專利名稱：新的锝和錸的絡(luò)合物、其制備中所用的配體及其作為放射性藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及放射性锝(Tc)和錸(Re)的絡(luò)合物，特別是基于锝(I)[Tc(I)]的Tc絡(luò)合物。本發(fā)明提供了新的Tc和Re的絡(luò)合物以及許多適用于形成所述絡(luò)合物的新配體。此外，本發(fā)明還涉及含有锝和錸的絡(luò)合物的放射性藥物產(chǎn)品和用于制備所述放射性藥物的試劑盒。本發(fā)明也包括這些放射性產(chǎn)品的各種用途。
相關(guān)技術(shù)說(shuō)明锝和錸的配位化學(xué)在用于核醫(yī)學(xué)的新放射性藥品的設(shè)計(jì)和合成中起到了重要作用。99mTc放射性藥品在核醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有廣泛的應(yīng)用。99mTc的物理性能使其成為用于外部成像的最理想放射性核素之一。從99Mo-99mTc發(fā)生器系統(tǒng)易于得到的是半衰期為6小時(shí)和γ發(fā)射最佳能量為140keV。Re絡(luò)合物是Tc絡(luò)合物的結(jié)構(gòu)模型，因?yàn)橥滴镲@示出非常相似的配位參數(shù)和物理性能。另外，具有原子核186Re和188Re的Re絡(luò)合物具有優(yōu)異的性能，因?yàn)樗鼈兪蔷哂杏行е委熌芰康摩?放射體，已經(jīng)報(bào)道了大范圍的具有這些金屬的絡(luò)合物，其中一些是當(dāng)前在核醫(yī)學(xué)中采用的。
基于Tc(I)的放射性藥品是理想的，這是由于事實(shí)上d6低自旋Tc(I)離子是動(dòng)力學(xué)上惰性的，意味著這種放射性藥品在活體內(nèi)非常穩(wěn)定。多年來(lái)，唯一重要的在低氧化態(tài)具有Tc的放射性藥品是99mTc[MIBI]+6，它在活體內(nèi)是穩(wěn)定的，但對(duì)于化學(xué)取代不是非常適合。更近一些，另外的Tc(I)放射性藥品的發(fā)展已經(jīng)受到用于制備反應(yīng)性Tc(I)部分的簡(jiǎn)單迅速的步驟說(shuō)明的支持，因此推動(dòng)了多方面的有機(jī)金屬化學(xué)。該反應(yīng)性Tc(I)部分是[Tc(CO)3(H2O)3]+，并且由Alberto等人報(bào)道[J.Am.Chem.Soc.120pp 7987-8(1998)]。連接到高惰性fac-[Tc(CO3)]+核的三個(gè)水分子能夠容易地被許多官能團(tuán)取代以給Tc(I)離子的一面加帽并產(chǎn)生含有Tc(CO)3部分的穩(wěn)定絡(luò)合物。例如，Kothari等人[Appl.Rad.Isot.58 p543-9(2003)]證實(shí)了NP2配體與[Tc(CO)3(H2O)3]+反應(yīng)形成穩(wěn)定的螯合物。
如果锝和錸放射性藥品的進(jìn)一步發(fā)展導(dǎo)致可提供穩(wěn)定的金屬絡(luò)合物，那么這將是有益的，該金屬絡(luò)合物是這樣的(i)易于偶聯(lián)到一定范圍的生物性媒介物上，(ii)易于改性以產(chǎn)生中性和帶一個(gè)正電荷的金屬絡(luò)合物兩者，和(iii)易于衍生以改性金屬絡(luò)合物的電子性質(zhì)和溶解性這兩個(gè)方面。
Arnold等人[JCS Dalton Trans.pp736-46(2001)]已經(jīng)報(bào)道了三腳架式配體三(2-吡啶基)甲胺及其一些衍生物，該論文公開(kāi)了配體與銅(II)和鋅(II)的絡(luò)合物及其晶體結(jié)構(gòu)以示范各種絡(luò)合物的配位方式。Arnold沒(méi)有暗示所公開(kāi)的配體將有益于放射性锝和錸絡(luò)合物的形成。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了含有三腳架式配體的新的锝和錸絡(luò)合物，用于本發(fā)明的三腳架式配體形成的金屬絡(luò)合物顯示出超過(guò)現(xiàn)有技術(shù)金屬絡(luò)合物的優(yōu)異性能。
本發(fā)明詳細(xì)說(shuō)明第一方面，本發(fā)明提供了一種具有式(I)配體的金屬絡(luò)合物 其中金屬是锝或錸的放射性同位素；R1是E基團(tuán)或-CH2(AR5)，其中A是S或O，以及R5是H或C1-6烷基；R2和R3各自獨(dú)立地是E基團(tuán)；E是任選地被取代的C3-10含氮雜芳環(huán)；以及R4是-(Z)q-Y；其中每個(gè)Z獨(dú)立地是-CQ2-、-CQ＝CQ-、-O≡C-、-CQ2CO2-、-CO2CQ2-、-NQ-、-NQCO-、-CONQ-、-NQ(C＝O)NQ-、-NQ(C＝S)NQ-、-SO2NQ-、-NQSO2-、-CQ2OCQ2-、-CQ2SCQ2-、-CQ2(NQ)CQ2-、C4-8亞雜環(huán)烷基、C4-8亞環(huán)烷基、C5-I2亞芳基、或C3-12亞雜芳基、氨基酸或單分散的聚乙二醇(PEG)結(jié)構(gòu)單元；其中每個(gè)Q獨(dú)立地選自H、C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基、C1-4烷氧基烷基或C1-4羥烷基；q是0-10的整數(shù)；以及Y是H、氨基、C1-10烷基、C3-20烷基芳香基、C6-14芳基、C3-12雜環(huán)、C2-10烷氧基烷基、C1-10羥基烷基、C1-10氨基烷基、C1-10羥基烷基、C1-10烷氧基、C1-10酸基、C6-10芳氧基或C6-10芳?；趸?，或者Y是生物學(xué)靶向部分；并且其中絡(luò)合作用涉及配體的5個(gè)可能的原子之中的至多3個(gè)。
本發(fā)明所定義的“金屬絡(luò)合物”意思是比較穩(wěn)定的配位絡(luò)合物，其中配體為式I的配體并且中心金屬是Tc或Re的同位素。當(dāng)該金屬是Tc的同位素時(shí)，優(yōu)選其為99mTc或94mTc，在該情形下本發(fā)明的Tc絡(luò)合物適用于分別通過(guò)單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)化斷層顯像(SPECT)或正電子發(fā)射斷層顯像(PET)來(lái)進(jìn)行的活體內(nèi)診斷成像。當(dāng)該金屬是Re的同位素時(shí)，優(yōu)選其為186Re或188Re，并因此適用于治療。非常優(yōu)選的是該金屬絡(luò)合物是“抗螯合轉(zhuǎn)移”的，即不易于與其它潛在競(jìng)爭(zhēng)配體進(jìn)行配體交換來(lái)獲得金屬配位位置。
本發(fā)明中的“含氮的雜芳環(huán)”是含有至少一個(gè)氮原子、優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)N原子、最優(yōu)選一個(gè)N原子的單環(huán)或稠環(huán)結(jié)構(gòu)。本發(fā)明優(yōu)選的氮雜芳基包括5員和6員的含氮環(huán)結(jié)構(gòu)，其例子是吡啶基、咪唑基、嘧啶、吡咯、唑和吡唑基(pyrazoyl)環(huán)加上其稠環(huán)類似物例如喹啉。在含氮雜芳環(huán)的情形下，術(shù)語(yǔ)“取代的”意思是一個(gè)或多個(gè)有機(jī)取代基連接到含氮雜芳環(huán)的環(huán)中的氮上或別處。適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)取代基例子包括C1-6烷基、氨基、硝基、鹵基、羧基、磺酸酯基和C6-14芳基。
在本發(fā)明中“生物學(xué)靶向部分”被定義為一種分子，當(dāng)所述金屬絡(luò)合物是放射性藥物時(shí)，其功能是作為將金屬絡(luò)合物轉(zhuǎn)移到哺乳動(dòng)物體內(nèi)特定部位的手段。優(yōu)選地，哺乳動(dòng)物體內(nèi)的部位是特定疾病狀態(tài)的部位。適當(dāng)?shù)纳飳W(xué)靶向部分包括3-100肽或肽類似物，其可以是線性肽或環(huán)肽或其組合；單克隆抗體或其片段；或酶底物或抑制劑；結(jié)合合成受體的化合物；寡核苷酸或寡聚-DNA或寡聚-RNA片段。生物學(xué)靶向部分可以源自合成或天然來(lái)源，但是優(yōu)選合成的。術(shù)語(yǔ)“合成的”意思是該術(shù)語(yǔ)的常規(guī)意思，即人造的，與從天然源例如哺乳動(dòng)物體分離出來(lái)截然相反。這種化合物的優(yōu)點(diǎn)是其制造和雜質(zhì)分布能夠被完全控制。術(shù)語(yǔ)“環(huán)肽”意思是其中兩個(gè)端部氨基酸通過(guò)共價(jià)鍵連接在一起的5-15個(gè)氨基酸的序列，該共價(jià)鍵可以是肽或二硫鍵或合成的非肽鍵例如硫醚、磷酸二酯、二硅氧烷或尿烷鍵。
術(shù)語(yǔ)“氨基酸”意思是L-或D-氨基酸、氨基酸類似物或氨基酸模擬物，其可以是天然存在或是由純合成來(lái)源而得，并且可以是光學(xué)純的，即單一對(duì)映體并因此是手性的，或?qū)τ丑w混合物。優(yōu)選本發(fā)明氨基酸是光學(xué)純的。術(shù)語(yǔ)“氨基酸模擬物”意思是天然存在氨基酸的合成類似物，其為等排物，即已經(jīng)被設(shè)計(jì)成模擬天然化合物的空間和電子結(jié)構(gòu)。這種等排物是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，并且包括但不限于縮肽、逆-反轉(zhuǎn)肽(retro-inverso peptides)、硫代酰胺、環(huán)烷烴、或1，5-二取代的四唑[見(jiàn)M.Goodman，Biopolymers，24，137，(1985)]。
適用于本發(fā)明的肽包括-生長(zhǎng)激素抑制素、奧曲肽及類似物，-結(jié)合到ST受體的肽，其中ST是指由大腸桿菌及其它微生物生產(chǎn)的熱穩(wěn)定性毒素；-層粘連蛋白片段例如YIGSR、PDSGR、IKVAV、LRE和KCQAGTFALRGDPQG，-用于靶向白細(xì)胞積聚的部位的N-甲?；?，-血小板因子4(PF4)及其片段，-含RGD(Arg-Gly-Asp)的肽，例如其可以靶向血管生成[R.Pasqualini et al，Nat Biotechnol.1997 Jun；15(6)542-6]；[E.Ruoslahti，Kidney Int.1997 May；51(5)1413-7]。
-α2-抗纖維蛋白溶酶、纖連蛋白或β-酪蛋白、纖維蛋白原或血小板反應(yīng)蛋白的肽片段。α2-抗纖維蛋白溶酶、纖連蛋白、β-酪蛋白、纖維蛋白原和血小板反應(yīng)蛋白的氨基酸序列可在以下參考文獻(xiàn)中找到α2-抗纖維蛋白溶酶前體[M.Tone et al，J.Biochem，102，1033，(1987)]；β-酪蛋白[L.Hansson et al，Gene，139，193，(1994)]；纖連蛋白[A.Gutman et al，F(xiàn)EBS Lett.，207，145，(1996)]；血小板反應(yīng)蛋白-1前體[V.Dixit et al，Proc.Natl.Acad.Sci.，USA，83，5449，(1986)]；R.F.Doolittle，Ann.Rev.Biochem.，53，195，(1984)；
-作為血管緊張素的底物或抑制劑的肽，例如血管緊張素II Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe(E.C.Jorgensen et al，J.Med.Chem.，1979，Vol22，9，1038-1044)[Sar，lie]血管緊張素IISar-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Ile(R.K.Turker et al.，Science，1972，177，1203)。
-血管緊張素IAsp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu。
優(yōu)選本發(fā)明的肽包括抗纖維蛋白溶酶或血管緊張素II肽?？估w維蛋白溶酶肽包括從下列物質(zhì)的N-終端得到的氨基酸序列(i)α2-抗纖維蛋白溶酶，即NH2-Asn-Gln-Glu-Gln-Val-Ser-Pro-Leu-Thr-Leu-Thr-Leu-Leu-Lys-OH或其變體，其中已經(jīng)交換、增加或去除了一個(gè)或多個(gè)氨基酸，例如NH2-Asn-Ghi-Glu-Gln-Val-Ser-Pro-Leu-Thr-Leu-Thr-Leu-Leu-Lys-Gly-OH，NH2-Asn-Gln-Glu-Ala-Val-Ser-Pro-Leu-Thr-Leu-Thr-Leu-Leu-Lys-Gly-OH，NH2-Asn-Gln-Glu-Gln-Val-Gly-OH；或者(ii)酪蛋白即Ac-Leu-Gly-Pro-Gly-Gln-Ser-Lys-Val-Ile-Gly。
通過(guò)常規(guī)的固相合成可得到本發(fā)明的合成肽，如以下文獻(xiàn)中所述P.Lloyd-Williams，F(xiàn).Albericio and E.Girald；ChemicalApproaches to the Synthesis of Peptides and Proteins，CRC Press，1997。
合適的酶底物、拮抗劑或抑制劑包括葡萄糖和葡萄糖類似物例如氟去氧葡萄糖；脂肪酸、或彈性蛋白酶、血管緊張素II或金屬蛋白酶抑制劑。優(yōu)選的非肽血管緊張素II拮抗物是洛沙坦。
合適的結(jié)合合成受體的化合物包括雌二醇、雌激素、孕酮、黃體酮及其它類固醇激素；多巴胺D-1或D-2受體的配體，或多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體例如托烷；以及血清素受體的配體。
優(yōu)選生物學(xué)靶向部分的分子量小于5000，最優(yōu)選小于4000，理想的是小于3000。優(yōu)選的生物學(xué)靶向部分是3-20聚體肽；或酶底物、拮抗劑或抑制劑。
當(dāng)金屬絡(luò)合物被用作放射性藥物時(shí)，連接基團(tuán)(Z)q的性質(zhì)也可用于改變?cè)摻饘俳j(luò)合物的體內(nèi)生物分布。因此，例如引入(Z)q中的醚基將有助于使血漿蛋白的結(jié)合最小化。當(dāng)(Z)q包括聚乙二醇(PEG)結(jié)構(gòu)單元或具有1-10個(gè)氨基酸殘基的肽鏈時(shí)，連接基團(tuán)可起到改變活體內(nèi)顯像劑的藥物動(dòng)力學(xué)和血消除速率的作用。這種“生物改性劑”連接基團(tuán)可加速放射性金屬顯像劑從背景組織(例如肌肉或肝臟)和/或從血液清除，從而由于背景干擾較小而得到更好的診斷圖像。生物改性劑連接基團(tuán)也可用于提供特定的排泄途徑，例如經(jīng)由腎，與經(jīng)由肝相反。當(dāng)(Z)q包括具有氨基酸殘基的肽鏈時(shí)，優(yōu)選該氨基酸殘基選自甘氨酸、賴氨酸、天門(mén)冬氨酸、谷氨酸或絲氨酸。肽鏈中的氨基酸數(shù)量?jī)?yōu)選為1-10，最優(yōu)選為1-3。當(dāng)(Z)q包括PEG部分時(shí)，優(yōu)選其包括結(jié)構(gòu)式為(-OCH2CH2O-)w的基團(tuán)，其中w是3-25的整數(shù)值。整數(shù)w優(yōu)選為6-22。尤其優(yōu)選含PEG的(Z)q基團(tuán)是衍生自單分散的PEG狀結(jié)構(gòu)、17-氨基-5-氧代-6-氮雜-3，9，12，15-四氧雜十七烷酸的聚合的單元，式Ia 其中p是1-10的整數(shù)。
每個(gè)E基團(tuán)優(yōu)選為取代或未取代的C3-6含氮雜芳環(huán)。優(yōu)選E基團(tuán)選自吡啶基、咪唑基(imidazoyl)和吡唑基(pyrazoyl)，特別優(yōu)選2-吡啶基。
式I的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式是其中R1、R2、R3各自為E基，優(yōu)選的E基團(tuán)如上所述。在該實(shí)施方式中，優(yōu)選R1、R2、R3各自為相同的E基團(tuán)，其提供對(duì)稱的三腳架式配體，并且最優(yōu)選各自是2-吡啶基。
R4優(yōu)選為式-NH(CO)-(Z)x-Y的官能化的芳基取代基，其中x是0-9的整數(shù)。這種酰基取代基是優(yōu)選的，因?yàn)樗鼈冊(cè)试SR4位置上的配體易于官能化，并且該酰基不與R1、R2和R3基團(tuán)的供電子原子競(jìng)爭(zhēng)。當(dāng)R4是氨基(即q＝0并且Y是氨基)時(shí)，這種競(jìng)爭(zhēng)可能是個(gè)問(wèn)題，因?yàn)榘被诮饘倥湮蛔饔孟乱部赡苄纬捎欣?-員環(huán)螯合物。
在一種優(yōu)選的式I配體的金屬絡(luò)合物中，金屬通過(guò)R1基的A原子和E基團(tuán)的雜芳環(huán)的氮原子進(jìn)行配位，以使配體起三腳架式螯合劑的作用。
以上略述的本發(fā)明第一方面的優(yōu)選實(shí)施例是具有+1氧化態(tài)的金屬絡(luò)合物。當(dāng)金屬是锝時(shí)，這些絡(luò)合物是特別有趣的，這是因?yàn)閐6低自旋Tc(I)離子的低動(dòng)力學(xué)惰性。
此外，有可能衍生出具有一定范圍的生物學(xué)靶向分子的配體，使所得絡(luò)合物能夠用于一定范圍的應(yīng)用。該合成方案的一個(gè)關(guān)鍵優(yōu)點(diǎn)是可易于改性三腳架式配體以生產(chǎn)中性的和帶電荷的絡(luò)合物兩者。因此，在式(I)中，當(dāng)R1是-CH2(AR5)時(shí)，優(yōu)選A是S。當(dāng)R1是-CH2(SR5)，并且需要不帶電的配體時(shí)，優(yōu)選R5是C1-3烷基，并且最優(yōu)選是-CH2(SCH3)、-CH2(SC2H5)或-CH2(SC3H7)。當(dāng)R1是-CH2(SR5)，并且需要帶負(fù)電荷的配體時(shí)，優(yōu)選R5是H，即R1是-CH2SH。
本發(fā)明的放射性金屬絡(luò)合物可通過(guò)處于適當(dāng)氧化態(tài)的放射性金屬與式I配體的溶液在適當(dāng)?shù)腜H值下反應(yīng)而制備。優(yōu)選該溶液含有弱絡(luò)合到金屬的配體(例如葡萄糖酸根或檸檬酸根)即放射性金屬絡(luò)合物是通過(guò)配體交換或螯合轉(zhuǎn)移而制備的。這種條件有利于抑制不需要的副反應(yīng)例如金屬離子的水解。當(dāng)放射性金屬離子是99mTc時(shí)，通常原材料是來(lái)自99Mo發(fā)生器的高锝酸鈉。锝存在于99mTc-高锝酸鹽中，處于Tc(VII)氧化態(tài)，它相對(duì)地是不反應(yīng)的。因此，制備低氧化態(tài)Tc(I)-Tc(V)的锝絡(luò)合物通常需要加入適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)上合格的還原劑例如連二亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、維生素C、甲脒亞磺酸、亞錫離子、Fe(II)或Cu(I)，以促進(jìn)絡(luò)合作用。優(yōu)選藥學(xué)上可接受的還原劑為亞錫鹽，最優(yōu)選為氯化亞錫、氟化亞錫或酒石酸亞錫。
Mease等人[Semin.Nucl.Med.，31(4)，278-285(2001)]給出了制備99mTc金屬絡(luò)合物的更多細(xì)節(jié)。制備放射性錸金屬絡(luò)合物的更多細(xì)節(jié)由Hashimoto等人的[Chapter 9 pages 275-291 in“Technetium andRheniumTheir Chemistry and its Applications”，Yoshihara and Omori(Eds)，Springer，Berlin(1996)]可得。本發(fā)明的一種制備99mTc絡(luò)合物的優(yōu)選方法是通過(guò)使用冷凍干燥的試劑盒來(lái)進(jìn)行的，如以下的第五個(gè)實(shí)施方式所述。
第二方面，本發(fā)明提供一種式II的金屬絡(luò)合物[LMX3]n(II)其中L是第一個(gè)實(shí)施方式所定義的式I配體，M是锝或錸的放射性同位素；X選自CO、鹵素、膦或異腈，以及n是金屬絡(luò)合物上的電荷，并且可以是-1、0、+1或+2。
當(dāng)X是異腈時(shí)，其合適地為單齒異腈。當(dāng)全部三個(gè)X基團(tuán)都是膦時(shí)，三個(gè)X供電子原子可以由三個(gè)單齒膦、一個(gè)三齒膦或單齒和雙齒膦的混合物組成。
式II的金屬絡(luò)合物(n)上的電荷將取決于存在于配體(L)中的供電子原子和X的身份。因此，例如當(dāng)X是CO、膦或異腈時(shí)，這些都是中性給體并且不影響該電荷。但是當(dāng)X是鹵素時(shí)，這些都是帶負(fù)電的給體。當(dāng)式I配體的R1是-CH2SH時(shí)，可以預(yù)料通過(guò)硫醇鹽陰離子發(fā)生了金屬絡(luò)合作用，即硫醇被脫去質(zhì)子以使該配體攜帶一個(gè)負(fù)電荷。
可以如第一實(shí)施例所述(上文)，加上Barrera等人的方法[Inorg.Chem.，35，335-341(1996)]制備式II的金屬絡(luò)合物。
優(yōu)選式II的X基團(tuán)是CO(即羰基)。這與如下所述式IIa的帶電絡(luò)合物和式IIb的中性絡(luò)合物相對(duì)應(yīng)[LM(CO)3]n(IIa)其中M如式II中所定義；L是如上所定義的式I配體，其中R1是E基團(tuán)或-CH2(AR5)，其中R5是C1-6烷基；R4是氨基或-(Z)q-Y，其中Z、q和Y如權(quán)利要求1中所定義；n是+1或+2。
優(yōu)選式IIa的金屬絡(luò)合物包括如第一個(gè)實(shí)施方式所述的優(yōu)選配體(上文)。優(yōu)選n是+1。優(yōu)選地，式IIa中的R1、R2和R3每個(gè)是2-吡啶基，而R4是結(jié)構(gòu)式為-NH(CO)-(Z)x-Y的官能化的酰基取代基，其中x是0-9的整數(shù)，如上面關(guān)于式II所述。當(dāng)Y不是生物學(xué)靶向部分時(shí)，優(yōu)選Y是氨基、苯基、吡啶基、哌啶基或咪唑基。最優(yōu)選R4是-NH(CO)Ph、-NH(CO)(CH2)3-(CO)NHCH2Ph、-NH(CO)(3-吡啶基)、-NH(CO)(4-吡啶基)、-NH(CO)CH2-哌啶基、-NH(CO)NH2或-NH(CO)(2，4-咪唑基)。
此外優(yōu)選式II的金屬絡(luò)合物是式IIb的中性絡(luò)合物L(fēng)M(CO)3(IIb)其中M如式II中所定義；L是式I配體，其中R1是-CH2SH或-CH2OH；R2和R3以及R4如式I中所定義。
優(yōu)選地，式IIb中的R1是-CH2SH，而L的R2和R3每個(gè)是2-吡啶基。由于-CH2SH或-CH2OH在與金屬配位時(shí)去質(zhì)子化，該金屬絡(luò)合物是中性的。
在式II、IIa和IIb中，優(yōu)選M為94mTc、99mTc、186Re或186Re，并且最優(yōu)選為99mTc。
其中X是CO，而M是99mTc，本發(fā)明的第二方面的絡(luò)合物可方便地由99mTc(CO)3((H2O)3+前體，如Schibli等人的[Bioconj.Chem.，11p345-351(2000)]和Kothari等人的[Appl.Rad.Isotop.，58，543-549(2003)]所述制備。該前體的三個(gè)水分子可容易地被式I配體的供電子原子取代以形成本發(fā)明的Tc絡(luò)合物。利用IsolinkTM試劑盒(Mallinckrodt，Petten，Netherlands)也可得到非臨床使用的99mTc(CO)3((H2O)3+前體。[99mTc(CO)3(H2O)3]+與本發(fā)明配體的后繼反應(yīng)導(dǎo)致了本發(fā)明99mTc絡(luò)合物的形成。通過(guò)Pietzsch等人的方法[Bioconj.Chem.，11，p 414-424(2000)]可制備相應(yīng)的錸金屬絡(luò)合物。
式IIa的金屬絡(luò)合物的許多例子在

圖1中舉例說(shuō)明。
第三方面，本發(fā)明提供了如式I所定義的配體，條件如下當(dāng)R1是CH2SCH3或包括2-吡啶基或2-喹啉環(huán)，并且R2和R3各自包括2-吡啶基環(huán)時(shí)，則R4不是H、-CH2OH、C1-4烷基、-NH2或-NH(CO)RX，其中RX是C1-12烷基、C1-4羧基烷基或-C6H4SO3H。
第三個(gè)實(shí)施方式配體的一種優(yōu)選種類是其中R1是CH2SH或-CH2OH的那些。更優(yōu)選這類配體是那些其中(i)R1是CH2SH，并且R2和R3每個(gè)包括2-吡啶基；或(ii)其中R1、R2以及R3每個(gè)包括2-吡啶基。最優(yōu)選的配體是其中R1、R2以及R3每個(gè)包括2-吡啶基的那些。
優(yōu)選第三個(gè)實(shí)施方式中的R4基是那些基團(tuán)其中Y是-(CH2)mNH2，其中m是1-6的整數(shù)，優(yōu)選2-4；或者是生物學(xué)靶向部分，即配體與生物學(xué)靶向部分的軛合物。另外優(yōu)選R4基是那些基團(tuán)其中Y是氨基取代的苯基、吡啶基、哌啶基或咪唑基。
通過(guò)Arnold等人的方法[JCS Dalton Trans.，736-746(2001)]可制備本發(fā)明的配體。當(dāng)R1、R2以及R3每個(gè)包括2-吡啶基并且R4是H時(shí)，用丁基鋰可以使橋頭質(zhì)子(R4基)脫去，隨后用鹵代烷使其烷基化，如Kodera等人的[Inorg.Chem.，42，1193-1203(2003)]所教導(dǎo)。其官能化的形式，包括具有生物學(xué)靶向部分的軛合物也可經(jīng)由雙官能的螯合物方法來(lái)制備。如此，眾所周知的是制備配體或螯合劑，其連接到官能團(tuán)(分別為“雙官能連接物”或“雙官能螯合物”)。已經(jīng)連接上的官能團(tuán)包括胺、硫氰酸根、馬來(lái)酰亞胺和活性酯例如N-羥基琥珀酰亞胺或五氟苯酚。本發(fā)明的配體1是胺官能化的雙官能螯合物的一個(gè)例子。Stichelberger等人的[Nucl.Med.Biol.，30，465-470(2003)]描述了適用于配位到锝或錸三羰基核的雙官能螯合物。這種雙官能螯合物可與生物學(xué)靶向部分上的適當(dāng)官能團(tuán)反應(yīng)以形成所需軛合物。待軛合的化合物上的適當(dāng)官能團(tuán)包括羧基(用于與胺官能化雙官能螯合劑形成酰胺鍵)；胺(用于與羧基或活性酯官能化雙官能螯合劑形成酰胺鍵)；鹵素、甲磺酸根和甲苯磺酸根(用于胺官能化的雙官能螯合劑的N-烷基化)以及硫醇(用于與馬來(lái)酰亞胺官能化雙官能螯合劑反應(yīng))。
實(shí)施例1-4進(jìn)一步提供了本發(fā)明配體的合成法。
在第四個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種放射性藥物，其含有以上所述任一方面和實(shí)施方式中描述的本發(fā)明金屬絡(luò)合物和其形式適用于哺乳動(dòng)物特別是人給藥的生物相容性載體?！吧锵嗳菪暂d體”是流體，特別是一種液體，其中顯像劑可以被懸浮或溶解以使該組合物在生理學(xué)上是可以耐受的，即可給藥到哺乳動(dòng)物體而沒(méi)有毒性或過(guò)度的不適。合適的生物相容性載體是可注射的載液例如無(wú)菌無(wú)熱原注射水；水溶液例如生理鹽水(其可有利地是均衡的，使得用于注射的最終產(chǎn)品是等滲或非低滲的)；一種或多種調(diào)節(jié)滲透性的物質(zhì)的水溶液(例如血漿陽(yáng)離子與生物相容性抗衡離子的鹽)、糖(例如葡萄糖或蔗糖)、糖醇(例如山梨糖醇或甘露糖醇)、甘醇(例如丙三醇)或其它非離子多元醇物質(zhì)(例如聚乙二醇、丙二醇等等)。
這樣的放射性藥品或者是被適當(dāng)?shù)靥峁┰谝环N具有密封的容器中，該密封適合于用皮下注射針一次或多次刺穿(例如，卷曲隔膜密封蓋)同時(shí)保持無(wú)菌完整性。這種容器可容納一個(gè)或多個(gè)病人劑量，優(yōu)選多劑量容器包括一個(gè)散裝小瓶(例如容積為10-30cm3)，其容納有多個(gè)病人劑量，由此一個(gè)病人劑量在制劑使用壽命期間的不同時(shí)間間隔下可這樣被抽入臨床級(jí)注射器以適應(yīng)臨床情況。將預(yù)充式注射器設(shè)計(jì)成容納了一個(gè)病人劑量，并因此優(yōu)選適合于臨床使用的一次性使用注射器或其它注射器。該預(yù)充式注射器可任選地備有注射器護(hù)罩以保護(hù)操作者不受害于放射性劑量。合適的這種放射性藥物注射器護(hù)罩是本領(lǐng)域所熟知的，并且優(yōu)選其含有鉛或鎢。
優(yōu)選本發(fā)明放射性藥品包括锝放射性同位素99mTc或94mTc，最優(yōu)選99mTc。當(dāng)锝同位素是99mTc時(shí)，適用于診斷成像放射性藥物的放射性含量范圍為180-1500MBq的99mTc，這取決于活體內(nèi)待成像的部位、攝取和靶與背景的比。
當(dāng)式II的X是CO時(shí)，本發(fā)明的99mTc放射性藥品可通過(guò)首先制備[99mTc(CO3)(H2O)3]+來(lái)制備，如上所述。[99mTc(CO3)(H2O)3]+與本發(fā)明配體的后繼反應(yīng)導(dǎo)致了本發(fā)明99mTc絡(luò)合物的形成。兩個(gè)步驟都在無(wú)菌條件下進(jìn)行或采用最后殺菌。
第五個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種用于制備上述放射性藥物組合物的無(wú)放射性試劑盒，其包括如第一個(gè)實(shí)施方式中所定義的式(I)的配體。當(dāng)放射性金屬是99mTc時(shí)，合適的該試劑盒還包括生物相容性還原劑。這種試劑盒被設(shè)計(jì)成可得到適用于人給藥的無(wú)菌放射性藥物產(chǎn)品，例如通過(guò)直接注射進(jìn)入血流中。對(duì)于99mTc，優(yōu)選該試劑盒被冷凍干燥并且被設(shè)計(jì)成與來(lái)自99mTc放射性同位素發(fā)生器的無(wú)菌99mTc高锝酸鹽(TcO4-)重組以得到適用于人給藥的溶液而不用更多的操作。合適的試劑盒包括一種容器(例如隔膜密封小瓶)，其中含有游離堿或酸鹽形式的配體或螯合劑軛合物以及生物相容性還原劑，例如連二亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、維生素C、甲脒亞磺酸、亞錫離子、Fe(II)或Cu(I)。優(yōu)選生物相容性還原劑為亞錫鹽例如氯化亞錫或酒石酸亞錫。另一方面，該試劑盒可任選地含有一種金屬絡(luò)合物，其在加入放射性金屬時(shí)經(jīng)歷金屬置換作用(即金屬交換)產(chǎn)生所需產(chǎn)品。
無(wú)放射性試劑盒可任選地地進(jìn)一步包括另外的組分例如螯合置換劑(transchelator)、輻射防護(hù)劑、抗微生物防腐劑、PH值調(diào)節(jié)劑或填料?！膀现脫Q劑(transchelator)”是一種這樣的化合物，其與锝迅速反應(yīng)形成弱絡(luò)合物，然后被配體取代。這將形成還原的水解的锝(RHT)的風(fēng)險(xiǎn)最小化，這是由于與锝絡(luò)合作用競(jìng)爭(zhēng)的高锝酸的迅速的還原作用。合適的該螯合置換劑是具有生物相容性陽(yáng)離子的弱有機(jī)酸鹽，即pKa值為3-7的有機(jī)酸。合適的該弱有機(jī)酸是乙酸、檸檬酸、酒石酸、葡糖酸、葡庚糖酸、安息香酸、酚類或膦酸。因此，適當(dāng)?shù)柠}是乙酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、葡糖酸鹽、葡庚糖酸鹽、苯甲酸鹽、酚鹽或膦酸鹽，優(yōu)選的該鹽為酒石酸鹽、葡糖酸鹽、葡庚糖酸鹽、苯甲酸鹽或膦酸鹽，最優(yōu)選為膦酸鹽，尤其最優(yōu)選為二膦酸鹽。一種優(yōu)選的該螯合置換劑是MDP即亞甲基二膦酸與生物相容性陽(yáng)離子的鹽。
術(shù)語(yǔ)“輻射防護(hù)劑”意思是通過(guò)捕獲高反應(yīng)性自由基(例如由水的輻射水解作用而產(chǎn)生的含氧自由基)來(lái)抑制降解反應(yīng)例如氧化還原過(guò)程的化合物。本發(fā)明的輻射防護(hù)劑適當(dāng)?shù)剡x自維生素C、對(duì)氨基苯甲酸(即4-氨基苯甲酸)、龍膽酸(即2，5-二羥基苯甲酸)及其與如上所述生物相容性陽(yáng)離子的鹽。
術(shù)語(yǔ)“抗微生物防腐劑”意思是抑制潛在有害微生物例如細(xì)菌、酵母菌或霉菌生長(zhǎng)的試劑。該抗微生物防腐劑也可表現(xiàn)出一些殺菌性能，這取決于劑量。本發(fā)明抗微生物防腐劑的主要作用是抑制在放射性藥物組合物的后重建中(即在放射性診斷成品本身中)任何這類微生物的生長(zhǎng)。但是該抗微生物防腐劑也可任選地地用于在重建之前抑制本發(fā)明的無(wú)放射性試劑盒的一種或多種組分中潛在有害微生物的生長(zhǎng)。合適的抗微生物防腐劑包括對(duì)羥基苯甲酸酯即對(duì)羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯或丁酯或其混合物；苯甲醇；苯酚；甲酚；溴棕三甲銨和硫柳汞。優(yōu)選的抗微生物防腐劑是對(duì)羥基苯甲酸酯。
術(shù)語(yǔ)“pH值調(diào)節(jié)劑”意思是可用于保證重建試劑盒的pH值在人或哺乳動(dòng)物給藥的可接受限度內(nèi)(pH值約為4.0-10.5)。合適的該pH值調(diào)節(jié)劑包括藥學(xué)上合格的緩沖劑，例如兩性離子緩沖劑、磷酸鹽或TRIS[即三(羥甲基)甲胺]，以及藥學(xué)上合格的堿例如碳酸鈉、碳酸氫鈉或其混合物。當(dāng)采用酸鹽形式的軛合物時(shí)，該pH值調(diào)節(jié)劑可任選地地被提供在獨(dú)立的小瓶或容器中，以使試劑盒使用者可調(diào)節(jié)pH值作為多步驟操作的一部分。
術(shù)語(yǔ)“填料”意思是藥學(xué)上合格的膨脹劑，其可在生產(chǎn)和冷凍干燥期間促進(jìn)材料處理。合適的填料包括無(wú)機(jī)鹽例如氯化鈉和水溶性糖或糖醇，例如蔗糖、麥芽糖、甘露糖醇或海藻糖。
第六個(gè)方面，本發(fā)明涉及本發(fā)明的放射性藥物的用途，其中放射性金屬是γ-發(fā)射體，用于SPECT成像。在放射性藥物給藥到受治療者之后，通過(guò)γ照相機(jī)探測(cè)所述受治療者內(nèi)的放射性藥物分布，其產(chǎn)生指示所述分布的圖像。
通過(guò)以下詳細(xì)的非限制性例子舉例說(shuō)明本發(fā)明。實(shí)施例1-4提供了配體2-8的合成。實(shí)施例5提供了配體6的99mTc-三羰基絡(luò)合物的制備方法，放射化學(xué)純度(RCP)為98％。實(shí)施例4提供了配體1、2、4、5和6的99mTc-三羰基絡(luò)合物的制備方法。
附圖的簡(jiǎn)要說(shuō)明圖1表示本發(fā)明的幾種金屬絡(luò)合物。
圖2概括了幾個(gè)實(shí)施例的配體的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
實(shí)驗(yàn)實(shí)施例通過(guò)Arnold等人的方法[JCS Dalton Trans.，736-746(2001)]來(lái)制備配體1[即1，1，1-三(吡啶-2-基)甲胺]。
實(shí)施例1配體2的合成在室溫下將苯甲酸酐(280mg，1.24mmol)一次性地加入配體1(250mg，0.95mmol)于CH2Cl2(2ml)中的攪拌的溶液中。攪拌持續(xù)了24小時(shí)并且用CH2Cl2(18ml)稀釋反應(yīng)混合物。用飽和碳酸氫鈉(20ml×2)和水(20ml×2)清洗該溶液，然后干燥(MgSO4)，過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑以剩下黃色殘余物。從CH2Cl2/戊烷混合物中再結(jié)晶該材料，得到黃色粉末產(chǎn)品(180mg，52％)，mp 233-234℃。
1H NMR(CDCl3)δH7.10-7.17(3H，m，5-H)，7.41-7.51(3H，m，4-H)，7.59-7.64(6H，m，3-H[x2]，間位-H[x2]，對(duì)位-H)，8.0(2H，dd，J＝7和2Hz，鄰位-H[x2])，8.53(3H，br d，J＝5Hz，6-H[x3])。
質(zhì)譜(ES)m/e-C23H19N4O(M+H)的計(jì)算值為367，測(cè)定值為367。
實(shí)施例2配體3和4的合成將亞硫酰氯(5.0g，42mmol)和煙酸(620mg，5.0mmol)在回流下加熱3小時(shí)，然后在減壓下除去過(guò)量反應(yīng)物以剩下白色殘余物。在減壓下將殘余物與甲苯(25ml×2)共蒸發(fā)以剩下白色粉末。在攪拌下將所得固體以多個(gè)50mg份加入配體1(250mg，0.95mmol)在含三乙胺(1.10g，10.0mmol)的CH2Cl2(10ml)中的溶液。在室溫下攪拌16小時(shí)之后，將該溶液用水(20ml×2)清洗，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并且在減壓下除去溶劑以剩下深褐色殘余物。通過(guò)硅膠色譜法用CH2Cl2/Me0H混合物(20∶1)洗脫來(lái)提純?cè)摎堄辔?。所需產(chǎn)品被分離為黃色固體(rf＝0.25)，將它從CH2Cl2/戊烷中再結(jié)晶，得淡黃色粉末(產(chǎn)量210mg，60.0％)，mp206-207℃。
1H NMR(CDCl3)δH7.14(3H，dt，J＝5.0和2.7Hz，5-H[x3]，7.35(1H，dd，J＝8.0和5.0Hz，5′-H)，7.58-7.61(3H，m4-H[x3])，7.62(3H，dt，J＝8.2和1.5Hz，3-H[x3])，8.23(1H，dt，J＝8.0和2.0Hz，4′-H)，8.51(3H，br d，J＝5Hz，6-H[x3])，8.71(1H，dd，J＝5.0和1.5Hz，6′-H)，9.25(1H，d，J＝2.0Hz，2′-H)，10.4(1H，s，NH)。
質(zhì)譜(ES)m/eC22H18N5O(M+H)的計(jì)算值為368，測(cè)定值為368。
以類似方法由作為原材料的異酸制備配體4，得到淡黃色粉末(140mg，40.0％)。mp 183-185℃。
1H NMR(CDCl3)δH7.15(3H，dt，J＝5.0和1.5Hz，5-H[x3]，7.57-7.66(6H，m4-H[x3]，3-H[x3]，7.80(2H，d，J＝5,9Hz，2′-H，6′-H)8.51(3H，d，J＝5Hz，6-H[x3]，8.74(2H，d，J＝5.9Hz，3′-H，5′-H)，10.45(1H，bs，NH)。
質(zhì)譜(ES)m/e-C22H18N5O(M+H)的計(jì)算值為368，測(cè)定值為368。
實(shí)施例3配體5的合成步驟(a)2-(哌啶-1-基)-乙酸乙酯將溴乙酸乙酯(8.5g，50.9mmol)以保持輕度回流的速率滴加到哌啶(4.3g，50.5mmol)和三乙胺(5.5g，54.4mmol)于氯仿(20ml)中的攪拌溶液中。添加完成之后，繼續(xù)攪拌2小時(shí)并且用水(20ml×3)清洗該反應(yīng)混合物。將氯仿層干燥(MgSO4)過(guò)濾并且蒸發(fā)溶劑以剩下黃色油。將該油通過(guò)短硅膠柱，用CH2Cl2/石油醚(Pet Ether)40∶60混合物(1∶1)洗脫。從所得溶液中除去溶劑，得到淡黃色油的所需產(chǎn)品(產(chǎn)量5.5g，64％)。
1H NMR(CDCl3)-δH1.20(3H，t，J＝7.0Hz，CH3)，1.40(2H，m，4′-H)，1.55(4H，m，3′-H 5′-H)，2,42(4H，m，2′-H 6′-H)，3.10(2H，s，NCH2CO)4.10(2H，q，J＝7Hz，OCH2)。
步驟(b)哌啶-1-基乙酸鹽酸鹽將2-(哌啶-1-基)-乙酸乙酯(5.5g，32.2mmol)、水(12ml)和濃HCl(3ml)在回流下加熱20小時(shí)。在減壓下將揮發(fā)性組分蒸發(fā)以剩下淺白色固體。將該固體與甲苯(50ml×3)共蒸發(fā)并且在真空下干燥，得到黃白色粉末(產(chǎn)量4.8g，83％)。
1H NMR(D2O)；-δH1.42-1.46(1H，m，4′-H)，1.73-1.86(5H，m，2′-H 3′-H 4′-H)，2.97-3.05(2H，m，2′-H 6′-H)，3.52-3.57(2H，m，2′-H 6′-H)，4.02(2H，s，NCH2CO)。
步驟(c)2-(哌啶-1-基)-N-[1，1，1-三(吡啶基-2-基)甲基]-乙酰胺將氫氧化鋰(85mg，3.5mmol)和哌啶-1-基乙酸鹽酸鹽(300mg，1.68mmol)溶解在甲醇(10ml)中以得到無(wú)色溶液。然后在減壓下除去甲醇，并且將無(wú)色固體與甲苯共蒸發(fā)，直到剩余了自由流動(dòng)粉。在該鋰鹽中加入干DMF(10ml)、配體1(250mg，0.95mmol)、Pybop(510mg，0.98mmol)并將該混合物加熱，直至得到了澄清溶液。去除加熱并且連續(xù)攪拌16小時(shí)。在減壓下除去揮發(fā)性組分以剩下溶解于CH2Cl2(20ml)中的橙色殘余物，并用水(20ml×3)清洗。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，過(guò)濾并且蒸發(fā)溶劑以剩下橙色油，通過(guò)硅膠色譜法，用CH3CN/MeOH混合物(200∶5)洗脫來(lái)提純殘余物。分離出(rf＝0.2)淡黃色油狀的所需產(chǎn)品，該產(chǎn)品靜置后固化(100mg 27％)，mp 123-125℃。
1H NMR(CDCl3)-δH1.45-1.50(2H，m，4′-H))，1.65-1.63(4H，m，3′-H 5′-H)，2.54-2.57(4H，m，2′-H 6′-H)，3.01(2H，s，NCH2CO)，7.12(3H，ddd，J＝7.5，5.0和1.0Hz，5-H，[x3])7.46-7.50(3H，m，3-H[x3])，7.60(3H，dt，J＝7.5和5.0Hz，4-H[x3])，8.50-8.53(3H，m，6-H[x3])，10.61(1H，s，NH)。
質(zhì)譜(ES)m/e-C23H26N5O(M+H)的計(jì)算值為388，測(cè)定值為388。
實(shí)施例4配體6、7和8的合成將1H-咪唑-4-羧酸(200mg，1.8mmol)和氫氧化鋰(45mg，1.9mmol)溶解于甲醇(10ml)中以得到澄清溶液，在減壓下除去揮發(fā)性組分并將殘余物與甲苯共蒸發(fā)，直至得到自由流動(dòng)粉。在該鋰鹽中加入干DMF(10ml)、配體1(250mg，0.95mmol)和Pybop(510mg，0.98mmol)。將該混合物加熱直至得到澄清的橙色溶液。去除加熱并將該溶液連續(xù)攪拌16小時(shí)。通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑以剩下粘性橙色殘余物，將其通過(guò)硅膠色譜法，用CH3CN/MeOH(95∶5)洗脫來(lái)提純。分離(rf＝0.3)出白色粉末狀的標(biāo)題化合物(100mg，29％)，mp＞250℃。
1H NMR(d6DMSO)-δH5.76(1H，s，NH咪唑)，7.23-7.28(3H，m，5-H[x3]，7.44-7.47(3H，m，3-H[x3]，7.53(1H，s，C-H，咪唑)，7.72(3H，bt，J＝7Hz，4-H[x3]，7.82(1H，s，C-H咪唑)，8.50(3H，m，6-H[x3])，10.46(1H，s，NH)。
質(zhì)譜(ES)m/e-C20H17N6O(M+H)的計(jì)算值為357，測(cè)定值為357。
以類似的方法由4-吡啶基乙酸鹽酸鹽制備了配體7，得到無(wú)色粉末(產(chǎn)量40mg，11％)，mpt 134-135℃。
1H NMR(CDCl3)δH3.70(2H，s，CH2)，7.13(3H，m，5-H[x3]，7.26(2H，d，J＝5.03-H，5-H)，7.43(3H，d，J＝6Hz 3-H[x3]，7.57(3H，t，J＝6Hz 4-H[x3]，8.47(3H，d，J＝5Hz，6-H[x3]，8.53(2H，d，J＝5.0Hz，2-H，6-H)，9.49(1H，bs，NH)。
質(zhì)譜(ES)m/e-C23H20N5O(M+H)的計(jì)算值為382，測(cè)定值為382。
以類似的方法由3-吡啶基乙酸鹽酸鹽制備了配體8，得到淺黃褐色粉末(180mg，54％)，mp 165-166℃。
1H NMR(CDCl3)δH3.68(2H，s，CH2)7.08(3H，ddd，J＝7.5，5.0和1.0Hz，5-H[x3]，7.19(1H dd，J＝7.5和5.0Hz 5′-H)，7.43(3H，m，3-H[x3])，7.53(3H，dt，J＝7.5和5.04-H[x3]，7.64(1H，bd，J＝7.5Hz 4′-H)，8.43(3H，m，6-H[x3]，8.46(1H，dd，J＝7.5和1.5Hz，6′-H)，8.56(1H，d，J＝1.5Hz，2′-H)，9.49(1H，s，NH)。
質(zhì)譜(ES)m/e-C23H20N5O(M+H)計(jì)算值為382，測(cè)定值為382。
實(shí)施例5制備配體6的99mTc三羰基絡(luò)合物將從發(fā)生器洗脫的1mLTcO4-加入Tc羰基試劑盒(IsolinkTM，Mallinckrodt，Petten，Netherlands)中，在983MBq下測(cè)量活性。從小瓶中除去大約4mL頂部空間，然后將其加熱到大約100℃持續(xù)30分鐘，使小瓶冷卻，并利用放氣針使壓力均衡。在除去4mL頂部空間之前加入50-100ug配體6。在利用放氣針使小瓶壓力均衡之前，將該小瓶加熱到大約100℃持續(xù)30分鐘，然后使其冷卻。測(cè)得PH值約為11.5，并且通過(guò)高效液相色譜法(HPLC)確定放射化學(xué)純度(RCP)為98％。
采用的兩種HPLC方法如下方法A溶劑A＝0.1％TFA于水中，溶劑B＝0.1％TFA于乙腈中方法B溶劑A＝0.2％880氨水溶液，溶劑B＝乙腈對(duì)于兩種方法，采用以下梯度

實(shí)施例6制備配體1、2、4、5和6的99mTc三羰基絡(luò)合物將從發(fā)生器洗脫的1mL TcO4-加入Tc羰基試劑盒(IsolinkTM，Mallinckrodt，Petten，Netherlands)中，測(cè)得活性為2.88Gq。從小瓶中除去大約4mL頂部空間，然后將其加熱到大約100℃持續(xù)30分鐘，使小瓶冷卻，并利用放氣針使壓力均衡。將50-100ug配體(于0.1mLMeOH中)加入充氮小瓶，接著加入0.7mL 0.4M磷酸鹽緩沖劑(pH值約為7.5)，然后加入從該試劑盒制備的0.2mL Tc(CO)3(H2O)3]+，并且測(cè)得活性為593Mq，在使小瓶冷卻之前將其加熱到大約100℃持續(xù)30分鐘，并利用放氣針使小瓶壓力均衡，PH值約為11.5，并且通過(guò)HPLC(如實(shí)施例5所述)確定每種絡(luò)合物的RCP如下

權(quán)利要求
1.一種式(I)的配體的金屬絡(luò)合物 其中金屬是锝或錸的放射性同位素；R1是E基團(tuán)或-CH2(AR5)，其中A是S或O，以及R5是H或C1-6烷基；R2和R3各自獨(dú)立地是E基團(tuán)；E是任選地被取代的C3-10含氮雜芳環(huán)；以及R4是-(Z)q-Y；其中每個(gè)Z獨(dú)立地是-CQ2-、-CQ＝CQ-、-O≡C-、-CQ2CO2-、-CO2CQ2-、-NQ-、-NQCO-、-CONQ-、-NQ(C＝O)NQ-、-NQ(C＝S)NQ-、-SO2NQ-、-NQSO2-、-CQ2OCQ2-、-CQ2SCQ2-、-CQ2(NQ)CQ2-、C4-8亞雜環(huán)烷基、C4-8亞環(huán)烷基、C5-12亞芳基或C3-12雜亞芳基、氨基酸或單分散的聚乙二醇(PEG)結(jié)構(gòu)單元；其中每個(gè)Q獨(dú)立地選自H、C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基、C1-4烷氧基烷基或C1-4羥烷基；q是0-10的整數(shù)；以及Y是H、氨基、C1-10烷基、C3-20烷基芳基、C6-14芳基、C3-12雜環(huán)、C2-10烷氧基烷基、C1-10羥基烷基、C1-10氨基烷基、C1-10羥基烷基、C1-10烷氧基、C1-10酸基、C6-10芳氧基或C6-10芳?；趸?，或者Y是生物學(xué)靶向部分；并且其中絡(luò)合作用涉及配體的5個(gè)可能的原子之中的至多3個(gè)。
2.權(quán)利要求1中所述的金屬絡(luò)合物，其中R1是-CH2(SR5)以及R5是C1-3烷基。
3.權(quán)利要求1中所述的金屬絡(luò)合物，其中R1是選自吡啶基、咪唑基和吡唑基的E基團(tuán)。
4.權(quán)利要求1-3中所述的金屬絡(luò)合物，其中R2和R3各自是選自吡啶基、咪唑基和吡唑基的E基團(tuán)。
5.權(quán)利要求1、3和4中任一項(xiàng)所述的金屬絡(luò)合物，其中R1、R2和R3各自是E基團(tuán)，它們是吡啶基。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的金屬絡(luò)合物，其中每個(gè)E基團(tuán)是2-吡啶基。
7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的金屬絡(luò)合物，其中所述金屬是锝的放射性同位素。
8.權(quán)利要求7中所述的金屬絡(luò)合物，其中所述锝的放射性同位素是99mTc。
9.一種式II的金屬絡(luò)合物[LMX3]n(II)其中L是權(quán)利要求1-6中所定義的式I的配體，M是锝或錸的放射性同位素；X選自CO、鹵素、膦或異腈；以及n是金屬絡(luò)合物上的電荷，并且是-1、0、+1或+2。
10.權(quán)利要求9中所述的金屬絡(luò)合物，其是式IIa的金屬絡(luò)合物[LM(CO)3]n(IIa)L是權(quán)利要求1-6中所定義的式I的配體，其中R1是E基團(tuán)或-CH2(AR5)，其中R5是C1-6烷基；R4是氨基或-(Z)q-Y，其中Z、q和Y如權(quán)利要求1中所定義；n是+1或+2。
11.權(quán)利要求10中所述的金屬絡(luò)合物，其中R1、R2和R3各自是2-吡啶基。
12.權(quán)利要求9或10中任一項(xiàng)所述的金屬絡(luò)合物，其中R4是氨基或-(Z)q-Y并且Y是氨基、苯基、吡啶基、哌啶基或咪唑基。
13.權(quán)利要求9-11中任一項(xiàng)所述的金屬絡(luò)合物，其中R4選自-NH(CO)Ph、-NH(CO)(CH2)3-(CO)NHCH2Ph、-NH(CO)(3-吡啶基)、-NH(CO)(4-吡啶基)、-NH(CO)CH2-哌啶基、-NH(CO)NH2或-NH(CO)(2，4-咪唑基)。
14.權(quán)利要求9中所述的金屬絡(luò)合物，其是式IIb的金屬絡(luò)合物L(fēng)M(CO)3(IIb)其中L是式I配體，其中R1是-CH2SH或-CH2OH；R2和R3以及R4如權(quán)利要求1中所定義。
15.權(quán)利要求14中所述的金屬絡(luò)合物，其中R1是-CH2SH，而R2和R3各自是2-吡啶基。
16.權(quán)利要求9-15中所述的金屬絡(luò)合物，其中M是锝的放射性同位素。
17.權(quán)利要求16中所述的金屬絡(luò)合物，其中所述锝的放射性同位素是99mTc。
18.權(quán)利要求1中所定義的式I配體，具有如下條件當(dāng)R1是CH2SCH3或包括2-吡啶基或2-喹啉環(huán)，并且R2和R3各自包括2-吡啶環(huán)時(shí)，則R4不是H、-CH2OH、C1-4烷基、-NH2、C1-4羧基烷基，-C6H4SO3H或-NH(CO)RX，其中RX是C1-12烷基。
19.權(quán)利要求18中所述的配體，其中Y是生物學(xué)靶向部分。
20.權(quán)利要求18中所述的配體，其中R1是-CH2SH或-CH2OH。
21.權(quán)利要求20中所述的配體，其中R1是-CH2SH，而R2和R3各自包括2-吡啶基。
22.權(quán)利要求18或19中任一項(xiàng)中所述的配體，其中R1、R2和R3各自包括2-吡啶基。
23.一種含有權(quán)利要求1-17中任一項(xiàng)所述的金屬絡(luò)合物的放射性藥物。
24.權(quán)利要求23中所述的放射性藥物，其中所述金屬是99mTc。
25.權(quán)利要求24中所述的放射性藥物，其中所述金屬絡(luò)合物如權(quán)利要求9-13中所定義。
26.權(quán)利要求24中所述的放射性藥物，其中所述金屬絡(luò)合物如權(quán)利要求14和15中所定義。
27.一種用于制備權(quán)利要求23-26的放射性藥物的試劑盒，它包括權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)所定義的式I配體。
28.權(quán)利要求27中所述的試劑盒，它還包括生物相容性還原劑。
29.權(quán)利要求23-26中任一項(xiàng)所述的放射性藥物用于SPECT成像的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了含有三腳架式配體的新的放射性锝錸絡(luò)合物，特別是本發(fā)明提供了Tc(I)絡(luò)合物。還提供了適用于形成本發(fā)明的锝和錸絡(luò)合物的新配體以及含有所述絡(luò)合物的放射性藥物組合物、用于其制備的試劑盒。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的
文檔編號(hào)C07F13/00GK101035567SQ200580033664
公開(kāi)日2007年9月12日 申請(qǐng)日期2005年10月4日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月4日
發(fā)明者R·巴拉 申請(qǐng)人:通用電氣健康護(hù)理有限公司