專利名稱：具有抗糖尿病作用的蛋白質水解物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及通過誘導胰島素分泌或通過增加糖尿病受試者或處于臨床前期(臨界性糖尿病)的受試者的胰島素受體來增強胰島素敏感性而顯示出預防或緩解高血糖狀態(tài)的作用(抑制血糖升高的作用)的組合物(血糖升高抑制劑、胰島素分泌促進劑)。而且，本發(fā)明涉及用于預防或治療由高血糖癥引起的疾病尤其是糖尿病和糖尿病并發(fā)癥的組合物。在本說明書中，這些組合物有時被總稱為抗糖尿病組合物。
而且，本發(fā)明涉及降低處于高血糖狀態(tài)的受試者血糖水平的方法，還涉及通過促進胰島素分泌的作用和抑制血糖升高的作用來預防或治療由高血糖癥引起的疾病(具體是糖尿病和糖尿病并發(fā)癥)的方法。
背景技術：
在活體中，通過胰島素的降血糖作用和腎上腺素、胰高血糖素、糖皮質激素和類似物的升血糖作用之間的平衡來控制血糖水平。具體地，胰島素抑制肝臟內(nèi)的糖原分解和糖異生，以阻止葡萄糖的產(chǎn)生并減少肝臟向血液中釋放的葡萄糖量，同時，胰島素增加葡萄糖在骨骼肌和白色脂肪組織中的攝取，從而降低血糖水平。相反，腎上腺素、胰高血糖素等促進肝臟中的糖原分解和糖異生，并促進葡萄糖從其中的釋放，從而增加血糖水平。
糖尿病是一種代謝性疾病，其中由于胰島素作用的急性或慢性下降引起持續(xù)的高血糖狀態(tài)，導致糖代謝、脂質代謝、氨基酸代謝等的紊亂。
糖尿病被分為胰島素依賴型或非胰島素依賴型。飲食療法和口服降血糖藥物對于治療胰島素依賴性糖尿病是無效的，由于胰島素分泌能力的下降或缺乏，胰島素依賴性糖尿病僅可通過胰島素治療。相反，對于非胰島素依賴型糖尿病(占糖尿病患者的90％)，盡管胰島素的作用較正常人弱，但其治療并不一定需要胰島素。通常采用食物療法和運動療法，如果效果不佳，則可同時采用使用降血糖藥物的化學療法。
如上所述，糖尿病是一種由持續(xù)高血糖狀態(tài)造成的代謝紊亂所引起的疾病，它是一種很棘手的疾病，可能伴隨眼、腎、神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、皮膚等處的許多并發(fā)癥。通常認為當血糖水平被控制在正常水平附近時就可以消除這些并發(fā)癥(Saishin Igaku Daijiten，1988，1211頁，Ishiyaku Publishers Inc.，日本)。
緩解高血糖狀態(tài)的已知藥物制劑包括胰島素制劑、磺酰脲制劑、雙胍制劑、改善胰島素抵抗的制劑、a-葡糖苷酶抑制劑等。胰島素制劑是用于胰島素依賴型糖尿病的治療藥物，盡管它們可靠地降低血糖水平，卻有引起低血糖癥的風險?；酋ｋ逯苿┦峭ㄟ^刺激胰腺β-細胞促進內(nèi)源性胰島素分泌而降低血糖水平的藥物。無論血糖水平如何，由于誘發(fā)胰島素分泌，它們可引起低血糖癥副作用。雙胍制劑是通過抑制肝臟糖異生、增加骨骼肌和類似部位內(nèi)糖消耗、并抑制糖的腸吸收來降低血糖水平的藥物，其優(yōu)勢是在正常人體或糖尿病患者中均不會引起低血糖癥。但是，雙胍制劑的問題在于經(jīng)常引起比較嚴重的乳酸性酸中毒。改善胰島素抵抗的制劑(例如噻唑烷衍生物和類似物)是通過強化胰島素的作用、并活化胰島素受體激酶來降低血糖水平的藥物。但是，已經(jīng)被指出有消化系統(tǒng)癥狀、水腫等副作用，而且紅細胞、血細胞比容和血紅蛋白的量減少，LDH的量增加(Atarashii TonyobyoChiryoyaku(New Diabetic Medicines)，90-99頁，1994，Iyaku(Medicineand Drug)Journal Co.，Ltd.，Japan)。a-葡糖苷酶抑制劑通過延緩糖類在胃腸道的消化和吸收而表現(xiàn)出抑制餐后血糖水平增加的作用，但問題在于如胃脹、腹鳴、腹瀉等方面的副作用(Joslin′s Diabetes mellitus，第13版，521-522頁)。
因此可以這樣說，有效治療或預防糖尿病及其并發(fā)癥的方法并沒有完全建立。


圖1顯示了球蛋白水解產(chǎn)物(制備實施例1)的凝膠過濾色譜圖。
圖2顯示了制備實施例2(3)中進行的反相(酸性)色譜的結果(色譜圖)。
圖3顯示了制備實施例2(4)中進行的反相(中性)色譜的結果(色譜圖)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是提供藥物組合物、食品組合物和飼料組合物，其具有促進胰島素分泌的作用或抑制血糖升高的作用。本發(fā)明的另一個目的是提供這種組合物，作為治療或預防糖尿病或其并發(fā)癥的組合物。
本發(fā)明者進行了廣泛研究以實現(xiàn)上述目的，并發(fā)現(xiàn)將球蛋白水解產(chǎn)物給予人為誘發(fā)高血糖癥的小鼠時，其血糖水平顯著地下降，高血糖癥得以改善。而且，本發(fā)明者確認，球蛋白水解產(chǎn)物的活性成分是包含在其中的肽(VVYP)，抑制血糖升高的作用歸因于其促進胰島素分泌的作用。
而且，本發(fā)明者確認，在血糖水平正常的受試者中沒有觀察到球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)抑制血糖水平升高的作用和促進胰島素分泌的作用，而在糖尿病患者和處于臨床前期的臨界性糖尿病患者中特異性地觀察到這些作用。
基于這些發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明者證實，球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)抑制和改善高血糖癥(降低被視為血糖過高的血糖水平)，并可以用于預防或治療由高血糖癥引起的疾病，如糖尿病及其并發(fā)癥。本發(fā)明是基于這些發(fā)現(xiàn)完成的。
具體地，本發(fā)明包括下面的實施方式。
1.一種抗糖尿病藥物，其包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
2.一種血糖升高抑制劑，其包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
3.一種胰島素分泌促進劑，其包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
4.一種特殊保健用食品，其具有抑制血糖升高的功能或提高胰島素分泌的功能，并優(yōu)選以此功能加以使用，所述食品包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
5.一種飼料，其具有抑制血糖升高的功能或提高胰島素分泌的功能，并優(yōu)選以此功能加以使用，所述飼料包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
6.一種預防或治療由高血糖癥引起的疾病的組合物，其包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
7.根據(jù)第6項的預防或治療由高血糖癥引起的疾病的組合物，其中所述由高血糖癥引起的疾病是糖尿病或糖尿病并發(fā)癥，如糖尿病性酸中毒、糖尿病性黃瘤、糖尿病性肌萎縮、糖尿病性酮癥、糖尿病性昏迷、糖尿病性胃功能紊亂、糖尿病性壞疽、糖尿病性潰瘍、糖尿病性腹瀉、糖尿病性微血管病變、糖尿病性子宮體硬化癥、糖尿病性心肌病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病、糖尿病性大皰、糖尿病性白內(nèi)障、糖尿病性皮膚病、糖尿病性硬化癥、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病脂性漸進性壞死或糖尿病性血循環(huán)障礙。
8.根據(jù)第6項的預防或治療由高血糖癥引起的疾病的組合物，其中所述由高血糖性癥引起的疾病是II型糖尿病或其并發(fā)癥。
9.一種抑制受試者血糖水平增加的方法，其包括將有效量的球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽給予患有由高血糖癥引起的疾病的受試者或處于該疾病臨床前期的受試者的步驟。
10.根據(jù)第9項的抑制受試者血糖水平增加的方法，其中所述由高血糖癥引起的疾病是糖尿病或糖尿病并發(fā)癥，如糖尿病性酸中毒、糖尿病性黃瘤、糖尿病性肌萎縮、糖尿病性酮癥、糖尿病性昏迷、糖尿病性胃功能紊亂、糖尿病性壞疽、糖尿病性潰瘍、糖尿病性腹瀉、糖尿病性微血管病變、糖尿病性子宮體硬化癥、糖尿病性心肌病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病、糖尿病性大皰、糖尿病性白內(nèi)障、糖尿病性皮膚病、糖尿病性硬化癥、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病脂性漸進性壞死或糖尿病性血循環(huán)障礙。
11.根據(jù)第9項的抑制受試者血糖水平增加的方法，其中所述由高血糖癥引起的疾病是II型糖尿病或其并發(fā)癥。
12.一種預防或治療受試者由高血糖癥引起的疾病的方法，其包括將有效量的球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽給予患有由高血糖癥引起的疾病的受試者或處于該疾病臨床前期的受試者的步驟。
13.根據(jù)第12項的預防或治療受試者由高血糖癥引起的疾病的方法，其中所述由高血糖癥引起的疾病是糖尿病或糖尿病并發(fā)癥，如糖尿病性酸中毒、糖尿病性黃瘤、糖尿病性肌萎縮、糖尿病性酮癥、糖尿病性昏迷、糖尿病性胃功能紊亂、糖尿病性壞疽、糖尿病性潰瘍、糖尿病性腹瀉、糖尿病性微血管病變、糖尿病性子宮體硬化癥、糖尿病性心肌病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病、糖尿病性大皰、糖尿病性白內(nèi)障、糖尿病性皮膚病、糖尿病性硬化癥、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病脂性漸進性壞死或糖尿病性血循環(huán)障礙。
14.根據(jù)第12項的預防或治療受試者由高血糖癥引起的疾病的方法，其中所述由高血糖癥引起的疾病是II型糖尿病或其并發(fā)癥。
15.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備抗糖尿病藥物中的用途。
16.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備血糖升高抑制劑中的用途。
17.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備胰島素分泌促進劑中的用途。
18.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備特殊保健用食品中的用途，所述的特殊保健用食品具有抑制血糖升高的功能或提高胰島素分泌的功能，并通常以此功能加以使用。
19.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備飼料中的用途，所述的飼料具有抑制血糖升高的功能或提高胰島素分泌的功能，并通常以此功能加以使用。
20.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備預防或治療由高血糖癥引起的疾病的組合物中的用途。
具體實施例方式
本發(fā)明的藥物組合物、食品組合物和飼料組合物的特征是含有球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)作為活性成分。
(1)藥物組合物血糖升高抑制劑、胰島素分泌促進劑和預防或治療由高血糖癥引起的疾病的組合物包括在本發(fā)明的藥物組合物的范圍內(nèi)。這種血糖升高抑制劑的特征是含有一定量的球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，其量能有效地預防或改善糖尿病患者或臨床前期糖尿病患者即臨界性糖尿病患者中的高血糖癥(抑制血糖升高)。這種胰島素分泌促進劑的特征是含有一定量的球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，其量能有效地促進糖尿病患者或臨界性糖尿病患者中的胰島素分泌。而且，這種預防或治療由高血糖癥引起的疾病的組合物含有一定量的球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，其量能有效地發(fā)揮血糖升高抑制作用或胰島素分泌促進作用。
球蛋白水解產(chǎn)物，即，本發(fā)明的藥物組合物活性成分的一種形式，是球蛋白如血紅蛋白、肌紅蛋白等的水解產(chǎn)物?？勺鳛榍虻鞍讈碓吹膭游镱愋筒皇芟拗疲梢允褂迷S多種類的動物，如牛、豬、羊、人、馬等。
可以使用含有大量肌紅蛋白的家畜肉、魚肉和類似物作為球蛋白來源。
球蛋白的水解和其它過程可以根據(jù)WO89/06970所述的方法實施。通常使用一種或多種水解酶如酸性蛋白酶、中性蛋白酶和堿性磷酸酶進行水解。
球蛋白水解方法的一個具體例子是將含有球蛋白的原料以5-30wt％(固體含量)的量分散在水中，用酸或堿將pH調節(jié)至適于蛋白酶的最佳條件，單次或分批加入蛋白酶，使該酶在20-70℃下反應3-48小時。
使用由此獲得的蛋白水解產(chǎn)物作為本發(fā)明的具有抑制血糖升高作用或促進胰島素分泌作用的球蛋白水解產(chǎn)物。它可在干燥后使用，或在向其中加入補充劑如羧甲基纖維素、糊精或類似物，然后干燥/固化后使用。
肽(VVYP)，即本發(fā)明的藥物組合物活性成分的另一種形式，包含在前述的球蛋白水解產(chǎn)物中，其量為大約1wt.％，因此可以從前述球蛋白蛋白直接產(chǎn)物中分離/純化出來。肽(VVYP)的分離或純化，除球蛋白之外，可以使用例如，魚肉蛋白、魚粉和類似動物蛋白；玉米蛋白(玉米醇溶蛋白)、大豆蛋白和類似植物蛋白的水解產(chǎn)物作為起始原料進行。
本文所述的分離或純化方法可以通過與已知的蛋白和肽純化方法相同的方式進行。例如，可以獲得含有肽(VVYP)的餾分，如果需要，然后通過使用鹽析、透析、離子交換樹脂、超濾、反相色譜或類似方法，或以適當?shù)慕M合方式使用這些方法，可以從該餾分中分離出肽(VVYP)。關于這些純化方法中提到的反相色譜，優(yōu)選酸性條件下的反相色譜和中性條件下的反相色譜組合進行。
可以根據(jù)已知的蛋白測定方法如茚三酮法測定餾分的蛋白含量。分離出的餾分中所含肽的氨基酸序列可以通過已知方法(氨基酸分析)確定。從而可以證實由Val-Val-Tyr-Pro氨基酸序列組成的本發(fā)明目標肽的存在。除根據(jù)前述方法分離或純化的肽(VVYP)之外，包含它的餾分也可以用作本發(fā)明藥物組合物的活性成分，只要該餾分表現(xiàn)出抑制血糖升高的作用或促進胰島素分泌的作用。
可以根據(jù)已知的肽合成法從化學上合成肽(VVYP)。肽合成法的例子有疊氮化物法、酰氯法、酸酐法、混合酸酐法、DCC法、活化酯法、羰基咪唑法、氧化還原法、DCC-添加劑(HOMB、HOBt、HOSu)法(Schreder，Luhke，The Peptide，第1卷，1966，Academic Press，NewYork，USA；Izumiya等人，Peptide Synthesis，Maruzen Co.，Ltd.(1975)；等)和類似方法。這些肽合成法包括固相合成法和液相合成法。
關于這些肽合成法，對于具有側鏈官能團的氨基酸如酪氨酸和蘇氨酸，優(yōu)選對其側鏈官能團進行保護。已知的可在此使用的保護基為，例如，芐氧羰基(Cbz-)、叔丁氧羰基(Boc-)、芐基(Bz-)等。在生成本發(fā)明肽的過程中可以根據(jù)已知的方法脫去這些保護基。
本發(fā)明的藥物組合物可完全由球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)組成。當藥物組合物與其他物質組合進行制備時，球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)的量不受限制，只要它足以發(fā)揮抑制血糖升高的作用或促進胰島素分泌的作用。通常，本發(fā)明的藥物組合物與藥理學可接受的載體和添加劑組合在一起進行制備。
載體的例子是賦形劑、稀釋劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、崩解抑制機、吸收促進劑、潤滑劑、助溶劑、緩沖劑、乳化劑、懸浮劑和和根據(jù)藥物組合物(制劑)給藥的劑型通常使用的類似載體。添加劑的例子是穩(wěn)定劑、防腐劑、緩沖劑、等滲調節(jié)劑、螯合劑、pH調節(jié)劑、表面活性劑、著色劑、合成香料、調味劑、增甜劑和根據(jù)制劑給藥的劑型通常使用的類似添加劑。
藥物組合物的單位劑量形式(藥物制劑的劑型)可以根據(jù)給藥途徑加以適當選擇。藥物組合物大體上可以分成口服藥物、經(jīng)肺藥物、經(jīng)鼻藥物、舌下藥物、胃腸外藥物(注射、滴注)或類似物。藥物組合物可以根據(jù)已知方法混合、成形或制備成為固體劑型如片劑、丸劑、分散劑、粉劑、顆粒劑、膠囊等；液體劑型如溶液、懸液、乳液、糖漿劑、酏劑等。藥物組合物可以制備成干燥產(chǎn)物的形式，當使用時通過加入適當載體成為液體?？梢愿鶕?jù)已知方法將藥物組合物制備成任何這些形式。
本發(fā)明的藥物組合物中球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)的比例不受限制。通常，藥物組合物形成的制劑中，含有大約0.1至大約80wt.％、優(yōu)選大約5wt.％至大約60wt.％、更優(yōu)選大約20wt.％至大約50wt.％的球蛋白水解產(chǎn)物，或大約0.001至大約80wt.％、優(yōu)選大約0.01wt.％至大約10wt.％的肽(VVYP)。
以此方式得到的藥物組合物的劑量可以根據(jù)藥物組合物的使用目的(用于抑制血糖升高、促進胰島素分泌、預防或治療由高血糖癥引起的疾病等)；藥物組合物的給藥方法；給藥方式；患者的年齡、體重、癥狀(糖尿病的嚴重程度)；和其他因素來加以適當確定。通常，優(yōu)選球蛋白水解產(chǎn)物給予成人的用藥量為每天大約100至大約2000mg，或者肽(VVYP)給予成人的用藥量為每天大約1至大約20mg。
藥物組合物并非只能以單一劑量給藥，可以每天分3至4次劑量給藥。前述劑型的藥物制劑以適合該劑型的途徑給藥，例如，可注射劑型的藥物制劑可以經(jīng)靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)或類似方式給藥；固體劑型的藥物制劑可以口服或類似方式給藥。
如以下實施例所證明，本發(fā)明的藥物組合物由于含有球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，具有促進胰島素分泌的作用，改善由于胰島素作用減弱或缺乏引起的高血糖狀態(tài)，從而發(fā)揮降血糖作用。因此，本發(fā)明的藥物組合物被用作預防或治療由胰島素作用減弱或缺乏造成的高血糖狀態(tài)引起的各種疾病的組合物。
糖尿病和糖尿病并發(fā)癥包括在這些疾病中。目標的糖尿病優(yōu)選為非胰島素依賴性II型糖尿病。本文討論的糖尿病并發(fā)癥是指由糖尿病(優(yōu)選非胰島素依賴性II型糖尿病)直接或間接進展發(fā)生的全身和局部疾病。具體的例子是糖尿病性酸中毒、糖尿病性黃瘤、糖尿病性肌萎縮、糖尿病性酮癥、糖尿病性昏迷、糖尿病性胃功能紊亂、糖尿病性壞疽、糖尿病性潰瘍、糖尿病性腹瀉、糖尿病性微血管病變、糖尿病性子宮體硬化癥、糖尿病性心肌病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病、糖尿病性大皰、糖尿病性白內(nèi)障、糖尿病性皮膚病、糖尿病性硬化癥、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病脂性漸進性壞死或糖尿病性血循環(huán)障礙等。
(2)食品組合物根據(jù)本發(fā)明提供的食品組合物包括具有抑制血糖升高功能并優(yōu)選以此功能進行使用的特殊保健用食品(包括被批準用于特殊保健用途的食品)；具有促進胰島素分泌功能并優(yōu)選以此功能進行使用的特殊保健用食品(包括被批準用于特殊保健用途的食品)；和由于具有血糖升高抑制作用或胰島素分泌促進作用而用于預防或治療高血糖癥引起的疾病的特殊保健用食品(包括被批準用于特殊保健用途的食品)。
前述具有抑制血糖升高功能的特殊保健用食品的特征是含有一定量的球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，其量能有效地預防或改善糖尿病患者或臨界性糖尿病患者的高血糖癥(抑制血糖升高)。食品的包裝和廣告可以帶有該作用(抑制血糖升高作用)的介紹。具有促進胰島素分泌功能的特殊保健用食品的特征是含有一定量的球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，其量能有效地促進糖尿病患者或臨界性糖尿病患者的胰島素分泌。食品的包裝和廣告可以帶有該作用(促進胰島素分泌)的介紹。用于預防或治療由高血糖癥引起的疾病的特殊保健用食品的特征是含有一定量的球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，其量能有效地發(fā)揮抑制血糖升高的作用或促進胰島素分泌的作用。食品的包裝和廣告可以帶有該作用(抗糖尿病作用)的介紹。
本發(fā)明的食品組合物可以完全由球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)組成。當食品組合物與其他物質組合進行制備時，球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)的量不受限制，只要其足以表現(xiàn)出抑制血糖升高的作用或促進胰島素分泌的作用。本發(fā)明的食品組合物可以與可在食品中使用的載體和添加劑組合進行制備。這些食品組合物包括通過將球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)與食品可接受載體和添加劑混合制備的片劑、丸劑、膠囊、顆粒劑、分散劑、粉劑、溶液(飲料)等形式的補充劑和類似物。本發(fā)明的食品組合物還包括含有球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)的產(chǎn)品，其可以采取普通食品和飲料的形式。
這些食品和飲料的例子包括乳飲料、乳酸菌飲料、含果汁的軟飲料、碳酸飲料、果汁飲料、植物汁飲料、植物/水果飲料、酒精飲料、粉末飲料、咖啡飲料、紅茶飲料、綠茶飲料、大麥茶飲料和類似飲料；蛋奶布丁、牛奶布丁、法式蘇菲布丁(soufflé puddings)、含果汁的布丁和類似布丁，果凍、bavarois、酸奶和類似甜點；冰淇淋、凍牛乳、奶冰(lacto-ice)、牛奶冰淇淋、含果汁的冰淇淋、軟式冰淇淋(softcream)、冰棒(ice candies)、冰凍果子露(冰糕)、冰凍甜點(frozenconfection)和類似的冷凍甜食；口香糖、泡泡糖、和類似的口香糖(棒狀口香糖(stick gum)、糖衣片口香糖)；巧克力豆(marble chocolate)和類似的包衣巧克力、草莓巧克力、藍莓巧克力、甜瓜巧克力(melonchocolate)和類似口味的巧克力，和類似巧克力；水果硬糖(包括夾心糖、奶油球、糖豆(marbles)等)，軟糖(包括飴糖、牛軋?zhí)恰⑾鹌ぬ?gummy candy)、果汁軟糖等)、水果糖(drop)、太妃糖和類似焦糖；硬餅干(hard biscuit)、餅干、脆餅(okaki)(米餅(rice cracker))、鮮貝(sembei)(米餅)和類似的烘焙甜食(上述所有均為甜食)；清湯(consommósoup)、濃湯和類似的湯；草莓醬、藍莓醬、橘子果醬、蘋果醬、杏子醬、蜜餞、類似果醬；紅葡萄酒和類似果酒；漿狀櫻桃、杏、蘋果、草莓和桃、和類似的加工水果；火腿、香腸、烤豬肉和類似的加工家畜肉；魚火腿、魚腸、魚片、kamaboko(蒸魚醬(steamedfish paste))、chikuwa(烤魚醬(baked fish paste))、hanpen(蒸魚糜(minced and steamed fish))、satsumaage(炸魚丸)、datemaki(omeletwrapper)、鯨咸肉和類似的加工海產(chǎn)品；烏冬面(udon)(小麥面條)、涼面(hiyamugi)、索面(somen)(細面條)、蕎麥面(soba)(蕎麥面條)、中式面條(Chinese noodle)、意大利式細面條、通心面、bifun(米粉)、harusame(涼粉條)、餛飩和類似的面條；和各種類型的配菜、面筋餅(wheat gluten cake)、魚松粉(denbu)和類似的各種其它加工食物產(chǎn)品。本發(fā)明的食物組合物優(yōu)選是飲料或甜食的形式。
食品組合物中活性成分(球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP))的量或者食品組合物的使用量不受限制，可以根據(jù)食品組合物的類型、所需改善作用的程度和其它因素在很大的范圍內(nèi)加以適當選擇。盡管食品組合物使用量的變化取決于食品組合物的類型，但對于體重60kg的人來說，可以適當?shù)剡x自以球蛋白水解產(chǎn)物計的大約100至大約2000mg/60kg的范圍，或選自以肽(VVYP)計的大約1至大約20mg/60kg的范圍。
本發(fā)明的食品組合物由于含有球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，具有促進胰島素分泌的作用，改善由胰島素作用減弱或缺乏引起的高血糖狀態(tài)，從而發(fā)揮降血糖作用。因此，本發(fā)明的食品組合物被用作預防或治療胰島素作用減弱或缺乏所致高血糖狀態(tài)引起的各種疾病。
(3)飼料組合物根據(jù)本發(fā)明提供的飼料組合物包括具有抑制血糖升高功能的飼料；具有促進胰島素分泌功能的飼料；和由于具有抑制血糖升高作用或促進胰島素分泌作用而用于預防或治療由高血糖癥引起的疾病的飼料。這些飼料優(yōu)選地可以用作尤其是犬、貓和類似動物的寵物食品。前述具有抑制血糖升高功能的飼料的特征是含有一定量的球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，其量能有效地預防或改善糖尿病動物或臨界性糖尿病動物的高血糖癥(抑制血糖升高)。具有促進胰島素分泌功能的飼料的特征是含有一定量的球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，其量能有效地促進糖尿病動物或臨界性糖尿病動物的胰島素分泌。用于預防或治療由高血糖癥引起的疾病的飼料的特征是含有一定量的球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)，其量能有效地表現(xiàn)出抑制血糖升高的作用或促進胰島素分泌的作用。
這些飼料組合物包括通過將球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)與可用于飼料的載體和添加劑混合制成的飼料，其形式為片劑、丸劑、膠囊、顆粒劑、分散劑、粉劑、溶液等。本發(fā)明的飼料組合物還包括采取普通飼料形式的含有球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)的產(chǎn)品。
飼料組合物中所含活性成分(球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP))的量或飼料組合物的劑量不受限制，可以根據(jù)飼料組合物的類型、所需改善作用的程度和其它因素在很大的范圍內(nèi)加以適當選擇。盡管飼料組合物劑量的變化取決于飼料組合物的類型，但對于10kg體重的動物，可以適當?shù)剡x自以球蛋白水解產(chǎn)物計的大約50至大約1000mg/10kg的范圍，或選自以肽(VVYP)計的大約0.5至大約10mg/10kg的范圍。
實施例以下給出的制備實施例和試驗實施例更詳細地對本發(fā)明進行說明，但本發(fā)明的范圍不限于這些實施例。在下列試驗實施例中，除非特別指出，“％”代表“重量百分比(wt％)”。
制備實施例1制備球蛋白水解產(chǎn)物以下詳細描述使用牛紅細胞制備球蛋白水解產(chǎn)物的方法。
向100kg新鮮的牛紅細胞中加250升水，進行充分的溶血。用磷酸將pH調節(jié)至2.8后，將2.6×107單位來自黑曲霉(Aspergillus niger)的酸性蛋白酶加入到溶液中，在50℃下反應3小時。
反應后，反應溶液在80℃下加熱30分鐘終止反應。此后，將氫氧化鈣的懸浮水溶液加入至反應溶液中，將pH調節(jié)至6.5。然后，加入10kg硅藻土，混合物用壓濾器過濾。將得到的濾液噴霧干燥，從而產(chǎn)生23kg粉末狀球蛋白水解產(chǎn)物。通過在下列條件下進行的凝膠過濾色譜考察球蛋白水解產(chǎn)物的分子量分布。
<凝膠過濾色譜>
儀器高效液相色譜儀(Shimadzu Corporation，LC-6A型)柱PolyHYDROXYETHYL A，5μm，9.4×200mm，PolyLC Inc.制造。
洗脫液50mM甲酸流速0.5ml/min檢測221nm處的UV吸收圖1顯示了根據(jù)上述凝膠過濾色譜獲得的球蛋白水解產(chǎn)物的凝膠過濾色譜圖。
制備實施例2抑制血TG水平升高的肽的餾分和純化本發(fā)明的肽通過以下方法獲得(1)離子交換，(2)超濾，(3)在酸性條件下通過反相柱色譜分離，和(4)在中性條件下通過反相色譜分離。
(1)離子交換將制備實施例1中得到的含13.7g球蛋白水解產(chǎn)物的10％水溶液加入到弱酸性陽離子交換樹脂(Amberlite IRC50，H+型，Organo Co.，Ltd.)中，攪拌1小時進行吸收。從而分離出未被吸收的餾分。
(2)超濾使用攪拌力超濾裝置(Advantec制造，UHP 90K)和超濾膜(Advantec制造，UIIH-1，分子量篩截1000)對前述離子交換得到的未吸收餾分進行超濾。收集保留在超濾膜上的液體(殘液)。對由此得到的餾分進行酸水解，根據(jù)茚三酮法進行定量。向檢測試管中每3至5mg蛋白加入1ml終濃度為6N的鹽酸，在大氣壓下將試管密封，并將其在110℃下加熱22小時，進行酸水解。前述的茚三酮法如下進行。將水解后樣品的pH用氫氧化鈉調節(jié)至5.0。然后使樣品與溶解在0.2M檸檬酸鹽緩沖液(pH5.0)中的茚三酮試劑在100℃下反應15分鐘。測量570nm處的吸光度。分別地，L-亮氨酸水溶液(75、150、225和300nmol/ml)作為標準溶液進行茚三酮反應。從測得的吸光度得到標準曲線，計算樣品中與L-亮氨酸相當?shù)陌被牧?。定量結果顯示于表1?；谄鹗记虻鞍姿猱a(chǎn)物的產(chǎn)率也顯示于表1。
(3)反相(酸性)色譜對上述超濾后獲得的濾液在下列條件下進行反相(酸性)色譜。
<反相(酸性)色譜>
儀器高效液相色譜儀(Shimadzu Corporation，LC-10A型)柱SuperPac Pep-S，15μm，22.5×250mm，Pharmacia制造)洗脫液含0.1％三氟乙酸的乙腈水溶液乙腈的線性濃度梯度為2-35％；乙腈濃度以1％/min的速率變化流速5 ml/min溫度40℃檢測220nm處的UV吸收餾分時間53.8-54.5分鐘(餾分A)圖2顯示了通過上述反相(酸性)色譜獲得的色譜圖。
對由此獲得的餾分進行酸水解，然后通過氨基酸分析進行定量。向檢測試管中每3至5mg蛋白加入1ml鹽酸(最終濃度為6N HCl)，在大氣壓下將檢測試管密封，并將其在110℃下加熱22小時，進行酸水解。氨基酸分析在下列條件下進行。
<氨基酸分析>
儀器高效液相色譜儀(Shimadzu Corporation，LC-6A型)柱Shim-pack ISC-07/S1504 Na，7μm，4.0×150mm，ShimadzuCorporation制造洗脫液氨基酸流動相試劑盒(Na型)，Shimadzu Corporation制造流速0.3ml/min溫度55℃反應溶液1分析試劑盒OPA試劑，Shimadzu Corporation制造檢測熒光吸收(Ex 348nm，Em 450nm)使用旋轉蒸發(fā)器濃縮、干燥酸水解的溶液，并使其結塊，并進一步減壓干燥12小時以上，從而完全去除鹽酸。將生成物溶解在0.2M檸檬酸鹽緩沖液(pH2.2)中，使得所含各種氨基酸的比例為大約100nmol/ml。該溶液通過0.45μm濾膜過濾，將10μl濾液裝柱。對于標準溶液，將混合有18種成分的H-型氨基酸標準溶液(Wako Pure ChemicalIndustries，Ltd.)用0.2M檸檬酸鹽緩沖液(pH2.2)稀釋25倍，將10μl稀釋的溶液裝柱(各種氨基酸均為1nmol/10μl)。計算氨基酸的峰面積，使用Chromatopac C-R4A(Shimadzu Corporation)進行分析，根據(jù)樣品峰面積/標準溶液峰面積的比例計算氨基酸的量。結果顯示于表1?；谇虻鞍姿猱a(chǎn)物的產(chǎn)率也顯示于表1。
(4)反相(中性)色譜進一步對上述反相(酸性)色譜洗脫、分餾得到的餾分在下列條件下進行反相(中性)色譜。
<反相(中性)色譜>
儀器高效液相色譜儀(Shimadzu Corporation，LC-10A型)柱SuperPac Pep-S，15μm，22.5×250mm，Pharmacia制造)洗脫液含20mM醋酸銨緩沖液(pH6.5)的乙腈水溶液乙腈的線性濃度梯度為0-25％；乙腈濃度以0.5％/min的速率變化流速5ml/min溫度40℃檢測220nm處的UV吸收分餾時間41.7-43.2分鐘(餾分B)，45.8-51.0分鐘(餾分C)。
圖3顯示了通過上述反相(中性)色譜獲得的色譜圖。對得到的餾分進行上文(3)中的定量，然后進行鑒定。根據(jù)各氨基酸相對總氨基酸含量的比例計算出氨基酸組成。結果顯示餾分B為VTL(Val-Thr-Leu)，餾分C為VVYP(Val-Val-Tyr-Pro)。與血紅蛋白氨基酸序列匹配，證實血紅蛋白中存在有這些餾分。定量結果和基于球蛋白水解產(chǎn)物的產(chǎn)率均顯示于表1。
表1

試驗實施例1對血糖水平升高的抑制作用(小鼠)使用制備實施例1中獲得的球蛋白水解產(chǎn)物和制備實施例2(4)中獲得的餾分C肽(VVYP)進行糖耐量試驗，以研究其對血糖水平升高的抑制作用。
70只雄性ICR小鼠(8周齡)，禁食過夜，分成7組，每組由10只小鼠組成。使用口腔探頭，每組小鼠灌胃給予5mg試驗組1)、10mg(試驗組2)或50mg(試驗組3)的球蛋白水解產(chǎn)物；1μg(試驗組4)、2μg(試驗組5)或10μg(試驗組6)的肽(VVYP)；或0.2ml(對照組)的水。球蛋白水解產(chǎn)物和肽(VVYP)溶解在0.2ml水中后進行使用。給藥后，立即使用口腔探頭以類似方式灌胃給予0.2ml葡萄糖溶液(0.25g/ml葡萄糖水溶液)。在給予葡萄糖溶液后30、60、90和120分鐘，從尾靜脈采血，使用試劑盒(Glucose CII Test Wako，Wako PureChemical Industries，Ltd.，Osaka)根據(jù)變旋酶/GOD法測定血糖水平。
給予葡萄糖溶液后120分鐘試驗組和對照組的血糖水平(AUC曲線下面積，mg/dL·120min)顯示于表2。在表2中，“相對于對照的百分比”是指試驗組血糖水平相對于對照組血糖水平的比例，對照組為100％(下文中同樣如此應用)。
表2

*p＜0.05**p＜0.01從表中可以看出，球蛋白水解產(chǎn)物和肽(VVYP)以依賴劑量的方式顯著地抑制小鼠的血糖水平升高。肽(VVYP)降低血糖的活性比球蛋白水解產(chǎn)物強1000倍以上。由于球蛋白水解產(chǎn)物所含肽(VVYP)的比例為大約1％，球蛋白水解產(chǎn)物產(chǎn)生降低血糖作用的活性成分(有效成分)之一推測是肽(VVYP)。
試驗實施例2對血糖水平升高的抑制作用(日本人)使用制備實施例1中得到的球蛋白水解產(chǎn)物對人體(日本人)進行糖耐量試驗(7-天休藥期，單盲法交叉試驗)(糖尿病受試者12名II型糖尿病患者，空腹血糖水平為200mg/dl或更高；正常受試者10名正常受試者，空腹血糖水平為100mg/dl或更低；平均體重68kg)，以研究球蛋白水解產(chǎn)物對血糖水平升高的抑制作用。
受試者(糖尿病受試者和正常受試者)由于前一天晚上開始禁食而處于饑餓狀態(tài)，給予其1000mg、1500mg或3000mg(試驗組)的球蛋白水解產(chǎn)物，或3000mg(對照組)的乳酪蛋白。給藥后立即給予葡萄糖溶液(75g/200ml)。在給予葡萄糖溶液后60、90和120分鐘后采血，使用試劑盒(Glucose CII Test Wako，Wako Pure ChemicalIndustries，Ltd.，Osaka)根據(jù)變旋酶/GOD法測定血糖水平。
在給予葡萄糖溶液后120分鐘試驗組和對照組受試者的血糖水平(AUC曲線下面積，mg/dL·120min)顯示于表3。
表3

*p＜0.05**p＜0.01從表中可以看出，以3000mg的球蛋白水解產(chǎn)物給藥對II型糖尿病受試者和正常受試者均顯示出統(tǒng)計學上顯著的抑制血糖水平升高的作用。但根據(jù)臨床應用，球蛋白水解產(chǎn)物對糖尿病受試者較正常受試者顯示出更明顯、更有效的作用。
因此，球蛋白水解產(chǎn)物被認為能顯著地抑制患有II型(非胰島素依賴性)糖尿病的受試者血糖的升高。根據(jù)上述試驗實施例1的結果，相信球蛋白水解產(chǎn)物的主要成分(活性成分)是肽(VVYP)，預計肽(VVYP)抑制患有II型(非胰島素依賴性)糖尿病的患者血糖升高的活性較球蛋白水解產(chǎn)物高大約5000倍。
試驗實施例3升高血胰島素水平的作用(日本人)12名受試者(日本人，平均體重67kg)給予其量為1000和3000mg的制備實施例1中獲得的球蛋白水解產(chǎn)物和其量為1000mg的安慰劑(乳酪蛋白)，休藥期為7天(單盲法交叉試驗)。給予每種物質后，采血測定血胰島素和血三碘甲腺原氨酸水平。具體地，受試者從前一晚要禁食12小時以上。在試驗當天，在給藥之前即刻采血，給藥后6小時內(nèi)每小時進行采血，以測定血胰島素和血三碘甲腺原氨酸水平。使用“Glazyme Insulin-EIA TEST”(Wako Pure Chemical Industries.Ltd.，Osaka)測定血胰島素水平。血三碘甲腺原氨酸水平的測定委托ShionogiBiomedical Laboratories(Osaka)(根據(jù)CLIA法)進行。
在給予試驗物質(1000mg和3000mg球蛋白水解產(chǎn)物和安慰劑)后3小時的血胰島素水平(mU/L·3h)和血三碘甲腺原氨酸水平(ng/L·3h)顯示于表4。
表4

*p＜0.05從表中可看出，給予3000mg球蛋白水解產(chǎn)物對血三碘甲腺原氨酸水平?jīng)]有產(chǎn)生很大差異，但血胰島素水平(胰島素分泌速率)顯著增加。這一事實確定了球蛋白水解產(chǎn)物在對甲狀腺功能沒有不良影響的情況下對人體(日本人)胰島素分泌速率具有特異性促進作用。而且，鑒于表中給出的結果，推測試驗實施例2中顯示的球蛋白水解產(chǎn)物抑制人體(日本人)血糖升高的作用是其促進胰島素分泌的作用所引起的，并且，鑒于試驗實施例1的結果，推測球蛋白水解產(chǎn)物的活性成分(有效成分)推測是肽(VVYP)。
試驗實施例4增加血胰島素水平的作用(西方人)17名西方人(7名肥胖受試者，10名正常受試者，平均體重82kg)給予500、1000和2000mg制備實施例1中制備的球蛋白水解產(chǎn)物和安慰劑(1000mg乳酪蛋白)，休藥期為7天(單盲法交叉試驗)。給予每種物質后，采血測定血胰島素和血糖水平。具體地，給予受試者奶油湯(含有41g碳水化合物和67g脂肪)，同時給予試驗物質。在給藥之前即刻采血(0)，至給藥后4小時內(nèi)每小時進行采血，以測定血胰島素和血糖水平。
使用“Glazyme Insulin-EIA TEST”(Wako Pure Chemical Industries.Ltd.，Osaka)測定血胰島素水平。使用試劑盒(Glucose CII Test Wako，Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，Osaka)根據(jù)變旋酶/GOD法測定血糖水平。
將試驗物質(500mg、1000mg和2000mg球蛋白水解產(chǎn)物和安慰劑)給予肥胖受試者和正常受試者后4小時的血胰島素水平(AUC曲線下面積，？mU/L·4h)和血糖水平(？mg/dL·4h)顯示于表5。
表5球蛋白水解產(chǎn)物對血胰島素水平的作用

從表中可以看出，通過給予球蛋白水解產(chǎn)物，肥胖受試者的血胰島素水平(胰島素分泌速率)明顯增加，血糖水平的升高相應地得到抑制。當球蛋白水解產(chǎn)物以1000mg的量給藥時，該效應非常顯著。相反，在正常受試者中沒有觀察到血胰島素水平(胰島素分泌速率)的升高(促進)。正常受試者而是顯示出下降的趨勢。
在對日本人受試者進行的試驗實施例3中，3000mg球蛋白水解產(chǎn)物的給藥量顯示的促進血胰島素水平(胰島素分泌速率)的作用比1000mg球蛋白水解產(chǎn)物的給藥量要強。相反，在對西方人進行的本試驗實施例中，1000mg球蛋白水解產(chǎn)物的給藥量顯示的促進血胰島素水平的作用(促進胰島素分泌作用)比2000mg球蛋白水解產(chǎn)物的給藥量要強。鑒于這一事實，球蛋白水解產(chǎn)物可以用作日本糖尿病患者的有效改善或預防組合物，其效果預計比對于西方糖尿病患者更好。
試驗實施例5降低血糖水平的作用(西方人)對30名BMI為30或更高的肥胖受試者(年齡18至65歲)進行12周的肥胖治療計劃(飲食療法、運動療法)。其中17名隨機選擇的受試者在家中每天攝入一次含1.5g制備實施例1中制備的球蛋白水解產(chǎn)物的低熱量食物(試驗組)。剩余的13名受試者在家中每天攝入一次不含球蛋白水解產(chǎn)物的低熱量食物(對照組)。此家庭保健37周后，測定試驗組和對照組的試驗受試者的空腹血糖水平和體重，將測定結果與家庭保健之前測定的結果進行比較。使用試劑盒(Glucose CII TestWako，Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，Osaka)根據(jù)變旋酶/GOD法測定血糖水平。表6顯示了試驗組和對照組的試驗受試者相對于家庭保健開始之前的空腹血糖水平變化均數(shù)。
表6

從表中可以看出，球蛋白水解產(chǎn)物給藥組和非球蛋白水解產(chǎn)物給藥組(對照組)的試驗受試者均顯示出體重低于家庭保健開始之前的體重。而且，球蛋白水解產(chǎn)物給藥組顯示出的血糖水平顯著降低。鑒于試驗實施例4的結果，推測本試驗實施例中顯示的球蛋白水解產(chǎn)物降低血糖的作用推測是促進胰島素分泌引起的。
試驗實施例6安全性試驗將實施例2中制備的氨基酸序列為Val-Val-Tyr-Pro(SEQ.ID.No.1)的肽口服給予雄性和雌性ICR小鼠，其用量為10g/kg(最高容許劑量)或更高，沒有一例死亡，從而表明該肽的安全性。
實施例1制備含肽(VVYP)的食品(1)制備奶粉將10毫克制備實施例2中制備的氨基酸序列為Val-Val-Tyr-Pro(SEQ.ID.No.1)的肽加入到100g嬰兒奶粉配方中，從而得到具有促進胰島素分泌或抑制血糖升高功能的奶粉。
(2)制備巧克力將50毫克制備實施例2中制備的氨基酸序列為Val-Val-Tyr-Pro(SEQ.ID.No.1)的肽加入到100g巧克力中，從而得到具有促進胰島素分泌或抑制血糖升高功能的巧克力。
(3)制備綠茶飲料將80千克綠茶葉加入到300l熱水(80℃)中，在該溫度下提取4分鐘。將得到的提取物冷卻并離心。收集清亮的上清液作為綠茶提取物。向此提取物中加入0.4kg維生素C，然后加入50g制備實施例2中制備的氨基酸序列為Val-Val-Tyr-Pro(SEQ.ID.No.1)的肽。加入熱水至最終體積為1000l?；旌衔锛訜嶂?5℃或更高的溫度，裝入金屬罐，蒸餾滅菌(125℃，5分鐘)，從而得到綠茶飲料。
(4)制備口香糖使用以下配方制備口香糖。
<口香糖配方>
香糖膠基25.0重量份蔗糖63.8重量份玉米糖漿10.0重量份甘油1.0重量份肽(VVYP)0.2重量份總計100.0重量份首先將香糖膠基、糖、玉米糖漿和甘油混合。然后加入制備實施例2中制備的氨基酸序列為Val-Val-Tyr-Pro(SEQ.ID.No.1)的肽，使用混合機在50℃下將該混合物進行均勻捏合。冷卻后，通過軋輥對混合物進行壓模，從而得到含有肽(VVYP)作為活性成分的口香糖棒，每根棒中該肽的比例為5mg。
實施例2制備含球蛋白水解產(chǎn)物的食品(1)補充劑根據(jù)標準方法將下列成分捏合、成粒、干燥和壓片，得到含有球蛋白水解產(chǎn)物作為活性成分的片劑，每片(200mg)中該球蛋白水解產(chǎn)物的含量為25wt.％(50mg)。這些片劑用作具有球蛋白水解產(chǎn)物藥理學作用(抗糖尿病作用、抑制血糖水平升高作用、促進胰島素分泌作用)的補充劑。
<片劑配方> (每片)球蛋白水解產(chǎn)物(制備實施例1) 50mg微晶纖維素 140mg蔗糖脂肪酸酯10mg總計200mg實施例3制備含有本發(fā)明肽的飼料將制備實施例2中制備的氨基酸序列為Val-Val-Tyr-Pro(SEQ.ID.No.1)的肽以0.1wt.％的比例加入到含有維生素、礦物質和類似物質的預混合物中。將該混合物以10wt.％的比例加入到市售的犬用食品中，從而得到具有促進胰島素分泌或抑制血糖升高功能的犬用食品。
工業(yè)應用性根據(jù)本發(fā)明，可以制造由于其中包含有球蛋白水解產(chǎn)物或肽(VVYP)作為活性成分而發(fā)揮降低血糖或促進胰島素分泌作用的藥物組合物、食品組合物和飼料組合物。這些組合物由于具有降低血糖或促進胰島素分泌的作用，在糖尿病和臨界性糖尿病受試者中表現(xiàn)出降低高血糖性血糖水平的作用。因此，本發(fā)明的組合物可以有效用于預防或治療由高血糖癥引起的疾病，尤其是糖尿病和糖尿病并發(fā)癥。
序列表<110>愛沐健制藥株式會社<120>具有抗糖尿病作用的蛋白質水解物<130>P05-98<150>US 60/627843<151>2004-11-15<160>1<210>1<211>4<212>PRT<400>1Val Val Tyr Pro1 權利要求
1.一種抗糖尿病藥物，其包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
2.一種血糖升高抑制劑，其包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
3.一種胰島素分泌促進劑，其包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
4.一種特殊保健用食品，其具有抑制血糖升高的功能或提高胰島素分泌的功能，并優(yōu)選以此功能加以使用，所述食品包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
5.一種飼料，其具有抑制血糖升高的功能或提高胰島素分泌的功能，并優(yōu)選以此功能加以使用，所述飼料包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
6.一種預防或治療由高血糖癥引起的疾病的組合物，其包括活性成分球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽。
7.根據(jù)權利要求6的預防或治療由高血糖癥引起的疾病的組合物，其中所述由高血糖癥引起的疾病是糖尿病或糖尿病并發(fā)癥，如糖尿病性酸中毒、糖尿病性黃瘤、糖尿病性肌萎縮、糖尿病性酮癥、糖尿病性昏迷、糖尿病性胃功能紊亂、糖尿病性壞疽、糖尿病性潰瘍、糖尿病性腹瀉、糖尿病性微血管病變、糖尿病性子宮體硬化癥、糖尿病性心肌病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病、糖尿病性大皰、糖尿病性白內(nèi)障、糖尿病性皮膚病、糖尿病性硬化癥、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病脂性漸進性壞死或糖尿病性血循環(huán)障礙。
8.根據(jù)權利要求6的預防或治療由高血糖癥引起的疾病的組合物，其中所述由高血糖性癥引起的疾病是II型糖尿病或其并發(fā)癥。
9.一種抑制受試者血糖水平增加的方法，其包括將有效量的球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽給予患有由高血糖癥引起的疾病的受試者或處于該疾病臨床前期的受試者的步驟。
10.根據(jù)權利要求9的抑制受試者血糖水平增加的方法，其中所述由高血糖癥引起的疾病是糖尿病或糖尿病并發(fā)癥，如糖尿病性酸中毒、糖尿病性黃瘤、糖尿病性肌萎縮、糖尿病性酮癥、糖尿病性昏迷、糖尿病性胃功能紊亂、糖尿病性壞疽、糖尿病性潰瘍、糖尿病性腹瀉、糖尿病性微血管病變、糖尿病性子宮體硬化癥、糖尿病性心肌病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病、糖尿病性大皰、糖尿病性白內(nèi)障、糖尿病性皮膚病、糖尿病性硬化癥、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病脂性漸進性壞死或糖尿病性血循環(huán)障礙。
11.根據(jù)權利要求9的抑制受試者血糖水平增加的方法，其中所述由高血糖癥引起的疾病是II型糖尿病或其并發(fā)癥。
12.一種預防或治療受試者由高血糖癥引起的疾病的方法，其包括將有效量的球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽給予患有由高血糖癥引起的疾病的受試者或處于該疾病臨床前期的受試者的步驟。
13.根據(jù)權利要求12的預防或治療受試者由高血糖癥引起的疾病的方法，其中所述由高血糖癥引起的疾病是糖尿病或糖尿病并發(fā)癥，如糖尿病性酸中毒、糖尿病性黃瘤、糖尿病性肌萎縮、糖尿病性酮癥、糖尿病性昏迷、糖尿病性胃功能紊亂、糖尿病性壞疽、糖尿病性潰瘍、糖尿病性腹瀉、糖尿病性微血管病變、糖尿病性子宮體硬化癥、糖尿病性心肌病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病、糖尿病性大皰、糖尿病性白內(nèi)障、糖尿病性皮膚病、糖尿病性硬化癥、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病脂性漸進性壞死或糖尿病性血循環(huán)障礙。
14.根據(jù)權利要求12的預防或治療受試者由高血糖癥引起的疾病的方法，其中所述由高血糖癥引起的疾病是II型糖尿病或其并發(fā)癥。
15.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備抗糖尿病藥物中的用途。
16.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備血糖升高抑制劑中的用途。
17.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備胰島素分泌促進劑中的用途。
18.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備特殊保健用食品中的用途，所述的特殊保健用食品具有抑制血糖升高的功能或提高胰島素分泌的功能，并通常以此功能加以使用。
19.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備飼料中的用途，所述的飼料具有抑制血糖升高的功能或提高胰島素分泌的功能，并通常以此功能加以使用。
20.球蛋白水解產(chǎn)物或Val-Val-Tyr-Pro肽在制備預防或治療由高血糖癥引起的疾病的組合物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了具有降低處于高血糖狀態(tài)的受試者血糖水平的作用，并用于降低該受試者血糖水平的組合物(血糖升高抑制劑)。而且，本發(fā)明提供了由于前述作用而用于預防或治療由高血糖癥引起的疾病，尤其是糖尿病和糖尿病并發(fā)癥的組合物(用于由高血糖癥引起的疾病的預防性或改善性組合物，抗糖尿病藥物)。
文檔編號C07K5/103GK101060854SQ20058003909
公開日2007年10月24日 申請日期2005年11月15日 優(yōu)先權日2004年11月15日
發(fā)明者香川恭一, 成瀬年彥, 福浜千津子 申請人:愛沐健制藥株式會社