)或微量分析。僅為舉例說明的目的而給出收率。急驟柱色譜法使用Merck硅膠60(230-400網(wǎng)目ASTM)或Fuji Silysia ChromatorexDU3050(氨基型，30-50微米)進行。低解析質(zhì)譜數(shù)據(jù)(EI)以Integrity(Waters)質(zhì)譜儀或Automass 120(JEOL)質(zhì)譜儀獲得。低解析質(zhì)譜數(shù)據(jù)(ESI)以ZMD2(Waters)質(zhì)譜儀或Quattro II(Micromass)質(zhì)譜儀獲得。NMR數(shù)據(jù)在270MHz(JEOL JNM-LA 270光度計)或300MHz(JEOL JNM-LA300)下，使用氘化的氯仿(99.8％D)和二甲基亞砜(99.9％D)作為溶劑(除非另有說明)，相對于作為內(nèi)標的四甲基硅烷(TMS)，以每百萬份數(shù)(ppm)測定；所用的常規(guī)簡寫為s＝單峰，d＝雙重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，br.＝寬峰等。IR光譜用Shimazu紅外光譜儀(IR-470)測量。旋光度使用JASCO DIP-370數(shù)字旋光儀(Japan Spectroscopic Co.，Ltd.)測量?；瘜W(xué)符號具有其常用的含義；b.p.(沸點)；m.p.(熔點)；l(升)，ml(毫升)，g(克)，mg(毫克)，mol(摩爾)，mmol(毫摩爾)，eq(當量)。粉末X射線衍射(PXRD)圖案使用裝配有自動進樣交換器、2θ-θ測角器、光束發(fā)散裂口、二級單發(fā)色器及閃爍計數(shù)器的Rigaku RINT-TTR粉末X-射線衍射儀測定。通過將粉末充填于鋁制樣品承載器上制備樣品用于分析。樣本通過60.00rpm旋轉(zhuǎn)，并且在室溫下以Cu-Kα輻射用4°/分鐘掃描。
實施例14-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸
步驟1.4-氰基四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯在0℃及N2中，于含NaH(17.7克，0.443摩爾)的DMF(200毫升)攪拌懸浮液中滴加含氰基乙酸叔丁酯(25.0克，0.177摩爾)的DMF(100毫升)。使混合物升溫至環(huán)境溫度且攪拌1小時。接著，將雙(2-溴乙基)醚(49.3克，0.177摩爾)添加于混合物中，并且使所得混合物在90℃下攪拌24h。冷卻至0℃后，混合物以水(100毫升)猝滅。蒸發(fā)除去揮發(fā)性成分，殘留物以EtOAc-甲苯(1∶2，500毫升)及水(500毫升)的混合物沉淀。有機相以水(500毫升)洗滌三次，以Na2SO4干燥，經(jīng)過濾且蒸發(fā)。固體以己烷洗滌且真空干躁，獲得19.0克(57％)白色結(jié)晶標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.96(2H，dt，J＝3.9Hz，12.3Hz)，3.73(2H，dt，J＝2.6Hz，12.3Hz)，2.20-1.94(4H，m)，1.52(9H，s)。
步驟2.4-(氨基甲基)四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯含4-氰基四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(18.95克，0.0897摩爾，步驟1)及阮內(nèi)鎳(1.00克)的甲醇(200毫升)混合物在室溫下氫化(3atm)12h。接著，使混合物經(jīng)硅藻土墊過濾，并且真空濃縮濾液，獲得16.01克(83％)黃色糖漿狀標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.86(2H，dt，J＝4.1Hz，11.4Hz)，3.48(2H，dt，J＝2.5Hz，11.5Hz)，2.75(2H，s)，2.03(2H，br d，J＝10.7Hz)，1.55-1.35(13H，m，包含9H，s，1.49ppm)。
步驟3.4-[(4-氧代哌啶-1-基)甲基]四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯于含4-(氨基甲基)四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(8.00克，0.0372摩爾，步驟2)及K2CO3(0.51克，0.0372摩爾)的EtOH-H2O(2∶1，240毫升)回流混合物中滴加含1-乙基-1-甲基-4-氧代哌啶碘化物(12.0克，0.0445摩爾，有機化學(xué)期刊(J.Org.Chem.)1995，60，4324-4330)的EtOH-H2O(2∶1，150毫升)，并且使所得混合物在相同溫度(回流)下攪拌1h。冷卻至室溫后，真空除去溶劑。將殘留物倒入飽和NaHCO3水溶液(200毫升)中，并且以CH2Cl2(200毫升三次)萃取混合物。萃取液經(jīng)Na2SO4干燥且濃縮。殘留物在硅膠柱上以己烷/乙酸乙酯(3∶1至2∶1)洗脫進行色譜法，獲得10.77克(98％)無色糖漿狀標題化合物。
MS(ESI)m/z298(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ3.84(2H，br d，J＝11.4Hz)，3.50(2H，dt，J＝2.0Hz，11.7Hz)，2.85(4H，t，J＝5.9Hz)，2.61(2H，s)，2.39(4H，t，J＝6.1Hz)，2.05(2H，d，J＝11.5Hz)，1.75-1.45(11H，m，包含9H，s，1.49ppm)。
步驟4.4-[(4-氰基哌啶-1-基)甲基]四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯在0℃下于含4-[(4-氧代哌啶-1-基)甲基]四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(8.77克，0.0295摩爾，步驟3)的1，2-二甲氧基乙烷(250毫升)攪拌溶液中添加對-甲苯磺?；谆惽杌?11.51克，0.0590摩爾)、EtOH(3.96毫升，0.0678摩爾)及t-BuOK(11.58克，0.1032摩爾)。使所得混合物在50℃下攪拌16h。冷卻后，將反應(yīng)混合物倒入飽和NaHCO3水溶液(200毫升)中，并且混合物以CH2Cl2(200毫升×3次)萃取。萃取液經(jīng)Na2SO4干燥且濃縮。殘留物在硅膠柱上以己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫進行色譜法，獲得5.76克(63％)黃色糖漿狀標題化合物。
MS(ESI)m/z309(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ3.81(2H，dt，J＝3.1Hz，11.0Hz)，3.48(2H，dt，J＝2.1Hz，11.7Hz)，2.76-2.64(2H，m)，2.64-2.52(1H，m)，2.50-2.35(4H，m，包含2H，s，2.46ppm)，1.98(2H，br d，J＝11.9Hz)，1.92-1.70(4H，m)，1.65-1.40(11H，m，包含9H，s，1.47ppm)。
步驟5.4-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯使含4-[(4-氰基哌啶-1-基)甲基]四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(5.76克，0.0187摩爾，步驟4)及阮內(nèi)鎳(3.00克)的甲醇(100毫升)混合物在室溫下氫化(3atm)12h。接著，使混合物經(jīng)硅藻土墊過濾且真空濃縮濾液，獲得5.72克(98％)黃色糖漿狀標題化合物。
MS(ESI)m/z313(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ3.80(2H，dt，J＝3.1Hz，11.5Hz)，3.49(2H，dt，J＝2.1Hz，12.2Hz)，2.80(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.58-2.40(4H，m，包含2H，s，2.43ppm)，2.15(2H，br t，J＝7.3Hz)，1.98(2H，br d，J＝13.7Hz)，1.70-1.40(16H，m，包含9H，s，1.47ppm)，1.30-1.10(2H，m)。
步驟6.4-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯使含對-硝基苯基氯甲酸酯(4.14克，0.0205摩爾)、1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮(3.62克，0.0205摩爾，藥物化學(xué)期刊(J.Med.Chem.)1999，42，2870-2880)及Et3N(7.81毫升，0.0560摩爾)的CH2Cl2(100毫升)混合物在室溫下攪拌4h。接著，添加4-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(5.72克，0.0187摩爾，步驟5)，并且使所得混合物在室溫下攪拌24h。反應(yīng)混合物以飽和NaHCO3水溶液(300毫升)稀釋，以CH2Cl2(300毫升)萃取三次。合并的萃取液以Na2SO4干燥且濃縮。殘留物在NH-硅膠柱上以己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫進行色譜法，獲得9.83克(100％)黃色糖漿狀標題化合物。
MS(ESI)m/z515(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.90(1H，t，J＝4.9Hz)，8.31-8.21(1H，m)，7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.80(2H，dt，J＝3.1Hz，11.5Hz)，3.49(2H，dt，J＝1.7Hz，11.4Hz)，3.28(2H，t，J＝6.4Hz)，2.81(2H，brd，J＝10.4Hz)，2.44(2H，s)，2.16(2H，t，J＝10.4Hz)，1.98(2H，d，J＝12.4Hz)，1.81-1.20(22H，m，包含6H，d，J＝7.1Hz，1.56ppm及9H，s，1.47ppm)。
步驟7.4-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸在0℃下于含4-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(3.67克，7.13毫摩爾，步驟6)的THF(80毫升)攪拌溶液中添加濃HCl(40毫升)，并且使所得混合物在室溫下攪拌20h。濃縮混合物除去溶劑且將殘留物倒入飽和NaHCO3水溶液中?；旌衔镆訡H2Cl2萃取三次，有機層以Na2SO4干燥。除去溶劑獲得殘留物，使之在硅膠柱上以MeOH/CH2Cl2(1∶10)洗脫進行色譜法，獲得3.01克(92％)標題化合物。使產(chǎn)物自THF再結(jié)晶，獲得白色結(jié)晶狀標題化合物(0.893克)。
MS(ESI)m/z459(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.99(1H，t，J＝5.6Hz)，8.30-8.15(1H，m)，7.25-7.105(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.95-3.70(4H，m)，3.34(2H，t，J＝6.3Hz)，3.14(2H，br d，J＝12.0Hz)，2.65-2.45(4H，m，包含2H，s，2.59ppm)，1.92(4H，t，J＝13.8Hz)，1.85-1.40(11H，m，包含6H，d，J＝6.9Hz，1.57ppm)。
m.p.176℃。
IR(KBr)v3281，2947，1720，1688，1611，1595，1547，1481，1447，1375，1200，1159，1136，1105，760cm-1。
C24H34N4O5的計算值C，62.86；H，7.47；N，12.22。實測值C，62.77；H，7.42；N，12.16。
合成4-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸的另一路徑敘述如下。
步驟8.{[1-(乙氧基甲基)哌啶-4-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯在環(huán)境溫度下于含(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(7.0克，33毫摩爾)的乙醇(19毫升)攪拌溶液中添加低聚甲醛(1.2克，39毫摩爾)及碳酸鉀(5.4克，39毫摩爾)。使混合物在環(huán)境溫度下攪拌4h。混合物經(jīng)過濾且以乙醇(50毫升)洗滌濾餅。蒸發(fā)除去揮發(fā)性成分，獲得白色粉末狀標題化合物8.9克(定量)。
1H-NMR(CDCl3)δ4.60(1H，brs)，4.07(2H，s)，3.49(2H，q，J＝7.1Hz)，3.08-2.83(4H，m)，2.50-2.36(2H，m)，1.75-1.60(2H，m)，1.44(9H，s)，1.52-1.35(1H，m)，1.19(3H，t，J＝7.1Hz)，1.31-1.12(2H，m)。
步驟9.[甲氧基(四氫-4H-吡喃-4-亞基)甲氧基](三甲基)硅烷在0℃下及氮氣中，于含二異丙基胺(1.6克，0.016摩爾)的四氫呋喃(4毫升)攪拌溶液中滴加正丁基鋰(己烷中1.59M，9.2毫升，0.014摩爾)，并且攪拌20分鐘。接著，使反應(yīng)混合物冷卻至-40℃，添加含四氫-2H-吡喃-4-羧酸甲酯(1.9克，0.013摩爾)及三甲基硅烷基氯(2.0毫升，0.015摩爾)的四氫呋喃(1毫升)，并且使所得混合物于3h內(nèi)逐漸升溫至室溫。蒸發(fā)除去揮發(fā)性成份，殘留物經(jīng)以己烷洗滌的硅藻土墊過濾。真空干燥濾液，獲得2.9克(定量)的透明黃色油狀標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.64-3.59(4H，m)，3.52(3H，s)，2.24(2H，t，J＝5.2Hz)，2.15(2H，t，J＝5.3Hz)，0.22(9H，s)。
步驟10.4-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]四氫-2H-吡喃-4-羧酸酯在0℃下于含{[1-(乙氧基甲基)哌啶-4-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯(4克，14毫摩爾，步驟8)及[甲氧基(四氫-4H-吡喃-4-亞基)甲氧基](三甲基)硅烷(2.9克，13毫摩爾，步驟9)的二氯甲烷(30毫升)攪拌溶液中滴加三甲基硅烷基三氟甲烷磺酸酯(0.24毫升，1.3毫摩爾)，并且使所得混合物在室溫下攪拌12h。反應(yīng)混合物以飽和碳酸氫鈉水溶液(150毫升)猝滅，以二氯甲烷(30毫升×2)萃取，并且合并的有機層以硫酸鈉干燥。除去溶劑獲得殘留物，使該殘余物在硅膠柱上以乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脫進行色譜法，獲得6.3克(64％)透明無色油狀標題化合物。
MS(ESI)m/z371(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ4.57(1H，br s)，3.84-3.78(2H，m)，3.70(3H，s)，3.49-3.41(2H，m)，2.99-2.95(2H，m)，2.73-2.68(2H，m)，2.47(2H，s)，2.19-2.11(2H，m)，2.06-2.01(2H，m)，1.61-1.51(5H，m)，1.44(9H，s)，1.24-1.11(2H，m)。
步驟11.4-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]四氫-2H-吡喃-4-羧酸在室溫下于含4-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]四氫-2H-吡喃-4-羧酸甲酯(6.47克，17.5毫摩爾，步驟10)的MeOH(32毫升)溶液中添加5N NaOH水溶液(10毫升)(放熱)。使所得溶液在60℃下攪拌7h，接著于冰冷卻浴中冷卻至5-10℃。于該溶液中添加5N HCl(10毫升)，并且濃縮所得溶液(pH值約為6)。于殘留物中添加2-丙醇(80毫升)。濃縮該溶液。于殘留物中添加2-丙醇(80毫升)且再度濃縮。殘留物以EtOH(80毫升)稀釋，并且使混合物在室溫下攪拌2h。使之經(jīng)硅藻土墊(5.0克)過濾除去NaCl。硅藻土墊以EtOH(20毫升)洗滌且濃縮合并的濾液。殘留物中添加CH3CN(40毫升)且濃縮。該程序的過程中發(fā)現(xiàn)形成白色沉淀物。于殘留物中添加CH3CN(40毫升)，并且使所得懸浮液在室溫下攪拌2h。該混合物經(jīng)過濾且所得固體以CH3CN(10毫升)洗滌，接著減壓干燥，獲得4.1克(65％)白色粉末狀標題化合物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.66(1H，m)，3.93-3.82(3H，m)，3.15-2.99(4H，m)，2.58(2H，s)，2.58-2.45(2H，m)，1.98-1.76(4H，m)，1.55-1.35(6H，m)，1.44(9H，s)。
mp 129℃。
步驟12.4-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸4-甲基苯磺酸酯在N2下于300毫升3-頸圓底燒瓶中加入4-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]四氫-2H-吡喃-4-羧酸(10克，28毫摩爾，步驟11)，并且在室溫下倒入含p-TsOH H2O(16克，84毫摩爾)的IPA(150毫升)溶液。所得混合物在60℃下及N2中攪拌7h，并且于2h內(nèi)在播晶種的同時緩慢滴加Et3N(8.6毫升，62毫摩爾)。添加Et3N過程中會形成白色沉淀物。所得白色懸浮液在60℃下攪拌3h，在50℃下攪拌5h且在室溫下攪拌10h。懸浮液經(jīng)過濾且所得固體以IPA(100毫升)洗滌，在50℃下干燥5h，獲得10.5克(87％)白色粉末狀標題化合物。
1H-NMR(D2O)δ7.54(2H，d，J＝7.4Hz)，7.22(2H，J＝7.4Hz)，3.80-3.65(2H，m)，3.55-3.40(4H，m)，3.20-2.75(6H，m)，2.24(3H，s)，1.90-1.80(6H，m)，1.55-1.35(4H，m)。
mp 247℃。
步驟13.4-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸含1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮(1.0克，5.7毫摩爾)及氯甲酸4-硝基苯酯(1.14克，5.7毫摩爾)的CH2Cl2(20毫升)混合物在室溫下及N2中攪拌5分鐘。于該混合物中緩慢添加Et3N(1.7毫升，12.5毫摩爾)，并且在室溫下將產(chǎn)生的混合物添加于含4-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸4-甲基苯磺酸酯(2.4克，5.7毫摩爾，步驟12)的CH2Cl2(15毫升)混合物中。所得混合物在室溫下攪拌2h?；旌衔镆?.5N HCl水溶液(100毫升)洗滌，并且有機層以飽和NaHCO3水溶液(75毫升)洗滌，接著濃縮有機層。殘留物以EtOAc(75毫升)稀釋，并且濃縮至約15毫升。產(chǎn)物播晶后，使該混合物在室溫下攪拌30分鐘。該程序的過程中，形成固體且過濾該混合物。所得固體以EtOAc(10毫升)洗滌，在50℃下真空干燥，獲得1.9克(73％)白色固態(tài)標題化合物。
步驟14.4-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸苯磺酸酯在室溫下于含4-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸(750毫克，步驟13)的CH3CN(5毫升)懸浮液中添加含苯磺酸單水合物(288毫克)的CH3CN(5毫升)溶液。所得混合物在室溫下攪拌2天，并且經(jīng)濃縮。殘留物經(jīng)干燥，獲得909毫克(90％)固態(tài)標題化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ9.10(1H,t,J=5.7Hz),8.11(1H,dt,J=8.0,0.8Hz)，7.88-7.76(2H，m)，7.46-7.36(3H，m)，7.32(1H，dt，J＝8.0，0.8Hz)，7.22(1H，td，J＝7.8，1.4Hz)，7.13(1H，td，J＝7.8，1.4Hz)，4.70(1H，六重峰，J＝6.9Hz)，3.85-3.55(5H，m)，3.50-3.38(4H，m)，3.23-3.05(2H，m)，2.15-1.90(5H，m)，1.78-1.58(5H，m)，1,55(6H，d，J＝6.9Hz)。
mp 223℃。
C30H40N4O8S的計算值C，58.42；H，6.54；N，9.08。實測值C，58.50；H，6.51；N，9.11。
PXRD(2θ(+/-0.1)5.3，12.6，21.4，21.9)。
實施例21-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸 步驟1.4-氰基環(huán)己烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟1中所示的方法，使用1，5-二溴戊烷制備標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ2.07(2H，d，J＝13.0Hz)，1.85-1.57(7H，m)，1.50(9H，s)，1.35-1.15(1H，m)。
步驟2.1-(氨基甲基)環(huán)己烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟2中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z214(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ2.69(2H，s)，2.02(2H，d，J＝13.2Hz)，1.65-1.05(19H，m，包括9H，s，1.47ppm)。
步驟3.1-[(4-氧代哌啶-1-基)甲基]環(huán)己烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟3中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z296(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ2.84(4H，t，J＝6.1Hz)2.57(2H，s)，2.38(4H，t，J＝6.1Hz)，2.04(2H，d，J＝12.2Hz)，1.65-1.15(17H，m，包括9H，s，1.47ppm)。
步驟4.1-[(4-氰基哌啶-1-基)甲基]環(huán)己烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟4中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z307(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ2.53-2.66(2H，m)，2.53-2.48(1H，m)，2.48-2.30(4H，m，包括2H，s，2.41ppm)，1.97(2H，d，J＝12.5Hz)，1.92-1.70(4H，m)，1.65-1.10(19H，m，包括9H，s，1.45ppm)。
步驟5.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟5中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z311(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ2.81(2H，d，J＝11.37Hz)，2.55(2H，d，J＝5.8Hz)，2.39(2H，s)，2.11(2H，t，J＝11.0Hz)，2.03-1.85(5H，m)，1.65-1.10(21H，m，包括9H，s，1.45ppm)。
步驟6.1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟6中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z513(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.89(1H，t，J＝5.3Hz)，8.33-8.20(1H，m)，7.23-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.27(2H，t，J＝6.3Hz)，2.82(2H，d，J＝11.5Hz)，2.39(2H，s)，2.12(2H，t，J＝11.4Hz)，1.97(2H，d，J＝13.2Hz)，1.73-1.10(28H，m，包括6H，d，J＝6.9Hz，1.56ppm及9H，s，1.45ppm)。
步驟7.1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸用類似于實施例1步驟7中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z457(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.98(1H，t，J＝5.8Hz)，8.28-8.18(1H，m)，7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.34(2H，t，J＝6.3Hz)，3.11(2H，d，J＝11.9Hz)，2.61(2H，s)，2.48(2H，t，J＝12.2Hz)，2.05-1.20(21H，m，包括6H，d，J＝6.9Hz，1.57ppm)。
m.p.151℃。
IR(KBr)v3291，2930，1732，1690，1545，1481，1373，1298，1202，1134，762cm-1。
C25H36N4O4的計算值C，65.76；H，7.95；N，12.27。實測值C，65.41；H，8.18；N，12.18。
實施例31-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸 步驟1.1-(碘甲基)環(huán)戊烷羧酸甲酯在N2中及維持在-10℃下，于含HN(iPr)2(1.31毫升，9.36毫摩爾)的THF(5毫升)攪拌溶液中添加n-BuLi(己烷中1.58M，5.43毫升，8.58毫摩爾)，并且使混合物在-10℃下攪拌1h。接著，在0℃下于該混合物中滴加含環(huán)戊烷羧酸甲酯(1.00克，7.80毫摩爾)的THF(3毫升)溶液，并且使混合物在0℃下攪拌2h。最后，在0℃下于該混合物中添加CH2I2(0.628毫升，7.80毫摩爾)，并且使所得混合物在室溫下攪拌16h。反應(yīng)混合物以飽和NH4Cl水溶液(50毫升)猝滅，以Et2O(75毫升)萃取二次，并且合并的有機層以鹽水(75毫升)洗滌。有機層以Na2SO4干燥，經(jīng)過濾且濃縮。除去溶劑獲得殘留物，使之在硅膠柱上以EtOAc/己烷(1∶20-1∶10)洗脫進行色譜法，獲得1.085克(52％)無色油狀標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.73(3H，s)，3.42(2H，s)，2.30-2.15(2H，m)，1.80-1.55(6H，m)。
步驟2.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)戊烷羧酸甲酯含1-(碘甲基)環(huán)戊烷羧酸甲酯(5.52克，0.0206摩爾，步驟1)、(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(8.83克，0.0412摩爾)及iPr2NEt(10.76毫升，0.0618摩爾)的N-甲基吡咯烷酮(70毫升)混合物在120℃下攪拌24h。冷卻后，反應(yīng)混合物以飽和NaHCO3水溶液(200毫升)稀釋，以AcOEt(200毫升)萃取三次，并且合并的有機層以水(200毫升)及鹽水(200毫升)洗滌。有機層以Na2SO4干燥，經(jīng)過濾且濃縮。除去溶劑獲得殘留物，使之在硅膠上以EtOAc/己烷(1∶1)洗脫進行色譜法，獲得4.91克(67％)黃色糖漿狀標題化合物。
MS(ESI)m/z355(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ4.58(1H，br s)，3.66(3H，s)，2.97(2H，t，J＝6.3Hz)，2.77(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.55(2H，s)，1.70-1.50(9H，m)，1.44(9H，s)，1.25-1.08(2H，m)。
步驟3.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸甲酯使含1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)戊烷羧酸甲酯(1.16克，3.27毫摩爾，步驟2)的CH2Cl2(25毫升)及三氟乙酸(5毫升)溶液在室溫下攪拌1.5h。反應(yīng)混合物再經(jīng)濃縮，并且以飽和NaHCO3水溶液(100毫升)堿化，以CHCl3(100毫升)萃取五次。合并的萃取液經(jīng)干燥且濃縮，獲得0.831克(100％)黃色糖漿標題化合物。
MS(ESI)m/z255(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ3.66(3H，s)，2.78(2H，d，J＝11.5Hz)，2.62-2.50(4H，m)，2.15-1.98(4H，m)，1.80-1.40(9H，m)，1.30-1.05(2H，m)。
步驟4.1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸甲酯用類似于實施例1步驟6中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z457(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.94(1H，t，J＝5.7Hz)，8.28-8.20(7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.66(3H，s)，3.27(2H，t，J＝6.4Hz)，2.84(2H，d，J＝11.6Hz)，2.62(2H，s)，2.20-2.00(4H，m)，1.75-1.50(15H，m，包括6H，d，J＝7.0Hz，1.56ppm)，1.40-1.20(2H，m)。
步驟5.1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸使含1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸甲酯(1.33克，2.90毫摩爾，步驟4)的4 N-HCl(6毫升)及乙酸(6毫升)混合物在回流下攪拌18h。冷卻后，反應(yīng)混合物經(jīng)濃縮且以NaHCO3水溶液(100毫升)堿化，以CH2Cl2(150毫升)萃取三次。合并的萃取液以Na2SO4干燥，經(jīng)過濾且濃縮。殘留物在硅膠柱上以MeOH/CH2Cl2(1∶10)洗脫進行色譜法，獲得1.12克(85％)白色固態(tài)標題化合物。粗化合物自EtOAc×2再結(jié)晶，并且在50℃下真空干燥2天，獲得610毫克白色結(jié)晶標題化合物。
MS(ESI)m/z443(M+H)+。
m.p.165℃。
IR(KBr)v3271，2934，1736，1684，1607，1558，1483，1454，1379，1358，1298，1209，1167，1097，758cm-1。
1H NMR(CDCl3)δ9.00(1H，t，J＝5.5Hz)，8.30-8.18(1H，m)，7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.34(2H，t，J＝11.0Hz)，2.32-2.17(2H，m)，2.00-1.30(17H，m，包括6H，d，7.0Hz，1.57ppm)。
C24H34N4O4·0.2H2O的計算值C，64.61；H，7.77；N，12.56。實測值C，64.34；H，7.79；N，12.48。
合成1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸的另一路徑敘述如下。
步驟6.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)戊烷羧酸甲酯依據(jù)實施例1步驟10中所述程序，使用[亞環(huán)戊基(甲氧基)甲氧基](三甲基)硅烷(合成(Synthesis)，1982，1，58-60)代替[甲氧基(四氫-4H-吡喃-4-亞基)甲氧基](三甲基)硅烷制備標題化合物。
MS(ESI)m/z355(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ4.58(1H，br s)，3.66(3H，s)，2.97(2H，t，J＝6.3Hz)，2.77(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.55(2H，s)，2.18-1.95(4H，m)，1.70-1.50(9H，m)，1.44(9H，s)，1.25-1.08(2H，m)。
步驟7.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)戊烷羧酸在室溫下于含1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)戊烷羧酸甲酯(2.8克，8.0毫摩爾，步驟6)的MeOH(11毫升)溶液中添加2N NaOH水溶液(6毫升)(放熱)。所得溶液在70℃下攪拌4h，接著于冰冷卻浴中冷卻至5-10℃。于該溶液中滴加5N HCl水溶液(6毫升)。濃縮所得溶液(pH值約為6)且于殘留物中添加2-丙醇(40毫升)。濃縮該溶液，于殘留物中添加CH3CN(40毫升)。所得混合物在室溫下攪拌2h，使之經(jīng)硅藻土墊(5.0克)過濾除去NaCl。濃縮濾液獲得2.4克(定量)白色固態(tài)標題化合物。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ6.90-6.75(1H，m)，2.95-2.80(2H，m)，2.79(2H，t，J＝6.4Hz)，2.58(2H，s)，2.25-2.05(2H，m)，2.05-1.85(2H，m)，1.65-1.50(6H，m)，1.50-1.25(3H，m)，1.37(9H，s)，1.20-0.95(2H，m)。
mp 150℃。
步驟8.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸4-甲基苯磺酸酯在室溫下于100毫升2-頸圓底燒瓶中，于含1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)戊烷羧酸(5克，14.7毫摩爾，步驟7)的THF(25毫升)混合物中添加含p-TsOH H2O(8.4克，44毫摩爾)的THF(25毫升)溶液。所得混合物在70℃下及N2中攪拌3h，并且冷卻至室溫。于該溶液中緩慢滴加Et3N(6毫升，44毫摩爾)。添加Et3N過程中會形成白色沉淀物，并且使所得混合物在室溫下攪拌14h。懸浮液經(jīng)過濾且所得固體以THF(10毫升)洗滌，在50℃下干燥5h，獲得5.9克(97％)白色固態(tài)標題化合物。
1H-NMR(D2O)δ7.51(2H，J＝8.2Hz)，7.19(2H，J＝8.2Hz)，3.38(2H，d，J＝11.0Hz)，3.09(2H，d，J＝2.6Hz)，2.88(2H，t，J＝12.1Hz)，2.79(2H，t，J＝6.6Hz)，2.21(3H，s)，1.94-1.75(5H，m)，1.61-1.27(9H，m)。
步驟9.1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸使含1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮(10克，56.8毫摩爾)及氯甲酸4-硝基苯酯(11.4克，56.8毫摩爾)的CH2Cl2(150毫升)混合物在室溫下攪拌5分鐘。于該混合物中緩慢添加Et3N(17.4毫升，125毫摩爾)，并且在室溫下將所得混合物添加于含1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸4-甲基苯磺酸酯(23.4克，56.8毫摩爾，步驟8)的CH2Cl2(75毫升)混合物中。攪拌10分鐘后，添加Et3N(7.9毫升，56.8毫摩爾)，并且使所得混合物在室溫下攪拌2h?；旌衔镆?N HCl水溶液(100毫升)洗滌。有機層于50℃下濃縮，直到約5vol為止，并且在80℃下以丙酮(50毫升×3)置換直到約5vol為止。在80℃下于該混合物中添加H2O(100毫升)，并且所得混合物在100℃下濃縮。冷卻至50℃后，將20％N，N-二甲基氨基乙醇水溶液(100毫升)添加于該混合物中，并且發(fā)現(xiàn)固體。所得混合物于冰冷浴中冷卻，并且使之在該溫度下攪拌18h?；旌衔锝?jīng)過濾且所得固體以H2O(100毫升)洗滌，在50℃下真空干躁，獲得17.9克(71％)白色固態(tài)標題化合物。
mp.166℃PXRD(2θ(+/-0.1)4.4，8.8，13.2，17.6)。
實施例41-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丙烷羧酸鹽酸鹽 步驟1.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)丙烷羧酸叔丁酯依據(jù)實施例3步驟1中所述的程序，使用環(huán)丙烷羧酸叔丁酯(J.Organomet.Chem.，1983，252，267-274)代替環(huán)戊烷羧酸甲酯制備1-(碘甲基)環(huán)丙烷羧酸叔丁酯(包含原料，3∶2混合物)。不需進一步純化用于下一步驟中。
用類似于實施例3步驟2中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z369(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ4.59(1H，br s)，2.99(2H，d，J＝5.9Hz)，2.89(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.57(2H，s)，2.00(2H，t，J＝11.7Hz)，1.62(2H，d，J＝12.9Hz)，1.55-1.35(1H，m)，1.44(9H，s)，1.42(9H，s)，1.30-1.15(2H，m)，1.13(2H，dd，J＝3.8Hz，6.6Hz)，0.74(2H，dd，J＝3.5Hz，6.3Hz)。
步驟2.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丙烷羧酸叔丁酯用類似于實施例3步驟3中所示方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z269(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ2.96(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.60-2.50(4H，m)，2.00(2H，t，J＝11.4Hz)，1.75-1.35(14H，m，包括2H，br d，J＝9.6Hz，1.66ppm及9H，s，1.43ppm)，1.33-1.16(2H，m)，1.13(2H，dd，J＝4.0Hz，6.9Hz)，0.74(2H，dd，J＝3.8Hz，6.6Hz)。
步驟3.1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丙烷羧酸叔丁酯用類似于實施例3步驟4中所示方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z471(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.91(1H，br t，J＝5.5Hz)，8.32-8.20(1H，m)，7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.30(2H，t，J＝6.4Hz)，2.91(2H，br d，J＝11.6Hz)，2.57(2H，s)，2.01(2H，br t，J＝9.5Hz)，1.73(2H，brd，J＝12.1Hz)，1.67-1.50(10H，m，包括6H，d，J＝7.0Hz，1.56ppm)，1.43(9H，s)，1.34-1.20(2H，m)，1.12(2H，dd，J＝4.0Hz，7.0Hz)，0.73(2H，dd，J＝3.9Hz，6.8Hz)。
步驟4.1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丙烷羧酸鹽酸鹽用類似于實施例1步驟7中所示方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z415(M+H)+。
m.p.206℃。
IR(KBr)v2936，2700，1732，1688，1556，1485，1383，1359，1182，1164，758cm-1。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.86(1H，t，J＝6.3Hz)，8.07(1H，dd，J＝1.0Hz，7.8Hz)，7.45(1H，d，J＝7.1Hz)，7.22(1H，dt，J＝1.3Hz，7.6Hz)，7.15(1H，dt，J＝1.2Hz，7.7Hz)，4.95-4.60(1H，m)，3.70-3.10(6H，m)，3.10-2.90(2H，m)，1.86(3H，m，包括2H，d，J＝11.2Hz，1.86ppm)，1.70-1.53(2H，m)，1.49(6H，d，J＝6.9Hz)，1.35-1.15(4H，m)。
C22H30N4O4·HCl·0.2H2O的計算值C，58.13；H，6.96；N,12.33.實測值C，57.93；H，6.97；N，12.18。
實施例53-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]丙酸鹽酸鹽 步驟1.4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯在室溫下于含1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮(J.Med.Chem.1999，42，2870-2880)(3.00克，17.02毫摩爾)及三乙胺(7.12毫升，51.06毫摩爾)的70毫升四氫呋喃攪拌溶液中添加含三光氣(5.15克，17.02毫摩爾)的14毫升四氫呋喃。使反應(yīng)混合物回流19h。混合物再冷卻至室溫，添加含4-(氨基甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(J.Prugh，L.A.Birchenough及M.S.Egbertson，Synth.Commun.，1992，22，2357-60)(3.28克，15.32毫摩爾)的10毫升四氫呋喃。反應(yīng)混合物再回流24h。再經(jīng)冷卻且以50毫升飽和NaHCO3水溶液堿化，并且以100毫升乙酸乙酯萃取三次。合并的萃取液以鹽水洗滌，以MgSO4干燥且濃縮。殘留物經(jīng)急驟色譜法(洗脫劑己烷/乙酸乙酯＝5/1至1/2)，獲得3.99克(62％)無色油狀標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ9.04-8.88(1H，m)，8.83-8.20(1H，m)，7.26-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，4.28-4.02(2H，m)，3.32(2H，t，J＝6.1Hz)，2.82-2.60(2H，m)，1.94-1.10(5H，m)，1.57(6H，d，J＝7.1Hz)，1.45(9H，s)。
步驟2.3-異丙基-2-氧代-N-(哌啶-4-基甲基)-2，3-二氫-1H-苯并咪式-1-甲酰胺使含4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.992克，9.58毫摩爾)的50毫升含10％鹽酸的甲醇及10毫升濃鹽酸的溶液在室溫下攪拌18h。接著濃縮混合物且以Na2CO3水溶液堿化，以CHCl3(100毫升)萃取三次。合并的萃取液經(jīng)干燥且濃縮。殘留物經(jīng)急驟色譜法(NH-硅膠，洗脫劑CH2Cl2/甲醇＝100/1)，獲得2.272克(75％)無色油狀標題化合物。
MS(ESI)m/z317(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ8.93(1H，br)，8.32-8.22(1H，m)，7.24-7.02(3H，m)，4.80-4.61(1H，m)，3.31(2H，t，J＝6.0Hz)，3.20-3.05(2H，m)，2.79-2.54(2H，m)，1.84-1.52(3H，m)，1.57(6H，d，J＝6.9Hz)，1.36-1.13(2H，m)。
步驟3.3-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]丙酸叔丁酯使含3-異丙基-2-氧代-N-(哌啶-4-基甲基)-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(0.50克，1.58毫摩爾，步驟2)、丙烯酸叔丁酯(0.340毫升，2.37毫摩爾)及iPrNEt(0.275毫升，2.37毫摩爾)的THF(20毫升)混合物回流18h。冷卻后，反應(yīng)混合物以飽和NaHCO3水溶液(100毫升)稀釋，以CH2Cl2(100毫升)萃取三次。合并的萃取液以Na2SO4干燥，經(jīng)過濾且濃縮。殘留物在硅膠柱上以MeOH/CH2Cl2(1∶20→1∶10)洗脫，接著在NH-硅膠上以EtOAc/己烷(1∶5→1∶2)洗脫進行色譜法，獲得0.111克(16％)無色糖漿狀標題化合物。
MS(ESI)m/z445(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.94(1H，br s)，8.30-8.20(1H，m)，7.25-7.11(3H，m)，7.11-7.00(1H，m)，4.80-4.62(1H，m)，3.31(2H，t，J＝6.2Hz)，2.95(2H，br t，J＝11.6Hz)，2.68(2H，t，J＝7.2Hz)，2.43(2H，t，J＝7.7Hz)，2.03(2H，br t，J＝11.4Hz)，1.98-1.82(1H，m)，1.79(2H，d，J＝12.1Hz)，1.56(6H，d，J＝7.2Hz)，1.50-1.30(11H，m，包括9H，s，1.44ppm)。
步驟4.3-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]丙酸鹽酸鹽用類似于實施例1步驟7中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z389(M+H)+。
IR(KBr)v2939，2637，1724，1682，1542，1466，1373，1217，1194，953，762cm-1。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.86(1H，t，J＝5.9Hz)，8.07(1H，dd，J＝0.8Hz，7.7Hz)，7.49(1H，d，J＝7.6Hz)，7.22(1H，dt，J＝1.3Hz，7.6Hz)，7.15(1H，dt，J＝1.0Hz，7.6Hz)，4.75-4.60(1H，m)，3.70-3.10(6H，m)，2.93(2H，br t，J＝11.2Hz)，2.85-2.70(2H，m)，1.95-1.75(3H，m，包括2H，d，J＝11.5Hz，1.87ppm)，1.65-1.40(8H，m，包括6H，d，J＝7.1Hz，1.49ppm)。
C20H28N4O4·HCl·0.8H2O的計算值C，54.68；H，7.02；N，12.75。實測值C，54.67；H，6.88；N，12.70。
實施例61-{[4-羥基-4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]環(huán)己烷羧酸
步驟1.1-(碘甲基)環(huán)己烷羧酸甲酯用類似于實施例3步驟1中所示的方法制備標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ3.73(3H，s)，3.32(2H，s)，2.20-2.05(2H，m)，1.70-1.20(8H，m)。
步驟2.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-4-羥基哌啶-1-基)甲基]環(huán)己烷羧酸甲酯用類似于實施例3步驟2中所示的方法，使用[(4-羥基哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(Chem.Pharm.Bull.，2002，50(9)1187-1194)及1-(碘甲基)環(huán)己烷羧酸甲酯(實施例6的步驟1)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z385(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ4.86(1H，br s)，3.66(3H，s)，3.11(2H，d，J＝6.3Hz)，2.55-2.45(6H，m)，2.03(2H，br d，J＝10.4Hz)，1.70-1.15(18H，m，包括9H，s，1.44ppm)。
步驟3.1-{[4-(氨基甲基)-4-羥基哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸甲酯用類似于實施例3步驟3中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z285(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ3.66(3H，s)，2.61(1H，br s)，2.57-2.45(5H，m)，2.35-2.11(3H，m)，2.04(2H，br d，J＝11.5Hz)，1.65-1.45(6H，m)，1.45-1.20(4H，m)。
步驟4.1-{[4-羥基-4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸甲酯用類似于實施例3步驟4中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z487(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ9.12(1H，t，J＝5.6Hz)，8.30-8.20(1H，m)，7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.65(1H，m)，3.66(3H，s)，3.54(2H，d，J＝5.9Hz)，2.60-2.45(6H，m)，2.03(2H，br d，J＝9.1Hz)，1.75-1.47(12H，m)，1.47-1.15(6H，m)。
步驟5.1-{[4-羥基-4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸用類似于實施例3步驟5中所示的方法制備標題化合物。
MS(ESI)m/z473(M+H)+。
m.p.184℃。
IR(KBr)v3437，3273，2943，1732，1688，1601，1533，1479，1452，1371，1134，978，762cm-1。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.94(1H，t，J＝5.6Hz)，8.09(1H，d，J＝7.7Hz)，7.43(1H，d，J＝7.7Hz)，7.22(1H，t，J＝7.8Hz)，7.14(1H，t，J＝7.4Hz)，4.75-4.58(1H，m)，4.59(1H，s)，2.47(2H，s)，4.00-3.00(6H，m)，1.86(2H，d，J＝11.4Hz)，1.60-1.10(18H，m，包括6H，d，J＝6.9Hz，1.49ppm)。
C25H36N4O5·0.5H2O的計算值C，62.35；H，7.74；N，11.63。實測值C，62.52；H，7.70；N，11.66。
實施例71-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸 步驟1.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)丁烷羧酸甲酯在環(huán)境溫度下，于含(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(12.8克，60毫摩爾)即1-甲?；h(huán)丁烷羧酸甲酯(2.13克，15毫摩爾，Davis，CharlesR.；Swenson，Dale C.；Burton，Donald J.，J.Org.Chem.，1993，58，6843)的四氫呋喃攪拌混合物中添加乙酸(8.6毫升，150毫摩爾)。30分鐘后，將三乙酰氧基硼氫化鈉(12.7克，60毫摩爾)添加于混合物中。接著，使混合物加熱至60℃2h。
冷卻后，將反應(yīng)混合物倒入飽和NaHCO3水溶液中。水層以二氯甲烷萃取三次。合并的有機相以鹽水洗滌，以MgSO4干燥且濃縮。殘留物在硅膠柱上以己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫進行色譜法，獲得4.25克(83％)白色固態(tài)標題化合物。
MS(ESI)m/z341(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ3.69(3H，s)，2.96(2H，t，J＝6.2Hz)，2.75(2H，d，J＝11.4Hz)，2.67(2H，s)，2.37-2.46(2H，m)，1.78-2.05(6H，m)，1.45-1.65(2H，m)，1.43(9H，s)，1.09-1.21(2H，m)。
步驟2.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸甲酯依據(jù)實施例3步驟3中所述程序，自1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)丁烷羧酸甲酯(實施例7的步驟1)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z241(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ3.67(3H，s)，2.72-2.78(2H，m)，2.66(2H，s)，2.54(2H，d，J＝6.2Hz)，2.34-2.47(2H，m)，1.79-2.04(8H，m)，1.54-1.64(2H，m)，1.05-1.35(3H，m)。
步驟3.1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸甲酯依據(jù)實施例1步驟6中所述程序，由1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮和1-[(4-{[(叔丁氧羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)丁烷羧酸甲酯(實施例7的步驟2)制備標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.92-8.86(1H，m)，8.28-8.24(1H，m)，7.20-7.12(3H，m)，4.75-4.62(1H，m)，3.70(3H，s)，3.27(2H，t，J＝6.4Hz)，2.85-2.72(2H，m)，2.68(2H，s)，2.47-2.35(2H，m)，2.05-1.92(4H，m)，1.92-1.76(2H，m)，1.71-1.61(2H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.32-1.17(2H，m)。
MS(ESI)m/z443(M+H+)。
步驟4.1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸依據(jù)實施例3步驟5中所述程序，自1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸甲酯(實施例7的步驟3)制備標題化合物。
IR(KBr)v3293，2979，2937，2875，1732，1687，1610，1548，1479，1375，1298，1203，1099，761，704cm-1。
1H-NMR(CDCl3)δ9.02-8.95(1H，m)，8.26-8.22(1H，m)，7.22-7.12(3H，m)，4.76-4.62(1H，m)，3.33(2H，t，J＝6.2Hz)，3.10-3.00(2H，m)，2.77(2H，s)，2.58-2.48(2H，m)，2.44-2.24(2H，m)，1.92-1.79(2H，s)，1.99-1.80(5H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.50-1.33(3H，m)。
MS(ESI)m/z429(M+H+)。
C23H32N4O4的計算值C，64.46；H，7.53；N，13.07。實測值C，64.47；H，7.43；N，12.93。
合成1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸的另一路徑敘述如下。
步驟5.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)丁烷羧酸乙酯依據(jù)實施例1步驟10中所述的程序，使用[亞環(huán)丁基(乙氧基)甲氧基](三甲基)硅烷(Chem.Commun.，1971，136-137)取代[甲氧基(四氫-4H-吡喃-4-亞基)甲氧基](三甲基)硅烷制備標題化合物。
MS(ESI)m/z355(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ4.55(1H，br)，4.17(2H，q，J＝7.1Hz)，2.96(2H，t，J＝6.3Hz)，2.76(2H，d，J＝11.4Hz)，2.48-2.33(2H，m)，2.05-1.80(6H，m)，1.43(9H，s)，1.25(3H，q，J＝7.1Hz)，1.40-1.05(7H，m)。
步驟6.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)丁烷羧酸含1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)丁烷羧酸乙酯(4.2克，11.9毫摩爾，步驟5)、2N NaOH(18毫升)及EtOH(12毫升)的混合物在50℃下加熱4h。所得溶液在冰浴中冷卻，并且添加2N HCl(約19毫升)直到混合物的pH約5-6為止。全部以CH2Cl2/iPrOH(3∶1，30毫升×3)萃取。合并的有機層經(jīng)干燥(Na2SO4)且過濾。濃縮濾液獲得3.8克(98％)黃色固態(tài)標題化合物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.08(1H，m)，3.20-3.10(2H，m)，3.08-2.99(2H，m)，2.91(2H，s)，2.60-2.38(4H，m)，2.35-2.16(2H，m)，2.05-1.76(6H，m)，1.65(1H，m)，1.44(9H，s)。
mp 160℃。
步驟7.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸4-甲基苯磺酸酯在N2下于500毫升3-頸圓底燒瓶中，使含1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]環(huán)丁烷羧酸(30克，92毫摩爾，步驟6)的THF(150毫升)混合物在室溫下攪拌10分鐘。在室溫下于該懸浮液中添加含p-TsOH H2O(52.4克，276毫摩爾)的THF(150毫升)溶液。在該溫度下攪拌10分鐘后，使所得溶液在回流條件下加熱3h。冷卻至室溫后，于1h內(nèi)在播晶種的同時非常緩慢地添加Et3N(28.1毫升，202毫摩爾)。添加Et3N的過程中形成白色沉淀物。所得白色懸浮液在室溫下攪拌6h，經(jīng)過濾且所得的固體以THF(100毫升×2)洗滌，在50℃下干燥5h，獲得35克(96％)白色粉末狀標題化合物。
1H-NMR(D2O)δ7.40(2H，d，J＝7.2Hz)，7.07(2H，d，J＝7.2Hz)，3.28-3.00(4H，m)，2.80-2.57(4H，m)，2.09(3H，s)，2.18-1.97(2H，m)，1.85-1.58(8H，m)，1.36-1.12(2H，m)。
mp210℃。
步驟8.1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸使含1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮(486毫克，2.8毫摩爾)及氯甲酸4-硝基苯酯(556毫克，2.8毫摩爾)的CH2Cl2(10毫升)混合物在室溫下攪拌5分鐘。于該混合物中緩慢添加Et3N(0.84毫升，6.1毫摩爾)，并且該混合物變成溶液。在室溫下將該溶液添加于含1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸4-甲基苯磺酸酯(1.1克，2.8毫摩爾，步驟7)的CH2Cl2(5毫升)混合物中。攪拌10分鐘后，添加Et3N(0.38毫升，2.8毫摩爾)，并且使所得混合物在室溫下攪拌2h。該混合物以0.5N HCl水溶液(10毫升)及飽和NaHCO3水溶液(10毫升)洗滌，接著濃縮有機層。在室溫下于殘留物中添加飽和NaHCO3水溶液(15毫升)及庚烷(15毫升)，并且使之在該溫度下攪拌6h。發(fā)現(xiàn)固體且過濾該混合物。所得固體以H2O及庚烷洗滌。經(jīng)干燥后獲得白色固態(tài)粗的物質(zhì)(1.0克，82％)。該粗物質(zhì)(4.0克)自甲苯(36毫升)再結(jié)晶純化，獲得2.6克白色固態(tài)標題化合物(66％)。
mp.173℃。
PXRD(2θ(+/-0.1)10.8，16.9，18.9，26.5)。
實施例8N-({1-(2-氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺 步驟1.[{1-(2-芐基氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯在環(huán)境溫度下，于含(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(38.8克，181毫摩爾)的N，N-二甲基甲酰胺(100毫升)攪拌溶液中添加3-氯新戊酸芐酯(14.2克，124毫摩爾，由3-氯新戊酰氯(25.6克，165毫摩爾)及芐基醇(19.6克，181毫摩爾)制備)、乙基二異丙基胺(64.0克，495毫摩爾)及碘化鈉(27.1克，181毫摩爾)。所得混合物在120℃下攪拌14h。蒸發(fā)除去揮發(fā)性成分，并且所得殘留物在硅膠柱上以己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫進行色譜法，獲得640毫克(1％)淡黃色油狀標題化合物。
MS(ESI)m/z405(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ7.43-7.23(5H，m)，5.10(2H，s)，4.58(1H，brt)，2.95(2H，m)，2.71(2H，m)，2.46(2H，br s)，2.06(2H，m)，1.57-1.36(3H，m)，1.44(9H，s)，1.12(2H，m)，1.17(6H，s)。
步驟2.N-({1-(2-芐基氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺在室溫下于含1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮(J.Med.Chem.1999，42，2870-2880)(411毫克，2.33毫摩爾)及三乙胺(1.00毫升，7.17毫摩爾)的二氯甲烷(20.0毫升)攪拌混合物中添加氯甲酸4-硝基苯酯(470毫克，2.33毫摩爾)。所得混合物在室溫下攪拌2h。于該混合物中添加含1-(2-芐基氧基羰基-2-甲基丙基)-4-氨基甲基哌啶鹽酸鹽{由濃縮[{1-(2-芐基氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯(實施例1的步驟1)(640毫克，1.49毫摩爾)及含10％HCl的MeOH(20.0毫升)的混合物制備}及三乙胺(1.00毫升，7.17毫摩爾)的二氯甲烷(5.00毫升)懸浮液。所得混合物在室溫下攪拌13h且于混合物中添加0.5M NaOH水溶液?；旌衔镆远燃淄檩腿　］腿∫阂?.5M NaOH水溶液及鹽水洗滌，以MgSO4干燥且真空濃縮。殘留物經(jīng)制備型薄層色譜法(硅膠，以二氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脫)純化，獲得508毫克(63％)淡黃色油狀標題化合物。
MS(ESI)m/z507(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ8.89(1H，br t，J＝5.7Hz)，8.26(1H，m)，7.43-7.05(8H，m)，5.10(2H，s)，4.70(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.26(2H，m)，2.75(2H，m)，2.48(2H，br s)，2.11(2H，m)，1.61(2H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.52(1H，m)，1.26(2H，m)，1.18(6H，s)。
步驟3.N-({1-(2-氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺在室溫下及氫氣中使含N-({1-(2-芐基氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(實施例8的步驟2)(418毫克，0.825毫摩爾)及20％Pd(OH)2/C(58.0毫克)的甲醇(80毫升)混合物攪拌12h。在硅藻土墊上過濾催化劑，并且減壓蒸發(fā)濾液。所得固體以己烷-CH2Cl2再結(jié)晶，獲得285毫克(84％)無色固態(tài)標題化合物。
MS(ESI)m/z417(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.80(1H，br t，J＝5.8Hz)，8.05(1H，m)，7.42(1H，m)，7.20(1H，m)，7.12(1H，m)，4.65(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.20(2H，m)，2.85(2H，m)，2.44(2H，br s)，2.18(2H，m)，1.61(2H，m)，1.50(1H，m)，1.47(6H，d，J＝7.0Hz)，1.20(2H，m)，1.04(6H，s)。未發(fā)現(xiàn)相當于羧酸的訊號。
C22H32N4O4·0.1H2O的計算值C，63.17；H，7.76；N，13.39。實測值C，62.78；H，7.74；N，13.11。
實施例9N-({1-(2-四唑-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺 步驟1.2-芐基-α，α-二甲基-2H-四唑-5-乙酸，乙酯在環(huán)境溫度下于含α，α-二甲基四唑-5-乙酸，乙酯(J.Med.Chem.1996，39，2354-2366)(6.87克，37.3毫摩爾)及K2CO3(12.3克，89.0毫摩爾)的丙酮(200毫升)攪拌混合物中添加芐基溴(4.45毫升，37.4毫摩爾)。所得混合物在50℃下攪拌18h且減壓濃縮。所得殘留物在硅膠柱上以己烷/乙酸乙酯(10∶1)洗脫進行色譜法，獲得6.14克(60％)無色油狀標題化合物。
MS(ESI)m/z275(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.23(5H，m)，5.73(2H，s)，4.11(2H，q，J＝7.2Hz)，1.70(6H，s)，1.13(3H，t，J＝7.2Hz)。
步驟2.2-芐基-α，α-二甲基-2H-四唑-5-乙醛在-78℃下于含2-芐基-α，α-二甲基-2H-四唑-5-乙酸乙酯乙醛(實施例9的步驟1)(6.14克，22.4毫摩爾)的二氯甲烷(100毫升)攪拌混合物中添加DIBAL(甲苯中1.0M，50.0毫升，50.0毫摩爾)。所得混合物在-78℃下攪拌4h。于反應(yīng)混合物中添加DIBAL(甲苯中1.0M，25.0毫升，25.0毫摩爾)，并且使所得混合物在-78℃下攪拌8h。于該混合物中添加2M HCl水溶液(100毫升)及飽和NH4Cl水溶液(20毫升)。分離有機層，以硫酸鎂干燥且減壓濃縮。所得殘留物在硅膠柱上以己烷/乙酸乙酯(10∶1)洗脫進行色譜法，獲得3.45克(67％)無色油狀標題化合物。
MS(ESI)m/z231(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ9.68(1H，s)，7.45-7.23(5H，m)，5.74(2H，s)，1.56(6H，s)。
步驟3.[{1-(2-(2-芐基四唑)-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯于含2-芐基-α，α-二甲基-2H-四唑-5-乙醛(實施例9的步驟2)(1.28克，5.56毫摩爾)及(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.40克，11.2毫摩爾)的四氫呋喃(300毫升)攪拌溶液中添加NaBH(OAc)3(5.90克，27.8毫摩爾)及AcOH(1.67克，27.8毫摩爾)。所得混合物在60℃下攪拌9小時且減壓濃縮。于攪拌的殘留油及固體中添加飽和NaHCO3水溶液及二氯甲烷。分離有機層，以硫酸鎂干燥且減壓濃縮。所得殘留物在硅膠柱上以己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫進行色譜法，獲得830毫克(35％)無色油狀標題化合物。
MS(ESI)m/z429(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.43-7.23(5H，m)，5.72(2H，s)，4.50(1H，brt)，2.91(2H，m)，2.58(2H，br s)，2.49(2H，m)，2.05(2H，m)，1.68-1.14(3H，m)，1.44(9H，s)，1.38(6H，s)，1.00(2H，m)。
步驟4.N-({1-(2-(2-芐基四唑)-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依據(jù)實施例8步驟2中所述程序，自1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮及[{1-(2-(2-芐基四唑)-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯(實施例9的步驟3)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z531(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ8.86(1H，br t，J＝5.7Hz)，8.26(1H，m)，7.43-7.08(8H，m)，5.72(2H，s)，4.70(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.21(2H，m)，2.59(2H，br s)，2.51(2H，m)，2.07(2H，m)，1.65-1.32(3H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.38(6H，s)，1.10(2H，m)。
步驟5.N-({1-(2-甲基-2-四唑丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依據(jù)實施例8步驟3中所述程序，自N-({1-(2-(2-芐基四唑)-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(實施例9的步驟4)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z441(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.77(1H，br t，J＝5.9Hz)，8.04(1H，m)，7.40(1H，m)，7.18(1H，m)，7.11(1H，m)，4.63(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.15(2H，m)，2.54(2H，br s)，2.43(2H，m)，2.10(2H，m)，1.60-1.25(3H，m)，1.45(6H，d，J＝7.0Hz)，1.32(6H，s)，1.14(2H，m)。未發(fā)現(xiàn)相當于四唑的訊號。
C22H32N8O4·0.95H2O的計算值C，57.74；H，7.47；N，24.48。實測值C，58.03；H，7.43；N，24.10。
實施例10N-({1-(2-環(huán)戊基-2-四唑乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺
步驟1.α-環(huán)戊基四唑-5-乙酸，乙酯在環(huán)境溫度下于含1-氰基-1-環(huán)戊烷羧酸乙酯(Bioorg.Med.Chem.Lett.1999，9，369-374)(6.19克，37.0毫摩爾)的1，4-二烷(100毫升)攪拌溶液中添加nBu3SnN3(12.3克，37.0毫摩爾)。所得混合物回流15h且減壓濃縮。于所得殘留物中添加含4M HCl的1，4-二烷(50毫升)，并且減壓濃縮。所得油狀物以己烷洗滌二次，獲得黃色油狀標題化合物的粗產(chǎn)物，其未進一步純化用于下一步驟中。
步驟2.2-芐基-α-環(huán)戊基-2H-四唑-5-乙酸，乙酯依據(jù)實施例9的步驟1中所述程序，自α-環(huán)戊基四唑-5-乙酸，乙酯(實施例10的步驟1)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z301(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.23(5H，m)，5.73(2H，s)，4.11(2H，q，J＝7.1Hz)，2.55-2.35(4H，m)，1.88-1.56(4H，m)，1.12(3H，t，J＝7.1Hz)。
步驟3.2-芐基-α-環(huán)戊基-2H-四唑-5-乙醛依據(jù)實施例9的步驟2中所述程序，自2-芐基-α-環(huán)戊基-2H-四唑-5-乙酸，乙酯(實施例10的步驟2)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z257(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ9.71(1H，s)，7.50-7.30(5H，m)，5.74(2H，s)，2.45-2.18(4H，m)，1.85-1.66(4H，m)。
步驟4.[{1-(2-(2-芐基四唑)-2-環(huán)戊基乙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯依據(jù)實施例9的步驟3中所述程序，自2-芐基-α-環(huán)戊基-2H-四唑-5-乙醛(實施例10的步驟3)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z455(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.43-7.23(5H，m)，5.72(2H，s)，4.67(1H，brt)，2.88(2H，m)，2.66(2H，br s)，2.48(2H，m)，2.24(2H，m)，1.93(2H，m)，1.83(2H，m)，1.78-1.48(4H，m)，1.43(9H，s)，1.37(2H，m)，1.23(1H，m)，0.94(2H，m)。
步驟5.N-({1-(2-芐基四唑)-2-環(huán)戊基乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依據(jù)實施例8的步驟2中所述程序，自1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮及[{1-(2-(2-芐基四唑)-2-環(huán)戊基乙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯(實施例10的步驟4)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z557(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ8.85(1H，br t，J＝5.5Hz)，8.26(1H，m)，7.43-7.08(8H，m)，5.73(2H，s)，4.70(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.19(2H，m)，2.70(2H，br s)，2.53(2H，m)，2.25(2H，m)，2.15-1.35(11H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.07(2H，m)。
步驟6.N-({1-(2-環(huán)戊基-2-四唑乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依據(jù)實施例8的步驟3中所述程序，自N-({1-(2-芐基四唑)-2-環(huán)戊基乙基}哌啶-4-基)甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(實施例10的步驟5)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z467(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.76(1H，br t，J＝5.9Hz)，8.04(1H，m)，7.40(1H，m)，7.18(1H，m)，7.11(1H，m)，4.64(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.14(2H，m)，2.63(2H，br s)，2.54(2H，m)，2.08(2H，m)，2.00(2H，m)，1.76(2H，m)，1.68-0.96(9H，m)，1.46(6H，d，J＝7.0Hz)。未發(fā)現(xiàn)相當于四唑的訊號。
C24H34N8O4·1.0H2O·0.5CH2Cl2的計算值C，55.83；H，7.08；N，21.26。實測值C，55.71；H，7.48；N，20.86。
實施例11N-({1-(2-環(huán)己基-2-四唑乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺 步驟1.α-環(huán)己基四唑-5-乙酸，乙酯依據(jù)實施例10的步驟1中所述程序，自1-氰基-1-環(huán)己烷羧酸，乙酯(Bioorg.Med.Chem.Left.1999，9，369-374)制備標題化合物。
步驟2.2-芐基-α-環(huán)己基-2H-四唑-5-乙酸，乙酯依據(jù)實施例9的步驟1中所述程序，自α-環(huán)己基四唑-5-乙酸，乙酯(實施例11的步驟1)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z315(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.23(5H，m)，5.75(2H，s)，4.11(2H，q，J＝7.1Hz)，2.36-2.16(4H，m)，1.70-1.44(6H，m)，1.12(3H，t，J＝7.1Hz)。
步驟3.2-芐基-α-環(huán)己基-2H-四唑-5-乙醛依據(jù)實施例9的步驟2中所述程序，自2-芐基-α-環(huán)己基-2H-四唑-5-乙酸，乙酯(實施例11的步驟2)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z271(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ9.55(1H，s)，7.45-7.25(5H，m)，5.75(2H，s)，2.34-2.16(2H，m)，2.14-1.94(2H，m)，1.70-1.32(6H，m)。
步驟4.[{1-(2-(2-芐基四唑)-2-環(huán)己基乙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯依據(jù)實施例9的步驟3中所述程序，自2-芐基-α-環(huán)己基-2H-四唑-5-乙醛(實施例11的步驟3)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z469(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.43-7.23(5H，m)，5.74(2H，s)，4.55(1H，brt)，2.87(2H，m)，2.62-1.05(17H，m)，2.49(2H，br s)，1.43(9H，s)，0.93(2H，m)。
步驟5.N-({1-(2-(2-芐基四唑)-2-環(huán)己基乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依據(jù)實施例8的步驟2中所述程序，自1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮及[{1-(2-(2-芐基四唑)-2-環(huán)己基乙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯(實施例11的步驟4)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z571(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ8.86(1H，br t，J＝5.7Hz)，8.26(1H，m)，7.43-7.08(8H，m)，5.73(2H，s)，4.70(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.18(2H，m)，2.51(2H，br s)，2.45-1.15(17H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.04(2H，m)。
步驟6.N-({1-(2-環(huán)己基-2-四唑乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依據(jù)實施例8的步驟3中所述程序，自N-({1-(2-(2-芐基四唑)-2-環(huán)己基乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(實施例11的步驟5)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z481(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.76(1H，br t，J＝5.9Hz)，8.04(1H，m)，7.41(1H，m)，7.18(1H，m)，7.12(1H，m)，4.64(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.14(2H，m)，2.38(2H，br s)，2.33-2.10(4H，m)，1.98(2H，m)，1.65-0.96(13H，m)，1.46(6H，d，J＝7.0Hz)。未發(fā)現(xiàn)相當于四唑的訊號。
實施例121-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]環(huán)己烷羧酸鹽酸鹽
步驟1.1-(4-氧代哌啶-1-基)環(huán)己烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟3中所示的方法，使用1-氨基環(huán)己烷羧酸叔丁酯(Kenner等人，J.Chem.Soc.，.1965，6239，6243)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z282(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.92(4H，t，J＝5.9Hz)，2.41(4H，t，J＝6.0Hz)，2.01-1.89(2H，m)，1.76-1.62(4H，m)，1.45(9H，s)，1.53-1.33(4H，m)。
步驟2.1-(4-氰基哌啶-1-基)環(huán)己烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟4中所示的方法，使用1-(4-氧代哌啶-1-基)環(huán)己烷羧酸叔丁酯制備標題化合物。
MS(ESI)m/z293(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.94-2.85(2H，m)，2.67-2.56(1H，m)，2.55-2.42(2H，m)，1.96-1.72(6H，m)，1.70-1.23(8H，m)，1.48(9H，s)。
步驟3.1-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]環(huán)己烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟5中所示的方法，使用1-(4-氰基哌啶-1-基)環(huán)己烷羧酸叔丁酯制備標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.07-3.18(2H，m)，2.55(2H，d，J＝6.4Hz)，2.15-1.94(4H，m)，1.47(9H，s)，1.76-1.19(13H，m)，1.19-1.03(2H，m)。
MS(ESI)m/z297(M+H+)。
步驟4.1-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]環(huán)己烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟6中所示的方法，使用1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮及1-(4-氰基哌啶-1-基)環(huán)己烷羧酸叔丁酯制備標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.97-8.86(1H，m)，8.29-8.24(1H，m)，7.21-7.11(3H，m)，4.78-4.64(1H，m)，3.29(2H，t，J＝6.2Hz)，3.19-3.09(2H，m)，2.16-2.05(2H，m)，2.04-1.93(2H，m)，1.83-1.73(2H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.46(9H，s)，1.70-1.39(2H，m)，1.38-1.16(7H，m)。
MS(ESI)m/z499(M+H+)。
步驟5.1-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]環(huán)己烷羧酸鹽酸鹽在室溫下于含1-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]環(huán)己烷羧酸叔丁酯(400毫克，0.802毫摩爾)的二氯甲烷(5毫升)攪拌溶液中添加三氟乙酸(5毫升，65.2毫摩爾)。12h后，減壓除去揮發(fā)性成分。于殘留物中添加含4N HCl的二烷(5.0毫升)，并且攪拌10分鐘。接著，減壓除去揮發(fā)物。殘留物在二乙醚/乙醇中沉淀，獲得370毫克無色粉末狀標題化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ8.94-8.82(1H，m)，7.45(1H，d，J＝7.9Hz)，7.27-7.10(2H，m)，4.73-4.61(1H，m)，3.71-3.19(7H，m)，2.98-2.81(2H，m)，2.38-2.26(2H，m)，1.98-1.53(10H，m)，1.49(6H，d，J＝7.0Hz)，1.38-1.03(2H，m)。
MS(ESI)m/z443(M+H+)。
C24H35N4O4·2H2O的計算值C，55.97；H，7.63；N，10.88。實測值C，55.61；H，7.51；N，10.48。
實施例132-乙基-2-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}丁酸
步驟1.2-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]-2-乙基丁酸甲酯用類似于實施例7的步驟1中所示的方法，使用2-乙基-2-甲?；∷峒柞?Okano，K.；Morimoto，T.；Sekiya，M.Journal of theChemical Society，Chemical Communications，1985，3，119)制備標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ4.62-4.48(1H，br)，3.65(3H，s)，3.01-2.93(2H，m)，2.73-2.65(2H，m)，2.46(2H，s)，2.13-2.02(2H，m)，1.73-1.50(6H，m)，1.44(9H，s)，1.28-1.10(3H，m)，0.76(6H，t，J＝7.5Hz)。
MS(ESI)m/z357(M+H+)。
步驟2.2-乙基-2-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}丁酸甲酯依據(jù)實施例8的步驟2中所述程序，自1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮及2-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]-2-乙基丁酸甲酯(實施例13的步驟1)制備標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.92-8.86(1H，m)，8.28-8.23(1H，m)，7.20-7.12(3H，m)，4.77-4.61(1H，m)，3.65(3H，s)，3.27(2H，t，J＝6.4Hz)，2.75-2.66(2H，m)，2.47(2H，s)，2.16-2.05(2H，m)，1.72-1.49(10H，m)，1.38-1.21(5H，m)，0.76(6H，d，J＝7.5Hz)。
MS(ESI)m/z459(M+H+)。
步驟3.2-乙基-2-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}丁酸依據(jù)實施例3的步驟5中所述程序，自2-乙基-2-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}丁酸甲酯(實施例13的步驟3)制備標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.03-8.94(1H，m)，8.27-8.21(1H，m)，7.20-7.12(3H，m)，4.76-4.63(1H，m)，3.34(2H，t，J＝6.2Hz)，3.16-3.05(2H，m)，2.60(2H，s)，2.55-2.38(2H，m)，1.94-1.38(2H，m)，1.80-1.38(15H，m)，0.88(6H，d，J＝7.5Hz)。
MS(ESI)m/z445(M+H+)。
C24H37N4O4Cl·0.2H2O的計算值59.48；H，7.78；N，11.56。實測值C，59.38；H，7.74；N，11.29。
實施例141-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]環(huán)戊烷羧酸鹽酸鹽 步驟1.1-(4-氧代哌啶-1-基)環(huán)戊烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟3中所示的方法，使用1-氨基環(huán)戊烷羧酸叔丁酯(WO 9105796)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z268(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.93(4H，t，J＝5.9Hz)，2.41(4H，t，J＝6.0Hz)，2.39-2.26(2H，m)，1.85-1.54(8H，m)，1.46(9H，s)。
步驟2.1-(4-氰基哌啶-1-基)環(huán)戊烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟4中所示的方法，使用1-(4-氧代哌啶-1-基)環(huán)戊烷羧酸叔丁酯制備標題化合物。
MS(ESI)m/z279(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.94-2.82(2H，m)，2.67-2.49(3H，m)，2.33-2.21(2H，m)，1.96-1.72(5H，m)，1.70-1.40(6H，m)，1.48(9H，s)。
步驟3.1-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]環(huán)戊烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟5中所示的方法，使用1-(4-氰基哌啶-1-基)環(huán)戊烷羧酸叔丁酯制備標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.07-2.95(2H，m)，2.60-2.52(2H，m)，2.41-1.19(4H，m)，1.76-1.62(4H，m)，1.61-1.40(12H，m)，1.19-1.03(2H，m)。
MS(ESI)m/z283(M+H+)。
步驟4.1-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]環(huán)戊烷羧酸叔丁酯用類似于實施例1步驟6中所示的方法，使用1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮及1-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]環(huán)戊烷羧酸叔丁酯制備標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.96-8.84(1H，m)，8.29-8.22(1H，m)，7.21-7.11(3H，m)，4.77-4.56(1H，m)，3.29(2H，t，J＝6.2Hz)，3.07-2.94(2H，m)，2.37-2.17(4H，m)，1.82-1.63(6H，m)，1.56(6H，d，J＝7.1Hz)，1.46(9H，s)，1.61-1.49(2H，m)，1.38-1.16(3H，m)。
MS(ESI)m/z485(M+H+)。
步驟5.1-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]環(huán)戊烷羧酸鹽酸鹽用類似于實施例12的步驟5中所示方法，使用1-[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]環(huán)戊烷羧酸叔丁酯制備標題化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ8.91-8.82(1H，m)，8.07(1H，d，J＝7.5Hz)，7.45(1H，d，J＝7.7Hz)，7.26-7.09(2H，m)，4.74-4.56(1H，m)，3.60-3.00(6H，m)，2.26-2.10(4H，m)，1.96-1.57(9H，m)，1.49(6H，d，J＝7.0Hz)。
MS(ESI)m/z429(M+H+)。
C23H33N4O4Cl的計算值C，59.41；H，7.15；N，12.05。實測值C，59.14；H，7.22；N，11.82。
實施例15N-({1-[(4-氧基羰基四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺
步驟1.四氫吡喃-4-基-羧酸芐酯使含四氫吡喃-4-基-羧酸(910毫克，6.99毫摩爾)及SOCl2(5.0毫升)的混合物在60℃下攪拌1h，并且真空濃縮。在環(huán)境溫度下于殘留物中添加芐基醇(1.52克，14.1毫摩爾)及四氫呋喃(5.0毫升)。使所得混合物在環(huán)境溫度下攪拌13h，并且真空濃縮。殘留物經(jīng)制備性薄層色譜法(硅膠，以己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫)純化，獲得1.08克(70％)淡黃色油狀標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.25(5H，m)，5.13(2H，s)，3.95(2H，m)，3.42(2H，m)，2.59(1H，m)，1.94-1.68(4H，m)。
步驟2.4-碘甲基四氫吡喃-4-基-羧酸芐酯依據(jù)實施例3的步驟1中所述程序，自四氫吡喃-4-基-羧酸芐酯(實施例15的步驟1)制備標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.25(5H，m)，5.19(2H，s)，3.80(2H，m)，3.47(2H，m)，3.31(2H，s)，2.18(2H，m)，1.56(2H，m)。
步驟3.N-苯甲?；?4-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氟哌啶使含N-苯甲?；?4-氨基甲基-4-氟哌啶(J.Med.Chem.1999，42，1648-1660)(3.54克，15.0毫摩爾)及二碳酸二叔丁酯(4.91克，22.5毫摩爾)的甲醇(80毫升)混合物在室溫下攪拌15h，并且真空濃縮。所得殘留物在硅膠柱上以己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫進行色譜法，獲得4.52克(89％)無色油狀標題化合物。
MS(ESI)m/z337(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.55-7.25(5H，m)，5.16(1H，br t，J＝6.3Hz)，4.51(1H，m)，3.62(1H，m)，3.55-3.00(4H，m)，2.10-1.25(4H，m)，1.43(9H，s)。
步驟4.4-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氟哌啶使含N-苯甲?；?4-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氟哌啶(實施例15的步驟3)(4.42克，13.1毫摩爾)、NaOH(2.62克，65.5毫摩爾)、H2O(9.00毫升)及乙醇(90.0毫升)的混合物回流15h，并且真空濃縮。向所得殘留物中添加水及氯仿。分離有機層，以硫酸鎂干燥且減壓濃縮。所得固體以己烷-CH2Cl2再結(jié)晶，獲得1.77克(58％)無色固態(tài)標題化合物。
MS(ESI)m/z233(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ4.93(1H，m)，3.30(2H，dd，J＝21.5，6.3Hz)，2.91(4H，m)，1.88-1.34(4H，m)，1.45(9H，s)，未發(fā)現(xiàn)相當于氨基的訊號。
步驟5.({1-[(4-芐基氧基羰基四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)氨基甲酸叔丁酯依據(jù)實施例3的步驟2中所述程序，自4-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氟哌啶(實施例15的步驟4)及4-碘甲基四氫吡喃-4-基-羧酸芐酯(實施例15的步驟2)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z465(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.25(5H，m)，5.16(2H，s)，4.78(1H，brt)，3.80(2H，m)，3.46(2H，m)，3.23(2H，dd，J＝21.9，6.3Hz)，2.64-2.32(4H，m)，2.52(2H，s)，2.08(2H，m)，1.90-1.35(6H，m)，1.45(9H，s)。
步驟6.N-({1-[(4-芐基氧基羰基四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依據(jù)實施例1的步驟6中所述程序，自1-異丙基-1，3-二氫-2H-苯并咪唑-2-酮及({1-[(4-芐基氧基羰基四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)氨基甲酸叔丁酯(實施例15的步驟5)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z567(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ9.08(1H，br t，J＝6.0Hz)，8.25(1H，m)，7.46-7.06(8H，m)，5.16(2H，s)，4.71(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.80(2H，m)，3.54(2H，dd，J＝20.9，6.0Hz)，3.46(2H，m)，2.65-2.36(4H，m)，2.53(2H，br s)，2.08(2H，m)，1.88-1.44(6H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)。
步驟7.N-({1-[(4-氧基羰基四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依據(jù)實施例1的步驟3中所述程序，自N-({1-[(4-芐基氧基羰基四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)-3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(實施例15的步驟6)制備標題化合物。
MS(ESI)m/z477(M+H)+。
1H NMR(CD3OD)δ7.93(1H，m)，7.12(1H，m)，7.02(1H，m)，6.93(1H，m)，4.49(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.65-3.36(6H，m)，3.15-2.82(4H，m)，2.80(2H，br s)，1.98-1.70(6H，m)，1.35(6H，d，J＝7.0Hz)，1.34(2H，m)。未發(fā)現(xiàn)相當于酰胺及羧酸的訊號。
所有出版物，包括(但不限于)本申請中所引用的頒發(fā)專利、專利申請及期刊論文各以其全文并入本文供參考。
雖然上文已參考公開的實施方案描述了本發(fā)明，但本領(lǐng)域的技術(shù)人員可輕易了解詳細的特定實驗僅是本發(fā)明的舉例說明。應(yīng)了解，可以在不偏離本發(fā)明的精神下進行各種改進。因此，僅用下面的權(quán)利要求限定本發(fā)明。
權(quán)利要求
1.下式的化合物， 或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中A為具有1至4個碳原子的亞烷基，該亞烷基未被取代或被1至4個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3-至6-元環(huán)；R1為異丙基或環(huán)戊基；R2為氫原子、鹵素原子或羥基；R3為羧基、四唑基、5-氧代-1，2，4-二唑-3-基或5-氧代-1，2，4-噻二唑-3-基；并且m為整數(shù)1或2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基或四唑基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基未被取代或被1至2個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3-至6-元環(huán)；并且m為整數(shù)2。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1為異丙基；R2為氫原子；R3為羧基或四唑基；A為具有1至2個碳原子的亞烷基，該亞烷基被2個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的偕取代基取代，其中該偕取代基可與其連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3-至6-元環(huán)；并且m為整數(shù)2。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1為異丙基；R2為氫原子；R3為羧基或四唑基；A為 并且m為整數(shù)2。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1為異丙基；R2為氫原子、氟原子或羥基；R3為羧基；A為 并且m為整數(shù)2。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，該化合物選自4-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氫-2H-吡喃-4-羧酸；1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸；1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)戊烷羧酸；1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丙烷羧酸；1-{[4-羥基-4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)己烷羧酸；1-{[4-({[(3-異丙基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}環(huán)丁烷羧酸；或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物。
7.藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，以及藥學(xué)上可接受的載體。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的藥物組合物，其進一步包含另一種藥理學(xué)活性劑。
9.治療包括人類的哺乳動物中由5-HT4受體活性介導(dǎo)的疾病狀況的方法，它包括給予需要該治療的哺乳動物治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中所述疾病狀況是胃食管反流病、胃腸疾病、胃動力障礙、非潰瘍性消化不良、功能性消化不良、腸易激綜合征(IBS)、便秘、消化不良、食管炎、胃食管疾病、惡心、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、阿爾茲海默氏病、認知障礙、嘔吐、偏頭痛、神經(jīng)學(xué)疾病、疼痛、心血管疾病、心力衰竭、心律失常、糖尿病或呼吸暫停綜合征。
11.下式的化合物， 或其鹽，其中R2為氫原子、羥基或鹵素原子；R6為氫原子或氨基保護基；Y為具有1至4個碳原子的烷氧基、具有2至8個碳原子的二烷基氨基、咪唑基、鄰苯二甲酰亞氨基、琥珀酰亞氨基或磺?；徊⑶襪為1或2。
12.下式的化合物， 或其鹽，其中A為具有1至4個碳原子的亞烷基，該亞烷基未被取代或被1至4個獨立地選自由鹵素原子、具有1至4個碳原子的烷基、具有1至4個碳原子的羥基-烷基和具有2至6個碳原子的烷氧基-烷基組成的組的取代基取代，其中任意2個非鹵素取代基可與它們連接的碳原子一起形成任選含至少一個選自N、O及S的雜原子的3-至6-元環(huán)；R2為氫原子、羥基或鹵素原子；R4為羥基或羧基保護基；R6為氫原子或氨基保護基；并且m為1或2。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中R
文檔編號C07D405/14GK1968946SQ200580019734
公開日2007年5月23日 申請日期2005年6月1日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月15日
發(fā)明者安藤幸司, 井口聰, 村瀨德晃, 村田好德, 沼田豐治, 曾根大紀, 內(nèi)田力, 上木達生 申請人:輝瑞大藥廠