專利名稱：以動物膽汁為原料高效提取膽紅素和膽汁酸技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從豬、牛、羊的膽汁中提取膽酸、去氧膽酸、膽紅素方法。其特征在于用于制備人工牛黃 和其它功能藥物和材料。
背景技術(shù)：
膽汁是在膽道中流動的一種特殊的體液，由哺乳動物肝臟分泌產(chǎn)生。在肝臟中形成后經(jīng)膽囊管進(jìn)入膽 囊，并在那里儲存起來進(jìn)食后從膽囊中釋放出來，消化食物中的脂肪和類脂。膽汁中極大部分是水(約占 97%),在水中溶有許多種物質(zhì)，其中包括能幫助脂肪消化和吸收的膽汁酸(約占2.5%),以及與消化無關(guān) 的肝的排泄物膽紅素(約占0.4%)。此外，膽汁中含有磷脂、膽固醇、鈉、鉀、鈣、磷酸鹽、碳酸鹽以及 極少量蛋白質(zhì)等成分。天然牛黃是牛科動物千燥的膽結(jié)石，其主要成分為膽紅素、膽酸、去氧膽酸、膽固醇、無機(jī)鹽等，是 傳統(tǒng)名貴中藥材。由于其產(chǎn)量低，不能夠滿足市場需求，目前以牛黃做原料的藥物絕大多數(shù)是用人工牛黃 代替天然牛黃。由于膽汁酸和膽紅素是制備人工牛黃的原料，促使從膽汁中提取膽汁酸和膽紅素的研究與 生產(chǎn)技術(shù)的提高。國外從上個世紀(jì)60年代開始膽汁酸和膽紅素的提取工作，現(xiàn)在是技術(shù)成熟、設(shè)備先進(jìn)、 產(chǎn)品純度高、質(zhì)量好；我國從上個世紀(jì)80年代展開膽汁酸和膽紅素的提取工作，現(xiàn)在有幾家企業(yè)進(jìn)行這 方面的生產(chǎn)，但是沒有高純度的膽汁酸和膽紅素商品，同時產(chǎn)品的產(chǎn)量也難以滿足日益擴(kuò)大的市場需求。 本發(fā)明提出了一種從豬、牛、羊的膽汁中聯(lián)合提取膽紅素和膽汁酸的方法，應(yīng)用此種方法可以制備高純度 膽紅素和膽汁酸此種方法生產(chǎn)成本低，沒有污染和有毒物質(zhì)排放。產(chǎn)品可以用于制備人工牛黃等藥物， 為制藥行業(yè)提供必要的原料，解決市場供霈缺口大的矛盾。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供-種從豬、牛、羊的膽汁中提取膽酸、去氧膽酸、膽紅素方法。本發(fā)明從豬、牛、 羊的膽汁中提取膽酸、去氧膽酸、膽紅素方法包括下述步驟脫脂，水解，萃取，皂化與濃縮，酸化與沉 淀，分離與純化。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明合成所用的原料新鮮膽汁(天津市肉類聯(lián)合加工廠提供)，濃鹽酸，氯仿，氫氧化鈉，乙醇(天 津化學(xué)試劑公司)。熔點(diǎn)用X-4熔點(diǎn)儀測定。IR用Bio-RADFTS135型傅立葉變換紅外光譜儀測定，KBr 壓片。'HNMR用VarianUnity Plus-300核磁共振儀測定，CDCl3為溶劑，TMS為內(nèi)標(biāo)。元素分析用FOSS Heraeus元素分析儀測定。實(shí)施操作1) 脫脂將新鮮的膽汁冷卻，至其中析出的固體物不再增加，過濾，除去固體物。2) 水解向除酯后的膽汁中加入氫氧化納，調(diào)節(jié)pH值為9 10，加熱至沸，保持沸騰10分鐘，冷卻。3) 萃取向水解冷卻后的膽汁中加入少量的亞硫酸氫鈉，攪勻后再加入約膽汁量四分之一體積的氯 仿，攪拌下向其中滴加鹽酸，調(diào)節(jié)pH到5~6，充分?jǐn)嚢韬蟮谷敕忠郝┒缝o置；分層后放出下層的氯仿， 將中間層固體取出，將其溶亍-等量氯仿，再放入分液漏斗靜置，分層后將氯仿放出，與第一次等到的氯仿 合并，旋蒸，得到膽紅素粗品，氯仿回收循環(huán)利用。分液后的上層膽汁備提取膽汁酸用。4) 膽紅素純化將膽紅素粗品溶解于乙醇中，蒸發(fā)部分溶劑使膽紅素析出，過濾，將得到的固體物避光下真空千燥，得精品膽紅素(IR (cm—'): 3411,3262,2918,2852,1696,1613,1441,1220， 991， 698 )。5)皂化與濃縮向提取膽紅素后的膽汁中加入氫氧化納，調(diào)節(jié)pH值為l(Kll，加熱濃縮至大部分水分被蒸出，得固化物。 6)酸化與沉淀將固化物溶亍適量的乙醇中，向其中滴加鹽酸，調(diào)節(jié)pH至3 4,有沉淀析出，過濾， 得固體膽汁酸混合物。7)分離與純化將得到的固體膽汁酸混合物溶解于適量的熱乙醇中，室溫冷卻，待析出固體物不 增加，過濾，將得到的固體真空干燥，得膽酸純品(m.p.: 196 1訴。C; IR(cm-l): 3352， 2936,2868,1726, 1464, 1376， 1177， 981; 1H-NMR (400MHz, DMS03): S/ppm = 0.60 (s， 3H, 18-H3), 0.81 (s， 3H， 19-H3)， 0.94(d, J = 6.0Hz，3H，21-H3),3.38(m，lH，3a-H)，3.61(s,7a鄰，3.78(s，12a鄰):濾液旋蒸，回收乙醇，得到的固體 用氯仿重結(jié)晶，得去氧膽酸精品(m.p.: 172~174°C; IR(cm-l):限(cm-l): 3371， 2935， 1734,1466， 1447,1370, 1078, 9914; 1H-NMR (400MHz, CDCI3): 5 /ppm = 0.65 (s， 3H, 18-H3), 0.85 (s， 3H， 19-H3)， 0.92(d, J = 6.0Hz, 3H， 21-H3), 3.39 (m, 1H, 3 a -H), 3.82 (s, 12 a -H))。
權(quán)利要求
1、一種從豬、牛、羊的新鮮膽汁中提取膽酸、去氧膽酸、膽紅素方法。膽酸、去氧膽酸、膽紅素可以用于制備人工牛黃和功能高分子材料。
2、 權(quán)利要求I所述的從豬、牛、羊的新鮮膽汁中提取膽酸、去氧膽酸、膽紅素方法，其特征在于它包 括下述步驟脫脂，水解，萃取，皂化與濃縮，酸化與沉淀，分離與純化。
3、 權(quán)利要求2所述的脫脂.其特征在于將新鮮的膽汁冷卻，使其中的酯類化合物以固體形式析出， 用過濾的方法將其除去。
4、 權(quán)利要求2所述的水解其特征在于向除醋后的膽汁中加入堿，調(diào)節(jié)pH值，加熱水解。
5、 權(quán)利要求2所述的萃取其特征在于向水解的膽汁中加入亞硫酸氫鈉和氯仿后用鹽酸調(diào)節(jié)pH,放出 氯仿層后，旋蒸，得到膽紅素，氯仿回收循環(huán)利用。
6、 權(quán)利要求2所述的皂化與濃縮其特征在于向提取膽紅素后的膽汁中加入堿，調(diào)節(jié)pH值，加熱至大 部分水分被蒸出。
7、 權(quán)利要求2所述的酸化與沉淀其特征在于將濃縮后的膽汁固化物溶于乙醇中，用鹽酸酸化，析出沉淀。
8、 權(quán)利要求2所述的分離與純化其特征在于分別用乙醇和氯仿對固體膽汁酸混合物進(jìn)行重結(jié)晶,得到 膽酸和去氧膽酸產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明涉及從豬、牛、羊的膽汁中提取膽酸、去氧膽酸、膽紅素方法。豬、牛、羊的膽汁主要由水(約占97％)、膽汁酸(約占2.5％)和膽紅素(約占0.4％)組成，此外還含有磷脂、膽固醇、鈉、鉀、鈣、磷酸鹽、碳酸鹽以及極少量蛋白質(zhì)等成分。將新鮮膽汁進(jìn)行冷卻、過濾脫脂、堿性水解、酸化、有機(jī)溶劑萃取制備膽紅素，剩余溶液深度皂化、酸化、有機(jī)溶劑沉淀制備膽酸和去氧膽酸混合物，再應(yīng)用重結(jié)晶方法將膽酸和去氧膽酸分開，得到高純度膽酸和去氧膽酸。
文檔編號C07J9/00GK101148468SQ20061001569
公開日2008年3月26日 申請日期2006年9月19日 優(yōu)先權(quán)日2006年9月19日
發(fā)明者劉安軍, 劉玉江, 胡祥正 申請人:天津科技大學(xué)