專利名稱：：具有抗病毒活性的新化合物的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及具有抗病毒活性的化合物，其藥學上可接受的鹽，這些化合物的制備方法，以及這些化合物在制備治療和/或預防病毒性感染疾病的藥物中的應用，屬于醫(yī)藥
技術領域：
。2
背景技術：
：流感和急性呼吸道病毒感染是臨床上發(fā)病率高、發(fā)病范圍廣的疾病。流感是由流感病毒引起的一種嚴重危害人類健康的急性呼吸道傳染病，發(fā)病率占有所呼吸道傳染病的首位，往往造成季節(jié)性全球或局部地區(qū)大流行。據統(tǒng)計，全世界每年有10%的人口，即約5億人被流感病毒感染。多發(fā)于秋冬及冬春交替季節(jié)，往往造成季節(jié)性大流行，是致死率最高的病毒傳染病之一。流感病毒具有抗原變異性及多重耐藥性。流感可引起很多合并癥，如繼發(fā)細菌感染，引起咽喉炎、中耳炎、鼻竇炎和支氣管炎。嚴重感染者可引起病毒性肺炎，尤其是對老年人、慢性病人和小孩。流感還可使原有的慢性病加重，包括心臟病、肺病、腎臟疾病和糖尿病，可導致相應器官功能的衰竭。臨床治療流感有三個方式疫苗、干擾素和抗病毒化療藥物。但由于流感病毒抗原的易變性和急性呼吸道病毒感染的多重性，造成疫苗無效；干擾素由于來源、給藥劑量、副作用等原因，限制了它的應用；抗病毒化療藥物，如核苷類、金剛垸胺類、神經氨酸酶抑制劑、病毒受體阻斷劑等在臨床廣泛應用，但其活性范圍較窄，具有副作用，且隨著臨床應用其耐藥性增加，而且價格昂貴，所以，亟需開發(fā)新的安全、有效的抗病毒藥物。3
發(fā)明內容本發(fā)明的目的在于公開了一種新的化合物，其藥學上可接受的鹽，其制備方法，及其在制備預防和/或治療病毒性感染，尤其是呼吸道病毒性感染藥物中的應用。本發(fā)明的技術方案如下-本發(fā)明提供了如式(I)所示的化合物-其中，R,為甲基、乙基、丙基、異丙基；R2為氫、甲酸基、乙酸基、丙酸基；R3為COOR'，R'為取代或未被取代的CL6直鏈或支鏈的垸基，取代或未取代的Q.k)的芳基，CL3直鏈或支鏈的烷氧基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基、苯基、芐基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基；取代基包括Cw直鏈或支鏈的烷基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基；H2R4為R2'，其中，Rl，、R2'各自為獨立的氫；d.3直鏈或支鏈的烷基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基；R5、R6各自為獨立的羥基；氨基；氰基；硝基；鹵素，選自氟、氯、溴、碘；取代或未被取代的CM直鏈或支鏈的烷氧基，選自甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基；R7為氫；取代或未被取代的CM直鏈或支鏈的烷基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基；Rg為甲基、乙基、丙基、異丙基。優(yōu)選為R!為甲基、乙基、丙基；R2為氫、甲酸基、乙酸基；R3為COOR',R'為取代或未被取代的Cw直鏈或支鏈的烷基，取代或未取代的C6.8的芳基，d.3直鏈或支鏈的烷氧基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、苯基、芐基、甲氧基、乙氧基、丙氧基；所述的取代基同上所述；&為<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>，其中，Rl，、R2，各自為獨立的氫、甲基、乙基、丙基；Rs為羥基；硝基；取代或未被取代的Cw直鏈或支鏈的烷氧基，選自甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基；R6為羥基；硝基；鹵素，選自氟、氯、溴、碘；取代或未被取代的Cw直鏈或支鏈的垸氧基，選自甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基；R7為氫；取代或未被取代的Cw直鏈或支鏈的烷基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基；R8為甲基、乙基、丙基。進一步優(yōu)選為R!為甲基、乙基；R2為氫、乙酸基；R3為COOR，，R'為甲基、乙基、丙基；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>，其中，Rl，、R2，各自為獨立的氫、甲基、乙基；Rs為羥基、甲氧基、乙氧基、丙氧基；R6為鹵素，選自氟、氯、溴、碘；甲氧基、乙氧基、丙氧基；R7為氫、甲基、乙基、丙基；Rs為甲基、乙基。最優(yōu)選的化合物包括化學名稱6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑)-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(以下簡稱化合物A)，結構式如下所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化學名稱6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(以下簡稱化合物B)，結構式如下所示化學名稱6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-噻唑)-111』引哚-3-羧酸乙酯(以下簡稱化合物C)，結構式如下所示本發(fā)明人對上述優(yōu)選化合物的衍生物進行了研究，發(fā)現其藥學上可接受的鹽具有良好的水溶性和穩(wěn)定性，易于制成注射劑。本發(fā)明化合物藥學上可接受的鹽包括有機酸鹽、無機酸鹽、有機堿鹽和無機堿鹽，其中無機酸鹽包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽；有機酸鹽包括甲酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、甲磺酸鹽、草酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、肉桂酸鹽；無機堿鹽包括堿金屬鹽鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽，堿土金屬鹽鎂鹽、鈣鹽、鋇鹽、鋅鹽；有機堿鹽包括葡甲胺鹽、氨基葡萄糖鹽。優(yōu)選為鹽酸鹽、硫酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、鈉鹽、鉀鹽。下面以其鹽酸鹽為例說明本發(fā)明化合物鹽的制備方法，但不僅限于下列工藝1、6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑)-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽(化合物A')的合成工藝反應方程式CH3反應步驟(1)6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(2-巰基-4-甲基-5-羧甲基-噻唑)-111-11引哚-3-羧酸乙酯的制備在干燥的反應瓶中，加入甲醇、氫氧化鉀，攪拌溶解后分批加入2-巰基-4-甲基-5-羧甲基-噻唑，室溫攪拌10min。然后再加入5-乙酰氧基-6-溴-2-溴甲基-l-甲基-lH』引哚-3-羧酸乙酯，攪拌反應12h，反應完畢。在攪拌下將反應液倒入冰水中，用稀鹽酸調至pH2左右，析出沉淀，抽濾，濾餅水洗后干燥，得淺黃色固體。即6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(2-巰基-4-甲基-5-羧甲基-噻唑)-1H-吲哚-3-羧酸乙酯。(2)6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-巰基-4-甲基-5-羧甲基-噻唑)-1&吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽的制備于反應瓶中加入乙醇、多聚甲醛和二甲胺鹽酸鹽，攪拌后加入濃鹽酸，攪拌均勻后加入6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(2-巰基-4-甲基-5-羧甲基-噻唑)-111』引哚-3-羧酸乙酯，升溫至60。C攪拌反應3h。減壓濃縮后冷凍析晶3h，析出結晶，抽濾，得粗品。粗品用異丙醇重結晶，得白色結晶，即6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-巰基-4-甲基-5-羧甲基-噻哇)-lH-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽。2、6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-l-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-lH-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽(化合物B')的合成工藝反應方程式(CH3)2NH-HC1(CH20)n反應步驟(1)6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-1^吲哚-3-羧酸乙酯的制備在干燥的反應瓶中，加入甲醇、氫氧化鉀，攪拌溶解后分批加入2-硫甲基-噻唑，室溫攪拌10min。然后再加入5-乙酰氧基-6-溴-2-溴甲基-l-甲基-lH』引哚-3-羧酸乙酯，攪拌反應12h，反應完畢。在攪拌下將反應液倒入冰水中，用稀鹽酸調至pH2左右，析出沉淀，抽濾，濾餅水洗后干燥，得淺黃色固體。即6-溴-5-羥基-l-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-lH-吲哚-3-羧酸乙酯。(2)6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-11^-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽的制備于反應瓶中加入乙醇、多聚甲醛和二甲胺鹽酸鹽，攪拌后加入濃鹽酸，攪拌均勻后加入6-溴-5-羥基小甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-1&吲哚-3-羧酸乙酯，升溫至60'C攪拌反應3h。減壓濃縮后冷凍析晶3h，析出結晶，抽濾，得粗品。粗品用異丙醇重結晶，得白色結晶，即6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻哇)4H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽。3、6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-噻唑)-1&吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽(化合物B')的合成工藝反應方程式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>反應步驟(1)6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(2-巰基-4-甲基-噻唑)-11^』引哚-3-羧酸乙酯的制備在干燥的反應瓶中，加入甲醇、氫氧化鉀，攪拌溶解后分批加入2-巰基-4-甲基-噻唑，室溫攪拌10min。然后再加入5-乙酰氧基-6-溴-2-溴甲基-l-甲基-lH-U引哚-3-羧酸乙酯，攪拌反應12h，反應完畢。在攪拌下將反應液倒入冰水中，用稀鹽酸調至pH2左右，析出沉淀，抽濾，濾餅水洗后干燥，得淺黃色固體。即6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(2-巰基-4-甲基-噻唑)-111-吲哚-3-羧酸乙酯。(2)6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-巰基-4-甲基-噻唑)4H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽的制備于反應瓶中加入乙醇、多聚甲醛和二甲胺鹽酸鹽，攪拌后加入濃鹽酸，攪拌均勻后加入6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(2-巰基-4-甲基-噻唑)-111-吲哚-3-羧酸乙酯，升溫至60。C攪拌反應3h。減壓濃縮后冷凍析晶3h，析出結晶，抽濾，得粗品。粗品用異丙醇重結晶，得白色結晶，即6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-巰基-4-甲基-噻唑)-11^-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽。本發(fā)明進一步要求保護上述化合物及其藥學上可接受的鹽在制備治療和/或預防病毒感染性疾病的藥物中的用途。本發(fā)明化合物及其藥學上可接受的鹽具有廣譜抗病毒活性，尤其對呼吸道病毒性感染有較好的抑制作用。本發(fā)明還進一步要求保護包括上述化合物或其藥學上可接受的鹽作為必需的活性成分與藥學上可接受的載體的藥物組合物，為臨床上或藥學上可接受的任一劑型；可以腸胃外、口服、經皮給藥等方式施用于需要這種治療的患者，優(yōu)選為口服制劑、注射劑。用于腸胃外給藥時，可制成注射劑。注射劑系指藥物制成的供注入體內的溶液、乳液或混懸液及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無菌制劑，注射劑可分為注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液。注射液系指藥物制成的供注射入體內用的無菌溶液型注射液、乳液型注射液或混懸型注射液，可用于肌內注射、靜脈注射、靜脈滴注等；其規(guī)格有l(wèi)ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、lOOml、200ml、250ml、500ml等，其中供靜脈滴注用的大體積(一般不小于100ml)注射液也稱靜脈輸液。注射用無菌粉末系指藥物制成的供臨用前用適宜的無菌溶液配制成澄清溶液或均勻混懸液的無菌粉末或無菌塊狀物，可用適宜的注射用溶劑配制后注射，也可用靜脈輸液配制后靜脈滴注；無菌粉末用溶媒結晶法、噴霧干燥法或冷凍干燥法等制得。注射用濃溶液系指藥物制成的供臨用前稀釋供靜脈滴注用的無菌濃溶液。制成注射劑時，可采用現有制藥領域中的常規(guī)方法生產，可選用水性溶劑或非水性溶劑。最常用的水性溶劑為注射用水，也可用0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的水溶液；常用的非水性溶劑為植物油，主要為供注射用大豆油，其他還有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。配制注射劑時，可以不加入附加劑，也可根據藥物的性質加入適宜的附加劑，如滲透壓調節(jié)劑、pH值調節(jié)劑、增溶劑、填充劑、抗氧劑、抑菌劑、乳化劑、助懸劑等。常用的滲透壓調節(jié)劑包括氯化鈉、葡萄糖、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、山梨醇等，優(yōu)選氯化鈉或葡萄糖；常用的pH值調節(jié)劑包括醋酸-醋酸鈉、乳酸、枸櫞酸-枸櫞酸鈉、碳酸氫鈉-碳酸鈉等；常用的增溶劑包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充劑包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧劑有亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉等；常用抑菌劑為苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射劑常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。用于口服時，可制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等；也可制成口服液體制劑，如口服溶液劑、口服混懸劑、糖漿劑等。片劑系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑，以口服普通片為主，另有含片、舌下片、口腔貼片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡騰片、緩釋片、控釋片與腸溶片等。膠囊劑系指藥物或加有輔料充填于空心膠囊或密封于軟質囊材中的固體制劑，依據其溶解與釋放特性，可分為硬膠囊(通稱為膠囊)、軟膠囊(膠丸)、緩釋膠囊、控釋膠囊和腸溶膠囊等。丸劑系指藥物與適宜的輔料均勻混合，以適當方法制成的球狀或類球狀固體制劑，包括滴丸、糖丸、小丸等。顆粒劑系指藥物與適宜的輔料制成具有一定粒度的干燥顆粒狀制劑，可分為可溶顆粒(通稱為顆粒)、混懸顆粒、泡騰顆粒、腸溶顆粒、緩釋顆粒和控釋顆粒等?？诜芤簞┫抵杆幬锶芙庥谶m宜溶劑中制成供口服的澄清液體制劑。口服混懸劑系指難溶性固體藥物，分散在液體介質中，制成供口服的混懸液體制劑，也包括干混懸劑或濃混懸液。糖槳劑系指含有藥物的濃蔗糖水溶液。制成口服制劑時，可以加入適宜的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等。常用填充劑包括淀粉、糖粉、磷酸鈣、硫酸鈣二水物、糊精、微晶纖維素、乳糖、預膠化淀粉、甘露醇等；常用粘合劑包括羧甲基纖維素鈉、PVP-K30、羥丙基纖維素、淀粉漿、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙甲纖維素、膠化淀粉等；常用崩解劑包括干淀粉、交聯聚維酮、交聯羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素等；常用潤滑劑包括硬脂酸鎂、滑石粉、十二烷基硫酸鈉、微粉硅膠等。本發(fā)明化合物與現有技術相比，具有以下優(yōu)點(1)提供了具有抗病毒活性的化合物，尤其是6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑)-111-(1引哚-3-羧酸乙酯、6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-舊-吲哚-3-羧酸乙酯、6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-噻唑)-111-吲哚-3-羧酸乙酯，及其藥學上可接受的鹽，豐富了臨床用藥品種。(2)體外和體內抗病毒實驗表明，本發(fā)明化合物及其藥學上可接受的鹽對呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒Ad7、甲3型流感病毒均具有較高的抑制活性，且具有一定免疫調節(jié)作用，具有廣譜高效的抗病毒活性。(3)本發(fā)明化合物及其藥學上可接受的鹽具有廣譜高效的抗病毒活性，尤其對呼吸道病毒性感染具有良好的臨床應用價值。以下通過實驗例來進一步闡述本發(fā)明化合物的有益效果。本發(fā)明化合物具有下列有益效果，但不應將此理解為本發(fā)明化合物僅具有下列有益效果。實驗例1本發(fā)明化合物對H印-2細胞的毒性作用供試品本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'，體外實驗將3種化合物分別配成0.1g/ml溶液，通過0.22ixm濾膜過濾除菌備用。細胞Hep-2細胞細胞生長液為RPMI-1640，加10%小牛血清，100U'mL"青霉素，100ug'mL"鏈霉素；細胞維持液除新生小牛血清為2%外，其余同細胞生長液。實驗方法:根據Mosmann建立的四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A，、B'、C'對Hep-2細胞的毒性作用。用胰蛋白酶將生長良好的Hep-2細胞分散成單個細胞懸液，按1X105m:L'1濃度分種于40孔板，每孔0.1ml。置37'C，5%<:02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,待細胞長成單層后，棄培養(yǎng)液上清，換含不同濃度的含藥維持液，每種濃度重復4孔，并設正常細胞對照。繼續(xù)培養(yǎng)48h后，棄培養(yǎng)液上清，每孔加入含5mg，ml"MTT的不含血清的MEM培養(yǎng)基50iiL，置C02培養(yǎng)箱中23h后，棄MTT上清，每孔加溶解液(DMSO與乙醇體積比為1:1)100tiL，振蕩510min，待結晶完全溶解，置96孔酶標測定儀上，測定570nm波長處的吸光度A，根據下式計算細胞存活率，并找出藥物對細胞的最大無毒濃度范圍。細胞存活率(％)=(實驗孔A/對照孔A)X100%結合細胞毒性實驗的結果，用加權直線回歸法計算藥物半數毒性濃度TC50。不同濃度的本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'作用細胞后的結果見表l。表l本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'對Hep-2細胞的毒性作用藥物不同藥物量(ugmL'1)的細胞存活率/%TC50(y.gml/1)10204080160320640A，116737062353126193.1B,113766861403225195.3C,108696352363023186.7實驗結果本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B，、C，對細胞毒性作用表現為細胞變圓，壁厚，脫落并且吸光值明顯下降，吸光度A值在O.IO以下，本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'對Hep-2細胞的半數毒性濃度分別為193.1ug'mU1、195.3"gm1/1、186.7ugmL'1，可知，1501^*1111/1以下為本發(fā)明化合物的鹽酸鹽八，、B，、C'的無毒性范圍。實驗例2本發(fā)明化合物對呼吸道合胞病毒增殖的抑制作用供試品本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'，體外實驗將3種化合物分別配成0.1g/ml溶液，通過0.22"111濾膜過濾除菌備用。病毒呼吸道合胞病毒(RSV)經Hep-2細胞活化增殖，細胞病變效應(CPE)達75%以上(+++++++)時收獲，滴定RSV滴定為104TCID5()(O.lml)'1。細胞Hep-2細胞實驗方法于已長成單層Hep-2細胞的40孔板上，每孔接種50uLl(^TCID5o的RSV病毒液，于3335'C吸附90min，棄病毒上清。根據實驗1細胞毒性實驗的結果，在藥物無毒濃度范圍內，加入不同濃度的含藥維持液每孔0.2ml，然后將病毒感染細胞培養(yǎng)板置3335°C，5%(:02培養(yǎng)，每日觀察細胞病變效應(CPE)。隔天換新鮮含藥維持液。實驗同時設正常細胞對照組和病毒對照組。CPE記錄方法為-為無CPE，+為25%細胞出現?！?++為50%細胞出現0￡;+++為75%細胞出現CPE;++++為100%細胞出現CPE。約在病毒對照+++++++時，棄培養(yǎng)液上清，每孔加入含5mg/mlMTT的培養(yǎng)液50uL，繼續(xù)培養(yǎng)23h后棄去MTT上清，加DMSO溶解液，每？LlOOuL，混勻，510min后，用酶標儀測570nm處的光密度A值，按下述公式計算藥物病毒抑制率。病毒抑制率(％)=(藥物處理組A-病毒對照組A)/(細胞對照組A-病毒對照組A)X100%結合細胞毒性實驗的結果，用加權直線回歸法計算藥物半數毒性濃度TCso和半數有效濃度ICsq,得到藥物治療指數(TI=TC5G/IC50)。根據細胞毒性實驗1的結果，選擇在無毒濃度范圍內，將藥物分別以不同的濃度進行抑制RSV病毒實驗，其病毒抑制率見表2。_表2本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'的抗呼吸道合胞病毒作用_<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>實驗結果1、呼吸道合胞病毒(RSV)對Hep-2細胞病變效應(CPE)表現為細胞腫脹，變圓，有合胞體形成。2、由表2可知隨藥物濃度增加，其抗病毒活性增強，表現為病毒抑制率升高。經直線回歸分析，藥物濃度與病毒抑制率之間表現出量效關系(p<0.05)。3、藥物的治療指數TI值愈大，藥物的安全范圍愈大，臨床的應用價值就越高，由表2數據可知，本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'均有較大的臨床應用安全范圍。結論本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'的藥物濃度與對呼吸道合胞病毒的抑制率有線性關系，臨床安全范圍大，表現出了較強的抑制呼吸道合胞病毒的效果。實驗例3本發(fā)明化合物體外抗副流感病毒作用供試品本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'，體外實驗將3種化合物分別配成0.1g/ml溶液，通過0.22um濾膜過濾除菌備用。病毒副流感病毒細胞Hep-2細胞實驗方法實驗分組擬定本發(fā)明化合物對副流感病毒的作用分成四個組。1組(藥物抗低滴度病毒生物合成組)先加病毒液10'2吸附細胞211后再加含藥維持液。2組(藥物抗髙滴度病毒生物合成組)先加病毒液10's吸附細胞2h后再加含藥維持液。3組和4組(藥物抗病毒吸附2h、6h組)將不同濃度的藥物加入到細胞內分別作用2h、6h后，棄去藥液，再加病毒液，吸附2h后更換細胞維持液。上述四組實驗組每孔劑量設4各重復孔，同時設立未感染細胞對照、病毒對照和溶劑對照。35°C、5%(:02培養(yǎng)，每天于倒置顯微鏡下觀察細胞變化。待病毒對照孔細胞病變(CPE)程度呈+++++++，且對照細胞正常時，MTT法進行活細胞染色，在570nm波長讀取OD值，根據OD值判斷不同濃度藥物對病毒抑制作用的大小，公式如下病毒抑制率(％)=(實驗組OD值一病毒對照組OD值)/(細胞對照組OD值一病毒對照組OD值)X100%Probit回歸方法計算藥物半數中毒濃度(TD5G)和半數有效濃度(ED5G)，治療指數(TI)=藥物半數中毒濃度(TD5o)/半數有效濃度(ED5o)，用LinearRegression對藥物劑量與其產生的細胞效應(細胞存活率、抑制率)進行相關性分析，判斷是否存在量效關系。表3本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'抗副流感病毒不同作用方式時病毒抑制率比較<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>注"一"表示此濃度未做。實驗結果1、本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'有體外抗副流感病毒作用，能顯著干擾病毒生物合成，隨著藥物濃度的增加，細胞腫脹、變圓、合胞體形成等典型CPE逐漸減弱，病毒抑制率明顯升高。2、本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'對副流感病毒無直接殺傷作用。3、在一定濃度范圍內，隨著藥物濃度的增加，對RSV的抑制率增加，并表現出量效關系。4、本發(fā)明化合物的鹽酸鹽能阻止RSV病毒的吸附與穿入細胞，且預先作用6h療效明顯強于預先作用2h。結論本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'通過不同的作用方式均能抑制副流感病毒的生物合成，起抗副流感病毒的作用，尤其抗低滴度病毒生物合成效果最顯著。實驗例4本發(fā)明化合物體外抗腺病毒Ad7作用供試品本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'，體外實驗將3種化合物分別配成0.1g/ml溶液，通過0.22pm濾膜過濾除菌備用。病毒腺病毒Ad7;細胞Hep-2細胞實驗方法藥物對Ad7侵入細胞的阻斷作用用藥物預先處理細胞8h，洗滌后以IX10葉CIDWL的Ad7每孔0.1ml攻擊，37°C、5。/。C02孵育2h后，棄上清，加細胞維持液培養(yǎng)，每天于倒置顯微鏡下觀察細胞變化；待病毒對照孔細胞病變效應(0￡)呈+++++++且細胞對照正常時，用MTT法檢測細胞存活率，每一藥物濃度均重復4孔，同時設正常細胞對照和病毒對照。以Probit回歸方法計算藥物半數有效濃度(ICso)。藥物對Ad7的直接殺傷作用將不同濃度的藥物與lXl(^TCID5o/L的病毒等量混合，37。C作用30min后，再將其感染Hep-2細胞，37°C、5。/。C02孵育2h后，棄上清，加入細胞維持液同上法培養(yǎng)和檢查。藥物對Ad7生物合成的抑制作用先用1x106TCID5q/L的Ad7每孔O.lml感染細胞，吸附2h后，吸去病毒，加入不同濃度的藥物，同上法培養(yǎng)和檢查。各組實驗均設細胞對照和病毒對照。病毒滴定將病毒感染細胞培養(yǎng)液反復凍融3次后，按10—'稀釋后接種到Hep-2單層細胞中，37°C、5n/。C02培養(yǎng)72h，觀察CPE，每一稀釋濃度重復4孔，以Reed-Muench法計算病毒滴度。數據處理數據用Probit回歸方法計算藥物半數中毒濃度(TC5o)和半數有效濃度(IC50)，用Linear-Regression對藥物劑量與其產生的細胞效應(細胞存活率、抑制率)進行相關性分析，判斷是否存在量效關系。實驗結果1、本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'各藥物處理組病毒抑制率與病毒對照組無顯著差異，且不受藥物濃度的影響，表明本發(fā)明化合物對Ad7無直接殺傷作用。2、本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'有明顯抑制Ad7生物合成的作用，隨著藥物濃度的增加，細胞腫脹變圓，折光度增強等典型CPE逐漸減弱，病毒抑制率(細胞存活率)明顯升高(p<0.05、pO.Ol)，并表現出量效關系。結論由實驗結果可知，本發(fā)明化合物有體外抗腺病毒Ad7作用，且化合物濃度與病毒抑制率表現出量效關系，但無直接殺傷作用。表4本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'對Ad7生物合成的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注++++:75%以上細胞病變；+++:75%50%細胞病變;++:50%25%細胞病變;—:無細胞病變；與病毒對照組比較，*p<0.05，**p<0.01實驗例5本發(fā)明化合物抗流感病毒實驗研究受試動物昆明種小白鼠，體重1822g，雌雄各半。供試品本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'病毒甲3型流感病毒強毒株1、對小白鼠鼻內接種甲3型流感病毒強毒株所致死亡率的影響取小白鼠120只，隨機分組，每組10只，腹腔內注射本發(fā)明化合物，每天一次，連續(xù)7d。同時以生理鹽水做平行對照。于第7天給藥后2h，用甲3型流感病毒鼻內接種0.21111/只，以小白鼠死亡為指標，觀察48h，記錄各組動物死亡率，相同方法重復3次。表5本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'對甲3型流感病毒鼻內接種小鼠死亡率的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注與生理鹽水組比較，*p<0.05，**p<0.012、對小白鼠腦內接種甲3型流感病毒強毒株致死亡率的影響方法同前，于第7d給藥后2h，用甲3型流感病毒腦內接種，0.1ml/只。表6本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'對甲3型流感病毒小鼠腦內接種死亡率的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>實驗結果1、鼻內接種甲3型流感病毒小鼠，腹腔內注射本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C，，與生理鹽水組比較，劑量為20或30g/kg時，能極顯著降低小白鼠的死亡率(p<0.01)，劑量為10g/kg時，能顯著降低小白鼠的死亡率(p<0.05)，呈顯著抗病毒作用。2、腦內接種甲3型流感病毒小鼠，腹腔內注射本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'，與生理鹽水組比較，劑量為20或30g/kg時，能極顯著降低小白鼠的死亡率(p<0.01)，劑量為10g/kg時，能顯著降低小白鼠的死亡率(p<0.05)，呈顯著抗病毒作用。結論流感病毒所致的上呼吸道感染，易繼發(fā)肺炎，腦炎等疾病。本實驗通過用強毒株甲3型流感病毒對小鼠鼻內和腦內接種，觀察本發(fā)明化合物對病毒感染小鼠的保護作用，結果表明，腹腔內注射連續(xù)7天可顯著防止由于病毒致肺及腦的感染引起的小鼠死亡。實驗6:本發(fā)明化合物體外抗副流感病毒的免疫調節(jié)作用動物昆明種小鼠(1820g),雌雄各半。供試品本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'實驗方法腹腔巨噬細胞吞噬實驗將100只昆明種小鼠隨機平均分為10組，即溶媒對照組，本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A，、B，、C，三種不同劑量組。各組動物均連續(xù)灌胃給藥5d，末次給藥后24h，5n/。雞紅細胞lml后，ip4h后取腹腔液滴片，37'C溫育30min，0.9%氯化鈉注射液漂洗，甲醇固定，Giemsa液染色。每只小鼠計數200個巨噬細胞，計算吞噬百分數和吞噬指數。碳廓清實驗小鼠分組方法及給藥劑量同上，增設正常小鼠對照組。除正常小鼠對照組外，其余各組小鼠于第35天皮下注射Hc50mg/kg，造成免疫功能低下。末次給藥后24h，全部小鼠靜脈注射10%中華墨汁的0.9%氯化鈉注射液，10ml/kg，1和5min后分別從眼眶取血20PL，加入2ml0.1%Na2CO3中搖勻，在680nm波長測吸光度(A)值，計算碳廓清指數(K)。血清溶血素實驗環(huán)磷酰胺(Cy)所致免疫低下動物，各設10組，分組及給藥劑量均同上。第2天腹腔注射3:5稀釋綿羊紅細胞(SRBC)0.2ml致敏。如進行免疫低下實驗，給SRBC同時開始腹腔注射Cyl5mg/kg4d，第6天摘小鼠眼球取血，分離血清，以0.9%氯化鈉注射液稀釋250倍，56。C水浴30min滅活補體。取處理后的血清lml，力1]10%SRBC0.5ml，加l:10稀釋的豚鼠血清lml，37。C水浴保溫30min，移至冰浴中終止反應后離心，取上清液lml，加文奇液3ml于540波長測A值并計算半數溶血值(HCso)。1、對正常小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響表7<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注與溶媒對照組比較，*p<0.05，**p<0.012、對免疫低下小鼠碳廓清的影響表8對免疫低下小鼠碳廓清作用的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>3、對正常及免疫低下小鼠血清溶血素含量的影響表9對小鼠血清溶血素含量的影響組別劑量/(mg/kg)正常小鼠HC50免疫低下小鼠HC50溶媒對照組_43.2±17.77.8±3.7化合物A'高劑量組3074.1±26.5*27.6±12.1*化合物A'中劑量組2073.6±41.3*26.2±12.8*化合物A'低劑量組1057.5±32.518.1±4.5*化合物B'高劑量組3075.2±25.8*27.9±13.2*化合物B'中劑量組2072.5±37.6*25.3±11.6*化合物B'低劑量組1056.6±33.619.3±5.5*化合物c'高劑量組3074.8±27.4*26.7±11.9*化合物c'中劑量組2070.8±36.5*23.9±11.2*化合物c'低劑量組1055.4±30.320.3±4.8*注與溶媒對照組比較，*p<0.05實驗結果1、腹腔巨噬細胞吞噬實驗結果表明，各組小鼠給予本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'不同劑量后，腹腔巨噬細胞吞噬百分比和吞噬指數與溶媒對照組比較均明顯增加(p<0.05，pO.Ol);2、碳廓清實驗結果表明，本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C'高、中劑量組免疫低下小鼠的K值與溶媒對照組比較明顯增加(p<0.05);3、血清溶血素實驗結果表明，本發(fā)明化合物的鹽酸鹽A'、B'、C，高、中劑量組的正常小鼠血清HCso與溶媒對照組比較明顯增加，低劑量組無明顯影響；本發(fā)明化合物各劑量組的免疫低下小鼠血清HC5()與溶媒對照組比較均明顯增加。結論本品使正常小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能明顯增強，使所致免疫低下小鼠碳廓清值明顯升高，表明本品對正常和免疫低下小鼠的非特異性免疫功能均具有明顯的促進作用；本品使正常及所致免疫低下小鼠血清溶血素水平明顯升高，使所致免疫低下小鼠的明顯增強，表明本品對正常和免疫低下小鼠的體液免疫功能和細胞免疫功能均有明顯的促進作用。具體實施例方式以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內容作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實施例。凡基于本發(fā)明上述內容所實現的技術均屬于本發(fā)明的范圍。以下實施例中各劑型的輔料可以用藥學上可接受的輔料替換，或者減少、增加。實施例16-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑)-111-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽的制備(1)6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑)-1H-吲哚-3-羧酸乙酯的制備在干燥的反應瓶中，加入甲醇300ml，氫氧化鉀13g(0.23mol)，攪拌溶解后分批加入27g(0.23mol)4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑，室溫攪拌10min。然后再加入5-乙酰氧基-6-溴-2-溴甲基-l-甲基-lH』引哚-3-羧酸乙酯90g(0.23mol)，攪拌反應12h，反應完畢。在攪拌下將反應液倒入冰水中，用稀鹽酸調至pH2左右，析出沉淀，抽濾，濾餅水洗后干燥，得淺黃色固體74.6g，即6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑)4H-吲哚-3-羧酸乙酯，收率75.9%。(2)6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑)-lH-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽的制備于反應瓶中加入乙醇500ml，多聚甲醛12g(0.4mol)和二甲胺鹽酸鹽65.1g(0.8mol)，攪拌后加入濃鹽酸8ml，攪拌均勻后加入6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑)-111-11引哚-3-羧酸乙酯85.48(0.2mol)，升溫至60'C攪拌反應3h。減壓濃縮后冷凍析晶3h，析出結晶，抽濾，得粗品。粗品用異丙醇重結晶，得白色結晶90.7g，即6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑)4H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽，收率76.5%。元素分析(C22H26BrN305S2HC1):C:44.42%,H:4.67%，Br:14.38%，Cl:5.86%,N:7.01%,S:10.70%(理論:C:44.56%，H:4.59%，Br:13.48%，CI:5.98%，N:7.09%,S:10.82%)實施例26-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-111-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽的制備(1)6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-1H-吲哚-3-羧酸乙酯的制備在干燥的反應瓶中，加入甲醇300ml，氫氧化鉀13g(0.23mol)，攪拌溶解后分批加入27g(0.23mol)2-巰基噻唑，室溫攪拌10min。然后再加入5-乙酰氧基-6-溴-2-溴甲基-1-甲基-111-吲哚-3-羧酸乙酯90g(0.23mol),攪拌反應12h，反應完畢。在攪拌下將反應液倒入冰水中，用稀鹽酸調至pH2左右，析出沉淀，抽濾，濾餅水洗后干燥，得淺黃色固體74.6g，即6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)4H-吲哚-3-羧酸乙酯，收率75.9%。(2)6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-111-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽的制備于反應瓶中加入乙醇500ml，多聚甲醛12g(0.4mol)和二甲胺鹽酸鹽65.1gC0.8mo1),攪拌后加入濃鹽酸8ml，攪拌均勻后加入6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-111-吲哚-3-羧酸乙酯85.4g(0.2mol)，升溫至60'C攪拌反應3h。減壓濃縮后冷凍析晶3h，析出結晶，抽濾，得粗品。粗品用異丙醇重結晶，得白色結晶85.9g，即6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-l-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-11^引哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽，收率82.5%。元素分析(C19H22BrN303S2HC1):C:43.72%，H:4.57%，Br:15.22%,CI:6.76%，N:8.00%，S:13.27%(理論:C:43.81%，H:4.45%，Br:15.34%,CI:6.81%，N:8.07%，S:12.31%)實施例36-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-噻唑)-111-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽的制備(1)6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-噻唑)-111』引哚-3-羧酸乙酯的制備在干燥的反應瓶中，加入甲醇300ml，氫氧化鉀13g(0.23mol),攪拌溶解后分批加入27g(0.23mol)4-甲基-2-硫甲基-噻唑，室溫攪拌10min。然后再加入5-乙酰氧基-6-溴-2-溴甲基-1-甲基-lH-吲哚-3-羧酸乙酯90g(0.23mol)，攪拌反應12h，反應完畢。在攪拌下將反應液倒入冰水中，用稀鹽酸調至pH2左右，析出沉淀，抽濾，濾餅水洗后干燥，得淺黃色固體74.6g，即6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-噻唑)-11^』引哚-3-羧酸乙酯，收率75.9%。(2)6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-噻唑).1H』引哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽的制備于反應瓶中加入乙醇500ml，多聚甲醛12g(0.4mol)和二甲胺鹽酸鹽65.1gC0.8mo1)，攪拌后加入濃鹽酸8ml，攪拌均勻后加入6-溴-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-噻唑)-1H-B引哚-3-羧酸乙酯85.4g(0.2mol),升溫至6(TC攪拌反應3h。減壓濃縮后冷凍析晶3h，析出結晶，抽濾，得粗品。粗品用異丙醇重結晶，得白色結晶85.4g，即6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-噻哇)-111-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽，收率79.8%元素分析(C2oH24BrN303S2HC1):C:48.13%，H:4.98%，Br:15.95%,CI:6.58%,N:8.32%,S:12.78%(理論:C:44.91%,H:4.71%,Br:14.94%，CI:6.63%,N:7.86%,S:11.99%)實施例4本發(fā)明化合物水針的制備1、處方處方l:化合物A'、B'、C聚山梨酯80注射用水25g(以化合物A、B、C計)10g2000ml共制備1000支處方2:化合物A'、B'、聚山梨酯80注射用水C，50g(以化合物A、B、C計)10g2000ml共制備1000支化合物A'、B'、聚山梨酯80注射用水C，100g(以化合物A、B、C計)20g2000ml共制備1000支化合物A'、B，、聚山梨酯80注射用水c,200g(以化合物A、B、C計)20g2000ml共制備1000支2、制備工藝(1)將生產用安瓿配液用容器具、儀器設備等進行清理、除菌、除熱原；(2)按處方稱取原料和輔料；(3)取聚山梨酯加配液量80%的注射用水，攪拌溶解；加入配液量0.05%的針用活性炭，攪拌15min，過濾，脫炭；(4)向溶液中加入化合物A'、B'、C'，攪拌溶解；(5)測定并調節(jié)溶液的pH值；(6)補加注射用水至全量，定容；(7)藥液經過0.22^11的微孔濾膜精濾，檢査澄明度；(8)半成品檢驗；(9)將藥液裝于安瓿中；(10)IO(TC流通蒸汽滅菌30min;(11)檢漏，燈檢；(12)成品全檢，包裝入庫。錢伊J5柳月M體聽先恪1、處方處方l:、B，、C，25g(以化合物A、B、C計)100g_2000ml_1000支A酐水物糖用合旋射化右偉汪一共處方2:<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>處方3:<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>處方4:<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>2、制備工藝(1)將生產所用西林瓶、膠塞及配液用容器具、儀器設備等進行清理、除菌、除熱原；(2)按處方稱取原料和輔料；(3)將右旋糖軒加配液量80%注射用水，攪拌溶解；然后加入配液量0.05%的針用活性炭，攪拌15min，過濾，脫炭；(4)向溶液中加入化合物A'、B'、C'，攪拌溶解；(5)測定并調節(jié)溶液的pH值；(6)補加注射用水至全量，定容；(7)藥液經過0.22pm的微孔濾膜精濾，檢査澄明度；(8)半成品檢驗；(9)藥液分裝2ml于西林瓶中，半壓塞；(10)將樣品置凍干機中，采用下述凍干工藝凍干40'C預凍4小時，-300!:低溫真空干燥18小時，030'C升溫干燥2小時，3(TC恒溫干燥2小時。(11)凍干結束，壓塞、扎蓋；(12)成品全檢，包裝入庫。實施例6本發(fā)明化合物氯化鈉注射液的制備1、處方處方l:A酐水物糖用合旋射化右備制注共處方2:處方3:處方4:化合物A'、B'、聚山梨酯80氯化鈉注射用水C，25g(以化合物A、B、C計)20g900g100000ml共制備1000瓶化合物A'、B'、聚山梨酯80氯化鈉注射用水c，50g(以化合物A、B、C計)20g900g100000ml共制備扁瓶化合物A'、B'、聚山梨酯80氯化鈉注射用水c，100g(以化合物A、B、C計)50g900g畫00ml共制備薩瓶化合物A'、B'、聚山梨酯80氯化鈉注射用水c，200g(以化合物A、B、C計)50g■g100000ml共制備畫瓶2、制備工藝(1)將配液用容器具、儀器設備等進行清理、除菌、除熱原；(2)按處方稱取原料和輔料；(3)取聚山梨酯加配液量80%的注射用水，攪拌溶解，加入氯化鈉，攪拌溶解；加入配液量0.05%的針用活性炭，攪拌15min，過濾，脫炭；(4)向溶液中加入化合物A'、B'、C'，攪拌溶解；(5)測定并調節(jié)溶液的pH值；(6)補加注射用水至全量，定容；(7)藥液經過0.22^111的微孔濾膜精濾，檢査澄明度；(8)半成品檢驗；(9)將藥液裝于輸液瓶中；(10)115。C熱壓滅菌30min;(11)檢漏，燈檢；(12)成品全檢，包裝入庫。實施例71、處方:處方l:本發(fā)明化合物葡萄糖注射液的制備處方2:處方3:處方4:化合物A'、B'、C,25g(以化合物A、B、C計)聚山梨酯8010g葡萄糖2500g注射用水100000ml共制備1000瓶化合物A'、B'、C,50g(以化合物A、B、C計)聚山梨酯8020g葡萄糖2500g注射用水100000ml共制備1000瓶化合物A'、B'、c，100g(以化合物A、B、C計)聚山梨酯8050g葡萄糖2500g注射用水100000ml共制備薩瓶化合物A'、B'、c，200g(以化合物A、B、C計)聚山梨酯8050g葡萄糖2500g注射用水100000ml共制備1000瓶2、制備工藝(1)將配液用容器具、儀器設備等進行清理、除菌、除熱原；(2)按處方稱取原料和輔料；(3)取聚山梨酯加配液量80%的注射用水，攪拌溶解，加入葡萄糖，攪拌溶解；加入配液量0.05%的針用活性炭，攪拌15min，過濾，脫炭；(4)向溶液中加入化合物A'、B'、C'，攪拌溶解；(5)測溶液的pH值，必要時用調pH值；(6)補加注射用水至全量，定容；(7)藥液經過0.22pm的微孔濾膜精濾，檢査澄明度；(8)半成品檢驗；(9)將藥液裝于輸液瓶中；(10)115。C熱壓滅菌30min;(11)檢漏，燈檢；1、處方:處方l:處方2:處方3:處方4:,品全檢，包裝入庫。本發(fā)明化合物片劑的制備化合物A'、B'、C，25g(以化合物A、B、C計)微晶纖維素50g預膠化淀粉畫g10%PVPK30乙醇液適量硬脂酸鎂3g共制備1000片化合物A'、B'、C'50g(以化合物A、B、C計)微晶纖維素50g預膠化淀粉100g10%PVPK30乙醇液適量硬脂酸鎂3g共制備1000片化合物A'、B'、C'lOOg(以化合物A、B、C計)微晶纖維素50g預膠化淀粉100g10%PVPK30乙醇液適量硬脂酸鎂3g共制備1000片化合物A'、B'、C'200g(以化合物A、B、C計)微晶纖維素50g預膠化淀粉100g10%PVPK30乙醇液適量硬脂酸鎂3g共制備1000片2、制備工藝(1)原料和輔料分別粉碎過80目篩備用；(2)制粒溶液制備取PVPK30加濃度為3095。/。藥用乙醇制成510。/。的溶液，即得;(3)取原料和輔料混勻，加入制粒溶液適量制軟材，20目制粒，5070'C干燥；(4)顆粒干燥后，18目整粒，加入硬脂酸鎂混勻；(5)顆粒含量測定；(6)壓片，隨機檢測片重；(7)成品全檢，包裝入庫。實施例9本發(fā)明化合物膠囊劑的制備1、處方處方l:處方2:處方3:處方4:化合物A'、B'、C'微晶纖維素預膠化淀粉10%PVPK30乙醇液硬脂酸鎂25g(以化合物A、B、C計)50g100g3g共制備化合物A'、B'、C'微晶纖維素預膠化淀粉10%PVPK30乙醇液硬脂酸鎂1000粒50g(以化合物A、B、C計)50g100git共制備1000粒化合物A，、B，、C，100g(以化合物A、B、C計)微晶纖維素50g預膠化淀粉100g10%PVPK30乙醇液適量硬脂酸鎂3g共制備1000粒化合物A'、B'、C'微晶纖維素預膠化淀粉10%PVPK30乙醇液硬脂酸鎂200g(以化合物A、B、C計)50g腦g3g共制備1000粒2、制備工藝(1)原料和輔料分別粉碎過80目篩備用；(2)制粒溶液制備取PVPK30加濃度為3095%藥用乙醇制成510%的溶液，即得;(3)取原料和輔料混勻，加入制粒溶液適量制軟材，20目制粒，5070'C干燥；(4)顆粒干燥后，18目整粒，加入硬脂酸鎂混勻；(5)顆粒含量測定；(6)膠囊填充，隨機檢測裝量;(7)成品全檢，包裝入庫。實施例IO本發(fā)明化合物顆粒劑的制備1、處方-處方l:化合物A，、B，、C，25g(以化合物A、B、C計)糖粉2000g2。/oHPMC50。/。乙醇溶液適量_共制備畫包處方l:化合物A'、B'、C，50g(以化合物A、B、C計)糖粉2000g2。/oHPMC50。/。乙醇溶液適量_共制備1000包處方l:化合物A，、B，、C，100g(以化合物A、B、C計)糖粉1900g2。/oHPMC50。/。乙醇溶液適量_共制備1000包處方2:化合物A，、B，、C，200g(以化合物A、B、C計)糖粉1800g20/oHPMC50。/。乙醇溶液適量_共制備畫包2、制備工藝(1)將原料和輔料粉碎過100目篩，備用；(2)按照處方量稱取原料和輔料；G)將化合物A，、B，、C，與糖粉以等量遞加的方法混合均勻，加入2Q/。HPMC50。/。乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；(4)過20目篩制顆粒；(5)顆粒在60'C的條件下烘干；干顆粒過18目篩整粒；(6)取樣，半成品化驗顆粒中主藥的含量，確定裝量；(7)成品全檢，包裝入庫。權利要求1、如式(I)所示的化合物及其藥學上可接受的鹽id="icf0001"file="A2006100706110002C1.gif"wi="106"he="42"top="45"left="50"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>其中，R1為甲基、乙基、丙基、異丙基；R2為氫、甲酸基、乙酸基、丙酸基；R3為COOR’，R’為取代或未被取代的C1-6直鏈或支鏈的烷基，取代或未取代的C6-10的芳基，C1-3直鏈或支鏈的烷氧基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基、苯基、芐基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基；取代基包括C1-3直鏈或支鏈的烷基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基；R4為id="icf0002"file="A2006100706110002C2.gif"wi="25"he="15"top="152"left="37"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>其中，R1’、R2’各自為獨立的氫；C1-3直鏈或支鏈的烷基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基；R5、R6各自為獨立的羥基；氨基；氰基；硝基；鹵素，選自氟、氯、溴、碘；取代或未被取代的C1-4直鏈或支鏈的烷氧基，選自甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基；R7為氫；取代或未被取代的C1-4直鏈或支鏈的烷基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基；R8為甲基、乙基、丙基、異丙基。2、如權利要求1所述的化合物及其藥學上可接受的鹽，其中，R!為甲基、乙基、丙基；R2為氫、甲酸基、乙酸基；R3為COOR'，R'為取代或未被取代的Cw直鏈或支鏈的烷基，取代或未取代的<:6.8的芳基，d.3直鏈或支鏈的烷氧基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、苯基、芐基、甲氧基、乙氧基、丙氧基；所述的取代基同上所述；R4為R2'，其中，Rr、R2，各自為獨立的氫、甲基、乙基、丙基；Rs為羥基；硝基；取代或未被取代的d.3直鏈或支鏈的烷氧基，選自甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基；R6為羥基；硝基；鹵素，選自氟、氯、溴、碘；取代或未被取代的Cb3直鏈或支鏈的垸氧基，選自甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基；R7為氫；取代或未被取代的d.3直鏈或支鏈的烷基，選自甲基、乙基、丙基、異丙基；R8為甲基、乙基、丙基。3、如權利要求2所述的化合物及其藥學上可接受的鹽，其中，Ri為甲基、乙基；R2為氫、乙酸基；R3為COOR，，R，為甲基、乙基、丙基；<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage3</formula>&為其中，R,'、R2，各自為獨立的氫、甲基、乙基；Rs為羥基、甲氧基、乙氧基、丙氧基；R6為鹵素，選自氟、氯、溴、碘；甲氧基、乙氧基、丙氧基；R7為氫、甲基、乙基、丙基；Rs為甲基、乙基。4、如權利要求3所述的化合物選自6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-5-羧甲基-噻唑)-1^1』引哚-3-羧酸乙酯、6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基-1-甲基-2-(2-硫甲基-噻唑)-1^卩引哚-3-羧酸乙酯、6-溴-4-二甲胺基甲基-5-羥基小甲基-2-(4-甲基-2-硫甲基-噻唑)-111』引哚-3-羧酸乙酯。5、如權利要求14所述的任一化合物藥學上可接受的鹽，包括有機酸鹽、無機酸鹽、有機堿鹽和無機堿鹽，其中無機酸鹽包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽；有機酸鹽包括甲酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、甲磺酸鹽、草酸鹽、擰檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、肉桂酸鹽；無機堿鹽包括堿金屬鹽鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽，堿土金屬鹽鎂鹽、鈣鹽、鋇鹽、鋅鹽；有機堿鹽包括葡甲胺鹽、氨基葡萄糖鹽。6、如權利要求14所述的任一化合物及其藥學上可接受的鹽在制備治療和/或預防病毒性感染疾病的藥物中的應用。7、如權利要求14所述的任一化合物及其藥學上可接受的鹽可以與藥學上可接受的輔料制成臨床上或藥學上可接受的任一劑型。8、如權利要求7所述的化合物及其藥學上可接受的鹽的劑型可以為口服制劑或注射劑。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術領域：
，涉及具有抗病毒活性的化合物，其藥學上可接受的鹽，這些化合物的制備方法，以及這些化合物在制備治療和/或預防病毒性感染引起的疾病的藥物中的應用。本發(fā)明的化合物具有廣譜抗病毒活性，對治療病毒感染，尤其是治療流感具有良好的臨床應用價值。文檔編號C07D417/12GK101190913SQ20061007061公開日2008年6月4日申請日期2006年12月1日優(yōu)先權日2006年12月1日發(fā)明者黃振華申請人:黃振華