專利名稱:具有抗炎活性的共軛物的制作方法
背景技術(shù):
抗炎藥物可分為甾體和非甾體抗炎藥物。甾體抗炎化合物仍然是治療各種炎性疾病和病癥例如哮喘,炎性鼻疾病如過敏性鼻炎、鼻息肉,腸疾病如克羅恩氏病、結(jié)腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎,皮膚炎癥如濕疹、牛皮癬、變應(yīng)性皮炎、神經(jīng)性皮炎、瘙癢癥,結(jié)膜炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎最有效的化合物。這類藥物除了具有出色的效力和有效性外,還存在多種不利副作用(例如糖代謝紊亂,鈣再吸收減少,內(nèi)源性皮質(zhì)激素分泌減少和腦垂體、腎上腺皮質(zhì)和胸腺生理功能紊亂)。市售甾體藥可非常有效地對抗炎性病癥和進程,然而其全身性副作用卻有所減輕。專利申請WO 94/13690、94/14834、92/13872和92/13873描述了被設(shè)計局部用于炎性部位的所謂“軟性”甾體物質(zhì)或可水解的皮質(zhì)激素類物質(zhì),然而其全身性副作用由于水解在血清中而減輕,在血清中該活性甾體物質(zhì)很快水解成非活性形式。仍然需要尋找到理想的、但在用于控制各種疾病例如哮喘或克羅恩氏病的長期和連續(xù)治療(如果需要的話)中沒有不良作用的甾體藥物,因而仍然需要集中精力發(fā)現(xiàn)和開發(fā)出具有改善了的治療特性的甾體藥物。
大環(huán)內(nèi)酯抗生素優(yōu)先蓄積在受試者的不同細胞中,特別是吞噬細胞例如單核外周血細胞、和腹膜及肺泡巨噬細胞中(參見Gladue,R.P等人,Antimicrob.Agents Chemother.1989,33,277-282;Olsen,K.M.等人,Antimicrob.Agents Chemother.1996,40,2582-2585)。部分大環(huán)內(nèi)酯的抗炎效果在文獻中已有記載,盡管其效果相對較弱。例如,紅霉素衍生物(J.Antimicrob.Chemother.1998,41,37-46;專利申請?zhí)朩O 00/42055)和阿奇霉素衍生物(EP Pat.Br.0283055)的抗炎效果已有記載。部分大環(huán)內(nèi)酯的抗炎效果還可以由在實驗動物模型例如酵母聚糖誘導(dǎo)的小鼠腹膜炎(J.Antimicrob.Chemother.1992,30,339-348)和內(nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠氣管內(nèi)中性粒細胞蓄積(J.Immunol.1997,159,3395-4005)中進行的體內(nèi)和體外研究已知。大環(huán)內(nèi)酯對細胞因子例如白介素8(IL-8)(Am.J Respir.Crit.Care.Med.1997,156,266-271)和白介素5(IL-5)(EP Pat.Br.0775489和EP Pat.Br.771564)的調(diào)節(jié)作用也是已知的。
國際公開號WO 02/055531 A1(在此將其全部內(nèi)容引入作為參考)公開了式II所示的共軛化合物 其中M表示在炎性細胞中具有蓄積性質(zhì)的大環(huán)內(nèi)酯亞單元,A表示可以是甾體或非甾體的抗炎亞單元,以及L表示連接M和A的連接分子;(b)它們的可藥用鹽、前藥和溶劑化物;(c)它們的制備方法和中間體;和(d)它們在治療人和動物炎性疾病和病癥中的用途。在WO 02/05531中,所述共軛的甾體-大環(huán)內(nèi)酯化合物主要在大環(huán)內(nèi)酯環(huán)的N/9a-位上與該甾體亞單元連接。
美國公開申請2004 0014685和國際公開號WO 04/005310 A2(在此將其全部內(nèi)容引入作為參考)涉及式III所示的化合物、它們的可藥用鹽和溶劑化物、它們的制備方法和中間體、以及它們在治療人和動物炎性疾病和病癥中的用途, 其中M表示在炎性細胞中具有蓄積性質(zhì)的衍生自大環(huán)內(nèi)酯的大環(huán)內(nèi)酯亞單元(大環(huán)內(nèi)酯部分),S表示衍生自具有抗炎活性的甾體藥物的甾體亞單元,以及L表示連接M和S的連接分子。
US公開申請20040077612(在此將其全部內(nèi)容引入作為參考)涉及式IV所示的新化合物、它們的可藥用鹽和溶劑化物、它們的制備方法和中間體、以及它們在治療人和動物炎性疾病和病癥中的用途, 其中M表示在炎性細胞中具有蓄積性質(zhì)的衍生自大環(huán)內(nèi)酯的大環(huán)內(nèi)酯亞單元(大環(huán)內(nèi)酯部分),V表示抗炎甾體或非甾體亞單元或者抗腫瘤或抗病毒亞單元,以及L表示共價連接M和V的連接基團。
US公開申請2004 0097434和國際公開號WO 04/005309(在此將其全部內(nèi)容引入作為參考)涉及式V所示的新化合物、它們的可藥用鹽和溶劑化物、它們的制備方法和中間體、以及它們在治療人和動物炎性疾病和病癥中的用途,
其中M表示在炎性細胞中具有蓄積性質(zhì)的衍生自大環(huán)內(nèi)酯的大環(huán)內(nèi)酯亞單元(大環(huán)內(nèi)酯部分),D表示衍生自具有抗炎、止痛和/或解熱活性的非甾體藥物(NSAID)的非甾體亞單元(非甾體部分),以及L表示共價連接M和D的連接基團。
US公開申請20050080003 (在此將其全部內(nèi)容引入作為參考)還進一步描述了具有通過鏈L與苷元類型大環(huán)內(nèi)酯亞單元的位置N/9a相連的甾體或非甾體抗炎亞單元D的共軛化合物。
US公開申請20040087517和國際公開WO2003/070174公開了(i)“轉(zhuǎn)運分子(transportophore)”和(ii)“非抗生素治療劑”通過引入該轉(zhuǎn)運分子的鍵或連接基團共價連接的共軛物。該轉(zhuǎn)運分子和共軛物必須具有至少為2的免疫選擇比例?!稗D(zhuǎn)運分子”被廣泛地定義為其中一部分類似于且被認為是(一種或多種)轉(zhuǎn)運蛋白底物的化合物。
然而,仍然需要具有治療作用的大環(huán)內(nèi)酯和甾體的新抗炎共軛物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及a)結(jié)構(gòu)I所示的新化合物 其中M表示在炎性細胞中具有蓄積性質(zhì)的衍生自大環(huán)內(nèi)酯的大環(huán)內(nèi)酯亞單元,Z表示衍生自非甾體抗炎藥物(NSAID)的甾體亞單元或非甾體亞單元,以及L表示連接M和Z的鏈;b)它們的可藥用鹽和溶劑化物;c)它們的制備方法和中間體以及d)它們在治療人和哺乳動物炎性疾病中的活性和用途。具體地說,該大環(huán)內(nèi)酯亞單元是9-脫氧-9-二氫-9a-氮雜-9a-高紅霉素內(nèi)酯(homoerithronolide)A或阿奇霉素苷元亞單元,以及與Z的連接是借助連接基L通過苷元環(huán)位置C/11上的羥基或者位置9a上的氮實現(xiàn)的。另外具體地說,該大環(huán)內(nèi)酯亞單元是9-脫氧-9-二氫-9a-氮雜-9a-高紅霉素內(nèi)酯A或阿奇霉素苷元亞單元,以及Z是甾體亞單元,并且與M的連接是借助連接基L通過17α-羥基實現(xiàn)的。
發(fā)明詳述式I所示化合物的特征在于在上述炎性疾病和病癥中選擇性蓄積于靶標器官和細胞中。該藥代動力學(xué)性質(zhì)保證了式I所示化合物可以通過抑制炎性介質(zhì)產(chǎn)生而在炎性細胞的炎性位點上發(fā)揮作用。按照這樣一種方式,就避免了皮質(zhì)甾體或非甾體抗炎分子的不良全身性副作用,且該甾體或NSAID部分的治療作用靶向作用于最需要的區(qū)域。在局部或全身使用之后,這些分子迅速蓄積在炎性細胞中,通過抑制細胞因子和趨化因子和/或其它炎性介質(zhì)產(chǎn)生,從而抑制炎癥。
根據(jù)已知的現(xiàn)有技術(shù),迄今尚未描述過作為本發(fā)明目的的式I所示化合物、它們的可藥用鹽、含其的藥物組合物、以及制備它們的方法。作為本發(fā)明目的的任何一種化合物均未被作為抗炎物質(zhì)或者炎性組織中嗜酸性細胞蓄積的抑制劑進行過描述。
在一方面,本發(fā)明涉及a)式I所示化合物 其中M表示具有亞結(jié)構(gòu)VIII的大環(huán)內(nèi)酯亞單元
其中R1、R2、R3、R4和R5各自獨立地是氫或基團例如C1-C4烷基(優(yōu)選甲基)、烷?;?優(yōu)選乙?;?、烷氧羰基(優(yōu)選甲氧羰基或叔丁氧羰基)、芳甲氧羰基(優(yōu)選芐氧羰基)、芳?;?優(yōu)選苯甲?;?、芳烷基(優(yōu)選芐基)、烷基甲硅烷基(優(yōu)選三甲基甲硅烷基)、烷基甲硅烷基烷氧烷基(優(yōu)選三甲基甲硅烷基乙氧甲基)或者是與式IX的鏈L中的X1的共價鍵;在另一方面,R1、R2、R3、R4和R5獨立地選自C1-C4烷基和氫。
在另一方面,R1、R2、R3、R4和R5獨立地選自甲基和氫。
在另一方面,R1、R2、R3、R4和R5是氫。
在另一方面,R4是可與R5結(jié)合形成″橋″(例如環(huán)狀碳酸酯或氨甲酸酯)的基團,或者R4是可與>NRN結(jié)合形成″橋″(例如環(huán)狀碳酸酯)的基團。
在另一方面,R4表示與式IX的鏈L中的X1的共價鍵;RN表示氫、C1-C4烷基或者與式IX的鏈L中的X1的共價鍵;L表示連接鏈;優(yōu)選L表示具有亞結(jié)構(gòu)IX或XIII的連接鏈-X1-(CH2)m-Q-(CH2)n-X2- IX-X1-(CH2)m-V-(CH2)p-Q-(CH2)n-X2- XIII其中X1選自-CH2-、-CH2-NH-、-C(O)-、-OC(O)-、=N-O-、-C(O)NH-或-OC(O)NH-;X2選自-NH-、-CH2-、-NHC(O)-、-C(=O)、-OC(O)-、-C(=O)O-、或-C(O)NH-;Q是-NH-或-CH2-;其中每個-CH2-或-NH-基團任選被C1-C7-烷基、C2-C7-烯基、C2-C7-炔基、C(O)Rx、C(O)ORx、C(O)NHRx、CH2C(O)ORx取代,其中Rx可以是C1-C7-烷基、芳基或雜芳基;V是-NH-或-NH-C(O)-;符號m、n和p獨立地是0或整數(shù)1-12;條件是如果Q=NH;則n不能是0。
連接基團的上述定義不僅優(yōu)選適用于式VIII的非甾體和大環(huán)內(nèi)酯的共軛物,還適用于落入式I的任意共軛物。如本領(lǐng)域熟知的那樣,還可以使用其它的連接基團,只要它們可以提供必要的間隔,且可用于將式I中的一個亞單元與其它亞單元連接起來。例如美國專利6,297,260(在此將其全部內(nèi)容引入作為參考)權(quán)利要求1和其中所包括的NSAID具體列表。
Z表示衍生自非甾體抗炎藥物(NSAID)的非甾體亞單元或者甾體亞單元,優(yōu)選為亞結(jié)構(gòu)X的甾體 其中Ra、Rb獨立地是氫、甲基或鹵素;Rf是氫、羥基或鹵素(優(yōu)選氯)或者與和其相連的碳原子形成C=O(羰基);Rc是羥基;C1-C4烷基(優(yōu)選甲基);C1-C4烷氧基(優(yōu)選甲氧基);C1-C4烷基羥基(優(yōu)選CH2OH);NH-C1-C4烷基(優(yōu)選NHCH3);CH2OC(O)C1-C4烷基(優(yōu)選CH2OC(O)CH3);XC(O)N(R1R2),其中X是S或O,R1和R2獨立地是C1-C6烷基或者R1和R2一起是C1-C6亞烷基;或者Rc是SCH2或CH2Y,其中Y是鹵素(優(yōu)選氯或氟),或者Rc是與鏈L中的X2的共價鍵,條件是鏈L與式VIII的大環(huán)內(nèi)酯亞單元的R4相連;Rd是與鏈L中的X2的共價鍵、氫、羥基、甲基或C1-C4烷氧基(優(yōu)選甲氧基或正丙氧基)或者與Re和與它們相連的C原子一起形成1,3-二氧戊環(huán),其可以被另外的烷基或烯基單或二取代(優(yōu)選2,2-二甲基或2-單丙基或反式-丙烯基環(huán));Re是氫、羥基、甲基或C1-C4烷氧基(優(yōu)選甲氧基或正丙氧基)或者與Rd和相連的C原子一起表示1,3-二氧戊環(huán),其可以被另外的烷基或烯基單或二取代(優(yōu)選2,2-二甲基或2-單丙基或反式-丙烯基環(huán));在另一方面,Rd優(yōu)選是與鏈L中的X2的共價鍵;Rj是氫或鹵素(優(yōu)選氯)。
在另一方面,本發(fā)明涉及選自下述的式X化合物 在另一方面,本發(fā)明涉及制備前述化合物的方法以及可用于所述制備方法的中間體。
在第三方面,本發(fā)明涉及含有用量足以抑制炎癥進程的一種或多種前述化合物的組合(例如兩種或多種本發(fā)明的NSAID共軛物、兩種或多種本發(fā)明的甾體共軛物、其中至少一種是本發(fā)明的NSAID共軛物且至少一種是本發(fā)明的甾體共軛物的兩種或多種本發(fā)明化合物)。如果需要治療炎性疾病或病癥時,這類組合可以提供更明顯的抗炎活性。
在又一方面,本發(fā)明涉及前述化合物在治療由炎癥進程引起的障礙和病癥中的用途,或者本發(fā)明化合物在治療前述障礙中的用途或制備用于這類治療的藥物的用途。
在本發(fā)明又一方面預(yù)期了含有本發(fā)明化合物及其可藥用鹽或溶劑化物的藥物組合物,其中包括可藥用稀釋劑或載體。實例包括但不限于羧甲基纖維素及其鹽、聚丙烯酸及其鹽、羧乙烯基聚合物及其鹽、海藻酸及其鹽、海藻酸丙二醇酯、殼聚糖、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、乙基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、N-乙烯基乙酰胺聚合物、聚異丁烯酸乙烯酯(polyvinyl methacrylate)、聚乙二醇、聚氧丙烯(pluronic)、明膠、甲基乙烯基醚馬來酸酐共聚物、淀粉、可溶性淀粉交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、支鏈淀粉以及丙烯酸甲酯和2-乙基己基丙烯酸酯的共聚物、卵磷脂、卵磷脂衍生物、丙二醇脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、去水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯去水山梨糖醇脂肪酸酯、聚乙二醇脂肪酸酯、聚氧乙烯水合(hydrated)蓖麻油、聚氧乙烯烷基醚、和聚氧丙烯。如果使用稀釋劑的話,適宜的緩沖體系pH范圍為4-8,同時一起使用低分子量醇例如乙醇和異丙醇。防腐劑和掩蔽劑的使用是適宜的。
在本發(fā)明又一方面,涉及治療其特征在于不希望的炎性免疫應(yīng)答或與之相關(guān)的炎性疾病、障礙、和病癥以及由過度分泌TNF-α和IL-1引起或與之相關(guān)的任何疾病和病癥的方法,所述方法包括向?qū)ο蠼o藥治療有效量的本發(fā)明化合物。
在本發(fā)明又一方面,涉及治療有需要的對象中與白細胞浸潤發(fā)炎組織有關(guān)的炎性病癥和免疫性或過敏性障礙的方法,所述方法向所述對象給藥治療有效量的本發(fā)明化合物。
在本發(fā)明又一方面,通過本發(fā)明化合物治療的炎性病癥和免疫性障礙選自哮喘、成人型呼吸窘迫綜合征、支氣管炎、囊性纖維化病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、眼葡萄膜炎、結(jié)膜炎、炎性腸病、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、末端直腸炎、牛皮癬、濕疹、皮炎、冠脈梗塞損傷(coronary infarct damage)、慢性炎癥、內(nèi)毒素休克和平滑肌增殖障礙。
在本發(fā)明又一方面,通過本發(fā)明化合物治療的炎性病癥和免疫性障礙選自哮喘、成人型呼吸窘迫綜合征、慢性阻塞性肺病(COPD)、炎性腸病、克羅恩氏病、支氣管炎和囊性纖維化病。
在本發(fā)明又一方面,涉及治療其特征在于過度異常產(chǎn)生細胞因子或炎性介質(zhì)或與之相關(guān)的炎性疾病、障礙和病癥的方法,所述方法包括向?qū)ο蠼o藥治療有效量的本發(fā)明化合物。
符號M、L和Z表示式I化合物中的三個不同亞單元。符號M表示大環(huán)內(nèi)酯亞單元,符號Z表示通過鏈L與大環(huán)內(nèi)酯亞單元M相連的甾體或非甾體亞單元。
在式I中,Z可以表示非甾體抗炎亞單元,即非甾體抗炎藥物(NSAID)的一部分。適宜的NSAID包括但不限于那些抑制負責(zé)前列腺素生物合成的環(huán)氧合酶的藥物、和某些內(nèi)分泌物抑制劑,包括各種環(huán)氧合酶同功酶(包括但不限于環(huán)氧合酶-1和環(huán)氧合酶-2)的抑制劑,以及與非甾體抗炎藥物(NSAID)有關(guān)的環(huán)氧合酶和脂氧合酶的抑制劑,例如可商購得到的NSAID醋氯芬酸、阿西美辛、對乙酰氨基酚、醋氨沙洛、乙酰水楊酸、乙酰水楊酰(acetyl-salicylic)-2-氨基-4-甲基吡啶酸、5-氨基乙酰水楊酸、阿氯芬酸、氨洛芬、氨芬酸、氨基安替比林、安吡昔康、阿尼利定、芐達酸、苯噁洛芬、柏莫洛芬、α-沒藥醇、溴芬酸、5-溴水楊酸乙酸酯(5-bromosalicylic acid acetate)、溴水楊醇、布氯酸、布替布芬、卡洛芬、塞來考昔、色甘酸鹽、桂美辛、環(huán)氯茚酸、氯吡酸、雙氯芬酸鈉、二氟尼柳、地他唑、屈噁昔康、苯乙氨茴酸、依托度酸、依托芬那酯、聯(lián)苯乙酸、芬布芬、芬克洛酸、芬度柳、非諾洛芬、芬替酸、非普地醇、flufenac、氟芬那酸、氟尼辛、氟諾洛芬、氟比洛芬、安胃靈(glutametacin)、水楊酸羥乙酯、異丁芬酸、布洛芬、異丁普生、吲哚美辛、吲哚洛芬、三苯唑酸、伊索克酸、伊索昔康、酮洛芬、酮咯酸、氯諾昔康、洛索洛芬、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、美沙拉秦、甲嗪酸、莫苯唑酸、孟魯司特、麥考酚酸、萘丁美酮、萘普生、尼氟酸、尼美舒利、奧沙拉秦、奧沙西羅、奧沙普秦、羥布宗、對乙酰氨基酚、帕沙米特、哌立索唑、苯基-乙酰基-水楊酸酯、保泰松、水楊酸苯酯、吡拉唑酸、吡羅昔康、吡洛芬、普拉洛芬、丙替嗪酸、白藜蘆醇(reserveratol)、醋水楊胺、水楊酰胺、水楊酰胺-O-乙酸、水楊酰硫酸酯(salicylsulphuric acid)、水楊苷、水楊酰胺、雙水楊酯(salsalate)、舒林酸、舒洛芬、琥布宗、他莫昔芬、替諾昔康、茶堿、噻洛芬酸、噻拉米特、噻氯匹定(ticlopridine)、替諾立定、托芬那酸、托美丁、托匹星、聯(lián)苯丁酸、希莫洛芬、扎托洛芬、佐美酸、托莫普羅、扎魯司特和環(huán)孢菌素。其它的NSAID類和特定的NSAID化合物公開在美國專利6,297,260中,在此將其全部內(nèi)容引入作為參考(特別是其權(quán)利要求1的通式及說明書和權(quán)利要求3的具體列表中引用的NSAID),thiazulidene NSAID公開在國際專利申請WO 01/87890中,在此將其全部內(nèi)容引入作為參考。優(yōu)選的是氟芬那酸、氟尼辛和塞來考昔。在部分實施方案中,NSAID亞單元既不是乙酰水楊酸,也不是麥考酚酸。
在式I中,Z還可以表示甾體亞單元,包括但不限于皮質(zhì)類固醇(例如糖皮質(zhì)激素和鹽皮質(zhì)激素)和雄激素。皮質(zhì)類固醇的非限制性實例包括氫化可的松(cortisol)、可的松、氯倍他索、氫化可的松(hydrocortisone)、氟氫可的松、氟氫縮松、氟米松、氟尼縮松、氟輕松、醋酸氟輕松、氟可龍、氟米龍、潑尼松、潑尼松龍、6-α-甲潑尼龍、曲安西龍、阿氯米松、倍氯米松、倍他米松、布地奈德、地塞米松、安西奈德、可的伐唑、地奈德、去羥米松、二氟可龍、二氟潑尼酯、氟氯縮松和二氯松、氟潑尼定(fluperinidene)、氟替卡、哈西奈德、甲潑尼松、甲潑尼龍、帕拉米松、潑那唑啉、潑尼立定、替可的松、曲安西龍,及它們的酸衍生物,例如醋酸鹽、丙酸鹽、二丙酸鹽、戊酸鹽、磷酸鹽、異煙酸鹽、間磺基苯甲酸鹽(metasulfobenzoate)、叔丁乙酸鹽和半琥珀酸鹽。
除非另有說明,以下術(shù)語具有下面的含義。
“鹵素”表示鹵原子,其可以優(yōu)選為氟、氯或溴(最優(yōu)選為氟或氯)。
“烷基”表示具有1-10個碳原子、更優(yōu)選1-6個碳原子的直鏈或支鏈飽和一價烴基。優(yōu)選的直鏈或支鏈烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基。優(yōu)選C1-C4烷基。最優(yōu)選甲基。烷基可以被1-5個取代基取代,所述取代基包括鹵素(優(yōu)選氟或氯)、羥基、烷氧基(優(yōu)選甲氧基或乙氧基)、?;?、酰氨基、氰基、氨基、N-(C1-C4)烷氨基(優(yōu)選N-甲氨基或N-乙氨基)、N,N-二(C1-C4烷基)氨基(優(yōu)選二甲氨基或二乙氨基)、芳基(優(yōu)選苯基)或雜芳基、硫代羰基氨基、酰氧基、氨基、脒基、烷基脒基、硫代脒基、氨?;?、氨基羰基氨基、氨基硫代羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、雜芳基、芳氧基、芳氧基芳基、硝基、羧基、羧基烷基、羧基取代的烷基、羧基-環(huán)烷基、羧基取代的環(huán)烷基、羧基芳基、羧基取代的芳基、羧基雜芳基、羧基取代的雜芳基、羧基雜環(huán)基、羧基取代的雜環(huán)基、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基和氧基羰基氨基(oxycarbonylamino)。所述取代的烷基落入本發(fā)明“烷基”的范圍內(nèi)。本發(fā)明的烷基定義包括具有烷基部分的基團,如烷氧基或烷?;?br>
“烯基”表示具有2-10個碳原子、優(yōu)選2-6個碳原子和至少1個碳碳雙鍵的直鏈或支鏈一價烴基。烯基可以被與烷基中相同的基團取代,任選被取代的烯基落入術(shù)語“烯基”的范圍內(nèi)。優(yōu)選乙烯基、丙烯基、丁烯基和環(huán)己烯基。
“炔基”表示具有2-10個碳原子、優(yōu)選2-6個碳原子和至少一個且優(yōu)選不超過3個碳碳參鍵的直鏈或支鏈一價烴基。炔基可以被與烷基中相同的基團取代,被取代的炔基落入術(shù)語“炔基”的定義范圍內(nèi)。優(yōu)選乙炔基、丙炔基和丁炔基。
“環(huán)烷基”表示具有3-8個碳原子且具有任選與芳基或雜芳基稠合的單環(huán)基團的環(huán)狀基團。環(huán)烷基可以被如下述芳基中定義的那樣被取代,被取代的環(huán)烷基落入術(shù)語“環(huán)烷基”的定義范圍內(nèi)。優(yōu)選環(huán)戊基和環(huán)己基。
“芳基”表示具有6-14個碳原子且具有單環(huán)例如苯基或多個稠合環(huán)例如萘基的不飽和芳香碳環(huán)基團。芳基可以任選進一步與脂族或芳基稠合,或者被一個或多個取代基取代,所述取代基例如鹵素(氟、氯和/或溴)、羥基、C1-C7烷基、C1-C7烷氧基或芳氧基、C1-C7烷基硫基或芳硫基、烷基磺?;?、氰基或伯氨基或非伯氨基。
“雜芳基”表示具有2-10個碳原子和1-4個雜原子例如O、S或N的單環(huán)或雙環(huán)芳香烴環(huán)。雜芳環(huán)可以任選與其它雜芳基、芳基或脂環(huán)基團稠合。這類基團的實例有呋喃、噻吩、咪唑、吲哚、吡啶、噁唑、噻唑、吡咯、吡唑、四唑、嘧啶、吡嗪和三嗪,優(yōu)選呋喃、吡咯、吡啶和吲哚。該術(shù)語包括被上述對芳基的說明的相同的取代基所取代的基團。
“雜環(huán)基”表示具有1-10個碳原子和1-4個選自N、S或O中的雜原子的飽和或不飽和單環(huán)或多環(huán)基團,其中稠合的環(huán)系中所述的其它一個或多個環(huán)可以是芳基或雜芳基。雜環(huán)基基團可以如同對烷基說明的被取代,取代的雜環(huán)基基團也在本發(fā)明所定義的范圍之內(nèi)。
當(dāng)Rc表示共價鍵時,非甾體或甾體亞單元Z通過Rc與鏈L連接至大環(huán)內(nèi)酯亞單元M中的R4。
當(dāng)Rd表示共價鍵時,非甾體或甾體亞單元Z通過Rd與鏈L連接至大環(huán)內(nèi)酯亞單元M。
當(dāng)RN表示共價鍵時,大環(huán)內(nèi)酯亞單元M通過RN與鏈L連接至非甾體或甾體亞單元Z。
當(dāng)R4表示共價鍵時,大環(huán)內(nèi)酯亞單元M通過R4與鏈L連接至非甾體或甾體亞單元Z。
在制備具有特定藥理活性的式I所示化合物時,本發(fā)明中某些新化合物將以制備藥學(xué)活性化合物的中間體形式制備得到。本發(fā)明還涉及這些中間體。
術(shù)語“鹽”可以包括酸加成鹽或游離堿加成鹽。可用于形成可藥用酸加成鹽的酸實例包括但不限于衍生自無毒性無機酸的鹽,例如硝酸、磷酸、硫酸、或氫溴酸、氫碘酸、氫氟酸、亞磷酸,以及衍生自無毒性有機酸的鹽,例如脂族單和二羧酸、苯基取代的鏈烷酸、羥基烷酸、鏈烷二酸、芳香酸、脂肪及芳香磺酸和乙酸、馬來酸、琥珀酸、或檸檬酸。這些鹽的非限制性實例包括包括萘二磺酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、醋酸鹽、三氟醋酸鹽、丙酸鹽、辛酸鹽、異丁酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、延胡索酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、苯甲酸鹽、氯代苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯基磺酸鹽、苯乙酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽等等。同樣還包括氨基酸例如精氨酸等的鹽,以及葡萄糖酸鹽、半乳糖醛酸鹽(例如參見Berge S.M.等人的″Pharmaceutical Salts,″J.of Pharma.Sci.,1977;661)。
所述堿性化合物的酸加成鹽通過將游離堿形式與足量的所需要的酸接觸,按照常規(guī)方法制備得到相應(yīng)的鹽。游離堿形式可以通過將相應(yīng)的鹽與堿接觸而重新得到,并且可以采用常規(guī)的方法分離。游離堿形式與其相應(yīng)的鹽在物理性質(zhì)上有所區(qū)別,例如在極性溶劑中的溶解性,但對于本發(fā)明目的而言,這些鹽與其相應(yīng)的游離堿是等價的。
可藥用堿加成鹽可以使用金屬或胺例如堿金屬和堿土金屬或有機胺形成。用作陽離子的金屬實例有鈉、鉀、鎂、鈣等。適宜的胺實例有N,N’-二芐基乙二胺、氯代普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、二環(huán)己胺、乙二胺(ethylenediamine)、N-甲基葡糖胺和普魯卡因。
所述酸化合物的堿加成鹽通過將游離酸形式與足量的所需要的堿接觸,按照常規(guī)方法制備得到相應(yīng)的鹽。游離酸形式可以通過將相應(yīng)的鹽與酸接觸而重新得到,并且可以采用常規(guī)的方法分離。
用于本發(fā)明藥物組合物上下文中的短語“可藥用的”是指生理學(xué)上可耐受的并且在給藥至哺乳動物(例如人)時不會產(chǎn)生不良反應(yīng)的分子實體(molecular entities)以及這類組合物中的其它成分。優(yōu)選地,本文中使用的術(shù)語“可藥用的”是指經(jīng)聯(lián)邦政府或州政府管理機構(gòu)許可的、或在美國藥典、或其它公認藥典中列出的用于哺乳動物特別是人中的物質(zhì)。
應(yīng)用于本發(fā)明藥物組合物中的術(shù)語“載體”是指與活性化合物一起給藥的稀釋劑、賦型劑、或載體(vehicle)。這些藥用載體(carriers)可以是無菌液體例如水、鹽水溶液、葡萄糖水性溶液、甘油水性溶液,和油類包括石油、動物、植物或合成來源的油例如花生油、大豆油、礦物油、芝麻油等。然而,由于二甲金剛胺具有高溶解性,因此優(yōu)選水性溶液。適宜的藥用載體記載在“Remington’s Pharmaceutical Sciences”,E.W.Martin著,18th Edition。本發(fā)明特別優(yōu)選的載體是適合速釋的載體,即在短時間內(nèi)例如60分鐘或更短時間內(nèi)釋出主要或全部活性成分,使得藥物能夠快速吸收。
本發(fā)明還包括由式I所示化合物或其鹽形成的溶劑化物(優(yōu)選水合物)。
本發(fā)明還涉及可由單獨的式I化合物形成的各種可能的互變異構(gòu)體形式。
本發(fā)明還包括式I化合物的前藥,即當(dāng)給藥至哺乳動物對象時能夠在體內(nèi)釋出式(I)的活性母體藥物的化合物。式I化合物的前藥可通過修飾式I化合物的官能基團制備得到,使得這種修飾可以在體內(nèi)裂解釋放出母體化合物。前藥包括這樣的式I化合物,其中式I化合物中的羥基、氨基、或羧基與與任何可能的基團鍵合得到的化合物,所述基團能夠在體內(nèi)裂解,再得到游離羥基、氨基或羧基基團。前藥的實例包括但不限于式I化合物的酯(例如乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物)。
式I化合物具有一個或多個手性中心,根據(jù)各取代基的性質(zhì),它們還可能具有幾何異構(gòu)體。區(qū)別在于原子空間排列的異構(gòu)體被稱作“立體異構(gòu)體”。彼此非鏡像的立體異構(gòu)體被稱作“非對映異構(gòu)體”,而那些不能重疊的可彼此成為鏡像的立體異構(gòu)體被稱作“對映異構(gòu)體”。當(dāng)化合物具有一個手性中心時,就可能具有一對對映異構(gòu)體。對映異構(gòu)體其特征可以在于其不對稱中心的絕對構(gòu)型,通常被描述為R-和S-次序規(guī)則(sequencing rules)(Cahn和Prelog),或者根據(jù)分子對偏振光平面的偏轉(zhuǎn),命名為右旋或左旋(即分別為(+)或(-)-異構(gòu)體)。手性化合物既可以單獨對映體存在,也可以以對映體混和物形式存在。含有等量對映體的混和物被稱作“外消旋混合物”。本發(fā)明包括式I化合物的所有異構(gòu)體。本說明書和權(quán)利要求書中關(guān)于特定化合物的描述和命名均包括各單獨對映異構(gòu)體及其混和物、外消旋物或其它等。立體化學(xué)的檢測方法和立體異構(gòu)體的分離方法是本領(lǐng)域熟知的。
“可藥用賦型劑”是指用于制備藥物組合物的賦型劑,其通常是安全、無毒性且沒有生理或其他不希望的副作用,包括可用于人和獸用的賦型劑。用于本發(fā)明中的“可藥用賦型劑”包括一種或不止一種這樣的賦形劑。
疾病(state)、障礙或病癥的“治療”包括(1)預(yù)防或延遲可能罹患或誘發(fā)疾病、障礙或病癥但尚未經(jīng)歷或表現(xiàn)出該疾病、障礙或病癥的臨床或亞臨床癥狀的哺乳動物的疾病、障礙或病癥的臨床癥狀的出現(xiàn),(2)抑制疾病、障礙或病癥,即阻止或減輕疾病或其至少一種臨床或亞臨床癥狀的發(fā)展,或(3)緩解疾病(disease),即引起疾病、障礙或病癥或其至少一種臨床或亞臨床癥狀消退。
對于待治療對象的效果是統(tǒng)計學(xué)上顯著的,或者至少能夠被患者或醫(yī)師所知曉。
“治療有效量”是指當(dāng)給藥至哺乳動物以治療疾病、障礙或病癥時足以實現(xiàn)所述治療的化合物的用量?!爸委熡行Я俊笨梢噪S化合物、疾病及其嚴重程度、及待治療哺乳動物的年齡、體重、生理狀況和響應(yīng)性的不同而不同。
急性炎癥的四種典型癥狀是在感染區(qū)域出現(xiàn)發(fā)紅、溫度升高、腫脹、疼痛,并導(dǎo)致受感染器官功能的喪失。
與特定病癥相關(guān)的炎癥癥狀和信號包括●類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎-關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、發(fā)熱和觸痛;全身性晨時僵直;●胰島素依賴型糖尿病-胰島炎,該病癥可導(dǎo)致各種炎癥并發(fā)癥,包括視網(wǎng)膜病、神經(jīng)病、腎病、冠狀動脈疾病、外周血管性疾病、和腦血管疾??;●自身免疫性甲狀腺炎-乏力、便秘、呼吸急促、面目及手足浮腫、外周性浮腫、心動過緩;●多發(fā)性硬化-痙攣、視覺模糊、眩暈、四肢乏力、感覺異常;●葡萄膜視網(wǎng)膜炎(uverortinitis)-夜視減弱、周邊視覺喪失;●紅斑狼瘡-關(guān)節(jié)痛、疹、光過敏、發(fā)燒、肌肉痛、手足浮腫、尿液異常(血尿、管型尿、蛋白尿)、腎小球腎炎、認知機能障礙、脈管血栓、心包炎;●硬皮病-雷諾氏?。皇?、臂、腿和面部腫脹;皮膚變厚;手指及膝疼痛、腫脹和僵直,胃腸功能紊亂,限制性肺?。恍陌?;腎衰竭;●其它具有炎癥特征的關(guān)節(jié)疾病,例如類風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎和多關(guān)節(jié)炎-發(fā)熱、疼痛、腫脹和觸痛;●其它炎性腦病,例如髓膜炎、阿耳茨海默氏病、AIDS癡呆性大腦炎-畏光癥、認知機能障礙、記憶喪失;●其它眼部炎癥,例如視網(wǎng)膜炎-視敏度減弱;●皮膚炎性疾病,例如濕疹、其它皮炎(如異位或接觸)、牛皮癬、紫外輻射燒傷(太陽射線和類似的UV源)-紅斑、疼痛、脫皮、腫脹、觸痛;●炎性腸病,例如克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎-疼痛、腹瀉、便秘、直腸出血、發(fā)燒、關(guān)節(jié)炎;●哮喘-呼吸急促、喘鳴;●其它過敏性疾病,例如過敏性鼻炎-噴嚏、瘙癢、流鼻涕;●與急性外傷有關(guān)的病癥例如中風(fēng)后腦損傷-感覺喪失、運動喪失、認知能力喪失;●心肌缺血造成的心臟組織損傷-疼痛、呼吸急促;●肺部損傷,如成人呼吸窘迫綜合征-呼吸急促、換氣過度、氧合量減少、肺浸潤出現(xiàn)的肺部損傷;●伴隨感染的炎癥,例如膿毒癥、感染性休克、中毒性休克綜合征-發(fā)燒、呼吸衰竭、心動過速、低血壓、白細胞增多;●其它與特定器官或組織有關(guān)的炎性病癥,例如腎炎(如腎小球腎炎)-少尿、尿異常;闌尾炎-發(fā)燒、疼痛、觸痛、白細胞增多;痛風(fēng)-疼痛、觸痛、關(guān)節(jié)腫脹和紅斑、血清升高和/或尿中尿酸;膽囊炎-腹部疼痛和觸痛、發(fā)燒、惡心、白細胞增多;慢性阻塞性肺病-呼吸急促、喘鳴;充血性心力衰竭-呼吸急促、羅音、外周性浮腫;II型糖尿病-終末器官并發(fā)癥,包括心血管、眼、腎和外周血管疾??;肺纖維化-過度換氣、呼吸急促、氧合量減少;血管疾病,例如動脈粥樣硬化和再狹窄-疼痛、知覺喪失、脈搏減慢、功能缺失和導(dǎo)致移植排斥的同種異體免疫-疼痛、觸痛、發(fā)燒。
亞臨床癥狀包括但不限于在表現(xiàn)臨床癥狀之前的炎癥外觀的診斷性標志。一類亞臨床癥狀為免疫癥狀,例如促炎癥淋巴樣細胞侵入或蓄積在器官或組織中,或者局部或外周出現(xiàn)識別病原體或?qū)ζ鞴倩蚪M織具特異性的抗原的活化促炎癥淋巴細胞。淋巴樣細胞的活性可以通過常規(guī)技術(shù)測定。
向宿主特定位置“遞送”治療有效量的活性成分是指在特定部位形成活性成分的治療有效的血藥濃度。這可以通過向宿主局部或全身性給藥活性成分實現(xiàn)。
術(shù)語“有需要的宿主或?qū)ο蟆笔侵覆溉閯游?,?yōu)選人。
術(shù)語“離去基團”是指能夠被親核基團(nucleophile)所置換。這樣的基團的例子包括但不限于鹵素、甲磺酸根(mesylate)、甲苯磺酸根(tosylate)和酯基。
制備方法本發(fā)明另一方面涉及制備式I化合物的方法,所述方法包括a)對于其中X2是-NH-的式I化合物,將亞結(jié)構(gòu)V的甾體或非甾體亞單元 (其中L1表示離去基團例如羥基)與亞結(jié)構(gòu)VIa的大環(huán)內(nèi)酯亞單元中的氨基進行反應(yīng) 亞結(jié)構(gòu)XI的甾體或非甾體亞單元是可以商購得到的產(chǎn)品,也可以與亞結(jié)構(gòu)XII的起始大環(huán)內(nèi)酯亞單元一樣,通過與申請人早期專利申請中描述的類似化合物的制備方法制備得到(HR專利申請?zhí)?0010018;WO專利申請?zhí)?2/055531);WO04/005309;WO04/005310均全文引入在此作為參考。
反應(yīng)通常在酸衍生物存在下進行,所述酸衍生物能夠活化甾體抗炎亞單元中的羧酸基團,例如鹵化物、混合酸酐,特別是碳二亞胺(如(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺(EDC))和苯并三唑。該反應(yīng)在堿例如有機堿(如三乙胺)的存在下、室溫以及惰性氣氛例如氮氣或氬氣下進行。完成反應(yīng)可能需要數(shù)小時至幾天時間。
b)對于其中X1是-C(O)NH-,Q是-CH2-或-NH-以及X2是-NH-或-NHC(O)-的式I化合物,能通過將大環(huán)內(nèi)酯亞單元與具有下面所示游離氨基的衍生甾體或非甾體亞單元反應(yīng)制備得到。
c)對于其中X1是-C(O)NH-,Q是-CH2-或-NH-以及X2是-NH-或-NHC(O)-的式I化合物,能通過將大環(huán)內(nèi)酯亞單元和具有下面所示游離羧酸基團的甾體或非甾體亞單元反應(yīng)制備得到。
甾體亞單元可以通過具有羥基的甾體中的21羥基與大環(huán)內(nèi)酯連接。由21-羥基甾體開始,將環(huán)狀縮酮與適宜的羧酸鹵化物或酸酐優(yōu)選在溶劑例如二氯甲烷中、在叔胺堿或吡啶存在下、在低溫(-50℃-100℃)下反應(yīng)。所形成的中間體與H2N-L-M反應(yīng)形成式I化合物 甾體亞單元還可以與大環(huán)內(nèi)酯通過甾體亞單元上的17位置連接。制備這類化合物的一種方法如下所示
如前面和后面的合成圖解所示,有兩種合成途徑供選擇一種是將C17上的羧酸基團在與連接基-大環(huán)內(nèi)酯部分(linker-macrolide partion)偶聯(lián)之前衍生形成C(O)-Rc;另一種是將同一羧酸基團僅僅是在進行這種偶聯(lián)之后衍生化。
例如,當(dāng)L是-K-NH-(其中K是與大環(huán)內(nèi)酯相連的L分子中的一部分)時,式I化合物能通過將大環(huán)內(nèi)酯環(huán)上的NH基衍生成末端-N-K-NH2基團,然后該衍生得到的大環(huán)內(nèi)酯與式Sa所示的甾體抗炎亞單元反應(yīng)而形成
對于其中X2是-NH-的式I化合物,能通過將大環(huán)內(nèi)酯亞單元和具有如下所示-C=C-鍵的甾體亞單元反應(yīng)制備得到。
位于起始甾體亞單元17位上的羧酸基團可以在與NH2-L-M反應(yīng)之前進行修飾。
位于起始甾體亞單元17位上的羧酸基團還能在與NH2-L-M反應(yīng)之前進行保護,然后在與NH2-L-M反應(yīng)或酯化步驟之后脫保護。
非甾體抗炎亞單元D可以含有-C(O)L1基團(例如游離羧酸基團),或者通過本領(lǐng)域已知的方法衍生化。
圖解I 根據(jù)圖解I,具有羥基的NSAID化合物還可以通過琥珀酸酐在吡啶的存在下作用而衍生化,然后所生成的中間體與三乙胺、4-吡咯并吡啶在二氯甲烷中反應(yīng)生成具有羧酸基團的NSAID(Huang C.M.等人.Chem.& Biol.2000,7,453-461,Hess S.等人.Bioorg.& Med.Chem.2001,9,1279-1291)。所生成的NSAID衍生物可以與連接基大環(huán)內(nèi)酯化合物例如式VIa偶聯(lián)。
圖解II 根據(jù)圖解II,具有氨基的NSAID化合物還可以通過氫化鈉和碘乙酸叔丁酯在N,N-二甲基甲酰胺中作用,生成NSAID的丁氧羰基衍生物,然后將其與三氟乙酸在二氯甲烷中反應(yīng),生成具有游離羧酸基團的NSAID(Hess S.等人.Bioorg.& Med.Chem.2001,9,1279-1291)。所生成的NSAID衍生物可以與連接基大環(huán)內(nèi)酯化合物例如式VIa偶聯(lián)。
圖解III 具有氨基的NSAID化合物還可以按照圖解III衍生化,通過琥珀酸酐在二甲氨基吡啶、N,N′-二異丙基乙基胺的存在下、在二甲基甲酰胺中作用,生成具有游離羧酸基團的NSAID(Pandori M.W.等人.Chem.& Biol.2002,9,567-573)。所生成的NSAID衍生物可以與連接基大環(huán)內(nèi)酯化合物例如式VIa偶聯(lián)。
式I化合物通常能這樣得到鏈L的一端首先與大環(huán)內(nèi)酯亞單元M相連,然后鏈的另一端與甾體或非甾體亞單元D相連;或者鏈L的一端首先與非甾體或甾體亞單元D相連,然后另一端與大環(huán)內(nèi)酯亞單元M相連;以及,還未形成鏈的一端與大環(huán)內(nèi)酯亞單元M相連,還未形成鏈的另一端與非甾體或甾體亞單元D相連,隨后末端化學(xué)連接形成鏈L。
為防止不希望的副反應(yīng),經(jīng)常需要對某些基團例如羥基或氨基進行保護。關(guān)于對這些基團進行保護,然后裂解所得到的保護衍生物的方法有深入討論,例如T.W.Greene和P.G.M Wuts的Protective Groups in Organic Synthesis2nd ed.,John Wiley & Son,Inc 1991和P.J.Kocienski的Protecting Groups,GeorgThieme Verlag 1994,在此將其全部內(nèi)容引入作為參考。適宜的氨基保護基團包括酰基類型的保護基團(例如甲?;⑷阴;鸵阴;?,芳基尿烷(aromatic urethane)類型的保護基團(例如芐氧羰基(Cbz)和取代Cbz、以及9-芴基甲氧羰基(Fmoc)),脂族尿烷類型的保護基團(例如叔丁氧羰基(Boc)、異丙氧羰基和環(huán)己氧基羰基)和烷基類型的保護基團(例如芐基、三苯甲基和氯代三苯甲基)。適宜的氧保護基團可以包括烷基甲硅烷基基團如三甲基甲硅烷基或叔-丁基二甲基甲硅烷基;烷基醚如四氫吡喃基或叔丁基;或酯基如乙酸酯。羥基保護基團可以通過在非質(zhì)子溶劑中與醋酸酐、苯甲酸酐或氯代三烷基甲硅烷進行反應(yīng)而得到保護。非質(zhì)子溶劑的實例有二氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、四氫呋喃等。
例如,保護氨基可以使用叔丁氧羰基(Boc)。實施例中描述了使用三氟乙酸(TFA)進行脫保護。
保護氨基和烷基氨基的相應(yīng)基團有下述基團例如烷?;?乙酰基)、烷氧羰基(甲氧羰基、乙氧羰基或叔丁氧羰基)、芳基甲氧羰基(芐氧羰基)、芳酰基(苯甲?;?和烷基甲硅烷基基團(三甲基甲硅烷基或三甲基甲硅烷基乙氧甲基)。保護基團的除去條件取決于所選擇的基團及其性質(zhì)。例如,?;鶊F如烷酰基、烷氧羰基和芳?;鶊F可以在堿(氫氧化鈉或氫氧化鉀)存在下水解除去,叔丁氧羰基或烷基甲硅烷基(三甲基甲硅烷基)基團可以使用相應(yīng)的酸(例如鹽酸、硫酸、磷酸或三氟乙酸)除去,芳基甲氧羰基(芐氧羰基)能通過在催化劑例如鈀-炭存在下氫解除去。
本發(fā)明另一方面涉及使用式I化合物作為抗炎劑、抗過敏劑和免疫調(diào)節(jié)劑的方法,本發(fā)明化合物可以根據(jù)炎癥位置以不同方式給藥,例如經(jīng)皮給藥、口服給藥、經(jīng)頰給藥、直腸給藥、非胃腸道給藥或者在需要呼吸道給藥時進行吸入給藥。
本發(fā)明另一方面涉及使用式I化合物作為抗炎劑、抗過敏劑和免疫調(diào)節(jié)劑的方法,本發(fā)明化合物可以根據(jù)炎癥位置以不同方式給藥。另外,本發(fā)明還涉及含有有效劑量的本發(fā)明化合物及可藥用賦型劑例如載體或稀釋劑的藥物組合物。
制備本發(fā)明的藥物組合物可以包括將各種成分進行混合、制粒、壓片和溶解的步驟?;瘜W(xué)載體可以是固體或液體形式。固體形式的載體可以不限于是乳糖、蔗糖、滑石、明膠、瓊脂、果膠、硬脂酸鎂、脂肪酸。液體形式的載體可以不限于是糖漿,油例如橄欖油、葵花籽油或大豆油,水,或生理鹽水。同樣地,載體還可以含有持續(xù)釋出活性成分的組分,例如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯??梢灾苽涠喾N形式的藥物組合物。如果使用固體載體的話,則劑型包括但不限于可供口服的片劑、錠劑、固體明膠膠囊劑、散劑或顆粒劑。固體載體的含量可以不同,但主要應(yīng)在25mg-1g的范圍內(nèi)。如果使用液體載體的話,則劑型可以是糖漿劑、乳劑、軟凝膠膠囊劑、無菌注射液體或無水液體混懸劑,它們可以局部或全身應(yīng)用,例如口服,非胃腸道給藥,經(jīng)皮給藥,粘膜給藥例如經(jīng)頰給藥、鼻內(nèi)給藥、直腸內(nèi)給藥和陰道內(nèi)給藥?!胺俏改c道給藥”是指靜脈給藥、肌內(nèi)給藥或皮下給藥。
本發(fā)明化合物的相應(yīng)制劑能用于預(yù)防和治療性處理(預(yù)防、延遲、抑制或緩解)由異?;虿幌M?過度的、未調(diào)節(jié)的或失調(diào)的)炎癥免疫應(yīng)答引起或與之相關(guān)的多種障礙(疾病和其它病理性炎癥病癥),所述炎癥免疫應(yīng)答涉及炎癥細胞因子或者包括但不限于TNF-α和IL-1β的其它炎癥介質(zhì)的生成。這類障礙包括自身免疫性疾病,例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、胰島素依賴型糖尿病、自身免疫性甲狀腺炎、多發(fā)性硬化癥、葡萄膜視網(wǎng)膜炎、紅斑狼瘡、硬皮??;其它具有炎癥特征的關(guān)節(jié)炎病癥,例如類風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎和多關(guān)節(jié)炎;其它腦部炎性疾病,例如腦膜炎、阿耳茨海默氏病、AIDS癡呆性大腦炎,其它眼部炎癥例如視網(wǎng)膜炎;炎性皮膚病,例如濕疹、其它皮炎(例如異位性皮炎、接觸性皮炎)、牛皮癬、紫外線輻射(太陽射線和類似的UV源)引起的灼傷;炎性腸病例如克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎;哮喘;其它變態(tài)反應(yīng)性疾病例如過敏性鼻炎;與急性外傷有關(guān)的病癥例如中風(fēng)后腦損傷、與心肌缺血有關(guān)的心臟組織損傷、肺損傷如成人呼吸窘迫綜合征中出現(xiàn)的肺損傷;感染伴隨的炎癥如膿毒癥、膿毒性休克、中毒性休克綜合征、其它特定器官或組織發(fā)炎例如腎炎(例如腎小球腎炎)、闌尾炎、痛風(fēng)、膽囊炎、慢性阻塞性肺病、充血性心力衰竭、II型糖尿病、肺纖維化、血管疾病如動脈粥樣硬化和再狹窄;和導(dǎo)致移植排斥反應(yīng)的同種異體免疫。這些化合物在需要經(jīng)呼吸道給藥時,也可以吸入給藥。本發(fā)明另一目標涉及化合物的各種藥物形式的制備,以使式I的活性化合物獲得最佳生物利用度。
對于經(jīng)皮給藥或粘膜給藥的外用制劑,可以將本發(fā)明的式I化合物制備成軟膏劑或乳劑、凝膠劑或洗劑形式。軟膏劑、乳劑和凝膠劑可以使用水或油性基質(zhì),加入適當(dāng)?shù)娜榛瘎┗蚰z劑制備。將本發(fā)明的化合物配制成吸入劑對于呼吸道給藥特別有效,其中式I化合物在壓力下以氣溶膠的形式釋出。優(yōu)選在式I化合物均勻分散在例如乳糖、葡萄糖、高級脂肪酸、二辛基磺基琥珀酸鈉鹽、或者最優(yōu)選在羧甲基纖維素中后,將其微粉化,從而使大部分顆粒獲得5μm或更小的粒徑。對于吸入制劑,可以將氣溶膠與用于分配活性物質(zhì)的氣體或液體推進劑進行混合??梢允褂梦肫?、霧化器或噴霧器。這類裝置是已知的,參見例如Newman等人的Thorax,1985,4061-676Berenberg,M.,J.Asthma USA,1985,2287-92。還可以使用Bird噴霧器,參見美國專利6,402,733;6,273,086;和6,228,346。
如本文所述的那樣,優(yōu)選將用于吸入的結(jié)構(gòu)I的化合物制成具有微小顆粒的干粉。
本發(fā)明化合物還可以摻入到用于定位治療器官或組織炎癥例如克羅恩氏病的制劑中,其可以口服或直腸給藥。在口服制劑中,可以加入在炎癥部位提高所述化合物的生物利用度的賦型劑。這可以通過腸道和延持釋出制劑的不同組合來實現(xiàn)。式I化合物如果以灌腸劑形式使用,則還可以用于治療克羅恩氏病和腸道炎性疾病,所述灌腸劑是可以使用適宜的制劑,這在本領(lǐng)域是眾所周知的。
本發(fā)明化合物的治療有效量可以通過本領(lǐng)域已知的方法測定。由于相對于單獨的抗炎甾體藥物或NSAID藥物而言,本發(fā)明化合物能夠更有效地遞送至希望位置,因此其用量通常低于甾體或NSAID抗炎藥物(以摩爾計),且仍然能獲得相同的治療效果。而且,由于給藥本發(fā)明化合物相對于甾體或NSAID抗炎藥物而言,幾乎沒有副作用,因此甾體藥物或NSAID藥物的用量可以增加。因此,下表僅僅作為指導(dǎo)使用。以摩爾計算,本發(fā)明化合物、其可藥用鹽、其溶劑化物或其前藥的閾值治療有效量通常等于或小于非甾體抗炎藥物的治療有效量。本發(fā)明化合物、其可藥用鹽、其溶劑化物或其前藥的寬范圍有效量和優(yōu)選有效量如下表所示。
例如,如果潑尼松的優(yōu)選用量為1-50mg/天,則其相當(dāng)于2.79μmol-139.5μmol的范圍。本發(fā)明的雜化甾體-大環(huán)內(nèi)酯共軛物(hybid steroid-macrolideconjugate)的起始用量范圍也是2.79μmol-139.5μmol共軛物/天。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員依據(jù)本說明書,可以對上述劑量進行細微調(diào)節(jié)。
本發(fā)明化合物的有效性可以通過任何評估炎癥或抗炎效果的方法進行評估。許多已知方法滿足上述目的,包括但不限于聯(lián)合使用注射微氣泡和差示超聲(contrast ultrasound)、測定炎癥細胞因子(例如TNF-α、IL-1、IFN-γ)、測定活性免疫系統(tǒng)細胞(活化T細胞、特異性識別yanzheng或移植組織的細胞毒性T細胞)及觀察(水腫和紅斑減少、瘙癢及燒灼感覺減輕、體溫降低、患病器官功能改善)、以及任何一種下面提供的方法。
本發(fā)明化合物的治療效果可由諸如下述的體內(nèi)和體外實驗驗證。
在下面的體內(nèi)和體外實驗中測定了本發(fā)明化合物有益的抗炎效果可以將口服劑型設(shè)計成在腸道炎癥部位實現(xiàn)化合物的生物利用度。這可以借助各種延遲釋出制劑的不同組合來實現(xiàn)。如果化合物以灌腸劑形式使用,則式I化合物還可用于治療克羅恩氏病和腸道炎癥,所述灌腸劑為可以使用適宜的制劑。
本發(fā)明化合物的相應(yīng)制劑能用于預(yù)防(包括但不限于防止、延遲或抑制)一種或多種在前面“治療”定義上下文中討論和定義的臨床或亞臨床癥狀的復(fù)發(fā)。其還可以用于治療性處理多種疾病和病理性炎癥,包括慢性阻塞性肺病(COPD),哮喘,鼻炎例如過敏性鼻炎、鼻息肉,腸病如克羅恩氏病、結(jié)結(jié)腸炎、腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎,皮膚炎癥如濕疹、牛皮癬、變應(yīng)性皮炎、神經(jīng)性皮炎、瘙癢癥、結(jié)膜炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
本發(fā)明化合物的生物學(xué)效果可以在下面的體內(nèi)和體外實驗中測定
人糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合分析人類糖皮質(zhì)激素受體的α亞型基因通過反向聚合酶鏈式反應(yīng)克隆??俁NA由人類外周血淋巴細胞按照制造商(Qiagen,Milano,Italy)的說明書進行分離,使用AMV逆轉(zhuǎn)錄酶(Roche,Basel,Switzerland)轉(zhuǎn)錄成cDNA,基因通過特異性引物1)5’ATATGGATCCCTGATGGACTCCAAAGAATCATTAACTCC3’和2)5’ATAT-CTCGAGGGCAGTCACTTTTGATGAAACAGAAG3’復(fù)制。所得到的反應(yīng)產(chǎn)物克隆至Bluescript KS質(zhì)粒(Stratagene,La Jolla,CA USA)的XhoI/BamHI位點,使用M13和M13rev引物(Microsynth,Balgach,Switzerland)通過雙脫氧熒光法進行測序,然后將其克隆至pcDNA3.1Hygro(+)質(zhì)粒(Invitrogen)的XhoI/BamHI位點。在12-孔平板上(Falcon)在含有10%FBS(Biowhitaker)的DMEM培養(yǎng)基(Life Technologies,Carlsbad,CA USA)中,接種入1×105COS-1細胞,在37℃下、具有5%CO2的大氣中培養(yǎng)至70%匯合。除去培養(yǎng)基,每孔中加入1μg的DNA、7μl PLUS試劑和2μl的Lipofectamin(Life Technologies)在500μl DMEM中的溶液。細胞在37℃下、具有5%CO2的大氣中培養(yǎng),5小時后加入相同體積的20%FBS/DMEM。24小時后,培養(yǎng)基完全換液。轉(zhuǎn)染48小時后,加入不同濃度的測試化合物和24nM[3H]地塞米松(Pharmacia,Piscataway,NJ USA)的DMEM培養(yǎng)基溶液。細胞在37℃下、具有5%CO2的大氣中培養(yǎng)90分鐘,用PBS緩沖液(Sigma,St.Louis,MO USA)洗滌3次,冷卻至4℃(pH=7.4),然后在含有0.2%SDS(Sigma,St.Louis,MO USA)的Tris緩沖液(pH=8.0)(Sigma,St.Louis,MO USA)中裂解。加入UltimaGold XR(Packard BioScience,Groningen,The Netherlands)閃爍液后,在Tricarb(Packard)β-閃爍計數(shù)器上讀取殘余放射活性。
化合物7和10對糖皮質(zhì)激素受體具有親和力,這是因為它們在測試中從糖皮質(zhì)激素受體中置換出放射活性地塞米松。其它的本發(fā)明化合物當(dāng)在該測試中進行測定時,也顯示出類似結(jié)果。
對由細胞調(diào)亡誘導(dǎo)引起的小鼠T細胞雜交瘤13增殖抑制的測定在96孔平板中,在含有10%FBS的RPMI培養(yǎng)基(Institute of Immunology,Zagreb)中進行三份測試甾體化合物稀釋。向不同濃度的化合物溶液中加入20000細胞/孔,在37℃下、具有5%CO2的大氣中培養(yǎng)過夜,然后加入1μCi[3H]脫氧胸腺嘧啶核苷(Pharmacia,Piscataway,NJ USA),混合物繼續(xù)培養(yǎng)3小時。應(yīng)用GF/C過濾裝置(Packard)真空收集細胞。在各孔中加入30μlMicroscynt O閃爍液(Packard),在β-閃爍計數(shù)器(Packard)上測量摻入的放射活性。通過使用糖皮質(zhì)激素受體強效拮抗劑米非司酮(Sigma,St.Louis,MOUSA)拮抗增殖抑制,證實了由糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的細胞凋亡具有特異性。
化合物7、9和10在1μM至1nM的濃度下顯示出對T細胞雜交瘤13增殖具有抑制作用。其它的本發(fā)明化合物當(dāng)在該測試中進行測定時,也顯示出抗增殖活性。
表1a在T淋巴細胞雜交瘤13細胞測定中的IC50值
IC50值采用GraphPad Prism軟件計算。
全部化合物具有小于2μM的IC50值,被認為具有活性。
測定對白介素4、白介素5和γ伴刀豆球蛋白-A誘導(dǎo)的鼠脾細胞干擾素產(chǎn)物的抑制作用脾細胞由通過注射硫噴妥鈉(Pliva,Zagreb,Croatia)處死的Balb/C小鼠的脾臟分離得到。將脾臟剁碎,在Histopaque 1083(Sigma Diagnostics,St.Louis,MO USA Cat.No 1083-1)上分離單核細胞。將在含有10%胎牛血清(Biowhittaker)的RPMI培養(yǎng)基(Institute of Immunology,Zagreb,Croatia))中稀釋的化合物吸入到96孔平板上,并加入在相同培養(yǎng)基中的細胞(每孔200000個細胞),以及最終濃度為5μg/ml的伴刀豆球蛋白A刺激劑(Sigma2002-2003 cat.No C5275)。陽性對照中沒有稀釋的化合物,代替稀釋的化合物的是含10%胎牛血清和相同濃度的伴刀豆球蛋白A的RPMI培養(yǎng)基,在37℃,相對濕度95%,CO2濃度為5%空氣中培養(yǎng)72小時。細胞在-70℃下冷凍,直至進行細胞因子的檢測。
按照制造商(R&D)推薦方法,通過特異性ELISA方法測定細胞因子白介素4、白介素5和干擾素γ。
采用下式計算抑制百分數(shù)%抑制=(1-[細胞因子在樣品中的濃度]/[細胞因子在陽性對照中的濃度])*100化合物10在1μM至1nM的濃度下抑制細胞因子生成。
小鼠肺部嗜酸粒細胞增多模型將體重為20-25g的雄性Balb/C小鼠隨機分組,通過在第0天和第14天腹膜內(nèi)(i.p.)注射卵白蛋白(OVA,Sigma,St.Louis,MO USA)致敏。在第20天,小鼠通過i.n.(鼻內(nèi))給予OVA(陽性對照或測試組)或PBS(陰性對照)進行攻擊試驗(challenge test)。i.n.給予OVA 48小時后,將動物麻醉,肺用1mlPBS灌肺。在Cytospin 3離心機(Shandon)上分離細胞。將細胞在Diff-Quick(Dade)中染色,通過鑒別計數(shù)至少100個細胞,測量嗜酸粒細胞百分比。
倍氯米松(Pliva d.d.)被用作陽性和陰性對照的標準物質(zhì)。在攻擊試驗之前,化合物每天以不同劑量i.n.或i.p.給藥兩天,直到測試完成。
采用用于測量皮質(zhì)酮(corticosterone)(R&D系統(tǒng))的試劑盒,測量各動物血漿中的皮質(zhì)酮水平?;衔?0(2mg/kg鼻內(nèi)給藥)對皮質(zhì)酮水平?jīng)]有影響,而倍氯米松(1mg/kg鼻內(nèi)給藥)被用作標準品顯著地抑制了皮質(zhì)酮水平。
相對于陽性對照而言,化合物10還具有統(tǒng)計學(xué)意義地顯著地降低了(t-檢驗,p<0.05)肺灌洗液中的嗜酸粒細胞數(shù)目。預(yù)期其它的本發(fā)明化合物也可以觀察到類似結(jié)果。
巴豆油在雄性Sprague-Dawley大鼠中誘導(dǎo)的水腫使用自動吸管將測試和對照物質(zhì)、以及載體(丙酮)局部給藥至各動物右耳的內(nèi)外表面,體積為60μL/耳(30μL/表面),30分鐘后,巴豆油產(chǎn)生作用(challenge)。測試物質(zhì)以2或5mg/耳/60μL丙酮的劑量給藥。地塞米松以1mg/耳/60μL丙酮的劑量給藥。30分鐘后,使用自動吸管向各動物右耳的內(nèi)外表面局部給藥20%巴豆油的丙酮乳液,體積為60μL/耳(30μL/表面)。作用5小時后,動物通過在100%CO2大氣中窒息實施安樂死。為了評價耳水腫,在左右耳廓上切得8mm圓孔,稱重。通過從接受治療的對側(cè)耳重量中減去未接受治療耳的8mm圓孔重量,計算水腫程度。將對接受治療的動物的水腫的抑制作用表示為對照大鼠(0%)的百分比。
局部給藥1次對照物質(zhì)地塞米松(1mg/耳),顯著地將耳水腫減輕了85.77%(p<0.05,非參數(shù)ANOVA,n=8)。以2mg/耳的單劑量局部施用1次化合物10,將耳水腫減輕了51.58%(p>0.05,非參數(shù)ANOVA,p=0.0285,不成對t-檢驗,n=8),以5mg/耳的劑量局部給藥1次,則顯著地將耳水腫減輕了85.53%(p<0.05,非參數(shù)ANOVA,n=8)。
在另一實驗中,以5mg/耳的劑量局部給藥1次化合物17,則顯著地將耳水腫減輕了76.59%(ANOVA,具有Tukey-Kramer多重比較檢驗,p<0.01,n=8)。
皮下海綿植入模型在本模型中,在Sprague-Dawley大鼠中測定局部發(fā)炎之后其新形成的肉芽組織,以及化合物對血漿皮質(zhì)酮濃度和胸腺重量的影響。Sprague-Dawley大鼠購自Iffa Credo,Lyon,F(xiàn)rance,且使用10周大的雄性大鼠。購買為5mm厚度片材形式的PVA海綿材料(Oriolik,Croatia)。使用木塞鉆孔器將海綿片材切成14mm圓片。圓片首先預(yù)先使用流動自來水洗滌,然后使用軟化水洗滌,最后浸漬在Pursept溶液(Merz Hygiene,Germany)中1小時。之后,將其使用軟化水充分漂洗,在80℃下干燥和加熱2小時,儲存在無菌條件下。將全部物質(zhì)溶解于乙醇中,施加到無菌海綿上,在層流室中放干,然后將海綿植入?;衔?0以10mg/0.3mL/海綿的單劑量給藥,而將貝氯米松二丙酸鹽以2或10mg/0.3mL/海綿施用。
在第0天,將動物通過吸入分散在麻醉誘導(dǎo)室(Stoelting Co.,USA)中的異氟烷(Abbott Laboratories Ltd.,USA)和5%氧氣麻醉。清除氣體采用Fluovac240V系統(tǒng)(International Market Supply,England)。使用氣體麻醉罩(StoeltingCo.,USA)維持麻醉,按照一定間隔檢查足反射性反應(yīng)(pedal reflex response)。植入?yún)^(qū)剃毛后,使用Pursept溶液(MERZ Hygiene,Germany)消毒。使用嚴格的無菌方法,在左和右肩胛區(qū)正下方制得兩個1cm長的皮膚切口。在左傷口的左側(cè)和右傷口的右側(cè)使用鈍鑷子制得小的皮下袋。在所有動物中,將所給藥的含有載體或已溶解物質(zhì)的海綿插入在左側(cè),未接受治療的插入在右側(cè)。將皮膚縫閉,用Pursept溶液消毒。在第7天,大鼠通過腹膜內(nèi)給藥硫噴妥鈉(PLIVA;0.5mL/100g體重)麻醉,然后通過穿刺A.頸動脈(carotis com)放血。
將血液收集在Vacutainer試管(Becton Dickinson,USA)中進行血漿皮質(zhì)酮濃度分析。血漿中的皮質(zhì)酮水平采用用于定量測定皮質(zhì)酮的R&D系統(tǒng)試劑盒測量。競爭性ELISA使用堿性磷酸酯共軛物皮質(zhì)酮作為競爭者進行。將樣本培養(yǎng)2小時,成功洗滌后,加入底物。1小時后,在405nm處測量吸收度。OD值與升高的皮質(zhì)酮濃度反向相關(guān)。皮質(zhì)酮濃度使用由皮質(zhì)酮標準濃度稀釋液生成的校準曲線計算。
為了測定胸腺重量,切除胸腺后使用分析天平稱重。將治療動物胸腺尺寸的減小表達為對照大鼠(0%)的百分比。
為了評價新形成的肉芽組織,將海綿小心切除后,各海綿使用無菌手術(shù)縫合線穿孔以使其在離心過程中保持位于Falcon試管上方。試管離心(1000rpm每10分鐘)。將海綿傾入滅菌器中,在60℃下加熱干燥。24小時后,海綿使用分析天平稱重,測量新形成的肉芽組織。將接受治療的海綿重量與同一動物的對側(cè)未接受治療的海綿重量進行對照。
使用具有Tukey-Kramer多重比較檢驗(Tukey-Kramer MultipleComparisons Test)的單向方差分析法(ANOVA),比較胸腺和海綿重量。為了比較皮質(zhì)酮濃度,進行具有Dunn’s Multiple Comparisons Test)的非參數(shù)ANOVA-Kruskal-Wallis檢驗。顯著性水平設(shè)定為p<0.05。
植入海綿7天后,將化合物10以10mg/海綿的單劑量給藥至海綿,和未接受治療和載體海綿相比較,這樣顯著減輕了肉芽組織的形成。相對于載體而言,貝氯米松在以2和10mg/海綿的劑量植入海綿之后,均顯著減輕了胸腺重量;而以10mg/海綿的劑量給藥化合物10對于胸腺重量沒有影響。與載體對照比較,以10mg/海綿的劑量使用貝氯米松顯著降低了血漿皮質(zhì)酮濃度,而化合物10對于血漿皮質(zhì)酮水平?jīng)]有影響。
由細菌脂多糖誘導(dǎo)的肺中性白細胞增多癥將重25g的雄性Balb/cJ小鼠(Iffa Credo,Lyon,F(xiàn)rance)隨機分成3組測試組、陽性和陰性對照組(每組10只動物)。向Balb/cJ小鼠鼻內(nèi)(i.n.)施用載體、貝氯米松二丙酸鹽或測試物質(zhì)。30分鐘后,向所有組鼻內(nèi)給與60μl以167μg/ml的濃度溶解于PBS中的細菌脂多糖(LPS),除陰性對照組之外,后者接受相同體積PBS。動物在24小時后處死,收集支氣管肺泡灌洗液(BALF),用于測定中性粒細胞和IL-6和TNF-α濃度。細胞因子使用夾心ELISA(R&D系統(tǒng))測定。使用GraphPad prism軟件、單向ANOVA TurkeyKramer Multiple Comparisons Test進行統(tǒng)計學(xué)分析。貝氯米松二丙酸鹽(2mg/kg)非顯著地降低了所有測試參數(shù)。和陽性對照組相比較,磷酸鹽形式的化合物10(4mg/kg)在統(tǒng)計學(xué)上顯著減少了BALF中的中性粒細胞,同時顯著降低了TNF-α和IL-6濃度。
合成方法和實施例前體在制備方法的下述實施例中,描述了由大環(huán)內(nèi)酯前體M1-M8和甾體前體S1-S24和非甾體前體D10、D11和D12合成式I化合物,這些實施例不以任何方式限制本發(fā)明的唯一性。
大環(huán)內(nèi)酯亞單元大環(huán)內(nèi)酯亞單元M1-M8為由下述通式結(jié)構(gòu)所示的化合物
表1
R1=R2=R3=H方法Aa)將化合物M1(480mg;1.1mmol)溶解于10mL丙烯腈中,反應(yīng)混合物在95℃下加熱24小時。然后,減壓蒸發(fā)除去溶劑。得到500mg化合物M2,其直接用于進一步合成不再提前純化。
b) 將化合物M2(500mg)溶解于20mL無水乙醇中,用催化劑PtO2(60mg)在40atm壓力下水合兩天。混合物在硅膠柱上純化,洗脫劑CHCl3∶MeOH∶NH4OH=6∶1∶0.1。得到193mg化合物M3。
表1中給出了化合物M1、M2和M3的性質(zhì)。
方法Ba)將阿奇霉素(11g)溶解于40mL CHCl3和80mL 6M HCl中,反應(yīng)混合物在60℃下加熱20小時。分離有機層和水層,然后將水相pH調(diào)節(jié)至9.5,水層再用二氯甲烷萃取。有機層用無水Na2SO4干燥并蒸發(fā)。分離得到6g化合物M4。MS(MH+)=434.7b)將化合物M4(5.95g,13.7mmol)、碳酸亞乙酯(7.3g,82.5mmol)和碳酸鉀(2.28g,16.5mmol)混合于100mL乙酸乙酯中,在75℃下回流加熱72h。分離有機層和水層,有機層用無水Na28O4干燥并蒸發(fā)?;旌衔镌诠枘z柱上純化,溶劑體系CHCl3∶MeOH∶NH4OH=6∶1∶0.1。分離得到3.5mg化合物M5。MS(m/z)460.4[MH]+。
c)在1.3mL(12.85mmol)1,4-二氨基丁烷中溶解118mg(0.26mmole)化合物M5。然后向溶液中加入30mg(0.26mmole)吡啶鹽酸鹽。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌20小時。產(chǎn)物通過二氯甲烷萃取,用水洗滌,有機層接下來用Na2SO4干燥,減壓蒸發(fā)除去溶劑?;旌衔镌诠枘z柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=30∶50∶2,得到50mg胺M6。MS(MH+)=548.4d)將化合物M1(5.05g,12.04mmol)與碳酸亞乙酯(6.5g,7.38mmol)和碳酸鉀(1.7g,1.23mmol)混合。向反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯(90ml)。溶液攪拌下加熱至75℃,持續(xù)24小時?;旌衔镉盟?2×50ml)洗滌。有機層然后用水(50ml)稀釋,使用2M HCl調(diào)節(jié)至pH 7并分離。有機層再次用水(50ml)稀釋,使用2M HCl調(diào)節(jié)至pH7并分離。有機層合并后,用無水硫酸鈉干燥,過濾并真空濃縮。得到1.7g化合物M7。MS(ES)m/z[MH]+446.31 e)在2.25ml(22.39mmol)的1,4-二氨基丁烷中溶解200mg(0.45mmole)化合物M7。然后向該溶液中加入52mg(0.45mmol)吡啶鹽酸鹽。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3天。產(chǎn)物通過二氯甲烷萃取,用水洗滌,有機層接下來用Na2SO4干燥并減壓蒸發(fā)除去溶劑?;旌衔镌诠枘z柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=30∶50∶2,得到60mg胺M8。MS(MH+)=534.4
化合物M9.將PS-碳二亞胺樹脂(1.15mg;1.38mmol)加入至干燥的反應(yīng)容器中。向干燥樹脂中加入12-(Fmoc-氨基)十二烷酸(Fluka,Lot 440842/150903094)(2)(200mg;0.46mmol)的CH2Cl2(7.5ml)溶液,混合物在室溫下攪拌。45分鐘后,加入化合物M3(109mg;0.23mmol)的CH2Cl2(3.5ml)溶液,反應(yīng)在50℃下攪拌20小時得到酰胺產(chǎn)物?;旌衔镞^濾后,真空濃縮除去溶劑。粗產(chǎn)物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH 6∶1∶0.1,得到化合物M9(160mg)。
LC/MS(面積%)93.4%。
HPLC-MSMS(ES)m/z[MH]+896.66(計算值896.59)化合物M10.將化合物M9(160mg,0.18mmol)溶解于哌啶(1ml)和CH2Cl2(5ml)中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時。蒸發(fā)除去溶劑,殘余痕量的哌啶通過加入并真空除去CH2Cl2(數(shù)份)而除去。粗產(chǎn)物通過硅膠柱在溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH 6∶1∶0.1中純化,得到化合物M10(132mg)。
LC/MS(面積%)95.7%。
HPLC-MSMS(ES)m/z[MH]+674.62(計算值674.52)IR(KBr)cm-13307,3093,2927,2854,1722,1715,1667,1660,1651,1645,1557,1539,1505,1463,1456,1373,1353,1265,1165,1091,1053,958,811,736。
甾體亞單元甾體亞單元S1-S24是下述通式所示的化合物
表2
DDO=2,2-二甲基-1,3-二唑酮
圖解1制備S7(圖解1)在氬氣下,向化合物S4(500mg,1.38mmol)的無水CH2Cl2(10ml)溶液中加入三乙胺(1.5mL,10.76mmol)、1-羥基苯并三唑(373mg,2.76mmol)、NH2CH2CH2NHBoc(218μl,1.38mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽(1.06g,5.52mmol)。反應(yīng)混合物在室溫和氬氣流下攪拌24小時,減壓濃縮。在硅膠柱上純化(洗脫劑CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=6∶1∶0.1)得到646mg化合物S7。
MS(ES)m/z[MH]+505.46制備S13(圖解1)將化合物S7(630mg,1.25mmol)在TFA(3ml)和CH2Cl2(3ml)中的溶液在室溫下攪拌1.5小時。真空除去TFA和CH2Cl2,殘余的痕量TFA通過加入并真空除去CH2Cl2(數(shù)份)而除去,得到1.32g化合物S13。
MS(ES)m/z[MH]+405.30
圖解2制備S9(圖解2)將甾體S1(1.5g,3.96mmol)和三乙胺(1.1ml,7.93mmol)的CH2Cl2(40ml)溶液在0℃下使用丙烯酰氯(644μl,7.93mmol)處理。30min后,反應(yīng)混合物先后使用飽和NaHCO3和H2O洗滌,無水Na2SO4干燥并減壓蒸發(fā),得到固體中間體。將其在丙酮(30mL)中和二乙胺(2.07mL,19.8mmol)攪拌2小時。溶液濃縮后,用水稀釋,用乙酸乙酯洗滌。水相使用2 M HCl酸化至pH 2,過濾得到固體。得到1.28g化合物S9。MS(ES)m/z[MH]+433.28;IR(KBr)cm-13477,2940,2879,2601,1731,1655,1596,1452,1401,1376,1276,1401,1376,1276,1221,1195,1146,1118,1064,1038,1011,975,951,931,904,874,832,812,767,703,657,635。
制備S10(圖解2)在氬氣下,向化合物S9(1.1g,2.54mmol)的無水THF(8ml)溶液中加入LiOHxH2O(106mg,2.54mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30min。然后加入Me2SO4(235μl,2.54mmol),所得到的混合物在65℃下攪拌3小時。反應(yīng)混合物使用乙酸乙酯(30ml)稀釋,先后使用飽和NaHCO3和水洗滌。有機層用Na2SO4干燥,減壓蒸發(fā)除去溶劑。得到925mg化合物S10。MS(ES)m/z[MH]+447.32;IR(KBr)cm-13333,3111,2944,2878,1753,1728,1659,1604,1450,1434,1409,1285,1262,1239,1192,1148,1117,1101,1065,1043,1013,977,928,893,879,809,707,686,662。
制備S14(圖解2)在化合物S10(800mg,1.8mmol)的MeOH(20ml)和CH3CN(10ml)溶液中加入NH2CH2CH2NHBoc(570μl,3.6mmol)。反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。減壓蒸發(fā)除去溶劑后,混合物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶9∶1.5。得到925mg化合物S14。MS(ES)m/z[MH]+607.38;IR(KBr)cm-13404,2975,2941,2878,1745,1665,1619,1509,1459,1392,1366,1268,1243,1175,1116,1064,1047,1032,1015,977,929,889,814,795,735,706,687,656。
制備S22(圖解2)將化合物S14(697mg,1.15mmol)的TFA(2ml)和CH2Cl2(2ml)溶液在室溫下攪拌2小時。真空除去TFA和CH2Cl2,殘余的痕量TFA通過加入并真空除去CH2Cl2(數(shù)份)而除去。粗產(chǎn)物稀釋于CH2Cl2(20ml)中,用水萃取。水層用NaOH中和,乙酸乙酯萃取(2×20ml)。有機層合并后,用Na2SO4干燥,過濾并真空濃縮。得到523mg化合物S22。MS(ES)m/z[MH]+507.44;IR(KBr)cm-13416,2940,2878,1741,1664,1619,1452,1392,1375,1268,1240,1201,1178,1117,1064,1047,1032,1014,977,928,889,799,721,686。
制備S15將甾體S5(500mg,1.32mmol)和三乙胺(0.37mL,2.64mmol)的CH2Cl2(30ml)溶液在0℃使用丙烯酰氯(0.22mL,2.64mmol)處理。30min后,反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋,先后使用NaHCO3水溶液和H2O洗滌,干燥并蒸發(fā)得到固體中間體。將其在丙酮(25mL)中和二乙胺(0.69mL,6.61mmmol)攪拌2小時。溶液濃縮后,用水稀釋,EtOAc洗滌。水相使用2N HCl酸化至pH2,過濾得到固體。得到259mg化合物S15。MS(m/z)433.36[MH]+;IR(cm-1)/KBr3438,3246,2937,2878,2656,1731,1717,1663,1628,1609,1458,1453,1409,1365,1318,1300,1278,1260,1193,1180,1118,1080,1061,1038,988,971,928,900,835,807,780,719,706。
制備S11
將甾體S2(0.5g,1.26mmol)和三乙胺(0.35mL,2.52mmol)的CH2Cl2(30ml)溶液在0℃下使用丙烯酰氯(0.21mL,2.52mmol)處理。30min后,反應(yīng)混合物使用CH2Cl2稀釋,先后使用NaHCO3水溶液和水洗滌,干燥并蒸發(fā)得到固體中間體。將其在丙酮(25ml)中和二乙胺(0.66mL,6.31mmol)攪拌2小時。溶液濃縮后,用水稀釋,EtOAc洗滌。水相使用2 N HCl酸化至pH 2,過濾得到固體。得到212mg化合物S11。MS(m/z)451.00[MH]+;IR(cm-1)/KBr3423,2941,2880,2624,1726,1665,1619,1609,1458,1407,1377,1301,1261,1234,1199,1150,1120,1071,1041, 1028,993,978,937,899,851,808,777,710,659。
制備S12將1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)(1當(dāng)量,0.11mmol)加入至10%酸S11(0.11mmol,50mg)的碳酸二甲酯溶液中,所得到的混合物在微波反應(yīng)器中加熱(100℃)10分鐘。反應(yīng)混合物冷卻至室溫,用CH2Cl2和水稀釋。有機層用Na2SO4干燥,蒸發(fā)后在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH=12∶1。得到39mg化合物S12。MS(m/z)464.96[MH]+;IR(cm-1)/KBr3339,2978,2943,2881,1736,1663,1619,1606,1452,1452,1432,1406,1375,1285,1255,1243,1214,1194,1116,1103,1072,1042,1006,990,978,933,896,851,812,735,712,685。
制備S17將甾體S16(0.5g,1.44mmol)和三乙胺(0.40mL,2.89mmol)的CH2Cl2(30ml)溶液在0℃下使用丙烯酰氯(0.24mL,2.89mmol)處理。30min后,反應(yīng)混合物使用CH2Cl2稀釋,先后使用NaHCO3水溶液和水洗滌,干燥并蒸發(fā)得到固體中間體。將其在丙酮(25mL)中和二乙胺(0.75mL,7.22mmol)攪拌2小時。溶液濃縮后,用水稀釋,EtOAc洗滌。水相使用2N HCl酸化至pH2,過濾得到固體。得到260mg化合物S17。MS(m/z)401.25[MH]+;IR(cm-1)/KBr3567,3448,2938,2914,2851,2643,2602,1732,1713,1653,1606,1596,1452,1406,1394,1346,1297,1258,1212,1184,1126,1084,1040,988,972,941,930,908,888,828,812,769,719,656。
制備S18將1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)(1當(dāng)量,0.23mmo1)加入至10%酸S15(0.23mmol,100mg)的碳酸二甲酯溶液中,所得到的混合物加熱回流(90℃)。完成后,反應(yīng)混合物冷卻至室溫,用EtOAc和水稀釋。有機層用Na2SO4干燥,蒸發(fā)后在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶8∶1。得到40mg化合物S18。MS(m/z)447.39[MH]+;IR(cm-1)/KBr3423,3368,2973,2944,2875,1737,1726,1657,1619,1602,1459,1450,1406,1389,1367,1307,1284,1242,1196,1116,1083,1065,1040,987,976,941,928,895,828,812,712,671。
制備S19將1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)(1當(dāng)量,0.25mmol)加入至10%酸S17(0.25mmol,100mg)的碳酸二甲酯溶液中,所得到的混合物加熱回流(90℃)。完成后,反應(yīng)混合物冷卻至室溫,用EtOAc和水稀釋。有機層用Na2SO4干燥,蒸發(fā)后在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶8∶1。得到42mg化合物S19。
MS(m/z)415.32[MH]+制備S23將甾體S6(700mg,1.942mmol)和三乙胺(0.54mL,3.884mmol)的CH2Cl2(50ml)溶液在0℃下使用丙烯酰氯(0.315mL,3.884mmol)處理。30min后,反應(yīng)混合物使用CH2Cl2稀釋,先后使用NaHCO3水溶液和H2O洗滌,干燥并蒸發(fā)得到固體中間體。將其在丙酮(40mL)和二乙胺(1.015mL,9.71mmmol)中攪拌2小時。溶液濃縮后,用水稀釋,EtOAc洗滌。水相使用2NHCl酸化至pH2,過濾得到固體。得到111mg化合物S23。MS(m/z)415.48[MH]+制備S24在化合物S23(100mg,0.24mmol)的無水THF(1.5mL)溶液中加入10.1mg(0.24mmol)LiOHxH2O。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30min。在反應(yīng)混合物中加入22.3μL的Me2SO4(0.24mmol),混合物在65℃下攪拌2小時。完成后,反應(yīng)混合物冷卻至室溫,用20mL EtOAc稀釋,然后依次用20mL飽和NaHCO3和20mL水處理。有機層用Na2SO4干燥并蒸發(fā)。得到121mg化合物S24。MS(m/z)429.48[MH]+ 制備化合物S25向1.0g(2.30mmol)醋酸帕拉米松的20mL甲苯溶液中加入960μL(6.90mmol,3eq)TEA,再加入219μL(2.30mmol,1eq)3-氯丙酰氯。溶液在室溫下攪拌24小時,蒸發(fā)后,粗產(chǎn)物在硅膠柱上純化,使用溶劑體系乙酸乙酯∶己烷5∶3。分離得到417mg純產(chǎn)物。
MS(m/z)489.38[MH]+MS(teor.)=488.55純度(HPLC-MS)96.42%IR(KBr)3386,3112,3037,2960,2924,2876,1751,1724,1679,1619,1602,1501,1452,1410,1388,1373,1342,1318,1267,1234,1198,1178,1139,1120,1092,1050,1028,1011,986,916,894,871,845,816,789,742,721,695,657。
制備化合物S26向100mg(0.205mmol)化合物S25的5mL THF溶液中加入17mg(0.410mmol)LiOHxH2O和5mL水,反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15min。然后使用1M NaOH調(diào)節(jié)pH至8,產(chǎn)物用DCM萃取。有機層用無水Na2SO4干燥并蒸發(fā)得到28mg純產(chǎn)物。
MS(m/z)447.10[MH]+MS(teor.)=446.51純度(HPLC-MS)98.37%
化合物S27將化合物S12在10mL無水THF中的溶液使用30.7mg(1.0mmol)K2CO3和0,0197mL(1.1mmol)乙基碘處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌24h,但是未得到產(chǎn)物。將混合物加熱至55℃,在2小時內(nèi)得到產(chǎn)物?;旌衔飪A入20mL DCM和20mL水的混合物中并萃取。有機層用水洗滌,無水Na2SO4干燥并蒸發(fā)。分離得到45mg粗產(chǎn)物。
MS(m/z)479.09[MH]+MS(teor.)=478.53純度(HPLC-MS)76.77%非甾體亞單元用于合成的前體是非甾體類抗炎藥物(NSAID),例如醋氯芬酸、阿西美辛、對乙酰氨基酚、醋氨沙洛、乙酰水楊酸、乙酰水楊酰-2-氨基-4-甲基吡啶酸、5-氨基乙酰水楊酸、阿氯芬酸、氨洛芬、氨芬酸、阿尼利定、芐達酸、苯噁洛芬、柏莫洛芬、α-沒藥醇、溴芬酸、5-溴水楊酸乙酸酯、溴水楊醇、布氯酸、布替布芬、卡洛芬、色甘酸鹽、桂美辛、環(huán)氯茚酸、氯吡酸、雙氯芬酸鈉、二氟尼柳、地他唑、苯乙氨茴酸、依托度酸、依托芬那酯、聯(lián)苯乙酸、芬布芬、芬克洛酸、芬度柳、非諾洛芬、芬替酸、非普地醇、氟芬那酸、氟尼辛、氟諾洛芬、氟比洛芬、安胃靈(glutametacin)、水楊酸羥乙酯、異丁芬酸、布洛芬、異丁普生、吲哚美辛、吲哚洛芬、三苯唑酸、伊索克酸、伊索昔康、酮洛芬、酮咯酸、氯諾昔康、洛索洛芬、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、美沙拉秦、甲嗪酸、莫苯唑酸、孟魯司特、萘普生、尼氟酸、奧沙拉秦、奧沙西羅、奧沙普秦、羥布宗、帕沙米特、哌異唑、苯基-乙?;?水楊酸酯、保泰松、水楊酸苯酯、吡拉唑酸、吡羅昔康、吡洛芬、普拉洛芬、丙替嗪酸、醋水楊胺、水楊酰胺-O-乙酸、水楊酰硫酸酯、水楊苷、水楊酰胺、雙水楊酯、舒林酸、舒洛芬、琥布宗、他莫昔芬、替諾昔康、噻洛芬酸、噻拉米特、替諾立定、托芬那酸、 托匹星、托美丁、聯(lián)苯丁酸、希莫洛芬、扎托洛芬、佐美酸、托莫普羅、扎魯司特,部分實施例的前體是氟尼辛(D10)、氟芬那酸(D11)和塞來考昔(D12) 制備D13(圖解3)將塞來考昔(D12)(4g,10.5mmol)、DMAP(640mg,5.24mmol)、重碳酸二叔丁酯(di-t-butyl-dicarbonate)(7.52mL,31.5mmol)和三乙胺(1.75mL,12.57mmol)在無水THF(20mL)中的混合物在室溫下攪拌1小時。然后加入溴代乙酸甲酯(2.63mL,26.24mmol)和K2CO3(2.9g,21mmol),所得到的混合物在室溫下攪拌22小時。反應(yīng)混合物傾入飽和NaHCO3,用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。有機層合并后,用飽和NaCl洗滌(50mL),MgSO4干燥,過濾并真空濃縮。所得到的玻璃狀物通過色譜法純化(硅膠,90∶9∶1.5CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH),得到4.53g產(chǎn)物D13,為白色粉末。MS(ES)m/z[MH]+554.33;IR(KBr)cm-13449,3136,3108,2983,1919,1759,1738,1618,1598,1501,1473,1450,1411,1372,1314,1273,1239,1165,1146,1095,1016,995,976,939,846,808,763,744,718,653。
圖解3制備D14(圖解3)將化合物D13(4.53g,8.18mmol)的TFA(5mL)和CH2Cl2(5mL)溶液在室溫下攪拌2小時。真空除去TFA和CH2Cl2,殘余的痕量TFA通過加入并真空除去CH2Cl2(數(shù)份)而除去,得到4.43g油狀產(chǎn)物D14。MS(ES)m/z[MH]+454.27;IR(KBr)cm-13281,2954,2925,1747,1595,1555,1499,1476,1438,1411,1376,1354,1324,1279,1238,1216,1162,1133,1100,1016,978,949,874,849,803,762,744,722,700,633。
制備D15(圖解3)將化合物D14(4.43g,9.77mmol)的THF(15mL)溶液使用LiOH(820mg,19.54mmol)的水(15mL)溶液處理,并攪拌30min。真空除去THF,所得到的混合物使用0.1M HCl調(diào)節(jié)至pH2。所得到的固體通過過濾分離,得到3.84g化合物D15。MS(ES)m/z[MH]+440.25;IR(KBr)cm-13396,1606,1574,1501,1472,1415,1373,1326,1274,1238,1169,1156,1129,1098,1022,974,930,847,813,758,628。
制備D16(圖解3)在氬氣下,向化合物D15(500mg,1.14mmol)的無水CH2Cl2(10mL)溶液中加入三乙胺(1.4mL,10mmol)、1-羥基苯并三唑(308mg,2.28mmol)、NH2CH2CH2NHBoc(180μl,1.14mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽(874mg,4.56mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下在氬氣流中攪拌24小時,減壓濃縮。在硅膠柱上純化(洗脫劑CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=6∶1∶0.1)得到390mg化合物D16。MS(ES)m/z[MH]+582.33;IR(KBr)cm-13378,2979,2933,2878,1686,1598,1528,1499,1473,1450,1409,1369,1341,1273,1238,1163,1135,1097,1006,976,843,827,808,761,744,719,694,627。
制備D17(圖解3)將化合物D16(300mg,0.52mmol)的TFA(3mL)和CH2Cl2(5mL)溶液在室溫下攪拌2小時。真空除去TFA和CH2Cl2,殘余的痕量TFA通過加入并真空除去CH2Cl2(數(shù)份)而除去,得到250mg產(chǎn)物D17。MS(ES)m/z[MH]+482.19。
圖解4制備D18(圖解4)在氬氣下,向氟芬那酸D11(245mg,0.87mmol)的無水CH2Cl2(20ml)溶液中加入三乙胺(1.2ml,8.73mmol)、1-羥基苯并三唑(240mg,1.78mmol)、NH2(CH2)6NHFmoc(300mg,0.9mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽(700mg,3.65mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下在氬氣流中攪拌24小時,減壓濃縮。在硅膠柱上純化(洗脫劑CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=6∶1∶0.1)得到430mg化合物D18。
制備D19(圖解4)
將化合物D18(400mg,0.66mmol)的乙酸乙酯(5mL)和哌啶(2mL)溶液在室溫下攪拌1小時。真空除去乙酸乙酯和哌啶。得到370mg化合物D19。
MS(ES)m/z[MH]+380.22 圖解5制備D20(圖解5)在氬氣下,向氟尼辛D10(340mg,1.15mmol)的無水CH2Cl2(10mL)溶液中加入三乙胺(1.6mL,11.5mmol)、1-羥基苯并三唑(312mg,2.3mmol)、NH2(CH2)6NHFmoc(390mg,1.15mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽(880mg,4.6mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下和氬氣流中攪拌24小時,減壓濃縮。在硅膠柱上純化(洗脫劑CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=6∶1∶0.1)得到548mg化合物D20。
MS(ES)m/z[MH]+617.66制備D21(圖解5)將化合物D20(548mg,0.89mmol)的乙酸乙酯(5mL)和哌啶(2mL)溶液在室溫下攪拌1小時。真空除去乙酸乙酯和哌啶。得到732mg產(chǎn)物D21。
MS(ES)m/z[MH]+395.45實施例化合物1
在化合物S9(250mg,0.58mmol)的甲醇(20mL)溶液中加入915mg(1.16mmol)大環(huán)內(nèi)酯M3。反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,混合物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=30∶50∶2。得到540mg化合物1。MS(m/z)909,42[MH]+。
化合物2 將化合物S13(1.3g,3.2mmol)和化合物M7(130mg,0.3mmol)溶解于吡啶(5mL)中。然后向溶液中加入吡啶鹽酸鹽(35mg,0.3mmol)和1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-十一碳-7-烯(1ml)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌7天。產(chǎn)物通過CH2Cl2萃取,用水洗滌,有機層接下來用Na2SO4干燥,減壓蒸發(fā)除去溶劑?;旌衔镌诠枘z柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=6∶1∶0.1,得到80mg產(chǎn)物2。MS(ES)m/z[MH]+850.70;IR(KBr)cm-13409,2939,2877,1664,1535,1495,1381,1296,1248,1163,1091,1070,975,928,889,829,757,702。
化合物3 將化合物D17(220mg,0.5mmol)和化合物M7(222mg,0.5mmol)溶解于吡啶(5mL)中。然后向溶液中加入吡啶鹽酸鹽(58mg,0.5mmol)和1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-十一碳-7-烯(1mL)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6天。產(chǎn)物通過CH2Cl2萃取,用水洗滌,有機層接下來用Na2SO4干燥,減壓蒸發(fā)除去溶劑?;旌衔镌诠枘z柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶9∶1.5,得到24mg產(chǎn)物3。MS(ES)m/z[MH]+927.68;IR(KBr)cm-13416,2973,2934,2880,1660,1599,1546,1498,1471,1376,1339,1272,1238,1163,1134,1097,974,843,808,761,740,703,615。
化合物4 將化合物D21(732mg,1.86mmol)和化合物M7(220mg,0.5mmol)溶解于吡啶(7mL)中。然后向溶液中加入吡啶鹽酸鹽(60mg,0.5mmol)和1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-十一碳-7-烯(1mL)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6天。然后產(chǎn)物通過CH2Cl2萃取,用水洗滌,有機層接下來用Na2SO4干燥,減壓蒸發(fā)除去溶劑?;旌衔镌诠枘z柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶9∶1.5,得到70mg產(chǎn)物4。MS(ES)m/z[MH]+840.43;IR(KBr)cm-13339,2971,2935,2878,1645,1593,1524,1462,1380,1320,1254,1186,1168,1122,1088,1023,975,927,795,772,720,665,614。
化合物5 將化合物S22(220mg,0.5mmol)和化合物M7(223mg,0.5mmol)溶解于吡啶(5mL)中。然后向溶液中加入吡啶鹽酸鹽(58mg,0.5mmol)和1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-十一碳-7-烯(1mL)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6天。產(chǎn)物通過CH2Cl2萃取,用水洗滌,有機層接下來用Na2SO4干燥,減壓蒸發(fā)除去溶劑?;旌衔镌诠枘z柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶9∶1.5,得到80mg產(chǎn)物5。MS(ES)m/z[MH]+953.80化合物6 將化合物D19(380mg,0.5mmol)和化合物M7(222mg,0.5mmol)溶解于吡啶(5mL)中。然后向溶液中加入吡啶鹽酸鹽(58mg,0.5mmol)和1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-十一碳-7-烯(1mL)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6天。產(chǎn)物通過CH2Cl2萃取,用水洗滌,有機層接下來用Na2SO4干燥,減壓蒸發(fā)除去溶劑?;旌衔镌诠枘z柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶9∶1.5,得到18mg產(chǎn)物6。MS(ES)m/z[MH]+825.47;IR(KBr)cm-13369,2970,2935,2878,1632,1595,1524,1452,1426,1377,1336,1283,1248,1165,1124,1097,1070,975,928,793,750,699,663。
化合物7 在化合物S10(50mg,0.11mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入107mg(0.22mmol)大環(huán)內(nèi)酯M3。反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,混合物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=6∶1∶0.1。得到23mg化合物7。MS(m/z)923.47[MH]+;IR(cm-1)/KBr3449,2938,2878,1738,1665,1621,1562,1544,1525,1521,1460,1377,1353,1266,1242,1178,1099,1050,1015,977,957,891,810,705,673。
化合物8
在化合物S19(41mg,0.099mmol)的甲醇(6mL)溶液中加入47mg(0.009mmol)大環(huán)內(nèi)酯M3。反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,混合物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶8∶1。得到19mg化合物8。MS(m/z)891.58[MH]+;IR(cm-1)/KBr3449,2974,2935,2876,1871,1846,1735,1658,1618,1545,1509,1459,1375,1352,1283,1177,1127,1087,1036,995,958,939,888,819,708。
化合物9 將含有化合物S18(77mg,0.17mmol)的甲醇(8mL)溶液和165mg(0.35mmol)大環(huán)內(nèi)酯M3的反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,混合物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶8∶1,得到36mg化合物9。MS(m/z)923.61[MH]+;IR(cm-1)/KBr3449,2974,2951,2935,2878,1736,1665,1626,1605,1561,1509,1459,1375,1319,1289,1254,1175,1080,1038,958,928,900,822,757,719,666。
化合物10 將含有化合物S12(37mg,0.08mmol)的甲醇∶乙腈(2∶5)溶液和76mg(0.16mmol)大環(huán)內(nèi)酯M3的混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,混合物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶8∶1,得到55mg化合物10。MS(m/z)941.97[MH]+;IR(cm-1)/KBr3449,2964,2936,2878,1736,1670,1630,1561,1509,1459,1376,1288,1260,1236,1178,1106,1074,1035,994,956,940,899,849,817,755,709,669。
化合物11 將化合物1(130mg,0.14mmol)和二甲基硫代氨甲酰氯(dimethyltiocarbamoylchloride)(35.32mg,0.286mmol)在2-丁酮(10mL)中的溶液在室溫下依次使用三乙胺(0.044ml,0.31mmol)、碘化鈉(21mg,0.143mmol)、和水(0.013mL)處理,并攪拌3天。反應(yīng)混合物然后依次使用二甲基乙酰胺(0.52mL)和水(3.23mL)處理;冷卻至0℃,攪拌2小時后,用EtOAc萃取。有機層用Na2SO4干燥,減壓蒸發(fā)?;旌衔镌诠枘z柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶9∶0.5。得到32mg化合物11。MS(m/z)996.48[MH]+;IR(cm-1)/KBr3449,2938,2878,1735,1665,1624,1458,1375,1250,1174,1103,1056,1034,1013,981,956,929,894,781,703,672。
化合物12 將化合物1(130mg,0.14mmol)和二甲基氨甲酰氯(35.32mg,0.286mmol)在2-丁酮(10mL)中的溶液在室溫下依次使用三乙胺(0.044ml,0.31mmol)、碘化鈉(21mg,0.143mmol)、和水(0.013mL)處理,并攪拌3天。反應(yīng)混合物依次使用二甲基乙酰胺(0.52mL)和水(3.23mL)處理;冷卻至0℃,攪拌2小時后用EtOAc萃取。有機層用Na2SO4干燥并減壓蒸發(fā)?;旌衔镌诠枘z柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶9∶0.5。得到30mg化合物12。MS(m/z)980.5[MH]+化合物13 在化合物S24(70mg,0.163mmol)的10mL甲醇和5mL乙腈溶液中加入156mg(0.327mmol)大環(huán)內(nèi)酯M3。反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,混合物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH=90∶9∶1.5。得到50mg化合物13。MS(m/z)906.00[MH]+。
化合物14 將化合物M10(60mg;0.09mmol)和化合物S12(42mg;0.09mmol)溶解于MeOH(10ml)和CH3CN(5ml)中,所得到的反應(yīng)混合物在50℃下攪拌過夜。溶劑真空濃縮除去后,粗產(chǎn)物在硅膠柱上純化兩次,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH 90∶8∶1,得到31mg化合物14。
LC/MS(面積%)94%。
HPLC-MSMS(ES)m/z[MH]+1138.80(計算值1138.73)IR(KBr)cm-13417,2932,2855,1742,1670,1633,1547,1457,1376,1288,1260,1181,1091,1074,1051,994,957,940,899,849,818,711。
化合物15 在10mL MeOH中溶解25mg化合物S26,然后加入34.68mg胺M3。反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,產(chǎn)物在硅膠柱上純化,使用溶劑體系CHCl3∶MeOH∶NH4OH 6∶1∶0.1,得到12mg化合物15。
MS(m/z)923.31[MH]+MS(teor.)=923.16純度(HPLC-MS)93.50%化合物16 向45mg(0.094mmol)化合物S27的10mL MeOH溶液中加入89.6mg(0.188mmol)胺M3。反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,產(chǎn)物在硅膠柱上純化,使用溶劑體系CHCl3∶MeOH∶NH4OH 6∶1∶0.1,得到15mg化合物16。
MS(m/z)955.41[MH]+MS(teor.)=955.17純度(HPLC-MS)88.26%化合物17 向100mg(0.215mmol)化合物S12的10mL MeOH溶液中加入137.3mg(0.280mmol)胺M11(按照國際公開WO2004/094449,實施例16所述制備)。反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,產(chǎn)物在硅膠柱上純化,使用溶劑體系CHCl3∶MeOH∶NH4OH 6∶1∶0.1,得到139mg化合物17。
MS(m/z)955.35[MH]+MS(teor.)=954.56純度(HPLC-MS)97.65%IR(KBr)3450,2939,2879,1738,1671,1628,1562,1545,1525,1459,1377,1288,1259,1236,1179,1072,1053,1036,994,957,941,900,850,817,756,709,667。
化合物18 向100mg(0.215mmol)化合物S12的10mL MeOH溶液中加入137.3mg(0.280mmol)胺M12(按照國際公開WO2004/094449,實施例17所述制備)。反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,產(chǎn)物在硅膠柱上純化,使用溶劑體系CHCl3∶MeOH∶NH4OH 6∶1∶0.1,得到162mg化合物18。
MS(m/z)983.37[MH]+MS(teor.)=982.59純度(HPLC-MS)98.68%IR(KBr)3448,2937,2878,1736,1671,1631,1458,1376,1288,1259,1236,1178,1105,1073,1053,1036,994,975,957,941,899,849,817,755,709,664。
化合物19 向150mg(0.307mmol)化合物S25的10mL MeOH溶液中加入292.6mg(0.615mmol)胺M3。反應(yīng)混合物在55℃下攪拌24小時。蒸發(fā)除去溶劑后,產(chǎn)物在硅膠柱上純化,使用溶劑體系CHCl3∶MeOH∶NH4OH 6∶1∶0.1,得到43mg化合物19。
MS(m/z)983.37[MH]+MS(teor.)=965.19純度(HPLC-MS)98.15%化合物20 將化合物10(97mg;0.1mmol)溶解于MeOH(10ml)中,冷卻至2℃。在該溫度下向反應(yīng)混合物中逐滴加入乙腈(2μl;0.2mmol)。在該溫度下攪拌3小時后,蒸發(fā)除去溶劑得到白色油狀產(chǎn)物,接著將其在硅膠柱上純化,洗脫劑CHCl3∶MeOH∶NH4OH 90∶8∶1。得到88mg化合物20。
HPLC-MSMS(ES)m/z[MH]+983,5IR(KBr)cm-13444,2953,2879,1744,1714,1671,1633,1455,1377,1289,1259,1180,1074,1049,1035,994,957,940,899,849,818,709化合物21將化合物10(100mg;0.1mmol)溶解于MeOH(10ml)中。在該溶液中加入N,N-二異丙基乙基胺(177μl;1mmol)和碘乙烷(52μl;0.65mmol)。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌24小時。真空蒸發(fā)除去溶劑,粗產(chǎn)物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH 90∶8∶1。得到22mg化合物21。
MS(ES)m/z[MH]+969,4化合物22將化合物10(200mg;0.2mmol)溶解于CH3CN(10ml)中。在該溶液中加入N,N-二異丙基乙基胺(442μl;2.6mmol)和2-碘丙烷(520μl;5.2mmol)。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌24小時。真空蒸發(fā)除去溶劑后,粗產(chǎn)物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH 90∶8∶1。得到70mg化合物22。
MS(ES)m/z[MH]+983,5化合物23將化合物10(200mg;0.2mmol)溶解于THF(10ml)中。在該溶液中加入溴代乙酸甲酯(46μl;0.5mmol)和碳酸鉀(55mg;0.4mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌20小時。真空蒸發(fā)除去溶劑,粗產(chǎn)物在硅膠柱上純化,溶劑體系CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH 90∶8∶1。得到148mg化合物23。
MS(ES)m/z[MH]+1013,權(quán)利要求
1.式I化合物 其中M表示亞結(jié)構(gòu)VIII的大環(huán)內(nèi)酯亞單元 其中R1、R2、R3和R5各自獨立地選自氫、C1-C4烷基、烷?;?、烷氧羰基、芳甲氧羰基、芳?;⒎纪榛?、烷基甲硅烷基、烷基甲硅烷基烷氧烷基或者是與式IX的鏈L中的X1的共價鍵;R4選自與式IX的鏈L中的X1的共價鍵、氫、C1-C4烷基、烷?;⑼檠豸驶?、芳甲氧羰基、芳?;?、芳烷基、烷基甲硅烷基和烷基甲硅烷基烷氧烷基;或者R4是能與R5結(jié)合形成環(huán)狀碳酸酯或氨甲酸酯、或與>NRN結(jié)合形成環(huán)狀氨甲酸酯的基團;RN表示氫、C1-C4烷基或者與式IX的鏈L中的X1的共價鍵;L表示連接基團;Z表示非甾體抗炎亞單元或甾體亞單元;和前述化合物的可藥用鹽和含有前述化合物的可藥用組合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物,其中L表示亞結(jié)構(gòu)IX或XIII的鏈-X1-(CH2)m-Q-(CH2)n-X2- IX-X1-(CH2)m-V-(CH2)p-Q-(CH2)n-X2- XIII其中X1選自-CH2-、-CH2-NH-、-C(O)-、-OC(O)-、=N-O-、-C(O)NH-或-OC(O)NH-;X2選自-NH-、-CH2-、-NHC(O)-、-C(=O)、-OC(O)-、-C(=O)O-、或-C(O)NH-;Q是-NH-或-CH2-;其中每個-CH2-或-NH-基團任選被C1-C7-烷基、C2-C7-烯基、C2-C7-炔基、C(O)Rx、C(O)ORx、C(O)NHRx、CH2C(O)ORx取代,其中Rx可以是C1-C7-烷基、芳基或雜芳基;V是-NH-或-NH-C(O)-;符號m、n和p獨立地是0或整數(shù)0-12;條件是如果Q=NH;則n不能是0。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物,其中Z是亞結(jié)構(gòu)X的甾體 其中Ra、Rb各自獨立地選自氫、甲基和鹵素;Rf選自氫、羥基、鹵素或者與和其相連的碳原子形成羰基(C=O);Rc是羥基;C1-C4烷基;C1-C4烷氧基;C1-C4烷基羥基;NH-C1-C4烷基;CH2OC(O)C1-C4烷基或XC(O)N(R1R2),其中X是S或O,R1和R2獨立地是C1-C6烷基,或者R1和R2一起是C1-C6亞烷基;或者Rc是SCH2或CH2Y,其中Y是鹵素;或者Rc是與鏈L中的X2的共價鍵,條件是鏈L與式VIII的大環(huán)內(nèi)酯亞單元的R4相連;Rd是與鏈L中的X2的共價鍵、氫、羥基、甲基、C1-C4烷氧基或者與Re和與它們相連的碳原子一起形成可以被另外的烷基或烯基單取代或雙取代的1,3-二氧戊環(huán);Re是氫、羥基、甲基、和C1-C4烷氧基;以及Rj選自氫和氯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物,其中所述Z是非甾體抗炎(NSAID)亞單元。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物,其中所述NSAID亞單元選自醋氯芬酸、阿西美辛、對乙酰氨基酚、醋氨沙洛、乙酰水楊酸、乙酰水楊酰-2-氨基-4-甲基吡啶酸、5-氨基乙酰水楊酸、阿氯芬酸、氨洛芬、氨芬酸、氨基安替比林、安吡昔康、阿尼利定、芐達酸、苯噁洛芬、柏莫洛芬、α-沒藥醇、溴芬酸、5-溴水楊酸乙酸酯、溴水楊醇、布氯酸、布替布芬、卡洛芬、塞來考昔、色甘酸鹽、桂美辛、環(huán)氯茚酸、氯吡酸、雙氯芬酸鈉、二氟尼柳、地他唑、屈噁昔康、苯乙氨茴酸、依托度酸、依托芬那酯、聯(lián)苯乙酸、芬布芬、芬克洛酸、芬度柳、非諾洛芬、芬替酸、非普地醇、flufenac、氟芬那酸、氟尼辛、氟諾洛芬、氟比洛芬、安胃靈、水楊酸羥乙酯、異丁芬酸、布洛芬、異丁普生、吲哚美辛、吲哚洛芬、三苯唑酸、伊索克酸、伊索昔康、酮洛芬、酮咯酸、氯諾昔康、洛索洛芬、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、美沙拉秦、甲嗪酸、莫苯唑酸、孟魯司特、麥考酚酸、萘丁美酮、萘普生、尼氟酸、尼美舒利、奧沙拉秦、奧沙西羅、奧沙普秦、羥布宗、對乙酰氨基酚、帕沙米特、哌立索唑、苯基-乙酰基-水楊酸酯、保泰松、水楊酸苯酯、吡拉唑酸、吡羅昔康、吡洛芬、普拉洛芬、丙替嗪酸、白藜蘆醇、醋水楊胺、水楊酰胺、水楊酰胺-O-乙酸、水楊酰硫酸酯、水楊苷、水楊酰胺、雙水楊酯、舒林酸、舒洛芬、琥布宗、他莫昔芬、替諾昔康、茶堿、噻洛芬酸、噻拉米特、噻氯匹定、替諾立定、托芬那酸、托美丁、托匹星、聯(lián)苯丁酸、希莫洛芬、扎托洛芬、佐美酸、托莫普羅、扎魯司特和環(huán)孢菌素。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物,其中所述NSAID亞單元不是乙酰水楊酸或麥考酚酸。
7.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物,其中所述NSAID亞單元選自氟芬那酸、氟尼辛和塞來考昔。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7的化合物,其中R1、R2、R3、R4和R5各自獨立地選自氫和C1-C4烷基,以及RN表示與鏈L中的X1的共價鍵。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物,其中R1、R2、R3、R4和R5獨立地選自氫和甲基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-7的化合物,其中R4表示與鏈L中的X1的共價鍵,以及R1、R2、R3、R4和R5各自獨立地選自氫和C1-C4烷基。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物,其中R1、R2、R3、R4和R5獨立地選自氫和甲基。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物,其中RN表示與鏈L中的X1的共價鍵。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物,其中X1是-CH2-且X2是-C(O)O-。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物,其中X1是-C(O)NH-且X2是-NH-。
15.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物,其中X1是-C(O)NH-且X2是-NHC(O)-。
16.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物,其中X1是-C(O)NH-且X2是-NH-。
17.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物,其中X1是-CH2-且X2是-C(O)O-。
18.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物,其中Rd是與鏈L中的X2的共價鍵。
19.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物,其中亞結(jié)構(gòu)X選自
20.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物,其中亞結(jié)構(gòu)X是
21.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
22.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
23.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
24.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
25.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
26.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
27.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
28.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
29.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
30.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
31.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
32.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
33.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
34.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
35.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
36.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
37.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
38.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
39.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
40.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
41.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
42.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
43.具有下述結(jié)構(gòu)的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物 及其可藥用鹽和溶劑化物。
44.藥物組合物,其中含有根據(jù)權(quán)利要求1-43的化合物及其可藥用鹽或溶劑化物以及可藥用稀釋劑或載體。
45.治療其特征在于不希望的炎性免疫應(yīng)答或與之相關(guān)的炎性疾病、障礙和病癥,以及由過度分泌TNF-α和IL-1引起或與之相關(guān)的所有疾病和病癥的方法,所述方法包括向?qū)ο蠼o藥治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-43的化合物。
46.治療有需要的對象中與白細胞浸潤發(fā)炎組織有關(guān)的炎性病癥和免疫性或過敏性障礙的方法,所述方法包括向所述對象給藥治療有效量的權(quán)利要求1-43的化合物。
47.根據(jù)權(quán)利要求45的方法,其中炎性病癥和免疫性障礙選自哮喘、成人型呼吸窘迫綜合征、慢性阻塞性肺病、炎性腸病、克羅恩氏病、支氣管炎、和囊性纖維化病。
48.根據(jù)權(quán)利要求45的方法,其中所述炎性病癥和免疫性障礙選自肺、關(guān)節(jié)、眼、腸、皮膚、和心臟炎性病癥和免疫性障礙。
49.根據(jù)權(quán)利要求45的方法,其中所述炎性病癥和免疫性障礙選自哮喘、成人型呼吸窘迫綜合征、支氣管炎、囊性纖維化病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、眼葡萄膜炎、結(jié)膜炎、炎性腸病、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、末端直腸炎、牛皮癬、濕疹、皮炎、冠脈梗塞損傷、慢性炎癥、內(nèi)毒素休克、和平滑肌增殖障礙。
50.治療其特征在于過度異常產(chǎn)生細胞因子或炎性介質(zhì)或與之相關(guān)的炎性疾病、障礙和病癥的方法,所述方法包括向?qū)ο蠼o藥治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-43的化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I所示的新化合物其中M表示亞結(jié)構(gòu)VIII的大環(huán)內(nèi)酯亞單元L表示亞結(jié)構(gòu)IX或XIII的鏈Z表示衍生至具有抗炎活性的甾體或非甾體藥物(NSAID)的甾體或非甾體亞單元;本發(fā)明還涉及這樣制備的化合物的可藥用鹽和溶劑化物、它們的制備方法和中間體、以及它們在治療人和動物炎性疾病和病癥中改善了的治療作用和用途。
文檔編號C07D267/00GK101090908SQ200580045145
公開日2007年12月19日 申請日期2005年10月27日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月27日
發(fā)明者姆拉登·默塞普, 米蘭·梅西克, 琳達·托馬斯科維克, 斯特里伯·馬科維克, 維斯賈·波爾賈克, 戈達納·西詹, 塞爾維拉·塞爾馬尼 申請人:葛蘭素伊斯特拉齊瓦基森塔薩格勒布公司